荧光蛋白观察镜

来自德国卡尔斯鲁厄理工学院等处的研究人员发现了一种新的，来自珊瑚虫的荧光蛋白，这种荧光蛋白可以用于高分辨率显微镜下观察活细胞。这一研究成果公布在《自然—方法学》（Nature Methods）杂志上。 领导这一研究的是著名的蛋白质相互作用分析专家：Gerd Ulrich Nienhaus，这位科学家著有《Methods in Molecular Biology: Protein-Ligand Interactions》，详细分析了蛋白与配基相互作用研究中的方法分析。 荧光蛋白是由很多能产生五彩斑斓的海洋动物产生的，包括绿色荧光蛋白，黄色荧光蛋白，红色荧光蛋白，橙色荧光蛋白等，这些荧光蛋白有些来自水母，有些来自珊瑚，近年来分子生物学家门从中提取出了很多种荧光蛋白及它们的基因，并用基因工程建立了一系列具有不同发光特性的荧光蛋白。

绿色荧光蛋白GFP的应用绿色荧光蛋白GFP的应用主要集中在利用其荧光性质的基础上作为一种标记物。1 绿色荧光蛋白GFP在分子生物学上的应用1.1 绿色荧光蛋白GFP作为报告基因 报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的DNA，如传统的荧光素酶（LUX）基因和β-葡萄糖苷酶（GUS）基因。绿色荧光蛋白GFP作为基因报告可用来检测转基因效率，把绿色荧光蛋白GFP基因连接到目的基因的启动子之后，通过测定GFP的荧光强度就可以对该基因的表达水平进行检测。目前，此方法无论在农杆菌介导或基因枪介导的植物遗传转化中还是在活细胞、转基因胚胎和动物中都已得到非常广泛的应用，特别是在活细胞基因表达的时空成像方面。 1.2 绿色荧光蛋白GFP作为融合标签绿色荧光蛋白GFP最成功的一类应用就是把绿色荧光蛋白GFP作为标签融合到主体蛋白中来检测蛋白质分子的定位、迁移、构象变化以及分子间的相互作用，或者靶向标记某些细胞器。在多数情况下，绿色荧光蛋白GFP基因在N-或C-末端与异源基因用常规的分子生物学手段就可以接合构成编码融合蛋白的嵌合基因，其表达产物既保持了外源蛋白的生物活性，又表现出与天然GFP相似的荧光特性。GFP的这种特性为蛋白质提供了一种荧光标记，不仅可以检测蛋白质分子的定位、迁移，还可以研究蛋白质分子的相互作用以及蛋白质构象变化，并依靠荧光共振能量转移即FRET来进行检测。

绿色荧光蛋白(GFP)是一种在紫外光照射下发出绿色荧光的蛋白质。此应用说明 用CPL-300和J-1500分别获得了gfp的cpl和cd光谱。

绿色荧光蛋白（GFP）是一种在暴露于紫外线时发出绿色荧光的蛋白质，并且已被证明具有手性性质。本申请说明说明了分别用CPL-300和J-1500获得的GFP的CPL和CD光谱。关键词：J-1500，圆二色性，CPL-300，圆偏振发光，蛋白质结构，荧光，生物化学

对于药物研发早期先导化合物寻找和确认，配有发光蛋白检测应用的FLIPRTETR是简便且可信赖的高通量筛选系统。发光蛋白检测部件包含了增强型CCD (ICCD) 相机和悬浮细胞系统。ICCD相机的增益可调节功能使得高通量FLIPRTETRA系统既可以适应基于染料的明亮的荧光实验，也可以记录信号强度较弱的化学发光蛋白实验。本篇应用文章描述了贴壁CHO Mito-Photina./H3发光蛋白细胞在高通量FLIPRTETRA系统中的实验结果和表现。

差示扫描荧光法（DSF），也被称为thermal shift assay（TSA），是表征蛋白热稳定性的常用方法之一，广泛应用于蛋白配体互作表征，突变体、缓冲液、去垢剂筛选等领域。DSF可以通过荧光染料或蛋白内源荧光信号监测升温过程中蛋白构象的变化计算其熔解温度Tm（折叠蛋白与去折叠蛋白相等时的温度）。

所有光合生物都必须要应对过量光照来避免光合氧化胁迫。对于植物和绿藻来说，高光的最快响应机制就是非光化学淬灭（NPQ）。这一过程允许将过量能量以热量形式安全地耗散掉。PsbS蛋白是这一过程中的重要传感器。为了确定PsbS蛋白在莱茵衣藻Chlamydomonas reinhardtii的NPQ和光保护中的作用，艾克斯－马赛大学Tibiletti T等培养了可以表达藻类或拟南芥psbS基因的叶绿体转基因株。通过FluorCam开放式叶绿素荧光成像系统进行的NPQ成像分析最终表明，两种PsbS蛋白都可以增强莱茵衣藻野生型和npq4突变株的NPQ，但没有观察到明确的光保护活性。

随着荧光蛋白的使用增加，荧光成像技术已经成为一个重要的应用。此外，电子显微镜能够提供高分辨率的观察， 透射电子显微镜（TEM）能够观察薄片样品的结构，而扫描电镜（SEM）常用来观察样本表面的形貌。多年来，植物科学和扫描电镜一直是密切相关的。这篇博客将会告诉你如何使用扫描电镜，以及它的优势和面临的挑战。需要注意的是，相比工业制造中的应用，扫描电镜不仅可以用于研究解剖学和生理学，还可以分析植物成分，如纤维。

一般制备淀粉样蛋白的透射电镜标本时。常会发生含碳铜网不能均匀和完全地吸附样本溶液的情况，使标本上出现斑块盲视野区和无样本区。染色达不到预期的效果，电镜下观察淀粉样蛋白超微结构质量较低。为此，本研究提出了一种扣滴延时染色法，即：采用样本溶液扣滴，延长样本与含碳铜网接触时间和延长醋酸双氧铀染色时间的方法，并通过实验证明了这种新方法的有效性。

在早期的研究中，研究者们的焦点集中在细胞器上，其中线粒体和内质网被研究得非常透彻。脑组织的细胞结构也开始使用透射电子显微镜（TEM）来观察。在使用透射电子显微镜（TEM）来进行研究期间，扫描电子显微镜（SEM）才刚刚开始成为观察样品表面形貌的工具，直到20世纪60年代和70年代才被正式运用 [1]。这篇博客提供了一些最近在细胞生物学应用研究中涉及到扫描电镜（SEM）的案例。

关于皮肤的发光，最被人们熟知的是由于使用某些含有荧光剂的化妆品而造成的荧光，其实我们的真皮层中的一些物质，本身就可以发出荧光。为什么正常皮肤会发出荧光呢？这是因为胶原蛋白的存在，胶原蛋白是皮肤组织中的结构性蛋白，其数量和健康关系到外表皱纹的生成与皮肤的老化现象，由于胶原蛋白具有自体荧光，根据胶原蛋白的种类或交联状态的不同，真皮层荧光光谱或强度会发生变化[1]，因此可以根据皮肤的荧光光谱来检验胶原蛋白含量及结构，此检测法更具实时性与非侵入性，目前，市面上一些胶原蛋白产品也用这种方法来判断产品对于改变皮肤状态的功效。

本应用说明描述了盐酸胍（GuHCl）对α-乳凝蛋白变性的荧光各向异性测量的变化关键词：J-1500、圆二色性、CDF-426、荧光、各向异性、α-乳白蛋白、GuHCl、二级结构、变性、生物化学

摘　要: 采用自行设计、组装的毛细管电泳光导纤维发光二极管诱导荧光检测装置, 建立了一种直接测定免疫球蛋白G( IgG)的方法。以蓝色发光二极管(LED)为荧光检测器的激发光源, 荧光素异硫氰酸酯( F ITC)为柱前衍生试剂, 采用毛细管区带电泳, 以20mmol/L 硼砂缓冲溶液(pH 912)为背景电解液进行分离检测。通过对衍生反应条件和电泳分离条件进行优化, 确定了最佳实验条件, 在该条件下, IgG的线性范围为415 ×10 - 8～112 ×10 - 6 g/L, 检出限为210 ×10 - 8 g/L。该方法简单、高效、选择性好, 无需前处理, 可用于人血清中IgG含量的测定。关键词: 免疫球蛋白G 毛细管电泳 发光二极管 荧光检测

内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），通过检测温度变化/变性剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光（350 nm/330 nm比值）的改变，获得蛋白的热稳定性(Tm值)、化学稳定性（Cm值）等参数。相比传统的方法，无需添加染料，通量高，样品用量少，数据精度高。

“总蛋白归一化”或TPN变得越来越流行，可以避免依赖看家蛋白进行归一化的许多缺点。不易受样品之间蛋白变化的影响，不是观察一种蛋白的强度，而是每条泳道的总灰度值。由于TPN技术消除了许多与信号归一化相关问题，因此发表文章越来越多地要求使用总蛋白信号进行归一化。

明慧三色荧光模块附件助力徕卡DM500生物显微镜升级三色LED荧光观察，转盘切换4孔位荧光通道，联动LED照明激发，样品处理只需几个简单步骤，随后即可进行荧光显微镜检测，搭配荧光相机，可保留荧光图片。配套数显屏显设计，实现定量实验的要求，对于亮度调节变得更加可控。采用大口径通道，激发光更均匀，视野更光宽，成像更清晰。

本文详细向您介绍如何使用日立荧光分光光度计F-7100分析检测皮肤中的胶原蛋白含量。通过测量不同生物样品（包括：三文鱼皮，男性皮肤和女性皮肤），利用三维立体的激发发射光谱，可以清晰辨别出各生物样品种类，并检测其中的胶原蛋白含量。F-7100拥有全球最快扫描、驱动速度和最高灵敏度，三维光谱分析更加方便、快捷，提供追踪监控化学反应过程。超高信噪比的优异功能，可以检测出低至1*10-12mol/L的荧光素，同时，更有利于痕量样品的测量。实验中，搭配主机使用的光纤附件使得样品种类与形状更具灵活性，将光源能量导出并无损伤直接检测肌肤变成可能。

多金属氧酸盐(polyoxometallates,POMs)由于结构的多样性以及其在分子尺寸、表面电荷分布、氧化还原电位、极性、酸性、溶解性及热稳定性等方面高度可调的分子特性，在材料，磁学，催化，尤其是医药科学等领域都有着广泛而重要的应用。肿瘤一直是威胁人类健康的一大顽疾。研究表明，组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylaseinhibitors，HDACi)可以通过改变组蛋白或转录因子的乙酰化状态诱导肿瘤细胞生长、分化或凋亡，具有明显的抗肿瘤活性。本论文首次将多酸类药物用于HDACi的筛选，从近400种POMs化合物中筛选出了五类13种与已知HDACi具有相同作用效果的多金属氧酸盐化合物。这五类POMs化合物分别是：1.夹心型钨锗酸盐化合物PA-304 PA-312 PA-313 PA-315 PA-317；2.三有机锡取代的钨锗酸盐化合物PA-320；3.过渡金属连接二钛取代的Keggin型钨磷酸盐形成的化合物PA-324 PA-331 PA-332PA-330；4.临床有机药物与Anderson型多阴离子形成的超分子化合物PA-301 PA-303；5.含Ti的三聚杂多钨锗酸盐化合物PA-334。实验中以PA-320为代表化合物，对其抗肿瘤活性做了初步的验证。绿色荧光蛋白质粒报告基因的荧光照片显示PA-320可以诱导绿色荧光蛋白发光增强，且发光的强度要强于已知临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA的作用效果。直观的说明PA-320可以刺激p21基因表达增加。逆转录PCR(RT-PCR)和DNA电泳的结果证实，不同浓度的PA-320处理的细胞，其细胞中p21基因的表达量与用临床组蛋白去乙酰化酶抑制剂BUA处理细胞后的作用效果相同。说明PA-320有和临床HDACi相同的作用功效，可以刺激p21基因的表达增加。据文献报道HDAC1对p21WAF1/CIP1基因的抑制作用最为显著。PA-320对瞬时转染的HDAC1-7的实验结果证实，在转染了HDAC1的同时加入一定浓度PA-320刺激后，p21WAF1/CIP1基因启动子报告基因的活性明显增强，HDAC1的活性明显受到抑制。瞬时转染HDAC实验证明多金属氧酸盐化合物PA-320可以很好的抑制HDAC的活性。MTT实验结果证实PA-320对Hela细胞，LNCaP细胞，293T细胞，SW620细胞四种癌细胞均有抑制作用。实验测得对四种癌细胞的IC50值分别为38.8679μg/ml，45.1477μg/ml，44.4783μg/ml和9.2771μg/ml。说明PA-320可以在相对较低的浓度下(100μg/ml)，PA-320的抑制浓度也是比较低的。说明PA-320对肿瘤细胞有很好的抑制效果。

EMT即上皮间质转化，在此过程中，上皮细胞的极性丧失，迁移和运动能力增强，同时上皮表型丢失而逐渐获得间质表型。伴随表型变化，许多基因的表达发生了改变，上皮表型相关蛋白，如角蛋白、E-钙粘蛋白、紧密连接蛋白-1、闭锁小带蛋白等含量下降，间质表型相关蛋白，如波形蛋白、N-钙粘蛋白、α -平滑肌肌动蛋白、纤维连接蛋白等含量上升，同时一系列转录因子的表达也发生了变化。蛋白表达量的变化多通过Western Blot和免疫荧光及免疫组化的方式来检测，其中Western Blot可以使用组织和细胞实现蛋白的定性和半定量，免疫荧光可以使用细胞爬片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，免疫组化可以使用组织切片检测细胞中蛋白的定位以及定性分析，针对不同的样品类型，可以采用不同方式来检测EMT导致的蛋白表达变化。

开发适用于临床样本测定的外泌体单颗粒分析新方法，是目前该外泌体单颗粒研究领域的热点之一。张教授团队开发出一种新的外泌体单颗粒多蛋白数字化分析方法（digital profiling of proteins on individual exosomes，DPPIE），成功实现了对癌症患者血浆样本中外泌体单颗粒表面蛋白CD63/EpCAM/MUC1的原位荧光信号放大检测。

支原体主要黏附在细胞膜上生存，没有细胞壁，通常呈圆形或椭圆形，一般呈末端尖锐、表面有许多小突起的形态特征，可以使用相差显微镜或者荧光显微镜观察检测支原体，有助于诊断和治疗支原体引起的疾病。（注意事项：支原体与细胞破碎后溢出的细胞内容物如线粒体等颇相似，应细加区别。）

随着国内公路及城市建设的的飞速发展，沥青的需求量增大，质量要求也越来越高，因此相关部门对沥青产品做了很多改进，改性沥青的显微结构与其宏观性能的联系非常紧密，广州明慧研究型正置荧光显微镜助力广东省某道路检测机构的改性沥青研究工作，利用荧光显微镜技术可以清晰地描述沥青的微观形态，该系统由三目荧光显微镜NE910-FL、600万高清荧光显微镜CCD相机MHC600和计算机组成，清晰观察改性料在沥青中真实的分布及其形态结构，搭配显微数字成像系统进行拍摄记录。

血液黏度是表示血液总体(包括血细胞和血浆)流动性的指标,血液黏度异常与临床许多疾病的发生、发展密切相关,为疾病的病因机制探讨、治疗、预后判断、疗效观察等方面提供了十分重要的信息,血红蛋白含量的变化可间接反映血黏度的高低。安东帕开发、生产和销售高精度的实验室仪器和过程测量系统，并提供用户定制的自动化解决方案。安东帕是密度、浓度和 CO2 、黏度以及流变测量领域的全球领导者。

探究使用水浴恒温振荡器进行蛋白结晶的最佳条件，以获得高质量的蛋白晶体。

apo-A1 简介载脂蛋白A1是一种蛋白质，由APOA1基因编码。作为高密度脂蛋白颗粒的主要成分，它在脂质代谢中具有特殊作用。APOA1基因位于第11条染色体上，具体位置为11q23-q24，该基因包含4个外显子。APOA1编码一个28.1kDa的蛋白质，由243个氨基酸组成；通过质谱数据观察到21个肽。载脂蛋白A1是血浆中高密度脂蛋白颗粒的主要蛋白成分。从肠道细胞分泌的乳糜微粒也含有载脂蛋白A1，但它在血液中迅速转移到高密度脂蛋白。该蛋白作为高密度脂蛋白颗粒的一个组成部分，通过接受细胞内的脂肪（包括动脉壁内的巨噬细胞，这些巨噬细胞已被氧化的低密度脂蛋白颗粒摄入的脂肪超载），使脂肪分子外流到其他地方，包括回到低密度脂蛋白颗粒或到肝脏排泄出来。它是卵磷脂胆固醇转移酶（LCAT）的辅助因子，该酶负责大多数血浆胆固醇酯的形成。载脂蛋白A1还被分离为前列环素（PGI2）稳定因子，因此可能有抗凝血作用。它经常被用作预测心血管疾病的生物标志物。

FluorCam多光谱荧光成像系统是目前唯一有能力实现了一台仪器上同时完成叶绿素荧光、多光谱荧光、NDVI归一化植被指数以及GFP、YFP、BFP、RFP、CFP、DAPI等荧光蛋白与荧光染料的成像分析功能，加装热成像模块后还可以进行热成像分析。这些功能使得FluorCam多光谱荧光成像系统就成为了一套功能非常全面的植物病害表型研究系统。

称重：根据培养基配方的比例，将牛肉提取物，蛋白胨和NaCl准确称入烧杯中。牛肉酱通常用玻璃棒挑出，在小烧杯或观察杯中称重，溶于热水，然后倒入烧杯中。也可以将其放在称量纸上，称量后直接放入水中。此时，如果将其稍加加热，牛肉糊将与称量纸分离，然后立即将纸页移开。蛋白胨吸湿性强，称重时移动迅速。另外，在混合药物时，应严格防止药物混合。羊角面包用于一种药物，或在服用一种药物后，将其洗涤并干燥，然后称重另一种药物。不要在瓶子上盖错盖子。

摘　要: 制备了大豆蛋白凝胶与戊二醛交联大豆蛋白凝胶,研究了凝胶的溶胀性及其影响因素,以质构仪、扫描电镜对凝胶的质构和断面微观结构进行了表征,结果表明:大豆蛋白浓度为13 % ,其凝胶溶胀率为15. 00 g/ g 当大豆蛋白浓度为12% ,25 %戊二醛用量为50μL ,交联大豆蛋白凝胶溶胀率为25. 1 g/ g , 氯化钠浓度和水的温度对交联大豆蛋白凝胶的溶胀率有影响,氯化钠浓度从0 升至0. 1 M ,交联凝胶溶胀率从25. 1 减小为5. 34 g/ g 水的温度从20 升至60 ℃,凝胶的溶胀率从21.81 增至49. 12 g/ g 质构分析和扫描电镜结果显示,戊二醛交联凝胶比大豆蛋白凝胶具有更高的硬度、弹性、内聚性、破裂强度和更有序的微观结构。关键词: 交联 戊二醛 大豆蛋白 凝胶 溶胀

苦荞茶是以苦荞麦为原料，经前处理、脱壳、干燥等工序加工而成的一种饮品。苦荞中含有淀粉、蛋白质和膳食纤维，也很有丰富的油酸和亚油酸，而亚油酸是人体最重要的脂肪酸，体内不能合成。蛋白质中有18种氨基酸，特别含有一般植物如小麦、稻米所缺少的赖氨酸，富含精氨酸和组氨酸，并且苦荞蛋白有近三分之一为清理蛋白，可清理体内毒素和异物，还含有多种微量元素如硒、碘、镉和多种维生素。平时可适当饮用苦荞茶。

98%。QPix400 系列的荧光成像模块可以显著减少下游的工作量，因为通过对荧光蛋白表达的定量，实现了有目的性筛选，确保只挑感兴趣的克隆。QPix 已成为市场上微生物克隆筛选系统的领导者，它可以提供多组荧光滤光片，兼容大多数的荧光克隆载体。基于荧光的重组克隆筛选方法使重组基因表达的筛选更加容易，提供了一个更加准确的筛选方法。