推荐厂家
暂无
暂无
[color=#444444]有人用HPLC做辣椒红素的测定吗?我想咨询几个问题,请问辣椒红素的标准品只有国外的吗,大概价位是多少?液相的色谱条件是什么啊?我找的文献中方法都有些不一样,能提供一个具体方法吗?或者提供几个英文的参考文献。麻烦大家了[/color]
1.前言: 辣椒红素是从成熟红辣椒果实中提取的四萜类天然色素,属类胡萝卜素。辣椒红素色泽鲜艳,色价高,着色力强,保色效果好,安全性高,在食品工业应用广泛,可用于水产品、肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等各类食品的着色。作为一种天然色素,[url=http://baike.baidu.com/item/%E8%81%94%E5%90%88%E5%9B%BD%E7%B2%AE%E5%86%9C%E7%BB%84%E7%BB%87][color=windowtext]联合国粮农组织[/color][/url](FAO)和[url=http://baike.baidu.com/item/%E4%B8%96%E7%95%8C%E5%8D%AB%E7%94%9F%E7%BB%84%E7%BB%87][color=windowtext]世界卫生组织[/color][/url](WHO)将辣椒红素列为A类色素,在使用中不加以限量。我国食品卫生法规定辣椒红素可应用于多种食品、医药以及化妆品中。目前测定辣椒红素的方法有薄层色谱法、比色法,也有采用HPLC测定的报道,但仅限于检测辣椒中的辣椒红素,未见有香肠中辣椒红素的检测方法,因此,目前急需一种高效、准确的方法来进行香肠中辣椒红素的检测。2.分析步骤2.1储备液的配制 准确称量10.00mg辣椒红素,溶解到丙酮中,定容到10mL,作为1000μg/mL的储备液(实际浓度应乘以辣椒红素的纯度),置于-18℃冷藏保存;2.2标准中间液的配制 准确量取2mL辣椒红素,溶解到正己烷中,定容到10mL,作为200μg/mL的中间液,置于4℃冷藏保存;2.3标准工作曲线的配制 用标准中间液配制成1、2、5、10、20、50、100μg/mL的标液作为工作曲线用的标准溶液。2.4样品处理 精确称取2.00样品于50mL离心管中,15mL的丙酮超声提取30min,离心,上清液转移至100ml梨形瓶中。残渣用15ml丙酮重复提取一次,离心,上清液合并到梨形瓶中。37℃旋干(若最后有水残留,加异丙醇旋干)。用2mL正己烷复溶,过膜,上机。2.5 HPLC测定2.5.1仪器条件(Agilent 1260 )2.5.2色谱参数:色谱柱:Agilent ZORBAX RX—SIL,5μm,4.6mm *250mm柱温:30℃流速:0.8mL/min进样量:20μL流动相:正己烷:乙醇=90:10(V/V)3.结果与分析3.1保留时间: 20mg/L与50mg/L辣椒红素通过RX—SIL色谱柱分离,确定保留时间,如下图:[align=center][img=,490,154]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071527_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]3.2检出限 在基质中添加相当于样品含有1.0mg/L的标准品,经前处理上机检测,计算其信噪比(S/N)>10,如图:[/align][align=center][img=,490,264]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071529_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]3.34.4 线性关系 精密吸取辣椒红素标准品,用正己烷溶稀释成系列浓度为1,2,5,10,20,50,100,200mg/L标准溶液,分别进样测定,以峰面积响应为纵坐标,辣椒红素浓度为横坐标,得到辣椒红素的回归方程为Y=8.05659X-0.09749,相关系数:0.9998,线性关系良好。[/align][align=center][img=,490,392]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071530_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]4.5 空白样品添加回收:[/align][align=center] [table=352][tr][td=4,1]回收率[/td][/tr][tr][td=1,2]名称[/td][td=1,2]添加浓度[/td][td=2,1]回收率%[/td][/tr][tr][td] 火腿肠[/td][td]香肠[/td][/tr][tr][td=1,6]辣椒红素[/td][td]spike-1mg/kg-1[/td][td]88.71[/td][td]91.27[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-2[/td][td]82.63[/td][td]85.42[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-3[/td][td]84.25[/td][td]86.33[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-4[/td][td]95.62[/td][td]95.1[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-5[/td][td]91.59[/td][td]89.74[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-6[/td][td]88.48[/td][td]84.55[/td][/tr][tr][td=2,1]RSD%[/td][td]5.36[/td][td]4.57[/td][/tr][tr][td=1,2]辣椒红素[/td][td]spike-20mg/kg[/td][td]93.24[/td][td]96.68[/td][/tr][tr][td]spike-100mg/kg[/td][td]98.44[/td][td]98.69[/td][/tr][/table][/align][align=left]添加回收选取市场上香肠及火腿肠做质控实验,回收均在80%-100%之间,方法稳定性良好。[/align][align=left]5.0 结语[/align][align=left] 初步用正相色谱做脂溶性物质,对此类型化合物较理想,后续继续尝试中。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif[/img][/align]
食品安全国家标准 食品添加剂 辣椒红