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[size=15px][font=宋体][color=black]蔓荆子[i][/i]([/color][/font][font=&][color=black]Vitex rotundifolia[/color][/font][font=宋体][color=black])中提取的黄酮类化合物[i][/i]具有抗炎、抗血管生成和抗肿瘤等活性,已有研究表明从蔓荆子果实中提取的蔓荆子黄素([/color][/font][font=&][color=black]Vitexicarpin[/color][/font][font=宋体][color=black])可以阻止肿瘤进展,然而蔓荆子黄素治疗结直肠癌([/color][/font][font=&][color=black]CRC[i][/i][/color][/font][font=宋体][color=black])所涉及的分子机制仍未完全确定。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素在体外和体内显著抑制了结肠直肠癌细胞的增殖、侵袭和转移,在体内抑制了结直肠癌的生长和肺转移。机制上,蔓荆子黄素直接靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black],破坏[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]之间的相互作用,促进[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]泛素化降解,进而抑制其下游的上皮[/color][/font][font=&][color=black]-[/color][/font][font=宋体][color=black]间质转化过程。[/color][/font][font=&][color=black][/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]1[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体外实验揭示蔓荆子黄素对[/color][/font][font=&][color=#0070c0]CRC[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的抑制作用[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]作者首先通过[/color][/font][font=&][color=black]MTT[/color][/font][font=宋体][color=black]、克隆形成、[/color][/font][font=&][color=black]EDU[/color][/font][font=宋体][color=black]、细胞周期和细胞凋亡测定等实验发现,牡荆[i][/i]子黄素对[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞系表现出更高的抗增殖潜力,且能够诱导的细胞凋亡和细胞周期阻滞,结果表明蔓荆子黄素表现出良好的抗肿瘤特性 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、体内实验揭示蔓荆子黄素抗肿瘤活性[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]随后作者评估了蔓荆子黄素是否具有体内抗肿瘤作用。通过建立[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]移植瘤[/color][/font][font=&][color=black]BALB/c[/color][/font][font=宋体][color=black]裸鼠模型发现,蔓荆子黄素延缓了肿瘤的生长,且对小鼠体重无显著影响,表明蔓荆子黄素具有体内抗肿瘤作用 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]3[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素直接靶向[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]CRC[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]为了探究蔓荆子黄素的抗癌机制,作者采用[/color][/font][font=&][color=black]CETSA[/color][/font][font=宋体][color=black]结合质谱鉴定其直接作用靶点,发现[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]是蔓荆子黄素的潜在作用靶点。随后,通过[/color][/font][font=&][color=black]CETSA+WB[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]SPR[/color][/font][font=宋体][color=black]、证实了蔓荆子黄素与[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]的结合。为了证实[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]介导的蔓荆子黄素诱导的抗肿瘤反应,在[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中敲低和过表达[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]基因,发现蔓荆子黄素对[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]敲低的[/color][/font][font=&][color=black]HCT116[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞的抑制作用显著降低 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]4[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]通过减少[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]的泛素化来稳定[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]有文献报道[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]表达密切相关,且[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]对[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]发展至关重要。作者研究通过[/color][/font][font=&][color=black]FpClass[/color][/font][font=宋体][color=black]网站预测发现。[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]互作,同时[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]在[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]组织中的表达存在显著相关性,且免疫荧光显示[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]共定位,[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]MST[/color][/font][font=宋体][color=black]实验显示[/color][/font][font=&][color=black]MPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]可以直接互作。进一步实验发现[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]通过减少泛素化降解来增强[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]的稳定性 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]5[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素直接结合[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]破坏[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]与[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]互作[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]由于蔓荆子黄素在[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞中靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black],而[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]存在相互作用,因此作者推测蔓荆子黄素可能影响[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]与[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]的结合。作者通过免疫荧光和[/color][/font][font=&][color=black]Western blot[/color][/font][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素能有效抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白的表达。通过分子对接、[/color][/font][font=&][color=black]Co-IP[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]MST[/color][/font][font=宋体][color=black]证实了蔓荆子黄素通过直接结合[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]来破坏[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2/c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]复合物,从而降低[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]蛋白水平 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]6[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素靶向[/color][/font][font=&][color=#0070c0]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]抑制[/color][/font][font=&][color=#0070c0]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]表达发挥体内抗肿瘤作用[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=宋体][color=black]蔓荆子黄抑制[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]异种移植小鼠肿瘤生长,敲低[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]也可有效降低肿瘤增殖,而敲低[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]后蔓荆子黄素没有进一步抑制肿瘤生长。免疫组织化学和免疫荧光发现蔓荆子黄素抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]vimentin[/color][/font][font=宋体][color=black]水平,同时增强[/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]表达。[/color][/font][font=&][color=black]shIMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]组和[/color][/font][font=&][color=black]shIMPDH2+[/color][/font][font=宋体][color=black]蔓荆子黄素组细胞中[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]Vimentin[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]表达无明显差异,表明蔓荆子黄素靶向[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]抑制[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]表达发挥体内抗肿瘤作用 [/color][/font][/size] [size=15px][b][font=&][color=#0070c0]7[/color][/font][font=宋体][color=#0070c0]、蔓荆子黄素在体内外均能降低结直肠癌的转移[/color][/font][font=&][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [size=15px][font=&][color=black]Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]过度表达是[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]发生和发展的主要驱动因素之一,此外,[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]作为转录调节因子控制许多基因来增强[/color][/font][font=&][color=black]EMT[/color][/font][font=宋体][color=black],促进肿瘤转移。作者在体外和体内评估了蔓荆子黄素预防肿瘤转移的能力。通过划痕实验和细胞侵袭实验发现蔓荆子黄素抑制[/color][/font][font=&][color=black]CRC[/color][/font][font=宋体][color=black]细胞转移和侵袭。[/color][/font][font=&][color=black]Western blot[/color][/font][font=宋体][color=black]发现蔓荆子黄素有效降低[/color][/font][font=&][color=black]c-Myc[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font=&][color=black]EMT[/color][/font][font=宋体][color=black]标志物([/color][/font][font=&][color=black]E-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]、[/color][/font][font=&][color=black]N-cadherin[/color][/font][font=宋体][color=black]等)水平。体内实验显示[/color][/font][font=&][color=black]IMPDH2[/color][/font][font=宋体][color=black]敲低阻断了[/color][/font][font=&][colo
仪器论坛的各位前辈们好,现在实验遇到一问题想向大家咨询一下。我现在是想比较蔓荆子炮制前后指纹图谱的差异,但是药典上规定蔓荆子来源于单叶蔓荆和蔓荆的果实,我是直接在药材市场上购买的药材,本想自己鉴定来源,但是查阅了文献之后仍然未得到检验的方法,而且,药典上虽然规定是两个来源,也没有对两个的性状分别描述,只笼统记载了性状,所以我现在想咨询下,如果我没有鉴定来源,能做这20多批的炮制前后指纹图谱比较么?
样品为复方维生素,其中一项是核黄素磷酸钠,没找到核黄素磷酸钠的对照品,故用的核黄素对照品样品制备:先用水溶,然后用流动相稀释,流动相弱酸性做出的结果比标示量低了很多啊用核黄素对照品代替核黄素磷酸钠对照品,请问结果可信吗?