自动防结冰系统

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自动防结冰系统相关的厂商

  • 广州市雷亚自动化系统有限公司成立于二零零三年,公司现有三大核心业务部门:流体输送事业部、皮带自动化输送事业部、工程项目事业部,天津、上海设有分公司。 经过十余年的发展,雷亚在流体输送、自动化输送系统、工艺设备系统控制设计、系统集成、施工方面积累了丰富的经验,历练了具有丰富实战经验的专业技术团队;由创业之初的工业自动化系统设计、系统集成、国际知名工业品牌产品代理, 逐步发展成为致力于给工业客户提供专业的工艺设备系统优化解决方案,与客户共同进行专业设备的研发改造、设备安装施工、总包交钥匙,客户整厂设备的维修、保养承包等工业服务公司。 雷亚团队一直秉持着专心、专注、专业的经营理念,以能给客户带来更好的行业解决方案为目标,不断努力前行,希望与客户共创美好!
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  • 深圳市青天自动化系统工程有限公司专注于电气化、自动化和数字化系统工程领域。是一家工业测量领域的仪器仪表服务商,提供工业测量领域、过程控制仪表服务与解决方案的自动化设备供应商。公司集研发、工程设计、设备制造、安装工程、维修维护一体化服务,并以节能技术咨询、能源审计、节能评估、节能项目成本、节能技改、合同能源管理,致力于可信的系统工程技术咨询、持续创新提供高品质服务。从经济效益、安全与环境影响方面出发,我们提供流量、物位、压力、温度冷量热量、数据采集与通讯、流程优化的过程自动化解决方案,并涉及各种行业,包括水利水电、石油化工、自来水行业、洁净工厂、城市热力热电行业、计量科研单位、楼宇节能等过程冷热量、流量计量领域,为顾客提供能创造更高价值的解决方案和设备配套。同时,我们具有训练有素的商务团队,建立了强大的全球订货和供货能力,您的订货工作将成为愉快的过程,体谅客户的需求,特殊状况下我们不计成本的物流创造了一个又一个货期奇迹,很多客户和我们建立了密切的合作伙伴关系。我们开发设计、生产销售、进出口以及测试和检修以下仪表、装置和系统:(1) 仪器仪表:电磁流量计、空调能量表、空调电磁冷热量表、空调能量计、涡轮流量计、涡街流量计、旋进旋涡流量计、热式气体流量计、压缩空气流量计、电磁水表、超声波流量计,超声波冷热能量表、空调计费热冷量表、液位计和雷达物位计等自动化计量产品。(2) 楼宇自动化系统:空调能耗计费系统、集中抄表系统、建筑能源管理、智慧供热管理、空调管理仪表盘、制冷控制系统、HVAC、传感器、电梯控制系统;(3) 污水厂自来水厂用的仪表:如电磁水表、流量计、ph、cod分析仪、电导仪等。(4) 工业自动化工程:混合控制系统、传感器、现场仪表、调节阀、过程分析仪、空调控制装置和系统、与环境有关的水、油和空气净化处理仪表、装置和系统。承接水厂、污水厂的自动化工程项目,为水厂提高安全卫生的饮水提供完善测量方案。提供各种公用设备的节能方案及改造工程;(5) 电气、通讯和精密仪表、装置和系统、控制、检测仪表、装置和系统,光学仪表、装置和系统;计算机软件的开发、销售和信息提供服务;(6) 控制元器件:离散和混合自动化、智能调节器、纪录仪、光电开关、接近开关、限位开关、按钮开关、燃烧安全控制器、系统相关设备,供电、供热事业水表、温水表及相关设备;电气仪表、医用电子仪表和医用机械设备;公司拥有众多国际驰名品牌仪表、阀门等产品的区域合作商,提供产品配套和服务:青天仪表QTLD/SZQT-CQ、江森、德国真兰、科隆、丹麦卡姆鲁普、德国西门子、ABB、GE、霍尼韦尔、丹佛斯、弗莱克森、E+H、GENTOS等品牌产品。为此,我们将持续提升短期和长期的服务价值,继续在测量系统、工业、商业楼宇和住宅市场中成为值得信赖的星级合作伙伴。
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  • 江苏戎信自动化系统有限公司是无人值守地磅称重厂家,全国直达。集研发、工程、销售、技术服务于一体。戎信称重产品包含:戎信电子地磅厂家,戎信无人值守地磅厂家、地磅称重软件厂家、自动过磅称重厂家、超限超载检测站治超系统厂家戎信、戎信大型停车场停车收费管理系统、企业停车管理系统、小区停车管理系统、高速收费站ETC管理系统,车载移动称重系统等成套设备系统的研发运维凭借专业的技术与商务团队,为广大新老客户带来更优质卓越的产品。 10年以上的诚信经营及行业耕耘积累带给江苏戎信自动化系统巨大的能量,在国内我们与多家知名企业建立了良好长期的项目合作关系。如杭州环境集团,新疆库尔勒金川煤矿,河北十百户超限超载检测站,苏州三星显示器,大理挖色垃圾站等等。经营理念:江苏戎信自动化系统有限公司有完善的质量保证体系,通过了所有合作伙伴的高标准质检及认可。为开拓市场,实现互惠互利,我们将本着“价格,质量”双优,“诚信,服务”共赢的经营理念,竭诚为广大客户服务。我们公司以“匠心精神,匠心产品,匠心服务”的态度为原则,竭诚为国内外用户提供优质的产品及诚信的服务。
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自动防结冰系统相关的仪器

  • IceFree自动防结冰系统 400-860-5168转1432
    仪器简介:IceFree系统是固定的自动的抗结冰喷洒系统,专用于高速公路/道路路面。该系统采用固定自动喷洒技术 (FAST),连续监测道路、桥梁或建筑物状况,通过检测几个关键环境参数的阈值,结冰前,自动点火,喷洒一种化学溶液。系统将连续监测状况,如果由于暴雪,抗结冰化学物质被稀释、失去作用时,将重新反复喷洒抗结冰溶液。 IceFree系统的核心是METEODATA-3000C自动气象站,结合专用道路状况传感器,如温度、水或冰情况、盐浓度,及一些气象传感器连续测量环境参数,如温度、相对湿度、露点、风速风向、天气状况(能见度和降水:下雨、下雪等) 、太阳辐射和土壤热通量等。 当AWS检测到道路有结冰风险时,将发出一个命令,被传递给水压系统,产生喷洒。因此,该系统为典型的路面气象信息系统(RWIS)。系统组成: IceFree系统由以下三部分组成: 路面气象信息系统(RWIS) 固定自动喷洒技术(FAST)子系统服务器 水压系统
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  • 凝冰监测传感器IDS-20,有立方体形和棒状两种探测器,用于可靠精确的凝冰探测,适用于航空、风力发电厂、高压电线、电缆汽车、天线、架空电 线,街道,建筑等。为使用者提供冻雨防治,凝冰预警等多种功能服务。测量原理创新的冰传感器利用不同频率的空气、水和冰的不同物理特性。通过测量传感器周围介质的复杂阻抗,IDS-20能够区分水和冰,从而识别冰的形成。增加了数据质量自我检查冰的形成和增加取决于特定的气候条件,这些条件是由冰所附着的气温、湿度和表面温度决定的。 现在,IDC-20的独特和非常有价值的特点是它额外地考虑了气象数据,以便进行合理的检查:系统与冰传感器平行,测量空气温度和湿度,计算露点和霜点。然后,传感器系统将这些数据与测量的冰值一起进行合理性检查。因此,有可能在质量上增加测量的可靠性,提高冰的检测结果。特性及优势9 结冰及冻雨监测9 冰水混合态分析分辨9 结冰探测: 0.01 mm to 80 mm冰层厚度探测9 不同应用选用不同版本传感器,方形探测器及棒形探测器9 可靠的观测结果9 适用于现有或新系统安装9 不需要维护,低成本9 参数实测: 结冰 冻雨 露点,霜点空气温度和湿度9 分析:结冰次数和持续时间 IDS传感器,冰层测量传感器类型cube sensor 5cube sensor 1rod sensor 80 冰 层厚度测量范围0.1 ... 5 mm0.01 ... 1 mm1 ... 80 mm重量0.7 kg0.7 kg2.3 kg长度560 mm560 mm580 mm IDS传感器,气象测量露点-20 ... +20 °C冰点-20 ... +20 °C空气温度-40 ... +60 °C空气湿度0 ... 100 %重量0,715 kgs尺寸 (mm)310 x 120 x 165 (H x W x D) IDS控制器重量3.6 kg尺寸 (mm)318 x 208 x 132 (L x W x D)防水IP 66操作温度范围-40 ... 60 °C电源冰层探测器:10 ... 28 VDC | heating: 24 V AC/DC功率主动测量: 50 mA at 12 VDC | heating: max. 7 A at 24 V AC/直流输出Icing: SDI-12 RS 485 (Modbus)three relay-outputs: rain, ice, failure其他综合防雷 集成过压保护
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  • 结冰探测创新之处 凝冰监测传感器IDS-20,有立方体形和棒状两种探测器,用于可靠精确的凝冰探测,适用于航空、风力发电厂、高压电线、电缆汽车、天线、架空电 线,街道,建筑等。为使用者提供冻雨防治,凝冰预警等多种功能服务。测量原理创新的冰传感器利用不同频率的空气、水和冰的不同物理特性。通过测量传感器周围介质的复杂阻抗,IDS-20能够区分水和冰,从而识别冰的形成。增加了数据质量自我检查冰的形成和增加取决于特定的气候条件,这些条件是由冰所附着的气温、湿度和表面温度决定的。 现在,IDC-20的独特和非常有价值的特点是它额外地考虑了气象数据,以便进行合理的检查:系统与冰传感器平行,测量空气温度和湿度,计算露点和霜点。然后,传感器系统将这些数据与测量的冰值一起进行合理性检查。因此,有可能在质量上增加测量的可靠性,提高冰的检测结果。特性及优势9 结冰及冻雨监测9 冰水混合态分析分辨9 结冰探测: 0.01 mm to 80 mm冰层厚度探测9 不同应用选用不同版本传感器,方形探测器及棒形探测器9 可靠的观测结果9 适用于现有或新系统安装9 不需要维护,低成本9 参数实测: 结冰 冻雨 露点,霜点空气温度和湿度9 分析:结冰次数和持续时间 IDS传感器,冰层测量传感器类型cube sensor 5cube sensor 1rod sensor 80 冰 层厚度测量范围0.1 ... 5 mm0.01 ... 1 mm1 ... 80 mm重量0.7 kg0.7 kg2.3 kg长度560 mm560 mm580 mm IDS传感器,气象测量露点-20 ... +20 °C冰点-20 ... +20 °C空气温度-40 ... +60 °C空气湿度0 ... 100 %重量0,715 kgs尺寸 (mm)310 x 120 x 165 (H x W x D) IDS控制器重量3.6 kg尺寸 (mm)318 x 208 x 132 (L x W x D)防水IP 66操作温度范围-40 ... 60 °C电源冰层探测器:10 ... 28 VDC | heating: 24 V AC/DC功率主动测量: 50 mA at 12 VDC | heating: max. 7 A at 24 V AC/直流输出Icing: SDI-12 RS 485 (Modbus)three relay-outputs: rain, ice, failure其他综合防雷 集成过压保护
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自动防结冰系统相关的资讯

  • 隆力德公司 水质自动监测系统集成的技术优势
    隆力德公司 水质自动监测系统集成的技术优势一、取水单元1.具有丰富的采水建设经验,能根据现场需要提供多种形式的采样设施。如栈桥,浮船,全水下式采水等;2.采用双泵双管路设计,一用一备,主管路故障时,备用管路自动切换,并发出报警通知技术人员来检查维护。备用管路自动定期自动维护,防止长期不使用出现故障;3.为避免采水管路脏污的影响,所有阀门采用大扭矩不锈钢机芯,不受沙粒等影响;4.具有采水点水位自动探测功能,水位过低无法采水时,自动保护采水管路防止水泵等设备干转,防止设备损坏;原理:电缆浮球开关是利用微动开关或水银开关做接点零件,当电缆浮球以重锤为原点上扬一定角度时(通常微动开关上扬角度为28度± 2度,水银开关上扬角度为10度± 2度),开关便会有ON或OFF信号输出。5.具有灵活的适应性,可根据实际情况选用自吸泵或潜水泵取水,选用自吸泵时具有自动补水功能,不需要人工为水泵补水;6.压力检测。采水过程中实时监测管路压力,防止管路压力过高造成管路损坏,和爆管危险;7.漏水检测功能。实时检测室内采样单元是否存在漏水现象,漏水严重时自动切断系统电源,确保用电安全。二、预处理单元1.水样进入五参数测试池之前没有任何过滤和拦截,最大限度保持水样完整性,不影响五参数测试;2.采用三级过滤方式完成水样预处理。前两级为粗滤,均采用大面积滤板,透过率高,清洗彻底;第三级为精滤,采用滤芯状膜式过滤,可以同时安装两种不同精度的滤芯,给不同过滤要求的仪器使用。该滤芯具有:过滤精度控制准确,耐腐蚀性好,透过率高,阻力小,结构坚实可高压反清洗,不需人工维护等优点。第三级滤芯内部结构如下图所示:3.超声波辅助。采用超声波对水样预处理,在取水后沉淀过程中利用了超声波的空化效应原理,将悬浮物、沙粒上附着的COD、总磷等成分剥离出来,粉碎成细小微粒或可溶成分,使水样中的这些污染物质不受多级过滤影响;同时超声波还具有清洗作用,可加速沉淀过程,防止脏污物在池壁、五参数传感器上附着,极大减小人工维护频率。超声波换能器工作前五参数已经数据采集完毕,不会因为超声波开启导致浊度、溶解氧等产生测试偏差。换能器选择40KHz高频,在人耳分辨范围之外,不产生噪声污染。由于超声波换能器功率和开启间隔设置得当,并不会造成水样本身温升,不影响后测量。 三、配水单元针对配水单元水样传输时容易产生误差的特点,我司设计采用蠕动泵作为配水动力源,相对自吸泵、增压泵、隔膜泵等具有如下优点:1.泵腔体积小无不残留;2..泵管化学稳定性好,不与水样发生化学反应;3.泵管不含重金属成分,不影响重金属测试;4.与水样接触面积小,不会产生累积污染;5.可以长时间干转,而无任何损坏。 四、清洗单元1.我司系统集成的清洗功能采用全清洗模式&mdash &mdash 任何走水样的管路、容器和部件全部进行反向清洗。采用高压水气混合清洗,更加彻底;2.清洗部分包括:采样管路,五参数桶,过滤设备,配水设备,配水管路,水样杯等。不留任何死角有效地防止累积误差;3.清洗时开启超声波功能,能够达到更良好的清洗效果;4.每次采水周期前后对系统进行清洗,清洗完成后对室外管路进行高压空气吹空,防止结冰和细菌繁殖。五、除藻单元除藻单元可根据客户需要选配不同的方式:包括除藻剂浸泡除藻和臭氧水除藻。除藻部分包括:采样管路,五参数桶,过滤设备,配水设备,配水管路,水样杯等全部水样有经过的部分。除藻剂浸泡除藻和臭氧水除藻各有优势。除藻剂浸泡除藻比较彻底,但对水体会产生较轻微污染。臭氧除藻相对效果稍差,但不会对监测水质造成影响。六、控制单元和数据传输单元1.以PLC为控制核心,完成设备控制,稳定可靠;2.以组态王为平台,构建人机界面,仪器扩展和软件修改更加容易;3.以高端服务器代替传统工控机长时间运行,稳定性更佳;4.独立式键盘,鼠标,设计操作更方便;5.完善的报警系统,系统故障可以精确到零件级,故障诊断直观快速;6.全面的数据采集系统。采集数据除了监测数据外,还有仪器状态,校正参数,系统状态,系统报警信息等。为分析数据有效性提供了良好的有效依据。七、采样器控制将采样器采样功能(ISCO 4700型采样器)与系统完美整合工作,可以实现:1.单个参数超标自动采样;2.全部参数超标自动采样;3.选定多个参数超标自动采样。通过多个参数联动,判断水质参数超标是否为污染事故更为准确有效;4.远程人工控制采样;5.定时采样。八、数据传输和反控1.多种数据方式可选(有线、无线等);2.子站按需在线,无数据传输时自动下线,网络流量消耗小,安全性好,不会因为长时间在线遭到网络攻击或病毒入侵;3.中心站通过我司独有的方式唤醒子站上线接收反控,子站将受控信息反馈给中心站(专门开发的无线路由器),通过这种环环相扣的执行方式,保证数据传输和反控信息通畅通无阻;4.反控灵活多样,包括:周期启动,采样器启动,采水管路清洗,系统清洗,系统采样,自动除藻,单台分析仪器启动等。综合以上我司提供给客户的是一套完整的,先进的,可靠的和可扩展水质自动监测系统平台产品。该产品能够更有效,更智能化,更现代化的完成繁重的在线监测任务,极大减小人工维护量。真正满足全自动化、智能化在线监测的要求。
  • 应用 | 一种具有防冰性能的超疏水表面的制备与研究
    研究背景凛冬将至,寒潮来袭,结冰是造成许多安全事故的重要原因。飞机防冰/除冰技术一直是航空工业的一个重要研究领域。飞机积冰主要发生在平尾、垂尾和发动机真空罩等外露表面,已成为威胁飞行安全和稳定性的严重问题。研究表明,飞机表面结冰主要是由于大量过冷水滴聚集和冻结造成的,特别是当飞机穿越过冷云层时。本文报告了通过光刻结合化学刻蚀方法制备了稳定的纳米片-微坑结构的超疏水表面,表面的防冰性和超疏水性均优于单一结构表面,且超疏水等级结构表面具有较高的非润湿性,接触角高达173°,滚动角低至4.5°,具有优异的超疏水性能和抗结冰性能,为航空工业的应用提供了一个理想的平台。实验仪器润湿性实验,使用KRÜ SS DSA100接触角分析仪。在样品表面滴落4 μl液滴测试接触角和滚动角。重复3次,计算平均值来保证接触角的准确性。为了进一步检验低温润湿性,在-18℃条件下放置样品和去离子水,直到去离子水变成过冷。然后,我们尝试通过在不同样品的表面喷洒过冷的水滴来模拟冻雨的条件。使用高速的相机拍摄,快速比较这些样品的不同润湿性。KRÜ SS DSA100接触角分析仪TC40温控腔箱:温控范围-30℃到160°C结论与讨论表面形貌在本节中,我们通过三种不同的处理方法构建了三个超疏水结构表面,目的是分析和研究表面形貌、润湿性和抗冰性能之间的相关性。此外,我们还制备了一个光滑的疏水铝表面作为标准对照,并与三种超疏水表面的抗冰性能进行了比较。三种结构形态的FESEM图像如图1所示。四种类型的表面处理如下:使用FAS-17改性的铝衬底表面(样品1),带有微坑结构FAS-17改性的铝衬底表面(样品2),带有纳米片FAS-17改性的铝衬底表面(样品3),具有分层结构(微坑规则阵列和纳米片)FAS-17改性的铝衬底表面(样品4)。 图1. 通过三种不同的处理获得的分层形态的扫描电镜图像:(a)微坑结构表面(样品2);(b)纳米片结构表面(样品3);(c)微/纳米分层结构表面(样品4)。常温和低温下的润湿性测试如图2所示,通过比较相同样品FAS-17修饰前后的接触角,改性后样品疏水性大幅提高。在光滑的衬底表面(样品1),通过降低表面自由能,液滴接触角可以增加到大约120°。这也证明了通过引入规则排列的CF3基团可以建立超疏水表面,此时表面能最低,为6.7 mJ/m2。样品3和样品4具有良好的超疏水性,使得水滴很容易从这些表面滚落,这可以用Cassie-Baxter模型来详细解释,说明表面的微观结构在提高超疏水性方面起着关键作用。超疏水纳米分层结构表面(样品4)具有较高的非润湿性,接触角高达约173°,滚动角仅仅为4.5°。与其他单结构表面相比,纳米片-微坑分层结构表面的超疏水性优于任何单结构表面,微尺度和纳米尺度结构的结合明显地捕获了更多的空气,导致在液滴下存在一个由无数空气袋构成的密封空气层。 图2. FAS-17改性前后4种表面结果的接触角和滚动角考虑到飞机的实际使用条件,将过冷水滴喷洒在低温下的测试超疏水性和防冰性能,结果表明,样品3和样品4可以防止过冷水滴的积累,表现出良好的超疏水性。相反,喷在样品1和样品2上的过冷水滴则表现出一定程度的亲水性。显然,研究结果证明,具有微/纳米结构的超疏水表面有效地排斥了被喷洒的冷冻水。结论综上所述,我们结合光刻工艺和化学蚀刻方法,巧妙地设计和制备了一种具有抗冰性能的超疏水分层结构表面。超疏水表面比其他单结构表面具有更强的非润湿性,并且具有优异的防冰性能,防止了过冷水滴的积累。因此,具有微/纳米结构的超疏水表面在航空工业中更具有作为飞机防冰材料的潜力。本文有删减,详细请参考原文。G.Wang, Y. Shen, J. Tao, X. Luo, L. Zhang and Y. Xia, Fabrication of a superhydrophobic surface with a hierarchical nanoflake–micropit structure and its anti-icing properties, RSC Adv., 2017, 7, 9981DOI: 10.1039/C6RA28298A
  • 拉曼光谱解密细胞内结冰如何影响细胞活性
    冷冻保存技术是将细胞长期维持在稳定的状态,从而应用于各种疾病的诊断和治疗。据1970年代以来的研究显示,多种类型细胞冷冻保存后的存活率会随着冷冻速率的不同而不同。大多数种类细胞的存活率与冷冻速率呈倒U形关系:即当超过最佳冷却速率后,细胞存活率随冷冻速率的增加而迅速下降,当低于最佳冷却速率时,细胞存活率随冷冻速率的降低而迅速下降。在快速冷冻速率下,细胞内的冰晶形成(Intracellular ice formation,IIF)会对细胞造成损害,并随着冷冻速率的增加导致细胞活性丧失。然而,IIF的机制仍无定论,目前业内存在的主要有以下三个假设:(1)Mazur假设称细胞外冰晶可以穿过膜孔生长进而诱导细胞内冰晶形成;(2)Asahina则认为冷冻直接破坏细胞膜是导致IIF的原因;(3)Toner等人则提出表面催化形成晶核是造成IIF的原因。  传统低温光学显微镜技术是有限的,高速图像采集和双光子显微镜可以提高观察细胞冷冻的空间和时间分辨率,虽然可以在低温下观察细胞反应,却不能与每个细胞的活性相关联。显微拉曼光谱技术可对细胞进行无标记检测,并可用于细胞内水的热力学状态(即液态水与冰)等化学属性进行识别,因此可作为探究细胞冷冻反应的有力工具。此外,显微拉曼光谱的高空间分辨率和可区分细胞膜、线粒体等亚细胞结构的能力意味着该工具可用于进一步探究IIF及其成因,并通过拉曼光谱能够直接表征IIF对细胞活性的影响进而判别冷冻细胞后的活性。  明尼苏达大学研究团队在Biophysical Journal发表题为“CharacterizingIntracellular Ice Formation of Lymphoblasts Using Low-Temperature RamanSpectroscopy”的研究成果(图1)[1]。研究结果表明显微拉曼光谱技术可用于研究细胞在不同冷冻速率和冷冻液成分下的冷冻反应。通过拉曼光谱发现胞内冰晶形成并不一定会导致细胞死亡,但细胞内冰晶的数量及大小会影响细胞活性。另外研究还发现,细胞内冰晶形成靠近于细胞膜并靠近于细胞外冰晶,而通过增加细胞膜和细胞外冰晶间的距离可以减少IIF;实验使用细胞松弛素D破坏肌动蛋白细胞骨架以改变细胞膜的渗透性来增加胞内冰晶形成量,当存在胞内冰晶时,可以显著的观察到细胞内渗透梯度,这些观察结果揭示了细胞膜与胞外冰晶的相互作用是导致IIF的原因。图1 研究成果(图源:[1])  此项研究选用Jurkat细胞作为淋巴细胞的模型细胞,采用的共聚焦显微拉曼系统Alpha 300R配备:UHTS300光谱仪、600 l/mm光栅以及DV401 CCD检测器。激发光源波长为532 nm,100×物镜(NA=0.9),聚焦在被测物上的光功率为10mW,显微分辨率约为296 nm。将细胞冷冻至-50℃,并在成像前保持20分钟。每幅图像有60×60个像素,每个像素点采集的积分时间为0.2秒,因此,对整个细胞进行成像总共需要12分钟。分别在第20、80和140分钟时对相同细胞进行拉曼光谱成像采集,以排除来自激光照射带来的光损伤/光漂白的热量影响。  单细胞中细胞色素c的分布被作为冷冻状态下细胞活性的衡量标准,其拉曼成像结果与台盼蓝染色结果高度一致。细胞色素c的空间分布使用 Moran' s I量化,并被用作细胞活性的标记。Moran' s I是一种基于信号位置和强度的进行空间相关性度量的方法,其值为-1时表示信号完全分散,+1时表示信号完全相关,0时表示信号随机分布。细胞色素c在750、1127、1314和1585 cm-1处具有强烈的拉曼信号,本实验以1127 cm-1作为标记峰用于生成细胞色素c的拉曼成像,并通过吖啶橙/碘化丙啶(Acridine orange/Propidium iodide,AO/PI)染色验证解冻后细胞的活性。根据常见的细胞内、外物质的特征峰位置(表1,图2),整合每个像素的光谱来组合拉曼成像,表征冰晶的大小、冷冻保护剂的细胞内浓度以及外部冰与细胞膜的接近程度。表1 拉曼光谱的波数分布数据来源:[1]∣制表:生物探索编辑团队图2 不同物质的拉曼光谱(图源:[1])  注:1)海藻糖;2)葡聚糖;3)DMSO;4)=细胞色素c;5)冰;6)冷冻保存在10% DMSO中的Jurkat细胞。根据左边的特定信号渲染出右边图像,并以光学显微镜图像为参考。  结果发现:1  细胞色素c的拉曼光谱可表征细胞复温后活性  解冻后细胞复苏率与冷冻速率的之间的函数绘制曲线呈倒U形,可知“最佳”冷冻速率为1-3℃/min,当冷冻速率高于该曲线时认为是过快的,并会与IIF相关(图3A)。在冷冻细胞的不同焦平面上获得的拉曼成像显示,细胞中间(中心)的细胞色素c图像提供了最强的信号(图3B)。台盼蓝染色阴性细胞(活细胞)的细胞色素c局部拉曼信号强且最低Moran' s I值为0.65,而台盼蓝染色阳性细胞(死细胞)没有可区分的细胞色素c拉曼峰(图3C)。因此,可使用0.65的Moran' s I值作为区分活细胞和死细胞的阈值水平。图3 Jurkat细胞活性的拉曼检测(图源:[1])  注:(A)在10% DMSO中冷冻Jurkat细胞后的复苏率与冷冻速率的函数曲线图。(B)冷冻细胞在三个不同深度焦平面上细胞色素c的拉曼成像。(C)通过拉曼光谱检测冷冻后Jurkat细胞的活性并使用台盼蓝进行验证,对应的细胞色素c的拉曼特征、拉曼成像和计算的Moran' s I值。2  拉曼光谱可分析细胞内冰晶的形成  拉曼光谱测定了细胞在1、10和50℃/min冷冻速率下的细胞活性:以1℃/min冷冻保存后的细胞中有80%是活的,以10℃/min冷冻保存后的有60%的细胞是活的,而以50℃/min冷冻保存后的只有20%的细胞是活的(图4A)。每个细胞内冰的相对量可以根据冰的横截面积与细胞的横截面积的比值(Aic)来估计。Aic与不同冷冻速率相关性函数(图4B),Aic随着冷却速率的增加而增加。统计Aic与Moran' s I值的函数曲线图,结果表明活细胞中的冰晶比死细胞少,但存在群体上的差异(图4C)。图4 不同冷却速率下细胞内细胞色素C和冰晶的分布(图源:[1])3  基于拉曼图像可计算IIF的冰晶尺寸及位置  在不同冷冻速率下,大多数细胞仅存在小冰晶。图5 细胞内冰晶的拉曼成像(图源:[1])4  拉曼图像可表征冰晶、细胞膜和IIF的相互作用  分别将细胞以10℃/min的冷冻速率在10% DMSO或10% DMSO+10%葡聚糖中进行冷冻保存。通过拉曼成像分析IIF和Aic,细胞通常存在于相邻冰晶之间的未冷冻溶液中(图6A)。实验观察指定了两个不同的区域:1)细胞外冰晶靠近细胞膜的区域;2)相邻冰晶之间的区域,其中细胞膜远离细胞外冰晶(图6B)。通过测量细胞和细胞外冰晶之间的未冷冻溶液的厚度来表示细胞膜与细胞外冰晶的接近度(图6C)。图6 在10% DMSO或10% DMSO+10%葡聚糖中冰和Aic的拉曼图像(图源:[1])5  拉曼验证破坏细胞骨架增加了细胞内冰晶的形成量  质膜不是孤立地起作用,而是与细胞中的其他结构相互作用,特别是细胞骨架。为了确定破坏膜结构对IIF的影响,将Jurkat细胞放置于50以及250μM细胞松弛素D(Cytochalasin D,CD)中培养30分钟,然后在10% DMSO中以10℃/分钟的速率进行冷冻。对于存在CD的实验,在10个细胞中有2个中观察到大块冰晶(图7A)。约83%的细胞靠近细胞膜存在比例很高的细胞外冰晶,其中带有大块冰晶的细胞确认死亡,而带有小冰晶的细胞部分死亡部分存活。细胞内冰晶与细胞膜的空间定位确证在细胞外冰晶附近(图7B)。在所有实验条件下,IIF的细胞比例相同(100%),但结果显示Aic会随着CD浓度的增加而显著增加(图7C)。图7 细胞松弛素破坏细胞骨架对IF的影响(图源:[1])此项研究证实了拉曼光谱技术可用于研究细胞在不同冷冻速率、不同冷冻保护剂下的冷冻反应。此外研究还表明了IIF靠近于细胞膜,特别是与细胞外冰晶相邻的位置。随着靠近细胞膜且与胞外冰晶相邻的比例增加,IIF比例也会增加,并且随着细胞膜和胞外冰晶之间的距离减小,IIF比例也会随之增加,这些结果表明细胞膜和细胞外冰晶之间的相互作用是造成IIF的原因。该研究还进一步了解了冷冻保护剂的潜在作用机制,但是,研究中无法通过拉曼技术将细胞骨架与细胞内其他蛋白质成分区分开来,因此也无法明确IIF是否会损害细胞骨架。

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