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如题请问用芦丁对照品绘制标准曲线是否能用槲皮素或其他的黄酮对照品替代?由于实验室的芦丁标准品不见了,老师建议先用槲皮素替代,请问是否可行?
硝酸铝显色法测银杏提取物总黄酮含量,以芦丁为对照,紫外波长扫描结果显示芦丁对照品在500nm左右有最大吸收峰,而供试品在400-600nm范围内均无最大吸收峰,而是呈上升趋势。特此求助,谢谢!
2 溶液的制备2.1对照品溶液的制备:取无水芦丁对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含0.1926mg/ml的溶液,作为对照品溶液。2.2 供试品溶液的制备:取本品,研细,取约 2.5 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇 50 ml,称定重量,加热回流 20 分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液 25 ml,置 50 ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,作为供试品溶液。3 测定法3.1标准曲线制备:分别精密吸取对照品溶液 1 ml、 2 ml、 3 ml、 4 ml、 5 ml分别置 10 ml量瓶中,各加50%甲醇至 5 ml,加5%亚硝酸钠溶液 0.3 ml,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液 0.3 ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液 4 ml,再加50%甲醇至刻度,摇匀,以相应的溶液为空白。照紫外-可见分光光度法试验(附录 V A),在510nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。3.2 样品溶液测定:精密量取供试品溶液 2 ml,置 10 ml量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀作为空白对照。另精密量取供试品溶液 2 ml,置 10 ml量瓶中,照标准曲线制备项下方法,自加“50%甲醇至5ml”起,依法立即测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水芦丁的量,计算,即得。