植物核酸提取

有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中的RNA， 而阻碍了其分子生物学方面研究的进展。这些植物组织中，或富含酚类化合物，或富含多糖，或含有某些尚无法确定的次级代谢产物，或RNase的活性较高。在完整的细胞内这些物质在空间上与核酸是分离的，但当组织被研磨，细胞破碎后，这些物质就会与RNA相互作用。酚类化合物被氧化后会与RNA不可逆地结合，导致RNA活性丧失及在用苯酚、氯仿抽提时RNA的丢失，或形成不溶性复合物；而多糖会形成难溶的胶状物，与RNA共沉淀下来；萜类化合物和RNase会分别造成RNA的化学降解和酶解。对于这些植物材料，用常规的RNA提取方法（如胍法、苯酚法和十六烷基三甲基溴化胺法等）难以提取出其RNA。纵观国际上RNA提取的试剂盒，如常见的Trizol，以及一些知名名牌的RNA提取试剂盒均很难从多糖多酚的植物中提取高质量的RNA，酚类物质的含量会随着植物的生长而增加。因而从幼嫩的植物材料中更容易提取RNA。此外，针叶类植物的针叶中多酚的含量比在落叶植物的叶子中要高得多。在植物材料匀浆时，酚类物质会释放出来，氧化后使匀浆液变为褐色，并随氧化程度的增加而加深，这一现象被称为褐化效应。被氧化的酚类化合物（如醌类）能与RNA稳定地结合，从而影响RNA的分离纯化；多糖的污染是提取植物RNA时常遇到的另一个棘手的问题。植物组织中往往富含多糖，而多糖的许多理化性质与RNA很相似，因此很难将它们分开。在去除多糖的同时RNA也被裹携走了，造成RNA产量的减少；而在沉淀RNA时，也产生多糖的凝胶状沉淀，这种含有多糖的RNA沉淀难溶于水，或溶解后产生粘稠状的溶液。由于多糖可以抑制许多酶的活性，因此污染了多糖的RNA样品无法用于进一步的分子生物学研究。Trizol主要成份是异硫氰酸胍和苯酚，没有特殊去除多糖和多酚的试剂，所以对于大多数多糖多酚的植物无法成功提取，即使添加了如2-巯基乙醇、二硫苏糖醇（DTT）或半胱氨酸之类的防止酚氧化的试剂也很难提取。RNeasy Plant Mini Kit主要裂解液是盐酸胍或则异硫氰酸胍，有些公司进行改进之后添加了诸如PVP40等结合多酚的试剂，亦无法取得让人满意的结果。百泰克公司在RNA提取方面积累了丰富的实践经验，开发出通用植物总RNA快速提取试剂盒，在试验的一百多例多糖多酚植物中，无一例外的提取出来高质量的RNA，其中包括棉花、苹果、葡萄、草莓、香蕉、龙眼、荔枝、番茄果实、茄子、松针、杨树、拟南芥种子、菠萝蜜、马蹄金、早熟禾、高羊茅、云杉、松树、紫椴、花楸、白桦、山毛榉、海棠花、槭槭、紫罗兰、毛爪草、丁香、月季、天竺葵、仙客来、菊花、牵牛花、紫松果、彩叶草、一品红、夹竹桃、垂叶榕等。

想买个核酸提取仪，做动植物组织DNA荧光定量PCR检测，有什么好的仪器，国产进口都可以，请用过的推荐下。谢谢

请问大家，我在做植物提取的时候，有机相和水相之间会有一层乳化层，要怎么处理呢，感觉静置太费时了。

植物油脂和提取物

各位大侠 有没有了解植物提取物的，请赐教！

近日，我国输日植物提取物产品中因含有甜蜜素而遭到了日本海关的通报。为最大限度削弱该事件对我植物提取物出口贸易的冲击，检验检疫部门提醒辖区内相关出口企业应了解自身产品的特性，在确保产品不含违禁添加剂的前提下，跨越出口门槛。 甜蜜素，其化学名称为环己基氨基磺酸钠，是食品生产中常用的添加剂。有实验表明，消费者食用超过安全摄入量的甜蜜素，咽喉会有刺激反应，甚至会出现咽喉水肿或肿痛，继而引起疾病，损害人体健康。因此，目前世界上有包括美国、英国、日本等国在内的40多个国家禁止使用甜蜜素作为食品甜味剂。而我国、欧盟、澳大利亚、新西兰在内的80多个国家则允许在食品中添加甜蜜素。 植物提取物是以植物为原料，定向获取和浓集植物中的某一种或多种有效成分，用于药品、保健食品、烟草、化妆品的原料或辅料等。由于国内外对植物提取物的标准并不一致，导致了我上述产品出口频遭通报、召回、退运等，如何实现我国植物提取物产品在国际市场的快速准入问题，已成亟待破解的一大难题。 为此，检验检疫部门建议植物提取物出口企业积极采取应对措施：一方面需建立一套科学的符合产品提取规格、标准和质量的生产体系，严格控制产品的生产过程，避免在生产过程中造成产品添加剂、重金属等污染；另一方面，提高植物提取物检测技术，实现精细指标监控，把好原料安全关；最后，应及时掌握信息，对相关动向保持高度敏感，一旦国外对植物提取物法规有新进展，便应加强研究，以最快速度寻找应对之策。'而我国、欧盟、澳大利亚、新西兰在内的80多个国家则允许在食品中添加甜蜜素。'所以还难控制啊！

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16069]植物提取物检验技术 1[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16070]植物提取物检验技术 2[/url]

植物提取做为一个新兴的行业,提取物既可以做药品原料,还可以做食品原料,它体现出绿色健康的象征,特受外国人喜爱!全球的植物药市场在2005年将突破260亿美元，2006年产值突破380亿美元,预计2007年将突破500亿.欢迎广大植提工作者参与到我们的交流空间------植提空间http://www.plantextra.com/bbs/?fromuid=3141[em17] [em17]

在做提取植物血红素，用的河南老师的提取方案，但是结果并不是很好，想问问哪位大师做过相关实验？给点经验和资料？

RT索氏提取一般是提取中药材当中的成分，但不知道可不可以提取植物当中的精油呢？新手一枚，请大家多赐教

从植物中提取的酚类待测物成分复杂，油脂多，如何纯化酚类物质，且如何去除油脂呢？请专家们解答，谢谢！

我还想问问大家：怎样对植物中的酚类物质进行提取？都有什么方法？由于我是新手，对各方面还都不太了解，各位费心了。

果德安 植物油脂和提取物

功能性食品和饮料是当今国内外食品工业新的增长点。鉴于近年消费者对食品安全的关注，因而从天然物中提取，特别是从通常食用的植物中提取功能性食品添加剂和配料，也自然成为国内外开发的热点。　　本文介绍了近年国内外从天然植物中提取功能性食品添加剂的发展动向，以及几种具有开发前景的食用植物提取物：绿茶提取物茶多酚、葡萄皮及籽的提取物、大豆异黄酮、番茄红素及植物甾醇的功能和发展动向。　　１ 天然植物提取物的国际发展动向　　在西方国家，由于不合理的饮食结构，脂肪和蛋白质摄入过多，超体重者和高血脂、高血压患者比较普遍，所以欧美一直十分强调低热量、低脂肪食品和添加剂的开发。　　以糖醇类食糖替代物生产无蔗糖甜食品，用菊粉等产品的代脂肪食品，还有用中碳链脂肪酸合成的低热量脂肪等，在国际上均占有领先地位。但过去很长一段时间，对采用具有生理活性的天然提取物，并不十分重视和提倡。在亚洲国家，有药食同源的传统，注重保健、功能食品的开发。　　功能性食品添加剂，特别是一些天然提取物的明显功效，也得到国际的公认。因此大量保健功能食品，以食物补充剂的方式进入美国和国际市场。近年在环保、安全、回归大自然的影响下，西方国家也不甘落后，致力于天然提取物的开发，对中国传统的食药两用的植物，也开展了深入的研究。目前已有不少天然提取的功能性食品添加剂，从欧美进入中国市场。　　2000年和2002年两届欧洲健康食品添加剂配料展览，参展企业400多家。从展出的产品看，天然提取物非常突出。如展台中有植物提取物74处、植物化学品31处、天然抗氧剂75处、膳食纤维44处、大豆异黄酮38处。　　展出产品中比较热门和突出的有：标示有妇女保健、降低血脂、改善心血管疾病、改善骨质疏松4大功能的大豆异黄酮；有护眼功能的叶黄素；消除自由基抗氧化活性高于维生素Ｅ100倍的番茄红素等。2002年6月在美国ＩＦＴ的展出，包括食物补充剂、含有生理活性物质的功能性饮料和食品、植物提取的天然色素和抗氧剂、果蔬加工品（脱水物和微粉）、生物合成的功能低聚糖和肽等。　　2002年8月在西安，由中国食品科学技术学会主持召开的“功能食品科技与发展国际研讨会”上，参加会议的有我国（包括台湾地区）、日本、美国、加拿大的专家学者150人左右。主要新技术新产品的报告，绝大多数是关于天然物或其提取物的。如植物异黄酮和骨质疏松症、酶法提取番茄红素、灵芝抗癌机制、枇杷叶提取物改善动物糖代谢、美国加州杏仁多功能、山药的抗氧化活性、白黎芦醇对骨代谢的影响、生物合成伽玛氨基丁酸、竹叶抗氧剂、香椿萃取液对人类精子运动能力影响的研究等。

核酸提取(核酸的分离与纯化)主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开,但在分离核酸时,应保证核酸分子一级结构的完整性,并排除其他分子污染。核酸提取方法一般包括细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤,而每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。操作过程中首先通过物理、化学或酶解作用裂解细胞,使核酸释放出来,并去除与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂肪类等生物大分子的过程。在此基础上,沉淀核酸、去除盐类和有机试剂等杂质,从而得到纯化的核酸。核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来自动完成样本核酸的提取工作的仪器。在传统的手工核酸提取过程中通常采用离心澄清的方法，操作时费时费力。近年来,出现了磁珠分离技术，利用磁珠在一定条件下对核酸具有很强亲和力的特点，吸附核酸。当条件改变时，磁珠又可以与其吸附的核酸分离,从而得到纯化的核酸。这种方法简便、高效、易于操作，是目前核酸提取仪采用的主要方法。具体来说，磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞，从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后，再在磁场作用下，使磁性颗粒与液体分开，回收颗粒（即磁珠-DNA 混合物），再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂，操作简单，符合核酸自动化提取要求，是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。

最近，听说浙江大学发明一种方法，从某种植物中提取物质，在作物釆收前几天喷散上去。可以降解农残50%。不知同行中有无熟悉此神物的朋友，能详细介绍其机理吗？

大家都谈谈对植物有效成分提取的经验、提取的方法、应注意些什么及出现的问题，大家一起在这里学习和交流。

[color=#444444]烧烤酱本身加的油就不多，大概就是２％而已．现在公司的企业标准制定的就是要检测酸价和过氧化值．本来我是将样品用石油醚浸泡过夜来提取植物油的，不过提取的效果不是很好．在ＱＳ现场审查的时候审查组的人说要用索氏提取，到底用什么方法来提取比较好呢？还请大家帮帮忙给点意见．谢谢拉[/color]

植物成分提取的一般方法有哪些？最好能简单的叙述下具体操作流程。谢谢各位高手了！比如说：叶黄素的提取

止血的药是从哪种植物中提取的？

如果我要从植物中提取物质．我应该如何取样？

[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多：[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39931.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]糖类是自然界中广泛分布的一类重要的有机化合物，又称碳水化合物，是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称。糖类在生命活动过程中起着重要的作用，是一切生命体维持生命活动所需能量的主要来源。植物中最重要的糖是淀粉和纤维素，动物细胞中最重要的多糖是糖原。[font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]总糖含量检测可溶性总糖含量检测还原糖含量检测糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖)单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖)多糖含量检测可溶性固形物含量检测β-葡聚糖含量检测多糖检测植物样本：植物干样、鲜样[font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]植物[/td][td]总糖含量检测 可溶性总糖含量检测 还原糖含量检测 糖组分(葡萄糖、果糖和蔗糖) 单糖组分检测(DL-木糖、DL-木糖、蔗糖、鼠李糖、 阿拉伯糖、麦芽糖、棉子糖、D-半乳糖、甘露醇、海藻糖、D-山梨醇、D-果糖) 多糖含量检测 可溶性固形物含量检测 β-葡聚糖含量检测[/td][td]实验室方法[/td][/tr][/table][font=&][size=16px][color=#333333]我们的优势[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font]菲优特检测服务形式委托检测：环境检测、食品/医药/保健品检测、化工检测、水产养殖检测、微生物检测等。科研服务：高校科研服务(氨基酸类、维生素类、脂肪类、糖代谢类、有机酸类、动/植物激素类、核苷酸类、生物胺类、花青素类、黄酮酚酸类、皂苷类、氮代谢类、植物提取物类、神经递质类等。生物项目研发(毒理测试、动物饲养、动物模型构建、保健食品功能性评价服务、动物实验技术服务等)。仪器共享：HPLC检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测平台、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]检测平台、动物实验服务平台。方法开发及咨询：实验室检测方法开发和应用、实验室管理咨询和培训、质量控制咨询与培训、实验仪器配置和选型等

请前辈们多多指点！谢谢！建设一个小型的植物提取实验室，面积大概30平，不知道都需要哪些仪器？1.样本的粉碎，带组织液的是不是用打浆机？干燥的样品用粉碎机？2.粗提取，布氏漏斗、索氏提取器、水浴锅、旋转蒸发仪、真空泵、离心机、冷冻干燥机等等都要吧？3.分离纯化，溶剂萃取、柱色谱？还有就是，一个项目做成一个提取物出来，大概多长周期，试剂预算大概需要做多少呢？

[font=宋体, SimSun][size=16px][color=#000000]ID鉴别是通过[b]化学方法[/b]来识别植物提取物的品质优劣、鉴别真伪。[/color][/size][/font][size=16px][font=宋体, SimSun][color=#000000]常用的方法有薄层色谱法（TLC）和高效薄层色谱法（HPTLC）。[/color][/font][b][font=宋体, SimSun][color=#000000]TLC：[/color][/font][/b][font=宋体, SimSun][color=#000000]是一种依靠同一吸附剂对不同化学成分吸附能力不同而达到分离的色谱方法。它是鉴别中药的最常用的手段，具有操作方便、设备简单、灵敏度好、可比性大、专属性强、显色容易等优点。可以依靠薄层板上斑点的有无来判定药材的真假，斑点的颜色的深度以及尺寸可一定程度上反映出药材的品质。同理植物提取物也可采用薄层色谱法来判断提取物的真假。[/color][/font][b][font=宋体, SimSun][color=#000000]HPTLC：[/color][/font][/b][font=宋体, SimSun][color=#000000]相比TLC，HPTLC具备简单性、准确性、低成本高效益等优点。其呈现的指纹图谱具有更好的分辨率，能在较短的时间内合理准确估算天然药物中的多种活性成分。HPTLC为执行可靠的鉴别提供了有力保证，因为其能够提供彩色的色谱指纹图谱信息，可被可视化并以数字图像存储[i][/i]。[/color][/font][b]HPTLC在中药、天然产物的分析应用：[/b][font=宋体, SimSun]植物药物活性物质定性分析[/font][font=宋体, SimSun]植物药物溶出度含量测定[/font][font=宋体, SimSun]天然药物真伪鉴别[/font][font=宋体, SimSun]未知活性物质筛选[/font][font=宋体, SimSun]产品一致性的分析[/font][b]实际应用案例《中国药典[i][/i]》中药材涉及的TLC鉴别：[/b][font=宋体, SimSun][back=transparent]如：人参、人参总皂苷、黄芪、麦冬、丹参、党参、水飞蓟[i][/i]、红景天、枇杷叶、马齿苋、木瓜、姜黄等几百种[/back][/font][/size][b]植物提取物TLC方法鉴别：[/b][font=宋体, SimSun][back=transparent]如：红景天提取物、姜黄素、葛根提取物、接骨木[i][/i]提取物、车前草提取物等近百种。[/back][/font]

现在我们在生活、生产中需要很多原料，大多都在人工合成或是工业合成的，植物提取素可能是未来工业、食品、生活所需的新型原料

一、植物组织蛋白质提取方法1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3-4小时）。3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清液，样品制备完成。　　蛋白质提取液：300ml1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml2、甘油（Glycerol）75ml3、聚乙烯吡咯烷酮（Polyvinylpolypyrrordone）6g　　这种方法针对SDS-PAGE，垂直板电泳！　二、植物组织蛋白质提取方法　　　三氯醋酸—丙酮沉淀法1、在液氮中研磨叶片2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜，然后离心（4℃8000rpm以上1小时）弃上清。3、加入等体积的冰浴丙酮（含0.07%的β-巯基乙醇），摇匀后离心（4℃8000rpm以上1小时），然后真空干燥沉淀，备用。4、上样前加入裂解液，室温放置30分钟，使蛋白充分溶于裂解液中，然后离心（15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准），可临时保存在4℃待用。5、用Brandford法定量蛋白，然后可分装放入-80℃备用。　　药品：提取液：含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。裂解液：2.7g尿素0.2gCHAPS溶于3ml灭菌的去离子水中（终体积为5ml），使用前再加入1M的DTT65ul/ml。　　这种方法针对双向电泳，杂质少，离子浓度小的特点！当然单向电泳也同样适用，只是电泳的条带会减少！　　三、组织：肠黏膜　　目的：WESTERNBLOT检测凋亡相关蛋白的表达　　应用TRIPURE提取蛋白质步骤：　　含蛋白质上清液中加入异丙醇：（1.5ml每1mlTRIPURE用量）　　倒转混匀，置室温10min　　离心：12000 g，10min，4度，弃上清　　加入0.3M盐酸胍/95％乙醇：（2ml每1mlTRIPURE用量）　　振荡，置室温20min　　离心： 7500g，5 min，4度，弃上清　　重复0.3M盐酸胍/95％乙醇步2次　　沉淀中加入100％乙醇 2ml　　充分振荡混匀，置室温20min　　离心： 7500g，5min，4度，弃上清吹干沉淀1％SDS溶解沉淀　　离心：10000g，10min，4度　　取上清-20度保存（或可直接用于WESTERN BLOT）　　存在的问题：加入1％SDS后沉淀不溶解，还是很大的一块，4度离心后又多了白色沉定，SDS结晶？测浓度，含量才1mg/ml左右。　　解决：提蛋白试剂盒，另外组织大小适中，要碎，立即加2X BUFFER，然后煮5－10分钟，效果很好的。

最近在收集植物提取物中各国关于农药残留限量的资料，请哪位知道这方面情况的不吝赐教。

做植物提取物的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]，一直不出峰，或者只出一个峰不知道为啥，正常不是应该有很多峰甚至有很多杂峰，是想鉴别提取物中的酚类物质，测总酚含量有很多，但是跑[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]就不出峰，换了几种流动相，按照文献里的也跑不出来，标准品能跑出来，这到底是为啥啊？

多酚类植物基因组DNA提取纯化及测试方法是什么?

一、实验目的 通过采用改进的SDS法提取植物叶片基因组DNA，使学生学习和掌握从植物组织中提取DNA的方法和原理。二、实验原理 基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交、RFLP、PCR分离基因和分子标记分析等。利用基因组DNA序列较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇，大分子的基因组DNA形成沉淀，而小分子DNA则附于管壁及管底,通过离心方法即可将它们分离，从而达到提取的目的。在提取过程中，若操控不当，基因组DNA会发生机械断裂，产生大小不同的片段，因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作，如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓等，以保证得到较完整的基因组DNA。一般来说，构建基因组文库，初始DNA长度必须在100kb以上，否则酶切后两边都带合适末端的有效片段很少。而进行RFLP和PCR分析, DNA长度可短至50kb, 在该长度以上，可保证酶切后产生RFLP片段(20kb以下)，并可保证包含PCR所扩增的片段(一般2kb以下)。不同生物（植物、动物、微生物）的基因组DNA的提取方法有所不同; 不同种类或同一种类的不同组织因其细胞结构及所含的成分不同，分离方法也有差异。在提取某种特殊组织的DNA时可参照文献和经验建立相应的实验方法, 以获得可用的DNA大分子。组织中的多糖和酶类物质对随后的酶切、PCR反应等有较强的抑制作用,因此用富含这类物质的材料提取基因组DNA时, 应考虑除去多糖和酚类物质。三、实验仪器和材料 台式高速离心机恒温水浴陶瓷研钵1.5ml 离心管移液器无菌枪头无菌牙签液　氮吸水纸四、实验试剂 DNA提取洗涤液100 mmol／L Tris•HCl(pH8.0)，3％可溶性PVP，20 mmol／L 巯基乙醇，20 mmol／L EDTA(pH8.0))DNA裂解液(100 mmol／L Tris•HCl(pH8.0)，20 mmol／L EDTA(pH8.0)，500 mmol／L NaC1，1.5％SDS)酚/氯仿/异戊醇(v:v:v=25:24:1)5M KAc无水乙醇异丙醇70%乙醇含5g/ml RNase 的TE缓冲液