短乳杆菌

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  • 保健食品乳杆菌检测

    保健食品中仅含有乳杆菌和双歧杆菌两种有益菌。根据GB 4789.35-2016标准,乳杆菌数量等于乳酸菌总数(MRS平板计数结果)减去双歧杆菌数量(改良MRS平板计数结果)?会出现减成负数的结果吗?

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  • 使用超高效合相色谱分析短杆菌肽
    使用超高效合相色谱(UPC2)分析短杆菌肽Sean M. McCarthy, Andrew J. Aubin, 和 Michael D. Jones沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德)应用效益■ 快速分离短杆菌肽■ 载量线性响应■ 准确、高精度分析短杆菌肽的方法■ 有可能用于其它疏水性肽和蛋白质沃特世解决方案ACQUITY UPC2系统ACQUITY SQDACQUITY UPC2 CSH氟苯基色谱柱Empower&trade 3软件关键词超高效合相色谱、UPC2、疏水性肽、短杆菌肽简介用反相液相色谱(RPLC)分析疏水性肽和蛋白质难度很大,因为溶液中经常需要使用洗涤剂保持疏水性物质的稳定性,而这些洗涤剂容易发生聚集和/或沉淀,严重影响它们的回收,这些因素以及其它原因使得难以用RPLC分离疏水性肽和蛋白质。在本应用纪要中,我们为您介绍一种在ACQUITY UPC2TM系统上使用沃特世(Waters)超高效合相色谱技术分离典型跨膜肽-短杆菌肽的方法。短杆菌肽是由芽孢杆菌产生的一种常见和已被良好表征的跨膜肽物质,它被用作对抗革兰氏阳性和某些革兰氏阴性细菌的局部用抗生素,短杆菌肽包括通用组成为甲酰-L-缬氨酸-甘氨酸-L-丙氨酸-D-亮氨酸-L-丙氨酸-D-缬氨酸-L-缬氨酸-D-缬氨酸-L-色氨酸-D-亮氨酸-L-X-D-亮氨酸-L-色氨酸-D-亮氨酸-L-色氨酸-氨基乙醇的一族化合物,其中X取决于短杆菌肽分子,即分别占总短杆菌肽量约87.5%、7.1%和5.1%的革兰氏A(X=色氨酸)、革兰氏B(X=苯丙氨酸)和革兰氏C(X=酪氨酸),1需要交替的D和L氨基酸单元构成_-螺旋状。我们研究了色谱柱化学品、流动相改性剂和梯度斜率对分离短杆菌肽的影响。采用优化方法分离市场上销售的非处方药物(OTC),将测定的短杆菌肽浓度与标示量进行对比。采用质谱仪测定短杆菌肽的浓度,采用选择离子谱表征每种物质。在ACQUITY UPC2系统上使用我们的方法,可得到线性和可重复的结果&mdash &mdash 测定的OTC制剂浓度为标示量的98.4%。试验测试条件除非另有说明,以下是用于所有色谱最终方法的最佳条件。UPC2测试条件UPC2系统: ACQUITY UPC2检测器: PDA、ACQUITY SQD PDA @ 280nm,分辨率为6 nm(补偿400至500 nm)色谱柱: ACQUITY UPC2 CSH 氟苯基,3.0 x 100 mm, 1.7 &mu m柱温: 50 ° C样品温度: 15 ° CUPC2 ABPR: 1885 psi进样量: 1 &mu L流速: 2.0 mL/min流动相A: CO2流动相B: 含0.1%TFA的甲醇(除非另有标示)梯度: 20%至30% B,1.5minSQD条件离子源: ES+锥孔电压: 20 V毛细管电压: 3.7kV源温度: 150 ° C脱溶剂气温度: 500 ° C脱溶剂气体流速: 400 L/hr锥孔气体流速: 25 L/hrSIR: 922.6,930.3,941.9数据管理Empower 3软件样品描述用解硫胺素芽孢杆菌(短芽孢杆菌)制备的短杆菌肽从Sigma Aldrich公司购买,将样品溶解在甲醇中制成0.5mg/mL浓度的溶液,如需要,可用甲醇稀释。含有短杆菌肽的非处方软膏是从当地药店购买的。将0.2g软膏溶解在10mL正己烷中,然后用5mL甲醇萃取短杆菌肽,去除甲醇层,用0.2-&mu m的烧结玻璃盘过滤,然后直接进样ACQUITY UPC2系统。结果与讨论我们系统性地筛选了四种色谱柱,测定哪种分离效果最佳,结果如图1所示,色谱柱筛选过程可在1小时内非常快速地完成。在我们设定的筛选条件下,BEH 2-EP和BEH色谱柱未检测到谱峰,由于其它色谱柱表现出合适的色谱性能,因而未对这两者的非洗脱原因深入研究,其中ACQUITY UPC2 CSH氟苯基色谱柱检测的色谱峰形最佳,因此采用该色谱柱继续研究。图1.通过短杆菌肽标准物的色谱峰形和保留时间筛选各种化学特性色谱柱。所有色谱柱规格为3.0x100mm,填装亚-2-微米填料;所有分离条件都采用流动相 A:CO2、流动相 B、含0.1% FA的MeOH、2 mL/min, 3%B至25% B,5min。为了分离短杆菌肽物质,对酸性改性剂的影响进行了研究,结果表明:使用三氟乙酸(TFA)可得到稍好的峰形,提高了短杆菌肽A和短杆菌肽C之间的分离度,结果如图2所示。已知TFA会抑制质谱电离,但每种物质的信号都足以定量检测治疗制剂,后续将对此进行讨论。对于要求更高灵敏度的应用,可能需要降低TFA浓度或使用甲酸,以达到希望的检测限值。图2.酸性改性剂对分离短杆菌肽的影响。当设置好合适色谱条件后,通过减少梯度时间优化分离过程,结果如图3所示,我们能够在1.5分钟时间内使每种短杆菌肽组分的分离度达到1.4或更高,在相同流速下通过减少运行时间增加梯度斜率,不但实现有效分离,同时还将短杆菌肽A的信噪比从336提高至605。图3.UV 280-nm痕量检测优化分离短杆菌肽A、B和C。我们测试了最佳分离条件,能够使用单四极杆质谱(SQD)检测每种物质,图4显示:每种物质都被质谱良好分离和检测到,另外每种短杆菌肽物质都显示含有绝大多数的M+2H离子,后续的研究将使用这些参数进行选择离子监测。图4:每种短杆菌肽物质的总离子图谱-A和加合离子图谱-B-D。选择强度最高的离子评估市场上销售的抗菌制剂中的短杆菌肽含量,对于多肽序列,红色残基是L型同分异构体,黑色残基是D型同分异构体。为了评估我们的方法是否适用于定量分析市场上销售的非处方药中的短杆菌肽,我们在ACQUITY SQD上使用选择离子监测,结果如图5A所示。我们绘制浓度-峰面积曲线,得到每种物质的校正曲线。结果发现:如图5B-D所示,每种成分在测试范围内都呈线性响应。另外还使用校正曲线测定了非处方药物中的每种短杆菌肽物质浓度。图5,图A-25.0、12.5、1.25和0.625mg/mL浓度的标准溶液中含有短杆菌肽物质的叠加选择离子谱。图B、C和D-每种短杆菌肽A、B和C各自的MS峰面积线性拟合图。使用开发的方法评估非处方药物中的短杆菌肽物质的浓度和相对丰度。如图6所示,重复分析结果表明:每种短杆菌肽%RSD值小,计算浓度与标签上的标称值相吻合;我们还发现短杆菌肽物质的相对丰度与文献报道的丰度非常吻合1。图6. 从抗菌软膏中萃取的短杆菌肽A、B和C的叠加选择离子谱重复进样分析的计算RSD值(N=3)在可接受限值以内,计算丰度与文献报道数值非常吻合1。结论正如本应用纪要所展示的,ACQUITY UPC2系统与ACQUITYUPC2色谱柱化学结合使用,可为短杆菌肽提供简单、准确和可重现的分析方法。该工作表明ACQUITY UPC2系统可用于分析疏水性肽,还可能用于分析疏水性蛋白质,例如膜蛋白。参考文献1. The Merck Index and Encyclopedia of Chemicals, Drugs, and Biologicals.13th ed. Whitehouse Station, NJ : Merck Research Laboratories 2001.关于沃特世公司 (www.waters.com)50多年来,沃特世公司(NYSE:WAT)通过提供实用和可持续的创新,使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步,从而为实验室相关机构创造了业务优势。作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者,沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。2010年沃特世拥有16.4亿美元的收入和5,400名员工,它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。联系人:叶晓晨沃特世科技(上海)有限公司 市场服务部xiao_chen_ye@waters.com周瑞琳(GraceChow)泰信策略(PMC)020-8356928813602845427grace.chow@pmc.com.cn
  • 新西兰乳品巨头产品中检出肉毒杆菌
    新西兰乳制品巨头恒天然集团3日宣布,旗下部分婴儿奶粉和运动饮料等产品可能 &ldquo 受到污染&rdquo ,含有肉毒杆菌。暂不清楚&ldquo 受污&rdquo 产品的具体名称和销往国家或地区。  早已发现?  恒天然2日发布这次污染消息,3日举行新闻发布会,公布更多详情。  这家企业新西兰奶制品公司执行董事加里· 罗马诺介绍说,检测显示,新西兰本地一家工厂2012年5月生产的3批浓缩乳清蛋白含有肉毒杆菌。这些&ldquo 受污&rdquo 产品总量38吨。  浓缩乳清蛋白作为基本原料,通常被用于生产婴儿奶粉、儿童成长奶粉和运动饮料等一系列产品。至于一般乳制品,例如鲜奶、酸奶、奶酪和经过高温消毒的牛奶产品,不会受影响。肉毒杆菌是一种生长在常温、低酸和缺氧环境中的革兰氏阳性细菌。肉毒杆菌食物中毒的主要临床表现是恶心、呕吐及中枢神经系统症状如眼肌、咽肌瘫痪,中毒者如抢救不及时,致死率较高。  按恒天然的说法,早在今年3月,企业便发现潜在质量问题,当时对某一产品的检测发现梭菌属细菌。只是,这一菌属许多菌种属于无害,因而企业在接下来几个月里对产品样品实施进一步检测。  直至7月31日,检测中发现了可能引起食物中毒的肉毒杆菌。问及为何耗时这么久才发现问题,罗马诺回应,这一时间符合现代标准。  罗马诺说,这次污染源是恒天然在新西兰北岛怀卡托地区豪塔普工厂的一根受污染的管道。&ldquo (发现受污染后)我们立即寻找源头,确定一小段管道没有像本应该的那么卫生。&rdquo   可瑞康中招  恒天然说,已于2日告知8家客户这次质量问题。这些客户现正紧急调查,以确定产品是否受到影响。如有必要,将召回产品。恒天然拒绝提供8家企业和相关产品名称,拒绝说明&ldquo 受污&rdquo 产品销往哪些国家和地区。  《新西兰先驱报》3日报道,新西兰初级产业部认定,在新西兰销售的5批婴儿奶粉产品可能受到污染。这一部门说,涉及的品牌是可瑞康(Nutricia Karicare)、产品是针对6个月以上婴儿的第二阶段配方奶粉。  恒天然被视作全球第四大乳制品企业,占新西兰国内大约9成市场份额,年收益大约160亿美元。  这是这家企业今年以来第二起产品&ldquo 受污&rdquo 事件。今年1月,新西兰初级产业部宣布,恒天然生产的奶粉中被检测出含有微量双氰氨。  初级产业部3日说,已把恒天然这起最新&ldquo 污染&rdquo 事件通报主要海外市场的政府监管机构。同时,这一部门将与恒天然及相关客户合作,加紧调查核实。  恒天然集团全球首席执行官(CEO)西奥· 史毕根斯说,企业将竭尽所能帮助8家受影响客户,确保&ldquo 受污&rdquo 产品从市场下架以及让公众知情。  我国高度重视  中国是新西兰奶粉的主要进口国之一。暂不清楚这次是否有&ldquo 受污&rdquo 奶粉进入中国市场。  中国国家质检总局高度重视这件事,2日立即与新西兰驻华使馆取得联系,要求新方立即采取措施,防止问题产品影响中国消费者健康。  同时,中国国家质检总局要求进口商立即召回可能受污染产品,要求各地检验检疫机构进一步加强新西兰输华乳制品的检验监管。  恒天然一名发言人说,恒天然集团全球首席执行官史毕根斯定于3日从欧洲前往中国,向相关机构和客户通报最新情况。  《新西兰先驱报》报道,就在这次肉毒杆菌污染事件前,恒天然正准备在中国市场推出自己品牌的婴儿奶粉&ldquo 安曼&rdquo (Anmum)。这家企业6月说,新品牌奶粉将首先在北京、上海和广州销售,如果开局顺利,将扩至中国其他地方市场。
  • 我国首次分离得到新乳杆菌 助推益生菌食品升级
    国家卫健委日前发布2020年第9号公告,其中“马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种”乳杆菌被列为新食品原料。据悉,这是天津科技大学王艳萍教授科研攻关的成果,是我国首次分离得到、全球首株完成全基因组测序、具有自主知识产权的新乳杆菌,对酸奶及益生菌等发酵食品升级品质、改善口感、清洁标签等将起到提升作用。  原料天然化、黏稠度和细腻口感是酸奶品质的高地。在欧洲,酸奶生产商通常使用特殊功能的乳酸菌来提高酸奶质地的“黏性”,同时,许多国家禁止在发酵乳中添加增稠剂、稳定剂,对天然酸奶的追求已成为未来市场趋势。  酸奶等益生菌发酵食品以其较高的营养价值和容易被人体吸收等特点受到人们青睐,我国每年包括酸奶在内的益生菌类食品市场都保持了两位数的增长,高品质酸奶成为乳品新消费需求。“挖掘中国微生物宝库资源,研发胞外多糖乳杆菌,解决酸奶不添加增稠剂而获得味蕾舒适的黏性及口感,使中国益生菌食品行业与国际接轨,助推产业优质化发展。”王艳萍把酸奶新型乳杆菌目标定位为对胞外多糖乳酸菌的研究和开发,利用微生物的筛选技术,获得高产胞外多糖的乳酸菌,通过对其产糖分子机制的研究,最终发现了马奶酒样乳杆菌ZW3胞外多糖合成的途径及其关键基因的作用。  经过近20年科学研究,在4次国家自然基金及多项省部级科研基金支持下,研发获得成功,在国内外学术期刊上发表文章论文30余篇。王艳萍通过收集、分离、功能确认菌株,到菌粉生产工艺、菌粉的稳定性、菌粉产品应用等一系列研究,对ZW3菌株高产胞外多糖的分子学机制、结构、性能及功能等方面进行了全面深入的研究,为该菌株在发酵食品、乳品、功能性食品、保健食品、化妆品以及微生态药物等领域的广泛应用奠定了坚实的基础。  马奶酒样乳杆菌ZW3是全球研究最深入和最全面、首株完成全基因组测序的马乳酒样乳杆菌,通过其自身代谢产物实现酸奶黏度增稠,可以避免因添加增稠剂和稳定剂影响发酵乳制品的口感及质量,使酸奶更美味和优质。  王艳萍介绍,乳酸菌胞外多糖具有独特的物理学和流变学特性以及公认的食用安全性,是天然的生物增稠剂,可以替代目前正在应用的、来源于非食品级细菌的稳定剂或增稠剂,在发酵乳品加工中具有重要用途,能提高干酪得率、降低酸奶凝胶脱水收缩现象,解决酸奶生产中常出现的凝胶易断裂、黏稠度低、乳清易析出等质量问题。  据该菌种申报单位诺佰克(武汉)生物科技有限公司的专家介绍,该乳杆菌是具有优异食品加工性能与调节肠道、精神健康等多种益生功能于一体的多功能菌株,有高产胞外多糖的特性,在食品中应用能减少稳定剂、增稠剂的使用,打造清洁标签,升级产品;可去除或减少发酵过程中产生的亚硝酸盐,提高产品安全性;还在调节肠道健康、提高免疫、抗氧化等方面具有多种功能。许多乳品行业专家都认为此乳杆菌是“小菌种,大作为”。

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  • 393干酪乳杆菌9338发酵乳杆菌19992格氏乳杆菌7830莱士曼氏乳酸杆菌BAA-52类干酪乳杆菌类干酪亚种8014植物乳杆菌7469鼠李糖乳杆菌9595鼠李糖乳杆菌53103鼠李糖乳杆菌NCIMB 7473鼠李糖乳杆菌15521沙克乳杆菌49032乳酸乳球菌19257乳酸乳球菌乳脂亚种11454乳酸乳球菌乳酸亚种19435乳酸乳球菌乳酸亚种23216非脱羧勒克氏菌700325非脱羧勒克氏菌33462长滩军团菌33152瓶梗肺炎军团菌19120格氏李斯特菌25401格氏李斯特菌700545格氏李斯特菌33090无害李斯特菌(英诺克)NCTC 11288无害李斯特菌19119伊凡诺夫李斯特菌(伊氏李斯特)BAA-139伊凡诺夫李斯特菌13932单核细胞增生李斯特菌QQ:
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  • 主要特点:可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可;可自动控制孵育温度和孵育时间检测样本只需1ml/1g;8个检测位各自独立可检测不同的样品;灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电脑出定量分析检测报告。通过ISO 16140:2003 “食品和动物饲料的微生物学 – 代替法的认证”。 RVLM微生物检测仪 检测范围:活细菌总数大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等肠道杆菌科金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌;绿脓杆菌 沙门氏菌李斯特菌肠球菌曲霉属真菌;曲霉菌属酵母菌乳酸杆菌 应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及 化妆品 与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅 水源检测、制水厂分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司 微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测 集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析) -免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻) 检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍 高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理 检测步骤:(简单三个步骤得到100%定量检测结果) 第一步:放入样本 -打开瓶盖,加入11ml无菌水-放入液态(固态/表面)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)-盖紧瓶盖 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合(充分溶解或混合如右图所示) -若使用振荡器,需时20秒左右;或用手用力摇,需时2~3分钟左右。 第三步:在适当时间判读结果(请查右表) -使用RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后立即放入检测仪-得到100%定量分析结果 *若没有RVLM微生物检测仪: -待充分溶解混合后,放入恒温器孵育 (在适当温度下孵育适当时间,请查下表)-肉眼判读定性或半定量分析结果以大肠菌群为例:若菌落数>108CFU/ml:2小时内颜色即变成黄色;若菌落数<102CFU/ml:14小时内颜色不会变成黄色;若菌落不存在:18小时后颜色仍保持开始颜色或其他中间色(不变成黄色) 使用后无菌处理 -按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方-放心安全丢弃(与过期药物同样处理) 微生物快速诊断 RVL@产品 Q&A1. 微生物检测瓶除可以检测活菌外,死菌可以检测么?答:不能检测死菌。2. 微生物检测瓶可以检测厌氧菌么?答:检测瓶的检测范围即包括厌氧菌(亚硫酸盐梭状芽胞杆菌 Sulphite reducing Clostridia,产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens),也包括需氧菌。 检测不同种微类生物的检测瓶中试剂不同。对于厌氧菌,我们有特殊的试剂,如检测产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens。3. 检测瓶的检测原理都分别用到了哪些检测方法?答:培养皿法、酶法、免疫法、基因法。4. 对于第 3 题,你能简要叙述这些方法的优劣势么?答:与传统的培养基法、胶体金、酶免法和 PCR 法不同,德国皇家微生物检测仪是多种方法的集合。单独使用一种检测方法都有自己的缺点:比如, PCR 法需要专业技术人员和昂贵设备; 培养基法操作复杂; 胶体金法灵敏度低; 酶免法特异性捕捉不充分。 德国皇家微生物检测瓶快速检测系列产品是以上多种方法的综合运用,吸收了每种方法的优点,弥补了各种方法的不足。5. 用微生物检测瓶进行微生物检测时,第一步是先放样本还是无菌水?答:都可以。6. 对样本进行微生物接种时,需要在无菌环境下进行么?答:检测瓶是通过捕捉特异性,结合多种检测法进行分析。无菌环境与否均可(临检的场所大都是非无菌环境)。7. 检测瓶可以检测表面样本和固态样本么?答:可以检测固态、液态、表面样本(用所配棉棒沾湿无菌水后涂抹表面)。纸浆等膏状、糊状、粘稠状昂本都可以检测。8. 检测瓶在检测固态样本时需要对进行研磨、稀释等前处理过程么?答:直接将样本放入检测瓶,无需任何前处理。 9. 每次检测的无菌水用量是多少?答:一般是 11ml。如果是检测液态样本或水样本,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。 10. 放入样本和无菌水后,“摇匀使其充分溶解和混合”这一操作步骤,无论定性分析还是定量分析,都是必要的步骤么?答:是的,摇匀无论是定性还是定量分析都是必要步骤。11. 不同的微生物对应的孵育温度是一样的么?请举例说明。答:不一样。37 摄氏度居多:活菌总数、沙门氏菌、李斯特菌等,大肠杆菌 44 摄氏度等,详细请参考对照表。12. 若是检测冷菜或者冰欺凌这样的样本,孵育是否应该低温进行?答:对检测样本自身的温度没有限制,检测样本中微生物,请严格遵照所检测微生物对应的孵育温度,依然根据对照表。13. 如果想加快检测时间,孵育温度可以调至高于所检测微生物对应的孵育温度?答:不可以,严格遵照对照表。14. 操作手册规定放入的样本量为多少?答:0.1g‐1.0g 或 0.1ml‐1.0ml。15. 若放入的样本量高于规定的样本量,检测结果会不同,或者检测结果(定量时)增加么?答:样本量多一些或少一些,定量分析结果不会有变化。 原因:传统的微生物学检测方法,包括官方参考方法,即基于固体选择性培养基的菌落计数法内在的统计分散度(统计名词,也称为统计变异,是变量或概率分布蔓延,常见的例子是方差,标准差和四分位距。)大于 50%。很多实验室已经证实皇家生物检测法与其他检测方法比统计分散度低,可信度高。但不管怎样,25‐30%的统计分散度还是有的。另外,由采样产生的统计分散度同样应该考虑在内,尤其是微生物经常容易繁殖的固态的肉制品类。 因此,加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的(和其他任何方法获得的结果相等)。16. 对于面粉这类低密度的散装样本,可以照常检测么?答:可以。 17. 对于酱油这样的深色样本,会影响定性检测结果的判读么?您有什么好的建议?答:如果搭配检测仪进行定量分析,不存在这个问题;如果只是通过肉眼观察变色进行定性分析,深色样本如果担心肉眼不能够清晰的辨认,建议进行稀释后再进行检测。还记得第 15 题得答案么?加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的和其他任何方法获得的结果相等)。稀释同样的道理。18. 如果是检测水样,还需要加入无菌水么?加多少?答:建议加水样 1ml,无菌水 10ml。19. 不同的微生物对应的开始颜色和呈阳性的颜色都相同么?请举例说明。答:不同。例如,沙门氏菌孵育 10 分钟左右出现的开始颜色为红色,阳性颜色为黄色;李斯特菌,开始颜色为蓝色,阳性颜色为黄色。具体请参考对照表。20.微生物检测仪兼备孵育机的功能么?答:是的。将检测瓶充分摇匀后立即放入检测仪,在软件上进行检测菌类设置后。检测仪会自动进行孵育,并自动给出定量分析检测报告。21. 微生物检测仪兼备振荡器的功能么?答:不具备。需用手用力摇 2‐3 分钟,或振荡器摇 20 秒左右,直至充分溶解或混合。22. 微生物检测仪的判读原理是什么?答:微生物检测仪是一款精密的光学判读仪。通过光学原理精密探测检测瓶中的颜色变化,并给出精确的定量分析检测报告。23. 微生物检测仪是外接电源,还是自带充电电池?答:外接电源。24. 微生物检测仪可以同时、独立地检测多少个检测瓶?答:8 个。同时、独立的探测,并分别给出定量分析报告。25. 微生物检测仪定量分析,需要在电脑上安装分析软件么?答:需要按照配套分析软件。26. 怎样的计算机操作系统对该分析软件兼容?答:XP, Vista, Windows 727. 如果检测仪是初次开机,接通电源后需要稍等多少时间再进行下一步操作?答:若初次开机,开机后停留 40 秒左右继续操作为宜。28. 检测仪进行定量分析时,充分混合后的检测瓶是应该立即放入检测仪,还是稍等片刻后再放入?答:充分混合后立即放入检测仪。29. 检测瓶放入检测仪后,在检测仪分析软件点击开始,软件界面上对应检测孔的灯会变成什么颜色?答:在所检测检测瓶对应的操作界面上点击“Start”(开始),对应孔的指示灯由绿色变为红色。表明检测开始并进行中。30. 当检测结束后,分析软件界面对应孔的灯光会恢复为什么颜色,说明检测结束,可以放入新样本?答:在检测进行时,指示灯为红色。当检测结束后,指示灯变为绿色。此时在对应的检测仪检测孔放入新的检测瓶开始下一轮检测是可以的。检测时间由细菌的存在量决定(当微生物含量较高时),或由对照表对应的检测时长决定(当微生物含量很低时,应超过对照表中检测 1CFU 对应的检测时间)。31. 微生物检测瓶的分析时间和检测瓶中微生物含量之间是什么关系?答:反比关系。即微生物含量越多,对应的检测时间越短;微生物含量越少,对应的检测时间越长。 如果样本中微生物含量过高,几分钟甚至几秒钟内检测仪的定量分析结果就会显著变动;如果微生物含量很低,(由于 RVLM 是非常精密灵敏的仪器)有经验的使用中可以通过几小时甚至几分钟的数据变化初步判断微生物目标含量是否达到规定要求。32. 分析检测前是否应该有明确的实验目的以确定你要检测的微生物含量(根据国家标准规定微生物的存在量。)?答:这样是最好的。例如,根据国家 GB 标准,或根据国际 EC 标准等,都有明确(或部分明确)地注明微生物在不同家禽、畜牧物种中的允许最大存在量。具体地说,在进行微生物检测时,我们首先要明确检测目的。如、国际 EC 2073:2005标准中规定,大肠杆菌在鲜肉中允许的最大存在量为 CFU 10^2/g,即每克鲜肉中大肠杆菌的含量不允许超过 CFU 10^2。此时我们根据对招表,找到大肠杆菌所在列,查 log CFU 10^2=2,即在大肠杆菌行中找到数字 2 所对应第一列的数字为 14。无论是肉眼进行定性分析,还是检测仪进行定量分析,要检测样本中大肠杆菌含量是否超过 CFU 10^2,最长在 14 小时即可得到严格精准的分析结果。如果是检测瓶进行定量分析,有经验的实验员会在很短时间内(譬如十几分钟)根据定量分析数据的动态变化情况,初步判断出检测瓶中的微生物含量。33. 明确要检测微生物含量的目的是什么,对照表起到什么作用?答:是确定所检测微生物对应的孵育温度、开始颜色、分析时间、阳性颜色的标准对照的依据。具体的使用方法请参考上一题答案。34. 什么是 CFU?答:colony‐forming unit,菌落形成单位。 经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。 细菌(可见)和真菌的测量单位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成单位,将稀释后的一定量的菌液通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。与常规利用显微镜对微生物数量进行测量不同,主要是对可见(即多数情况下形成菌落)的细菌数量进行测量的单位。 意思就是每毫升菌液中含有多少单细胞! 传统上就叫“个”。但是,我们知道,一个菌落并不一定是一个细菌所生成,也可能是由一簇细菌(一个细菌团)所生成,这时候再叫“个”就不太准确啦,准确的叫法就是“菌落形成单位”,英文缩写“CFU”。就像“公斤”和“千克”,只是叫法不同,数量上没有变化。 CFU 代表“colony forming units”。CFU/mL 指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数,也有用 CFU/g 即对应固体培养基。35. 假如我要检测样本中大肠菌群的菌落含量不得超过 106CFU/g 或 106CFU/ml, 用肉眼观察瓶中颜色变化进行定性分析,请对照“孵育温度和比色对照表”详细叙述检测步骤。答:第一步:放入样本 放入所要检测的样本(0.1‐1.0g,或 0.1‐1.0ml),加入 11ml 无菌水(根据检测物情况,若为液体,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。差别不大),盖紧瓶盖。 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合。 如果用手需有力摇 2‐3 分钟左右;或用振荡器摇,需时 20 秒左右。 第三步:在适当时间判读检测结果 (1)若肉眼定性分析。根据对照表确定大肠菌群对应的孵育温度、开始颜色、检测时间、阳性颜色等信息。 孵育温度:根据对照表为 37℃; 开始颜色:即摇匀后放入 37℃恒温箱孵育 10 分钟左右会呈现的颜色。根据对照表为红色; 检测时间:我们要检测标准为大肠菌群含量不超过 106CFU/g 或 106CFU/ml。根据对照表,对应列log 106=6,找数字 6 对应行的数字为 6,即检测时间为 6 小时。即,观察时间确定为 6 小时。 阳性颜色:根据对照表,大肠菌群的阳性颜色为黄色。 确定了以下信息后,我们把充分混合后的检测瓶放入 37℃恒温箱,这样一直放置。孵育 10 分钟左右,我们观察会发现检测瓶会呈现检测大肠菌群对应的开始颜色——红色。继续放置,到 6 个小时的时候进行观察,如果颜色变为黄色,说明样本中大肠菌群含量超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为不合格品;若没有变为黄色,而是始终保持开始颜色红色,或其他中间颜色,说明样本中大肠菌群含量未超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为合格品。 (2)若检测仪进行定量分析 此步骤请参见下一题。第四步:无菌处理最后别忘记按下检测瓶的瓶盖上方对检测瓶进行灭菌处理。按下瓶盖后摇一摇,好了,可以安全丢弃了。注意:在进行实验操作时,不要碰到检测瓶的瓶盖顶部,以免在不当的时候进行了无菌处理,影响试验结果。36. 若第 34 题搭配检测仪进行精确的定量分析,请详述操作步骤。答:(2)若检测仪进行定量分析 将充分混合后的检测瓶立即放入检测仪。 启动检测仪软件,点击“Station”(状态)录入相关信息(包括:检验员姓名、检测、检测样本所属客户、检测时间等信息);在软件操作界面“analysis type”(检测种类)下拉菜单中勾选所检测的微生物种类,点击 ok,点击开始,指示灯变红,开始进入分析状态。观察检测仪的定量分析数据变化,进行判断。37. 为什么在检测结束之前,不能按下检测瓶的瓶盖?答:无菌处理。瓶盖中还有无菌处理物质,按下瓶盖,瓶盖中的无菌处理物进入瓶内,与瓶内溶剂进行反应,完成无菌处理。因此,实验过程中请不要轻易触碰检测瓶的瓶盖。 技术人员选答题,销售人员必答题:1. 检测瓶可以检测多少种微生物,分别是什么?答:活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、肠球菌、亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、曲霉属真菌、曲霉菌、酵母菌。 以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等。2. 检测瓶在检测大肠杆菌时,可以检测到所有的大肠杆菌菌株么(包括目前流行的 EHEC?)答:是的,可以检测到全部的大肠杆菌菌株,包括 EHEC 肠出血性大肠杆菌(E.coli O104, O111, O157 等)3. 检测瓶的应用范围有哪些?答:卫生控制:食品(HACCP),厨房、工具、表面(HACCP),水质,(CDC)疾病控制、进出口检验检疫、药品及化妆品。 与我们生活息息相关的:环境监测机构,农产品及相关加工公司,水源检测和制水厂,水配送公司,药厂、药房、化妆品厂,分析实验室和 HACCP 诊断,奶制品厂,咖啡馆、餐厅,消费者保护团体、工商管理机构,室内空调调节公司,尤其能应用于军事、大型展会等的食品快速检测。4. 你认为大肠杆菌检测瓶、李斯特菌检测瓶、沙门氏菌检测瓶除了是用于食品安全检测外,适用于医疗么?答:大肠杆菌(EHEC)、李斯特菌、沙门氏菌,这三款检测瓶可用于体外临床检测。 Royal 微生物检测瓶系列的全球定位依然是食品安全。在欧洲,对人体进行微生物的临床体外检测是非常少的,欧洲的各方面安全控制的很好。然而,在发展中国家,以上三款微生物的人体体外临床检测经常发生。而以上三款检测瓶用于体外临床检测的安全性和准确度都可以保证。4 合 1 试纸片和检测瓶市场定位的区别 1)4 合 1 试纸片和检测瓶比较 4 合 1 试纸片配合其分析仪,一台分析仪可以同时检测 48 个试纸片。因此,从经济成本的角度考量,最好一开机就是 48 片同时检查。对于医院,攒够 48个粪便样本后,一次性进行分析。检测瓶,一个样本就可以进行检查。而且更大的优势在于,这款产品会非常受医生的欢迎。因为医生可以不用接触样本,这是目前大多数的医院检测无法做到的。把瓶子给病人,让病人自己将粪便样本放入后送回给医生。医生拿到检测瓶,在医院的振荡器上摇匀后,放入孵育机,等待结果判读即可。2)检测瓶与医院目前传统检测法的比较 ?目前医院的检测方式依然是培养皿法居多。这种方法最令医生反感的地方是医生要接触样本。如果医生处于怀孕期,接触到李斯特菌的后果就是流产。如果检测台没有处理干净,也容易导致微生物的传播。 检测瓶,医生完全不用接触样本。样本放入检测瓶的的这个过程交给病人在卫生间去操作就可以。医生要做的就是简单的摇匀和放入孵育器孵育(振荡器和孵育器都是医院的常规设备)。5. 无论固态、液态还是表面样本,在检测时是否都无需进行前处理?答:是的6. 检测仪的特异性是多少?答:99.999%(理论极限值)7. 检测仪的灵敏度是多少?答:可以检测到 1 个活菌的理论极限值。8. 做定性分析时,检测需要几步,分别是什么?答:三步:加样;摇动瓶子直到充分溶解和混合;在适当时间判读结果(根据对照表)。最后不要忘记按下瓶盖上方进行无菌处理。9. 做定量分析时,检测需要几步,分别是什么?答:同上。具体请参考检测仪操作文档。10. 检测后按下检测瓶瓶盖的目的是什么?答:无菌处理,请参考上第 45 题。11. 检测瓶的储存温度是多少?答:在 20℃-25℃左右既可以储存,这个温度下很方便运输,对于临检来说是有利的。但随着大气温室效应,夏天时还是要注意储存温度不要超过 25℃,负责会影响检测瓶检测的灵敏度。然而,如果可以放到 4℃进行储存,保质期可以延长近一倍。12. 如果预延长检测瓶的有效期,储存温度最好为多少?答:4℃,具体见下表。
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    嗜酸乳杆菌的用途及使用方法! 嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属,革兰氏阳性杆菌,杆的末端呈圆形,主要存在小肠中,释放乳酸,乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素,但是抑菌作用比较弱。早在20世纪70年代,北卡罗来纳州立大学从人体粪便中最先分离出LactobacillusacidophilusNCFM,它是唯一一株进行了基因测序和注释的嗜酸Chemicalbook乳杆菌。嗜酸乳杆菌是目前乳酸菌家族中广泛研究与开发的益生菌之一,被视为第三代酸乳发酵剂菌种,也是人体中重要的微生物。嗜酸乳杆菌不仅在胃中,它还是人体小肠内的主要益生菌。 一、菌种简介平台编号:bio-67309提供形式:冻干物拉丁属名:Lactobacillus acidophilus中文名称:嗜酸乳杆菌拉丁名称:Lactobacillus acidophilus其它保藏中心编号:=AS 1.2686来源历史:←中科院微生物所收藏时间:2010/10/15原始编号:LA-14资源归类编码:15131319101模式菌株:非模式菌株用途:研究;生产;奶制品(美国菌种)。主要用途:研究;生产具体用途:奶制品(美国菌种)。生物危害程度:四类培养基编号:CM0006培养基名称:MRS培养基培养基成分:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸钠 5.0g,柠檬酸二铵 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH6.8。*培养CICC 10774时pH需调至5.0.培养温度:37℃需氧类型:厌氧保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。 二、嗜酸乳杆菌的功效1、抑制病原菌、抗病害:嗜酸乳杆菌能有效调整动物肠道的菌群平衡,调节机体肠粘膜的免疫活性,增强免疫力,提高动物存活率。2、促进动物生长:能分泌乳酸,并产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶,有利于物质的分解;合成B族维生Chemicalbook素,氨基酸、未明促生长因子等营养物质,促进动物生长。3、净化养殖水体:明显降低养殖水体氨氮等有害物质的含量,分解鱼类残饵、粪便及水中有机质,改良水体环境,抑制水体中有害菌的繁殖生长,调节藻相平衡,控制有害菌藻,净化水质,促进鱼虾类健康生长。 三、嗜酸乳杆菌的用途嗜酸乳杆菌作为益生菌家族中的重要成员更是被广泛的应用于各种功能性食品当中,如瑞典研发的发酵燕麦粥,其产品中的益生菌能寄生于胃肠道壁上,有效地改善人体的免疫系统,增强免疫力。 四、嗜酸乳杆菌的使用方法嗜酸乳杆菌可与其它添加剂混合作预混料使用,经预混合后添加到粉料中或直接与其他饲料原料一起制粒;也可投于饮用水中饲喂。 五、嗜酸乳杆菌的获取方式嗜酸乳杆菌在胃中存活率一般能达到80%,但是若不经包埋处理,口服嗜酸乳杆菌后,它们的活力仍是会受到影响的;而如果将它们全部包埋,又无法发挥其在胃中的有益作用。因此我们首先选择由菌母直接繁育出的一代活菌,再将它们的一半应用双层包埋技术,不仅胃、肠同养,还保证了活菌在肠道中的活性。双包埋技术的优势还在于,外层的胶质在肠道内溶解后,内层的蛋白质还可帮助活菌定植在肠壁上,让它们代代繁殖,有效调节肠道微生态。根据卫生部公告2011年第25号,嗜酸乳杆菌是可用于婴幼儿食品的菌种。嗜酸乳杆菌的性状:冷冻干燥粉末,嗜酸乳杆菌活菌数:≥3.0×10cfu/g,水分:≤4.0%,如菌液,则水分80%。 六、嗜酸乳杆菌的增殖方式在营养丰富的MRS培养基巾,添加低聚糖对3株乳酸菌增殖的影响,如低聚异麦芽糖对嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、乳酸链球菌均有一定的增殖作用。低聚糖是由2~10个单糖单位通过糖苷键而连接的小聚合体,介于单体单糖与高度聚合的多糖之间。国外已有报道,低聚糖可以促进肠道双歧杆菌和乳酸菌的增殖,抑制大肠杆菌等的生长,还可以稳定肠道环境,提高肠黏膜免疫功能等。也有报道低聚果糖仅可提高粪便中微生物的数量,不能促进肠道中双歧杆菌的数量。通过本实验可以看出,低聚异麦芽糖和低糖均可一定程度的促进禽源嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌和乳酸链球菌的增殖。低聚糖作为双歧因子,不能被消化道和病原菌利用,仅能被益生菌利用,从而可使益生菌大量繁殖,作为益生菌的增殖因子,增强益生菌的竞争优势。本实验进行了不同营养条件下异麦芽低聚糖对3株乳酸菌体外增殖的观察。本实验结果显示,在营养贫瘠的培养基中,低聚糖可以明显的促进乳酸菌的增殖,这对于临床上人和动物机体的肠道恢复具有积极的意义。乳酸杆菌和双歧杆菌等肠道有益菌群的生长增殖需要较高的营养水平,而大肠杆菌等条件致病菌对于营养的要求相对较低,在肠道内繁殖时,获得其生长的营养要求较容易。正常健康的机体肠道环境下,有益菌群获得足够的营养,生长增殖比较旺盛,对有害菌群亦起到了一定的抑制作用;而当机体肠道紊乱,有害菌群大量增殖消耗营养,有益菌群此时营养条件不够,生长增殖受到影响,从而更加加剧了肠道环境的恶化。而此时服用低聚糖,可有效的发挥其对于乳酸杆菌的增殖作用,加之其不被有害菌群所利用的特性,决定了它可以特异的促进双歧杆菌、乳酸杆菌生长,从而达到调节肠道菌群平衡的效果。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!
  • 大肠杆菌大肠菌群测试片(ECC)
    大肠杆菌大肠菌群测试片(ECC)使用说明方法编号:50211原理及适用范围:大肠杆菌(Escherichia coli)和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群测试片(E.coli/ColiformCount Plate)是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。2操作方法2.1样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,制成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内,振摇后成为1:100的稀释液。2.2接种:一般食品选1~2个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片(BE203)置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下,每个稀释度接种两片。2.3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3结果判读:培养后大肠杆菌显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。选择有阳性菌落的最高稀释度的测试片进行计数,然后乘以稀释倍数即为样品中每毫升(克)含有大肠菌群数。4附加说明4.1我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群(Coliform)作为检测指标,而欧盟等许多国家则以大肠杆菌(E.coli)作为检测对象,因此,本产品对于出口食品和国际航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。4.2如果样品的酸碱度pH 7.0以下时,应先用灭过菌的碱性溶液(如1mol/LNaOH)调节到pH7.0-~8.0。4.3大肠杆菌大肠菌群测试片对纯菌的检测灵敏度可达0.15cfu/mL。4.4一般食品对于大肠菌群的要求都比较严格,如果测试片上有成片的红点,或者中央没有红点,但边缘有很多红点,一定是已经严重超标,建议按多不可计来报告。
  • 阪崎肠杆菌测试片
    阪崎肠杆菌的测试片检测方法方法编号:50451适用范围:可用于各类食品和原料中阪崎肠杆菌菌的检测以及突发事件应急需要。2方法原理:测试片是一种预先制备好的一次性培养基产品,由阪崎肠杆菌选择性培养基、吸水凝胶和特异性酶显色剂等组成,一步培养15~24小时就可确定出目标菌的存在。3操作方法3.1样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL灭菌生理盐水的取样罐或均质杯内,充分振摇或置均质器中制成1:10的样品匀液。3.2接种:将测试片置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置5 min使培养基凝固,最后用手轻轻地压一下。每个样品接种2片。3.3培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃,培养15~24h。3.4结果判别:对测试片进行观察,呈蓝绿色的菌落为阪崎肠杆菌。对于出现阳性菌落的样品,最好用其他方法作进一步的鉴定。4附加说明4.1阪崎肠杆菌纯菌株产生典型的蓝绿色点,接种一些肠道菌如大肠杆菌、肠炎沙门氏菌等时,一加样下去就会出现有紫色的点或晕状,此为产品本身显色剂的原因,不影响产品的使用和结果判读;而金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157和副溶血性弧菌等均被抑制。4.2本法还可应用于从业人员体检、中毒样品和物体表面的检测,用取样棉签涂抹被测物体表面,放入装有3mL灭菌生理盐水的试管中,摇晃10s,然后取1mL接种到测试片上。4.3注意使用过的测试片上带有活菌,需及时按照生物安全废弃物处理原则进行处理 。

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