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[font=宋体][font=宋体]全能核酸酶([/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体])是一种来自于粘质沙雷氏菌([/font][font=Calibri]Serratia marcescens[/font][font=宋体]),经基因工程改造的核酸内切酶。可降解双链、单链、线状、环状的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体],完全将核酸降解成[/font][font=Calibri]3~5[/font][font=宋体]个碱基长度的[/font][font=Calibri]5'-[/font][font=宋体]单磷酸寡核苷酸。义翘神州不仅可以提供研究级核酸酶,依托于[/font][font=Calibri]ISO 13485[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]体系,还可提供高效、高质量、应用广的[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别全能核酸酶。同时我们提供核酸酶残留检测试剂盒,在解决生物制品核酸污染的同时,有效降低酶本身的残留风险。下面通过问答形式向大家详解全能核酸酶:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处理粘附细胞?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]洗涤后,向[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物(或其他哺乳动物细胞裂解物)中加入[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解物,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处理悬浮细胞?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 离心收集悬浮细胞后,将[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物(或其他哺乳动物细胞裂解物)加入含有[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶的离心管中,在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解物,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处组织样本呢?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 研磨[/font][font=Calibri]30[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]100mg[/font][font=宋体]动植物组织后,加入[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]200μL[/font][font=宋体]裂解液和[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解液并离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 大肠杆菌或其他细菌呢?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 离心收集细菌后,裂解液或研磨破碎后,每[/font][font=Calibri]100μL[/font][font=宋体]加入[/font][font=Calibri]1~5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解液,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 正常推荐稀释比(终浓度)为[/font][font=Calibri]1:1000[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]1:20000[/font][font=宋体],其中时间、温度和稀释比是影响反应的积极因素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 是否用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 是[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 你能减少剂量吗[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 如果你想减少剂量,可以适当提高反应温度或延长反应时间[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 反应辅因子[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 必须向反应溶液中加入[/font][font=Calibri]2-5mM Mg2+[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 反应缓冲液[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 常用的生物缓冲液,如[/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MOPS[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]pH6-8[/font][font=宋体])等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 稀释后每次使用多少?如何测试梯度?一开始多少钱?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 根据不同的实验要求,添加量可以在[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]之间。真核细胞所需的量高于原核细胞,因为真核细胞的核酸含量高,并且可以按照[/font][font=Calibri]1/1000[/font][font=宋体]的比例添加真核细胞初始添加量,可以按照[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]的比例添加原核细胞。由于全能核酸酶活性在室温下较高,因此在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃下消化的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]添加比例高于室温下。普通的[/font][font=Calibri]CoIP[/font][font=宋体]实验、蛋白质表达实验可以适当地略微增加,并且可以按照[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]的比例添加对[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]残基要求高的实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何灭活全能核酸酶?如何移除?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: [/font][font=Calibri]EDTA[/font][font=宋体]螯合金属离子的使用可以可逆地抑制全能核酸酶的活性,极端条件下可以引起不可逆的失活,如[/font][font=Calibri]100mM NaOH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃处理[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]。可以通过阴离子交换柱或[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法从目标产物中分离全能核酸酶。由于这种核酸内切酶的高稳定性,建议不要在最终产物需要排除核酸酶的应用中使用全能核酸内切酶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 储存条件[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 储存温度为[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃。储存缓冲液:[/font][font=Calibri]20mM Tris-HCl pH 8.0[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]50mM NaCl[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]2mM MgCl2[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体]甘油。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 全能核酸酶应用[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: [/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、蛋白质提取过程中核酸污染的去除:当重组蛋白质纯化或哺乳动物细胞裂解物下游需要低粘度时,全能核酸酶可用于降低样品粘度,以便于操作;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、有效减少储存的外周血单个细胞([/font][font=Calibri]PBMC[/font][font=宋体])的聚集;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、有利于不溶性蛋白在复性前的高质量包合体系制备;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、有效去除带负电荷核酸对双向[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]蛋白样品的影响;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、在宽范围的条件下([/font][font=Calibri]6M[/font][font=宋体]尿素、[/font][font=Calibri]0.1M[/font][font=宋体]盐酸胍、[/font][font=Calibri]0.4%Triton X100[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]0.1%SDS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM EDTA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM PMSF[/font][font=宋体]),降解所有形式的(双链、单链、线性、环状)[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、根据美国食品药品监督管理局的核酸污染去除程序,去除蛋白质产品中的污染;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、本品可与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提液中的核酸,降低溶液粘度,提高蛋白质产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供不同级别全能核酸酶,[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级条件下生产的[url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]全能核酸酶[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]SuperNuclease[/b][/url][/font][font=宋体],无动物源性,可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]。超高活性,应用场景广泛且使用量低不易残留,质量、性能、供货能力可靠,并已完成在[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的药物主文件申报备案([/font][font=Calibri]DMF Number#:35978[/font][font=宋体]),满足药物申报的规范。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit[/font][/font][font=Calibri] [/font]
请问您认为GCMSD污染源有哪些?哪些来源于GC?哪些来源于MSD部分?
经常看到网上有“犀利XX”,是不是来源于Silly?