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[align=center]浅谈生物安全柜操作规范[/align] 生物安全柜作为致病菌接种必备设备,在微生物检测中有着很重要的作用,为规范生物安全柜的操作,本文从人员、使用环境、设备操作流程及注意事项等几个方面进行阐述吗,使微生物检测人员能够正确使用生物安全柜。 首先微生物检测人员需进行生物安全柜的使用培训才能进行操作,未经授权人员不能使用。 其次使用环境条件建议安置在10,000洁净度以上环境安置,环境在温度 0~40℃、相对湿度不超过90%、无腐蚀性气体和通风良好的室内,远离高速尘源和震源。安全柜附近不得有超过安全柜正面吸入风速(0.5m/s)的气流。禁止在有人员频繁进出的场所、门和通道口处及空调送风口附近安装使用安全柜,以免空气干扰操作口及排气口气流。在安全柜周围应留有保养检修空间(至少应在两侧留出25cm,背面留出30cm)。 然后是仪器原理及操作流程:生物安全柜工作原理是空气由前窗操作口进入 负压风道与柜体内空气充分混合后,由风机送入静压箱,经高效过滤器过滤后以垂直层流的状态进入操作区,操作区左右及后部墙体均为负压风道,使工作区与外部环境形成气幕及箱体双层隔离。同时工作区被负压包围,保证样品不发生泄漏,操作区的气流由于风机的作用,通过负压风道与前窗操作口进入的空气混合后,其中部分混合气体(约70%)由风机送入静压箱循环使用,其余混合气体(约30%)经排风高效过滤器过滤后排出柜体。操作流程:生物安全柜玻璃门为手动操作,正常工作时玻璃门的开启高度200mm,如果超出表示高度时,声光报警系统启动,提醒用户玻璃门超高。注:当玻璃门开启时,紫外灯无法开启。[img=,690,457]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301343253_1757_3295053_3.png!w690x457.jpg[/img]生物安全柜电源为220V、50Hz,柜体后部方有接地标志,必须做到可靠接地后方可使用。接通电源后,通电进入待命状态。[img=,690,540]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301379361_1495_3295053_3.png!w690x540.jpg[/img](1)按下[img=,117,173]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301393874_6018_3295053_3.png!w117x173.jpg[/img][紫外灯控制键],开启紫外灯消毒30分钟后将紫外灯关闭。(注:此时玻璃门应是关闭状态)(2)打开玻璃门到标识处。(3)按下[img=,117,169]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301396123_5363_3295053_3.png!w117x169.jpg[/img][风机启动键],开启风机约30分钟左右,使操作区达到规定的洁净度。(4)按下[img=,125,175]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910311301398555_747_3295053_3.png!w125x175.jpg[/img][照明控制键],开启照明灯,操作人员方可进行工作。当检测人员完成工作后,应将仪器关闭,首先关闭风机、玻璃门,打开紫外灯消毒30分钟,以杀灭残留在安全柜内部的病菌。然后关闭紫外灯,打开玻璃门,清洁工作台面及集液槽。最后关闭电源。最后是注意事项和维护保养,注意事项:生物安全柜在使用中,前玻璃挡板应处于工作状态(开口20厘米)。生物安全柜中的器材和设备应减少至最少,在据工作区周边15cm范围内进行操作。(建议大型容器间应留有空隙)生物安全柜内不能使用本生灯,可用小型电子炉,建议使用无菌一次性接种环。工作前,操作者应调节椅子高度,确保自己的脸在前开口之上,手臂放入安全柜内约1分钟后,才能进行材料操作,操作者手臂不可频繁出入生物安全柜。决不能让实验记录簿、废塑料包装物,吸样器等堵住前格栅,所有操作都应在操作平面中部或后部据前格栅10厘米以内进行。尽量减少在操作者背后走动,房间内不应有产生干扰气流的设备,安全柜的正面不应对着经常开启的门窗。操作者的手臂不可频繁出入生物安全柜,否则会打乱气流破坏保护气幕。在生物安全柜内工作时可采取一些避免发生交叉污染的措施:开口的试管和瓶子不应垂直放置,操作者用培养皿和组织培养皿时应拿着盖遮其上方。(直立式吸管收集容器不应在生物安全柜内使用)瓶盖和试管帽操作完成后应尽快盖上。禁止在强辐射源(如非屏蔽的射频源)旁使用本设备。维护与保养:操作人员应严格按照说明书中的要求进行操作,且应有详细的当班工作记录备查。日常维护:运行安全柜,检查安全柜各部分功能是否正常运行。a.用清洁剂擦拭设备表面和操作区表面;b.用玻璃专用清洁剂清洁生物安全柜玻璃;c.对操作室进行消毒灭菌处理。(1)定期维护:每三个月对设备进行全面检查一次,认真维护保养。a.全面清洗设备,并消毒灭菌;b.检查各部件是否启闭灵活,各部分功能是否正常;c.检查高效过滤器网是否积尘,是否需要清洗。(2)生物安全柜的现场检测有下列情况之一时,应对生物安全柜进行现场检测:a.生物安全柜安装完毕,即将使用前;b.生物安全柜被移动位置后;c.对生物安全柜检修后;d.对生物安全柜更换高效过滤器后;e.生物安全柜一年一度的常规检测。综上,生物安全柜在使用过程中需要注意事项较多,很容易犯错的就是门开启过高,手频繁进出等,只有进行规范操作,才能够保证检测人员在进行检测工作中的人身安全,顺利的进行微生物检测作业。
[align=center] [/align] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]作为生物安全实验室的一级屏障,生物安全柜是科研或医疗实验室中重要的硬件装备,为了让实验室人员规范使用生物安全柜,现归纳出以下注意事项,希望大家在实际操作中尽可能规避风险。 生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的,在使用时一定要遵从其标准操作规程。 但是您真的用对了方法吗?总结归纳出以下安全柜日常操作注意事项。 1、注意分区 在日常操作过程中,安全柜内部应分为3个区,依次为洁净区、工作区、污染区。洁净区用于摆放吸头盒、培养基等必要物品;工作区用于无菌操作;废弃吸头等弃于位于污染区的垃圾盒内。(如图1所示)。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img=,341,266]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190500harmfcxacwyxdffa.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444]图1、安全柜内部分区 2、注意进气格栅 安全柜的进气格栅通常位于操作台前方,在操作时应尽量避免衣袖遮挡进气格栅干扰安全柜的安全气流,从而带来安全隐患。如图2所示:左边是非正确操作-----操作人员手臂和实验物品挡住了格栅;右边为正确操作-----安全柜搁手架高于操作台面,操作人员手臂避免了遮挡进气格栅。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190600xm98jg8j4jjzmq74.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 3、勿放置过多物品 安全柜的操作台除了前面有进气格栅,后面也有格栅。如果在操作过程中放置的物品遮挡住后格栅,也会影响安全气流,给操作带来安全隐患。如图3所示。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190616i51m8sujus4xz43r.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图3、物品遮住操作台后方格栅 4、保持操作台面下方清洁 建议定期将安全柜操作台面提起,清理台面下方区域,保持该区域清洁。如图4 所示为非正确操作-----台面下方的污物易造成样品污染。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190636bcaechra818fxz8m.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 5、正确使用紫外灯 紫外灯杀菌的特点是快速、方便、易遮挡。因此,在使用紫外灯照射工作台时应保证内部干净无遮挡物品。如图5所示为非正确操作。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190709g0a7illvg07iggg6.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图5、安全柜内放置大量物品 6、安全柜内勿使用酒精灯 正规合格的安全柜无需酒精灯即可进行无菌操作。点燃酒精灯还有可能干扰安全柜内的安全气流,使用不当还可能造成核心部件如超高效过滤器损坏,因此不建议在安全柜内使用酒精灯。如图6所示,超高效滤器被破坏。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190727tprus03zk0063pvo.png.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 图6、被破坏的ULPA滤器 7、超净工作台≠生物安全柜 超净工作台不等同于生物安全柜,超净工作台只保护工作区的样品免受外来污染,适用于需要局部洁净无菌工作环境的试验操作。生物安全柜可以为人员,样品提供双重保护,是一种能防止实验操作处理过程中含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的安全防护设备。 8、进行特殊材料操作的注意事项 在处理特殊材料操作,例如,有毒,易燃,易爆等材料之前,应当由专业的生物安全专员或工程师来确定生物安全柜是否适用于您的应用需求。 9、正确选择生物安全柜的放置地点 安全柜应当尽量远离外部气流干扰因素,例如门窗、空调通风口、人员过道以及其他实验室气流干扰设备(如同房间的其他生物安全柜、通风橱或者超净工作台等)。 10、安全柜警报响起时请勿继续操作 当安全柜的警报系统触发时,请立即停止手上的工作,并联系专业的工程师。 11、 请勿在生物安全柜内摆放过多物品 安全柜的工作区域内严禁堆积过多的物品,以免影响安全柜本身的气流和安全性能。 12、避免对气流屏障的干扰 请遵循缓慢移动原则,操作时手臂应尽量水平缓慢移动,以避免影响正常的气流状态。避免垂直和过快移动造成污染物外泄。 13、安全柜自净周期 开启安全柜时,让安全柜先自主运行3-15分钟,来达到气流的稳定和净化操作区的空气以达到相应的洁净度级别。然后操作者再进行相关的实验操作即可。 14、正确的生物安全柜工作高度 请确保安全柜在工作时前窗处于规定的安全高度。 15、在安全区域内进行操作 切勿阻塞安全柜前窗处的进气格栅和工作腔内的空气回流孔。尽量在工作区的中心部位进行操作。 16、安全柜安全分区原则 生物安全柜的工作区应该从左往右或者从右到左被依次划分为三个区域:清洁区、操作区和污染区。而实验供给品应放置在洁净区内;实验仪器和样品应放置在操作区域;废弃物应放置在污染区内。 [/color][/size][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font] [img]https://file3.foodmate.net/attachment/forum/202401/15/190813x3cb333gwy65gw5a.jpg.thumb.jpg[/img] [font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444][/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][size=18px][color=#444444] 17、确保生物安全柜连续使用 安全柜尽量不关机连续不间断使用,确保气流屏障的持续稳定,以避免污染物的外泄。 18、日常维护灭菌 紫外灯灭菌无法代替安全柜的日常表面除菌。因此在安全柜使用前后,请按照程序为安全柜进行表面除菌。可用75%酒精擦拭表面,注意不能用含氯消毒剂,因为会腐蚀不锈钢。 19、正确着装为操作提供必要保护 当进行高危险性操作,如在BSL-3和BSL-4实验室防护等级,要进行三级个人防护,应选用医用防护口罩或N95口罩、双层乳胶手套、面屏、护目镜、医用防护服、防水靴套、双层医用防护帽。必要时双层口罩(外医用防护口罩,N95)。 20、生物安全柜必须进行年度认证 根据国际和中国相关生物安全实验室和生物安全柜标准,安全柜在移位、更换过滤器或内部维修后,都需要进行性能认证检测,而认证检测需要至少每年一次。[/color][/size][/font]
目的:规范生物安全柜的操作与维护工作,确保仪器正常运作,以保障工作人员的安全。 适用人员: 临床微生物实验室检验人员。内容:1.操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜,避免双臂频繁穿过气幕破坏气流;并且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒,以去除污染。2.打开风机5~10分钟,待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内,至少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作。3.安全柜内不放与本次实验无关的物品。柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开,操作过程中物品取用方便,且三区之间无交叉。物品应尽量靠后放置,但不得挡住气道口,以免干扰气流正常流动。4.操作时应按照从清洁区到污染区进行,以避免交叉污染。为防可能溅出的液滴,可在台面上铺一用消毒剂浸泡过的毛巾或纱布,但不能覆盖住安全柜格栅。5.柜内操作期间,严禁使用酒精灯等明火,以避免产生的热量产生气流,干扰柜内气流稳定;且明火可能损坏HEPA滤器。6.工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关房门,以防止安全柜内气流不稳定。7.在实验操作时,不可打开玻璃视窗,应保证操作者脸部在工作窗口之上。在柜内操作时动作应轻柔、舒缓,防止影响柜内气流。8.安全柜应定期进行检测与保养,以保证其正常工作。工作中一旦发现安全柜工作异常,应立即停止工作,采取相应处理措施,并通知相关人员。 9.工作完全后,关闭玻璃窗,保持风机继续运转10~15分钟,同时打开紫外灯,照射30分钟。10.柜内使用的物品应在消毒后再取出,以防止将病原微生物带出而污染环境11.遥控器的使用:预约开机开机:1)、只有打开电源锁后,按下电源键(power)前,预约功能才有效。即打开电源锁后,首先按下预约键(sub),接着通过调大(+)、调小(-)键确定时间的分位(右边第一个),按确认键(confirm)确认,接着再通过增大(+)、减少键(-)调整十分位(右边第二个),按确认键(confirm)确认。同样的方法设定小时位(右边第三个)和10小时位(左边第一个)。每次预约都要按4次确认键(confirm)。2)、时间确认后,通过功能键(遥控器上都有)选定功能,相应的功能指示灯亮。3)、按电源键(power)启动预约功能。这时,预约时间开始倒计时,当预约时间到了以后,对应的功能启动。定时关机:1)、按下定时键(InstallTimer),再通过调大(+)、调小键(-)、确认键(Confirm)确定时间的分位(与预约开机相同),按确认键(Confirm)确认,接着再通过增大(+)、减少键(-)调整十分位,按确认键( Confirm)确认。同样的方法设定小时的个位和小时的十位(方法如同预约)。2)、当第4次按下确认键(Confirm)后,即确认时间最高位后,定时开始,时间开始倒计时,当时间到后,关闭所有功能,设备处于待机状态。在正常使用过程中,照明(LIGHT)、插座(SOCKET)、风机(WM)、消毒(KG)按键一次启动相应功能,再按一次则取消启动该功能。12. 保养与维护12.1安全柜应定期进行清洁消毒,柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜体外表面则可以每天用1%的84消毒液擦拭。12.2安全柜的内表面应在每次使用前与使用后进行去污处理。要用消毒剂擦拭工作台表面及内壁面,使用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时,应进行最后表面去污处理,即对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精,这种对目标生物有效的消毒剂。如使用漂白粉液这种有腐蚀性的消毒剂,则要用灭菌水进行二次擦拭。建议工作柜在清洁、消毒时处在工作状态。如果其未处在工作状态,则应运行5分钟,以便在安全柜关闭前将其中的气体清除掉。2使用的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物的消毒剂应能杀死柜内可能存在的所有微生物。一天工作结束时,应进行最后表面去污处理,即对工作台、各个侧面、背面及玻璃的里面进行全面擦拭。可以使用漂白粉液或70%酒精,这种对目标生物有。