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热处理奶这里的热处理娃指在60~65℃下加热约15s。新迸的生奶经过热处理后,能够延长 保存期,使生奶在被进-步加工之前能够延长冷藏储存的时间。这种处理方法能有效减 少假单胞菌等热敏性嗜热菌的数量。但假单胞菌能在生奶冷藏期间生 长,产生胞外酶(如蛋白酶和脂肪酶),这类酶不受随后的热处理的影响,能继续保留在奶 液中,产生类似UHT奶或奶酪样的腐败现象。染色剂还原试验该方法将氯化二苯基四氮唑(TTC)作为染色剂,嗜热链球菌作为分析菌株。当 将TTC染色剂加人事先接种了嗜热链球菌的无抗生素的奶中时,样品中的TTC快速还 原为红色的偶氮化合物。此还原过程是不可逆的,红色的偶氮染色剂不能被氧分子重新 氧化,这点与用亚甲基蓝作为染色剂时不同:当细菌的活性被残留抗生素或其他抑制物 质完全抑制时,则TTC染色剂不能转化为偶氮化合物,此时,奶液仍呈白色。表明部分待 测微生物受到抑制(当介于中间的红色阴影产生时)。 因此,测试的敏感度受菌株的菌龄、加人量的多少以及加人TTC之前菌体培养时间的影响。 结果的比较必须在标准状态下进行。
来源:生物秀染色剂的分类一、按来源可以分为 1.天然染色剂:主要是苏木素,胭脂红,地衣红,番红花。 2.合成染色剂:是从煤焦油中提取的苯衍生物。在生物染色中还使用一些无机化合物,如硝酸银,氯化金,磺,锇酸,高锰酸钾等。 二、按主要用途分为 1.胞核染色剂:苏木素,胭脂红,甲苯胺蓝,美蓝,孔雀绿等。 2.胞浆染色剂:伊红,淡绿,橘黄G,酸性品红,苦味酸等。 3.脂质染色剂:苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑,硫酸尼罗蓝及油红等。 三、按染色剂分子中的发色团可分为九类 1.亚硝基类:发色团为亚硝基(-NO)如萘酚缘-B。 2.硝基染料:发色团是硝基(-NO2)如苦味酸。 3.偶氮类:发色团为偶氮基(-N=N-)属于这一类的染色剂的橘黄G,刚果红,俾士麦棕和许多苏丹类的脂质染色剂。 4.醌亚胺类:这类染料含有两个发色团,一个是印胺基(-N=),一个是醌型苯环,如硫堇,美蓝,甲苯胺蓝O,硫酸尼罗蓝,中性红,碱性藏红花O,焦油紫等。 5.苯甲烷染料:发色团是醌型苯环,如孔雀缘,浅绿,碱性品红,酸性品红,结晶紫,甲基缘等。 6.山叮染料:发色团是醌型苯环,如派罗宁,伊红Y等。 7.蒽醌染料:此类染色剂含有色原蒽醌,如茜素和胭脂虫酸。 8.噻唑类。 9.喹啉类。 8,9类染色剂使用极少。 四、按染色剂的化学性质分类 染色剂的干粉是稳定的盐类,它们在溶液中则电离成酸性或碱性染色剂。如酸性染色剂,能够产生氢离子(H+)或其它阳离子(Na+),而其本身成为带负电荷的阴离子者。这类染色剂一般用于染细胞浆,如伊红Y,苦味酸,橘黄G等。碱性染色剂,能产生氢氧根离子(OH -)或其它负离子(如Cl-),而本身成为带正电荷的阳离子者。这类染色剂常用于染细胞核,如碱性品红等。 1.酸性染色剂:色原——助色团——Na→[色原-助色团]+Na+。常用的如伊红,酸性品红,苦味酸,橘黄G,刚果红,水溶性苯胺蓝,淡绿等酸性染料常用以染细胞浆等碱性成份。 2.碱性染色剂:色原——助色团——Cl→[色原-助色团]++Cl。常用的如苏木素,卡红,次甲基蓝,甲苯胺蓝,硫堇,美蓝等碱性染料常用以染细胞核等酸性成份。 严格地说,酸性染色剂的溶液并不一定呈酸性。同样,碱性染色剂的溶液也未必呈碱性。所谓酸性和碱性染色剂仅指它们电离后其分子的主要染色部分是阳离子还是阴离子。因此称为阳离子型染色剂或阴离子型染色剂更为适当。 常规H.E染色中苏木素染液的PH值约为7,此时胞核的化学成份电离产生H+,而其本身成为带电荷的阴离子,所以被阳离子型的碱性染料剂所着色。伊红染液为弱酸性。细胞的化学成份从溶液中获取H+而成为带正电荷的阳离子,因此与阴离子型的酸性染色剂(伊红)相结合,染作红色,这就是H.E染色分别显示核和胞浆的机制。 3.中性染色剂:这是酸性染色剂和碱性染色剂的复合物,又可称为复合染料。是由碱性染料(色碱的盐)和酸性染料(色酸的盐)配制而成。其中染色剂的分子很大,所以往往水中溶解度较低,需用酒精做溶剂。血液学中的血液涂片经常使用的瑞氏染色剂及姬姆萨染色剂就是这种混合染色剂。其中的各种不同成分可分剔使核、胞浆和颗粒着色。
为一种生物染色剂,必须同时满足两个要求:具有鲜艳透明的颜色,而且能与组织细胞相结合。染色剂分子能够显示颜色的基因,称为发色团。主要的发色团有:亚硝基和偶氮基显示的颜色较强,在染色剂中有一个这样的发色团,就可染出颜色。其他的发色团则不是这样,必须有几个发色团,有醌的分子中就有四个发色团,(2个羰基2个烯基)。 大量的合成染料都是由煤焦油蒸馏得到的,它们都是苯的衍生物,所以苯环是合成染料的基础。苯本身是无色的,但其氢原子为某发色团取代后就带有了颜色。含有发色团的苯环化合物,称为色原。 苯+发色团=色原 色原还不能很好地与组织细胞相结合,即使着了色也很容易脱去。因此仅仅具有色原还不能成为染色剂,染色剂分子中还需具备促使染色剂与组织细胞相结合的基因,这样基国在称为助色团。如—NH2 —COOH —OH —SO3H 氨基 羧基 羟基 磺酸基 氨基在溶液中形成阳离子(+),为碱性;其它羟基,羧基和磺酸基皆带阴离子(-)故为酸性。如三硝基甲苯是个色原,它虽有发色团—硝基,但因缺乏助色团,所以没有染色作用,不能称为染料。假如三硝基苯分子中的一个氢原子被羟基置换,则所生成的化合物既具有发色团而又得到了助色团—羟基,这就成了常用的酸性染料苦味酸。 这就可以看出,助色团的作用在于使色原形成盐类,可以在溶液中电离成为带电的离子,这样才能与相应的组织细胞的成份相结合。