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弱阳离子交换色谱

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弱阳离子交换色谱相关的论坛

  • 柱后衍生测水中草甘膦,阳离子交换色谱柱

    根据国标《GBT 5750.9-2006 生活饮用水标准检验方法 农药指标》测水中的草甘膦,用柱后衍生法,标准上写的用阳离子或阴离子交换色谱柱,打算使用阳离子交换柱做,但不知道具体应该选择什么样的阳离子交换柱做,选柱有什么标准或要求,有做过这个的吗,指点一下吧,多谢!

  • 【求助】求氢型阳离子交换树脂色谱柱预处理及保存方法

    第一次检验原料药——利巴韦林,色谱条件:氢型阳离子交换树脂,磺化交联的苯乙烯-二乙烯基共聚物为填充剂;以水(用稀硫酸调整pH值到2.5);207nm请问这个氢型阳离子交换树脂色谱柱使用前需要预处理吗?使用后怎样保存?有什么注意事项?

  • 【资料】-离子交换色谱法教程

    离子交换色谱法教程Sober和Peterson于1956年首次将离子交换基团结合到纤维素上,制成了离子交换纤维素,成功地应用于蛋白质的分离。从此使生物大分子的分级分离方法取得了迅速的发展。离子交换基团不但可结合到纤维上,还可结合到交联葡聚糖(S-ephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose)上。近年来离子交换色谱技术已经广泛应用于蛋白质、酶、核酸、肽、寡核苷酸、病毒、噬菌体和多糖的分离和纯化。它们的优点是:⑴具有开放性支持骨架,大分子可以自由进入和迅速扩散,故吸附容量大。⑵具有亲水性,对大分子的吸附不大牢固,用温和条件使可以洗脱,不致引起蛋白质变性或酶的失活。⑶多孔性,表面积大、交换容量大,回收率高,可用于分离和制备。一、基本理论  离子交换剂通常是一种不溶性高分子化合物,如树脂,纤维素,葡聚糖,醇脂糖等,它的分子中含有可解离的基团,这些基因在水溶液中能与溶液中的其它阳离子或阴离子起交换作用。虽然交换反应都是平衡反应,但在层析柱上进行时,由于连续添加新的交换溶液,平衡不断按正方向进行,直至完全。因此可以把离子交换剂上的原子离子全部洗脱下来,同理,当一定量的溶液通过交换柱时,由于溶液中的离子不断被交换而波度逐减少,因此也可以全部被交换并吸附在树脂上。如果有两种以上的成分被交换吸着在离子交换剂上,用洗脱液洗脱时,在被洗脱的能力则决定于各自洗反应的平衡常数。蛋白质的离子交换过程有两个阶段──吸附和解吸附。吸附在离子交换剂上的蛋白质可以通过改变pH使吸附的蛋白质失去电荷而达到解离但更多的是通过增加离子强度,使加入的离子与蛋白质竞争离子交换剂上的电荷位置,使吸附的蛋白质与离子交换剂解开。不同蛋白质与离子交换剂之间形成电键数目不同,即亲和力大小有差异,因此只要选择适当的洗脱条件便可将混合物中的组分逐个洗脱下来,达到分离纯化的目的。二、离子交换的分类及常见种类(一)分类离子交换剂分为两大类,即阳离子交换剂和阴离子交换剂。各类交换剂根据其解离性大小,还可分为强、弱两种,即 强酸剂 阳离子交换剂  弱酸剂 强硷型 阴离子交换剂 弱硷型。1.阳离子交换剂  阳离子交换剂中的可解离基因是磺酸(-SO3H)、磷酸(-PO3H2)、羧酸(COOH)和酚羟基(-OH)等酸性基。某些交换剂在交换时反应如下:强酸性:R-SO3-H++Na+ R-SO3- Na+H+弱酸性:R-COOH+Na+ R-COONa+H+国产树脂中强酸1×7(上海树脂#732)和国外产品Dowex 50、Zerolit 225等都于强酸型离子交换剂。2.阴离子交换剂  阴离子交换剂中的可解离基因是伯胺、(-NH2)、仲胺(-NHCH3)、叔胺[N-(CH3)2]和季胺[-N(CH3)2]等硷性基团。某些交换反应如下:强硷性:R-N+(CH3)2 HOH-+Cl R-N+(CH3)2 Cl+OH-弱硷性:R-N+(CH3)2 HOH-+Cl R-N+(CH3)2 HCl+OH-强硷性#201号国产树脂和国外Dowex1、Dowex2、ZerolitFF等都属于强硷型阴离子交换剂。(二)种类1.纤维素离子交换剂:阳离子交换剂有羟甲基纤维素(CM-纤维素),阴离子交换剂有氯代三乙胺纤维纱(DESE-纤维素)。2.交联葡聚糖离子交换剂:是将交换基因连接到交联葡聚糖上制成的一类交换剂,因而既具有离子交换作用,又具有分子筛效应,是一类广泛应用的色谱分离物质。常用的Sephadex离子交换剂也有阴离子和阳离子交换剂两类。阴离子交换剂有DEAE-Sephadex A-25,A-50和QAE- Sephadex A25,A50; 阳离子交换剂有CM-Sephaetx C-50,C-50和Sephadex C-25,C-50。阴离子交换剂用英文字头A,阳离子交换剂的英文字头是C。英文字后面的数字表示Sephadex型号。3.琼脂糖离子离交换剂:是将DESE-或CM-基团附着在Sepharose CL-6B上形成,DEAE-Sephades(阴离子)和CM-Sepharose(阳离子),具有硬度大,性质稳定,凝胶后的流速好,分离能力强等优点。三、实验操作(一)交换剂的处理,再生与转型  新出厂的树脂是干树脂,要用水浸透使之充分吸水膨胀。因其含有政绩一些杂质,所要要用水、酸、硷洗涤。一般手续如下:新出厂干树脂用水浸泡2小时后减抽压去气泡,倾去水,再用大量无离子水洗至澄清,去水后加4倍量2N HCl搅抖4小时,除去酸液,水洗到中性,再加4倍量2N NaOH搅抖4小时,除硷液,水洗到中性备用。将树脂带上所希望的某种离子的操作称为转型。如希望阳树脂带Na+,则用4倍量NaOH搅拌浸泡2小时以上;如希望树脂带H+,可用HCl处理。阴树脂转型也同样,若希望带Cl-则用HCl,希望带OH-则用NaOH。用过的树脂使其恢复原状的方法称为再生。并非每次再一都用酸、硷液洗涤,往往只要转型处理就行了。(二)柱上操作⑴交换剂装柱最简单的交换层析柱可用硷式滴定管代替。处理过的树脂放入烧杯,加少量水边搅拌边倒入保持垂直的层析管中,使树脂缓慢沉降。交换剂在柱内必须分布均匀。⑵上样向层析柱内倾入样品液⑶洗脱与收集  不同样品选用的洗脱液不同。原则是用一种比吸着物质更活泼的离子,把吸着物交换出来。由于被吸着的物质往往不是我们所要求的单一物质,因此除了正确选择洗脱液外还采控制流速和分布收集的方法来获得所需的单一物质。来源:中国色谱网[em61]

  • 阳离子交换色谱:抑制or非抑制?

    阳离子交换色谱:抑制or非抑制?

    [align=center][font=宋体][size=22pt][font=宋体]阳离子交换色谱法:抑制[/font]or[font=宋体]非抑制?[/font][/size][/font][/align][font=宋体][size=10.5000pt]要进行[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]本文[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]的讨论首先来认识一下什么是抑制法和非抑制器法:[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]抑制法:在色谱柱后连接抑制器,然后连接电导池,以降低背景电导,提高待测离子的灵敏度,由于早期抑制器为抑制柱,所以抑制器法也被称为双柱法。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]非抑制法:在色谱柱后直接连接电导池,背景电导较高,待离子电导低于背景[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]电导[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt],出负峰。由于没有连接抑制器所以称为非抑制法,也被称为单柱法。[/size][/font][align=center][img=,690,185]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005181536097295_8188_1974219_3.png!w690x185.jpg[/img][/align][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法测定阳离子虽然不像测定阴离子那样优势明显,但由于可以同时测定多种金属离子、铵和有机胺、醇胺等也存在一定的应用空间。阳离子交换色谱通常使用甲烷磺酸、硫酸等强酸做流动相,其电导检测存在两种方式:抑制与非抑制。阳离子抑制电导与阴离子分析相似,即色谱柱后连接抑制器,将高电导的流动相抑制并将阳离子转化为相应的氢氧化物然后进入检测器,产生的信号为待测离子氢氧化物与[/font]“水”的电导之差。非抑制电导是指色谱柱直接连接电导检测器,产生的信号为氢离子和待测离子的电导之差,待测离子的峰为倒峰,经过软件处理变成正峰。下面我们将详细介绍两者的区别。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]非抑制电导受检测原理的限制(氢离子是[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]目前已知的[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]离子中极限摩尔电导值最高的离子),流动相浓度不可能很高,通常低于[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]6mM[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]甲烷磺酸,这就进一步限制了色谱柱的容量(低容量)以及测定样品浓度的上限,因此非抑制法应用空间有限。由于分析过程中流动相浓度必须保持不变才能使基线稳定,不能使用梯度淋洗[/size][/font][font=宋体][size=10.5pt][font=宋体]。此外非抑制电导对温度的变化比较敏感,温度每变化[/font]1[font=宋体]度,电导变化[/font][font=Calibri]2%[/font][font=宋体]左右,非抑制电导的高电导流动相受温度的波动会迅速的在色谱曲线中表现出来,表现为基线漂移和波动。[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]抑制电导则不受上述因素的制约,由于将酸性流动相抑制后背景电导接近纯水,抑制电导可以使用高容量色谱柱([/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]Ionpac CS16[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]柱具有[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]8400[/size][/font][font=Symbol][size=10.5000pt]m[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mol[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]每[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]柱的容量)和高浓度流动相([/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]6[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]0[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mM[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]甲烷磺酸),可分析质量浓度比[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]10000:1[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]的钠离子和铵离子,也可以使用梯度淋洗同时分离保留差异较大的组份。由于水是热的不良导体,阳离子抑制电导对温度的变化不如非抑制电导灵敏。从检测的角度考虑,阳离子抑制电导灵敏度高,可以进行痕量分析,非抑制电导[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]的灵敏度相对较差[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]但是非抑制电导检测也并非一无是处。阳离子抑制电导仅对碱金属和碱土金属离子的电导响应呈线性,铵离子、有机胺等弱碱由于氢氧化物不完全解离,其电导响应为非线性。过渡金属离子的氢氧化物为难溶的沉淀,也不能使用抑制电导检测。上述问题使用非抑制电导检测可以得到很好的解决,使用草酸、酒石酸等具有络合能力酸根离子的酸做流动相可以在合理时间内将过渡金属离子洗脱,电导响应为氢离子与该离子的电导之差,与浓度呈现较好的线性关系。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]以上内容从分离和检测的角度进行讨论,阳离子抑制电导与非抑制电导还在高压平流泵、色谱柱管、色谱填料等方面存在差异,这些因素可能不会对仪器的性能产生明显的影响,更多的体现在商品化仪器的价格方面。我们通过一个表格来介绍他们的区别以及潜在的影响。[/size][/font][align=center][img=,690,161]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005181536344648_9590_1974219_3.png!w690x161.jpg[/img][/align][font=宋体][size=10.5000pt]酸性流动相可能腐蚀金属材料,溶出的金属离子会在色谱柱中有保留,在抑制器中生成氢氧化物沉淀,硅胶会在[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]PH2[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]的流动相中溶解,所以以上材料不会出现在阳离子抑制电导系统中却可以与非抑制电导兼容。有的用户在购买阴[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]后想升级系统测阳离子,这些配件就有可能影响用户的使用体验,限制应用空间。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]综上所述,阳离子交换色谱中抑制与非抑制的区别并非简简单单的一个抑制器,泵、流路管件、色谱柱管、色谱填料等因素也潜在的制约了仪器的应用领域。仅就分离和检测原理来说,非抑制电导只能使用低容量柱、不能进行梯度淋洗和痕量分析,但可以采用适当的流动相对过渡金属离子进行分离和检测,而且对所有的阳离子检测信号均为线性。用户在购买[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url](尤其是先购买阴离子后续升级阳离子的用户)之前务必将眼光放得长远一些,避免后续一些技术方面和商业方面的口水战。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]为说明两种检测方法的不同,文末附[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]三[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]张图及[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]相关[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]技术问答。第一张是使用[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]RPIC-201[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]7[font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url][/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]阳离子抑制电导测定自来水中五种阳离子的色谱图,其中锂离子为[/size][/font][font=Symbol][size=10.5000pt]m[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]g/L[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]级而其他离子为[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mg/L[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]级。第二张图为阳离子非抑制电导测定标样的色谱图,浓度均为[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mg/L[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]级。非抑制电导在刚生成色谱图时色谱峰为倒峰,为方便观察和定量,[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]第三张图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]将[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2[font=宋体]中[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]目标离子的峰翻转为正峰。[/size][/font][align=center][img=,690,589]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005181536559095_1844_1974219_3.png!w690x589.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]1 [font=宋体]阳离子交换抑制电导测定自来水中五种阳离子[/font][/size][/font][/align][align=center][img=,690,502]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005181537128404_1885_1974219_3.png!w690x502.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2 [font=宋体]阳离子交换色谱非抑制电导测定四种阳离子(未经任何处理)[/font][/size][/font][/align][align=center][img=,690,489]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005181537233816_3012_1974219_3.png!w690x489.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]3 [font=宋体]阳离子交换色谱非抑制电导测定四种阳离子(将图[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]中目标离子峰转为正峰)[/font][/size][/font][/align][font=宋体][size=10.5000pt]技术问答:[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]问:为什么[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]1[font=宋体]中[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]抑制电导检测的单位是[/size][/font][font=Symbol][size=10.5000pt]m[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]S[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]而[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]图[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]2[font=宋体]、图[/font][font=Calibri]3[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]非抑制电导检测的单位是[/size][/font][font='Times New Roman'][size=10.5000pt]mV[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]?[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]答:检测信号单位与是否抑制无关,而与检测器有关。电导的国际通用单位为[font=Symbol]m[/font][font=&]S,与电导池常数、待测离子浓度、离子的极限摩尔电导值有关。mV是电压单位,是未经过校[/font][/size][/font][font=宋体][size=10.5pt]正的原始信号。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]问:为什么非抑制电导的水负峰这么大?[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]答:这是由于酸性流动相的背景电导较大造成的,抑制电导由于将流动相抑制成[/font]“水”,背景电导很低,出现一个较小水负峰的原因是水中低浓度的杂质离子。[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt]问:测定未知样品中的阳离子,事先无法预测浓度高低怎么办?[/size][/font][font=宋体][size=10.5000pt][font=宋体]答:建议使用抑制电导[/font]+[font=宋体]动态量程电导检测器,测定低浓度组分时灵敏度自动提高,测定高浓度组份时灵敏度自动降低,一次进样即可同时测定高低浓度组份,阴离子可以完成质量浓度比[/font][font=Times New Roman]30000:1[/font][font=宋体]氯离子[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]溴酸盐的定量,阳离子可以完成质量浓度比[/font][font=Times New Roman]10000:1[/font][font=宋体]钠离子[/font][font=Times New Roman]/[/font][font=宋体]铵离子的定量。[/font][/size][/font]

  • 离子交换色谱步骤及作用

    [font=宋体][font=宋体]离子交换层析[/font][font=Calibri](IEX)[/font][font=宋体]是一种主要基于蛋白净电荷的色谱分离方法,通常用于追踪脱酰胺和琥珀酰亚胺的形成。[/font][font=Calibri]IEX[/font][font=宋体]有两种类型:阳离子交换和阴离子交换层析法。当缓冲液[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值高于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时,蛋白带负电(阴离子);当[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值低于此[/font][font=Calibri]IP[/font][font=宋体]时,蛋白带正电(阳离子)。下面主要介绍离子交换色谱操作中应注意的一些具体问题。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]色谱柱[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱应根据分离样品的数量选择合适的色谱柱,用于离子交换的色谱柱一般又厚又短,不宜过长。直径和柱长的比例通常在[/font][font=Calibri]1:10[/font][font=宋体]到[/font][font=Calibri]1:50[/font][font=宋体]之间,色谱柱应垂直安装。安装立柱时,立柱应平整,不得有气泡。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]平衡缓冲器[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱的基本反应过程是离子交换剂与待分离物质和缓冲液中离子的交换,因此离子交换色谱中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]的选择对分离效果有很大影响。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]平衡缓冲液是指离子交换柱加载后和样品加载后用于平衡离子交换柱的缓冲液。选择平衡缓冲液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]首先确保待分离的单个物质(如蛋白质)的稳定性。其次,要使每种待分离物质与离子交换剂有适当的组合,并尽量使样品与待分离杂质与离子交换器的组合有更大的差异。通常,待分离的样品与离子交换器具有更稳定的组合。并尽量使杂质不与离子交换剂结合或结合不稳定。在某些情况下(如污水处理),杂质可以与离子交换器牢固结合,样品与离子交换器结合不稳定,也可以达到分离的目的。另外,要注意平衡缓冲液不能与离子交换剂离子有很强的结合力,否则会大大降低交换容量,影响分离效果。选择合适的平衡缓冲液可以直接去除大量杂质。并使以下洗脱具有良好的效果。如果平衡缓冲液不合适,可能会给后续洗脱带来困难,无法获得良好的分离效果。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]样品交付[/font][/font][font=宋体][font=宋体]负载离子交换色谱时,应注意样品液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值,负载量不宜过大,一般以[/font][font=Calibri]1-5%[/font][font=宋体]的柱床体积为宜,这样样品才能吸附在色谱柱的上层,分离效果更好。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]洗脱缓冲液[/font][/font][font=宋体][font=宋体]梯度洗脱通常用于离子交换色谱,通常有两种方法来改变离子强度和改变[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]。改变离子强度通常是通过在洗脱过程中逐渐增加离子强度来实现的,从而洗脱掉与离子交换剂结合的各种组分;对于[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]变化的洗脱,阳离子交换剂通常为从低到高的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱,阴离子交换剂通常是从高到低的[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]洗脱。由于[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]可能对蛋白质稳定性有很大影响,因此通常使用具有不同离子强度的梯度洗脱。梯度洗脱装置介绍较早,可以有线性梯度、凹梯度、凸梯度和分级梯度洗脱方法。通常,线性梯度洗脱具有更好的分离效果,因此通常使用线性梯度洗脱。[/font][/font][font=宋体]洗脱液的选择也是为了确保所有待分离的组分在整个洗脱液梯度范围内是稳定的。第二种是使结合到离子交换器的所有分离的组分能够在洗脱液梯度范围内洗脱。此外,梯度范围可以尽可能小以提高分辨率。[/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]洗脱速度[/font][/font][font=宋体]洗脱液的流速也影响离子交换色谱的分离效果,洗脱速率通常保持恒定。一般来说,慢洗脱速度要好于快分辨率,但洗脱速度太慢会造成分离时间长、样品扩散、光谱峰宽、分辨率降低等副作用,因此根据实际情况选择合适的洗脱速度。如果洗脱峰相对集中在某个区域,则应减小梯度范围或降低洗脱速度以提高分辨率。如果分辨率良好,但洗脱峰太宽,则可以适当地提高洗脱速度。[/font][font=宋体][font=Calibri]6.[/font][font=宋体]样品的浓缩和脱盐[/font][/font][font=宋体]通过离子交换色谱法获得的样品通常具有较高的盐浓度、较大的体积和较低的样品浓度。因此,通过离子交换色谱法获得的样品应进行浓缩和脱盐。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]离子交换色谱法的应用[/b][/font][font=宋体]离子交换色谱法有着广泛的应用,主要在以下几个方面。[/font][font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]水处理[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱法是一种简单有效的去除水中杂质和离子的方法。聚苯乙烯树脂广泛应用于高纯水的制备、硬水软化和污水处理。纯水可以通过蒸馏制备,但它消耗大量能量,而且制备量小、速度慢、纯度不高。通过离子交换色谱法可以快速、大量地制备高纯水。通常,水依次通过[/font][font=Calibri]H+[/font][font=宋体]型强阳离子交换器,以去除吸附在阳离子交换器上的各种阳离子和杂质;然后,通过[/font][font=Calibri]OH[/font][font=宋体]型强阴离子交换剂,去除阴离子交换剂吸附的各种阴离子和杂质,得到纯水。经过弱阳离子和阴离子交换剂的进一步纯化,可以获得高纯度的纯水。离子交换器在使用一段时间后可以通过再生处理进行再利用。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]小分子的分离和纯化[/font][/font][font=宋体][font=宋体]离子交换色谱法还广泛应用于无机离子、有机酸、核苷酸、氨基酸、抗生素等小分子的分离纯化。例如,分析氨基酸,使用强酸性阳离子聚苯乙烯树脂,将氨基酸混合物置于[/font][font=Calibri]pH2~3[/font][font=宋体]柱上。此时,氨基酸在树脂上结合,然后逐渐提高洗脱液的离子强度和[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体],从而使各种氨基酸以不同的速率洗脱,并可以分离和鉴定。提供所有自动氨基酸分析仪。[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]生物大分子的分离纯化[/font][/font][font=宋体]离子交换色谱法是根据物质带电性质的不同,分离纯化蛋白质等生物大分子的重要手段。由于生物样品中蛋白质的复杂性,仅用一次离子交换色谱法通常很难达到高纯度,并且经常与其他分离方法结合使用。离子交换色谱法分离样品应充分利用根据带电性质进行分离的特点,只要选择合适的条件,离子交换色谱可以获得满意的分离结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec][b]离子交换层析蛋白纯化[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-purification-by-iec[/font][/font]

  • 离子交换色谱问题讨论

    在离子交换色谱中,待测阳离子电荷越小、其水合离子的半径越大,则越先出峰?对吗?请大家说说自己的看法.当然也可是指教其他的影响出峰的因素.谢谢[em61]

  • 二甲双胍等双胍类化合物的分析(离子性化合物、强阳离子交换、SCX UG80)

    二甲双胍等双胍类化合物的分析(离子性化合物、强阳离子交换、SCX UG80)

    双胍类化合物二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍被用于治疗糖尿病,是具有强碱性和强极性的离子性化合物。这些化合物在常规C18色谱柱上很难得到保留,因此我们考虑在强阳离子交换模式下,使用CAPCELL PAK SCX UG80色谱柱对其进行保留与分离,并且尝试缩短分析时间。使用短柱长的CAPCELL PAK SCX UG80色谱柱(2.0 mm i.d. x 20 mm)对3种双胍类化合物进行分析,结果如图1。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609290900_612528_2222981_3.jpg在强阳离子交换模式下进行的分析,通过调节流动相pH值和盐浓度均可对化合物的保留行为进行调整,其中盐浓度是影响保留强弱的主要因素。如图1所示,随着盐浓度的提高,虽然各化合物的保留逐渐变弱,但在短时间内得到了3个成分的分离;在20mmol/L甲酸铵/乙腈=60/40流动相条件下,将流速提升3倍(即600μL/min)可将分析时间缩短至4分钟以内,且20mmol/L的低盐浓度也适用于质谱分析。【参考】除了强阳离子交换模式下之外,我们还尝试在反相模式和亲水性相互作用的HILIC模式下进行分析。反相柱分别选择了柱长相同的C18色谱柱和键合金刚烷基的ADME色谱柱。虽然在反相模式下,ADME比C18柱保留能力强,但对二甲双胍的保留较其他两种模式较弱。假如您关注的是二甲双胍的保留,那么除了强阳离子交换模式外,在HILIC模式下亦能得到对二甲双胍的良好保留。由于分离模式不同,流动相中的有机相比例亦有所差别,因此请根据所分析样品的性质来选择最适合的分离模式。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609290900_612529_2222981_3.jpg

  • 离子交换色谱柱的使用

    最近在使用Luna SCX(阳离子交换色谱柱)求使用注意事项,是不是可以用纯缓冲盐作为流动相?以及其他相关注意的问题?因为色谱柱的说明书也没有看到,求指点。

  • 【讨论】在使用硅胶基质离子交换色谱柱的方法中,怎么优化色谱条件?

    由于这几天都在做用SCX色谱柱进行样品检测,有个问题想要和大家讨论一下,在使用离子交换色谱法中,怎么优化色谱条件?离子交换色谱柱法:是以离子交换剂为固定相如:强阳离子交换柱(SCX),强阴离子交换柱(SAX),以缓冲溶液为流动相,借助于试样中电离组分对离子交换剂亲和力不用以达到分离离子型或可离子化的化合物的目的。我就抛砖引玉了:1、改变缓冲盐的浓度,一般增加缓冲盐的浓度可以缩短保留时间;2、改变pH值,一般在碱性条件下强阳离子交换柱(SCX)色谱法中,保留时间会缩短;3、……大家来说说自己的观点吧

  • 阳离子交换柱

    谁用过阳离子交换柱,需要注意点是什么麽,如果峰分离不开,调节ph有关吗

  • 求购RP柱和H型(Na型)强酸性阳离子交换柱

    求购RP柱和H型(Na型)强酸性阳离子交换柱

    如题,本实验室现在用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]检测水质中的7中阴离子,需用到预处理柱: 聚苯乙烯-二乙烯基苯为基质的RP柱或硅胶为基质键合C18柱(去除疏水性化合物) ; H型强酸性阳离子交换柱或Na型强酸性阳离子交换柱(去除重金属和过渡金属离子) 等类型。想请教下各位,有没有同行,提供一下厂商或直接回复本人。谢谢!或者有以下图示的树脂和设备也行:[img=,690,436]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904161749432715_1109_3433699_3.png!w690x436.jpg[/img]

  • 阳离子交换膜

    我正在做电化学合成的实验。实验的装置已基本搭好,但是缺少阳离子交换膜,不知那位仁兄知道在何处可以买到。知道的话,请回复一下!谢谢拉!!!!![em62] [em62]

  • 【讨论】检测氟化物用阴离子还是阳离子交换树脂

    【讨论】检测氟化物用阴离子还是阳离子交换树脂

    这几天在研究国家标准GB/T 5750.5-2006,发现氟化物检测,说是用磺化聚苯乙烯强酸性阳离子交换树脂,并说该法可检测氯化物、硫酸盐、硝酸盐等。在GB/T 5750.10-2006的溴酸盐检测,又说使用阴离子交换柱,可分析氟化物、溴酸盐、氯化物、溴化物、硫酸盐、硝酸盐。本人还没接触过离子色谱仪,不清楚这问题了,是标准错误,还是没理解到位?(GB/T 5750.5-2006)氟化物---------------------http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106211639_300789_2309397_3.jpg(GB/T 5750.10-2006http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/06/201106211640_300790_2309397_3.jpg)溴酸盐------------------------------

  • 如何评价土壤阳离子交换量的数据呢?

    [b]1.CEC的大小[/b],基本上代表了土壤可能保持的养分数量,即保肥性的高低。 阳离子交换量的大小,可作为评价土壤保肥能力的指标——[b][color=#cc0000]阳离子交换量大,土壤保废能力强吗?[/color][/b]阳离子交换量是土壤缓冲性能的主要来源,是改良土壤和合理施肥的重要依据。http://baike.baidu.com/link?url=Txuz2gUOmvpB1A2EbYj5hvF3OGEm6qq5qEV5duOcaBPuoBWIMrvJT2KgsBZKOZZeq0rimkGuvJ0ibh9l1ET0QK [b]2.[/b] [color=#003300][b]阳离子交换量还能体现其它信息吗?特别是对金属。[/b][/color][color=#003300][b][/b][/color][b][color=#3333ff]3.某土壤样品中阳离子交换量为13.26cmol/kg,如何评价他呢?[/color][/b]

  • 离子交换色谱法

    离子交换色谱法中,适用于WAX(弱阴离子交换柱)检测的物质?蛋白质,多肽,核酸,氨基酸 为什么?

  • 【资料】阳离子交换柱使用手册

    阳离子交换柱使用手册Chrompack HPLC IonoSpher C Columns 注意Chrompack IonoSpher C 色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂(pH6.5)或酸性溶剂(pH2.5)会溶解硅胶材料导致柱子损坏。在使用这个柱子之前,你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。 1. 简介Chrompack IonoSpher C 柱填充硅胶基质的强阳离子交换材料,含有磺酸盐功能团。特别设计用于使用常规HPLC分析有机和无机阳离子。 2. 色谱柱老化在开始分析工作以前,柱子必须经过正确的老化。一个没有正确老化的柱子可能会带来问题,诸如很差的柱效或者分离情况发生变化等等。要老化这类柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去离子水。再用你选用的洗脱液进行平衡。 在发货以前,每根柱子都已经测试过并进行了老化。因此没有必要在第一次使用时用水冲洗)。3. 洗脱液推荐在这类柱上使用的洗脱液是要求低电导的缓冲液,例如柠檬酸或酒石酸缓冲液(或其混合溶液),pH范围从2.5到6.5,其中有乙二胺作为洗脱阳离子。 绝对不能使用水杨酸缓冲液,因为水杨酸分解产物会改变固定相的性质。 洗脱液在使用以前要脱气,并用0.5微米滤膜过滤,防止发生检测和泵送问题。 一定要在开始使用系统以前检查有否微生物生长,否则你的柱子会堵塞,柱压会升高到无法接受的水平。

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