夏至草素对照品

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 近日，江西中医药大学何军伟副教授课题组利用中药药理学的方法考察了一种中药的作用原理。该团队对夏至草的乙醇提取部位及其大孔吸附树脂洗脱部位为对象进行了具体的研究。实验作用的模型为急性血瘀证大鼠。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 实验研究 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 夏至草Lagopsis supina (Steph) IK.-Gal. Ex Knorr.为唇形科夏至草属多年生草本植物，药用历史悠久。由于临床功效与益母草一致，都有凉血活血之功，故常以益母草的替代品使用。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 为了研究夏至草的药效物质基础及作用机制，需要首先明确有效成分，然后确认成分与作用的关系。本研究中，首先分离得出夏至草乙醇提取物及其大孔吸附树脂30%乙醇洗脱部位的特征图谱，接下来又证明了夏至草提取物或总生物碱具有改善血液和淋巴微循环障碍作用。通过显著地改善血瘀证大鼠的血流动力学、血液流变学特性，表现在抗凝血、抗血小板聚集、抗纤维蛋白溶解等指标的改善。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 实验中通过UHPLC-qTOF-MS/MS技术从夏至草总提取物中鉴定了51个成分，采用HPLC技术测定了该植物中的2个主要活性成分（水苏苷A和毛蕊花糖苷）的含量。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 利用全自动生化仪对SD大鼠血清中的相关血液因子进行了分析，得出了夏至草提取物及其部位对急性血瘀微循环障碍大鼠小肠、胃、肝器官微区血流量的影响。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 核心技术探讨 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 0em " span style=" color: rgb(0, 0, 0) " strong 1. UPLC与UHPLC的区别： /strong /span span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong br/ /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " UPLC是超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography，UPLC）的简称。借助于HPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。超高效液相色谱是一个新兴的领域，作为世界第一个商品化UPLC产品的Waters ACQUITY UPLC sup TM /sup 超高效液相色谱系统在1996年问世。 /p p style=" text-align: center" a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/23.html?SidStr=4928& AgentSortId=& SampleId=& IMCityID=& IMShowBCharacter=& IMShowBigMode=" target=" _blank" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 230px height: 239px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/873f0b8b-d69a-45fd-a827-c22262a87711.jpg" title=" vanquish.jpg" alt=" vanquish.jpg" width=" 230" height=" 239" / /a /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(89, 89, 89) font-size: 14px " strong 赛默飞 Vanquish& #8482 UHPLC超高效液相色谱系统 /strong /span /p p span style=" color: rgb(89, 89, 89) font-size: 14px " strong /strong /span /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C232392.htm" target=" _blank" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 239px height: 239px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/13e6d7ea-ce2b-4f07-b855-f77a9bf8290e.jpg" title=" WATERS Arc.jpg" alt=" WATERS Arc.jpg" width=" 239" vspace=" 0" height=" 239" border=" 0" / /a /p p style=" text-align: center text-indent: 0em " span style=" color: rgb(89, 89, 89) font-size: 14px " strong 沃特世 ACQUITY Arc系统 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " UHPLC的特点是工作压力硬件通常可以承受超过9,000 psi（620 bar）或更高的系统压力。不仅可以实现更高的分辨率、缩短整体分析时间，还可以实现精确的温度控制。UHPLC系统的扩散体积和耐受压力方面进行了优化，可以匹配2.5–3.5 μm颗粒度的柱子，最大限度发挥色谱性能。UHPLC是目前使用最为广泛的液相色谱仪，常见系统多有安捷伦1260SL，岛津Prominence UFLC，Thermo Ultimate3000。最近， strong Waters的ACQUITY Arc /strong 加入了这个阵营。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 0em " strong 2. 生化分析仪 /strong /p p style=" text-indent: 0em text-align: center " a href=" https://www.instrument.com.cn/zc/150.html" target=" _blank" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/873455d9-94c9-410f-8c71-a7c07d9cdccc.jpg" title=" Roche生化分析仪.png" alt=" Roche生化分析仪.png" / /a /p p style=" text-align: center text-indent: 0em " span style=" color: rgb(89, 89, 89) font-size: 14px " strong 罗氏Cedex Bio多参数生化分析仪 /strong /span br/ /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 全自动生化分析仪是根据光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。将原始手工操作过程中的取样、混匀、温浴（37℃）检测、结果计算、判断、显示和打印结果及清洗等步骤全部或者部分自动运行。运行速度最快可达9,600 样品/小时。具有测量速度快、准确性高、消耗试剂量小等特点，现已在各级医院、防疫站、计划生育服务站得到广泛使用。可以搭配不同的试剂盒并建立不同的检测方法。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/34197fa9-4313-4065-bd2d-6845ad3df007.jpg" title=" Biomedicine.png" alt=" Biomedicine.png" / /p p style=" text-align: left text-indent: 2em " 研究成果发表在Elsevier旗下 strong Biomedicine & amp Pharmacotherapy /strong 期刊，题目为“Lagopsis supina extract and its fractions exert prophylactic effects against blood stasis in rats via anti-coagulation, anti-platelet activation and anti-fibrinolysis and chemical characterization by UHPLC-qTOF-MS/MS”。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 期刊Biomed. Pharmacother.创办于1982年。杂志主要集中在药理毒理学、生物医药等领域，至今已发展30多年，最新的IF为4.545。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 目前，中药药效物质基础的研究比较热门。除了应用在单味饮片中，对于复方的研究，也在逐步开展。 /p

精准药物分析的工作，离不开稳定的分析系统和可靠的标准物质（标准品/对照品等）。标准物质具有复现、保存和传递量值的基本作用，对实现测量结果的溯源性，保证测量结果在时间与空间上的连续性与可比性，进而确保测量结果的准确可靠、有效与国际互认具有关键作用。 岛津为制药行业客户提供稳定可靠的标准品/对照品制备解决方案：制备液相系统（Prep LC）、质谱引导的制备液相系统（MS-trigger Prep LC），超快速制备纯化液相色谱系统（UFPLC）、制备超临界流体色谱（Prep SFC）。 超快速制备纯化液相色谱系统（UFPLC）可在线完成从分离、浓缩、纯化到回收的制备全过程。 2020年，中国药科大学药物分析系吴春勇博士于新药仿药CMC实操讨论群进行了精彩而全面的主题分享，并发表在“新药仿药CMC实操讨论”公众号，经过“新药仿药CMC实操讨论”的授权，在此分享吴春勇博士的《化学药物研发过程中的对照物探讨》。 概述案例 对于吴春勇博士的《化学药物研发过程中的对照物探讨》，新药仿药CMC实操讨论群也进行了较为热烈的探讨。PPT正文后续延申的讨论内容如下（基本按照时间先后顺序列出）。 沈晓斌博士（前FDA资深审评员，FDA报批咨询顾问）：very nice.吴博士论述的非常全面、非常细。我们就说比如说在FDA做review的时候呢，我们个人不会接触那么全面，各种各样的方式，这个标准品的这个去就是抽点它的含量呀，就是拿到他的COA，通常不会把各种方法都是看过一遍的。 就是它这个PPT呢，把所有的东西都给想细细的捋了一遍，个人觉得就是这是一个对知识体系的全面的补充，有些东西，因为你以前没有接触过，你不会考虑那么细，当在FDA的时候你看到的是公司怎么做，然后你来评估他是否合理，是否可以接受，或者跟FDA的现有要求，来评估。 想要就说一点，FDA本身他不去说去该怎么去定量，这个标准品他只是负责审评，就是评审你（的资料），外界可以自己去建议你想要的方式，但是你要有足够多的科学依据，然后他（FDA）来评估是否可以接受，就是完全靠自己来论述清楚。 另外就是说国内看起来，这个我以前对国内这个没有太多的，而且也没有特别去关注，因为我这个工作最早才从FDA报批方面的东西，吴教授这个主题一讲，觉得国内在有些方面其实要求是似乎是比USP、FDA的要求更细更多一些，有一种感觉就是弯道超车已经超了，在有些方面实际上是做的更好。只不过，过去这些年，西方就是设定了这种既定的质量标准，那其他国家，就因为你要照着西方去做仿药嘛，你就必须根据他的规则来走，更多的是这方面的区别。 孙亚洲老师（长沙晶易首席科学家）：意见1：研发人员买的非法定对照品，外标法测定杂质含量时，很多人直接采用了COA的赋值，也直接采用相应的测定结果订入了标准，有些不妥。包括批检验，最初的朔源需要是法定对照或者经过标定的对照品。 意见2：在吴博士的ppt中，对于非法定来源的如百灵威，sigma等买到的杂质对照品，拿到后是否需要再行进行研究工作或者分析一下是否存在风险，似乎没有提出来。这个问题建议大家是否深入思考一下。 群主补充：只有经过标化赋值且可溯源（过程，方法，验证）的，风险才是最低的。 群主补充：尽管杂质测定中，如5%的误差是可以接受的（这属于科学性的范畴）；但不等同于对照品/标准品可以草率拿来，草率采用他人的赋值，这完全是两个范畴。也许某份杂质对照品中含水量10%，无机成分包括前处理过程带来的硅胶等30%，若草率定量，杂质的真实含量会被低估如40%。 沈晓斌博士：同意以上的观点。 群友1：通过药品杂质的公司购买的对照品，我们就碰到了，欧美的一家知名公司提供的对照品结构出现偏差，我们通过多次比对都无法拿到和代谢产物吻合的结果，多次交涉和讨论之后才发现该公司的产品是另外一个同分异构体。 吴春勇博士（中国药科大学药物分析系副教授）：看来概率虽然小，这个问题还是客观存在的。 沈晓斌博士：提供化合物的公司没有责任和义务。使用者必须做该做的来证明给监管机构标准品的使用是合理的。 刘国柱博士（长沙晨辰医药创始人、技术总监）：我请教吴博士一个问题，目前国内杂质对照品市场非常混乱，大部分购买的杂质对照品都是经几手倒卖才到厂家手里，对照品塑源存在问题，谱图与赋值真实性也存在问题，请问对此引入的风险有何看法？ 群友2：在购买对照品的时候，在COA的同时能否得到该合成方法的信息，这个在技术层面上是有难度的。没有哪个合成公司愿意提供产品合成路线给对方的。 群友3：好多杂质对照品本身不稳定，需要在-20℃保存，有可能在运输过程中就发生了变化，拿到的第一时间应该进行确认，遇到好几次这种情况。 吴春勇博士：在现有的条件下，购买的商业化对照品全部自己赋值，实践上还是存在相当的困难，成本上也没法控制。所以我个人观点：1）尽量选择知名公司；2）自己对风险进行评估，尤其是校正因子与各国药典不同，或者结构上与待测药物的生色团类似，分子量相当，校正因子却有显著不同。 【插话：知名公司依旧有风险或风险大】 是的，分享的那个案例，购买公司是业界相当知名的！ 群友4：购买杂质时能同时获得合成信息的可能性非常小，最多提供四大谱（还不带解谱的），那就需要公司内部有比较强大的解谱能力，有碰到过解谱结果和供应商提供的不一致的情况，所以购买“商业化”的杂质对照风险是很大，市场良莠不齐，缺乏有效的管控。 群友5：我们碰到问题的那家公司就是业界知名对照品公司，也有出失误的概率。 刘国柱博士：另请教吴博士及大家一个问题，目前国内许多企业对于杂质对照品的结构确证，很多时候都只做了质谱与NMR氢谱与碳谱，不做二维；而事实上不做二维NMR谱，NMR信号是无法归属的，从而不足以确定杂质结构，有可能确证的结构是错的；请问这个问题大家如何看待？ 吴春勇博士：我个人只要做结构确认，一定做二维。 刘国柱博士：那我和您观点一致，强烈呼吁大家做结构确证一定要做二维。 购买的杂质对照品一般只提供质谱与NMR氢谱与碳谱，不做二维与结构解析；在此习惯引导下，国内许多企业自已做杂质结构确证也只做个质谱与NMR氢谱与碳谱，个人观点这是存在风险的做法。 代孔恩（安士研发总监）：法规有明确规定必须这么表征，很多标准品量很小，做全应该不容易。【插话：情况多，复杂，没法一刀切】 黄常康博士（南京百泽医药创始人）：有些杂质是定向合成的，或者是有文献数据的。我觉得根据实际情况来判断需不需要。不用二维定不了结构的，该做就做，有些简单的杂质，其实氢谱已经足够了，质谱只是多一个证据。 自己做的话，还需要加上做结构确证的杂质的钱，很多时候会差很多。 群友6：对照品的检测分析，既要有普遍性的，也要特殊性的，这个普遍性与特殊性的界点怎么界定，很难有一个文件化的说法。 以上讨论内容来源： 新药仿药CMC实操讨论公众号

对照品系指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质，包括杂质对照品，不包括色谱用的内标物质。在药品检验工作中我们常会用到一种用来检查药品质量的特殊参照物——药品标准物质(对照品)。它在药品检验中具有十分重要的地位。随着仪器分析的广泛使用，必将越来越多地使用药品标准物质。下面远慕生物就来介绍一下如何对对照品进行保存和使用：　　(1)对照品应按说明书规定的条件妥善保存，一般置干燥阴凉处保存，某些对照品如维生素E等需避光低温保存。要注意对照品的使用期限，过期、变质的对照品不宜再使用。开瓶后建议短期内用完，避免开瓶后长期不用，同时，在重复使用过程中应尽量避免对照品的分解、污染或吸潮。　　(2)使用中检所对照品时，应严格按说明书执行。一般情况下，供鉴别、检查用的对照品不能用于含量测定。红外鉴别用的对照品使用时应注意与样品在晶型上的差异，必要时可采用相同的方法对样品和对照品重结晶。例如氨苄西林钠具有多种不同的晶型，可用丙酮对样品和对照品重结晶后测定，以确保二者晶型和红外光谱图的一致。　　(3)由中国药品生物制品检定所提供的对照品或国际对照品为法定对照品，以法定对照品作对照标化的原料可称为二级对照品或工作对照品。药品生产单位为节约成本，可使用工作对照品进行日常检验，但药品检验所必须使用法定的对照品，出具的检验报告书才具有法律效力。　　(4)除另有规定外，对照品使用时应采用适宜的方法测定其水分的含量，按干燥品(或无水物)进行计算后使用，否则会造成含量测定结果偏高。对热稳定的对照品可直接干燥后使用；对热不稳定的对照品可同时另取一份作干燥失重，扣除水分后使用。此外，对照品若含有结晶水或盐基，使用时应注意其换算。　　远慕生物提供以下服务：　　1.中药提取物的定制研发和生产，中药提取物代加工相关服务。　　2.中药高含量提取物的工业化高效分离及分离纯化生产　　3.天然产物原料药和中间体的生产，定制（包括合成，半合成）