病毒核酸提取

目前，临床上针对新型冠状病毒的实验室检测主要是SARS-CoV-2病毒核酸和血清特异性抗体检测。核酸检测，是指通过特殊的技术手段检测临床样本中是否存在特定的病原体核酸，从而诊断患者的感染原因。此次新冠病毒是单链RNA病毒，根据《新冠病毒感染的肺炎诊疗方案（试行第七版）》（下文简称诊疗方案）建议，针对疑似病例的确诊，需要具备以下病原学证据之一者，即为确诊病例：1. 实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性；2. 病毒基因测序，与已知的新型冠状病毒高度同源；3. 血清新型冠状病毒特异性IgM抗体和IgG抗体阳性；血 清新型冠状毒特异性IgG抗体由阴性转为阳性或恢复期较急性期4倍及以上升高。诊疗方案中提到了三种检测方式，其中实时荧光RT-PCR和基因测序都属于核酸检测，需要进行核酸提取。新冠病毒核酸检测是临床诊断的“金标准”， 患者鼻咽拭子、痰、纤维支气管镜灌洗液、血液、肛门拭子、粪便等标本核酸检测阳性，说明其感染了新冠病毒，而且具有传染性。目前新冠病毒检测中核酸提取一般通常使用两种方式：手工提取和仪器提取。病毒核酸提取试剂盒采用具有独特分离作用的磁珠和缓冲液系统，专为快速、高度敏感,有效的从血清、鼻咽拭子样本中提取病毒DNA、RNA而研制，磁珠在一定条件下对核酸具有很强的亲和力，并且在条件改变时，磁珠与其吸附的核酸分离，能够达到快速分离纯化核酸的目的，产品提取出的核酸能够满足下游各种分子生物学实验检测，例如PCR扩增等。荧光定量PCR是临床分子检测中常用的检测方法，病毒核酸提取方法的选择对于最终的检测结果的影响非常重要。在以往采用RT-PCR对病毒核酸进行的检测中，磁珠法是较为常用的核酸提取方法，普遍认为其对病原体的核酸提取具有简便、高效、提取浓度及纯度较高等优势。此外因各实验室条件不同及针对的病毒的试剂盒不同，离心柱法、煮沸裂解法等也在临床大量应用。不同的病毒核酸提取方法因其提取产物浓度、纯度的差别以及对RNA的保护程度不同，将在一定程度上影响病毒核酸尤其是临界阳性样本的核酸检出。磁珠法手工提取病毒核酸主要设备有：冰箱、超低温冰箱、高速冷冻离心机、混匀器、微量加样器(0.2-1000ul)、磁力架、无菌无酶吸头、移动紫外灯、水浴锅或金属浴、生物安全柜等。无菌无酶吸头系列磁力架（货号DTCLJ-20）核酸提取仪病毒核酸医院检验科在进行新冠病毒检测时通常面临着大量的待检测样本需要短时间出来完成报告结果，因此自动化、高通量的核酸提取仪已经变得极为迫切。LunAmple全自动核酸提取纯化仪高通量提取 ---- 每次提取可根据需要选择1-72个样本人性化界面 ---- 触屏加按键式直接操作，无需连接电脑简单易用自由编辑 ---- 可自行编辑所需程序或预设保存，快速便捷结果稳定 ---- 提取灵敏度高，重复性好，核酸质量高安全可靠 ---- 配备紫外灭菌功能，减少与有害试剂的接触防止污染 ----内置独家去除核酸气溶胶装置，保护样本不被污染核酸提取制备的整体步骤

2019年12月以来，湖北省武汉市陆续发现多例新型冠状病毒感染的肺炎患者，根据国家卫健委发布的《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案（试行版第五版）》，实验室检查在鼻咽拭子、痰液、下呼吸道分泌物、血液等标本种可检测出病毒核酸，确诊依据之一为呼吸道标本或血液标本实时荧光定量RT-PVR检测SARS-CoV-2核酸阳性，检测流程如下： 由于新冠病毒传染性极强，因此在核酸检测过程中安全性问题尤为重要，已有报道检验人员疑因实验过程中气溶胶感染SARS-CoV-2，海尔生物医疗提供可完全在生物安全柜内使用的核酸提取仪，最大程度保护环境及医技人员，比手工试剂盒更快更便捷。 目前核酸检测一度受到质疑，怀疑其有假阴性出现，假阴性的出现与病毒拷贝数有直接关系，对于同一份样本来说，与试剂及仪器的灵敏度准确度有极大关系，从核酸提取环节来说，就要求可以从样本中提取微量的优质RNA，海尔生物医疗提供得率高、纯度高的低压加压膜法自动核酸提取仪，快速简单易上手。l 仪器设备及试剂盒搭配方案：类型自动化方案手工辅助型方案产品名称QuickGene-AutoS RNA Tissue Kit QuickGene RNA tissue kit S II 型号AS-RTRT-S2规格48prep96prep方法学膜法膜法配套仪器QuickGene-Auto12S/24sQuickGene-Mini80/Mini480仪器性能无需离心，减少气溶胶，样本空气暴漏时间短，膜法提取快速质优无需离心，减少气溶胶，可放安全柜内，更安全，比普通手工试剂盒更快速便捷另有更多32、96通量核酸提取方案、荧光定量（四通道以上）PCR检测方案，以及SARS-CoV-2感染样本运、检、存、生物安全的全场景方案。

病毒DNA&RNA共提取试剂盒是新芝生物为配合NP-2032全自动核酸提取仪实现更好的纯化效果而推出的试剂产品。这款试剂盒配套全自动核酸提取仪，可以实现高度自动化，在保证实验结果的前提下，减轻实验人员操作负担，有效保障实验人员操作安全并提高样品处理效率。试剂 产品备案号：浙杭械备20200879号生产备案号：浙杭食药监械生产备20200114号 仪器 产品备案号：浙甬械备20200139号生产备案号：浙宁食药监械生产备20150052号 特点一 适用样本范围广 特点二：DNA和RNA病毒核酸通用型试剂盒，无需另外采购 特点三：操作便捷样本直接上样，调用内置程序，直接运行即可获得高质量核酸溶液 特点四：核酸高质量，实验结果优异2019-nCOV参考品经不同品牌试剂盒提取纯化后,产物扩增结果 特点五：结果稳定且重复性好HBV参考品（200 IU/ml）经NP-2032提取后的产物扩增曲线，重复提取32个样本，检测率32/32 详询各地办事处。更多新品即将发布，尽情期待！ ▼End

2020庚子鼠年有一个不一样的开场，一场新冠病毒性肺炎疫情牵动着国人的心。目前，疫情防控工作正进入攻坚阶段。早发现、早隔离、早治疗正是有效控制疫情发展的有效举措。根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第五版 修正版）》，新冠肺炎确诊标准之一是新型冠状病毒核酸检出阳性。然而近期媒体报道，在疑似患者人群中，新冠病毒核酸检出阳性率低于50%，导致多数患者不能得到确诊。这可能与样本采集、核酸提取和RT-PCR等多环节的质控密切相关，而核酸提取作为检测流程中非常重要的环节，其良好的性能对检测结果至关重要。全面的核酸提取解决方案珀金埃尔默专业的chemagen技术在核酸提取方面的优势有目共睹：一、安全专利M-PVA亲水性磁珠，提取全流程在室温条件下进行，无需加热，在保证核酸高得率与高纯度的同时，有效防止加热可能导致的气溶胶污染。二、高效专利的电磁分离技术，可实现独有的磁棒自旋转式混匀，充分混匀反应体系，液面平稳，有效避免孔间交叉污染。三、省力内置自动化分液器，提取过程中自动添加试剂，大大减少手工操作时间。四、灵活多种机型可选，灵活的提取通量，可实现提取1-192样本/批Chemagic Prepito-D自动核酸提取仪Prepito-D是一款桌面式小型自动化核酸提取仪，批处理通量为1~12，可对血液、血浆、咽拭子、唾液、组织等多种类型的样本进行自动化的核酸提取，提取过程中，试剂通过内置分液器进行自动添加。Chemagic 360 自动核酸提取仪Chemagic360是基于电磁原理进行磁珠分离的高通量自动化核酸提取仪，可从各种类型样本中提取核酸，通过金属棒自我旋转混匀而不是上下震荡方式进行反应体系的混匀，可以有效降低样本间交叉污染的风险；该系统规格为：90cm*90cm*95cm，内置自动分液器，除样本和部分小体积试剂需要手工加入提取体系之外，其余核酸提取试剂均自动加入，可大大减少手工操作时间。三个规格（12、24与96）提取头可选，可实现1~96个/批次，可处理10μL~10mL的原始样本，单孔反应体系1.5mL~40mL，真正实现大体积样品核酸提取。内置控制电脑，触摸屏操作。Chemagic Prime 全自动核酸提取与体系构建系统Chemagic Prime是PerkinElmer JANUS自动化液体处理工作站与Chemagic 360自动核酸提取仪的完美整合，可以实现高通量无人值守的自动化核酸提取。除了兼具Chemagic 360的所有性能特点之外，Chemagic Prime可以实现不同规格原始样本管上机，自动化条码扫描，试剂分装及提取产物的转移、分装、浓度均一化等操作，还可以自动化构建PCR反应体系。可并行处理2块96孔板，是一款真正高通量无人值守的全自动化核酸提取设备。仪器与配套提取试剂盒信息另外，PerkinElmer自动化机器人整合系统（ARS），可整合存储板栈、JANUS G3液体处理工作站、chemagic 360自动核酸提取仪、封膜机以及主流荧光定量PCR仪，实现样本从原始管上样、核酸提取到RT-PCR检测全流程的无人值守式自动化检测方案，通量更高，有效提高样本检测效率，保护实验人员免于感染风险。自动化机器人整合系统（ARS）全力支持各地的公共卫生、医疗部门及科研院校使用核酸提取技术是珀金埃尔默积极抗击新冠肺炎疫情的承诺。我们将时刻做好准备，与疫情抗争，赢得这场新冠战“疫”。

8月4日，中国海关科学技术研究中心公开招标购买一批新冠病毒核酸提取及检测试剂，预算350万元。　　项目编号：HG21GK-A0000-D043　　项目名称：中国海关科学技术研究中心2021-2022年新冠病毒核酸提取及检测试剂公开招标采购项目　　预算金额：350.0000000 万元(人民币)　　采购需求：　　行业类型：工业包号品目货物名称预估采购数量（万人份）预估预算总价（万元）交货时间交货地点主要技术要求0101核酸提取纯化试剂盒1070详见第四部分项目需求书海关指定地点技术指标详见第四部分项目需求书02（核心产品）新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）A1013503新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）B23004新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（荧光PCR法）D10115　　注：1、投标人必须对所投标包中的所有货物进行投标，不允许拆包投标。　　2、针对同一包，一个投标人不得提交两个或两个以上不同的投标文件或投标报价。　　3、本项目02品目为核心产品，其中品目02、品目03、品目04须为不同品牌产品。　　合同履行期限：。　　本项目( 不接受 )联合体投标。　　开标时间：2021年08月31日 09点00分(北京时间)

专为传染病检测、病毒核酸提取的专业打造；疾控中心和检验科医师的私人定制产品，市场首款的72通量产品LunAmple系列核酸提取纯化仪采用磁珠分离技术，通过利用磁棒和磁棒套的配合运动，将吸附有核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内，再利用磁棒套反复快速地搅拌液体，充分混匀反应液体系，经过样本裂解、核酸吸附、清洗与洗脱，最终得到纯净的核酸。核酸提取纯化过程主要包括以下几个步骤：裂解：将样本加入到裂解液中，充分混合，使核酸充分释放；吸附：在样品裂解液中加入磁珠，充分混合，使核酸吸附到磁珠表面；洗涤：将结合了核酸的磁珠收集并转移到洗涤缓冲液中，反复洗涤，除去蛋白与糖类等杂质；洗脱：将磁珠转移到洗脱缓冲液中充分混合，靠加热提供合适的洗脱温度，核酸即从磁珠表面脱落并溶入到洗脱缓冲液中用途范围：下游实验应用（如荧光定量PCR及二代测序等）的关键因素取决于高品质核酸模板的提取纯化制备。DenoGen系列核酸提取纯化仪可提供高品质的提纯结果，且操作简便，满足您实验工作的自动化需求。该仪器可广泛用于常规科研、医学检验、疾病预防与控制、食品安全、法医等领域。适用样本：创新点：专为病毒核和传染病领域打造，市场上第一款商用病毒全自动核酸提取纯化仪；检测速度快18分钟即可完成72个样品提取；仪器装有专业去除核酸气溶胶污染清除装置，从源头解决样本污染问题；德诺杰亿-病毒全自动核酸提取纯化仪-Lunample X72

基本信息 关键内容： 病毒免疫分析,生物安全柜,离心机,核酸提取仪,旋涡混合器,大分子作用仪 开标时间： 2022-01-28 09:30 采购金额： 260.20万元 采购单位： 北京地坛医院 采购联系人： 牛磊 采购联系方式： 立即查看 招标代理机构： 中招国际招标有限公司 代理联系人： 罗会京 代理联系方式： 立即查看 详细信息 北京地坛医院生物安全柜等招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2022-01-07 招标单位: 正在招标 招标产品:,,,,,, 招标编号:JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001 北京地坛医院生物安全柜等招标公告 2022-01-07 16:33:36 【北京地坛医院生物安全柜等招标公告】，招标编码为【JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001】，招标项目内容包括【生物安全柜、超净台、台式高速冷冻离心机、-80度冰箱、全自动核酸提取仪、全自动医用PCR分析系统、多用途涡旋混合器】，投标截止到【2022-01-28 09:30】，欢迎合格的供应商前来投标 项目编号： JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001 项目名称：研究型病房设备购置项目 一、采购需求：(预算金额：260.2 万元(人民币)) 包号 设备名称 数量 分项预算（万元） 预算（万元） 1 干式荧光分析仪 1 5 145 全自动医用PCR分析系统1 1 75 全自动医用PCR分析系统2 1 30 全自动核酸提取仪 1 35 3 10-30度药品恒温箱 4 6 115.2 -20度冰箱 2 8 -80度冰箱 6 48 超净台 2 6 多用途涡旋混合器 4 3.2 加样器100-1000ul 10 2 快速血糖测定仪 2 10 生物安全柜 2 12 台式高速冷冻离心机 2 20 包2和包1中的全自动核酸提取仪国产，企业允许进口。 合同履行期限：合同签订之日起至质保期结束。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 按照《中华人民共和国政府采购法》及《中华人民共和国政府采购法实施条例》等相关法规要求，本项目执行中小企业、监狱企业、残疾人福利企业等政府采购政策，政府采购优先采购节能产品和环境标志产品。 3.本项目的特定资格要求： 1) 投标人须是在中华人民共和国境内注册，能够独立承担民事责任，有提供本项目服务能力的本国供应商，包括法人、非法人组织或者自然人 2) 投标人须具有相应的生产或经营许可文件 3) 单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动 4) 除单一来源采购项目外，为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得再参加该采购项目的其他采购活动。同一供应商可以同时承担项目的整体设计、规范编制和项目管理、监理、检测等服务 5) 根据财库〔2016〕125号《财政部关于在政府采购活动中查询及使用信用记录有关问题的通知》的要求，通过“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)和中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)查询相关主体信用记录，查询时间为招标文件购买截止时点至投标截止时点后12个小时内。对列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商，拒绝其参与政府采购活动 6) 投标人须购买本项目的招标文件并登记备案 7) 投标人须具备《中华人民共和国政府采购法》第二十二条关于供应商条件的规定，遵守国家、本项目采购人本级和上级财政部门政府采购的有关规定。 8) 本项目不接受联合体投标。 9) 投标人不得将本项目进行分包、转包 10) 法律、行政法规规定的其他条件。 三、获取招标文件 时间：2022-01-07 至 2022-01-14 ，每天上午09:00至11:30，下午13:30至16:30(北京时间，法定节假日除外) 电子邮箱：luohuijing@cntcitc.com.cn。 方式： 本项目线上领取标书，相关操作如下： (1)办理CA认证证书，详见北京市政府采购电子交易平台(http://zbcg-bjzc.zhongcy.cn/bjczj-portal-site/index.html)查阅“用户指南”—“操作指南”—“市场主体CA办理操作流程指引”，按照程序要求办理。 (2)于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”—“操作指南”—“市场主体注册入库操作流程指引”进行自助注册绑定。 (3)招标文件获取方式：供应商按照规定办理CA数字认证证书后，自招标公告发布之日起持供应商自身数字证书登录北京市政府采购电子交易平台免费获取电子版招标文件。 (4)下载时间：2022年1月7日至2022年1月14日16:30。 (5)未按上述获取方式和期限下载招标文件的投标无效。 (6)证书驱动下载： 于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”—“工具下载”—“招标采购系统文件驱动安装包”下载相关驱动。 CA认证证书服务热线010-58511086 技术支持服务热线010-86483801 注意：请供应商认真学习北京市政府采购电子交易平台发布的相关操作手册。 售价：￥0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2022-01-28 09:30(北京时间) 地点：中招国际招标有限公司会议室(北京市海淀区学院南路62号中关村资本大厦6层)。 五、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：首都医科大学附属北京地坛医院 地址：北京市朝阳区京顺东街8号 联系方式：牛磊,84322173 2.采购代理机构信息 名 称：中招国际招标有限公司 地 址：北京市海淀区学院南路62号中关村资本大厦6层 联系方式：罗会京、李艳君、崔健、侯云燕，010-62108111、8131 3.项目联系方式 项目联系人：罗会京、李艳君、崔健、侯云燕 电 话：010-62108111、8131 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容：病毒免疫分析,生物安全柜,离心机,核酸提取仪,旋涡混合器,大分子作用仪 开标时间：2022-01-28 09:30 预算金额：260.20万元 采购单位：北京地坛医院 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：中招国际招标有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 北京地坛医院生物安全柜等招标公告 北京市-海淀区 状态：公告 更新时间： 2022-01-07 招标单位: 正在招标 招标产品:,,,,,, 招标编号:JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001 北京地坛医院生物安全柜等招标公告 2022-01-07 16:33:36 【北京地坛医院生物安全柜等招标公告】，招标编码为【JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001】，招标项目内容包括【生物安全柜、超净台、台式高速冷冻离心机、-80度冰箱、全自动核酸提取仪、全自动医用PCR分析系统、多用途涡旋混合器】，投标截止到【2022-01-28 09:30】，欢迎合格的供应商前来投标 项目编号： JBZC2021_193316_302-JH0036-XM001 项目名称：研究型病房设备购置项目 一、采购需求：(预算金额：260.2 万元(人民币)) 包号 设备名称 数量 分项预算（万元） 预算（万元） 1 干式荧光分析仪 1 5 145 全自动医用PCR分析系统1 1 75 全自动医用PCR分析系统2 1 30 全自动核酸提取仪 1 35 3 10-30度药品恒温箱 4 6 115.2 -20度冰箱 2 8 -80度冰箱 6 48 超净台 2 6 多用途涡旋混合器 4 3.2 加样器100-1000ul 10 2 快速血糖测定仪 2 10 生物安全柜 2 12 台式高速冷冻离心机 2 20 包2和包1中的全自动核酸提取仪国产，企业允许进口。 合同履行期限：合同签订之日起至质保期结束。 本项目不接受联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 按照《中华人民共和国政府采购法》及《中华人民共和国政府采购法实施条例》等相关法规要求，本项目执行中小企业、监狱企业、残疾人福利企业等政府采购政策，政府采购优先采购节能产品和环境标志产品。 3.本项目的特定资格要求： 1) 投标人须是在中华人民共和国境内注册，能够独立承担民事责任，有提供本项目服务能力的本国供应商，包括法人、非法人组织或者自然人 2) 投标人须具有相应的生产或经营许可文件 3) 单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动 4) 除单一来源采购项目外，为采购项目提供整体设计、规范编制或者项目管理、监理、检测等服务的供应商，不得再参加该采购项目的其他采购活动。同一供应商可以同时承担项目的整体设计、规范编制和项目管理、监理、检测等服务 5) 根据财库〔2016〕125号《财政部关于在政府采购活动中查询及使用信用记录有关问题的通知》的要求，通过“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)和中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)查询相关主体信用记录，查询时间为招标文件购买截止时点至投标截止时点后12个小时内。对列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单的供应商，拒绝其参与政府采购活动 6) 投标人须购买本项目的招标文件并登记备案 7) 投标人须具备《中华人民共和国政府采购法》第二十二条关于供应商条件的规定，遵守国家、本项目采购人本级和上级财政部门政府采购的有关规定。 8) 本项目不接受联合体投标。 9) 投标人不得将本项目进行分包、转包 10) 法律、行政法规规定的其他条件。 三、获取招标文件 时间：2022-01-07 至 2022-01-14 ，每天上午09:00至11:30，下午13:30至16:30(北京时间，法定节假日除外) 电子邮箱：luohuijing@cntcitc.com.cn。 方式： 本项目线上领取标书，相关操作如下： (1)办理CA认证证书，详见北京市政府采购电子交易平台(http://zbcg-bjzc.zhongcy.cn/bjczj-portal-site/index.html)查阅“用户指南”—“操作指南”—“市场主体CA办理操作流程指引”，按照程序要求办理。 (2)于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”—“操作指南”—“市场主体注册入库操作流程指引”进行自助注册绑定。 (3)招标文件获取方式：供应商按照规定办理CA数字认证证书后，自招标公告发布之日起持供应商自身数字证书登录北京市政府采购电子交易平台免费获取电子版招标文件。 (4)下载时间：2022年1月7日至2022年1月14日16:30。 (5)未按上述获取方式和期限下载招标文件的投标无效。 (6)证书驱动下载： 于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”—“工具下载”—“招标采购系统文件驱动安装包”下载相关驱动。 CA认证证书服务热线010-58511086 技术支持服务热线010-86483801 注意：请供应商认真学习北京市政府采购电子交易平台发布的相关操作手册。 售价：￥0 元，本公告包含的招标文件售价总和 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 2022-01-28 09:30(北京时间) 地点：中招国际招标有限公司会议室(北京市海淀区学院南路62号中关村资本大厦6层)。 五、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：首都医科大学附属北京地坛医院 地址：北京市朝阳区京顺东街8号 联系方式：牛磊,84322173 2.采购代理机构信息 名 称：中招国际招标有限公司 地 址：北京市海淀区学院南路62号中关村资本大厦6层 联系方式：罗会京、李艳君、崔健、侯云燕，010-62108111、8131 3.项目联系方式 项目联系人：罗会京、李艳君、崔健、侯云燕 电 话：010-62108111、8131

10copies/mL！EmagPure-96plus“大转小”重新定义核酸提取仪超高灵敏度从2019年底疫情初期到现在，多轮筛查、假阴性、无症状病毒携带者、“14+7”超长隔离期、工作生活各种不便，经常是由于低病毒载量的不可检出性。目前常规新冠病毒核酸检测限为300-500copies/mL,如何更早更筛查出人群中低病毒载量及无症状病毒携带者、让生活尽早恢复常态化？医脉赛科技特别推出专利研发的核酸提取仪EmagPure-96plus,该仪器其独特的“大转小”功能就能完全解决以上“大海捞针”的困惑，让低浓度的核酸病毒无处遁形；EmagPure-96plus仪器可以通过利用大体积15mL深孔板，配以大磁头（强磁吸磁珠）在进行完全裂解洗涤后，转而采用小磁头吸取磁珠转移到小体积50μL或100μL的收集管中进行洗脱，轻松一步“大转小”实现了大体积低浓度样本到小体积高浓度洗脱液的转换，极大解决了灵敏度低、实验假阴性的可能，让我们更早一步发现，更早一步解决，尽早切断病毒传播链！使一切变得更有序！通过系列的实验数据表明：使用医脉赛科技EmagPure-96plus高通量多功能的核酸提取仪、医脉赛病毒保存管、核酸提取试剂盒，配以“大转小”独特专利技术，其荧光定量PCR仪检测结果表明大大提高了检出限，可检测病毒载量低至5-10copies/mL，较目前的常规检测灵敏度提高10-30倍,让病毒无处躲藏。从以上实验数据我们可以发现：搭载“大转小”专利技术的EmagPure-96plus大大提高了检测灵敏度，使我们能够更早一步发现“真相”；EmagPure-96plus不仅在提高灵敏度方面有卓越的表现，对于有高通量检测需求的客户来说EmagPure-96plus其双磁头的超强配置（15分钟完成192个单一样本），更能让我们在有限的时间检测更多的样本，一天上万已经触手可及；实现了真正意义上的高通量！医脉赛科技通过不断的创新和研发，广泛服务于疾病防控、临床诊断、出入境检验检疫、法医、科研等领域，我们力求为核酸检测，蛋白纯化提供更多优质高效的解决方案！“此实验所用到的试剂和仪器关于医脉赛医脉赛科技于2010年在上海张江由海归专家团队创建，并在浙江嘉善建立了2000多平米的标准化研发/生产基地。专注于磁性纳米微球技术在生物医药领域的应用和创新；截止2020年已自主研发并上市6大系列40余种产品，包括全线磁珠法提取试剂盒、蛋白纯化纳米磁珠、各种功能化磁珠、化学发光磁珠、病原体/微生物保存管，32/96/192通量全自动核酸/蛋白提取仪，具备完善的医疗器械生产管理、质量体系；拥有10万级洁净自动化试剂盒生产流水线车间、生物安全室；核心技术已取得10余项国内国际专利证书，20余个中国、欧洲、美国医疗器械注册证。医脉赛科技的产品线已能覆盖所有临床样本的前处理，包括传染病检测、肿瘤筛查、遗传病检测、核酸提取和富集等，医脉赛科技坚持为科研、医院系统，疾控系统，医检所、和动物疾控及养殖等行业提供更为简捷、绿色、环保、安全、样本纯化富集产品及解决方案。

近年来，随着非洲猪瘟、禽流感等疫情的时有爆发，以及人们对宠物健康的不断关注，动物疫病检测逐渐受到重视。不管是世界粮农组织，还是我国农业农村部公布的政策指南或诊断标准，核酸检测都是动物疫病确诊的重要标准。产品性能全面升级在动物疫病的分子诊断中，核酸提取是检测环节的重要步骤，核酸提取的质量和效率直接影响着检测结果的精准性。为了更好满足动物疫病防控需要，天隆科技将动物病毒DNA/RNA快速提取试剂全面升级，更快速，更简便，更高效、更精准！现有试剂配合天隆自动化提取设备，可在10分钟左右，从鼻咽拭子、环境样本等样本中快速、高效提取非洲猪瘟病毒、猪蓝耳病、禽流感等病毒DNA/RNA，助力动物疫病防控。产品优势操作省力：预封装升级，只需一步加样，即可置于仪器内提取体系升级：400uL上样量，提升弱阳性检出率提取快速：仅需10分钟，即可获得高质量核酸高效灵敏：100copies/mL病毒载量样本轻松提取相关数据不同浓度阳性样本的检测CT均值（使用不同厂家提取试剂，相同厂家的PCR仪+PCR试剂）订货信息订货短代码T050T051T052规格64T/盒（预封装）16T/板×4 板40T/盒（预封装）10T/板×4 板20T/盒（预封装）5T/板×4 板适用样本鼻咽拭子、环境样本等适用设备天隆GeneRotex 96、NP968系列核酸提取仪及同类型仪器精密度变异系数 CV≤5%储存条件室温保存，有效期一年天隆科技作为国内核酸提取试剂行业标准的牵头起草者，拥有深厚的技术积累和丰富的防疫经验，自主研发了系列分子诊断设备及配套试剂。未来，天隆科技将继续坚持自主创新，为用户不断创造一流分子诊断产品！

分子诊断是指在人体之外，应用分子生物学方法，检测患者体内遗传物质结构或表达水平的变化，通过对人体样本(血液、体液、组织等)进行检测而获取临床诊断信息，进而判断疾病或机体功能的技术。而检测人体样本的关键步骤之一，是样本中的核酸（DNA和RNA）提取与纯化，核酸的质量直接决定了检测结果的有效性和准确性。新羿生物作为国内数字PCR行业领导者，搭建了以数字PCR、荧光定量PCR两大技术平台为核心的，包括从样本采集、核酸提取到试剂检测等一整套“高灵敏”检测整体解决方案，其中多款核酸提取产品经大量临床样本验证，现隆重推出：┃新冠病毒核酸提取新速度（目录号：#11022 #11023）为更好地应对新冠病毒的快速检测需求，进一步提升检测效率，新羿生物针对新冠病毒检测最常用的拭子样本，研发出病毒核酸快速提取纯化试剂， 经过不断的产品性能优化，可实现12min 完成病毒RNA提取纯化。产品特点操作简单：无需蛋白酶K，使用方便提取纯度高：对PCR扩增无抑制提取时间短：自动化提取，12min 完成拭子样本提取纯化提取效率高且对PCR反应无抑制┃病原体核酸提取：感染性疾病诊断急先锋（目录号：11004# 11005# 11019# 11020#）病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括真菌、细菌、病毒等。鉴定病原微生物的种类，判断病原微生物的感染程度，对于疾病诊断和治疗具有重要意义。病原检测样本类型十分复杂，涉及血清、血浆、脑脊液、肺泡灌洗液、痰液、胸腹水及组织等多种类型样本。如何充分裂解样本并高效提取病原核酸，是首要解决的问题。为此，新羿生物推出了病原体系列核酸提取试剂，以解决不同样本的核酸提取问题。产品特点试剂裂解性能优异：无需额外预处理，可从多种微生物中提取核酸。提取物兼容性好：所得核酸可直接进行qPCR、数字 PCR实验用于临床疾病诊断等。适用样本类型多：基质较为复杂的样本、血液、保存液、脑脊液、肺泡灌洗液、痰液、培养基中微生物（细菌、真菌）等样本。┃订购信息

p style="text-align: justify text-indent: 2em "疫情防控进入关键阶段，能快速准确检测病毒关键基因核糖核酸（RNA）的试剂盒对快速确诊的作用不言而喻。南京中科拜尔医学技术有限 公司独立自主研发的磁珠法病毒核酸提取试剂盒已打通与下游体外诊断产品企业的“通道”，进一步助力新型冠状病毒的检测。据悉，这一提取试剂盒最快可在18分钟内提取新冠病毒的RNA，能有效加速检测进程。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong磁珠法超快速病毒核酸提取试剂盒/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong样本使用广泛/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "血液、血渍、细胞、组织匀浆液、唾液、深刻痰液、肺泡灌洗液、鼻咽抽取物/呼吸道抽取物、拭子（ 咽拭子、鼻拭子、肛拭子）等；/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong高质量、快速无毒/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "独特的裂解缓冲体系，纯化出的病毒核酸可满足通量测序等试验要求；/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "采用磁珠吸附，我允许使用酚氯仿，可结合自动化仪器使用，18min内即可完成试验。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong磁珠法超快速病毒核酸提取试剂盒/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong超快速/strong：核酸提取仅需span style="color: rgb(255, 0, 0) "18分钟/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong超灵敏/strong：灵敏度比常规产品span style="color: rgb(255, 0, 0) "高2-4倍/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong超方便/strong：span style="color: rgb(255, 0, 0) "无蛋白酶K可常温存储/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong超简单/strong：一步加样，其余步骤全自动完成/pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/b6939fb8-b075-4b89-905b-a5032b9d37ab.jpg" title="image004.jpg"//pp style="text-align: center"img style="" src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/d615bf5e-6018-4ff4-bfe5-54d9f8990ceb.jpg" title="image005.jpg"//pp style="text-align: center "span style="text-indent: 0em "中科拜尔32通/spanspan style="text-indent: 0em "道核酸提取仪/span/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong关于南京中科拜尔医学/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "南京中科拜尔医学技术有限公司创立于2014年，坐落于南京经济技术开发区兴智科技城。公司以自动化分子诊断为核心技术，专注于功能性纳米材料、分子诊断试剂、自动化分子诊断仪器的研发、生产、销售和技术服务，是一家创新驱动型高新技术企业。公司以磁性纳米分离纯化技术为平台，产品覆盖磁性功能纳米材料、磁珠法核酸提取试剂、智能型防污染核酸提取仪、高通量全自动核酸提取及检测工作站等。公司核心技术团队来自中国科学院、东南大学等国内外知名研究所。拥有15年自动化分子诊断技术研究经验和成果积累，主持和参与完成国家和省部级课题项目70余项，获得省部级奖项10余项，拥有相关专利技术100多项，相关技术水平处于行业领先地位。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "span style="text-indent: 2em "另外，/spanspan style="color: rgb(192, 0, 0) text-indent: 2em "CFDA认证、国家高新技术企业、独立自主知识产品，多项专利保护、分子生物类试剂盒定制化开发/spanspan style="text-indent: 2em "等也是南京中科拜尔医学技术有限公司关键词属性。/span/pp style="text-align: right text-indent: 2em "文源：南京中科拜尔医学/p

p style="text-align: justify text-indent: 2em "strong核酸检测呈阳性，表明又一例新型冠状肺炎病例被确诊了，但核酸检测阳性报告是如何出炉的呢？核酸检测需要经历哪些流程呢？/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "从接收样本开始，核酸病毒实验室工作人员，这群离新型冠状病毒最近的“隐形战士”，都是三级防护，strong他们需要对样本灭活，核酸提取、扩增等，然后对结果进行分析，并最终出报告，这个过程要持续6个小时/strong。如果检测结果为“阳性”，则需要更换试剂再次重复操作一次，进行复核。也就是说，strong一份新冠核酸阳性报告出炉，至少需要12小时。/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "整个操作中，他们都需要十分小心，特别是在安全柜内打开样本盖子提取核酸时，需要讲究手法，需要轻轻地、温柔地打开盖子，一不小心就可能形成气溶胶，污染安全柜，也可能让其他样本交叉感染，形成“假阳性”。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/c26655b1-c4ca-413e-b624-4045bd69edd9.jpg" title="摄图网_501114917_wx.jpg" alt="摄图网_501114917_wx.jpg"//pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong接收样本/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong安全柜内打开转运箱/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong3层密封，每打开一层都要消毒/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "每次展开工作前，都要用75%乙醇对实验室内的生物安全柜的空间和台面以及核酸提取仪进行消毒。实验室内摆放着多个仪器，一旦开始实验，就要等到实验结束才能出来，而消毒是每次进行新冠病毒核酸检测前都必须做的准备工作。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "消毒完成，工作人员需要互相帮忙，穿着防护衣、护目镜、隔离衣，并戴上N95口罩、双层手套，套上脚套等，按照三级防护的标准穿戴好，进入实验室，对送到的装有标本的转运箱进行消毒，然后将标本转运箱放入生物安全柜。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "随后，工作人员要坐在生物安全柜前，双手伸进柜里，慢慢打开标本转运箱。因为转运箱是密封的，工作人员需要相互配合，一人开箱，一人用75%乙醇进行消毒。转运箱共有3层密封，每打开一层就要进行消毒，并确定密封是否完好。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong病毒灭活/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong56℃水浴30分钟，静置20分钟/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong降低开盖导致的气溶胶污染/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "工作人员在取出转运箱中的样本后，在生物安全柜内用75%乙醇对装有标本的密封袋进行喷洒消毒，用吸水纸擦拭后，小心地将样本拿到实验室内的水浴箱中内，放置在水浴箱中的试管架上。水浴箱温度预热至56℃，样本灭活时间为30分钟，灭活之后，需常温静置20分钟，这个过程就是‘病毒灭活’。”/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "病毒灭活是非常重要的一步，可以在不影响检测结果的情况下，确保检测人员安全，病毒灭活后，操作人员感染风险会大大降低。虽然是一个简单的将病毒放入水浴箱的操作，但工作人员的护目镜上会因此蒙上了一层水雾，视线受到限制。在整个检测的时间里，工作人员因为穿着防护服，交流必须大声说话，但为了防止口渴喝水上厕所，他们又只能少说话，等待的时候，多数时候坐在凳子上，看着时间。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong提取核酸/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong开盖要温柔，还要讲究手法/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong一不小心就可能形成气溶胶/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "待样本灭活静置后，工作人员开始再次配合操作，一人拿样本，一人编号。随后，他们拿出样本采集管，需要非常温柔地打开盖子，用移液设备吸取一定量的样本，然后加入核酸提取试剂，把病毒外层蛋白质破坏，让核酸释放出来，提取完成后，立即将提取物进行封盖处理。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "提取核酸是最危险的一个操作步骤，打开样本采集管的盖子，必须要轻轻地、非常温柔，有时还要讲究手法，如果开盖的力度大了，很可能就会形成气溶胶，这样会污染生物安全柜，也会污染手套，甚至有可能让安全柜内的样本交叉感染，形成‘假阳性’。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong报告出炉/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong检测结果如果是阳性/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong需换试剂再重复一次操作/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "在生物安全柜内将提取核酸加至PCR扩增反应体系中，花了差不多近3个小时。随后，工作人员将扩增体系放入扩增仪，核对扩增程序是否正确，启动扩增程序，待反应开始后离开实验室，等待报告出炉。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "经过6个小时的程序，检测报告出来，如果某份是阳性，则需要更换试剂再进行复核检测，整个流程和第一次一样，重复操作一次，又需要6个小时。/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong核酸检测工作人员一般为三人一组，共有三个小组，每天2-3班倒，他们都是‘隐形战士’。虽然他们防护很到位，但毕竟是和新冠病毒近距离接触，工作人员讲：“刚开始那两天，我回到家中，都不敢抱两岁的孩子，害怕有风险；而晚上也很难睡着，闭上眼就是白天的检测经过。”/strong/pp style="text-align: justify text-indent: 2em "strong在这场抗击疫情战斗中，这些一线的检测人员是战斗的主角，值得大家尊敬，预祝他们早日凯旋归来。/strong/pp style="margin-top: 0em margin-bottom: 1em padding: 0px color: rgb(68, 68, 68) font-family: 宋体, " Arial Narrow" white-space: normal text-align: justify text-indent: 2em "span style="margin: 0px padding: 0px text-indent: 2em "众志成城，抗击疫情。防控新型冠状病毒感染的肺炎疫情，全国在行动，仪器及检测人也在行动!仪器信息网作为科学仪器行业的专业门户网站，充分发挥科学仪器行业专业媒体资源优势，整合科学仪器及检验检测多方资源，第一时间推出/spana href="https://www.instrument.com.cn/zt/xxgzbd" target="_blank" style="margin: 0px padding: 0px color: rgb(84, 141, 212) text-decoration-line: none text-indent: 2em "span style="margin: 0px padding: 0px "strong style="margin: 0px padding: 0px "“抗击新冠疫情，仪器人在行动”/strong/span/aspan style="margin: 0px padding: 0px text-indent: 2em "专题，全力支援疫情抗击工作。/span/pp style="margin-top: 0em margin-bottom: 1em padding: 0px color: rgb(68, 68, 68) font-family: 宋体, " Arial Narrow" white-space: normal text-indent: 2em "strong style="margin: 0px padding: 0px "/strong/pp style="margin-top: 0em margin-bottom: 1em padding: 0px color: rgb(68, 68, 68) font-family: 宋体, " Arial Narrow" white-space: normal text-align: center text-indent: 2em "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/xxgzbd" target="_blank" style="margin: 0px padding: 0px color: rgb(102, 102, 102) text-decoration-line: none "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/a767565f-df49-479b-8f08-ac6296a275ee.jpg" title="ae723130-0e56-4376-8be7-ad82428ada84.jpg" alt="ae723130-0e56-4376-8be7-ad82428ada84.jpg" style="margin: 0px padding: 0px border: 0px max-width: 100% max-height: 100% "//a/pp arial="" white-space:="" text-align:="" style="margin-top: 0em margin-bottom: 1em padding: 0px color: rgb(68, 68, 68) font-family: 宋体, " Arial Narrow" white-space: normal text-align: center "span style="margin: 0px padding: 0px color: rgb(84, 141, 212) "a href="https://www.instrument.com.cn/zt/xxgzbd" target="_blank" style="margin: 0px padding: 0px color: rgb(84, 141, 212) text-decoration-line: none "点击图片查看专题详情/a/span/pp style="margin-top: 0em margin-bottom: 1em padding: 0px color: rgb(68, 68, 68) font-family: 宋体, " Arial Narrow" white-space: normal text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/63b2fa31-6e48-4b20-8924-9b0e251db168.jpg" title="企业微信截图_1581300750743.jpg" alt="企业微信截图_1581300750743.jpg" width="400" height="400" border="0" vspace="0" style="margin: 0px padding: 0px border: 0px max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 400px "//p

据了解，之所以出现这些说法，是因为有人在家用橘子汁做抗原检测，结果显示“两道杠”。视频中，操作人员直接把橘子汁液挤在新冠抗原试剂检测盒上，随后T区和C区均出现紫红色的横线。这些内容，导致不少人产生恐慌，纷纷询问是真是假，甚至表示不敢吃橘子了。目前正是橘子、橙子等水果大量上市的季节，也有网友表示，最近家里常吃这些水果，自己和家人的核酸检测均无异常。网友在家用橘子汁做抗原检测，结果呈阳性（网络截图）为验证传言的真实性，11月27日晚，央广网记者随机找到一处核酸检测便民服务点，在食用了橘子约2分钟后，且在没有饮水及食用其他食物的情况下，参与了核酸采样。记者吃下橘子后，立刻参与了核酸采样。11月28日早上7点，记者打开北京健康宝进行核酸自查，结果显示：阴性记者本人11月28日的健康码自查询结果吃橘子到底会不会影响抗原检测和核酸检测结果？橘子汁让抗原检测呈现阳性结果是为什么？带着这些问题，央广网记者采访了应急总医院检验科主任许慧。用橘子汁做抗原检测或者核酸检测，结果无意义许慧主任表示，样本检测是个“精细活”，需要进行全流程的质量控制，即在采样前、采样中、采样后确保操作准确，才能确保结果的准确性。首先要明确抗原检测和核酸检测是不一样的。抗原检测病毒的衣壳上的蛋白质，使用的胶体金方法的快速测试卡；而核酸检测病毒衣壳内部的核酸，方法通常为实时荧光定量扩增检测（RT-PCR）。网友用橘子汁作试验检测的是病毒抗原。抗原检测或核酸检测要获得准确的检测结果，规范取样是最关键的一环。新冠病毒抗原试剂盒的适用样本为“人鼻黏膜上皮细胞”，将橘子汁作为样本滴入试剂盒，本身就不符合取样标准。因此，无论呈现出何种结果，都是无意义的。用橘子汁做抗原检测，为什么会出现假阳性？其实2021年就有德国研究人员做过类似的实验，不只是橙子的汁液，研究人员将可口可乐、零度可乐、芬达、红牛、伏特加、威士忌、白兰地、苏打水等多种饮料分别直接滴加在新冠抗原检测孔中，过一段时间，都会出现提示阳性的T线。但对这些饮料进行核酸检测，并没有检测到新冠病毒。“这是因为，抗原检测试剂盒只有在正确的使用方式下，检测结果才有效力。做抗原检测时，需要将拭子取样后放入含有样本处理液的采样管中，洗脱后滴入试剂板条。同样，研究人员把这些饮料与样本处理液混合后再滴加到样本孔中做检测，抗原检测并不会出现T区红线的结果。”秘密就在样本处理液中。新冠抗原检测试剂盒的原理简单来说，就是通过特异抗体捕获特定抗原，但抗原抗体的结合需要维持适当的PH值（酸碱度），样本处理液里含有缓冲体系，可以保证抗原抗体在合适的PH值下结合。”橙汁或者各类饮品直接加到试剂板条上，破坏了适宜的PH环境，造成抗原抗体的非特异性结果，这才产生了假阳性。吃橘子是否会影响抗原检测结果？多虑了据了解，检测过程中，确实会有一些干扰因素影响最终检测结果，出现假阳性等情况。但使用抗原检测试剂无需担心吃橘子这一问题，因为新冠抗原检测试剂盒一般使用取样位置相对较浅、更便于大众操作的鼻拭子作为标本。做抗原检测时，鼻拭子的采样部位位于鼻腔内，吃了哪些食物并不会对检测结果造成影响。专家提示，抗原检测时，应严格按照说明操作。要注意，取样部位为鼻腔黏膜上皮细胞。因此，最好在取样前先擤个鼻涕，清除鼻腔内的“多余”物质。吃橘子是否影响核酸检测结果？不必担心目前，大多数核酸检测点提取的样本都是口咽拭子，许慧主任介绍，核酸检测主要是通过测定致病微生物病毒的核酸来判定结果。提取核酸的过程中要经过洗脱、纯化。因此，其他物质对核酸检测结果的影响微乎其微。专家建议，检测前30分钟受检者最好不要喝水、饮酒或嚼口香糖，采样前2小时应避免进食，以防止咽拭刺激反射性呕吐。核酸检测结果与抗原检测结果不一致怎么办？2022年3月10日印发的《关于印发新冠病毒抗原检测应用方案（试行）的通知》第五部分“核酸检测的确认”中明确指出，核酸检测是新冠病毒感染的确诊依据。在进行核酸检测确认的过程中，如核酸检测阳性，不论抗原检测结果是阳性还是阴性，均按照新冠病毒感染者或新冠肺炎确诊患者采取相应措施；如核酸检测阴性但抗原检测阳性，则视同新冠病毒感染者采取集中隔离等措施，密切观察，连续进行核酸检测。因此，抗原检测可以作为判断是否感染病毒的一个补充手段，不建议作为日常筛查的主要方式。

注意：该试剂盒仅供研究使用，且不在中国大陆销售。最近一段时间以来，除了大家日夜关注的新冠病毒疫情以外，另外一种传染性疾病——猴痘，时不时地就会登上热搜，出现在我们的眼前。猴痘（monkeypox）听上去是不是有些陌生？我们好像只听说过牛痘cowpox，还有一个英文很像的是天花（smallpox）。没错，他们都是亲戚，都属于正痘病毒属（orthopoxvirus）这个家族。猴痘其实也并不是一种新发现的病毒，世卫组织早在1970年，于非洲刚果第一次发现有人感染猴痘。而猴痘疫情也并不是很久没有出现了，美国2003年、2021年，英国2018、 2019、2021都有报道过猴痘。2022年5月初以来，已有20多个非地方性流行国家发现多例猴痘病例，且已出现人际传播。而这次特殊的一点是，出现了明显的社区传播。由于图片容易引起不适，这里就不放图了2022年7月1日，国家卫健委印发《猴痘防控技术指南（2022年版）》。指南介绍，猴痘是由猴痘病毒感染所致的一种病毒性人兽共患病，临床表现主要为发热、皮疹、淋巴结肿大。既往接种过天花疫苗者对猴痘病毒存在一定程度的交叉保护力，据WHO的数据，天花疫苗对猴痘病毒的保护率约为85%，而未接种过天花疫苗的人群对猴痘病毒普遍易感。指南指出，疾病控制旨在实现早发现、早报告、早诊断、早调查、早处置。各级各类医疗卫生机构日常接诊发热伴出疹病人时，应注意询问病例流行病学史，同时进行病原学筛查。针对近期国际上出现人际传播的猴痘病毒，PerkinElmer公司开发了对应的病原体核酸检测试剂盒，即PKamp Monkeypox Real-time PCR RUO Kit V1，该试剂盒基于多重实时荧光PCR技术，从纯化的核酸中定性检测猴痘病毒(MPXV)的核酸（DNA）。该试剂盒与天花病毒(VARV)和其他非天花正痘病毒(NVAR) 的DNA无交叉反应。正痘病毒属包含感染人类的四种病毒：天花病毒(variola，VARV)、猴痘病毒(monkeypox，MPXV)、牛痘病毒(vaccinia，VACV)(包括水牛痘，buffalopox)和牛痘病毒(cowpox，CPXV)。该试剂盒包含阳性和阴性对照，用于质控，确保报告结果的准确。另外，还添加了用于检测内源性基因RNase P的引物/探针组合，能够有效监测人类生物样本采集和核酸提取效率。特异性：针对猴痘病毒特异性F3L基因灵敏度：20拷贝/PCR反应自动化：与PerkinElmer自动化核酸检测流程完美兼容chemagen自动化核酸提取技术PerkinElmer通过结合自动化核酸提取和RT-PCR技术方面的专业知识，在提供高质量的自动化分子检测工作流程方面表现出色，这一点在新冠病毒核酸自动化检测方面得到了充分展现。在进行分子检测时，纯化的核酸质量是至关重要的，因为降解、杂质和酶抑制剂都会对最终检测数据的质量产生重大影响。PerkinElmer旗下chemagen自动化核酸提取技术完美解决了相关的问题挑战，可以高效地对目标核酸分子进行提取纯化，适用于荧光PCR检测和基因测序分析等下游应用。推荐使用chemagic™ 360全自动核酸提取仪搭配chemagic™ Viral DNA/ RNA 300 Kit H96 (货号：CMG-1033-S) 试剂盒对猴痘病毒进行提取纯化。Chemagic 360全自动核酸提取仪JANUS G3 PCR体系构建工作站基于液体驱动的移液系统，可提供超高精度的小体积加样，从容应对PCR体系构建过程中小体积移液需求；搭配灵活的4/8通道Varispan移液机械臂，间距可调，兼容不同规格的实验耗材；移液器腔体的连接管路可实时冲洗，避免气溶胶污染或者携带污染。JANUS G3 PCR体系构建工作站全自动化机器人整合系统（ARS）可实现样本从原始管上样、核酸提取到RT-PCR检测全流程的完全无人值守，更高通量根据提取仪数量的不同可达到几十块96孔板不等的连续工作。该系统整合了存储板栈、JANUS G3液体处理工作站、chemagic™ 360全自动核酸提取仪、封膜机以及主流荧光定量PCR仪，多台设备以机器人手臂为核心由中控软件统一控制，时序编排与控制软件管理设备间的协同工作，高通量样品进入流水线工作，可实现新冠病毒核酸提取与检测全流程无人值守，不仅有效提高样本检测效率，还保护实验人员免于感染风险。全自动化机器人整合系统（ARS）试剂盒信息试剂盒货号：SDX-62669试剂盒名称：PKamp™ Monkeypox Virus Real-time PCR RUO Kit V1试剂盒组成：试剂A酶混合液阴性对照MPXV试剂B1试剂盒包装规格：192测试/盒保存条件：-25℃~-15℃保存，有效期为24个月。阳性对照阳性对照货号：SDX-62670阳性对照品名：PKamp™ Monkeypox Virus V1 Positive Controls阳性对照包装规格：20次反应猴痘并没有那么可怕，但对其仍需重视，为潜在的传播风险做好预防、检测和治疗的准备。我们也在不断努力，践行我们的口号，INNOVATING FOR A HEALTHIER WORLD

在此次新型冠状病毒疫情中，作为最终确诊的关键性技术，核酸检测发挥了及其重要的作用。但是近期关于核酸检测准确性问题的讨论甚嚣尘上，如何提高检测的准确性，如何减少假阴性/假阳性成为困扰检测工作者的重要难题。从目前已有的资料来看，很多方面得到了讨论，如：冠状病毒感染人体后，病变主要发生肺部，即下呼吸道，上呼吸道咽部病毒含量低，通过咽拭子检测常常出现阴性，再加上其他一些因素，比如：采样不规范，运输和存储等造成病毒RNA降解，核酸检测试剂盒的快速审批入市，质量参差不齐等等，这些环节都可能导致假阴性的发生。同时各环节操作的不规范，还容易出现假阳性的发生。而从核酸提取质量，荧光定量PCR各品牌，各型号的对核酸检测试剂的适应性的讨论就不多见了，本文就病毒核酸提取、qPCR检测、体系加样等环节，在耶拿公司产品的基础上提出了一系列解决方案， 供大家参考。一、核酸提取：作为核酸检测的起始步骤，病毒核酸能否被高效安全的从样本中提取出来，将会成为整个核酸检测至关重要的一步。在多数核酸提取的过程中，操作者将面临如下几类问题：1、咽拭子、血清、血浆等上样量不足，现在普遍是200μL的上样体积，病毒获得不足，产生假阴性结果；2、病毒富集效率低、裂解不充分，导致核酸产物收率较低而引起的假阴性结果；3、提取产物富含高浓度盐分、有机物等PCR抑制剂残留，对后续定量PCR检测产生抑制产生假阴性结果；4、提取过程中过度的剪切力将本来含量不高的病毒核酸破环，病毒核酸完整度差，无法作为后续荧光定量PCR模板而导致的假阴性结果；5、手工提取过程复杂，步骤繁多增加交叉污染概率而导致的假阳性结果；6、常规磁棒法全自动核酸提取仪因磁棒磁力下降导致磁珠残留，进而导致交叉污染出现假阳性/假阴性结果。解决方案德国耶拿公司InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪，Cybio-Felix全能型工作站将人们从繁琐的核酸提取纯化过程中解放出来，大大提高了工作效率和产物质量。您只需要加入样本，选择相应的提取程序，按下“开始”即可轻松获得纯净的核酸。l 耶拿公司的C16 Touch核酸提取仪，最大上样体积可到600μL，加大上样量可以获得更多核酸，降低假阴性的产生l 产物无磁珠残留，有效防止交叉污染，降低假阳性；提取结果重复性、均一性更好其配套的针对病毒提取的相关试剂拥有如下两项专利：◆ Dual Chemistry Technology2005年耶拿公司发明了专利性的核酸提取技术DC-Technology（双缓冲液技术），采用独特的裂解缓冲液和新型的结合缓冲液，无需使用高盐结合，提高核酸提取得率，以及更为完整的核酸片段，降低假阴性可能。◆ Smart Extraction技术—新一代核酸提取技术 2016年耶拿公司又发明了专利性的新一代提取技术Smart Extraction，该技术打破常规核酸提取需要借助介质吸附核酸的传统，提取过程无需酚/氯仿、无需离子交换、无需离心柱、无需硅胶膜、无需磁珠，仅需tip上下吹打即可完成。提取得到的核酸得率高、完整度高，纯度好，降低假阴性的可能性。二、荧光定量PCR检测：当检测工作者收获了高质量、低杂质的样本核酸后，荧光定量PCR过程中的检测灵敏度、特异性、重复可靠性就成为了获取高质量检测结果最至关重要的因素了。1、基于仪器老化、设计缺陷等原因导致的荧光定量PCR仪温度控制的准确性、均一性不高，结果扩增效率较低或者批次内和批次间的重复性不佳，导致假阴性结果；2、不同型号仪器采用不同的激发光源对结果会有一定影响，某些光源使用一定时间没有更换，对付近期的高强度检测工作会进一步降低仪器的灵敏度，导致假阴性结果；3、各类荧光定量PCR所采用的检测器灵敏度是存在差异的，导致假阴性结果。基于以上问题德国耶拿公司qTOWER3系列荧光定量PCR仪，以其卓越的温控系统带来快速稳定的实验结果，先进的光学检测系统带来高灵敏度的检测。l 镀金纯银样品槽，采用热传递性非常好的银质材料，快速的升降温速率能够加快实验速度，缩短实验时间，提高实验效率。准确的温度控制带来优异的温度均一性，进而带来各样品间以及各批次间稳定的定量PCR扩增结果。l 采用蓝色、绿色、红色、白色四个高强度长寿命LED固态光源，确保在整个光谱检测范围内都有很强的激发光强，有利于较弱信号的采集，从而提高实验检测灵敏度，减少假阴性可能。LED光源寿命长，免维护，节约后续的使用成本。l 采用定量PCR仪上最新一代的通道式光电倍增管（CPM）检测器，有效降低背景噪音信号，检测灵敏度比CCD或PMT（普通光电倍增管）高，提高检测灵敏度，减少假阴性可能。三、液体处理过程：近期，各类关于检测工作繁重，人员压力大，复检次数众多等，相继被各类媒体争相报道。由此可见，面对如此重大的疫情，检测人员所面对的工作压力是非常巨大的。1、在复杂的检测工作中试剂、样本的错加、漏加都成为假阴性、假阳性产生的主要来源之一；2、液体处理中的交叉污染也成为了检测假阳性结果的主要原因。在如今的新时代，各类全自动液体处理工作站已经在全球各个生命科学、疾病药物诊断研发、政府机构的高通量检测领域中得到广泛的使用。德国耶拿公司建议除了前面提到的核酸提取步骤可以采用全自动液体处理工作站高效的完成之外，PCR的体系构建等工作也可以采用类似的方法来解决。德国耶拿公司Cybio-Felix全能型液体处理工作站，可自动完成定量PCR反应中涉及到的各类预混液、引物、模板、去离子水 等的加样，代替手工快速、准确、高效地进行定量PCR反应体系的构建，适用于各类PCR体系及成品试剂盒的液体处理。1、超高的移液准确性：确保在小体积量程下实现准确地加入模板内并且准确地分装反应体系，有效的减少因加样产生的假阴性结果；2、PCR体系构建快速高效，提高检测效率，让更多的疑似患者能够尽快明确：可在半小时内实现整版PCR体系构建；若采用整板的预混Mix，则完成速度更快；3、有效避免交叉污染：仪器运行时完全封闭，避免环境污染；采用带滤芯的tip，避免移液头污染；UV灯灭菌，避免批间污染。且PCR体系构建速度较快能减少模板中DNA的挥发，减少系统内核酸气溶胶的浓度大幅减少假阳性的发生概率；4、提供可放置入于生物安全柜中的型号，避免各类污染，保护实验人员安全。核酸检测结果是否可信，并不能一概而论，如果检测仪器、试剂盒都没有问题，且每个实验环节都控制的很好，那么结果就非常可信，反之则无法判断。让我们齐心协力，用我们自己的专业知识来共同对抗疫情。

2021年6月4日中国计量科学研究院发布全球首个新型冠状病毒核糖核酸假病毒弱阳性口腔粘液基质标准物质(高浓度和低浓度)。▲规格：200μL/管（研制单位：中国计量科学研究院）新冠病毒核酸检测最常见的样品为咽拭子，但目前国内外尚未有以口腔粘液为基质的新型冠状病毒核糖核酸检测标准物质。通过模拟临床检验咽拭子样本的基质和病毒浓度，可最大限度地重现新冠病毒核酸临检样本检测过程，对咽拭子样品从RNA提取至核酸扩增检测的全过程进行质控，为新型冠状病毒检测实验室的弱阳性和位于灰区的检测结果提供判定参考，满足了国家卫健委新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南中的新型冠状病毒核酸检测过程质量控制的要求，并可用于新型冠状病毒检测试剂盒性能验证。该标准物质是采用重量法，将NIM-RM5203新型冠状病毒（2019-nCoV）假病毒核糖核酸标准物质添加到人工模拟的口腔粘液基质中制备而得。将重量法配制值作为标准物质ORF1ab基因和N基因的标准值。资源来源于：中国计量科学院。

p　　王成彬教授近日通过中华医学会检验学分会公众号发文，称近期有媒体及专家反映新型冠状病毒核酸检测阳性率低、有的病例重复检测多次阴性后出现阳性结果、咽拭子标本多次检测阴性但最后在呼吸道灌洗液标本中检测出阳性结果、CT影像筛查出现新型冠状病毒肺炎特征但核酸检测阴性等问题。经过与临床分子诊断学专家、临床检验医学专家、临床呼吸病医学专家、临床影像医学专家交流，现提出自己的一点看法。仪器信息网摘录如下，供广大读者参考：/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202002/uepic/7dba3cad-31c9-43c5-a8e2-d24ce88767fa.jpg" title="8367256c-69ea-4910-bda6-20f8be03c701.jpg" alt="8367256c-69ea-4910-bda6-20f8be03c701.jpg"//pp style="text-align: center "解放军总医院医学检验中心主任 王成彬教授/ppstrong　　一、关于核酸检测在新型冠状病毒肺炎患者诊断中的应用/strong/pp　　新型冠状病毒肺炎(Novel Coronavirus Pneumonia, NCP)是由2019新型冠状病毒(2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV)感染引起的一种急性传染性疾病，而确定诊断的金标准就是能在患者体内找到2019-nCoV的存在。核酸检测就是检测2019-nCoV基因中某些特定核酸序列的存在，因此从方法学层面考虑其作为实验室诊断金标准没有任何疑问，而CT(电子计算机断层扫描)作为临床影像学筛查指标具有重要价值，但无论从早期诊断、鉴别诊断、排除诊断还是最终确诊等方面都还具有一定的局限性，更无法替代病原学诊断。其实任何疾病本身都具有分层诊断的概念，在感染性疾病的诊断中，临床表现、流行病学史、影像学、病原学等指标都发挥重要作用，但病原学诊断肯定是最精准的诊断。当然我们在重视核酸检测在病毒感染诊断中的重要价值的同时，也要客观考虑由于其方法学特点、疾病发展过程、标本采集、标本保存与运输、核酸提取、扩增体系、人员操作等因素都可能造成最后检测结果的假阴性或假阳性。/pp　　strong二、关于2019-nCoV核酸检测方法/strong/pp　　目前，无论是临床实验室还是疾病控制中心(CDC)实验室，普遍应用的是实时荧光RT-PCR方法，此检测方法成熟可靠，并已在常规检验和科研实验中被广泛应用。该方法是将标本中的特定核酸序列进行扩增，理论上每一次扩增后的核酸数量都是成倍增加，经过30次以上扩增后，其核酸数量达到足够通过荧光等常规方法进行检测。如果有人说目前实验室所用2019-nCoV核酸检测方法不可靠，可能是因为其对该方法原理和临床应用不了解。实时荧光RT-PCR方法从采集标本送到实验室，经过对标本的接收、处理(有时从安全考虑需要灭活处理，这点对于生物安全至关重要，但也有专家提出可能影响检测效率)、病毒核酸提取、核酸扩增、数据处理及报告，一般需要约4个小时或更长时间，如何改进核酸提取和扩增流程，缩短整个检测时间是迫切需要解决的问题。目前也有个别厂家的检测试剂检测的不是2019-nCoV核酸而是病毒进入机体后机体产生的抗体，病毒进入机体到机体产生特异性的抗体需要一段时间(窗口期)，因此检测到病毒抗体肯定滞后于检测到病毒核酸。病毒抗体检测一般用于筛查手段及流行病学调查，其敏感性、特异性、临床应用效率还需要进一步的验证和评估。/pp　　strong三、2019-nCoV核酸检测阳性率低等问题/strong/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "(一)患者的病程与病情/span/strong：NCP患者的发病都会经历一个从感染后无症状，到轻度症状出现，再到严重症状出现的过程。不同病程、不同病情患者机体中的病毒存在量可能不同(已有病毒感染，但由于在相关部位采集不到病毒或采集到的病毒量太少，以致于现有方法检测不到，也称窗口期)。因此，对临床高度疑似NCP患者，应该连续采集标本进行核酸检测(这可能是临床患者多次检测阴性，阳性结果出现晚的主要原因之一)。其实任何病原学检测，都不能只根据一次阴性结果而做出排除性诊断，更不能根据核酸检测阴性而漏诊临床高度疑似的NCP患者，尤其在高发地区，在大面积流行期间。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "(二)标本采集、运输及保存/span/strong/pp　　strong1、标本采集部位/strong：很多专家从实践工作中总结出的经验认为，鼻咽拭子标本2019-nCoV核酸检测阳性率高于口咽拭子，下呼吸道采集的痰、肺泡灌洗液标本阳性率高于上呼吸道的口、鼻咽拭子采集的标本(这也是这两天被广泛评论的某患者咽拭子标本三次核酸检测阴性，收住院后在抢救过程中采集肺泡灌洗液标本核酸检测阳性的原因)，但下呼吸道的痰、肺泡灌洗液标本采集难度大、易引起患者喷射导致采集操作者感染风险大，一般情况不建议使用(气管切开、上呼吸机抢救病人可用)。近期发布的第五版《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》已将标本采集“咽拭子”更新为“鼻咽拭子”。为了提高检测阳性率，建议采集同一病人多部位标本，合并进行检测。比如，用口咽拭子、鼻咽拭子同时采集标本，然后放到同一采集管中送检。对于有消化道症状的疑似患者，同时采集粪便或肛拭子进行检测。/pp　　strong2、标本采集方法/strong：近期用于2019-nCoV核酸检测标本主要是口咽拭子，采集时让患者张大嘴后用特制棉签或小刷头刮取其咽部采集带病毒标本。如果平时医护人员咽拭子取样不多，刮取标本时患者的反应又比较大，往往导致刮取标本的位置不对，或力度和时间不够，没有刮取到带病毒的标本或刮取到的带病毒标本量少，最后导致检测结果阴性。/pp　　strong3、标本运输及保存条件/strong：2019-nCoV为RNA病毒，很容易被外源性或细胞破坏后所释放的RNA酶降解，而影响最后的检测效率。严格来讲标本采集后应及时送到实验室(疾控中心、医院检验科、第三方实验室)，尽快完成检测。标本在常温条件下放置时间过长(几个小时、十几个小时、二十多个小时或更长时间)，也可能是造成最后检测结果假阴性的原因。近期有人提出使用防病毒核酸降解标本采集管，但目前此类产品数量少、成本高、实际应用效果也需要进一步评价。建议标本采集后及时送检，及时检测(4小时)。如因某些原因标本采集后不能及时送检或及时检测，应将其置于4℃保存(24小时)。24小时内不能检测的标本，建议于-70℃以下保存并避免反复冻融。/pp　　span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong(三)核酸检测试剂/strong/span/pp　　strong1、核酸提取：/strong上面已叙述过2019-nCoV核酸检测需要对所采集标本中核酸进行提取。目前临床实验室所用方法有手工提取和机器自动或半自动提取，通常情况下机器自动提取方法的效率要优于手工提取。而不同提取试剂和手工提取流程的掌控对最后提取到的核酸数量和质量可能存在差别，而从标本中所提取出的核酸数量和质量对于检测方法中下一个步骤核酸扩增至关重要，从而也就直接影响最后的检测结果。/pp　　strong2、核酸扩增试剂：/strong由于不同厂家试剂研发是根据2019-nCoV核酸Orf1ab、N、E、S等基因的特异性序列设计的扩增探针(不同厂家的扩增试剂可分为1个、2个或3个靶标基因位点检测试剂)，试剂中酶、金属离子等成分与质量的差异，都可能影响扩增效率和最后检测结果的灵敏度。/pp　　strong3、试剂应用的特殊性：/strong由于导致本次疫情的是2019-nCoV，加上其突发性，试剂生产商只能根据有限公开的病毒核酸研究数据开展试剂研发，国家相关部门最早推荐了一些厂家的检测产品，后来又审批了一些厂家检测试剂的注册申请。目前开展2019-nCoV检测试剂研发生产的厂家已超过百家，正常情况下一个临床检测试剂产品从研发到应用需要通过一系列的临床验证与评估，但由于本次疫情的特殊性，时间的紧迫性，所研发试剂来不及完成正常流程，特别是无法得到一定数量临床患者标本的验证。对于临床某些高度疑似病例，或检测结果难以确定病例，建议用2种以上试剂进行检测、验证。/pp　　strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "(四)核酸扩增仪器/span/strong：目前不同实验室用于2019-nCoV核酸检测的仪器(PCR仪或核酸扩增仪)种类有所不同，价格上从几万、十几万、数十上百万不等，不同的设备对检测过程中不同温度的控制精度、对荧光信号检测敏感度等不同，从而可能导致检测结果的差异。/pp　　以上是对近期媒体及专家反映2019-nCoV核酸检测阳性率低等问题其可能原因的一些分析，由此可以理解，目前2019-nCoV核酸检测中各种原因引起的这样或那样的问题是现实存在的，也是难以避免的。我们不能因为这些问题的存在而普遍怀疑、甚至否定目前实验室2019-nCoV核酸检测结果。目前2019-nCoV核酸检测大多在三级医院或CDC二级以上实验室开展，这些实验室的管理水平、技术人员素质、检验设备的先进程度、检验过程的质量控制措施等方面可以说大都是处于国际先进水平，而各实验室也在通过工作开展中的回顾总结或通过实验室之间的经验交流，不断改进、完善2019-nCoV核酸检测方法。/pp　　近期中华医学会检验医学分会也组织了相关方面专家对2019-nCoV核酸检测进行了探讨，并出台了2019-nCoV核酸检测相关专家共识，同时一些新的基因检测平台也在不断研发。随着基因测序、数字PCR、RT-PCR毛细管电泳等技术的应用(国家卫健委发布的“新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案--试行第五版 修正版”中已将病毒基因测序与实时荧光RT-PCR核酸检测列为实验室确诊方法)，2019-nCoV核酸检测中的问题肯定会得到持续改进。/ppspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "　　strong附：/strong/span/ppspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "　　王成彬，解放军总医院医学检验中心主任，主任医师，教授，博士研究生导师，北京理工大学、中南大学、温州医科大学、南开大学兼职教授(博士研究生导师) 现担任中华医学分会副主任委员，北京医学会检验医学分会主任委员等。/span/ppspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "　　近年来还从事进口血细胞分析仪配套试剂和POCT方法学研究。作为课题负责人先后承担军队医药卫生基金、国家863、国家自然科学基金等课题研究。获北京市科技进步二等奖2项，军队科技进步二等奖1项，三等奖3项，中华医学科技三等奖一项。在国内、外期刊发表学术论文70余篇，其中SCI收录论文9篇，主编专著2部，主译专著1部。/span/ppspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong style="white-space: normal "span style="color: rgb(255, 0, 0) "　　/span/stronga href="https://www.instrument.com.cn/zt/xxgzbd" target="_blank" title="点击进入仪器信息网特别专题：“抗击新冠疫情 仪器人在行动”" style="white-space: normal color: rgb(255, 0, 0) "strong点击进入仪器信息网特别专题：“抗击新冠疫情 仪器人在行动”/strong/aspan/span/span/p

日前，国家药监局发布了《猴痘病毒核酸检测试剂技术审评要点（试行）》，审评要点主要包括监管信息、综述资料、产品技术要求及检验报告、分析性能研究、稳定性研究、阳性判断值研究其他非临床研究资料等，并对每一项进行了详细的陈述。详情如下：国家药监局器审中心关于发布猴痘病毒核酸检测试剂技术审评要点（试行）的通告（2022年第31号） 　　为规范猴痘病毒核酸检测试剂技术审评工作，国家药监局器审中心组织编写了《猴痘病毒核酸检测试剂技术审评要点（试行）》，现予发布。特此通告。　　附件：猴痘病毒核酸检测试剂技术审评要点（试行）.doc国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心2022年7月15日附件猴痘病毒核酸检测试剂技术审评要点（试行）本审评要点旨在指导注册申请人对猴痘病毒核酸检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技术审评部门提供参考。本审评要点是对猴痘病毒核酸检测试剂的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用。若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。一、适用范围本审评要点适用于猴痘病毒核酸检测试剂注册申请和变更注册申请的情形，其他未尽事宜应当符合《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家药品监督管理局公告2021年第122号）等相关法规要求。二、注册审查要点（一）监管信息1.产品名称及分类编码产品名称应符合《体外诊断试剂注册与备案管理办法》（国家市场监督管理总局令第48号）及相关法规的要求，如猴痘病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）。根据《体外诊断试剂分类规则》，该产品按照第三类体外诊断试剂管理，分类编码为6840。2.其他信息还包括产品列表、关联文件、申报前与监管机构的联系情况和沟通记录以及符合性声明等文件。（二）综述资料综述资料主要包括概述、产品描述、预期用途、申报产品上市历史及其他需说明的内容。应详细说明产品所采用的技术原理及检测流程。提供不同适用机型的检测通量，即一次检测最多可检测的样本数。提供核酸提取（手工和自动提取方式应分别明确）和PCR扩增的时间，以及检测全过程所需的时间。不同检测流程，分别提供最少和最多检测样本量下的检测时间。与已上市同类产品进行比较，比较内容包括样本类型，检测原理，检测靶基因区域，组成成分，内标，质控品，判读规则，分析性能和临床性能等。（三）产品技术要求及检验报告注册申请人应当在原材料质量和生产工艺稳定的前提下，根据产品研制、前期评价等结果，依据国家标准、行业标准及有关文献资料，结合产品特性按照《医疗器械产品技术要求编写指导原则》（2022年第8号）的要求编写。该类产品作为第三类体外诊断试剂，应当以附录形式明确主要原材料以及生产工艺要求。猴痘病毒核酸检测试剂如有国家标准品，技术要求中应体现国家标准品的相关要求，并使用国家标准品对三批产品进行检验。猴痘病毒核酸检测试剂的检出限水平应符合国家相关指南文件规定申报产品对国家灵敏度标准品的检测结果应与声称的检出限水平相当。如有适用的国家标准、行业标准，产品技术要求的相关要求应不低于相应的要求。（四）分析性能研究注册申请人应采用在符合质量管理体系的环境下生产的试剂盒进行所有分析性能研究，提交具体研究方法、试验方案、试验数据、统计分析等详细资料。如申报产品适用不同的机型，需要提交采用不同机型进行性能评估的资料。如申报产品包含不同的包装规格，需要对各包装规格进行分析或验证。分析性能评估所用样本的基本信息均需明确，例如样本来源、样本类型、采集和处理方式、稀释方式、定值过程及数据等。如果样本的阴阳性或浓度值由其他单位提供，需要由该单位出具盖章的样本信息文件。 分析性能评估中如使用稀释样本，应采用与适用样本类型一致的阴性基质。分析性能评估用样本应当为真实样本，可采用境内或境外样本进行研究。对于各项性能中采用的样本，在下述各项性能研究资料中分别提供样本信息列表。建议着重对以下分析性能进行研究。1.反应体系1.1样本采集和处理根据适用样本类型，进行样本采集研究。提供样本采集器具和保存液等的详细研究资料，明确保存液或裂解液等的成分、浓度、使用量的要求等。配套的不同保存液或裂解液需验证检出限和重复性。提供样本灭活、处理方式、处理过程的研究。1.2核酸提取和反应体系研究确定最佳核酸提取和反应体系，包括核酸提取方法与过程、提取用样本体积、洗脱体积和PCR加样体积、各种酶浓度、引物/探针浓度、dNTP浓度、阳离子浓度及反应各阶段温度、时间、循环数等。建议在保证核酸提取质量的情况下尽量扩大总反应体系和加样量，以提高检测灵敏度。提交不同适用机型基线和阈值循环数的确定资料。不同适用机型的反应条件如果有差异应分别详述，并提交验证资料。2.样本稳定性对采集后各阶段的样本进行稳定性研究，包括不同保存液、裂解液，不同灭活方式处理后的样本，研究内容包括冷藏保存时间，冷冻保存时间，冻融次数等。建议对每种样本类型均进行稳定性研究。如核酸提取液可不立即进行检测，还需对核酸提取液的保存条件和稳定性进行研究。3.适用的样本类型列明产品适用的样本类型，如皮肤病变标本（包括病变皮疹、痘疱表面和/或渗出物的拭子，痘疱液，痘疱表皮或痘痂等）、咽拭子、全血或血清样本，应分别进行分析性能评估。4.核酸提取/纯化性能在进行核酸检测之前，建议有核酸提取/纯化步骤。该步骤的目的除最大量分离出目的DNA外，还应有相应的纯化作用，尽可能去除PCR抑制物。对配合使用的所有核酸提取试剂进行提取核酸纯度、浓度、提取效率的研究，并与质量较好的核酸提取试剂进行平行比对。若产品适用两种或以上核酸提取试剂，则每一种核酸提取试剂均需配合检测试剂进行抗干扰、精密度和检出限的验证。5.精密度应对精密度指标，如标准差或变异系数等的评价标准做出合理要求。应考虑运行、时间、操作者、仪器、试剂批次和地点等影响精密度的条件，设计合理的精密度试验方案进行评价。精密度评价试验应包含核酸提取步骤。设定合理的精密度评价周期，例如为期至少20天的检测。对检测数据进行统计分析，获得重复性、实验室内精密度、实验室间精密度、批间精密度等结果。应至少包含3个水平：阴性样本、临界阳性样本、中/强阳性样本，并根据产品特性设定适当的精密度要求，例如：阴性样本：待测物浓度为零浓度，阴性检出率应为100%（n≥20）。临界阳性样本：待测物浓度略高于试剂盒的检出限，阳性检出率应≥95%（n≥20）。中/强阳性样本：待测物浓度呈中度到强阳性，阳性检出率为100%且Ct值的CV≤5%（n≥20）。6.分析特异性6.1交叉反应首先应采用生物信息学分析方法进行研究，应当包括人基因组和所有已知病原体。样本验证：交叉反应研究样品除特殊说明外，应采用灭活的临床样本或添加了灭活病原体培养物的阴性临床样本，样本基质应与预期检测样本类型一致，交叉反应研究用样本主要考虑以下几方面：6.1.1其他近缘病毒：天花病毒（假病毒）、痘苗病毒、牛痘病毒、鼠痘病毒、传染性软疣病毒、特纳河痘病毒（假病毒）、亚巴猴病毒（假病毒）等。6.1.2引起出疹症状等的其他病毒：水痘-带状疱疹病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒-1/-2、人类疱疹病毒 6、人类疱疹病毒 7、人类疱疹病毒8、麻疹病毒、肠道病毒、梅毒螺旋体、登革病毒等。6.1.3适用样本中可能存在的其他细菌/真菌：金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌、丙酸杆菌、类白喉杆菌等。6.1.4高浓度人类基因组DNA。注：病毒培养液的浓度单位可采用TCID50或PFU/mL，细菌培养物浓度单位可采用CFU/mL。建议在病毒和细菌感染的医学相关水平进行交叉反应的验证。通常，细菌感染的水平为106 CFU/mL或更高，病毒为105 PFU/mL或更高。也可采用其他合理方法定值的浓度，例如核酸浓度107 copies/mL，如病原体样本或培养物不能符合上述要求，申请人应详细说明理由。申请人应提供所有用于交叉反应验证的病毒和细菌的来源、种属/型别信息和浓度确认等试验资料。6.2干扰研究6.2.1干扰试验应根据所采集样本类型，针对可能存在的内源/外源物质干扰情况进行验证，验证推荐物质见表1。建议申请人在每种干扰物质的潜在最大浓度（“最差条件”）条件下进行试验，检测包含临界阳性水平在内的猴痘病毒样本。对结果进行合理的统计分析，对比添加干扰物质前后的 Ct 值差异。检测的潜在干扰物包括样本中的原有物质及在样本采集和处理期间引入的物质。表1 用于干扰试验的物质类别具体物质粘蛋白、白蛋白血液（人类）适用样本类型为咽拭子缓解咽部症状的含片、喷剂等适用样本类型为血液时血脂、胆红素、血红蛋白、抗凝剂（如适用）过敏性症状缓解药物盐酸组胺、氯雷他定、西替利嗪抗病毒药物抗生素左氧氟沙星、阿奇霉素、头孢曲松、美罗培南解热镇痛药物扑热息痛、对乙酰氨基酚、阿司匹林全身性抗菌药物妥布霉素维生素A样本采集和处理期间引入的物质6.2.2竞争性干扰申请人应结合产品适用的样本类型，充分考虑临床上容易与猴痘病毒合并感染的病原体，在高浓度的情况下对低浓度（例如检出限浓度）猴痘病毒核酸检测的影响，进行竞争性干扰研究。7.检出限7.1检出限的确定将不同来源的至少3个样本梯度稀释于与适用样本一致的基质中，进行检出限的确定。每个浓度梯度最少重复3次检测，以100%可检出的最低浓度水平作为估计检出限，在此浓度附近制备若干梯度浓度样本，每个浓度至少重复20次检测，将具有95%阳性检出率的最低浓度水平作为确定的检出限。7.2检出限的验证选择另外3个不同来源的样本在检出限浓度水平进行验证，应达到95%阳性检出率。如包括多个检测靶标，应分别进行研究。8.包容性8.1应当采用生物信息学分析方法对产品检测的包容性进行研究，应当包括所有已公布的猴痘病毒核酸序列。8.2验证具有时间和区域特征性的至少10个不同来源的阳性样本，包含西非分支、刚果盆地分支和不同的变异株。研究应包括检出限和重复性的验证。注意包容性研究样本和检出限研究样本不能重复。9.企业参考品验证根据主要原材料研究资料中的企业参考品设置情况，采用三批产品对企业参考品进行检验并提供详细的试验数据。（五）稳定性研究申报试剂的稳定性主要包括实时稳定性（有效期）、开瓶稳定性及冻融次数限制等研究，申请人可根据实际需要选择合理的稳定性研究方案。稳定性研究资料应包括具体的实施方案、详细的研究数据以及统计分析结论。对于实时稳定性研究，应提供至少三批产品在实际储存条件下保存至成品有效期后的研究资料。（六）阳性判断值研究阳性判断值一般为申报产品检测病毒核酸阳性的Ct值。阳性判断值研究用样本来源应具有多样性和代表性，考虑不同时间、地域、不同的感染阶段和生理状态等因素，尽量纳入较多弱阳性和高阴性水平的样本。在条件允许的情况下，建议覆盖目前的流行株进行阳性判断值研究。采用ROC曲线分析建立阳性判断值，并确定产品的判读规则。如判定值存在灰区，应提供灰区的确认资料。如果产品适用不同样本类型，需要对各样本类型进行阳性判断值的验证。提交阳性判断值研究所用样本的背景信息列表，至少包括性别、年龄、临床诊断信息、样本来源机构、检测结果等信息。提供内标检测结果范围的确定方法和研究资料。（七）其他非临床研究资料1.主要原材料研究该类产品的主要原材料包括引物、探针、酶、dNTP、核酸分离/纯化组分（如有）、质控品、企业参考品等。应提供主要原材料的选择与来源、制备过程、质量控制标准等相关研究资料、质控品的定值试验资料等。如主要原材料为企业自制，应提供其详细制备过程；如主要原材料源于外购，应提供资料包括：选择该原材料的依据及对比筛选试验资料、供货方提供的质量标准、出厂检验报告，以及该原材料到货后的质量检验资料。供应商应固定，不得随意更换。1.1引物和探针：应详述引物和探针的设计原则，提供引物、探针核酸序列、靶序列的基因位点及两者的对应情况。建议每种病毒设计两套或多套引物、探针以供筛选，通过序列比对和功能性试验等方式，对病毒进行包容性和特异性（如交叉反应）的评价，其中序列比对包括与已公布猴痘病毒序列的比对，及与易产生交叉反应的其他病原体的序列比对；功能性试验包括对不同来源、不同滴度的猴痘病毒核酸阳性样本，和不同的近缘病原体的检测。通过筛选确定最佳的引物和探针组合。引物、探针的质量标准应至少包括序列准确性、纯度、浓度及功能性实验等。1.2脱氧三磷酸核苷（dNTP）：包括dATP、dUTP、dGTP、dCTP和dTTP，应提供对其纯度、浓度、功能性等的详细验证资料。1.3酶：需要的酶主要包括DNA聚合酶、尿嘧啶DNA糖基化酶等，应分别对酶活性、功能性等进行评价和验证。1.4质控品试剂盒一般包含阴性质控品和阳性质控品。阳性质控品应包含试剂盒检测的靶序列，可采用假病毒制备，建议制备浓度为弱阳性。质控品需参与样本处理、核酸的平行提取和检测的全过程，以对整个提取和PCR扩增过程、试剂/设备、交叉污染等环节进行合理质量控制。提交试剂盒质控品有关原料选择、制备、定值过程、浓度范围等试验资料，对质控品的检测结果Ct值范围做出明确的要求。1.5内标内标，又称内对照，可对管内抑制导致的假阴性结果进行质量控制，应与靶核酸一同提取及扩增。申请人需对内标的引物、探针设计和相关反应体系的浓度做精确验证，既要保证内标荧光通道呈明显的阳性曲线又要尽量降低对靶基因检测造成的抑制。明确内标的检测结果Ct值范围。建议科学设置内标，对待测样本的取样质量、试剂的反应体系进行监控。1.6企业参考品制备申请人应根据产品性能验证的实际情况自行设定企业内部参考品，包括阳性参考品、阴性参考品、检出限参考品、精密度参考品。应提交企业参考品的原料来源、选择、制备、阴阳性及浓度确认方法或试剂等相关验证资料。阳性参考品应包含不同浓度水平的目标核酸阳性样本至少5例。 阴性参考品则主要涉及对分析特异性（交叉反应）的验证情况，建议包括水痘-带状疱疹病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒、人类疱疹病毒、天花病毒（假病毒）、痘苗病毒、牛痘病毒、化脓性链球菌、白色念珠菌等。检出限参考品应包含95%阳性检出水平或略高于检出限的水平，如100%阳性检出水平。精密度参考品应包括高、低两个浓度的样本，其中一个浓度应为检出限附近的浓度。2.生产工艺研究资料介绍产品主要生产工艺，可用流程图结合文字的方式表述。提交主要生产工艺的确定及优化研究资料。（八）临床评价1.临床试验机构建议申请人在相关流行病学多发区域选择临床试验机构，应是经备案的医疗器械临床试验机构（包括各级疾病预防控制中心）。临床试验机构数量应不少于3家，且具有分子生物学方法检测的优势，实验操作人员应有足够的时间熟悉检测系统的各环节（仪器、试剂、质控及操作程序等），熟悉评价方案。在整个实验中，试验体外诊断试剂和对比方法均应处于有效的质量控制下，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性。2.临床试验设计2.1 与对比方法/试剂的比较研究2.1.1申请人可采用核酸序列测定方法作为参比方法，验证试验体外诊断试剂检测结果与核酸序列测定（测序）结果之间的一致性。临床研究中应对选用的测序方法做详细介绍，并对委托测序服务的机构（如涉及）资质和选择依据作简要说明或提供相关资料。同时申请人应进行部分与病毒分离培养鉴定进行比对的临床试验。2.1.2 如有已上市同类产品，临床试验可选择已上市的同类产品作为对比试剂，对比试剂的选择应考虑样本类型、产品性能等方面应与试验体外诊断试剂具有良好的可比性。2.2 与临床参考标准的比较研究除上述比对试验外，还应考虑试验体外诊断试剂与临床参考标准进行对比。临床参考标准即按照国家卫生健康委员会发布的《猴痘诊疗指南》及《猴痘防控技术指南》等文件进行病例诊断的方法。3.临床试验入组人群临床试验的入组人群应为产品的预期适用人群，该产品的适用人群为猴痘的疑似病例，申请人在进行临床试验时应依据国家卫生健康委员会发布的《猴痘诊疗指南》中对“疑似病例”的定义，按照该定义入组病例进行临床研究。同时还应入组部分需要进行鉴别诊断的其它发热出疹性疾病，如水痘、带状疱疹、单纯疱疹、麻疹、登革热等进行特异性的评价。如试验体外诊断试剂包括血液样本类型，应注意针对该样本类型，入组人群应为急性期发病7日内的病例。4.临床试验样本类型临床样本的采集建议按照《猴痘病毒实验室检测技术指南》进行。临床试验过程中，如临床试验过程中样本确实难以获得，经提取后的核酸提取液亦可作为样本进行临床试验。如采用核酸提取液进行临床试验，建议临床试验中明确该核酸提取液对应的样本类型及样本保存液/采样液（如适用），同时明确核酸提取试剂盒，临床前应对临床试验中所涉及的样本类型、样本保存液及核酸提取试剂进行充分的性能评估，临床试验中所用样本保存液及核酸提取试剂应严格满足考核试剂及对比试剂要求。如申报产品适用于不同的样本类型，如皮肤病变标本（包括皮疹/痘疱渗出物的拭子；痘疱液；痘痂等）、咽拭子、全血或血清样本，应在临床试验中分别进行临床评价。针对全血和血清两种样本类型，申请人可通过同源比对的方式进行评价。样本类型的选择，应参考国家卫生健康委员会发布的《猴痘诊疗指南》及《猴痘防控技术指南》等文件的相关要求。5.临床试验样本量与对比方法/试剂比较研究的临床试验样本量应满足统计学要求，可采用适当的统计学方法进行估算。临床试验可依据试验用体外诊断试剂相对于对比方法的阴阳性符合率分别估算最低阴阳性样本例数。临床样本量的估算建议采用如下样本量公式计算，公式中，n为样本量；Z1-α、Z1-β为显著性水平和把握度的标准正态分布的分数位，P0为评价指标的临床可接受标准，PT为试验体外诊断试剂评价指标预期值。其中，阴阳性符合率的临床可接受标准（P0）建议不低于90%。获得临床试验数据后，证明产品相对于对比方法的阴阳性符合率（置信区间下限）不低于预设的临床可接受标准（P0）。当评价指标P接近100%时，上述样本量估算方法可能不适用，应考虑选择更加适宜的方法进行样本量估算和统计学分析，如精确概率法等。如申报试剂包含不同样本类型，建议针对皮肤病变标本、咽拭子、血液样本分别按照上述方法进行统计学估算。皮肤病变标本中，皮疹/痘疱渗出物的拭子、痘疱液、痘痂等均应有一定例数。病毒分离培养应入组一定数量的阳性及阴性病例，考察试验体外诊断试剂与病毒分离培养结果的一致性，纳入的例数也应进行统计学估算，可采用抽样精度的公式进行样本量估算。与临床参考标准的比较研究，建议参考与对比方法/试剂比较研究部分的样本量估算方法，设定合理的临床可接受标准。6.临床试验结果的统计分析此类产品的临床试验目的在于验证试验体外诊断试剂与已上市同类产品及临床参考标准的一致性，统计分析一般以四格表的形式对结果进行总结，并据此计算试验体外诊断试剂与对比方法的阳性/阴性符合率、临床灵敏度、临床特异度及其置信区间。应将试验体外诊断试剂与对比方法检测结果一致性、试验体外诊断试剂检测结果与临床参考标准的一致性、试验体外诊断试剂检测结果与病毒分离培养鉴定结果的一致性分别进行统计分析，以评价产品临床性能。临床试验建议对入组人群的人口学进行分析，包括年龄、性别、临床诊断背景等。临床试验中包含不同样本类型的，应在总样本数（各样本类型总和）进行统计分析的基础上，每个样本类型分别进行统计分析。临床试验中所有不一致结果均应结合患者的流行病学背景、临床症状、疾病转归等信息进行充分的分析。7. 境外临床试验数据的认可境外临床试验数据应符合《接受医疗器械境外临床试验数据技术指导原则》和《使用体外诊断试剂境外临床试验数据的注册审查指导原则》的相关要求。提交完整的临床试验方案、报告和伦理审查意见，以及该数据适用于中国患者人群的论证资料、境内外临床试验质量管理差异的对比资料和临床试验质量管理差异对于临床试验结果影响的论证资料。注册申请人应根据上述临床试验技术审评要求，论证境外临床试验数据的充分性。8. 临床证据的形式要求申请人应按照《体外诊断试剂注册与备案管理办法》、《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》等法规文件要求提交各机构伦理审查意见、临床试验方案、临床试验小结、临床试验报告以及临床试验数据库。临床试验数据汇总表作为临床试验报告的附件提交。数据表中应包括检测病例的编号、年龄、性别、样本类型、临床诊断结果、发病时间、试验体外诊断试剂检测结果（含各基因的Ct值）、对比方法的检测结果（各基因的Ct值）等，如临床试验中所用样本为核酸提取液，应明确该样本样本保存液（如涉及）、核酸提取试剂等。临床应用的数据集中每一病例编号应能够溯源。关于测序试验，申请人应提供以下关于测序部分的详细试验资料，需有临床试验单位的签章确认。（九）产品说明书和标签样稿产品说明书格式应满足《体外诊断试剂说明书编写指导原则》的要求。产品说明书中技术内容应与注册申报资料中的相关研究结果保持一致，如某些内容引用自参考文献，应以规范格式进行标注，并单独列明文献的相关信息。新冠病毒核酸检测试剂说明书编写应重点关注以下内容。1．【预期用途】本试剂盒用于体外定性检测猴痘疑似病例、其他需要进行猴痘病毒感染诊断或鉴别诊断者的xx样本中猴痘病毒核酸。有关“疑似病例”等人群的定义参照《猴痘诊疗指南》及《猴痘防控技术指南》等文件执行。该产品在使用上应当遵守《猴痘诊疗指南》及《猴痘防控技术指南》等文件的相关要求。开展猴痘病毒核酸检测，应符合《猴痘病毒实验室检测技术指南》等的要求，做好生物安全工作。本试剂盒检测结果仅供临床参考，不得作为临床诊断的唯一标准。建议结合患者临床表现和其他实验室检测对病情进行综合分析。2.【检验原理】简述产品的核酸提取和扩增原理，检测能够覆盖的目标基因序列特征。明确内标基因名称及其作用。如采用了防污染措施，进行简要描述。3.【主要组成成分】明确试剂盒中各组分及具体成分。明确需要但未提供的材料，例如核酸提取试剂，病毒保存液等的产品名称，生产厂家，货号及注册证号、备案号等信息。4.【样本要求】需详细描述样本采集和处理方式，包括采样步骤，适用的拭子材质（如适用），保存液及使用体积、适用的抗凝剂类型（如适用），灭活方式等。描述样本及核酸提取液的保存稳定性。5.【检验方法】明确核酸提取用的样本体积、洗脱体积和PCR加样体积，阴、阳性质控品与待测样本同步进行核酸提取操作。明确各适用机型的反应参数设置。明确质控品和内标的检测结果Ct值范围，作为实验有效性的标准。6.【检验结果的解释】通过扩增曲线和Ct值进行结果阴阳性的判断，列明结果阴性、阳性、复测、无效等所有情形。7.【检验方法的局限性】7.1本试剂盒的检测结果仅供临床参考，对患者的临床诊治应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。7.2有关假阳性结果的可能性分析7.2.1 如果样本在运输、处理过程中发生交叉污染，则可能导致假阳性结果；7.2.2 实验环境有PCR产物等气溶胶污染，则可能导致假阳性结果；7.2.3 实验过程中使用的耗材、设备等受污染，则可能导致假阳性结果。7.3有关假阴性结果的可能性分析7.3.1不合理的样本采集、转运、储存及处理、样本中病原体含量过低均有可能导致假阴性结果；7.3.2该病原体待测靶序列的变异或其他原因导致的序列改变可能会导致假阴性结果；7.3.3 未经验证的其他干扰或PCR抑制因子等可能会导致假阴性结果。8.【产品性能指标】简述以下性能指标：8.1国家标准品（如有）和企业参考品的符合率。8.2检出限：简要介绍评价方法、所用样本情况以及评价结果。8.3对包容性的研究情况进行总结。包括不同分支样本和猴痘病毒变异株的检出限和重复性性能并描述猴痘病毒变异株生物信息学分析结果。8.4对精密度的研究情况进行总结。8.5分析特异性8.5.1交叉反应：详述交叉反应验证的病原体种类，及有/无交叉反应的浓度水平。8.5.2干扰试验：说明验证的干扰物质种类及有/无干扰反应的浓度水平。8.6临床试验：简要介绍试验方法、受试者及样本、试验结果和结论等。9.【注意事项】9.1本产品仅用于体外诊断。9.2临床实验室应严格按照《医疗机构临床基因扩增实验室管理办法》等有关分子生物学实验室要求。9.3试剂保存运输及使用过程中多种因素可能导致性能变化，如保存运输不当、样本采集、样本处理及检测过程操作不规范等，请严格按照说明书操作。因拭子等样本采集过程及病毒感染过程本身的特点，可能存在采集到的样本量不足等原因带来的假阴性结果，应结合临床其他诊疗信息综合判断，必要时复测。9.4生物安全防护相关内容9.5避免实验室污染的措施

近日（10月25日） 医政医管局发布了《关于进一步强化当前新冠病毒核酸检测服务的通知》，文件明确核酸检测机构要向社会提供24小时核酸检测服务，要力争在6小时之内报告结果。国务院应对新型冠状病毒肺炎、疫情联防联控机制医疗救治组发布的这份通知指出：01全国所有二级及以上综合医院、传染病专科医院、各级疾控机构等，均应当具备核酸检测能力并提供核酸检测服务。02核酸检测机构要向社会提供24小时核酸检测服务，还要更进一步缩短核酸检测结果报告时间，特别是对“愿检尽检”人群的核酸检测，要力争在6小时之内报告结果。03在保证检测质量的前提下，发挥核酸检测仪器设备最大效能，鼓励根据检测量，配备新冠病毒核酸快检试剂及配套设备，减少等待时间。04卫生健康行政部门要通过官方网站、客户端、微信公众号、公共服务小程序等多种方式，向社会公布辖区内所有核酸检测机构名单、工作时间、联系电话、地址等，并及时更新，鼓励开发可视化地图便于群众查询。05第三方医学检测机构的核酸检测资源也要面向社会全部开放。为应对大规模的核酸检测需求，睿科集团推出自动化样本前处理解决方案助力新冠病毒核酸检测。其中包含原始样本分装、高效自动化核酸提取，到PCR体系构建的整套自动化样本前处理流程，能在大幅缩短病毒核酸提取时间的情况下，满足医护工作者和检验人员在病毒核酸提取过程中对通量灵活、快速自动及安全防控的需求。睿科新冠病毒核酸检测自动化操作流程产品介绍Vitae Mini-Lids 小型旋盖仪人体工学倾角设计，实验人员单手持管，即可快速定位完成开关盖。可用于新冠病毒检测中拭子采样管的开关盖操作，适配市面上所有规格拭子采样管。开关盖指令由传感器自动触发启动，12分钟完成96个标本开关盖。Vitae Lids分杯工作站可一次实现48/96个采样管的开关盖、样本分杯等功能，适用范围广，具备液滴捕获、气密防滴落设计，可配置生物防污染外罩或者直接放置到生物安全柜中使用，有效防控污染。Vitae 100全自动核酸纯化系统采用磁珠分离技术，可以快速提取1-96个样本，具有紫外灭菌及HEPA过滤系统，防止样本交叉污染，保护操作人员的安全。Vitae 100全自动PCR体系构建系统代替手工的PCR反应体系中重复移液步骤，实现自动化高效精准移液，避免了人为重复操作带来的误差以及污染；可实现384孔PCR板的分装；移液精度可以达到CV2%；兼容国内外任意品牌核酸提取的耗材和PCR板。

随着全国疫情防控进入常态化阶段，局部地区出现小规模聚集性病例，是现阶段疫情的主要特点。作为新冠筛查“金标准”的核酸检测，整体检测速度和通量的要求逐步严苛和多元化。为保障检测人员远离病原体感染风险，提升病原体核酸检测的准确性和效率，睿科集团推出自动化样本前处理解决方案助力新冠病毒核酸检测。其中包含原始样本分分装、高效自动化核酸提取，到PCR体系构建的整套自动化样本前处理流程，能在大幅缩短病毒核酸提取时间的情况下，满足医护工作者和检验人员在病毒核酸提取过程中对通量灵活、快速自动及安全防控的需求。睿科新冠病毒核酸检测自动化操作流程产品介绍Vitae Lids分杯工作站可一次实现48/96个采样管的开关盖、样本分杯等功能，适用范围广，具备液滴捕获、气密防滴落设计，可配置生物防污染外罩或者直接放置到生物安全柜中使用，有效防控污染。Vitae 100全自动核酸纯化系统采用磁珠分离技术，可以快速提取1-96个样本，具有紫外灭菌及HEPA过滤系统，防止样本交叉污染，保护操作人员的安全。Vitae 全自动PCR体系构建系统代替手工的PCR反应体系中重复移液步骤，实现自动化高效精准移液，避免了人为重复操作带来的误差以及污染；可实现384孔PCR板的分装；移液精度可以达到CV2%；兼容国内外任意品牌核酸提取的耗材和PCR板。

扬子晚报网2月4日讯（记者 薛马义）寨卡（Zika）病毒正在美洲“爆炸式蔓延”。2月1日世界卫生组织(WHO)宣布，将寨卡病毒及小头症列为全球紧急公共卫生事件。昨天记者获悉，针对此次疫情，苏州一家企业紧急启动 “寨卡（ZiKa）病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）”的项目，并已设计完成，随时等待量产工作。该试剂盒将第一时间走进疫情防控部门，为疑似病例的及时、有效检测工作提供保障。 主要通过蚊子叮咬传播，孕妇感染后可导致新生儿小头畸形 世界卫生组织(WHO)2月1日宣布，将寨卡病毒及小头症列为全球紧急公共卫生事件，国际社会应当协调应对。这是继甲型H1N1流感、脊髓灰质炎及埃博拉疫情后，世卫组织发布的第四个国际关注的突发公共卫生事件。目前寨卡（Zika）病毒已在全世界24个国家和地区有疫情报道，并已发现超过4000例新生儿小头畸形病例。中国大陆目前尚未发现寨卡病毒病例，但存在病例输入风险。国家卫计委提醒，随着气候逐渐回暖，到了春夏季后，广东等南方省份需要格外警惕。 苏州天隆科技有关负责人江志强告诉扬子晚报记者，寨卡（Zika）病毒属于黄病毒科中之黄病毒属的RNA病毒，与乙型脑炎病毒、登革热病毒、西尼罗病毒近亲。该病毒主要通过伊蚊叮咬在人际间传播。该病毒于1947年首次在乌干达被科学家一只发病的恒河猴体内分离出来，当时这只猴子是准备用来进行黄热病研究的。 寨卡病毒病主要通过蚊子（伊蚊）叮咬传播，血液和性传播罕见。多数病人仅出现轻微发热、红疹（多数为斑丘疹），另有一些病人会出现头痛、关节痛以及非化脓性结膜炎等症状，大多持续2至7天后自愈，极少出现死亡。近期有研究结果提示，病毒感染可导致少数人出现神经和自身免疫系统症状，孕妇感染后可能导致新生儿小头畸形，并可导致小儿夭折，其因果关系尚待进一步研究确证。 从样本的提取到核酸定量检测、报告的出具仅需2个小时 江志强表示，由于寨卡病毒与登革热、西尼罗河病毒和黄热病等其它黄病毒会发生交叉反应，因此通过血清学方法做出诊断可能较为困难。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和血中病毒分离培养可以确诊。起病7天内，如果检测到外周血清中寨卡病毒RNA阳性可以诊断，但由于RT-PCR阳性窗比较短（3-7天），也就是病毒血症期短，因此阳性窗之外阴性结果不能除外感染。 “寨卡病毒核酸为单股正链RNA，全基因长度约为11Kb，我们选择其中多个保守靶基因片段作为检测目标，实现多靶点同时检测，并结合高特异的探针技术（LNA技术)，有效地避开其他黄病毒的干扰，确保检测的高敏感度和特异性，可对血清中寨卡病毒实现实时定量分析，其检测灵敏度可达50copies/ml。” 江志强告诉扬子晚报记者，该检测试剂盒配合天隆自主研发生产的自动化核酸提取仪、提取试剂及荧光定量PCR仪，从样本的提取到核酸定量检测、报告的出具仅需2个小时，大大缩短了检测周期。特有内参基因的扩增检测，对实验过程（核酸提取、PCR扩增）进行全程监控，最大程度上保证结果的可靠性。 前往已出现寨卡病毒疫情的地区，可征求当地卫生部门的意见 江志强表示，目前该病主要通过对症治疗，尚无针对性的药物和疫苗，但可通过防止蚊虫叮咬有效预防。建议采取以下措施：使用驱虫剂；穿戴尽可能覆盖身体各部位的衣服，而且最好是浅色衣服；采用纱网、门窗紧闭等物理屏障；蚊帐内睡觉。要保护自己免患寨卡病毒和其它蚊媒疾病，每个人都应当采取上述措施，避免受到蚊子叮咬。孕妇或者计划怀孕的妇女应当遵循这一建议，当前往已经出现寨卡病毒疫情的地区旅行时，也可征求当地卫生部门的意见。 苏州天隆科技位于苏州纳米城，主要从事分子诊断、核酸检测、POCT等检验仪器、医疗器械及体外诊断试剂的研发、生产和销售，其产品在HIN1、H7N9、埃博拉、中东呼吸综合征等检测方面具有良好表现；2009年检出陕西首例甲型H1N1流感病例，2013年在浙江省完成了数千例流感样H7N9病毒核酸提取和筛查；2014年我国援非医疗检测队在塞拉利昂疫区利用天隆产品完成348例埃博拉出血热疑似病例的临床研究，检出阳性标本166例，并正式列入我国及西非诊断埃博拉病毒和疫情防控的应急储备产品；2015年，在中东呼吸综合征冠状病毒（ MERS-CoV）肆孽期间，天隆产品一旦发现MERS疑似病例，最快2小时内就能出结果，MERS检测试剂发往多个省级CDC、医院并出口至韩国，用于国家定点医院、流感检测网中心对流感、发热病人的初筛。（编辑：曹卢杰）

日前，中国计量科学研究院前沿中心生命科学计量团队为应对核酸检测实验室日常质量控制对质控品的迫切需求，紧急研制了一批新型冠状病毒核酸检测弱阳性标准物质。 当前新冠疫情仍在全球蔓延，国内疫情防控任务依然艰巨。核酸检测作为新冠筛查及确诊的“金标准”，却屡次出现多次检测才能确诊的“假阴性”问题。因此，加强实验室质量控制，特别是“质控品”的使用显得日益重要。2020年12月28日，国务院应对新型冠状病毒感染肺炎疫情联防联控机制印发《医疗机构新型冠状病毒核酸检测工作手册（试行 第二版）》（联防联控机制医疗发〔2020〕313号），要求各医疗机构应当加强核酸检测质量控制。“实验室应按照《国家卫生健康委办公厅关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测有关要求的通知》（国卫办医函〔2020〕53号）要求规范开展室内质控。每批检测至少有1份弱阳性质控品（第三方质控品，通常为检出限的1.5-3倍）、3份阴性质控品（生理盐水）。质控品随机放在临床标本中，参与从提取到扩增的全过程。” 此次研制的标准物质是参与从提取到扩增全过程的假病毒形式标准物质，能够模拟病毒含量低的临床样本，涵盖新冠病毒的三个关键靶标基因：N 基因（全长）、E 基因（全长）和ORF1ab基因（片段），适用于大多数核酸检测试剂盒。定值方法是以重量法配制值作为标准值，数字PCR方法进行验证，具有可溯源性。特性量值为每管溶液中含有的病毒ORF1ab基因和N基因的拷贝数浓度。包括高浓度及低浓度两个水平，量值范围为： 高浓度——ORF1ab(2945~4739) copies/mL, N（1940 ~ 3142）copies/mL； 低浓度——ORF1ab(881~1433) copies/mL, N（584~946）copies/mL。 检测实验室可根据核酸检测试剂的检测限进行选择使用（下表），对新冠病毒核酸从提取到扩增的全过程进行质量监控，有效保证检测结果的准确、可靠。 截至目前，中国计量科学院共研制七种新冠病毒核酸标准物质，可应用于方法建立、质量控制、仪器校准、试剂性能评估、验证与评价等多方面，保障核酸检测结果准确、可比、可溯源，为打好常态化疫情防控攻坚战提供计量技术支撑。

p 世界卫生组织(WHO)2月1日宣布，将寨卡病毒及小头症列为全球紧急公共卫生事件，国际社会应当协调应对。这是继甲型H1N1流感、脊髓灰质炎及埃博拉疫情后，世卫组织发布的第四个国际关注的突发公共卫生事件。寨卡（Zika）病毒正在美洲“爆炸式蔓延”，目前已在全世界24个国家和地区有疫情报道，并已发现超过4000例新生儿小头畸形病例。中国大陆目前尚未发现寨卡病毒病例，但存在病例输入风险。国家卫计委提醒，随着气候逐渐回暖，到了春夏季后，广东等南方省份需要格外警惕。br//pp 2月3日，国家卫计委公布《寨卡病毒病诊疗方案（2016第一版）》，其中规定：病毒荧光PCR核酸检测为病原学检查和病例确诊依据。br//pp 针对此次疫情，天隆科技紧急启动 “寨卡（ZiKa）病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）”的项目并已设计完成，随时等待量产工作。该试剂盒将第一时间走进疫情防控部门，为疑似病例的及时、有效检测工作提供保障。/pp style="text-align: center " 寨卡（ZiKa）病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）/ppimg width="640" height="520" title="试剂图片.png" style="width: 640px height: 520px " src="http://img1.17img.cn/17img/images/201602/uepic/68321558-2536-4c51-b099-3cfd86b55d96.jpg" border="0" vspace="0" hspace="0"//ppstrong检测原理：/strong/pp 寨卡病毒核酸为单股正链RNA，全基因长度约为11Kb，天隆科技选择其中多个保守靶基因片段作为检测目标，实现多靶点同时检测，并结合高特异的探针技术（LNA技术)，有效地避开其他黄病毒的干扰，确保检测的高敏感度和特异性，可对血清中寨卡病毒实现实时定量分析，其检测灵敏度可达50copies/ml。br//pp 该检测试剂盒配合天隆自主研发生产的自动化核酸提取仪、提取试剂及荧光定量PCR仪，从样本的提取到核酸定量检测、报告的出具仅需2个小时，大大缩短了检测周期。特有内参基因的扩增检测，对实验过程（核酸提取、PCR扩增）进行全程监控，最大程度上保证结果的可靠性。br//ppstrong试剂盒参数：/strongbr/灵敏度：50copies/mlbr/规 格：25测试/盒br/有效期：-20℃保存，有效期12个月。br//ppstrong什么是寨卡（Zika）病毒？/strong/pp寨卡（Zika）病毒属于黄病毒科中之黄病毒属的RNA病毒，与乙型脑炎病毒、登革热病毒、西尼罗病毒近亲。该病毒主要通过伊蚊叮咬在人际间传播。该病毒于1947年首次在乌干达被科学家一只发病的恒河猴体内分离出来，当时这只猴子是准备用来进行黄热病研究的。/pp style="text-align: center "br/img title="1.png" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201602/uepic/5108dc86-f78c-48b3-8977-5e4cd2a6555f.jpg"//ppstrong寨卡(ZiKa)病毒模式图/strong/pp 寨卡病毒病感染以症状和流行病史为诊断基础（比如，蚊子叮咬，或者到已知存有寨卡病毒的地区旅行）。由于寨卡病毒与登革热、西尼罗河病毒和黄热病等其它黄病毒会发生交叉反应，因此通过血清学方法做出诊断可能较为困难。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和血中病毒分离培养可以确诊。起病7天内，如果检测到外周血清中寨卡病毒RNA阳性可以诊断，但由于RT-PCR阳性窗比较短（3-7天），也就是病毒血症期短，因此阳性窗之外阴性结果不能除外感染。br//pp 寨卡病毒病主要通过蚊子（伊蚊）叮咬传播，血液和性传播罕见。多数病人仅出现轻微发热、红疹（多数为斑丘疹），另有一些病人会出现头痛、关节痛以及非化脓性结膜炎等症状，大多持续2至7天后自愈，极少出现死亡。近期有研究结果提示，病毒感染可导致少数人出现神经和自身免疫系统症状，孕妇感染后可能导致新生儿小头畸形，并可导致小儿夭折，其因果关系尚待进一步研究确证。br/　 目前该病主要通过对症治疗，尚无针对性的药物和疫苗，但可通过防止蚊虫叮咬有效预防。建议采取以下措施：使用驱虫剂；穿戴尽可能覆盖身体各部位的衣服，而且最好是浅色衣服；采用纱网、门窗紧闭等物理屏障；蚊帐内睡觉。要保护自己免患寨卡病毒和其它蚊媒疾病，每个人都应当采取上述措施，避免受到蚊子叮咬。孕妇或者计划怀孕的妇女应当遵循这一建议，当前往已经出现寨卡病毒疫情的地区旅行时也可征求当地卫生部门的意见。 /pp　 天隆产品早在HIN1、H7N9、埃博拉、中东呼吸综合征等突发公共卫生事件中做出了重要贡献。br//pul class=" list-paddingleft-2" style="list-style-type: disc "lip2009年，陕西首例H1N1。天隆荧光PCR仪检出陕西首例甲型H1N1流感病例；/p/lilip2013年，H7N9。人感染H7N9禽流感防控期间，天隆荧光PCR仪和核酸提取仪及试剂装备了浙江大学第一附属医院、湖州市CDC等重点单位，完成了数千例流感样H7N9病毒核酸提取和筛查；/p/lilip2014年，埃博拉疫情。天隆科技快速响应进行埃博拉病毒核酸检测试剂（PCR-荧光探针法）的研发和生产，在塞拉利昂疫区，我国援非医疗检测队利用该试剂完成了348例埃博拉出血热疑似病例的临床研究，检出阳性标本166例。该试剂盒经过CFDA严格考核，通过了应急审批，获得了国家注册证，已正式列入我国及西非诊断埃博拉病毒和疫情防控的应急储备产品；/p/lilip2015年，中东呼吸综合征冠状病毒（ MERS-CoV）。天隆设备一旦发现MERS疑似病例，最快2小时内就能出结果，MERS检测试剂发往多个省级CDC、医院并出口至韩国，用于国家定点医院、流感检测网中心对流感、发热病人的初筛。/p/lilipbr//p/li/ulpbr//pp“为人类健康，创造一流分子诊断产品”是天隆科技的追求，我们将一如既往地为人类健康提供优良的产品及全方位的支持服务。/p

非洲猪瘟病毒提取检测试剂盒(AB盒)FT-FWSJ_风途批发_非洲猪瘟病毒提取检测试剂盒(AB盒)_Go tšwa ga poledišano ya sešireletši sa go dira modumo ya sešireletši sa go tswalela ka Afrika (AB Kit)_好试剂选风途错不了　　非洲猪瘟的爆发对我国养殖业构成了空前的挑战，将对我国养猪业及相关产业的发展产生深远的影响。近期有报道称，从部分猪血浆蛋白粉中检测出非洲猪瘟病毒核酸，这几乎宣告了猪源性饲料添加剂( 如血浆粉、血球粉、肉骨粉)的死刑。如何解决这些添加剂的出路和替代途径是需要研究的重要课题。目前频繁的生猪调运和简易的运猪车辆，是疫情长距离扩散的主要风险因素，亟待建立可监测、可追溯、符合生物安全的生猪/猪肉调运和监管系统。　　【产品名称】　　通用名称：病毒DNA提取试剂盒　　英文名称：Extraction Kit for Virus DNA　　【预期用途】　　本试剂盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、组织、饲料及环境中的病毒DNA的提取，纯化的核酸可适用于各种常规操作及PCR试验。　　【试剂盒组分】　　I、试剂盒组成及贮藏条件名称20 T50 T1、吸附柱20个50个2、收集管20个50个3、裂解液5 mL11 mL4、洗液I13 mL32 mL5,洗液II13 mL32 mL6.洗脱液1.2 mL3 mL　　2、 保存条件及有效期：室温下保存，有效期12个月.　　3、 需自备材料：无水乙醇、1.5 mL无菌离心管、1.5 mL无菌离心管(长臂型)、生理盐水、研钵、无菌　　1mL, 2OOuL、10uL枪头、记号笔等。　　【操作步骤】　　一、样品制备　　1、 血液样品：抗凝血样品置离心管中，8000转/分钟离心2分钟，取上层血浆 非抗凝血样品置离心 管中，待凝固后，8000转/分钟离心2分钟，取上层血清，置于灭菌离心管中，编号待检。　　2、 组织样品：采集脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体等病变组织样品0.1g.组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨，加入1 mL生理盐水混匀，8000转/分钟离心2分钟，取上清于灭菌离心骨中，编号待检。　　3、 口腔液：进食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉线绑纱布团吸引动物咀嚼，收集口腔液大于 500uL， 8000转/分钟离心2分钟，取上清于灭菌离心管中，编号待检。　　4、 饲料：取适量研磨后的饲料(约0.2g)，放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP 管屮，振荡混匀，8000转/分钟离心2分钟，取上清于灭菌离心管中,编号待检.　　5、 灰尘：用无菌棉签蘸取适量环境表面上的灰尘，放入含1 mL生理盐水或PBS(PH为7.4)缓冲液的2 mL EP管中，振荡混匀，8000转/分钟离心2分钟，取上清于灭菌离心管中，编号待检。　　二、DNA的提取　　1、取裂解液200uL加入无核酸酶1.5 mL离心曾屮，分别加入血浆/血清/组织液等样品液200uL. 震荡混匀10秒或颠倒混匀10次，室温放置5分钟(如果室内温度较低时.需放置25C水浴温育)，再加入200uL无水乙醇，颠倒混匀10秒 若样品浑浊则先12000转/分钟离心1分钟处理，取上清液，以避免堵塞柱子 　　2、 将液体转入套有收集管的吸附柱中， 12000rpm离心1分钟：　　3、 弃收集管液体，向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm离心1分钟 　　4、 弃收集管液体，向吸附柱中加600uL洗液II， 12000 rpm离心I分钟 　　5、 弃收集管液体，12000 rpm离心2分钟，以彻底去除残留洗液 　　6、将吸附柱转入新的无核酸酸1.5mLEP管(长臂型)中，向柱中央滴加50 uL洗脱液，静置1分钟, 12000 rpm离心1分钟，EP管中液体即为病毒DNA。　　【注意事项】　　1、 实验前诺仔细阅读本试剂盒说明书，严格按照操作步骤执行.在操作过程中对时间、试剂体积等 粘确控制可以获得好的结果。　　2, 样本应新鲜采集使用，或低温运输储存 　　3, 样本具有潜在感染风险，核酸的提取应在核酸提取实验室的生物安全柜中进行。　　4、 核酸提取冇关耗材确保高温灭菌，提取后核酸尽快进入下一步试验或冷冻保存待用。　　5, 试剂使用前应混合均匀，试剂具有一定腐蚀性，使用时请戴手套、口罩做好防护。　　6. 低温下裂解液出现结晶数属正常现象，可在60°C水浴加热助溶后使用。　　7、 实验产生的废弃物应及时收集，远离PCR实验室进行无害化处理。　　仅供兽医诊断使用　　非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒说明书　　【兽药名称】　　通用名称：非洲猪瘟病毒荧光PCR核酸检测试剂盒　　汉语拼音:Feizliouzhuwen Bingdu Yingguang PCR Hesuan Jianceshijihe　　英文名称：African swine Fever Virus (ASFV) PCR Nucleic Acid Diagnostic Kit　　商品名称：无　　【主要成分与含量】试剂盒中含有如下组分:试剂盒组分含量阳性对照250μL/管×1管 阴性对照250μL/管×1管 PCR反应液850μL/管×1管 萌混合液150μL/管×1管 说明书1份/盒【作用与用途】 本试剂盒可用于血液、脾脏、肝脏、淋巴结、 样品中非洲猪瘟病毒核酸的检测。扁桃体、肾脏、肌肉、环境样品等　　【用法与判定】　　1 用法　　1.1待检样品釆集、保存及运输　　1.1.1样品釆集　　(1) 活猪样品 无菌采集抗凝血或血清5mL　　(2) 病死猪剖检样品或屠宰场剖检样品 无菌采集死猪的牌、肺、肾、扁桃体、淋巴结、肌肉等组织样品。2〜8°C低温运至实验室用于检测。　　(3) 病猪污染的周边环境 采集与病猪相关场所的粪便、饲料、污水样品。2〜8°C低温运至实验室用于检测。　　1.1.2样品保存 采集的样品在2〜8°C保存应不超过24小时，-70°C条件下保存，避免反复冻 融。　　1.1.3样品运输泡沫箱加冰袋后密封进行运输。包装和运输应符合农业农村部《高致病性动 物病原微生物菌(毒)种或者样品运输包装规范》和交通运输部门关于危险品运输管理的有关规定。　　1.2样品处理　　1.2.1血液样品处理 抗凝血样品置于离心管中，8000 r/min离心2分钟取上层血浆，编号待 检。非抗凝血样品置于离心管中，待凝固后，8000 r/min离心2分钟取200μL上层血清，编号待检。　　1.2.2组织样品处理取适量脾脏、肝脏、淋巴结、扁桃体、肌肉等组织，置于研磨器或研磨管中研磨，再加适量生理盐水混匀，制成约10%的组织匀浆，8000 r/min离心2分钟，取200μL上 清于RNase/DNase-free无菌离心管中，编号备用。　　1.2.3环境样品处理　　1.2.3.1粪便、饲料样品处理方法取适量的粪便、饲料放入盛有PBS缓冲液的研磨管中研磨混匀，制成约10%的匀浆液.8000 r/min离心2分钟，取200μL上清于RNase/DNase-free无菌离心 管中，编号备用。　　1.2.3.2污水样品处理方法 直接取200μL污水进行核酸提取。　　1.3病毒核酸的提取用磁珠法或柱式法进行DNA核酸提取。　　1.4荧光PCR反应：　　1.4.1从试剂盒中取出荧光PCR反应液、酶混合液，室温融化后，2000 r/min离心5秒。设被 检样品、阳性对照和阴性对照总和为n,则反应体系配制如下：　　试剂 体系　　PCR 反应液 17× (n+1) μL　　酶混合液 3× (n+1) μL　　1.4.2在新的RNase/DNase-fire 1.5 ml离心管中加入上述试剂，充分混匀后瞬时离心。按照20μL/ 管分装量将试剂分装至荧光PCR反应管。　　1.4.3在上述制备好的荧光PCR反应管中分别加入阴性对照、阳性对照各5μL、处理好的待测核酸各5μL,终体积25μL/管，盖好荧光PCR反应管盖，混匀后瞬时离心，转移到荧光PCR仪器 上。　　144将PCR反应管放置在荧光PCR仪样品槽中，在荧光PCR仪上运行以下程序：步骤条件循环数UNG处理50 ℃, 2分钟1预变性95 ℃, 3分钟1预扩增95 ℃： 8 秒 55 ℃： 8 秒 5PCR扩増95 ℃： 8 秒 55 ℃： 8 秒 40　　荧光通道选择FAM,在PCR扩增阶段每个循环的55℃时采集荧光信号。设置扩增体系为25μL, 同时要选择passive reference和quencher为none的模式。(注：若荧光PCR仪(如AB17500)按说明 书中的反应程序设置后因持温时间短无法运行，可将预扩增和PCR扩增条件变更为95C： 5秒 55°C： 30 秒)　　2结果判定　　2.1试验有效性判定　　阳性对照有典型扩增曲线且Ct值≤30.且阴性对照无Cl值或无扩增曲线，线形为直线或轻微斜线，无指数增长期。则判试验结果有效。否则，此次试验视为无效。　　2.2样品判定　　2.2.1阳性：样本检测结果Ct值≤35且有明显指数增长期，判定检出非洲猪瘟病毒核酸。　　2.2.2可疑：样本检测结果Ct值在35〜38范围内。此时应对样本进行重复检测，如果重复实验 结果Ct值仍在35〜38范围内，有明显指数增长期.则判定为阳性，否则为阴性。　　2.2.3阴性：样本检测结果Ct值38或无Ct值，判定未检出非洲猪瘟病毒核酸。　　【注意事项】(1)实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按照操作步骤执行，在操作过 程中对时间、试剂体积等精确控制可以获得好的结果。　　(2) 实验室应严格按照有关规定分区管理，依照配液区-模板提取区-扩增区-分析区顺序 进行基因检测。各区间人员、器材、试剂及空气流向应有严格要求。　　(3) 核酸提取有关耗村确保洁净、无DNase/RNase,提取过程尽量低温、快速，完成后进入 下一步实验或冻保。　　(4) 对于顶部采光仪器要带新的一次性PE手套对荧光PCR管封盖，对于底部采光仪　　器要避免徒手或使用过的手套接触荧光PCR管底，检测过程中使用不带荧光物质一次性乳胶手套。　　(5) 冻存试剂使用前应于室温下完全融化，瞬时离心使液体完全沉于管底。避免反复冻融， 以免影响试剂性能。　　(6) 样品、阳性对照等在使用后及时封盖，.避免组分间及气溶胶等的污染造成假阳性。　　(7) 扩增产物禁止开盖，实验产生的废弃物应及时收集，远离PCR实验室进行无害化处理。　　【规格】50头份/盒　　【贮藏与有效期】试剂盒置-20°C以下避光保存，有效期12个月。　　【批准文号】兽药生字163668871

p　　新型冠状病毒COVID-2019仍然是公众最关注的的话题，红外热成像仪、核酸检测试剂盒、抗体快速测试卡等一大批仪器在这场抗疫战争起到了至关重要的的作用。例如：/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/news/20200213/521866.shtml" target="_self"红外热成像入校园!体温快速筛查系统在国科大四校区全面启用/a/pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/news/20200217/522086.shtml" target="_self"15分钟现场筛查!南开大学7天研制出新冠病毒抗体快速测试卡/a/pp　　12日在瑞士日内瓦闭幕的新型冠状病毒全球研究与创新论坛将研发更加简便的确诊工具定为短期内最迫切的目标。br//pp　　a href="https://www.instrument.com.cn/news/20200214/521891.shtml" target="_self"新冠病毒全球论坛聚焦：研发比PCR检测更简便易行的确诊工具/abr//pp　　那么，目前可能适用于新型冠状病毒的检测手段都有哪些?/pp　　strong一、核酸检测方法/strong/pp　　strong1. 全基因组测序/strong/pp　　全基因组测序可准确鉴定病毒，但是目前的高通量测序平台测序时间较长，灵敏度相对较低。/pp　　特点：可准确鉴定病毒、在病毒溯源和流行病学调查中有重要作用/pp　　问题：测序时间较长、灵敏度相对较低/pp　　strong2. RT-PCR/strong/pp　　基于病毒基因保守序列的RT-PCR检测方法，是呼吸道病毒检测的常用方法，本次新冠病毒检测也同样适用。该方法通过对病毒RNA进行提取、逆转录、PCR扩增病毒保守序列(RdRP基因(特异性靶点)、E蛋白基因、N蛋白基因以及一个鉴定保守基因S区位点 可以只检测RdRP基因或者选择RdRP基因和其他多个基因确认)，扩增体系中的荧光蛋白会结合扩增出的双链DNA序列从而发出荧光，根据检测到的荧光值判断是否有病毒存在并定量。/pp　　该方法的优点是相较于其他抗原抗体法(如胶体金技术)更为灵敏，检测结果更为准确，但是检测需要专业的仪器和分子检测实验室以及专业的操作人员，操作不当或者实验室条件不足可能会因气溶胶污染造成假阳性，且整个流程需要几个小时，相较于胶体金法时间更长。/pp　　strong3. CRISPR/strong/pp　　CRISPR系统由向导RNA(gRNA)和Cas蛋白组成，gRNA能够指导Cas识别并切割带有特异序列的RNA或者DNA分子。其中Cas13a蛋白在特异性切割靶标RNA时，会继续切割非靶标RNA，利用这一特点，在整个体系中加入带有荧光标记的RNA信号分子，一旦带有荧光的RNA被切开，就会发出荧光信号，该技术与等温扩增技术结合，可高特异性高灵敏性低对病毒核酸进行检测。/pp　　该技术检测时间相较于RT-PCR短，但是CRISPR系统研究出现时间较短，该系统存在有脱靶的可能，其灵敏度和特异性还有待考证。/pp　　strong4. 逆转录环介导等温扩增法(RT-LAMP)和实时RT-LAMP/strong/pp　　逆转录环介导等温扩增法(RT-LAMP)对2009年H1N1大流行病毒的敏感性为97.8%，特异性为100%。基于LAMP的检测方法也被用于检测高致病性的H5N1和H7N9禽流感病毒，其敏感性比基于RT-PCR的方法具有可比性或更高的灵敏度。/pp　　二、strong病毒分离鉴定/strong/pp　　病毒培养是诊断流感病毒感染的传统方法之一，但是传统的分离鉴定方法需要连续培养多天，敏感性和特异性都会低于核酸检测方法，虽然在前期确定侵害性病原物起到关键作用，但较为耗时，且不便捷，不能满足大量疑似患者筛查需求。/pp　　strong三、免疫学检测方法/strong/pp　　strong1. 直接免疫荧光技术/strong/pp　　将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位，这种检测方法的敏感性低于核酸检测方法。/pp　　strong2. 免疫胶体金层析技术/strong/pp　　胶体金是一种常用的标记技术，是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。用于检测病毒使用的试剂条包被的是人体免疫系统中出现的该病毒特异性抗体或者是检测病毒本身的抗原，检测结果会出现肉眼可见的红色或者粉色条带。/pp　　虽然免疫胶体金层析技术操作简单，出结果快(一般为20分钟)，但是此方法敏感性较差，加入样本后的原理靠的是层析，也就是往外分散，如果材料等质量有误差，会影响检测结果 也会因为病人感染时间较短或者采样部位导致病毒含量较低，导致出现假阴性。另外，该方法由于依赖抗原抗体，对于前期开发时选择包被的抗原/抗体最为关键，短时间内开发出的产品有待确认其特异性和灵敏性。/pp　　strong四、其他方法/strong/pp　　基因芯片技术、酶联免疫吸附测定(ELISA),IgG及IgM免疫荧光检测。/pp　　在本次疫情中，通过临床特征和各项指标的判断，以及核酸检测来最终确诊是否为新冠病毒感染，其中CT影像和核酸检测一直作为诊断标准在疫情诊断中发挥着重要作用。从目前来看，不同检测方法均存在着各自的优势和弊端，只有综合运用各种检测工具，才能实现快速高效的检测，缩短新冠患者的确诊周期。/ppbr//p

核酸提取作为作为核酸检测的“第一步”，也是最关键的一步，其获得的核酸质量的优劣直接影响到下游分子生物学试验的成败。在疫情期间，自动化的核酸提取仪在加速新冠病毒检测中起了举足轻重的作用。由于疫情原因，核酸提取仪需求会在相当时间内保持旺盛状态。所以，今天我们为大家整理市场上的核酸提取系统品牌信息，以供大家了解。目前市场上的核酸提取仪的提取原理主要分为两种：磁珠法和膜吸附法，其中磁珠法占市场主流地位。磁珠法具体又包括磁棒法和抽吸法。国外核酸提取仪品牌QIAGENQIAcube Connect正在重新定义自动化样品处理的优势。凭借先进的数字功能和连通性，QIAcube Connect及其附件和耗材使研究实验室只需按一下按钮，即可完全自动化和跟踪其著名的QIAGEN离心柱萃取和纯化方案。研究人员可以通过内置屏幕与平板电脑保持远程连接，该平板电脑包含预装的QIAcube Connect应用程序，从而可以快速响应，并可以在远离QIAcube Connect的情况下监控运行情况。使用最常用的140多种标准协议自动化80多种QIAGEN试剂盒可选的协议定制功能可将其扩展到几乎所有应用程序允许自进行DNA，RNA和蛋白质样品处理，消除手工处理步骤产生标准化结果，通过随附的平板电脑实现快速响应时间和远程运行监控。 RocheMagNA Pure LC 2.0 System可从各种生物样本（全血、白细胞、外周血、单核细胞、培养细胞、组织、石蜡切片）中分离纯化DNA、RNA和mRNA（PCR级纯度）。富士QuickGene-610L是在QuickGene 810型自动核酸提取仪的基础上开发出来的一款新型半自动的基因组提取系统，并专门优化以用于全血的遗传分析。其能在12分钟内从6份全血样品中提取DNA，适用于高通量的常规分析工作。Thermo fisherKingFisher™ Presto 磁珠纯化仪，专为自动化系统设计，可与封膜仪、PCR仪、离心机等其他仪器进行整合。为高通量实验室提供全天候的稳定、高性能纯化服务。ABIExpress核酸提取仪结合磁珠检测技术，操作简便灵活，能在短时间内处理大量样本，是一款实用性非常强的自动核酸提取系统。特点：1.专为疑难检材设计提高DNA得率；2.不含PCR抑制剂，提取到的DNA质量高；3.封闭性系统，最大程度的降低污染。TecanFreedom EVO工作站是一种高度灵活且可拓展的系统，可以实现不同样品RNA、mRNA、基因组DNA的自动化提取。可以使用不同的分离技术—如固相提取、磁珠分离以及离心分离法来进行提取操作。珀金埃尔默Chemagic 360 自动核酸提取仪是基于电磁原理进行磁珠分离的高通量自动化核酸提取仪，可从各种类型样本中提取核酸，通过金属棒自我旋转混匀而不是上下震荡方式进行反应体系的混匀，可以有效降低样本间交叉污染的风险。内置自动分液器，除样本和部分小体积试剂需要手工加入提取体系之外，其余核酸提取试剂均自动加入。耶拿德国耶拿成立于1990年，前身为久负盛名的卡尔蔡司公司分析仪器部，已发展成为德国最大的分析仪器公司之一。1.耶拿新核酸提取技术Smart Extraction2.InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪3.高通量自动核酸纯化系统4.小型自动核酸纯化系统梅里埃NucliSENS easyMAG是梅里埃运用其独特专利技术研发的一套全自动核酸提纯仪系统，这套突破性的平台，通过极其简单的操作提高了生产力。贝克曼库尔特Biomek NXP工作站配置了96通道加样器、震荡混匀模块和温控模块，能自动化地完成核酸提取过程中的样品裂解、磁珠混匀、磁珠洗涤及核酸高温洗脱等核酸提取流程，在70分钟内完成96个检材样品的自动化提取实验，自动化集成化程度很高。ioneerExiPrep™ 16 全自动核酸提取仪是 Bioneer 核心产品之一，该仪器极大地提高了核酸提取操作的智能化，使用非常简洁。只需加入样本，选择对应提取程序，按下 “Start” 即收获核酸。一次可提取 1-16 个样本，时间不超过 30 分钟，还可联网，1 台电脑同时操作多台机器，并且有着极佳的性价比和经济的配套试剂盒。欧罗拉创建于1990年的欧罗拉是北美著名的生化仪器设备公司。VERSA Gene 1100高通量测序文库制备工作站，通过在短时间内获得全基因组序列，对基因组学研究工作产生了革新性影响。针对NGS工作流程选择合适的自动化设备是一个复杂的过程，首要满足NGS流程的高通量要求，以及自动化解决方案的稳定性以及扩展性能，才能更好发挥NGS技术的优势。KURABOQuickGene-Mini80 是迷你型核酸纯化仪，无需额外的离心操作，避免对样品的损伤，回收率高，操作方便，快速。可对各种样品，包括血液，组织、细胞、植物、病毒等进行DNA/RNA的提取。结合特定的试剂盒进行核酸提取，性价比极高，让实验室人手一台的核酸提取成为可能，更快，更方便，更准确，片段更长，回收效率更高。国产常见核酸提取仪品牌仪器信息网统计了2020年下半年核酸提取仪中标情情况，发现中标信息覆盖50家核酸提取仪研发制造企业，其中外资企业仅占6席。从核酸提取仪中标数量来看，81.3%为国产品牌，进口品牌仅占18.7%。在核酸提取仪市场，国内品牌已经占据显著优势。核酸提取仪进口/国产比例（数量）核酸提取仪中标品牌占比下面列出部分国产核酸提取仪介绍及产品特点附：核酸提取专场

核酸提取和纯化，对检测结果的影响早在公元前2-3世纪，中国和印度就有了关于病毒所导致的疾病---天花的记录，直到19世纪末，病毒才开始逐渐被发现和鉴定。目前，对于新冠疫情的检测，使用体外诊断核酸检测方法仍是不可或缺的手段。 核酸是分子生物学的基础，而核酸提取是核酸检测，乃至于整个分子行业绕不过去的门槛，很多时候一份样本的核酸提取的好坏直接决定了检测结果的有效性。 核酸提取的主要步骤：01裂解细胞去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子，去除其他不需要的核酸分子，如提取DNA分子时，应去除RNA，反之亦然。 02沉淀核酸纯化核酸，去除盐类，有机剂等杂质，一般可以把核酸提取方式主要分为三类：溶液型抽提，柱式抽提，磁珠纯化法。 随着基因检测、个性化给药等普及，生物行业各个领域都追求高通量、高纯度的今天，磁珠法纯化提取核酸的优势更加明显 磁珠技术作为是运用较为广泛的核酸提取方式。磁珠法与PCR法联合使用，在高效提取核酸的同时，使气溶胶污染概率大大降低，能有效防止实验容易出现假阳性的问题。 说到磁珠法，那我们首先当然必须得了解磁珠，什么是磁珠呢？磁珠是利用一定的组织包被四氧化三铁核心而形成的可以被磁铁吸附的同时有能通过表面包被物吸附（结合）核酸的神奇的小珠子。 ▲ 磁珠法核酸提取原理示意图 磁珠法是通过裂解液裂解细胞组织样本，从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内，通过反复快速搅拌、混匀液体，经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤，*得到纯净的核酸。核酸纯化的方法是影响所提取核酸质量的重要因素，只有高质量的核酸才能满足下游的各种应用。 如何获得更*的核酸提取结果？除了选择合适的提取方式，严谨的实验操作之外，无菌、高品质的实验室小耗材也值得精心挑选！SP Bel-Art为DNA/RNA浓缩纯化过程提供必要的工具，保证提取核酸的质量。 01研磨组织相关产品ProCulture微量均质器-手持式快速处理一对多样品的理想选择，配套的塑料研棒无DNase，RNase。 液氮冷却微型研钵和研杵套件通过在微型离心管中均匀化来保护样品质量，减少样品损耗和采集时间。 02核酸提取相关产品磁珠分离架可拆卸套管，更有效地传输液体；50ml和15/5ml型号的独立管套使液体的添加和去除更容易；不同规格可供选择：1.5ml至50ml型号的管套上的弹簧柱塞允许珠子沿管壁以不同高度分离；目前该款明星产品正在申请*。 Flowmi™ 细胞过滤器过滤原代培养物时尽量减少样品损失，使用方便防止污染。 ProCulture轨道振动平台把你的搅拌器变成轨道摇床。 ProCulture37°C恒温板在培养箱外保持理想的细胞温度。培养皿在培养箱外放置更长时间；保护细胞活力；减少细胞压力，使胰蛋白酶等酶有效地发挥作用。 ProCulture-1°C冷冻控制器易于使用，可控制冷冻速度，大约每分钟-1°C；适用于1.0/1.8ml的试管，18位。 03核酸纯化相关产品PrepSafe微型离心管微型浮动架在工作台上工作，在水浴中漂浮；离心管被紧密地固定，确保不会弹出；将支架的支腿压在工作台上，可松开管子，便于拆卸；开放式支架使试管与水接触*，以便更好地控制样品的温度。 关于SP Bel-ArtSP Bel-Art隶属于SP Scientific集团，公司坐落于美国新泽西州，自1946年创立以来，开发，开创了实验室使用塑料设备的先河，生产制造的实验室设备和耗材广泛应用于制药、生命科学、生物技术、教育、食品、医疗保健和石化等行业，现有产品超过10,000种，为客户提供全面的选择，产品广泛销往美洲、欧洲、亚洲、非洲、澳洲等多个国家和地区。Bel-Art产品经过反复的实践检验，以高质量的标准为全球广大用户提供全方位的产品和技术服务。作为SP旗下的一个成员，Bel-Art致力于为客户提供更多创新性、更有价值的产品。SP Bel-Art主打产品细胞过滤器保存小体积样品，避免流式细胞仪堵塞安瓿瓶开瓶器杜绝试剂污染，安全方便开启安瓿瓶无菌取样工具FDA级别适用于生物制药行业，伽马射线灭菌，无需进行昂贵的清洁验证生物危害处理高压灭菌处理生物危害垃圾干燥器款式丰富，*化实验室空间磁力搅拌子种类繁多，适用于各种搅拌实验常用管架试管架、离心管架等温度计涵盖各种玻璃液体、电子和双金属温度计比重计波美计、密度比重计、酒精比重计等试剂瓶带GHS标签的安全洗瓶、试剂瓶等移液器和附件各种款式移液产品生命科学相关产品磁珠分离架、96孔PCR板、研磨器、克隆环等

新型冠状病毒（2019-nCoV）全球范围内大规模爆发，使“核酸检测”进入了公共视野。在全球新冠诊断标准中，基于荧光定量PCR的核酸检测是 “金标准”。伴随PCR一同火出圈的还有另一关键设备--核酸提取仪，它是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸提取工作的仪器。在核酸检测过程中，核酸提取作为前处理，对最终分析结果的准确性起到重要作用。自动化的核酸提取仪是针对大规模人群进行快速核酸检测的重要技术支撑。核酸提取仪在环境微生物检测、食品安全检测、法医学鉴定、疾控医疗、生物学研究以及畜牧业等多种领域均得到广泛地应用。核酸提取技术的“前世今生”新型冠状病毒的检测需要经过取样、留样、保存、核酸提取、上机检测五个步骤，大多数临床样本中的核酸浓度相对较低，从复杂的生物样品中提取高纯度的核酸对保证高灵敏度和高准确性的核酸检测起着关键性作用。核酸提取是指从复杂体系中实现核酸的分离和纯化，核酸分子一级结构的完整性、纯度、样品溶解率与核酸吸附率等均可作为核酸提取效率的指标。1869年,瑞士医生Friedrich Miescher首例成功的进行了核酸提取。19世纪80年代初，德国生物化学学家Aibrecht Kossel进一步纯化获得核酸。此后，研究者在提取材料和方法上不断进行改进,发展出一系列核酸提取技术。根据工作方式，核酸提取技术分为手动提取和自动提取两大类。手动核酸提取技术存在操作步骤复杂、效率低，核酸纯度低等问题，而全自动核酸提取技术是应用配套的核酸提取试剂来自动化完成样本核酸的快速提取，具有操作简单、精确性高和稳定性强等优势。在本次新冠疫情中，高通量全自动核酸提取仪在大规模人群核酸检测中发挥了重要作用。核酸提取仪的工作原理目前，核酸提取仪的工作原理主要分为磁珠法和柱提法，其中磁珠法在当前市场占主流地位。 磁珠法的工作原理主要利用磁珠对核酸的特异性识别和高效结合性，通过磁珠吸附核酸达到分离效果，常见的磁珠种类包括氧化锆磁珠和二氧化硅磁珠等。根据磁珠与液体的分离方式又细化分磁棒法和抽吸法，二者原理和过程相同。磁珠法提取过程示意图（图源网络）磁珠法核酸提取仪器的特点◆高效简捷，能够实现高通量操作，操作简单，用时短 ◆灵活稳定，能够实现自动化操作，重复性高 ◆安全环保，减少对操作员身体的危害 ◆价格低廉，可满足数据库建设 ◆质量稳定，核酸纯度高柱提法的工作原理主要利用二氧化硅对核酸特异吸附性，在高盐，低pH的环境下将核酸吸附在硅胶膜上，后经离心或洗脱（洗脱液为低盐高pH溶液）等方法将其剥离，达到分离的目的。通量一般在1-12个样本，操作时间与人工提取相比较，没有显著优势，因此目前主要应用于实验室的研究。柱提法提取过程示意图（图源网络）新冠疫情引爆核酸提取仪市场新冠疫情的爆发导致对核酸提取仪的需求暴增。根据2020年全国公开招中标信息调查，当年核酸提取仪中标总计7011台/套，出现国内外品牌共计77个。在纷繁复杂的品牌型号中，如何挑选到自己满意的核酸提取仪呢？接下来，小编将遴选推荐一些靠谱品牌型号。（按品牌简称首字母排序）A奥美泰克推荐型号：AMTK全自动核酸提取纯化仪 CL-ME96/192推荐理由：★移液头采用高硬度、轻质合金材料，保障移液精密度和准确度 ★图形化软件界面、简单易懂易操作，客户能自行进行编程并运行★整合扩展能力强，客户自由选择各功能模块或适配器▲ AMTK全自动核酸提取纯化仪 CL-ME96/192（点击查看）奥盛推荐型号：Auto-Pure 96 全自动核酸提取仪推荐理由：★高通量快速提取，每次可同时提取1-96个样本 ★转盘式设计，仪器占用面积小，运行稳定，安全可靠★7英寸彩色触摸屏显示，参数、程序可自由编辑，自由匹配试剂盒▲ Auto-Pure 96全自动核酸提取仪（点击查看）Aurora推荐型号：Aurora VERSA 1100 全自动核酸提取工作站推荐理由：★高通量快速提取，每次可同时提取1-96个样本；兼容市场多种常规耗材和试剂 ★PCR/RT-PCR反应体系构建，系列稀释、母液配置等液体自动处理★配备封闭式高效过滤安全外罩，避免污染▲Aurora VERSA 1100 全自动核酸提取工作站（点击查看）B博日推荐型号：博日GenePure Pro全自动核酸提取纯化仪 NPA-32P推荐理由：★可轻松应对各类微小磁珠，轻松达到提取核酸无挂壁为残留 ★精准控温，采用包裹性更全面的深孔加热 ★核酸提取自动化，一次性可处理样品32份▲ 博日GenePure Pro全自动核酸提取纯化仪 NPA-32P（点击查看）D帝肯推荐型号：Tecan Freedom EVO核酸提取工作站推荐理由：★可以实现不同样品RNA、mRNA、基因组DNA以及质粒的自动化提取操作 ★可以使用不同的分离技术（固相提取、磁珠分离等）来进行提取操作▲ Tecan Freedom EVO核酸提取工作站（点击查看）EEppendorf推荐型号：Eppendorf epMotion 5073t 核酸提取工作站推荐理由：★精确移液体积精确度范围为 0.2-1000μL ★触屏或鼠标进行操作，USB接口可以用于数据存储与备份★自动检测液体体积、耗材和吸头，自动切换分液工具及机械手▲ Eppendorf epMotion 5073t 核酸提取工作站（点击查看）H华大智造推荐型号：MGISP-100B全自动核酸提取纯化仪推荐理由：★单轮可运行8/16/24/32样本，运行时间40-80分钟★整合多种功能，占地面积小于0.5m3★配置封闭式安全防护门及自动清洁功能▲ MGISP-100B全自动核酸提取纯化仪（点击查看）MMP推荐型号：MPure-12自动化核酸提取仪推荐理由：★享受单次实验处理1～12个样品的灵活性和简便性 ★操作平台独特设计，降低样品间的交叉污染★实验结果可重复性，处理体积可扩展性，使用方便▲ MPure-12自动化核酸提取仪（点击查看）P珀金埃尔默推荐型号：Pre-NAT II全自动核酸提取纯化仪推荐理由：★24和96两种提取模式，提供从10uL微量样本到4mL自动化核酸提取解决方案，满足多种客户需求；程序可编辑，提供定制化程序 ★90min完成96个样本的核酸提取及PCR前处理过程 ★1.5米长，折叠式显示系统，节省更多实验室宝贵空间▲ Pre-NAT II全自动核酸提取纯化仪（点击查看）QQIAGEN推荐型号：EZ1 Advanced XL全自动核酸纯化仪推荐理由：★过程快速，每轮纯化20–45 分钟 ★通量灵活，每轮可纯化多达14 个样品 ★多达4台EZ1 Advanced XL可同时与一台外接电脑相连，扩大通量至每轮56 个样品▲ EZ1 Advanced XL全自动核酸纯化仪（点击查看）S赛默飞推荐型号：ThermoScientific KingFisher Flex全自动核酸提取仪推荐理由：★采用KingFisher样品提取方式，全程无需离心或抽真空。 ★快速高通量，15-40min内完成96份样品的提取纯化 ★配置兼容不同板型的多种磁头以满足各种提取需求▲ ThermoScientific KingFisher Flex全自动核酸提取仪（点击查看）TThmorgan推荐型号：全自动核酸提取仪 MM24推荐理由：★通量高，一次可完成24个样品的提取 ★平行性好，提纯孔间差CV小于1% ★核酸纯度高，磁珠回收率大于99%▲ 全自动核酸提取仪 MM24（点击查看）TIANGEN推荐型号：TGuide S96全自动核酸提取纯化仪（TGuide S96 Automate）推荐理由：★四维一体运动模式，振荡频率高，多档可调 ★循环吸附模式，多次循环，即使小粒径磁珠也可确保无漏网之鱼 ★污染控制，安全防护▲ TGuide S96全自动核酸提取纯化仪（TGuide S96 Automate）（点击查看）天隆科技推荐型号：核酸提取仪 NP968-C推荐理由：★高通量，一次实现1-32个样品的快速高效制备 ★安全可靠，空气过滤模块、紫外消毒模块 ★可外接扫码枪，扫描后自动识别程序信息，一键运行▲ 核酸提取仪 NP968-C（点击查看）X新芝推荐型号：新芝全自动核酸提取仪NP-2032推荐理由：★多速度多模块供选择，且可储存100个程序，满足不同客户要求 ★核酸回收率95%，磁珠回收率95% ★合计约20-40min可完成32个样本提取（依试剂而定）▲ 新芝全自动核酸提取仪NP-2032（点击查看）Y耶拿推荐型号：InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪推荐理由：★新一代核酸提取技术Smart Extraction：核酸得率高、纯度好 ★预装封膜试剂条/板，一次可同时提取1-16个样品，★CyBio移液技术保证核酸提取过程移液的高精确度和可重复性▲ InnuPure C16 touch全自动核酸提取仪（点击查看）

轮状病毒核酸标准物质研究曾静，徐蕾蕊近年来，由食源性病毒引起的食品安全事件呈增长态势。食源性病毒一直难以得到及时、有效的监控，不仅对食品卫生和人民健康构成严重威胁，也对食品工业和国民经济造成很大影响。食源性病毒是以食物为载体，导致人类患病的病毒。轮状病毒（Rotavirus，RV）是在世界范围内引起儿童急性腹泻和儿童重症腹泻的最常见的病毒。自1973年Bishop发现RV以来，人们对RV的危害性认识越来越清楚。据统计，全球每年约有1.14亿儿童腹泻与RV有关，导致52.7万人死亡。 在我国，RV腹泻每年大约导致27 000名5岁以下儿童死亡；全国范围内因腹泻入院的5岁以下儿童中，RV阳性检出率高达47.8%。 快速可靠的检测技术对控制轮状病毒引起的食源性腹泻，尤其是儿童重症腹泻，保障人民健康具有重要意义。目前，RV的检测方法主要包括电镜观察、细胞培养、核酸杂交、酶联免疫及分子生物学方法等。 尤其以PCR为基础的核酸扩增方法，逐步应用在食源性病毒的检测中，可缩短检测时间，完善食源性病毒检测方法。检验检疫行业标准对该病毒的检测也是基于PCR技术的qRT PCR方法，然而实际操作过程中存在较多问题，如实验人员操作的随机误差， 标本核酸提取后抑制物的残留，带扩增靶核酸浓度、逆转录效率等均可影响扩增效率，造成检测结果偏差。一个稳定可靠，无生物传染危险性的标准物质，对于保证RV核酸扩增检测质量具有重要意义。以往多采用质粒DNA或含有病毒颗粒的阳性样本，如腹泻患者粪便样品作为核酸扩增检测时的阳性对照。而质粒DNA无法对病毒RNA逆转录的过程进行控制，在用于定量分析时很难直观传达病毒含量信息。患者粪便样品有潜在的传染性，均一性差，制备运输困难，且反复冻融后病毒载量会明显降低。人工合成的cRNA恰好能弥补此不足，只需经过一定处理，保证其稳定性，就可作为理想标准品对检测过程中的逆转录和PCR两个环节进行质量控制。本研究构建含T7启动子的重组质粒，选择RV目的基因下游的Ham HⅠ限制性内切酶位点进行单酶切，可有效避免非目的基因的转录，易于转录和富集含RV目的基因的cRNA片段。获得的cRNA与RV基因（accession no. EU868888）100%同源，且与重组质粒pcDNAII-NSP3测序结果一致，为RV核酸标准物质的溯源性提供了基础。均一性研究结果显示：RV核酸标准物质样品的均一性引入的不确定度为 0.21×107 拷贝/μL，瓶间精密度与瓶内精密度差异无统计学意义， 符合JJG 1006-94《一级标准物质》的相关要求。稳定性研究方面，RV核酸标准物质样品在40 ℃高温下迅速降解，在RT，4 ℃，-20 ℃条件下分别稳定保存3，7，21d，该标准物质的运输条件为低温（＜4 ℃）运输，最长运输期限为7d；趋势检验分析表明，-80 ℃时，在保存时间6个月内，RV核酸标准物质样品cRNA含量无显著差异，满足标准物质的实际应用，稳定性引入的不确定度为0.18×107拷贝/μL。目前，国内外没有相应的可供RV核酸标准物质样品进行对比溯源定值的有证标准物质，因此采取多家有资质的独立实验室应用数字PCR方法联合定值的方式进行定值研究和不确定度评价。近年来发展起来的数字PCR（Digital PCR，dPCR）技术是一种全新的核酸定量检测方法。1999 年 Vogelstein与Kinzler首次提出了数字PCR的概念，逐步形成了微反应室/孔板数字PCR（Chamber digital PCR，cdPCR）、微流体数字PCR（Microfluidic digital PCR，mdPCR）（大规模集成微流控芯片）和微滴式数字PCR（Droplet digital PCR，ddPCR）3种dPCR系统。 在3种dPCR系统中，ddPCR 采用油包水的微滴方式将含有DNA或cRNA模板的PCR反应体系分割到 10 000~20 000个独立反应单元中，每个独立反应单元内均包含DNA或cRNA单分子和PCR反应溶液，并且独自进行逆转录和PCR扩增反应，最后微滴逐一通过微滴检测器，有荧光信号的微滴记为阳性，无荧光信号的微滴记为阴性，记录每个样品中阳性微滴的比例，按照泊松分布原理，计算反应体系内模板的拷贝数，根据模板的稀释倍数，计算样品中的模板含量，不依靠校准物或外标，实现核酸精准定量。在实际操作过程中，ddPCR 系统能够分割形成的小反应单元数目有限，一般在10000-20000之间，因此需要对核酸模板适度稀释，方能用ddPCR方法进行精准定量。本研究首先对cRNA 采用天平称重法进行10倍梯度稀释至合适的浓度，应用ddPCR方法在多家有资质的实验室内进行定值研究，以含有RV目的片段的cRNA的拷贝浓度，即每μL溶液中所含的cRNA拷贝数作为标准值。根据ddPCR原理，实现 RV 核酸标准物质特向量值的溯源，且所用天平、移液器等所有设备在投入使用前都进行校准，确保定值结果的准确、有效和可溯源性。定值研究得到的5组有效检测数据总体近似符合正态分布，而各组检测数据不等精度，故对定值结果进行不等精度加权处理， 将加权平均值6.60×107 拷贝/μL 作为 RV 核酸标准物质的标准值。定值不确定度评价应包括测量平均值的标准偏差（A类分量）和定值过程人员、设备、环境等引入的不确定度（B类分量），考虑到测量过程中B类分量被随机体现在定值结果中，故将多家实验室定值数据加权平均值引入的不确定度分量作为RV核酸标准物质的定值不确定度，为 0.10×107拷/μL。综合均匀性引入的不确定度ubb及稳定性引入的不确定度us计算RV核酸标准物质的标准不确定度uCRM=0.30×107拷贝/μL。报告标准物质特性量值的测量结果时，需要使用扩展不确定度，特性量值表达为标准值±扩展不确定度。扩展不确定度是指：确定测量结果区间的量，合理赋予被测量值分布的大部分可望含于此区间。根据定值结果符合正态分布，本研究中取置信概率 95%，扩展因子 k=2，计算相对扩展不确定度，得到 RV 核酸标准物质特性量值为（6.60±0.60）×107 拷贝/μL。食源性病毒检测已由“定性检出”步入到“精准定量”时代，越来越多的医疗机构和检测单位都意识到病毒精准定量的重要性和必要性。本标准物质的研制，对食源性病毒检测标准物质的制备技术和稳定保存技术的发展，积极开展相关病毒检测标准物质的制备，填补相关检测领域的空白，进一步推进食源性病毒检测的标准化和规范化具有重要意义。作者简介中国海关科学技术研究中心 曾静 研究员毕业于中国农业大学微生物专业，获理学博士学位。在微生物专业领域具有30年工作经验。第一届食品安全国家标准评审委员会委员，第二届食品安全国家标准评审委员会副主任委员；参与制定国家食品安全卫生标准 微生物限量标准GB29921；主持和参与科技部重大专项6项，获得省部级一、二、三等奖共计9项，制定行业标准30余项，发表科研论文40余篇。 （本文编辑：刘立东）【行业征稿】若您有生命科学、医药、临床等行业相关研究、技术、应用、管理经验等愿意以约稿形式分享，欢迎自荐或引荐投稿联系人：刘编辑word图文/视频投稿邮箱：liuld@instrument.com.cn

p　　2020年2月12日，国家药品监督管理局医疗器械技术审评中心发布通告，发布《2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点》。/pp　　审评要点中明确指出，2019新型冠状病毒核酸检测试剂用于对咽拭子、鼻咽拭子、肺泡灌洗液、痰液、呼吸道洗液、抽吸液或其他呼吸道分泌物等样本中的2019新型冠状病毒核酸进行体外定性检测。本审评要点适用于进行首次注册申报的产品。/pp　　审评要点中要求，企业应提交在符合质量管理体系的生产环境下生产的试剂盒进行的所有性能验证的研究资料，包括具体研究方法、实验方案、实验数据、统计分析等详细资料。建议着重对核酸(RNA)提取/纯化性能、最低检测限、不同区域病毒样本包容性的验证、分析特异性、精密度等分析性能进行研究。/pp　　详细内容请查看：a href="https://www.cmde.org.cn/directory/web/WS01/images/MS44ICAyMDE50MLQzbna17Syoba+usvL4bzssuLK1LzB16Ky4by8yvXJ88bA0qq14y5kb2M=.doc" target="_blank"2019新型冠状病毒核酸检测试剂注册技术审评要点(下载)/a。/ppbr//p