血液核酸提取

[quote][b]项目概况[/b]区血液中心2022年核酸检测试剂耗材采购项目 招标项目的潜在投标人应在西藏自治区公共资源交易平台获取招标文件，并于2022年09月05日 09点50分（北京时间）前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：GZFCG2022-10430项目名称：区血液中心2022年核酸检测试剂耗材采购项目预算金额：139.2000000 万元（人民币）最高限价（如有）：139.2000000 万元（人民币）采购需求：本项目涉及检测乙型肝炎病毒（HBV DNA）、丙型肝炎病毒（HCV RNA）、人类免疫缺陷病毒（HIV RNA）；具体详见采购文件第五章《采购需求》合同履行期限：30日历天，具体以签订的合同为准本项目( 不接受 )联合体投标。

核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法，操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术，利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点，吸附核酸。当条件改变时，磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作，是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说，磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂，操作简单，符合核酸自动化提取要求，是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。

[quote][b]项目概况[/b]全市血液集中化核酸检测试剂 招标项目的潜在投标人应在北京市政府采购电子交易平台,具体方式详见“其他补充事宜”。获取招标文件，并于2023-09-06 13:30（北京时间）前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：11000023210200053020-XM001项目名称：全市血液集中化核酸检测试剂预算金额：1613 万元（人民币）采购需求：[table][tr][td][align=center][font=新宋体]分包号[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]分包项目[/font][font=新宋体][/font][/align][align=center][font=新宋体]名称[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]数量[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]单位[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]简要服务内容[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=新宋体]1[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]全市血液集中化核酸检测试剂（第1包）[/font][font=新宋体][/font][/align][align=center][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]1[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]项[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][table][tr][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]包号[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]采购产品名称[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]数量[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]单位[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]是否接受[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][align=center][font=inherit][font=新宋体]进口产品投标[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]1[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]全市血液集中化核酸检测试剂[/font][font=宋体][/font][/align][align=center][font=宋体]（第1包）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]12.5万[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]人份 （检测报告数）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]是[/font][font=宋体][/font][/align][/td][/tr][/table][align=center][font=&][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=新宋体]2[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]全市血液集中化核酸检测试剂 （第2包）[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]1[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]项[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][table][tr][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]包号[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]采购产品名称[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]数量[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]单位[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]是否接受[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][align=center][font=inherit][font=新宋体]进口产品投标[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]2[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]全市血液集中化核酸检测试剂（第2包）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]12.6万[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]人份 （检测报告数）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]否[/font][font=宋体][/font][/align][/td][/tr][/table][align=center][font=&][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=新宋体]3[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]全市血液集中化核酸检测试剂 （第3包）[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]1[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]项[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][table][tr][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]包号[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]采购产品名称[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]数量[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]单位[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]是否接受[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][align=center][font=inherit][font=新宋体]进口产品投标[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]3[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]全市血液集中化核酸检测试剂（第3包）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]2万[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]人份 （检测报告数）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]是[/font][font=宋体][/font][/align][/td][/tr][/table][align=center][font=新宋体][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=新宋体]4[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]全市血液集中化核酸检测试剂 （第4包：核酸检测质控品）[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]1[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=新宋体]项[/font][font=新宋体][/font][/align][/td][td][table][tr][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]包号[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]采购产品名称[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]数量[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]单位[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit][font=新宋体]是否接受[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][align=center][font=inherit][font=新宋体]进口产品投标[/font][/font][font=inherit][font=新宋体][/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=宋体]4[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]全市血液集中化核酸检测试剂[/font][font=宋体][/font][/align][align=center][font=宋体]（第4包：核酸检测质控品）[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]5086[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]支[/font][font=宋体][/font][/align][/td][td][align=center][font=宋体]否[/font][font=宋体][/font][/align][/td][/tr][/table][align=center][font=宋体][/font][/align][/td][/tr][/table][font=新宋体]其中第1包控制金额为人民币825万元；第2包控制金额为人民币630万元；第3包控制金额为人民币110万元；第4包控制金额为人民币48万元。[/font]合同履行期限：第一包、第二包、第三包、第四包：合同执行期限为自合同签订之日起一年本项目不接受联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：[font=新宋体]本项目第一包、第二包、第三包、第四包不专门面向中小企业采购。[/font][font=新宋体][/font]3.本项目的特定资格要求：[font=新宋体]3.1本项目不接受分支机构参与投标；[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]3[/font][font=新宋体].2[/font][font=新宋体]本项目不属于政府购买服务；[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]3.[/font][font=新宋体]3[/font][font=新宋体]其他特定资格要求：[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]本项目第一包、第二包、第三包、第四包其他特定资格要求：[/font][font=新宋体][/font][font=宋体]（[/font][font=宋体]1[/font][font=宋体]）投标产品如涉及药品，应提供国家食品药品监督管理部门药品注册证，药品生产许可证或药品经营许可证。如为进口药品，还应提供中华人民共和国进口药品注册证。[/font][font=宋体][/font][font=宋体]（2）投标产品如涉及医疗器械，应提供中华人民共和国医疗器械注册证。[/font][font=宋体][/font][font=宋体]（3）投标人是制造商的应提供医疗器械生产许可证。投标人是代理商的应提供医疗器械经营许可证。[/font][font=宋体][/font][font=宋体]（4）投标产品如涉及标准物质及标准品，应提供国家质量监督检疫总局颁发的相应证书。[/font][font=inherit]三、获取招标文件[/font]时间：2023-08-16 至 2023-08-23 ，每天上午09:00至12:00，下午12:00至17:00（北京时间，法定节假日除外）地点：北京市政府采购电子交易平台,具体方式详见“其他补充事宜”。方式：[font=新宋体]供应商使用电子营业执照、或按照规定办理CA数字认证证书后，自招标公告发布之日起登录北京市政府采购电子交易平台免费获取电子版招标文件。[/font]售价：￥0 元，本公告包含的招标文件售价总和[font=inherit]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font]2023-09-06 13:30（北京时间）地点：北京市海淀区学院路30号科大天工大厦A座5层511会议室[font=inherit]五、公告期限[/font]自本公告发布之日起5个工作日。[font=inherit]六、其他补充事宜[/font][font=新宋体]1.本项目采用电子招标，相关操作如下：[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（1）办理CA认证证书，详见北京市政府采购电子交易平台（http://zbcg-bjzc.zhongcy.com/bjczj-portal-site/index.html#/home）查阅“用户指南”-“操作指南”-“市场主体CA办理操作流程指引”，按照程序要求办理。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（2）于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”-“操作指南”-“市场主体注册入库操作流程指引”进行自主注册绑定。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（3）招标文件获取方式：供应商使用电子营业执照、或按照规定办理CA数字认证证书后，自招标公告发布之日起登录北京市政府采购电子交易平台免费获取电子版招标文件。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（4）下载时间：同招标公告中“获取招标文件”的时间。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（5）未按上述获取方式和期限下载招标文件的投标无效。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（6）证书驱动下载：[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]于北京市政府采购电子交易平台“用户指南”-“工具下载”-“招标采购系统文件驱动安装包”下载相关驱动。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]CA认证证书服务热线010-58515511[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]技术支持服务热线010-86483801[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（7）注意：请供应商认真学习北京市政府采购电子交易平台发布的相关操作手册，认真核实数字认证证书情况确认是否符合本项目电子投标要求，如无法按照要求在电子投标文件中加盖电子签章和加密，请及时联系技术人员。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]（8）本项目招标采用线上与线下相结合方式，[/font][font=inherit][font=新宋体]线上仅包括：供应商获取招标文件；线下包括：投标截止前供应商递交纸质版投标文件、参与开标。[/font][/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]2.需要落实的政府采购政策：政府采购促进中小企业发展；政府采购支持监狱企业发展；政府采购促进残疾人就业等。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]3.投标文件请于开标当日（投标截止时间之前）递交至开标地点，逾期递交文件恕不接受。[/font][font=新宋体][/font][font=新宋体]详见附件下载，[/font][font=新宋体]BIECC-23ZB0199-2[/font][font=inherit]七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：北京市红十字血液中心地址：北京市海淀区北三环中路37号联系方式：石老师,010-828076732.采购代理机构信息名 称：北京国际工程咨询有限公司地　址：北京市海淀区学院路30号科大天工大厦A座6层联系方式：关老师/包老师，010-82372770/130511731303.项目联系方式项目联系人：关老师/包老师电　话：　　010-82372770/13051173130

问题描述：核酸提取方式主要有哪些？有何差异？解答：[align=left][font=宋体][color=black]目前主流的核酸提取方法有煮沸裂解法、苯酚氯仿抽提法、离心柱法、磁珠法，接下来介绍这几个方法的原理、优劣势及适用场景。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]1[/color][/font][font=宋体][color=black]）煮沸裂解法：原理是通过加热使细胞膜破裂，充分暴露核酸，核酸可溶解于上层水溶液中，通过高速离心沉淀变性蛋白质和细胞碎片，上清液即为核酸粗提液。此方法的操作相对简单，成本低，但由于是粗提，成分比较复杂，有时可能带来一定的体系干扰或者裂解不充分的情况，一般用于细菌定性鉴定时使用。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]2[/color][/font][font=宋体][color=black]）苯酚氯仿抽提法：原理是苯酚和氯仿抽提除去蛋白和多糖类杂质，获得相对较为纯净的基因组核酸。成本比较低廉。缺点是试剂毒性较大，长时间操作对人员健康有较大影响。试剂需要自行配制，批次间差异显著。提取效率相对较低，不适宜少量或者微量操作。一般用于大量核酸样本的抽提。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]3[/color][/font][font=宋体][color=black]）离心柱法：原理是利用裂解液促使细胞破碎，使细胞中的核酸释放出来，利用柱子中的载体吸附提纯核酸。它的优点是比传统的酚氯法提取纯度高、毒性低，有利于[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]保护，而且能进行微量操作，价格较低。缺点是不便于高通量、自动化操作，对实验室设备和人员的操作技能要求较高。目前应用广泛，常用于细菌、病毒、动物组织等多种样本的核酸提取[/color][/font][sup][font='Times New Roman','serif'][color=black][13][/color][/font][/sup][font=宋体][color=black]。[/color][/font][/align][align=left][font=宋体][color=black]（[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]4[/color][/font][font=宋体][color=black]）磁珠法：与离心柱的操作原理基本相同，利用交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等细胞中其他物质分离。优点是能够实现自动化、高通量操作，配合核酸自动提取仪使用，操作简单、用时短，核酸纯度高、浓度大，可广泛用应用于血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]DNA[/color][/font][font=宋体][color=black]和[/color][/font][font='Times New Roman','serif'][color=black]RNA[/color][/font][font=宋体][color=black]分离，但超高通量样本同时进行时，可能存在一定的污染风险。[/color][/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

问题描述：核酸提取中裂解液的使用量为多少合适？解答：[align=left][font=宋体]裂解液的用量原则是确保能彻底裂解样品，同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低，将导致沉淀效率低，影响得率；浓度过高，去除杂质的过程复杂且不彻底，导致纯度下降。另外，裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的，而不是以核酸含量为基准，这一点务必牢记。[/font][/align]以上内容来自仪器信息网《PCR实战宝典》

核酸提取仪有两种分类分类方式，一种是按用途进行分类，另一种是按照应用试剂的不同进行分类。（1）按照用途分类：一类是自动液体工作站，自动液体工作站是功能非常强大的设备，液体分液、吸液等自动完成，甚至可以整合扩展、检测等仪器设备，实现标本提取、扩增、检测全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用，不太适合常规实验室提取核酸，一般都应用在单一类标本并且一次提取标本量非常大（至少96个，一般几百个）的实验需求上。自动工作站的平台建立及平台的运作，需要比较大的资金。另一类是小型的自动化仪器，小型的自动化仪器是通过运行结构的特殊设计来达到自动提取核酸的目的，可以在任何实验室得到应用，最近几年有很多机型陆续投放市场。（2）根据应用的试剂不同分类：一类是应用磁珠法试剂的仪器，另一类是应用离心柱法试剂的仪器。应用磁珠法的自动核酸提取仪操作简便，容易自动化，是目前市场上的主流，如QAGEN、Lab-Aid 820等仪器。与传统的手工操作相比核酸提取仪的优势：核酸提取仪一般具有以下的特点：(1) 无交叉污染：仪器部件未接触到生物学样本；(2) 自动化系统：每次提取工作，操作者只需要做好安装工作，布置好孔板（提供提取所需要的试剂）.提取整个过程都不需要人为的帮助，仪器自动完成；(3)提取控制：在提取过程中，如果操作者需要，该系统允许您对提取过程进行控制。

[quote][b]项目概况[/b]白城市红十字中心血站采购血液核酸检测试剂项目（二次） 招标项目的潜在投标人应在在白城市公共资源交易平台交易主体登录界面(http://ggzy.jlbc.gov.cn：)进行基础会员诚信库注册，核验通过后，凭借办理的数字证书登录系统，进入政府采购栏目，点击交易文件下载，查找本项目，免费下载采购文件，没有系统下载记录或从其他途径获取的采购文件开标时一律按无效投标处理获取招标文件，并于2023年06月27日 14点30分（北京时间）前递交投标文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：BCCG20230142-1项目名称：白城市红十字中心血站采购血液核酸检测试剂项目（二次）预算金额：134.4000000 万元（人民币）最高限价（如有）：134.4000000 万元（人民币）采购需求：陈良白城市红十字中心血站采购血液核酸检测试剂项目（二次）合同履行期限：按合同约定本项目( 不接受 )联合体投标。[font=inherit]二、申请人的资格要求：[/font]1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；2.落实政府采购政策需满足的资格要求：无3.本项目的特定资格要求：无[font=inherit]三、获取招标文件[/font]时间：2023年06月05日 至 2023年06月12日，每天上午8:30至11:30，下午12:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：在白城市公共资源交易平台交易主体登录界面(http://ggzy.jlbc.gov.cn：)进行基础会员诚信库注册，核验通过后，凭借办理的数字证书登录系统，进入政府采购栏目，点击交易文件下载，查找本项目，免费下载采购文件，没有系统下载记录或从其他途径获取的采购文件开标时一律按无效投标处理方式：网上下载售价：￥0.0 元，本公告包含的招标文件售价总和[font=inherit]四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点[/font]提交投标文件截止时间：2023年06月27日 14点30分（北京时间）开标时间：2023年06月27日 14点30分（北京时间）地点：白城市公共资源交易中心六楼[font=inherit]五、公告期限[/font]自本公告发布之日起5个工作日。[font=inherit]六、其他补充事宜[/font][font=inherit]七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。[/font]1.采购人信息名 称：陈良地址：开发区胜利西路268号联系方式：陈良 133943621882.采购代理机构信息名 称：吉林吉祥建设工程管理有限公司地　址：白城市新兴路39楼2单元一楼门市联系方式：孙聪 0436-36077783.项目联系方式项目联系人：孙聪电　话：　　0436-3607778

你们在对样本中的核酸提取时，都使用的什么仪器去进行的提取？

想买个核酸提取仪，做动植物组织DNA荧光定量PCR检测，有什么好的仪器，国产进口都可以，请用过的推荐下。谢谢

单位计划采购自动核酸提取仪，听几个进口厂家推介了，得出来的观点相悖，特求助高人指点一二。到底是滤膜法好还是磁珠法好？是否为真正的全自动怎样去区分？高通量与否怎样鉴定？

出售赛默飞核酸提取仪kingfisher prime，仪器未使用过。开机正常。有意义私聊。[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211120846072310_5286_4092743_3.png[/img]

最近刚刚开始接触血液中毒物的测定，最近用乙酸乙酯提取血液中有机磷农药，对于常规的十几种农药，提取效率还可以，但是对于其他的毒物（菊酯类、dupin、安定类药物等），这个单一的前处理方式就无法解决问题了。如何选择合适的提取剂，合适的前处理，达到最优的提取效率一直困扰着我。希望各位接触过此类分析的前辈能给点建议，感激不尽！

据英国《每日邮报》11月4日报道，罗马尼亚科学家研制出人造血液，并已在小鼠身上测试使用，效果良好。　　报道称，罗马尼亚巴比什—博雅伊大学的科研人员经过6年研究发现，利用水、无机盐以及一种深海昆虫体内提取的蚯蚓血红蛋白所合成的液体，可短时间替代血液实现氧气和二氧化碳交换代谢。不过测试过程还将持续两年,以便观察人是否发生毒性反应，未来研究人员还将在病人身上测试人造血液。　　报道指出，如果人造血液获得成功并推广应用，不仅可缓解血库的供给短缺，还能降低血液污染的风险，显著提高输血的适用范围和临床功效。 血荒是不是有希望解决了？

如题，该如何进行前处理呢？我看文献有些是直接加入高锰酸钾沉淀蛋白，然后离心，去上清液就行了，不知这样能提取出血液中的硫酸阿托品吗？

做血液中有机磷农药分析，其他的都提取的很好，唯独有几种物质，怎么都提取不出来，比如辛硫磷，氧化乐果啊

请问高手们,怎样用HPLC测血液中的红霉素含量,我现在是不知道选用哪种流动相,用多大波长的紫外光测,用什么提取方法比较好?谢谢你的回答.你的大恩大德我永不忘.

在司法部的7004-2016方法用于毒驾的体内毒品检验中，血液的用量达到了2ml,用乙醚提取法时常会有大量的脂肪出现，使用PSA除色素较好，但除脂效果一般。请问各位老师在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]前处理中有什么好的除脂方法？

[table][tr][td]项目概况河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法）采购项目招标项目的潜在投标人应在登录“河南省公共资源交易中心 (http://www.hnggzy.net/) ”，凭 CA 数字证书获取招标文件，并于2023年09月06日09时00分（北京时间）前递交投标文件。[/td][/tr][tr][td]一、项目基本情况[/td][/tr][tr][td]1、项目编号：豫财招标采购-2023-783[/td][/tr][tr][td]2、项目名称：河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法）采购项目[/td][/tr][tr][td]3、采购方式：公开招标[/td][/tr][tr][td]4、预算金额：5,492,500.00元[/td][/tr][tr][td]最高限价：5492500元[/td][/tr][tr][td=2,1][table][tr][td]序号[/td][td]包号[/td][td]包名称[/td][td]包预算（元）[/td][td]包最高限价（元）[/td][/tr][tr][td]1[/td][td]豫政采(2)20231230-1[/td][td]河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法）采购项目[/td][td]5492500[/td][td]5492500[/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td]5、采购需求（包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等）[/td][/tr][tr][td]5.1 采购货物名称及数量：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒（1+2型）核酸检测试剂盒（[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法） 650盒（384人份/盒）。5.2 标包划分：1 个标包5.3 采购货物技术性能指标：具体参数详见招标文件第五章“采购需求”5.4 采购范围：试剂的供货、运输、保险、装卸、验收交付、培训、技术支持、质保及相关伴随服务等5.5 资金来源：财政资金，已落实5.6 交货期：合同签订后7日内按要求分批次交货5.7 交货地点：采购人指定地点[/td][/tr][tr][td]6、合同履行期限：按合同执行[/td][/tr][tr][td]7、本项目是否接受联合体投标：否[/td][/tr][tr][td]8、是否接受进口产品：否[/td][/tr][tr][td]9、是否专门面向中小企业：否[/td][/tr][tr][td]二、申请人资格要求：[/td][/tr][tr][td]1、满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；[/td][/tr][tr][td]2、落实政府采购政策满足的资格要求：[/td][/tr][tr][td]节约能源、保护环境、扶持不发达地区和少数民族地区、促进中小微企业、监狱企业及残疾人福利性单位发展等政府采购政策。[/td][/tr][tr][td]3、本项目的特定资格要求[/td][/tr][tr][td]3.1根据《财政部关于在政府采购活动中查询及使用信用记录有关问题的通知》(财库〔2016〕125 号)和《河南省财政厅关于转发财政部关于在政府采购活动中 查询及使用信用记录有关问题的通知》(财库〔2016〕15 号)被列入中国政府采购网( www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为记录名单”的(指政府采购行政处罚有效期内)；被列入“中国执行信息公开网”(http://zxgk.court.gov.cn/shixin)失信被执行人的；被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)“重大税收违法失信主体”的投标人将被拒绝参加投标。注：(采购人、代理机构在开标后对所有投标供应商信用记录进行查询，并将查询结果网页打印存档，投标供应商不良信用记录以代理机构开标后查询结果为准。 )3.2单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的投标。[/td][/tr][tr][td]三、获取招标文件[/td][/tr][tr][td]1.时间：2023年08月16日 至 2023年08月22日，每天上午00:00至12:00，下午12:00至23:59（北京时间，法定节假日除外。）[/td][/tr][tr][td]2.地点：登录“河南省公共资源交易中心 (http://www.hnggzy.net/) ”，凭 CA 数字证书[/td][/tr][tr][td]3.方式：《河南省公共资源交易中心-市场主体系统》中下载投标项目所含全部资料[/td][/tr][tr][td]4.售价：0元[/td][/tr][tr][td]四、投标截止时间及地点[/td][/tr][tr][td]1.时间：2023年09月06日09时00分（北京时间）[/td][/tr][tr][td]2.地点：河南省公共资源交易中心远程开标室(一)-2[/td][/tr][tr][td]五、开标时间及地点[/td][/tr][tr][td]1.时间：2023年09月06日09时00分（北京时间）[/td][/tr][tr][td]2.地点：河南省公共资源交易中心远程开标室(一)-2(郑州市经二路12号(经二路与纬四路向南50米路西))[/td][/tr][tr][td]六、发布公告的媒介及招标公告期限[/td][/tr][tr][td]本次招标公告在《河南省政府采购网》、《河南省公共资源交易中心网》上发布， 招标公告期限为五个工作日。[/td][/tr][tr][td]七、其他补充事宜[/td][/tr][tr][td]1、本项目采用“远程不见面”开标方式，供应商无需到河南省公共资源交易中心现场参加开标会议及递交纸质标书，无需到达现场提交原件资料。2、不见面服务的具体事宜请查阅河南省公共资源交易中心网站“办事指南”专区的《新交易平台使用手册（培训资料）》中《河南省公共资源“智慧交易”平台-不见面开标大厅投标人操作手册》。3、逾期上传/送达的或者未上传/未送达指定地点的响应文件，采购人不予受理[/td][/tr][tr][td]八、凡对本次招标提出询问，请按照以下方式联系[/td][/tr][tr][td]1. 采购人信息[/td][/tr][tr][td]名称：河南省红十字血液中心[/td][/tr][tr][td]地址：郑州市金水区同乐路9号[/td][/tr][tr][td]联系人：司丽萍[/td][/tr][tr][td]联系方式：0371-63831305[/td][/tr][tr][td]2.采购代理机构信息（如有）[/td][/tr][tr][td]名称：中韵天隆工程集团有限公司[/td][/tr][tr][td]地址：郑州市金水区青年路145号升龙环球大厦C座26楼2608室[/td][/tr][tr][td]联系人：王京拴 王自红[/td][/tr][tr][td]联系方式：0371-88881296[/td][/tr][tr][td]3.项目联系方式[/td][/tr][tr][td]项目联系人：王京拴 王自红[/td][/tr][tr][td]联系方式：0371-88881296[/td][/tr][/table]

1. 使用正确的细胞或组织储存条件 在样品用液氮瞬间冻结之后，应该储存在-80°C，千万不能解冻。即使是置于含有胍盐的裂解液中作匀浆前的短暂解冻，也会导致RNA的降解和损失。瞬间冻结的组织应该首先在超低温条件下先研磨成粉，然后置于裂解液中进行匀浆。RNAfixer使样品储存更为便利。储存在RNAfixer中的细胞或组织可在室温下稳定保存长达1个星期，在4°C可稳定保存长达1个月，或永久保存在-20°C。2. 消除环境RNase的污染为了得到完整的、高品质RNA，在整个RNA制备过程中，当RNA离开强蛋白变性剂（如离液裂解液或酚）的保护时，避免引入新的RNase污染就非常关键。由于RNase几乎是无所不在，所以必须确保与纯化的RNA接触的每一样东西都是无RNase污染的。所有的表面，包括移液器、工作台、玻璃器皿和制胶设备，都必须用表面去污净化溶液如RNase喷雾清除剂 来处理过，去除各种溶液或者反应缓冲液中可能存在的RNase污染，可以用RNAsafe。必须保证一直使用无RNase的枪头、试管和溶液，手套也应经常更换。3.迅速灭活内源的RNA酶，以防止RNA降解。以下3个方法均可有效使内源RNA酶失活：1）用含离液（如胍盐）的细胞裂解液收获样品，并立即匀浆。2）用液氮瞬间冻结样品。值得特别注意的是：组织块必须保证足够小，在浸入液氮的瞬间就能冻结，以确保瞬间令RNA酶失活。3）立即将样品置于RNAfixer无液氮RNA样品储存液中。它是一种水相、无毒的收集试剂，能立即稳定并保护完整、未冻结的组织和细胞样品中的RNA。关键要点是组织样品切片一定要够薄（0.5 cm），这样RNAfixer才能在RNase破坏RNA之前迅速渗入组织块中。4. 选择合适破壁方法细胞或组织的彻底匀浆对RNA提取来说，是一个很关键的步骤，它能够防止RNA的损失和降解。匀浆的方法应根据细胞或组织的类型来选择。大部分培养的细胞可以置于细胞裂解液中，通过简单的涡旋震荡来匀浆；而动物组织、植物组织、酵母和细菌、真菌则常常需要更加剧烈的方法，通常用液氮研磨。比如说细菌（特别是革兰氏阳性菌）的细胞壁，就需要溶菌酶消化来实现彻底的细胞裂解和RNA的最大回收，酵母提取时加入破壁酶帮助破壁，再用TRIpure或RNApure进行提取。5. RNA提取少走弯路——不同材料如何选择最适RNA提取试剂现有众多的RNA分离方法也许令人难以取舍。目前最简单也是最安全的方法是柱式分离，如RNApure 因为操作简单，时间短，纯度高而受到大家的喜爱，RNApure不需要DNA酶消化DNA，节省了时间，避免RNA的降解，从而提高了产量；相对非柱式分离（如TRIzol），去除蛋白及其他杂质干净，提高了纯度，对于细胞、组织、一般植物均非常适合。植物RNA的提取比较难抉择，植物RNA提取受酚、多糖、蛋白杂质、次生代谢物含量的影响，一般用TRIzol提取纯度不高，而且很多植物用TRIzol提取不出来。这时候可以选择多糖多酚植物总RNA提取试剂盒（水仙、辣椒、胡萝卜、玉米、百合、小麦、西红柿、花菜、油菜等）和通用植物RNA提取试剂盒（适合绝大多数植物提取，包括：各种中草药、植物种子、苹果、葡萄、草莓、香蕉、龙眼、荔枝、草坪植物、松树、杉树、白桦、紫松果、彩叶草、一品红、夹竹桃、垂叶榕、紫罗兰、月季、天竺蓝、牵牛花等）；非常值得一提的是血液（包括血清、血浆、脑脊液、各种拭子或其他液体含量高的样本）RNA的提取用TRIzol和红细胞裂解的方法效果都不好，因为红细胞裂解液不含有RNA酶的抑制成分，这个过程RNA很容易降解，推荐使用TRIpure LS (RP1101)或者血液总RNA提取试剂盒（RP4001），该方法适用于表达谱芯片实验中RNA的提取，并成为博奥生物芯片北京国家工程研究中心的推荐方法： 著名实验室推荐：全血RNA提取 6. 低浓度RNA的沉淀纯化得到的RNA可能需要通过沉淀来浓缩，以满足一些下游应用的需要。醋酸铵(NH4OAc) 沉淀（加0.1体积的5M 醋酸铵、2-2.5体积的无水乙醇，-20°C放置25分钟以上）可以很好地回收RNA。如果需要定量回收低浓度的RNA（ng/ml），可以采用共沉淀（如linear acrylamide糖原glycogen,、酵母yeast RNA ）的方法。核酸助沉剂是linear acrylamide，当RNA用于RT-PCR分析时，线性的丙烯酰胺和DNase处理的糖原都可以作为理想的共沉淀剂，因为它们都不含DNA污染，糖原含量高会抑制PCR反应，应注意控制浓度，核酸助沉剂对PCR无影响，成为病毒核酸提取的首选。酵母RNA和未处理的糖原会给样品带来核酸污染，有可能影响RT-PCR的结果。沉淀后，注意避免RNA沉淀过分干燥，因为这可能导致很难重新溶解。7. 提取好的RNA如何储存如果只是短期储存，重悬的RNA应放置于-20°C；如果是长期储存的话，就应该放置于-80°C。储存RNA时，可以加入少量的RNA酶抑制剂（RP5601），避免RNA的降解，RNA可以直接做下游实验。如果要长期保存RNA，可以加入RNAlong。我们推荐将RNA溶液分装在几支管中。这会避免反复冻融损伤RNA，并预防偶然的RNase污染。

核酸纯化柱（微/小提）http://www.biocomma.cn/images/2mlxiaoti.jpg核酸纯化小提柱产品组成外管医疗级PP，2ml，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，收集离心试剂。内管医疗级PP，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，底部鲁尔接口设计，方便试剂流出。筛板特殊纤维材料，在高速离心过程中，支撑硅胶膜，保证硅胶膜的完整性，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，厚度仅为0.3mm，孔径50um，致孔，孔隙率只有不到百分之二十，相比市场上同类产品，比面积小，静电小，DNA吸附极大降低。硅胶膜孔径1um，高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA，低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP，固定筛板与硅胶膜。核酸纯化微提柱http://www.biocomma.cn/images/2mlweiti.jpg产品组成外管医疗级PP，2ml，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，用来收集离心液。内管医疗级PP，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，底部鲁尔接口设计，方便离心液收集。装配位(这里指装配硅胶膜、筛板和压圈处)1直径为7.4mm，与市场上核酸小量提取同等规格。装配位2，直径为5.4mm，此处为微量核酸提取装配位，面积为小量提取装配位的一半。筛板特殊纤维材料，在高速离心过程中，支撑硅胶膜，保证硅胶膜的完整性，耐受酸碱和大部分的有机溶剂，厚度仅为0.3-0.5mm，孔径50um，孔隙率只有不到百分之二十，相比市场上同类产品，比面积小，静电小，DNA吸附极低。硅胶膜孔径1um，高盐低pH值选择性吸附DNA、RNA，低盐高pH值释放DNA、RNA压圈医疗级PP，固定筛板与硅胶膜。CommaPrep™核酸微提/小提柱可用在核酸提取过程（见图1）中过柱结合、洗涤、洗脱步骤中http://www.biocomma.cn/images/nucleic-2.jpg 图1 核酸提取过程核酸吸附量：核酸纯化小提柱：0-20ug核酸纯化微提柱：0-10ug规格：2ml离心管+吸附柱 适用范围：核酸提取原理是在特定溶液环境下（高盐、低pH)使核酸吸附在固相介质（硅胶膜）上，洗涤去除杂质后，再改 变溶液环境使DN A溶解到纯水或TE中。DNA提取：核酸提取柱用于基因组DNA抽提，不需要使用平衡液。抽提缓冲液，或者结合液中需要胍盐（如硫氰酸胍等） 辅助DNA吸附到膜上。RNA提取：裂解液建议使用含有硫氰酸胍（异硫氰酸胍）可以抑制RNA酶活性，保证RNA酶完整性；可以配合Trizol使用，样品经Trizo裂解后，氯仿分相去除蛋白等杂质，取上层过柱，然后70%乙醇洗涤，即可得到纯净的RNA。【注意事项】 1.上柱前溶液的PH值应小于7；2.洗涤液中的乙醇浓度不得低于50%，一般55%--80%之间。3.最后洗脱，可以用去离子水或者TE（10 mmol/LTris-Cl，1 mmol/L EDTA (pH8.0)）。如果长期保存DNA，建议使用TE。定购信息Cat#品名离心柱规格提取量包装DNAK1001CommaPrep™质粒小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1004CommaPrep™琼脂糖凝胶回收纯化柱2ml0-10μg100套/包DNAK1007CommaPrep™ 核酸纯化柱（微小提）2ml0-10μg100套/包DNAK1008CommaPrep™基因组小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1009CommaPrep™RNA小提纯化柱2ml0-20μg100套/包DNAK1002CommaPrep™质粒中提纯化柱15ml0-100μg20套/包DNAK1003CommaPrep™质粒大提纯化柱50ml0-500μg10套/包定制

[size=16px][color=#ff0000][b][url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]立即投递该职位[/url][/b][/color][/size][b]职位名称：[/b]核酸提取试剂盒研发员-苏州市[b]职位描述/要求：[/b]岗位职责：负责针对各种临床样本的核酸提取试剂的开发和优化；配合磁珠进行核酸提取试剂盒的开发和优化；如游离DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]纯化试剂盒、DNA片段筛选试剂盒等。岗位要求：拥有相关学科的大专/硕士或博士学位，如生物技术、分子生物学等。至少1年以上核酸提取的开发经验，熟悉相关实验操作和技术原理。[b]公司介绍：[/b] 未名环诊是国内成立最早的环境分子诊断企业，以北京大学研究成果和团队基础，研发基于污水流行病学的大数据监测评估技术，开创了污水毒情监测业务，为各级政府提供毒情监测和溯源服务。为全国行业龙头，细分领域市场占有率超60%。与公安部、18个省级公安厅、200多个地市级公安局合作，为我国公安禁毒事业做出了巨大贡献和技术突破。 企业的发展目标为以城市生活污水为载体，不断挖掘污水中蕴含的城市大...[url=https://www.instrument.com.cn/job/position-88822.html]查看全部[/url][align=center][img=,178,176]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108160948175602_3528_5026484_3.png!w178x176.jpg[/img][/align][align=center]扫描二维码，关注[b][color=#ff0000]“仪职派”[/color][/b]公众号[/align][align=center][b]即可获取高薪职位[/b][/align]

看一篇文章，作者想要测定血液中的PBDE的浓度，首先是测定了血液中脂质的含量，具体步骤是这样的：称量1mL血样，加入对应内标后，加入了盐酸（6M）和异丙醇后混合震荡，然后用MTBE/正己烷进行萃取目标物，萃取了2次，然后把提取液通过了氯化钾溶液清洗该提取液，然后蒸发，称量至恒重后测定脂质含量。 这里作者没有说明加入盐酸和异丙醇是为了什么，不是为了提取。因为后文作者写到用MTBE/正己烷 提取的。 另外这个氯化钾溶液的作用是什么，作者说清洗有机相，是清洗什么呢？ 希望有了解的朋友不吝指教。

血液中常见毒物的定性定量分析能力验证计划[align=center]结果反馈表[/align]参加编号：样品收到日期： 2022.9.8 样品测定日期： 2022.9.12样品外观描述： 血液约10ml（分装在2管中），具塞塑料管包装，检材编号为2022采用的检测方法：[font=黑体] [/font] 1.参照《SF/Z JD0107014-2015 血液和尿液中108中毒（药）物的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱检测方法》。2.参照《GA_T 1322-2016法庭科学血液中地西泮等十种苯骈二氮杂类药物[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱检验方法》。3.将检材分别在酸性、碱性条件下用氯仿：甲醇=3：2的混合萃取剂提取、离心后分离提取液,直接进样供8890-5977B GC/MS分析。最低检出限：[table][tr][td][align=center][color=black]样品[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]保留时间[/color][/align][align=center][color=black]（min）[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]检出限[/color][/align][align=center][color=black]（[/color][size=16px][color=black]u[/color][/size][color=black]g/m[/color][size=16px][color=black]L[/color][/size][color=black]）[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]样品[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]保留时间[/color][/align][align=center][color=black]（min）[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]检出限[/color][/align][align=center][color=black]（ug/m[/color][size=16px][color=black]L[/color][/size][color=black]）[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]甲基苯丙胺[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]3.841[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]氯胺酮[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]7.715[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]苯巴比妥[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]8.343[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]1.00[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]美沙酮[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]8.860[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]卡马西平[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]9.651[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.20[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]奥沙西泮[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]9.730[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.50[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]地西泮[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]10.284[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.05[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]咪达唑仑[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]11.225[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]唑吡坦[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]13.082[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]氯氮平[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]13.836[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.10[/color][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][color=black]艾司唑仑[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]14.423[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.50[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]阿普唑仑[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]14.963[/color][/align][/td][td][align=center][color=black]0.50[/color][/align][/td][/tr][/table]定量方法采用： 内标法 √外标法[table][tr][td]样品测定结果：[/td][/tr][tr][td]定性定量结果：检出的成分请在相应方框内打钩“√”，并将定量结果填写在相应位置。（数值保留小数点后两位）□甲基苯丙胺 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size] [/td][/tr][tr][td] □ 氯 胺 酮 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td] 地 西 泮 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td] 艾司唑仑 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 咪达唑仑 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]√ 阿普唑仑 0.89 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 奥沙西泮 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 卡马西平 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 苯巴比妥 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 氯 氮 平 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 唑 吡 坦 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][tr][td]□ 美 沙 酮 [size=13px]μg/mL（微克每毫升）[/size][/td][/tr][/table]对整个检测过程的描述： 1.样品测定方法：2022.09.08日收到血液约10ml（分装在2管中），具塞塑料管包装，检材编号为2022。[font=times new roman]2022.09.12日开始进行样品测定，[/font]参照《SF/Z JD0107014-2015 血液和尿液中108中毒（药）物的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱检测方法》。参照《GA_T 1322-2016法庭科学血液中地西泮等十种苯骈二氮杂类药物[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-质谱检验方法》。将检材分别在酸性、碱性条件下用氯仿：甲醇=3：2的混合萃取剂提取、离心后分离提取液,直接进样供8890-5977B GC/MS分析。 [font=宋体]2.进样分析：分别取空白溶剂、12种混合标准品、空白血液、空白对照（加标）、检材样品、系列浓度的混合标准溶液（检出限）、阿普唑仑系列浓度标准溶液、检材样品、质量控制样品依次进行分析。 [/font] [font=宋体]3.定性分析：通过GC/MS分析认为： [/font]（1）检材血样中阿普唑仑色谱峰的GC平均保留时间15.02min；与混合标准溶液中的阿普唑仑平均保留时间一致。空白血液、空白对照（加标）对定性分析无干扰。（2）利用质谱库检索功能，在NIST库中对检材血液中总离子流图逐峰检索，确认检材血液中检出阿普唑仑，其质谱离子碎片特征和丰度与混合标准品中阿普唑仑的质谱离子碎片特征及丰度一致； 空白血样、空白对照（加标）对定性分析无干扰。（3）定性检验结果：空白对照、混合标准品对照检验、与标准品的保留时间各特征离子及其丰度对比，结果检出阿普唑仑。未检出甲基苯丙胺、氯胺酮、地西泮、咪达唑仑、阿普唑仑、苯巴比妥、氯氮平、奥沙西泮、唑吡坦、卡马西平、美沙酮成分 。 4.定量分析：配制阿普唑仑质量浓度为0.5ug/mL、1.0ug/mL、2.0ug/mL、4.0ug/mL、8.0ug/mL的对照品标准溶液，进样分析，以阿普唑仑的峰面积（Y）为纵坐标、阿普唑仑质量浓度（X）为横坐标进行线性回归。得线性回归方程： Y=376.119863*X-187.274050 R[sup]2[/sup]=0.99256704 血液中阿普唑仑含量为[font=宋体]0.89[/font]ug/mL，[font=宋体]相对相差为[/font]2.7%[font=宋体]，小于5%，定量数据可靠。[/font] 5.质量控制 （1）检出限测定：20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1ug/mL、2ug/mL的添加混合标准品依次进样后，得到含12种目标物的方法检出限，其中阿普唑仑的方法检出限为0.5ug/mL。 （2）质控样品测定：将4.5ug/mL质量浓度的阿普唑仑质控样品进样后，经4.2.2曲线测定后其阿普唑仑质量浓度为4.587ug/mL，与质控已知质量浓度一致，实验结果可靠。 6.综合上述分析：检材血液中检出阿普唑仑成分。阿普唑仑含量为0.89ug/mL，相对相差为[font=times new roman]2.7%[/font]，小于5%，定量数据可靠。阿普唑仑方法检出限为0.5[font=times new roman]ug/mL，可以确认从检材血液中检出阿普唑仑，阳性结果可靠。 [/font] 7. 2022年9月12日，取所送血液检材约4mL用于检验，剩余检材放置于－4℃冰箱中保存2个月备查。 检验完成时间：2022年9月22号

血液中的还原性物质有哪些 他们在血液中的含量范围大致是什么 血液中水杨酸和氨基乙酸的含量是什么范围 谢谢、、、

提取植物DNA时遇到多糖成分的干扰， DNA质量一直不高，如何消除多糖的影响？参考见解：一般来说，SDS法提取的DNA会还有较多的多糖，使DNA成胶冻状。而CTAB法提取可基本上除去多糖。如果是植物材料本身含糖量比较高，可用以下方法试一试：1、 在 DNA 未溶出之前，先用一些缓冲液洗去多糖。如可用缓冲液：100 mmol/LTris -HCl(pH=8.0)、5 mmol/L EDTA和0.35 mol/L Sorbitol洗几次。2、 使 DNA 提取液中的多糖先沉淀。在提取液中加入 0.35 倍体积的无水乙醇，迅速混匀，多糖会先沉淀。3、 沉淀 DNA 时，使多糖保留在溶液中。如用乙醇沉淀时，在待沉淀溶液中加入 1/2 体积的 5 mol/L NaCl，或加 NH4Ac 使终浓度为 10 mmol/L。或 0.5 mL DNA 液中加 0.12 5 mL 4 mol/L NaCl 和 0.625 mL 13% PEG 8000（冰浴 1 h）。4、 多糖和 DNA 的共沉淀物进行再分离。如用 TE缓冲液反复清洗共沉淀 物，将清洗液合并再用醇沉淀 DNA，或将沉淀物溶解后，经琼脂糖电泳，切下 DNA 部分再将胶回收，或者用多糖水解酶将多糖降解。还 有在提取缓冲液中加一定量的氯苯(1/2体积)，氯苯可以与多糖的羟基作用而去除多糖 。上述方法还可组合使用，以达到最佳效果。然而这些方法均会在一定程度上减低 DNA 的提取量；如果材料较少或要求较高，则可考虑用柱层析方法，使用对 DNA 具有 特异性吸附的树脂来纯化 DNA。曾有文献提到选用 Wizard Purification Kit，PRC-5 柱 ，Sephacryl S-1000 或 S-500，Qiagen Genomic tip 500/G ，或者 CsCl 梯度离心纯化 DNA。血样4度保存了2月，现在按照酚常规提取方法不能提取出DNA，有什么解决办法？参考见解：按照常规的酚/氯仿法不可能提不出来，下面是参考方法：1、 首先洗出白细胞，最好有1毫升以上血液。2、 加入5ml DNA提取缓冲液，(10m mol/L Tris-cl, 0.1 mol/L EDTA, o.5% SDS),混匀。3、 加入25ul 蛋白酶K ,使终浓度达到100ug/ml, 混匀，50℃水浴过夜。4、 用等体积的（酚，氯仿，异戊醇，25：24：1）混合物抽提一次，5000r/min，10min离心收集水相。5、 取水层，加入3倍体积-20℃预冷无水乙醇5000r/min，10min，75%乙醇5000r/min洗DNA，充分干燥将DNA溶于适量水中。 CTAB法提取水稻基因组DNA， TE 溶解后琼脂糖胶电泳检测，点样孔附近有一条明显的主带。用MBI 公司产的限制性内切酶酶切过夜，鉴定时发现DNA已经被完全切烂，只在溴酚蓝前存在微弱smear状产物。换用NEB 公司产的酶，更换EP管，灭菌水之后重复几次，结果还是如此。拿其他人的DNA 做对照，酶切结果正常。用异丙醇将DNA 重新沉淀，换了TE溶解，检测主带仍旧清晰，可是用酶切之后DNA还是被切烂。为什么？ 参考见解：1、 公司的酶不行。2、 如做酶切，DNA最好不用异丙醇（因其不易挥发）而用无水乙醇沉淀。3、 酶量大或作用时间太长了。建议重提DNA，取少许用超纯水溶解（非TE），按照说明书进行酶切。要用新鲜样品或液氮冷冻-70度保存的样品。这样通过降低内切酶的活性减少DNA的降解；要得到全血基因组DNA，可以先用分层液密度梯度离心将淋巴细胞分离吗？这样做，与沉淀全血细胞然后破坏红细胞得到的结果有何差异？参考见解：1、 觉得还是先分离细胞好，因为DNA和RNA大都是在细胞核内，有红细胞反而不太好。从血里面提RNA，用淋巴细胞分离液先分离有核细胞的，效果还是不错的。2、 现在提取全血的DNA,也就是提取淋巴细胞中的DNA，用密度梯度离心，只是富积淋巴细胞，能得到更多的DNA而已。一般如果DNA的量的要求不太多的话，没必要。3、 如果对基因组的要求不高，可以试试这个方法。取EDTA-Na2抗凝血100μl加至1.5ml Eppendorf管中，加无菌重蒸水500μl；10 000r/分钟离心3分钟，弃净上清；加20μl 5mol/L KI，旋涡振荡30秒;0.9%NaCl 100μl,150μl氯仿/异戊醇(24∶1)，振荡30秒；10 000r/分钟离心5分钟，吸上清100μl于另一Eppendorf管中，加异丙醇60μl，轻轻混匀，10 000r/分钟离心5分钟，弃上清；加冷无水乙醇1000μl，10 000r/分钟离心5分钟；弃去无水乙醇，37℃烤干；50μl无菌重蒸水或TE，混匀溶解备用。从经福尔马林处理后的组织标本中提取DNA可以吗？参考见解：可以的，国外有好多相关试剂盒，qiagen, roche等公司都有的。100ml的大量提取，蛋白酶Ｋ是必需的吗？它的作用是什么？用溶菌酶代替可以吗？每次在用酚氯仿异戊醇抽提后，上层里面都是絮状的蛋白质，离心几次都沉淀不下来，请问是哪里出了问题？参考见解：一般来说，蛋白酶的作用是将蛋白质消化成小的片段，促进核酸与蛋白质的分开，同时，也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。而溶菌酶的作用是破坏微生物细胞壁，二者作用各异，不可替代。对于实验中的蛋白问题，建议离心后先用竹签挑出蛋白，小心吸取上层清液，再重复抽提几次试试。一般植物DNA提取的时候都不加蛋白酶K，这样提出来的DNA链上的组蛋白等未被蛋白酶消化，不是很难除去吗？那DNA是不是不纯？可以用来酶切吗？参考见解：蛋白酶k的主要作用并不是消化组蛋白，而是消化细胞，在动物细胞DNA的提取也不加蛋白酶k也是可以的，植物细胞的较易破碎，不需要蛋白酶k的作用。protenase K作用：1、 消化组蛋白，释放出DNA。2、 消化DNAse，提高DNA分子量。建议还是加蛋白酶k为好，这样提出来的 DNA分子量会高一点，且更纯。提白粉孢子的总DNA，白粉孢子比较小，直接在研磨中加液氮研磨可以吗？参考见解：液氮研磨的方法应该可行的，做动物组织，植物组织多采用这种方法，植物纤维一样可以用液氮研磨，要有耐心，边加液氮边研磨，研磨好后再抽提，应该是可以的。在CTAB法提取DNA时，有一些品种没有DNA析出，是什么原因？参考见解：1、 用预冷的异丙醇来沉淀试试，同时研磨的时候要研的非常非常的细。2、 没有看到析出物并不代表没有沉淀，可以继续下一步试验，溶解的时候少加一点儿。3、 高离子强度下DNA与CTAB能形成共沉淀。可能DNA就这样留在沉淀里了。提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时，怎样更好的抑制内源核酸酶的活性？参考见解：在提取内源核酸酶含量丰富的材料的DNA时,可增加裂解液中螯合剂的含量,细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔。用试剂盒对农田土壤的的微生物群落DNA进行提取，虽然总DNA提出来了，可是用细菌的通用引物进行PCR的时候却怎么也扩不出来，请有没有什么好的办法可以解决这个问题？参考见解：环境特别是土壤的样品成分

核酸蛋白检测仪是层析分析的主要装置，核酸蛋白检测仪配上层析柱、恒流泵、部分收集器、层析谱分析系统（根据需要选配）和电脑打印设备即构成一套完整的核酸蛋白检测仪分离层析系统。它是当今从事生命科学研究、药物测定、化工、食品科学及医学研究等行业的现代分析实验仪器。核酸蛋白检测仪分析系统广泛用于工业、农业、科研和大专院校的科学研究和教学实验。其原理是根据物质（样品）对紫外光有明显吸收的特征，实现对样品成份含量比对分析，以便进行样品蛋白、核酸物质识别检测和含量测定。在生化分析、环保科学、食品研究、毒理研究、新药开发等领域中对核酸、蛋白检测、纯化和提取提供了一种独特的分析手段。

1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如Tris、EDTA、NaCl 等)。盐的作用，除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris)，还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏(如 EDTA)、维持核酸结构的稳定 (如 NaCl)等。去污剂则是通过使蛋白质变性，破坏膜结构及解开与核酸相连接的蛋白质，从而实现核酸游离在裂解体系中。裂解体系中还可能加入蛋白酶；利用蛋白酶将蛋白质消化成小的片段，促进核酸与蛋白质的分开，同时，也便于后面的纯化操作以及获得更纯的核酸。也有直接使用高浓度的蛋白质变性剂 (如GIT、GuHCl 等) 裂解的，该方法已经成为了 RNA 抽提的主流，却不是基因组 DNA 抽提的主流。 最常用的纯化方法，一是PC 抽提 + 醇沉淀，二是介质纯化。第一种方法是利用 PC对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质，实现核酸与蛋白质的分离；再用醇将核酸沉淀下来，实现核酸与盐的分离。第二种方法则是利用某些固项介质，在某些特定的条件下，选择性地吸附核酸，而不吸附蛋白质及盐的特点，实现核酸与蛋白质及盐的分离。高盐沉淀去除蛋白质是第一种纯化方法的一个变体，省略了 PC操作的麻烦。当然，也有不纯化的抽提方法，但是用途多局限于简单的 PCR。其它杂质 – 如多糖、多酚等 -的去除，基本上都是在这两种方法的基础上，通过增加一些特别的试剂，或者增加一些额外的步骤来实现的。2、了解你的实验样品 如果你研究某个实验样品，并且要抽提它的核酸，以下的信息一定要先行收集：该样品的核酸含量、酶含量、特殊杂质含量。如果你对样品的特点一无所知，当样品稍微有一点复杂时，抽提核酸的实验就会碰到许多问题。以血液为例，如果你不知道鸟的血液中有核细胞的含量是人血的千倍左右，而使用人血一样的起始量去抽提鸟血的基因组 DNA，怎么可能成功？失败了又怎么知道原因所在？同时，只有对实验样品有所了解，才能正确选择裂解方法。 绝大部分情况下，使用新鲜样品可以获得最好的结果。对一些杂质含量高的样品，如果使用新鲜样品抽提基因组 DNA 是碰到杂质残留过大的问题，可以试一下 -20C保存一天后再抽提的对策，可能会有意想不到的效果。样品如果因为某些原因必须先行保存，也要先简化一下样品：血液最好只保存有核细胞；将样品分割后保存，避免反复冻融。如果实验室不具备合适的保存条件，将样品先裂解后再保存，是一个不错的选择。3、裂解方法的评价 含蛋白酶的裂解方法，可以认为是抽提基因组 DNA 的首选。裂解包括膜蛋白的游离和与基因组 DNA相连接的蛋白质的游离。蛋白酶的作用是使蛋白质变小，故而对蛋白质的游离有巨大的促进作用；同时，巨大的基因组 DNA是很容易“缠”住大分子的东西的，蛋白质被蛋白酶消化变小后，则不容易被基因组 DNA“缠”住，有利于蛋白质在纯化操作中的去除，使最终获得的基因组 DNA 的纯度更高。另外一个思路是，如果基因组 DNA 与蛋白质“缠”在一起，在纯化的过程中有两种可能：如果基因组 DNA 的特性占优势，则纯化时以 DNA的形式被保留下来，导致蛋白质的残留；如果蛋白质的特性占优势，则纯化时以蛋白质的形式被去除，导致 DNA 的损失。有些样品，如肌肉，即使是RNA 抽提，也强烈建议使用含蛋白酶的裂解液 (或者在操作中的某个时候使用蛋白酶消化蛋白质)，原因在于这些样品中的蛋白质，是非常难以去除的。该方法是获得最大得率和最高纯度的基础。 不使用蛋白酶的去污剂裂解方法，仍然在细胞基因组 DNA抽提方面有优势，尤其是当得率和纯度要求不是最高，而经济性及操作简单很重要时。控制好裂解液/样品的比例是该方法成功的关键。该方法结合高盐沉淀，可以实现最简单的操作，但纯度及得率的稳定性可能会比用 PC 抽提的差一些。 高浓度蛋白质变性剂 (如 GIT、GuHCl 等)的裂解方法，是抽提 RNA 的首选。总 RNA 的抽提，最重要的是快速裂解细胞膜，至于与基因组 DNA 相连接的蛋白质的裂解以及基因组与蛋白质“缠”住的问题，因为都不会对以后的纯化产生大的影响，可以不考虑。高浓度蛋白质变性剂能快速破坏细胞膜，进而迅速抑制住细胞内的 RNA酶，从而确保了 RNA 的完整性。除了极少量不适用该方法的样品 – 主要是植物，其它绝大部分样品的 RNA的抽提，都可以以高浓度的蛋白质变性剂为基础的。该方法也可用于基因组 DNA 抽提，非常快速简单，但纯度不是很高。 含 CTAB的裂解液，几乎成为富含多糖的样品，如细菌、植物的基因组 DNA 抽提的首选裂解方法。该方法成功与否与两个因素有关：一是 CTAB的质量，二是洗涤的彻底程度。CTAB 的质量对裂解效率有很大的影响，而且，似乎还说不清楚原因，因为即使是同一公司生产的纯度一样的CTAB，批号不同，效果就可能差别很大。洗涤去除 CTAB 要比其它的盐难一些，同时， CTAB的少量残留也会对酶活性有巨大影响，所以洗涤是否彻底也是该方法成功与否的关键。裂解时的温度，多使用65C；但如果发现降解严重或者得率太低，可以试一下 37C – 45C 这个相对低温的区域。 SDS碱裂解法是质粒抽提的首选裂解方法，具有快速、得率高、几乎无基因组 DNA污染的特点。控制好裂解液/菌体的比例和操作的温和是该方法成功的关键。蛋白质的沉淀效率在 4C 会更好一些，所以，加入溶液 III 后在 4C静置一段时间以及采用 4C 离心去蛋白质，都可以提高质量。该方法不一定要使用 PC 纯化，但结合 PC 纯化，可以获得纯度很高的质粒。RNA的去除可以靠在溶液 I 中加入 RNase A (100ug/ml) 或者在最后的溶解液中加入 RNase A (25 ug/ml)来实现。总的感觉是，在溶液 I 中使用 RNase A，RNA 的残留少一些。不过，经典沉淀几乎没有办法彻底去除 RNA 残留。另外，对大质粒(50 kb 以上)，该方法可能会有问题。 PCR模板的简易裂解方法，也是使用面很广的一类方法。该方法的特点是无须纯化，样品被裂解后即可直接取裂解液用于PCR，非常快速。也正因为不纯化，所以，假阴性 (即没有扩增出来的阳性)比例也比较高。该方法最简单的裂解液就是水，复杂一点的就会含有一些不会抑制后续的 PCR 反应，而且能提高裂解效率，甚至还可能部分消除样品内抑制PCR 反应杂质的东西，如 Triton X-100、甲酰胺等。再复杂一点的就会含有诸如 Chelex 100之类的能吸附部分杂质的介质。操作也非常简单，多使用温度的变化来实现样品的裂解，如煮沸、或者高温-低温的多次循环等。该方法最适合从一大堆样品中找出阳性样品，但却不适合用于判断某一个样品是阳性还是阴性。降低样品使用量可以提高阳性率，因为样品量的降低，同时意味着 PCR 的抑制物量的降低。 选择了合适的裂解液，下一步就是要控制好样品与裂解液的比例。这个问题非常重要，但却没有获得足够的重视。严肃的参考资料，都应该会提供一个简单的比例，如1ml 裂解液可以用于 T mg 组织或者 C个细胞；我的建议是，你的样品量绝对要小于资料所提供的。起始样品用多大，并没有具体的说法。如果不是样品量有限，则以能抽提出满足数次成功实验所需的核酸量，作为决定样品起始量的基础，会比较合理的。不要因为 1ml 裂解液可以抽提 100mg 样品，就一定使用 100mg样品。裂解液的用量，表面上与抽提的结果 (纯度及得率)没有关系，然而，在实际操作中，对结果是有比较大的影响的。裂解液的用量原则是：确保能彻底裂解样品，同时使裂解体系中核酸的浓度适中。浓度过低，将导致沉淀效率低，影响得率；浓度过高，去除杂质的过程复杂且不彻底，导致纯度下降。另外，裂解液的用量是以样品中蛋白质的含量为基准的，而不是以核酸含量为基准，这一点务必牢记。4、纯化方法 评价 PC 抽提/醇沉淀方法，是一个永不过时的方法。稳定、可靠、经济、方便。PC抽提可以彻底去除蛋白质，醇沉淀可以去除盐，对于一般的干净的样品 (杂质为蛋白质)，该方法完全可以获得高质量的核酸。虽然每次 PC抽提都会损失一部分核酸(因为不可能将水相全部移取)，以及低浓度核酸的醇沉淀效率低，但这些问题都可以靠操作的调整而得以解决或者减少影响。该方法的最大的问题是不适合大规模抽提。 PC抽提是去除蛋白质的一个非常有效的手段。苯酚能使蛋白质变性，变性后的蛋白质从水相中被析出，处于苯酚中或者苯酚/水相之间。PC抽提的关键是，一要混匀彻底，二要用量足够。彻底混匀，才能确保苯酚与蛋白质的充分接触，使蛋白质完全变性。许多人总是担心混匀的剧烈程度是否会对核酸，尤其是基因组 DNA 造成破坏，实际上大可不必如此小心。剧烈的混匀操作，是会部分打断大分子的基因组 DNA，但该破坏作用不会强烈到 DNA变成 10kb 以内的小片段。手剧烈晃动混匀后，基因组 DNA 的片段，大部分会大于 20kb，这个大小，除了一些特别的要求外，对 PCR和酶切，都是完全适用的。如果要求的片段非常大，如构建文库用，则不能使用剧烈的混匀方法，而只能来回温和颠倒混匀 –此时的关键是：裂解液的比例要足够大，使体系不要太粘稠。用量要足够，是因为苯酚去除蛋白质是有一定的饱和度的。超过了该饱和度，裂解体系中的蛋白质不会被一次去除，必须靠多次抽提，方可