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上周五灭菌的营养琼脂培养基一周天后一瓶长菌了?咋回事?请教高手帮忙。 我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,每次微波炉加热熔化后使用都废弃,这几次实验时,偶尔出现异常现象,查找污染原因,稀释剂没问题,最后拿剩下的两瓶未使用的培养基直接培养,其中一瓶长菌了,我真不晓得咋回事? 配制培养基那一周做过菌液配制,但是所有的玻璃容器都灭菌的,除了装营养琼脂培养基的瓶子,觉得只是倒培养基,应该不会被菌种污染,所以没有灭菌。一直配营养琼脂培养基的锥形瓶都是这几个瓶子。一直以来我们都是我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,都没有发生过培养基长菌。
三糖铁琼脂培养基( l )成分 蛋白胨 20g 硫酸亚铁 0.2g 牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸钠 0.2g 乳糖 10g 002%酚磺酞指示液 12.5ml 蔗糖 10g 琼脂 12~15g 葡萄糖 1g 水 1000ml 氯化钠 5g ( 2 )制法 除乳糖、蔗糖、葡萄糖、指示液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀后,再加入其余成分,摇匀,分装,121 ℃ 灭菌15 分钟,制成高底层(2 ~3cm ) 短斜面。( 3 )用途 用于初步鉴别肠杆菌科细菌对糖类的发酵反应和产生硫化氢试验。 方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,做高层穿刺和斜面划线接种,置35 ℃ 培养24~ 48 小时,观察结果。培养基底层变黄色为葡萄糖发酵阳性,斜面层变黄色为乳糖、蔗糖发酵阳性;底层或整个培养基呈黑色表示产生硫化氢。
菌落培养平板计数琼脂灭菌后,为什么是深红色,跟以前不一样颜色?琼脂也没有过期,灭菌是121℃,20分钟。问题出在哪里,这样的琼脂还能用吗?