类固醇和激素

粪便提取类固醇激素，想用液相色谱测浓度，有大神做过吗？求经验。

各位前辈大家好： 初来乍到请多多关照！我最近想做监测鱼体内血清中类固醇激素的实验，实验室的仪器和设备都是很齐全的，我打算用HPLC-Q/TOF去做，先定性后定量。现在有一个问题难倒我了，就是标准品因为我做内源性的激素物质的监测，雄激素、雌激素和孕激素的标准品大多是哺乳动物和人的，我有3点疑惑，请懂的人帮忙指点一下：1、有卖的雌激素、雄激素和孕激素是从鱼体内提取的吗？谁知道请帮我提供一个公司的名称被 2、如果标准品都是从人或者哺乳动物体内提取的，我在用飞行时间质谱做鱼体内监测的时候能够扫描出来吗，比如说标准品是雌二醇是从人体内提取后制成标准品的，那么我监测鱼体内的内源性雌二醇能扫描出来吗，是同一种物质吗，分子结构是否相同呢？我看一些标准中检测过外源性性激素，他们所用的标准品是怎么合成的呢，我用这种标准品能够检测我鱼体内的呢？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em34.gif（说的有点麻烦，不知道大家看懂没） 3、用过ABSciex家的5600+的仪器的高手们，请问在没有标准品的情况下是否无法进行监测，不用标准品有没有什么软件或者技术能分析出来物质，没有标准品无法进行定量吧！问题很棘手也很多！请大家给予帮助，初来乍到积分很少，努力攒积分吧！谢谢了！

请教一下类固醇和三萜化合物的区别，感觉他们好相似，多谢多谢！

[size=4][color=#DC143C][font=黑体]同位素比质谱方法检测内源性类固醇雄烯二酮[/font][/color][/size]=========================================在所使用的禁用物质中，类固醇激素是较为普遍使用的一类药物。人体自身能合成与分泌的类固醇激素称为内源性类固醇激素，如攀酮。由于在检测方法上有一定难度，一些运动员选择使用内源性类固醇制剂以逃避兴奋剂检测。目前，兴奋剂检测实验室应用同位素比质谱分析方法检测内源性类固醇来源。13C和12C是碳元素在自然界中的天然同位素。有机化合物的来源不同，其同位素比(如13C与12C的比值)也不同。人体自身分泌的类固醇与相同化学结构的类固醇制剂的同位素比不同。应用同位素比质谱分析技术可以测定化合物13C与12C的比值，同位素比用δ（‰）值表示。根据仪器的分析流程和组成部分，本文方法称为[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比质谱([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS)方法。该方法在兴奋剂检测中的应用时间较短，文献方法较为繁琐，本文建立了快速灵敏的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析方法。-------------------------------------------------试验材料与方法1. 试剂和对照品试剂：β-葡萄糖醛酸酶，Sigma；其余均为国产分析纯试剂。对照品：睾酮（缩写T）、雄酮（缩写An）、本胆烷醇酮（缩写Etio）、5α-雄烷-3α，17β-二醇（缩写5α-diol）、5β-雄烷-3α，17β-二醇（缩写5β-diol）、孕二醇（缩写PD）购自Sigma公司。2. 样品两名健康志愿者，一名男性40岁，尿样为sample 1；一名女性38岁，尿样为sample 2，均没有服用任何药物。收集其晨尿为阴性对照尿。阳性尿样为世界反兴奋剂机构水平考试所用尿样来自兴奋剂检测中心。3. 仪器[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]/燃烧炉/同位素比值质谱仪（HP6890/DELTA PLUS，Finnigan）；高效液相色谱仪（Waters2796，检测器：Waters2996 PAD，自动收集器：Waters Fraction Collector Ⅲ）；Anilent 5973i[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]-质谱联用仪。4. 方法4.I [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS操作条件色谱柱：HP5毛细管色谱柱，25m×0.2mm i.d.×0.3μm；柱流速：1mL/min（室温）；升温程序：60 ℃（2min）一50 ℃/min→255℃一2.5℃/min→280℃（6.5min）；进样口温度：260℃；燃烧炉温度:960℃；质谱离子源：EI；参考气：CO2，1.8V。4.2 高效液相色谱仪操作条件色谱柱：ZQRBAX SB-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：水-乙睛，梯度洗脱（0-18min：乙睛从30%→100%）；流速1mL/min；柱温：室温。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD操作条件色谱柱：HP-1毛细管色谱柱，25 m×0.2mm i.d.×0.11μm；柱流速：1 mL/min （室温）；升温程序：150 ℃（1min一5℃/min→200℃一30℃/min→310℃（10min）。4.4 样品预处理取尿样2mL，加人1Ml0.2mol pH=7.0的磷酸盐缓冲液和10μLβ-葡萄糖醛酸酶（5000 IU）混匀，在55℃恒温水浴中培养3h，取出后加pH=8.8的碳酸盐固体缓冲剂约100mg 和5mL叔丁基甲醚，振荡萃取，离心后，取出上层有机溶液，在加热的情况下，用氮气吹干，加人50μL甲醇溶解残渣，备用。将上述甲醇溶液置HPLC仪上，依前述色谱条件分离，分段收集流出液，确定收集时间程序。分别将流出组分用氮气吹干，加人50μL环己烷，备用。4.5 对照品溶液的制备分别配制对照品睾酮、雄酮、本胆烷醇酮、5α-雄烷-3α，17β-二醇、5β-雄烷-3α，17β-二醇，孕二醇的甲醇溶液，浓度为1mg/mL。4.6 样品测定4.6.1 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD 分析依上述[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/MSD仪器操作条件，取样品溶液及对照品溶液进行全扫描，扫描范围m/z 20~450，选择待测物的特征离子，获得SIM图。经对样品中与对照品有相同保留时间的峰进行质谱分析，及与标准品质谱图的对比，确定待测样品的组成。4.6.2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析依上述CC/C/IRMS仪器操作条件，对处理后的样品进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]gc[/url]/C/IRMS分析，测得内源性类固醇激素的δ值。

类固醇（包括固醇）是在植物油中存在的天然非甘油酯类组分。由于它们在生物柴油中可溶，所以会在产品中出现。它们的存在可能会对生物柴油质量造成影响。 测定类固醇的两种常用方法是GC-FID联用和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-[b][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url][/b]联用。 早在20世纪90年代，Plank和Lorbeer就开始进行生物柴油中类固醇分析的工作。zui初他们提出了一种GC-FID法，以测定由菜籽油制得的植物油甲酯中的游离固醇和酯化固醇。在进行分析之前，先用含1%三甲基氯化硅烷的BSTFA将样品硅烷化，随后将样品在含5%苯基的甲基聚硅氧烷柱中进行分析。在由菜籽油制得的生物柴油中检出了菜籽油甾醇、β-谷甾醇、芸苔甾醇、胆固醇、豆甾醇和燕麦甾醇以及它们的酯。 此后该课题组又研发了LC-GC法，以测定菜籽油甲酯中的游离固醇，后来对这种方法又进行了一些改进。 现在人们更倾向于使用LC-GC法，因为该法能够提供更多的样品信息，分析时间较短，结果的可重复性也比较好。LC-GC法无需对样品进行提纯和皂化处理，但必须先用MSTFA将游离固醇硅烷化。运用这种方法，人们已经对一些以大豆、几种油菜籽、葵花籽和餐厨废油为原料的生物柴油进行了成功的分析

新华社东京1月19日电 （记者蓝建中）肠出血性大肠杆菌导致食物中毒时，重症患者有时会出现痉挛和昏睡等脑部症状，甚至会死亡。东京大学和富山大学的研究小组发现，如果在短时间内给重症患者大量注射类固醇，可能会取得较好效果。 2011年，日本烤肉连锁店“惠比寿烤肉酒家”的生拌牛肉引发集体食物中毒事件，导致5人死亡，食物中毒是由大肠杆菌O111引发的。 研究小组对富山、石川和福井等地的86名患者的治疗记录进行了分析。在这些患者中，有34人出现了伴随着肾功能衰竭的溶血尿毒综合征，有21人出现了痉挛和昏睡等脑部症状。 在最初进行治疗时，医生采用的是血浆交换等治疗手段，但是在开始注射类固醇之后，就不再出现死亡病例，在接受类固醇治疗的12名脑部症状患者中，有11人没有出现后遗症而康复。研究小组指出，这参考了治疗流感病毒导致的脑部症状时使用类固醇的做法。 在大肠杆菌O111导致的食物中毒中，通常有很多患者会出现脑部症状。东京大学教授水口雅指出：“对于食物中毒导致的脑部症状，一直缺乏有效的治疗方法，这个发现有可能促进开发出新的治疗方法。” 这一成果论文已经刊登在最新一期美国《神经病学》杂志网络版上。

在体育界，对于睾丸激素的滥用越来越需要一个新的检测方法。 目前，GC-MS被用来从尿液中检测排泄物的睾丸激素/表睾(甾)酮比值。 当T/E的比例超过6:1的时候，传统上被认为是确证为睾丸素的管理。 这个比值被接受，由于世界流行的T/E比例低于该比例。但是， 有少部分的天然的就超过了6:1, 这样一些无辜者就被错误的判别成了有罪。 以下工作揭示了天然和合成的睾丸素荷尔蒙在C13方面的差异。这个应用文章揭示了传统的测试方法的失败，和使用GC-C-IRMS方法分析的成功。睾丸激素庚酸酯，丙酸睾丸甾酮库存是从日本获得。参比类固醇，吉拉德氏试剂T(羧甲基，三甲基氨基氯化酰胺)和铋酸盐是从Sigma公司获得。Sephadex LH-20是AB公司产品，Sep-pakcartridges来自waters。B-葡(萄)糖苷酸酶/芳香基硫酸酯酶是从Sigma和Boehringer Mannheim公司获得。所有的试剂均是分析6级。关于这个研究的志愿者5个中国男子（年龄：19-22）参与这个研究。在肌肉注射250mg庚酸睾丸酮之前的两天，收集尿样。在注射后的最初四天里，收集两个尿样（20ml），虽然只有每天清晨收集的样品用于分析。清晨点的尿样在第5-9天收集，后面依次是第11,13,15天。

大家好，请问胆固醇、性激素、维生素等固醇类物质有国家标准吗？标准是什么呢

●误区三：没有鳞的鱼胆固醇高 ［解析］这个归纳不够全面。的确有一些没有鳞的鱼胆固醇较高，如银鱼、河鳗、泥鳅、黄鳝、鳕鱼，但不是所有无鳞的鱼胆固醇都高，如带鱼、鲨鱼，与有鳞的草鱼、鲳鱼、鲈鱼等相似。 ●误区四：糖尿病病人吃碳水化合物越少越好 ［解析］血糖和碳水化合物的摄入有关。糖尿病病人应当适当控制碳水化合物的摄入，以防止血糖超标。应在维持正常体重的条件下，维持正常能量的摄入，碳水化合物仍应保持占能量的60％~65％。糖尿病患者每次应摄入富含膳食纤维的食物如燕麦片、新鲜蔬菜等，使碳水化合物消化吸收缓慢，血糖不会升高过快，水平亦较稳定；如果单纯的少食碳水化合物反而使消化吸收快，血糖很快升高，且持续时间短，容易发生低血糖，出现心悸、头晕、出冷汗等。 　　 ●误区五：晚上只吃菜不吃饭可减肥 ［解析］单纯性肥胖的主要原因是能量摄入过多，消耗太少，能量在体内转为脂肪积聚，形成肥胖。产生能量的三大营养素是蛋白质、脂肪、碳水化合物。脂肪1克可产生9千卡的能量，蛋白质和碳水化合物1克可产生4千卡的能量。少吃饭可少摄入碳水化合物，可减少摄入能量，但多吃菜肴会多摄入脂肪，产生的能量更高，达不到减肥的目的，反使摄入的营养素不能平衡，不利于健康。

带壳水煮蛋由于不加油、烹调温度不高、蛋黄中的胆固醇也未接触氧气，是对心脏更友好的吃法。至于炒鸡蛋，由于鸡蛋打散后再炒，蛋黄中的胆固醇和空气接触较充分，氧化较多，且鸡蛋比较吸油，不太推荐。

[size=4] 牛奶是人类重要的食品之一，富含蛋白质、维生素、钙质及其他人类所需的营养素，具有很高的营养价值，倍受人们青睐，各个国家都鼓励人民消费牛奶及乳制品，WHO也把人均乳制品列为衡量一个国家人民生活水平的主要指标之一。目前世界年人均牛奶消费量约为100kg，我国乳品消费也在不断增长，Agriculture and Agri-FoodCanada公布的数据显示，2000年我国液态奶年人均消费量为2kg，到2004年上升至7.7L(约合8kg)。　　随着人们对EDCs的逐渐重视，不少学者开始研究食物中雌激素与人类健康的关系，尤其是牛奶。Ganmaa等[1]学者认为现在消费的牛奶中雌激素水平较100年前有明显增加。虽然目前各国政府对牛奶中的雌激素标准没有明确的规定，但现代牛奶中雌激素水平及人类长期饮用牛奶是否会对人体健康产生不利影响，正越来越受到学术界的关注。尤其在我国，奶类消费的群体以儿童和青少年居多，长期饮用高含量雌激素的牛奶是否会对其生长发育等产生不利影响，有待进一步研究。本文就近年来有关牛奶中雌激素及其安全性的研究进行回顾。　　[b]1、牛奶中的雌激素[/b]　　雌激素是一类化学结构相似、分子中含有18个碳原子的类固醇激素，是与动物繁殖有直接关系的生殖激素。雌激素主要有三种类型：雌酮、雌二醇和雌三醇。雌二醇有两种形式，有生物活性的17β-雌二醇和无生物活性的17α-雌二醇。　　雌激素可应用于奶牛生产中，主要与孕激素等一起诱导奶牛发情和泌乳。因此，现代牛奶中的雌激素包括内源性雌激素，即奶牛本身产生的雌激素，和外源性雌激素，即应用于奶牛的雌激素，但目前普遍认为在规范用药的前提下雌激素药物残留量可忽略不计。　　人类现在消费的牛奶与100年前不同：首先，现代饲养的奶牛多为经基因改良的高产奶牛如Holstein(荷兰的一种奶牛)，品种与100年前不同，不同品种奶牛分泌的牛奶中雌激素含量不同[2]；其次，饲养方法不同，100年前人们用牧草饲养奶牛，而现在为增加牛奶产量，通常用含动物蛋白的高蛋白饲料饲养，可能会增加现代牛奶中雌激素含量[3]；最重要的是，现代奶牛生产中，奶牛在生产后三个月即可进行人工受精，替代了自然交配，几乎在整个怀孕期间持续泌乳，尤其是妊娠后期，其血清中雌激素水平显著提高，牛奶中的雌激素也随之增加[4]。据估计大约75%的商业化牛奶来源于妊娠奶牛[3]。　　商业化牛奶是经均一化作用和巴氏灭菌法作用后的产物，而销售前牛奶的巴氏灭菌过程不能彻底灭活这些激素，有文献报道西方饮食中动物源性雌激素主要来源于牛奶和乳制品，占雌激素消费的60-70%[4]。因此对商业化牛奶中雌激素的评估更有价值。Wolford等[5]运用放射免疫测定法检测商业化牛奶中雌激素的浓度，雌酮、17β-雌二醇和雌三醇分别为(33.7±2.7)pgml-1、(6.4±1.1)pgml-1和(9.0±2.0)pgml-1。另有学者检测两种商业化奶牛(Holstein和Jersey)牛奶中的雌激素浓度时，发现他们显著高于20年前报道的浓度，提示近期乳制品的激素水平随着现代乳品工业的发展快速增加[3]。而我国奶牛的饲养主要以小规模、分散型的农户饲养为主，奶源质量控制难度较大，尤其在激素使用方面，如规范使用兽药和严格执行休药期规定等监控较难，有可能造成牛奶中激素含量增加。2005年9月-2006年3月期间我们曾对无锡市销售的部分本地和外地生产的市售全脂纯牛奶中的雌性激素进行检测，发现市售全脂纯牛奶中含有一定数量的雌性激素，不同品牌全脂纯牛奶中雌性激素水平有差异，同一品牌不同批号中雌性激素水平也有波动[6]，牛奶中高雌性激素水平是否会对人类健康有影响值得进一步研究。　　牛奶中的雌激素可由血循环中的雌激素通过血-乳屏障进入乳汁，也可部分由乳腺合成，血浆中和牛奶中雌二醇浓度相似，但牛奶中雌酮浓度是血浆中的4倍。硫酸雌酮是牛奶的主要雌激素，有较高的生物活性，一旦进入人体，能够迅速转换为雌酮和雌二醇。雌酮大多与蛋白结合，在检测牛奶中的雌激素时，Ganmaa等[7]发现雌酮占雌激素的69%，结合型雌酮占优势。硫酸雌酮可用于绝经期妇女的激素替代疗法，其血浆半衰期长，能够被肠黏膜完全吸收，且形态无改变。Remesar等[8]计算人类饮食中雌酮吸收率，发现46.6%来源于乳制品。据测量，如每天消费一杯牛奶，将有700ng的硫酸雌酮被摄入，该数量比健康成年男性循环中的雌激素高500-1000倍。　　[b]2、牛奶中的雌激素与人类健康[/b]　　牛奶中的雌激素为食物源性雌激素，可被人体吸收，是属外源性雌激素的一种。近年来，EDCs样作用一直是研究的热点。EDCs是指可通过食物链或直接接触等途径进入体内，影响体内激素的合成、释放、转运和代谢，从而对生殖系统、神经系统和免疫系统等产生多方面影响的化合物，它可通过模拟内源性激素或拮抗正常的内源性激素，干扰内分泌功能，其主要表现为雌激素样作用。Guillette[9,10]研究发现EDCs可引起鳄鱼生殖腺发育异常、血浆雌激素水平升高，并可引起雄性鳄鱼低精子浓度及血浆睾酮浓度下降等。有美国学者报道，EDCs与近20年来男孩尿道下裂[11]和女孩乳房早发育[12]有一定的关联。我国学者张树成等[13]在分析男性精[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]量的变化时发现，在过去15年间里，男性精子质量下降、数量减少，可能与EDCs有关。Boyle等[14]学者认为，人类精子数量减少及生殖系统肿瘤发病率的升高与动物性食物摄取量有关，而动物性食品中含有相当数量的雌激素，其是否与上述疾病相关需进一步研究。　　现代牛奶中的高雌激素水平已经引起学术界的关注。Hill等[15]对北美白人、黑人及南非黑人尿中性激素进行检测，结果显示素食非裔美国人雌激素排泄减少，而西方饮食的南非黑人雌激素代谢增加。Bernstein等[16]报道，亚洲妇女牛奶和乳制品消费量低，其血浆雌激素浓度低于白种人，后者乳制品消费量高，支持牛奶消费与血浆雌激素浓度有相关性。上述研究提示牛奶中雌激素水平可影响人体雌激素的代谢。　　一些学者研究发现女性生殖系统肿瘤与牛奶的消费有一定相关性。流行病学资料显示乳腺癌的发生与乳制品等的消费呈正相关，并认为饮食中的脂肪是乳腺癌的主要危险因素之一[17,18]。然而，自50年代起全脂牛奶的消费稳步下降，代之为脱脂牛奶，而乳腺癌的发病率却有所增加[19]，此现象使上述理论面临挑战。Ganmaa等[1]学者用逐步回归法分析了40个国家饮食与女性乳腺癌、卵巢癌及子宫内膜癌发病率和死亡率的相关性，其相关系数分别为0.817、0.779和0.814，推测牛奶和乳制品中雌激素与乳腺癌、卵巢癌和子宫内膜癌的发生有关。　　文献报道牛奶及乳制品消费增加了男性前列腺癌发生的危险度[3,18,19]，但其中的机制尚不清楚。Chan等[20,21]学者研究前列腺癌的发病因素时，发现乳制品中的钙可降低1,25(OH)2D3的浓度,1,25(OH)2D3为前列腺的保护因子,故乳制品和钙是男性前列腺癌发生危险因素之一。但Qin等[3]对大量的文献分析后认为牛奶中的脂肪和钙不能完全解释前列腺癌的发生，提出牛奶及乳制品中的雌激素可能为前列腺癌发生的诱因之一。　　牛奶中的雌激素是否会影响儿童的生长发育和生殖系统发育等，目前研究资料甚少。然而，青春期前儿童体内产生雌激素少，对于外源性激素敏感性较高，暴露于外源性性激素对于其是危险的，可能使其生长加速和/或出现乳房发育等[22]。研究发现生活方式的改变和环境因素可能是性早熟的重要病因之一[23-25]。虽然目前没有直接证据证明牛奶中的雌性激素可能引起上述疾病，但倪继红等[26]发现人参蜂皇浆可引起儿童性早熟，而其中就含有相当量的雌激素。Matagne等[27]在体外研究雌二醇对幼年雌鼠下丘脑GnRH脉冲式分泌的影响时，发现注射雌二醇后可出现GnRH脉冲间隙减少，阴道开口及首次发情时间提前，认为雌二醇可影响新生雌鼠大脑中与性激素分泌有关细胞的分化，导致性早熟。Ganmaa等[7]就牛奶对雌雄大鼠亲代子代生殖功能的影响进行研究，发现牛奶对两代生育力、生殖能力及生殖器官发育等方面无明显损害，但在均衡营养的前提下,牛奶对大鼠生长有促进作用,牛奶组子代中有一例出生时即死亡，三例有骨骼异常，而在对照组中未出现类似情况，该结果是否与牛奶中的雌激素有关，需要进一步研究。[/size][size=4][/size]

鸡蛋里虽有胆固醇，但也有卵磷脂、叶黄素等多种心血管保健成分，以及对降低同半胱氨酸水平有利的多种B族维生素和甜菜碱。

300mg）的两倍。这些研究结果提示，不应过分限制或降低胆固醇的摄入量。　　我国2000年版《中国居民膳食营养素推荐摄入量》中对膳食胆固醇摄入量的推荐值是每天小于300毫克。在2013年版《中国居民膳食营养素推荐摄入量》中提出，每天从膳食中摄入的胆固醇为300-500毫克，对胆固醇的限制也有所降低。从我个人观点来说，为了健康，还是适量而可为好。　　哪些食物中的胆固醇含量比较高？　　1、猪脑、羊脑：每100克中含胆固醇在2000毫克以上。　　2、动物的内脏：肝、肾、肺、心、舌、肚、大肠，蟹黄、鱼籽、墨斗鱼。 3、肥肉：猪、羊、牛、鸡、鸭等动物性食物的肥肉中。

在用固相萃取前处理方法做雌激素回收率实验时，洗脱液最好是什么呢？我试过纯甲醇，甲醇和乙酸乙酯，乙腈和丙酮，但真的不知道什么样的比例最好。求助大神

RTSPE固相萃取SPE C18固相萃取小柱 6ml 500mg1.活化6ml色谱甲醇过柱，滴速为宜。2.平衡6ml去离子水过柱，滴速为宜，当水液面要比填料上表面高1mm左右，再上样。3.上样取上图第四步离心后的上清液过C18小柱，滴速为宜。过柱前上清液要利用1%乙酸调节pH至2.5-3.0之间。4.淋洗5%甲醇溶液，6ml淋洗过柱，去除杂质。抽干5.洗脱用2-4倍柱床体积的95%色谱甲醇洗脱。这是我初步想的方法，用来进行ABA前处理，之后准备在进行一系列操作进行HPLC检测。但是有几个问题1.活化用的甲醇浓度一般是多少？2.关于提取剂，我查了文献有的说可以利用80%甲醇进行浸提。有的说利用改进的Bieleski混合液（甲醇:甲酸：水=15:1:4，v/v/v），这个Bieleski里面用的甲醇和甲酸是百分之多少的？3.再就是淋洗这一步，我测定的植物激素是利用反相萃取方法，淋洗为了把干扰物质洗去，应该用多少的甲醇呢？我的ABA溶解在80%的甲醇中。4.最后洗脱，用的甲醇浓度多少呢？希望来人解答万谢！！很急的

维生素C能增加“好”胆固醇的水平，促进胆固醇代谢，并可抑制胆固醇合成酶的活性，降低胆固醇合成速率，从而达到控制血脂的目的。新鲜果蔬富含维生素C，比如猕猴桃、鲜枣、青椒、绿叶菜等。

破译鸡蛋中胆固醇的真相1. 前言鸡蛋营养丰富，含有蛋白质、脂肪、胆固醇、卵磷脂、维生素、铁、钙、钾等人体需要的矿物质。然而有研究人员提出，鸡蛋胆固醇含量相对较高，过多摄入鸡蛋会导致人体血清胆固醇增高，引发心血管疾病。由此我们对鸡蛋中胆固醇含量进行研究，探索快速检测鸡蛋中胆固醇含量的方法。2. 实验部分2.1 仪器与试剂 仪器： HanonLC7000四元低压高效液相色谱系统（配置高压泵，紫外检测器），万分之一电子天平，涡旋混合仪，离心机，超声波清洗器 试剂： 胆固醇标准品，甲醇（色谱纯），异丙醇（分析纯），乙醚（分析纯），石油醚（分析纯），无水乙醇（分析纯），市售普通鸡蛋2.2 色谱条件色谱柱：C18色谱柱 150mm×4.6mm×5μm；流动相：甲醇-异丙醇（4:1，v/v）；流速：1.0mL/min；温度：25℃； 进样量：20μL；检测波长：205nm。2.3 标准溶液配制准确称取胆固醇标准品25mg，于25ml容量瓶中，用无水乙醇溶解稀释至刻度，得胆固醇储备液（1.0g/L）。取胆固醇储备液0.0，0.5， 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，1.0ml于10ml容量瓶中，无水乙醇稀释定容，的浓度为0，0.05 ，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0g/L 胆固醇标准溶液。2.4 样品前处理取鸡蛋称重，除去蛋清，准确称取蛋黄重量。取蛋黄样品2.0g，用20ml高纯水溶解稀释混匀，得蛋黄稀释液（0.1g/ml）。取蛋黄稀释液1.0ml于具塞离心管中，加无水乙醇1.0ml，涡旋混匀，加乙醚3.0ml，石油醚3.0ml，涡旋混合，将混合液离心（4000r/min），使液体分层，取上层有机相；下层再加入2.0ml乙醚和2.0ml石油醚进行萃取，合并上层萃取液，氮吹仪吹干（温度30℃），0.5ml乙醇溶解，经0.45μm有机微孔滤膜过滤后，上机检测。3. 结果与讨论3.1 标准工作曲线 配制好的系列胆固醇标准溶液，在设定好的色谱条件下进行色谱分析，进样量为20μL，保留时间为6.72min，每个浓度标准溶液重复进样三次，以峰高H（mAU）为纵坐标，胆固醇标准溶液浓度C(g/L)为横坐标，绘制标准工作曲线，线性回归方程为H=76.45C-0.052，相关系数r=0.9991。3.2 蛋黄中胆固醇含量将处理好的蛋黄样品取样测试，进样量20μL，在6.72min胆固醇被洗脱出来，蛋黄其他组分能与胆固醇有效分离，不干扰胆固醇的测定。由胆固醇标准曲线回归方程计算胆固醇含量。（液相图谱件见图1，结果见表1）图1 蛋黄胆固醇液相图谱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/2017011916

土鸡蛋和洋鸡蛋的胆固醇，那个高？

鸡爪子，广东人美名曰“凤爪”，是广东人不可缺少的食品，节前与同学聚会时听闻也有胆固醇。其实鸡爪主要是鸡皮和肌腱，以胶原组织为主，真正的胆固醇含量应该是不高，网上的资料也是众说纷纭。现在有很多是人是用油来烹饪，估计更多的胆固醇是来自用油，而不是鸡爪本身。建议大家参照以下这个方法去做，吃得更放心。先用开水煮8分钟，捞起，用干净冷水（最好是冰水）泡三次，每次水暖就换掉。然后根据自己的口味，加调味料（盐焗鸡粉、醋、辣椒等），既爽又不油腻。

[b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]（[/font][font=微软雅黑]1）遗传代谢性疾病的检测[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]遗传代谢性疾病的单一病种的发病率较低，但其种类繁多，总体发病率仍然较高。目前，[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]可同时筛查氨基酸、有机酸、糖代谢异常及脂肪代谢紊乱等共100余种疾病。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]方法在日本等发达国家已广泛应用于婴幼儿及新生儿遗传性代谢疾病的筛查和诊断，取得了良好效果。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]可以检测血液、尿液、脑脊液、唾液、汗液等，而且所需样本量较少，尿液一般需要10mL左右，血滤纸片只需直径16mm血片，约相当于80μL左右全血，实现了“一种方法检测多种疾病”，大大提高了检测效率。[/font][/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]样品的前处理是一个繁琐而耗时的过程。传统的衍生方法所需时间较长（大于30min），Deng等提出利用微波辅助进行甲基硅烷化，认为给予700W能量好和照射60s是最佳条件，较传统方法缩短近30倍。[/font][font=微软雅黑] [/font][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]（[/font][font=微软雅黑]2）尿液类固醇激素的谱分析[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]用[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行尿液类固醇激素的谱分析对诊断新生儿和成人的类固醇激素合成和代谢异常有非常重要的作用。早在1986年，Shackleton等就提出用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行尿液类固醇激素谱分析应遵循以下原则：1）精确收集24h尿样；2）从尿液中提取所有结合型类固醇激素；3）完全水解所有结合型类固醇激素；4）高游离类固醇激素的回收率；5）转化所有激素为挥发性衍生物；6）调整所测组分的色谱分辨率；7）在较广泛的浓度梯度范围内有良好的线性反应；8）反应因素确定：只与纯化的待测定的类固醇激素反应；9）每个激素的再现性好；10）无杂质干扰。类固醇激素的谱分析可用于鉴别不同种类的先天性肾上腺皮质增生、Cushing综合症、肾上腺功能不全或抑制状态。Homma等在日本建立了足月新生儿尿液类固醇激素的参考值。他们通过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]选择性离子扫描方式成功界定了50种尿液类固醇激素的参考值。其实验结果显示，脱氢表雄酮、孕烯醇酮、17-羟孕酮、皮质醇的主要代谢产物在白天（06：00-14：00）和晚上（21：00-24：00）无显著性差异。[/font][/font][font=微软雅黑] [/font][b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]（[/font][font=微软雅黑]3）产前诊断[/font][/font][/b][font=微软雅黑][font=微软雅黑]产前诊断又称宫内诊断或出生前诊断，是指直接或间接地对孕期胎儿情况进行检测，继而采取一些必要的措施防止严重遗传病、先天性畸形和智力障碍患儿的出生，提高人口素质。目前，文献中报道的能用[/font][font=微软雅黑][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]进行产前诊断的疾病包括甲级丙二酸血症、丙酸血症、酪氨酸血症及其他一些有机酸血症。检测的样本可来自羊水、母亲尿液等。[/font][/font][font=Calibri] [/font]

跪求各位老大，胆固醇的速检方法，本人新手，多多指教

固相萃取柱的类型及应用 硅胶的填料(60A，40um)类型填料应用ODS（C18） 硅胶上键合十八烷基 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲苯酸取代酯,苯酚, 邻苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,茶碱,水溶性维生素。 Octyl (C8) 硅胶上键合辛烷 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲基酸取代酯,苯酚,邻 苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,水溶性维生素。 Ethyl (C2)硅胶上键合乙基 相对C18和C8，因为短链，保持作用小的多,适合非极性化合物。 Phenyl 硅胶上键合苯基 相对C18和C8，反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物 　Silica 无键合硅胶 极性化合物萃取,如乙醇，醛,胺,药物,染料，锄草剂,农药,酮,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 Cyano(CN) 硅胶上键合丙氰基烷 反相萃取,适合于中等极性的化合物,正相萃取,适合于极性 化合物,比如,黄曲霉毒素,抗菌素,染料,锄草剂,农药,苯酚,类 固醇。弱阳离子交换萃取,适合于碳水化合物和阳离子化合物。 Amino(NH2) 硅胶上键合丙氨基 正相萃取,适合于极性化合物。弱阴离子交换萃取,适合于 碳水化合物,弱性阴离子和有机酸化合物。 Strong Anion Exchange(SAX) 硅胶上键合卤化季氨盐 强阴离子交换萃取,适合于阴离子,有机酸,核酸,核苷酸, 表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。 Strong Cation Exchange(SCX) 硅胶上键合磺酸钠盐 强阳离子交换萃取,适合于阳离子,抗菌素,药物,有机碱,氨基酸,儿茶酚胺,锄草剂,核酸碱,核苷,表面活化剂。容量:0.2毫 当量/克。 AL2O3填料 类型填料应用Alumina A(acidic)酸性 PH ~5 极性化合物离子交换和吸附萃取,如维生素. Alumina B(basic) 碱性 PH~8.5 吸附萃取和阳离子交换。 Alumina N(neutral) 中性 PH~6.5 极性化合物吸附萃取。调节pH,阳和阴离。 子交换.适合于维生素,抗菌素,芳香油,酶,糖苷,激素 Florisil填料-硅酸镁 类型填料应用Florisil 极性化合物的吸附萃取,如乙醇,醛,胺,药物,染料,锄草剂,农药,PCBs,酣,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 类型填料应用EVIDEXII(Drugs of Abuse辛烷和阳离子交换树脂 Amphetamina/Methamphetamine、 PCP、Benzoylecgonine、 Codeine/Morphine、 THC-COOH(Marijuana)

固相萃取柱的类型及应用类型 　　填料 应用 硅胶的填料(60A，40um)ODS（C18） 硅胶上键合十八烷基 　反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲苯酸取代酯,苯酚, 邻苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,茶碱,水溶性维生素。 Octyl (C8) 硅胶上键合辛烷 　 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗 菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲酸取代酯,苯酚,邻 苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,水溶性维生素。 Ethyl (C2) 硅胶上键合乙基 相对C18和C8，因为短链，保持作用小的多,适合非极性化合物。 Phenyl 硅胶上键合苯基 相对C18和C8，反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合 物, Silica 无键合硅胶 　极性化合物萃取,如乙醇，醛,胺,药物,染料，锄草剂,农 药,酮,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 Cyano(CN) 硅胶上键合丙氰基烷 　反相萃取,适合于中等极性的化合物,正相萃取,适合于极性 化合物,比如,黄曲霉毒素,抗菌素,染料,锄草剂,农药,苯酚,类 固醇。弱阳离子交换萃取,适合于碳水化合物和阳离子化合物。 Amino(NH2) 硅胶上键合丙氨基 　 正相萃取,适合于极性化合物。弱阴离子交换萃取,适合于 碳水化合物,弱性阴离子和有机酸化合物。 Strong Anion Exchange(SAX) 硅胶上键合卤化季氨盐 　　强阴离子交换萃取,适合于阴离子,有机酸,核酸,核苷酸, 表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。 Strong Cation Exchange(SCX) 硅胶上键合磺酸钠盐 　 强阳离子交换萃取,适合于阳离子,抗菌素,药物,有机碱,氨基酸,儿茶酚胺,锄草剂,核酸碱,核苷,表面活化剂。 容量:0.2毫 当量/克。 AL2O3填料 Alumina A(acidic) 酸性 PH ~5 极性化合物离子交换和吸附萃取,如维生素. Alumina B(basic) 碱性 PH~8.5 吸附萃取和阳离子交换。 Alumina N(neutral) 中性 PH~6.5 　 极性化合物吸附萃取。调节pH,阳和阴离。子交换.适合于维生素,抗菌素,芳香油,酶,糖苷,激素 Florisil填料-硅酸镁　Florisil 极性化合物的吸附萃取,如乙醇,醛,胺,药物,染料,锄草 剂,农药,PCBs,酣,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 用于NIDA-5所要求的五种毒 品代谢物分析EVIDEXII(Drugs of Abuse) 辛烷和阳离子交换树脂 　Amphetamina/Methamphetamine、 PCP、Benzoylecgonine、 Codeine/Morphine、 THC- COOH(Marijuana)

[color=#333333]类胡萝卜素能防止[/color][color=#333333]“[/color][color=#333333]坏[/color][color=#333333]”[/color][color=#333333]胆固醇的氧化，保护血管，避免斑块和血管病变的产生。黄色、绿色、红色果蔬都是类胡萝卜素的优质来源，比如木瓜、芒果、西红柿、南瓜、红薯、胡萝卜等。[/color]

中国卫生部8月15日下午就“圣元奶粉疑致儿童性早熟”调查结果举行了发布会，中国卫生部新闻发言人、卫生部办公厅副主任邓海华通报调查结果，检测结果符合国内外文献报道的含量范围。目前市场上抽检的圣元奶粉和其他婴幼儿奶粉激素含量没有异常。 邓海华说，检测结果表明，42份圣元奶粉中未检出己烯雌酚和醋酸甲孕酮等禁用的外源性性激素，内源性雌激素(17β-雌二醇和雌酮)和内源性孕激素(孕酮和17α-羟孕酮)的检出值分别为0.2-2.3μg/kg和13-72μg /kg，其中患儿家中存留样品雌激素和孕激素检出值分别为0.5μg/kg和33μg/kg。检测结果符合国内外文献报道的含量范围。详情参考[url=http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100809/2708809/]三聚氰胺续集：奶粉又爆“激素门”！——圣元奶粉“激素门”事件追踪贴！[/url]

固相萃取(SPE)被日趋认为是一个非常有用的样品处理技术，专门用来进行分析前的 样品纯化和浓缩。使用固相萃取法能避免液-液萃取所代来的许多问题,比如,易于乳化， 不完全的相分离,较低的定量分析回收率,昂贵易碎的玻璃器皿和大量的有机废液。与液- 液萃取相比,固相萃取更有效,容易达到定量萃取,快速和自动化,同时也减少了溶剂用量和 工作时间。 固相萃取(SPE)通常是用于液体样品的准备和不易或不挥发样品的萃取,但是 也用于能预先提取到溶液里的固体样品。固相萃取产品对样品的萃取,浓缩和净化都非常好。 它们提供给您多种的化学性质,吸附剂类型和大小。针对您的需要及样品性质,选择适当的产 品是非常重要的。 固相萃取柱的类型及应用 硅胶的填料(60A，40um) 　 ODS（C18） 硅胶上键合十八烷基 　反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性, 维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲苯酸取代酯,苯酚, 邻苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,茶碱 ,水溶性维生素。 Octyl (C8) 硅胶上键合辛烷 　 反相萃取,适合于非极性到中等极性的化合物,比如,抗 菌素, 巴比妥酸盐,酞嗪,咖啡因,药物,染料,芳香油,脂溶性维生素,杀 真菌剂,锄草剂,农药,碳水化合物,对羟基甲基酸取代酯,苯酚,邻 苯二甲酸酯,类固醇,表面活化剂,水溶性维生素。 Ethyl (C2) 硅胶上键合乙基 相对C18和C8，因为短链，保持作用小的多,适合非极性化合物。 Phenyl 硅胶上键合苯基 相对C18和C8，反相萃取,适合于非极性到中等极性的化物, Silica 无键合硅胶 　极性化合物萃取,如乙醇，醛,胺,药物,染料，锄草剂,农药,酮,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇 Cyano(CN) 硅胶上键合丙氰基烷 　反相萃取,适合于中等极性的化合物,正相萃取,适合于极性 化合物,比如,黄曲霉毒素,抗菌素,染料,锄草剂,农药,苯酚,类 固醇。弱阳离子交换萃取,适合于碳水化合物和 阳离子化合物。 Amino(NH2) 硅胶上键合丙氨基 　 正相萃取,适合于极性化合物。弱阴离子交换萃取,适合于 碳水化合物,弱性阴离子和有机酸化合物。 Strong Anion Exchange(SAX) 硅胶上键合卤化季氨盐 　　强阴离子交换萃取,适合于阴离子,有机酸,核酸,核苷酸, 表面活化剂。容量:0.2毫当量/克。 Strong Cation Exchange(SCX) 硅胶上键合磺酸钠盐 　 强阳离子交换萃取,适合于阳离子,抗菌素,药物,有机碱,氨基酸,儿茶酚胺,锄草剂,核酸碱,核苷,表面活化剂。 容量:0.2毫 当量/克。 AL2O3填料 Alumina A(acidic) 酸性 PH ~5 极性化合物离子交换和吸附萃取,如维生素. Alumina B(basic) 碱性 PH~8.5 吸附萃取和阳离子交换。 Alumina N(neutral) 中性 PH~6.5 　 极性化合物吸附萃取。调节pH,阳和阴离。 子交换.适合于维生素,抗菌素,芳香油,酶,糖苷,激素 Florisil填料-硅酸镁 Florisil 　 极性化合物的吸附萃取,如乙醇,醛,胺,药物,染料,锄草剂,农药,PCBs,酣,含氮类化合物,有机酸,苯酚,类固醇

大家好，我现在在做 纸浆中的 胆固醇酯类和甘油三酯类 物质的GC-MS 检测，用的柱子是安捷伦公司的 DB-5HT，目前一直很苦恼如何对纸浆样品进行预处理，直接跑好像样品无法完全气化？。。还有同学老师们帮忙解答，感激不尽 Thank you so much!!(另外，像胆固醇标样和油酸胆固醇酯类标样可以直接检测吗？酯的沸点有六百多度，好像很困难，不知道有什么衍生化的方法。。)

鸡蛋加强营养和商业价值的面食，因此许多国家都建立了最低限度鸡蛋含量水平（基于要么计数或重量）的面食和其他蛋产品。虽然鸡蛋含量标准已建立，方法通常不指明和一些程序可以适用。胆固醇的方法往往是用来验证产品要求在标签上应与蛋 但是，由于胆固醇可添加使用非卵子来源，其存在本身是一个可靠的标志，鸡蛋的内容。此外，即使卵子来源的胆固醇的产品，很难定量相关内容，以各级鸡蛋，因为胆固醇水平的发现鸡蛋中自然是充满变数。该方法在这里允许使用甘油酯，除了胆固醇，评估内容的鸡蛋面条。这种方法提供了色谱分离胆固醇， diglycerides ，和甘油三酸脂，使欺诈（非蛋）来源的胆固醇容易和准确确定，因此定性和定量的比较可以。 &：简单的提取方法&：易于识别伪造产品总之，估计胆固醇的食品往往是部分验证测试的标签要求有关鸡蛋的内容。然而，在场的情况下胆固醇的产品可能是由于非蛋源，以及自然变异的胆固醇含量鸡蛋中进一步复杂化定量的结论。该方法在这里显示simplfies欺诈检测纳入甘油酯测试。比较容易的色谱概况，蛋和蛋产品（面食）样品可以使用RTX公司 - 65TG栏，这是专门测试，以保证良好的分离和可靠的性能甘油酯 高比科技 13691497252 侯先生 希望对大家有所帮助 具体可以链接：http://www.restek.com/aoi_fff_A018.asp[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=120323]鸡蛋制品，色谱分离胆固醇， diglycerides ，和甘油三酸脂等方法[/url]

预防胆固醇水平超标，建议少吃动物内脏、肥肉等胆固醇含量较高的食物，多吃新鲜水果和蔬菜、杂粮、豆类等。

做胆固醇时前处理需要皂化，皂化的目的是什么，皂化装置是一个烧瓶和冷凝装置吗？提取过程为何说三次有机溶剂合并一起，意思是包含皂化过程中的有机溶剂吗？望路过的指点。