推荐厂家
暂无
暂无
[align=center][b]流动相混合方式对苦参碱及氧化苦参碱出峰影响[/b][/align][b]1. 色谱条件与系统适用性试验[/b] 色谱柱Agilent ZORBAX NH[sub]2[/sub](Agilent ZORBAX SB C18);以乙腈-异丙醇- 3 % 磷酸溶液(80 :5 : 15)为流动相 ;检测波长为210nm。理论板数按氧化苦参碱峰计算应不低于4000。[b]2. 对照品溶液的制备[/b] 取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品 适量,精密称定,加流动相分别制 成苦参碱94.74 μg/ml, 氧化苦参碱156.65μg/ml的混合溶液,即得。[b]3. 供试品溶液制备[/b] 取本品粉末(过三号筛)约0. 3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加浓氨试液0. 5ml,精密加入三氯甲 烷20ml,密塞,称定重量,超声处理 (功率250W,频率33k Hz)30分钟,放冷,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液5ml,加在中性氧化铝柱 (100〜 200目,5g,内径 1 cm )上 ,依次以三氯甲烷、三氯甲烷 -甲醇(7 : 3)混合溶液各20ml洗脱,合并收集洗脱液,回收溶剂至干,残渣加无水乙醇适量使溶解,转移至10ml量 瓶中,加无水乙醇至刻度,摇匀,即得。[b]4. 样品分析[/b] 依次将混合对照品溶液和供试品溶液进样10 μL,记录苦参碱、氧化苦参碱保留时间及峰面积。[b]5. 结果[/b]5.1 以乙腈(A)-异丙醇(B)- 3 % 磷酸溶液(C)三相流动相泵前混合 混合对照品溶液及供试品溶液色谱图分别见图1、图2.[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041713523978_9340_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图1 对照品溶液色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041714189908_9161_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图2 供试品溶液色谱图5.2 以乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液(80:5:15)混合溶液为流动相 分别将乙腈、异丙醇、3%磷酸溶液过膜,之后将乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液按照药典比例混合均匀于同一流动相瓶中,超声脱气,在线脱气。混合对照品溶液及供试品溶液色谱图见图3、图4。[align=left][img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041714538638_4360_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] [/align] 图3对照品溶液色谱图[img=,690,308]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907041715257979_1578_2613952_3.jpg!w690x308.jpg[/img] 图4 供试品溶液色谱图[b]6 讨论[/b] 以乙腈(A)-异丙醇(B)- 3 %磷酸溶液(C)三相流动相在四元泵上泵前混合,或者以乙腈为流动相A、异丙醇-3%磷酸溶液(5:15)为流动相B二元高压泵上泵后混合,对照品溶液和供试品溶液苦参碱、氧化苦参碱出峰异常,见图1、图2。只有预先将乙腈-异丙醇-3%磷酸溶液按照药典(80:5:15)比例预先混合均匀,脱气,对供试品溶液及对照品溶液梯度洗脱,苦参碱和氧化苦参碱出峰正常,见图3、图4。
用毛细管电泳分离苦参碱和氧化苦参碱,缓冲液为pH=7.4的PBS,CZE模式,哪个先出峰呀,为什么呀,依据是什么呀?[~192149~]
为什么测苦参碱和氧化苦参碱时要用氨基柱?什么情况下应该用氨基柱?