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请问大家:按照国标对羟脯氨酸进行测定,但是好像感觉氯胺T与羟脯氨酸标准品不反应,加入高氯酸后总是产生白色沉淀,而且水浴过后也没有生成红色化合物,请问这是怎么回事,忘大哥指点一下
最近做乳制品中的L-羟脯氨酸的测定。所用的方法是下列附件的方法,该方法与国标9695.23—2008有一点不一样的地方,想向各位高手请教一下。1.该方法用酸性氯化亚锡进行水解,将氯化亚锡溶于浓盐酸中。国标是用浓硫酸进行水解,这两者有什么不同?2.国标明确规定样品中加30ml的浓硫酸,在105℃的干燥箱内恒温16h;附件中的标准没明确规定温度,就说样品中加100ml酸性氯化亚锡溶液,然后放入几粒沸石,恒温水浴回流16h。那么问题出来了,究竟应该水浴多少度?如果也是100℃左右的话,那16h过夜很不现实;如果需要100℃左右,能不能不水浴回流,而是放入恒温箱内,这样可以吗?3.我做了三次该实验,效果都不理想,主要表现在:1.标准曲线走的非常不好,出现过一次空白管比前2个标准系列的吸光度值还要高。2.没有生成红色的化合物,加完显色剂之后,颜色是浅褐色,不知道这样对不对总之,该实验做的非常不理想,现在非常着急,而且我表述的可能会不太明确,想找做过该实验的高手们指导一下,如果谁看见这条信息,并且正好可以给哦指导一下,请加我QQ:414827197.验证的时候就写“羟脯氨酸”。本人非常非常着急,希望尽快得到大家的帮助!