空间灭菌系统

现在很多人都在推空间干雾灭菌系统，也不知道效果如何？

简介实验室即进行试验的场所，是科技的产出地，是科学的摇篮，是科学研究的基地，科技发展的源泉，对科技发展起着非常重要的作用。进入二十世纪，各类实验室如雨后春笋，研究工作广泛开展。在科技发达的今天，对于实验室微生物的控制却是束手难测，实验室对洁净度要求比较高，必需严格控制空间微生物数量，防止杂菌污染目标菌种及器皿，且实验完毕后要对样本进行销毁、空间及器材进行消毒防止微生物对外环境污染。实验室的消毒，一直都是工作人员很头疼的问题。但是又必须做好，否则工作就没法很好的开展。即要达到灭菌消毒效果同时又不能使人员和设备受到危害。所以一般考虑用杀菌效果好的灭菌消毒剂，还要安全无毒副作用的。一般情况下，实验所用的物质都带有毒性，经常会产生各种难闻的，有腐蚀性的、有毒的或易爆的气体。这些有害气体如不及时排除室外，会造成室内空气污染，影响实验人员的健康与安全；影响仪器设备的精度和使用寿命。实验室空间污染源 （1）在实验室当中的大部分实验员来自不同的生活环境，可能有一部分实验员缺少很好的自我卫生习惯，因此进入房间当中，所需要标本、模型让其操作道具，每一种模型会有很多人进行接触，标本在我们不知不觉当中已经变成了无形病毒的传播能够存在的介质，再加上某些实验员的不良习惯，尤其是部分实验员有吃食物的爱好，就能够使得病从口腔进入身体的情况出现。 （2） 实验室当中标本、物品很多，在实验员运用后，对于标本、模型采用置之不理得态度，能够使得标本以及道具沾染细菌。 （3） 实验室的消毒产品并不能进行全面杀毒灭菌，甚至一部分的实验室没有进行消毒杀菌。 （4） 实验室人员没有完全使用实验室制度来进行操作或者没有依照实验室的相关要求学生进行试验。 （5） 有些试验要求使用“菌罗”以及储存“菌落”的实验室不可以完全按照要求，在实验室操作实验员决定没有必要完全按照操作进行，因此对自我造成伤害。实验室空间污染分类实验室生物源危害主要是由微生物。尤其是病源微生物引起的。包括细菌。病毒。寄生虫等。在实验室内做试验、研究等操作时。实验人员需要处理大量的病源微生物，很容易引起污染。根据生物污染的对象，为空气污染、水污染、人体污染、物体表面污染等种类。1．对空气的污染：根据污染空间，可分为实验室内环境空气污染、实验室外环境空气污染。许多操作可产生气溶胶。气溶胶（aerosol），是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系，又称气体分散体系。其分散相为固体或液体小质点，其大小为10﹣3cm～10﹣7cm，分散介质为气体。当气溶胶不能安全有效地限定在一定范围内，便导致实验室内空气污染。2．对水的污染：实验中会产生大量污水，医院污水尤其是传染病医院，综合医院传染病房的污水，有大量的有机悬浮物和固体残渣，还不同程度的含有多种细菌、病毒和寄生虫虫卵。这种污水不经处理直接排入江河、池塘或直接灌溉，可污染环境和水源。当人们接触成食用污染水时，可能使人致病或引起传染病的流行。3．对人体的感染：人是实验室污染最容易侵袭的对象。其污染途径包括接触污染物或吸入病源微生物气溶胶。原因有几下几种：（1）实验室事故引起的污染，通过器械、破碎且污染的玻璃器皿、针头刺破伤而发生。（2）实验室动物引起的感染。（3）气溶胶引起的感染，通过呼入被污染的气溶胶而感染。（4）其他：工作区与生活区相混，下班或餐前不洗手而感染。4．对物体表面的污染：实验人员的皮肤、鞋底、感染性物溢出或溅出后处理不当可造成墙壁、地面、台面、仪器和其他等物体表面的污染。实验室常用消毒剂1、紫外线灭菌　在接种室、超净台上或接种箱里用紫外灯灭菌。紫外线灭菌是利用辐射因子灭菌，细菌吸收紫外线后，蛋白质和核酸发生结构变化，引起细菌的染色体变异，造成死亡。紫外线的波长为200-300nm，其中以260nm的杀菌能力最强，但是由于紫外线的穿透物质的能力很弱，所以只适于空气和物体表面的灭菌，而且要求距照射物以不超过1.2m为宜。2、熏蒸灭菌　用加热焚烧、氧化等方法，使化学药剂变为气体状态扩散到空气中，以杀死空气和物体表面的微生物。这种方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。 它们使微生物的蛋白质变性，或竞争其酶系统，或降低其表面张力，增加菌体细胞浆膜的通透性，使细胞破裂或溶解。一般说来，温度越高，作用时间越长，杀菌效果越好。另外，由于消毒剂必须溶解于水才能发挥作用，所以要制成水溶状态，如升汞与高锰酸钾。还有消毒剂的浓度一般是浓度越大，杀菌能力越强，但石炭酸和酒精例外。 常用熏蒸剂是甲醛，熏蒸时，房间关闭紧密，按5-8ml/m3用量，将甲醛置于广口容器中，加5g/m3高锰酸钾氧化挥发。熏蒸时，房间可预先喷湿以加强效果。冰醋酸也可进行加热熏蒸，但效果不如甲醛。3、臭氧灭菌　臭氧极不稳定，分解时释放出自由基态氧，自由基态氧具有强氧化能力，可以穿透细胞壁，氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶；也可以直接与细菌、病毒发生作用，破坏其细胞器和核糖核酸，分解DNA、RNA、蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物，使细菌的物质代谢生长和繁殖过程遭到破坏；还可以渗透细胞膜组织，侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部的脂多糖，促进细胞的溶解死亡，并且将死亡菌体内的遗传基因、寄生菌种、寄生病毒粒子、噬菌体、支原体及热原（细菌病毒代谢产物、内毒素）等溶解变性灭亡。实验室空间灭菌，消毒，是实验室的一个重点，也是难点，就算在严格的生物安全柜里操作也难以避免病毒气溶胶以气体扩散的形式逸散在空气中， 还有阳性动物的呼吸等途径都会有机会给空气传上病毒分子。 目前普遍采用的是臭氧或者甲醛熏蒸配合杀孢子剂，但是臭氧的杀菌能力有限，甲醛熏蒸对人体的危害性大，且消毒后必须空置2－3天，人员才能进入洁净区，影响效率不说，还不易验证。极大的造成了实验室的生产效率降低， 而且也不易验证。 那么有没有一种全新的灭菌消毒产品，在既能达到快速、方便灵活对微生物室空间进行杀菌消毒效果同时，又不会让人员和设备受到危害材料兼容性好的空间灭菌产品，还没有残留呢？奥克泰士实验室空间灭菌剂的出现，彻底解决以上难题！奥克泰士应用于涉及实验室空间污染的洁净室，无菌区等。 其目的是消灭各种对人或动物有致病生命危险的病源微生物的同时，保护工作者、合作者和实验室支持人员不受传染，同时保护产品和环境不受污染。成功的破除了杀孢子剂有刺激性，有害的传统消毒概念，破除了空气熏蒸需要静置很长一段时间的固有概念。主要成分过氧化氢 银离子。德国原装进口，食品级无色无味无毒无残留型，是目前国际上最为先进的一款实验室环境微生物杀菌消毒剂，由于其独特的作用原理，能够杀灭包括芽孢、细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌、病毒在内的所有类型的微生物具有杀菌彻底，不产生微生物耐药性，无任何毒性残留，不造成重复污染等特点。采用的氧化剂为过氧化氢，它与稳定剂结合形成复合溶液。作为催化剂添加的痕量银离子可以保持长久的效用。银离子的杀菌作用是基于单价银离子通过共价键和配位键来与细菌蛋白质牢固结合，从而使细菌钝化或沉淀。能在实验室空间消毒中迅速杀灭各种微生物（包括芽孢）或者抑制微生物繁殖的高效广谱的食品级进口高效杀菌剂。现已十分广泛的应用于各种实验室空间消毒中。实验室空间杀菌灭菌剂基于过氧化氢和银离子，是全球最高效的杀菌消毒剂，可以在3-5分钟内对芽孢杆菌的杀灭率达到6-8个log。可以作为固定的实验仪器杀菌消毒产品。

[color=#444444]随着近几年在我国乃至全球突发疫病的爆发，高等级生物安全实验室越来越受到全球各国的重视，我国目前也已建成P4实验室两座，P3实验室上百座。由于高等级生物安全实验室的特殊性，其内部排向大气的空气必须经过双级HEPA的袋进袋出过滤器（BIBO），以拦截空气中悬浮的高危害微生物。因此HEPA过滤器为此类微生物的富集区，在每年更换HEPA过滤器时需要先对其灭菌，灭菌合格后方能进行下一步处理。目前对于BIBO的灭菌，国内尚无较好的方法，这里上传一个附件《生物安全实验室袋进袋出系统灭菌难点和解决方案》，为某公司经第三方验证的使用VHP（汽化过氧化氢）对BIBO双级高效灭菌的案例，供大家参考，希望对大家有所帮助。[/color]

微生物实验室如何进行无菌间灭菌呢？最近经常看到有实验员咨询：我的无菌室空白验证长菌落了，是不是无菌室灭菌不彻底啊！我们的无菌室应该用什么方式灭菌？等等。无菌室作为我们微生物检测的空间，一旦出现这种情况大家都会感到担忧，会有疑问：在这样的环境里检测，结果能准确吗？首先我们应该了解我们的无菌室应该处于什么状态，有什么要求。一般情况下，我们的无菌室达到空间洁净度10000级就可以了，但操作区域例如超净工作台、生物安全柜里需要达到洁净度100级，也就是我们常说的“整体万级，局部百级”。万级洁净度对空间落菌的要求是：静态检测，自然沉降菌≤3CFU/皿，百级洁净度对空间落菌的要求是：静态检测，自然沉降菌≤1CFU/皿。也就是说平时我们做的空间验证，只要不超过这个标准，就是符合要求的，因此也不必太过担忧。那么，怎样能够保证我们的无菌室符合要求？当我们的无菌室出现异常应该如何处理？我们得先从无菌室的灭菌方式开始讲。一般无菌室的灭菌方式分为：紫外线照射、臭氧灭菌、化学熏蒸这几种。这几种灭菌方式各自有各自的特点，大家可以根据自己的实际情况来选择合适的灭菌方式，遇到异常难以解决时，也可以考虑增加一种灭菌方式来解决。紫外线照射：紫外线灭菌是利用适当波长的紫外线破坏微生物机体细胞中的DNA或RNA结构，造成生长性细胞死亡来达到灭菌效果，属于一种物理方式的灭菌，也是我们微生物检测无菌室最常用的灭菌方式。该方法操作简单，使用方便，也比较经济，可以杀灭各种微生物，包括细菌、病毒、真菌、立克次体以及支原体等，因此在实验室里，是最常见的灭菌方式。但紫外线灭菌也有一定的缺点，紫外线只能对直接照射到的微生物起到杀灭作用，因此只能对空间中照射到的地方起作用，一些照射不到的死角或者物品的内部是无法达到效果的，因此使用紫外线灭菌的无菌室，也会辅助以一些化学试剂，例如洁尔灭、酒精等消毒剂对死角进行清理。使用紫外线灭菌，应当定期检测紫外线的强度，若是无法达到要求的强度，就应该考虑更换紫外灯。根据2002年国家卫生部发布的《消毒技术规范》，紫外灯的要求是紫外线强度不得低于70μW/cm2（紫外灯1m处），而空间内的紫外灯的布局也是有要求的，要求平均每m3不少于 1.5W。也就是说，假如你无菌室是5m2，实验室高度是3米，那么你的空间体积就是15m3，你空间中使用的紫外灯的功率就不得低于22.5w。按照这个方式就可以算一下你的无菌室需要多少紫外灯了。当紫外线的强度达不到要求时，就需要更换紫外灯了。臭氧灭菌：臭氧是一种强氧化剂，灭菌过程属生物化学氧化反应。O3灭菌原理一般有以下三种：1.臭氧通过氧化分解细菌内部葡萄糖所需的酶，使细菌灭活死亡。2.直接与细菌、病毒作用，破坏它们的细胞器和DNA、RNA，使细菌的新陈代谢受到破坏，导致细菌死亡。3.透过细胞膜组织，侵入细胞内，作用于膜内的脂蛋白和内部的脂多糖，改变细胞的通透性，导致细胞溶解死亡。使用臭氧灭菌，杀菌彻底，无残留，杀菌广谱，可杀灭细菌繁殖体和芽孢、病毒、真菌等，并可破坏肉毒杆菌毒素。另外，O3对霉菌也有极强的杀灭作用。O3为气体，能迅速弥漫到整个灭菌空间，灭菌无死角。所以，臭氧灭菌也是目前被广泛使用的灭菌方式。用臭氧消毒空气，必须是在封闭空间，且室内无人条件下进行，消毒后至少过 30min 才能进入。另外臭氧的密度比空气大，在空气中会迅速下降到空间的底层，因此臭氧发生器也应当安装在无菌室的顶部。一般灭菌时间选择30min即可，要求空间中臭氧浓度不低于20mg/m3。化学熏蒸：化学熏蒸是一种十分传统的空间灭菌方式，一般是采用易挥发气化的化学物质的蒸汽对空间微生物进行杀灭的目的，一般常用甲醛、戊二醛、过氧化氢、过氧乙酸等。这里以常用的甲醛熏蒸为例。一般甲醛熏蒸又称甲醛高锰酸钾熏蒸，将40%的甲醛溶液加入到高锰酸钾溶液中，二者发生反应，放出大量的热使甲醛蒸发到空间中，从而对无菌室进行灭菌。一般甲醛熏蒸的灭菌效果比较理想，对霉菌等较难清除的污染菌也有较好的杀灭效果，因此在无菌室被霉菌污染时，通常都是使用甲醛进行熏蒸来彻底消灭污染源。但是甲醛熏蒸的缺点也是很明显的，因为甲醛是一种强致癌性的化学品，对人体的伤害较大，在使用过程中需要特别注意，并且残留量也要进行严格的控制。每次熏蒸后，至少需要通风24h才可以使用。目前对熏蒸后甲醛的残留量并没有明确要求，还是要通过经验来判断，目前国家对居民住房要求甲醛含量不大于0.1mg/m3，所以我们也可使用甲醛含量测定仪来对熏蒸后的空间进行检测。目前甲醛熏蒸灭菌的方法食品检测无菌室的灭菌中已经较少使用，主要也是因为操作比较繁琐，灭菌时间较长，进行一次甲醛熏蒸之后，会有几天无法使用无菌室进行检测，所以只有在其他灭菌方法无法达到理想的灭菌效果时，才会考虑进行甲醛熏蒸。而其实这种灭菌方式目前在很多药企的无菌室灭菌，还是会经常用到的，另外，有些生产区域如果长期被霉菌污染，也会考虑用甲醛熏蒸的方法来解决。了解了这几种常用的无菌室灭菌方式，在我们日常的工作中也可以根据自己实验室情况进行选择，尤其是长期使用一种灭菌方式若是灭菌效果达不到理想的效果时，可以根据实际情况更换灭菌方式，或者引进一种新的灭菌方式两者结合，以期达到预想的效果。

湿热灭菌柜灭菌物品放入高压饱和蒸汽，热水喷淋和其他手段微生物蛋白质核酸变性，和杀灭微生物的方法。该方法具有很强的杀菌能力，热杀菌是最有效，最广泛使用的消毒方法。药品，容器，介质，无菌衣，橡胶塞和其他在高温和高湿不改变或损坏的货物，可以采用的灭菌方法。 干热灭菌的物品放入干热灭菌柜，隧道消毒器等设备，利用热空气杀死微生物或消除热原方法。适用于高温而不是由湿热灭菌消毒灭菌的物品，如玻璃，金属容器，纤维制品，固相试剂，液体石蜡，可采用的灭菌方法。 能够干热灭菌的，基本都可以湿热灭菌，但是某些仪器，如离心管、枪头等塑料制品，必须湿热灭菌。消毒灭菌至关重要。 高温湿热由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。其原因有三：①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，所以较同一温度的干热空气中易于凝固。②湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所需温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大，使其深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好一些。所以高温消毒并不是简单的看消毒温度，主要是看是否湿热消毒。另外，从使用角度看，湿热消毒一般控制在90°C就能达到很彻底的消毒效果，整个消毒过程中培养箱内的所有附件都不用取出，可以全部进行消毒；而干热消毒为了达到较好的效果，温度一般都在100°C以上，在这种温度下消毒培养箱内的传感器、HEPA过滤器等都要在消毒过程中取出，等消毒结束再装上，这样即麻烦，附件又不能同时消毒，而且增加二次污染的几率，再者要达到100°C以上的高温，培养箱的加热系统的电热丝必然要加粗，这会导致培养箱的温度控制难度增加，均一性变差。

灭菌法系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去，从而使物品残存活微生物的概率下降至预期的无菌保证水平的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的灭菌。无菌物品是指物品中不含任何活的微生物。对于任何一批灭菌物品而言，绝对无菌既无法保证也无法用试验来证实。一批物品的无菌特性只能相对地通过物品中活微生物的概率低至某个可接受的水平来表述，即无菌保证水平(Sterilityassurance level，简称SAL)。实际生产过程中，灭菌是指将物品中污染微生物的概率下降至预期的无菌保证水平。最终灭菌的物品微生物存活概率，即无菌保证水平不得高于10-6。已灭菌物品达到的无菌保证水平可通过验证确定。灭菌产物品的无菌保证不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP 管理和良好的无菌保证体系。灭菌工艺的确定应综合考虑被灭菌物品的性质、灭菌方法的有效性和经济性、灭菌后物品的完整性和稳定性等因素。灭菌程序的验证是无菌保证的必要条件。灭菌程序经验证后，方可交付正式使用。验证内容包括：(1)撰写验证方案及制定评估标准。(2)确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确，并能处于正常运行（安装确认）。(3)确认灭菌设备、关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行（运行确认）。(4)采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定（性能确认）。(5)汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。日常生产中，应对灭菌程序的运行情况进行监控，确认关键参数（如温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度及吸收的辐照剂量等）均在验证确定的范围内。灭菌程序应定期进行再验证。当灭菌设备或程序发生变更（包括灭菌物品装载方式和数量的改变）时，应进行再验证。物品的无菌保证水平与灭菌工艺、灭菌前物品被污染的程度及污染菌的特性相关。因此，应根据灭菌工艺的特点制定灭菌物品灭菌前的微生物污染水平及污染菌的耐受性限度并进行监控，并在生产的各个环节采取各种措施降低污染，确保微生物污染控制在规定的限度内。灭菌的冷却阶段，应采取措施防止已灭菌物品被再次污染。任何情况下，都应要求容器及其密封系统确保物品在有效期内符合无菌要求。

灭菌大法汇总 灭菌法系指用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于无菌、灭菌制剂、原料、辅料及医疗器械等生产过程中物品的灭菌。 无菌物品是指物品中不含任何活的微生物。然而，对于任何一批灭菌产品来说，绝对无菌是既无法保证也无法被用试验来证实的，因为不可能对每一最小包装的产品进行无菌试验。事实上，物理或化学灭菌方法手段灭菌试验表明：微生物的杀灭曲线遵循对数规则，，因此，所以，批已灭菌物品的无菌性标准一般在概率意义上定义为污染单位低到可接受的程度，一般用以物品灭菌后微生物存活的概率-无菌保证值水平SAL (Sterility Assurance Level)表示。最终灭菌产品产品微生物存活的概率的无菌保证值一般不得低于高于10-6，即灭菌后微生物存活的概率不得大于百万分之一。无菌保证值与灭菌物品中存在的微生物数量及特性密切相关，因此在产品生产的各个环节均应采取各种有效的手段(包括过滤除菌等措施)来降低待灭菌产品的微生物污染并控制在规定的限度内。已灭菌产品达到的无菌保证水平可通过验证确定。 灭菌产品的无菌保证并不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的全面质量保证体系。灭菌工艺的制定确定应综合考虑其被灭菌物品的性质、灭菌方法的有效性、和经济性及、灭菌后产品物品的完整性和稳定性等因素。 灭菌程序的验证是无菌保证的重要内容必要条件。对灭菌产品(包括最终容器及包装)而言，；灭菌方法在实际应用前必须对其灭菌程序经进行验证后，方可交付正式使用。验证内容包括： ⑴撰写确定验证方案及制定评估标准。 ⑵确认灭菌设备技术资料齐全、安装正确,并能处于正常运行（安装确认）。 ⑶确认关键控制设备和仪表能在规定的参数范围内正常工作运行（运行确认）。 ⑷采用灭菌物品或模拟物品进行重复试验，提供各参数范围，确认灭菌效果符合规定（性能确认）。 ⑸汇总并完善各种文件和记录，撰写记录完整的验证报告。 日常生产中，应对灭菌过程程序的运行情况进行监控，确认灭菌过程中各关键参数（如温度、压力、时间、湿度、灭菌气体浓度及吸收的辐照吸收剂量等）均在验证确定的范围内。；已采用的灭菌程序中关键的设备和工艺应定期进行再验证。当灭菌程序发生较大变化发生变更时，（包括灭菌柜中灭菌物品放置装载方式和数量发生的改变）时，应进行重新再验证。 产品在这种概率意义上的无菌保证并不能依赖于最终产品的无菌检验，而是取决于生产过程中采用合格的灭菌工艺、严格的GMP管理和良好的全面质量保证体系。这意味着批生产过程的监控将比批无菌试验结果更能反映产品的无菌保证水平。产品的无菌保证与灭菌前产品被污染的程度及污染菌的特性相关。因此，应严格监控被灭菌品灭菌前的微生物污染水平及污染菌的耐受性，并在生产的各个环节采取各种措施降低污染，确保微生物污染控制在规定的限度内。 否则，应采取必要手段降低污染及消除抗性菌株，甚至进行灭菌工艺的重新验证。灭菌后，应防止已灭菌物品被再次污染。任何情况下，都应要求容器及其密封系统确保产品在有效期内符合无菌要求。灭 菌 方 法 常用的灭菌方法有蒸汽湿热灭菌法、干热灭菌法、气体灭菌法、辐射灭菌法和过滤除菌法。可根据被灭菌物品的特性采用一种或多种方法的组合灭菌。只要产品允许，一般应尽可能选用终端最终灭菌法（即产品分装至包装容器后再灭菌）灭菌。若产品不适合采用终端最终灭菌法，可选用过滤除菌法或无菌生产工艺达到无菌保证要求，只要可能，应对非最终灭菌的产品作补充性灭菌处理（如流通蒸汽灭菌）。 一、蒸汽湿热灭菌法 本法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽或流通蒸汽灭菌、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。流通蒸汽不能完全杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅助灭菌手段。高压蒸汽灭菌该法灭菌能力强，为热力学灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌灭菌方法。药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其他其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品，均可用本法灭菌。流通蒸汽不能完全杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅助灭菌手段。1. 蒸汽灭菌的有关参数 (1)D值 D值即微生物的耐热参数，系指一定温度下，杀灭90%微生物所需的时间，以分表示。D值越大，表明该微生物的耐热性越强。不同的微生物在不同环境条件下具有不同的D值。 灭菌方法验证时，微生物的耐热参数一般使用D121℃ 。 (2)Z值 Z值即灭菌温度系数，系指使某一种微生物的D值下降一个对数单位，灭菌温度应升高的值(℃)，通常取10℃。它被用于定量的描述孢子对灭菌温度变化的敏感程度，Z值越大孢子对温度的敏感性越弱。 (3)FT值 FT值系指给定的Z值下，灭菌程序所赋予待灭菌品在温度T下的灭菌时间，以分表示。 LgP=lgN0- FT/DT 式中P为灭菌产品中微生物存活的概率。 N0为产品灭菌前微生物的数量。 灭菌温度高时，FT值就小，灭菌温度较低时，所需FT值就大。 (4)灭菌率L L值系指在某温度下灭菌1分钟所相应的标准灭菌时间(分)， 即F0和FT的比值(L= F0/FT = D121℃ /DT)。不同Z值、不同温度下的L值是不同的，灭菌率均可查得。 (5) F0值 F0值即标准灭菌时间，系指灭菌过程赋予待灭菌物品在121℃下的等效灭菌时间，即T=121℃、Z=10℃时的FT值。121℃为标准状态，F0值即为标准灭菌时间，以分表示。一个灭菌程序的总的标准灭菌时间F0，应包括加热及冷却过程。它可以用灭菌率对时间求积分的方法计算而得。 F0=∫t2t1Ldt 式中dt为测定的间隔时间，相邻两次的间隔时间通常取1分钟。 100℃以下，L值可以忽略。F0是作为灭菌过程中监控物品达到无菌保证的重要手段。现代灭菌器上设置有F0值自动显示系统。 上述参数及其关系为蒸汽灭菌程序的设计、验证及日常灭菌效果的监控提供了理论依据。灭菌条件及验证的基本要求高压蒸汽湿热灭菌条件一般通常采用121℃×20min或116℃×40min的程序，也可采用其它温度和时间参数。总之，必须保证物品灭菌后的SAL≤10-6。总之，必须验证所采用的灭菌条件能达到无菌保证要求。在实际应用中，对热稳定的产品或物品，可采用过度杀灭法菌，其SAL应≤10-1212。对热极为敏感的产品，可的允许标准灭菌时间F0可低于8min。，但对F0低于8的灭菌程序要求应在生产全过程中，对产品中污染的微生物严加监控，并采取各种措施防止耐热菌污染及降低微生物污染水平，以确保被灭菌灭菌产品达到无菌保证要求。灭菌物品的表面必须洁净，不得污染有机物质。必要时，外表应用适宜的包皮宽松的包裹，特别是烧瓶、试管等容器的塞子要防止脱落。灭菌柜内的物品装载方式应保证灭菌蒸汽彻底穿透物品，且不影响蒸汽穿透速度和灭菌后的干燥程度。灭菌柜中的空气应排空并被饱和蒸汽完全替代,以保证表压与灭菌柜内压力的一致。 采用湿热灭菌时[d1] ，被灭菌物品应有适当的包装和装载方式，保证灭菌的有效性和均一性。 蒸汽灭菌法湿热灭菌工艺验证时，应进行热分布试验、热穿透试验和生物指示剂验证试验。以确定灭菌柜空载及不同装载时腔室里中的热分布状况及可能存在的冷点；在空载条件下，确认121℃时腔室的各点的温度差值应≤±1℃、；使用插入实际物品或模拟物品内的温度探头，确认灭菌柜在不同装载时，最冷点物品的标准灭菌时间（F0）达到设定的标准；用生物指示剂进一步确认在不同装载时冷点处的灭菌物品达到无菌保证水平。本法常用的生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus)。

培养基的高压灭菌及效果验证消毒灭菌在医学实践上有着重要意义。它可切断传播途径、控制感染扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的细菌，防止医院感染；在微生物检验的领域中，消毒灭菌是保正感染的病原学检验不受外来微生物污染的前提。（一）术语消毒( disinfection)、灭菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐（antisepsis）和无菌( asepsis)是常用术语。下面就术语概念加以叙述。(1)灭菌：是用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的灭菌。（如外科器械、注射器、基础培养基灭菌等。）(2)消毒：是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括细菌芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂( dis-infectant)。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。(3)防腐：直接使用防腐剂(antiseptics)破坏或抑制活的病原微牛物的方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或杀菌肥皂清冼双手等。(4)无菌：防止感染病原体进入灭菌组织或物品的操作技术称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。用于消毒灭菌的物理方法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。这里介绍热力消毒灭菌法。高热破坏微生物蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致微生物死亡。受高热作用后，蛋白质分子运动加快，肽链连接键断裂，蛋白变性凝固；细胞膜功能受损使胞内物质漏出，细菌内外环境平衡失调。不同种类微生物对热的耐受力不同，多数无芽胞细菌经55-60℃作用30-60分钟后死亡，100℃时迅速死亡。有芽胞细菌则对高温有强的抵抗力，如肉毒芽胞梭菌煮沸需3—5小时才死亡。热力灭菌分干热灭菌法和湿热灭菌法两大类，相同温度下后者较前告效力大，其原因是：①湿热环境中菌体蛋白易凝固；②湿热穿透力比干热大；③湿热蒸气变为液态时可释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度。1．干热（dry heat）灭菌法(1)焚烧。直接点燃或在焚烧炉内进行，仅适用于废弃物品或动物尸体。(2)烧灼。直接以火焰灭菌，适用于微生物学实验室接种环、针和试管口等灭菌。(3)干烤。在干烤箱内进行，加热至150-180℃ 2-4小时达到灭菌效果，适用于高温下不变质、不被破坏和不蒸发的物品，如玻璃器皿、瓷器，不能用于塑料、棉、纸制品。2．湿热( moist heat)消毒灭菌法(1)巴氏消毒法。巴氏消毒法(pasteurization)是用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物而保持物品中所需的不耐热成分的方法。此法由巴斯德创立，用于酒类消毒而得名。目前用于牛乳消毒。方法有两种：一种为71.6℃加热15秒，另一种为63-66℃加热30分钟。大多采用第一种方法。(2)煮沸法。在1个大气压下，水煮沸后温度达100℃，煮沸5分钟后可杀死一般细菌繁殖体。如于水中加入2%碳酸钠，可将其沸点提高至105℃，既可促进芽胞的杀灭，又可防止金属器皿生锈。(3)流通蒸气消毒法。又称常压蒸气消毒法，常用附诺(Amold)流通蒸气灭菌器，利用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒，10-30分钟后细菌繁殖体被杀死，但对芽孢作用不大。(4)间歇灭菌法（fractional sterilization）。采用间歇方式达到灭菌目的。将灭菌物品置于阿诺流通蒸气灭菌器内，100℃加热15-30分钟，每日1次，连续3次。每次灭菌后取出物品置37℃孵育箱过夜，致残存的芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸气灭菌器加热而被杀灭。如此反复，既可杀灭芽胞，又可使不耐高温的物质免受影响。若某些物质不耐100摄氏度，则可将温度下降至75-80℃，每次加热时间延长到30-60分钟，常用血清凝固器对吕氏血清培养基和L-J培养基的灭菌属此方法。(5)高压蒸气火菌法。利用密闭的耐高压蒸气灭菌器(autoclave)，在蒸气不外溢的条件下，使锅内压力增高，随之蒸气温度也增高。通常在103.4kPa压力下蒸气温度达到121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。（二）下向主要介绍高压蒸气灭菌器灭菌效果的验证方法高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求，这是药品实验中的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格足实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到对药品的无菌试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。为此我们提供了进行灭菌效果验证的一个简易可行的方法。1．试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5 CFU/片。(2) 121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层，则需放10处。留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存l℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次，共做六次。5个点六次试验表明温度均在121℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明高压蒸气灭菌效果合格。高压灭菌器属于强检仪器，但强检只是对仪器物理参数的考核。所以做过强检的灭菌器还必须进行灭菌效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提灭菌器，往往仪器指针达到所需的温度，但灭菌物品的实际温度却未达到要求。导致灭菌物品不彻底，影响实验结果。培养基灭菌不彻底，影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气灭菌器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。（三）灭菌时的注意事项使用高压蒸气灭菌器时，首先应注意在开放蒸气的同时，排除灭菌器内的冷空气。必须将器内冷空气全部排除后，才可关闭排气孔。假如灭菌器内仍存留有部分空气时，刚压力表上虽已达到了某一压力值，但器内之温度仍未达到相应之度数。存留的空气越多，刚二者相差也越大。差也越大，器内温度不足，灭菌则不彻底。 转

巴氏消毒：定义：将液体加热到一定温度并持续一段时间，以沙溪可能导致疾病、变质或不需要的发酵微生物的过程。原理：在一定温度范围内，温度越低，细菌繁殖越慢；温度越高，繁殖越快，但温度太高，细菌就会死亡。巴氏消毒其实就是利用病原体不是很耐热的特点，用适当的温度和保温时间处理，将其全部杀灭。但经巴氏消毒后，仍保存小部分无害或者有益、较耐热的细菌或细菌芽胞，因此，巴氏消毒不是“无菌”处理过程。效果：选择巴氏消毒手段的制药用水系统需采用不锈钢材质新型安装，其微生物污染水平通常能有效的控制在低于50CFU/ml的水平。由于巴氏消毒能有效的控制系统的内源性微生物污染，一个前处理能力较好的水系统，细菌内毒素可控制在5EU/ml的水平。方法：常采用80℃以上的热水循环1~2h。臭氧杀菌：原理：通过氧化作用破坏微生物膜的结构而实现杀菌效果。效果：臭氧水的杀菌速度极快，100μg/L臭氧浓度在1min内能杀死60000个微生物。水中臭氧浓度超过8μg/L时，微生物即停止繁殖，水中臭氧浓度超过50μg/L时，系统能有效杀菌微生物和细菌。ISPE建议水中臭氧浓度控制在20~200μg/L。臭氧能有效去除水中的卤化物并降解生物膜，同时经紫外破除后完全无残留，是纯化水系统和高纯水系统中能连续去除细菌和病毒的最好方法。臭氧的半衰期仅为30~60min，为保证系统没有离子污染、提高臭氧溶解度，目前主要推荐采用水电解的方式产生臭氧。与巴氏消毒相比，臭氧杀菌系统除了有操作简单、水温无波动、消毒时间短和降解生物膜等优点外，管道材质选择余地也非常大。纯蒸汽杀菌：定义：指利用高温高压蒸汽新型灭菌的方法。效果：纯蒸汽杀菌可杀死一些微生物，包括细菌的芽孢，真菌的孢子或休眠体等耐高温的个体。方法：目前常以温度121℃、灭菌30min作为纯蒸汽杀菌参数。纯蒸汽杀菌时，一定要排尽罐体内的不凝性空气，否则会大大降低灭菌效果，同时，灭菌过程中系统所有低点的冷凝水菌需得到及时排放，在疏水器前端采用温度传感器进行在线监测，在最冷点的温度达到灭菌温度时开始计时灭菌。优点：时间短、气化潜热、系统简单。过热水杀菌：定义：指利用高温高压过热水进行灭菌的方

灭菌柜验证的重要性一、国内制药企业对热力灭菌的现状随着我国制药工业的发展，国内一些药厂不断对企业进行技术改造，提高产品质量。新购买的热力灭菌设备都由生产厂家进行了验证，但是多数制药企业在做回顾性验证和再验证时，忽视了其重要性，一台设备经过验证并在使用一个阶段以后，旨在证实其“验证状态”没有发生漂移而进行的验证。在药品生产过程中，由于各种主观及客观的原因，需要对设备的管理或操作规程作出变更。有些情况下，变更可能对产品质量造成重要的影响，因此，必需要进行回顾性验证和再验证。二、灭菌的概念一个细胞本身或在其寄住内，其新陈代谢、生长以及繁殖等主要生命活动一旦停止，就意味着死亡。与消毒的概念不同，灭菌工艺是指以适当的物理或化学手段，将一定数量活的微生物完全杀灭，并使其生命活动产生不可逆转的灭活过程。在制药工业实践中，无菌是指灭菌工艺使一批产品中非无菌品的概率符合药典通则规定无菌要求的状态，它的内涵远远超出了无菌检查的范围。从理论上说，无菌产品应当是没有任何微生物污染的产品。然而，一旦将无菌定义为绝对无微生物污染，那么，这种绝对的标准就无法用试验来认定或用科学的方法来验证，从而使标准架空，以至无法在工业界建立起可以应用的技术标准，因为技术标准的确立必须具备3个必要条件：科学性、安全性和可操作性。三、验证的原理和目的灭菌程序的验证是无菌保证的重要内容。USP24（1211）药品的灭菌和无菌保证中非常明确地阐明了灭菌程序验证的原则要求。使用未经验证的灭菌程序，就谈不上产品的无菌保证。要想使一个灭菌设备在受控的验证状态下运行，必须充分了解微生物学和工程学方面的基本原理；设备的设计、安装和运行都必须合理、恰当；必须通过科学的试验，用数据来证明设备的运行不但稳定，而且可靠。从早期的工艺设计到验证的实施和监控的所有文件记录，均应归档保存。 只有对与灭菌设备运行相关的电气、机械以及物理操作等全面了解后，才能着手该设备的验证。对上述资料的充分了解，是撰写验证方案和标准操作规程的先决条件。这对拟定校验和维修计划、制定再验证方案，确保设备运行始终处于受控状态下是十分有益的。空载热分布试验是通过一组经过校正的标准热电偶测定灭菌器腔室内各不同部位温度变化值,并根据所测定的温度变化值得到温度分布图和其热力学特征。在此试验中应用的热电偶至少在10支以上，热电偶在安装时不应与腔室内金属（如内壁、架子等）接触，在试验过程中至少有一支热电偶应位于设备自身控制系统的温度传感器附近。试验过程应采用与生产过程要求相同的操作运行条件，并应记录整个温度变化过程，即包括升温与降温过程。正常的干热灭菌系统在空载状态下其热分布应该均匀，腔室内各点温度值与设定值之间的误差均应在验证方案规定的范围之内。 装载的热穿透试验 将热电偶均匀放置在产品容器及腔室内，以确定灭菌相应装载方式下的冷点。某一灭菌程序的热穿透试验应在最大和最小装载方式下分别进行，以确定装载方式对被灭菌物品的热力学影响。此验证试验获得的数据包括：最高和最低温度（温度范围）、保温阶段各点的平均温度、最小及最大F0值以及保温时间。 四、验证的重要性灭菌设备对无菌保证的作用是至关重要的，对灭菌设备基本原理缺乏了解会给灭菌程序的验证及此后设备的正确使用、维护、保养等造成不稳定因素。忽视灭菌后防止二次污染的措施，会给成无菌保证带来风险，例如，大容量注射剂灭菌采用饮用水冷却，或纯化水冷却，这两种介质均无微生物污染监控措施；又如，小容量注射剂检漏用水对微生物污染也无监控措施。对于干热灭菌柜来说，不安装高效过滤器，或安装后从不定期检查完好性，这些均是无菌保证的不利因素。 干热灭菌往往和去热原联系一起。去热原的工艺条件比孢子杀灭程序要苛刻得多，通常相当于标准干热灭菌时间FH的数十倍。因此，如果干热去热原工艺能使细菌内毒素下降了3个对数单位，那么就没必要再进行生物指示剂的挑战性实验了。

消毒及灭菌的定义：1.消毒定义：利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。区分为高程度消毒（High-level Disinfection）、中程度消毒（Intermediate-level Disinfection）、低程度消毒（Low-level Disinfection）三种方式。2.灭菌的定义：以化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。本版关于灭菌的话题已有730贴， 关于灭菌的话题已有320 贴，这些帖子的绝大多数是讨论了一些关于消毒灭菌的具体操作技术。本贴的主旨是从应用微生物技术的角度来谈论这个老话题，希望战友们积极参与。我先开个头，简单介绍一下几种非热灭菌技术。大家还可以进行补充和详细谈论。1.冷冻真空干燥(vacuo-lyophilization)灭菌冷冻：－20℃以下，细胞原生质内水分结冰，破坏其胶体状态并机械挤压，刺伤菌体而死亡。真空：抽去空气呈低氧或绝氧状态，抑制正常呼吸干燥：导致菌体脱水和盐类浓度增高，抑制代谢活动正常进行2.微波(microwave)灭菌微波：是频率范围为300~300000MHz的无线电波，与其他波段的无线电波相比，其具有波长短，振荡周期短，似光波性和频率很高等特点。微波灭菌机理：微波的热效率高；介质分子振荡旋转速度快；菌体脱水，蛋白质凝固；染色体、细胞膜、酶系统发生变性。3.γ射线(γ-ray radiation)灭菌γ射线：是一种波长非常短能量非常大，有强烈穿透力使物质产生电离作用的电磁波。γ射线灭菌机理：低剂量的γ射线诱发生物变异。高剂量γ射线使水分子电离，生成具有强氧化性的H+和强还原性的OH－，直接作用菌体细胞本身；电离产生的电子和环境的分子氧结合，氧化菌体内酶的化学基团使酶失活；辐射能导致DNA降解或其他物质分解，造成死亡。4.化学熏蒸（fumigating）灭菌法化学熏蒸的概念：在一定温度和压力的密闭条件下，化学毒剂由固态或液态迅速转成气态渗透到生物体内，使生物致死。常用熏蒸灭菌剂(1)甲醛（HCHO）R—NH2 + HCHO R—NH2 •CH2O甲醛的灭菌机理在于它的还原作用与蛋白质的氨基结合使其变性，从而破坏了酶系统和细胞膜、细胞壁的结构(2)环氧乙烷(CH2OCH2)R—SH + CH2OCH2 R—S—CH2CH2OH环氧乙烷的灭菌机理在于它与蛋白质的氨基、羟基、酚基和巯基结合使其变性，抑制氧化酶和脱氢酶的活性，破坏菌体正常代谢熏蒸设备：简易消毒箱、真空熏蒸机、熏蒸消毒室

会验证高压灭菌器灭菌效果吗？微生物实验室最少不了的实验仪器之一就是灭菌器，一般实验室常用的是高压蒸汽灭菌器。GB 4789.1-2016中要求：实验设备应定期进行检查和/或检定（加贴标志）、维护和保养，以确保工作性能和操作安全。但你的灭菌器有没有类似的检查呢？如果要做类似的验证，又需要怎么做呢？今天就给大家汇总一下高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证的相关内容。高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证一般有化学指示剂法、留点温度计法、自制测温管法和生物指示剂法，每种方法的原理都是相似的，主要是通过验证灭菌时灭菌器里的温度能否达到要求。我们可以根据自己实验室的具体情况选择其中一种或多种方法进行验证。一、化学指示剂法原理：化学指示剂在一定温度与作用时间下，会受热变色或变形，根据这一特点来判断是否达到需要的灭菌参数。一般实验室常用的是3M压力灭菌指示胶带，这种指示胶带是利用灭菌前后胶带颜色变化来判断灭菌效果。它是由热敏化学物质与显色剂及漆辅料制成油墨，并将油墨以条纹状印制在特制的一面胶纸带制成。指示胶带可以直接粘贴于包裹外，长度不低于5cm，并轻压胶带以增加粘性和封包效果；在121℃持续20min或130℃持续4min后，胶带上印有的斜行的白色指示线条会完全变黑，成为黑色线条；如变色不均匀或不彻底，可认为该包裹不符合灭菌条件。二、留点温度计法原理：留点温度计法是利用水银温度计不回流的特性，其原理跟传统体温计相似，可以指示灭菌器在灭菌过程中达到的最高温度。验证时把水银温度计放在盛水的大三角瓶里，灭菌时把三角瓶放在灭菌器的上部和下部，灭菌结束后看水银温度计的温度和要求温度是否一致。此法只能验证温度，不能指示灭菌时间是否达到要求，因此是灭菌器验证的最低标准。三、自制测温管法原理：利用一些化学药品受热熔化后再冷却，晶体的外形不同的特性，把化学药品密封在小玻璃管内，灭菌时放在灭菌器里，灭菌完后观察晶体的形状，就可以判断温度是否达标。常用的试剂是苯甲酸，苯甲酸的熔点为121-123℃，跟我们要求的灭菌器的灭菌温度基本吻合，因此灭菌时把固体苯甲酸密封在小玻璃管内放进灭菌器，灭菌结束就可以观察苯甲酸的状态来验证灭菌器是否达到了要求温度。这种方法的局限跟留点温度计法相同，也只能指示灭菌时的温度，对灭菌时间是否达到要求无法判断。四、生物指示剂法原理：利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌，来测定热力灭菌的效果。嗜热脂肪杆菌的芽孢对热的抗性较强，其耐热能力与病原微生物肉毒梭菌芽孢相似，以此为指示菌，验证灭菌器能否达到灭菌要求。生物指示剂分为三种：芽孢悬液、芽胞菌片、菌片和培养基混合指示管。一般放在灭菌容器的5个点：下层的前、中、后和上层、中层的中央点。灭菌后取指示剂接种到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中，55-60℃培养2-7天，若培养基澄清、颜色没有变化即说明芽孢被杀死，灭菌器灭菌效果良好；如果培养基黄色浑浊，说明芽孢未被杀灭，灭菌器灭菌效果不合格。芽孢悬液和芽孢菌片的验证方法均是如此。目前实验室还常用商品化的生物指示管，其原理与芽孢悬液和芽胞菌片相同，指示管中有嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢和培养液玻璃小管，将指示管放在灭菌容器内的各个点上，高压灭菌后，将管中盛培养液的玻璃管挤碎，培养液从内部的小管中被放出，放入56℃培养箱中培养，同时做阳性对照。若是灭菌器灭菌效果不合格，指示管内的芽孢复活后生长会改变肉汤的颜色是肉汤变为黄色；若是灭菌器灭菌效果良好则管内芽孢被灭活不再生长，肉汤仍旧是原来的紫色。对于灭菌器的效果验证，目前并没有相关标准严格的要求验证的频次，但是实验室应当自行制定验证频次规定，并严格按照要求进行。从操作性和验证结论两个方面出发，小编推荐使用指示胶带和生物指示管，因为这两种方法操作简单，可以对灭菌效果进行全面的验证。希望以上内容对您有所帮助！

1．目的：建立紫外灭菌器的标准操作规程，保证正确操作，为生产提供合格的纯化水。2. 范围：适用于紫外灭菌器的日常操作。3. 职责：工程部、纯化水处理系统操作人员，对本标准的实施负责。4. 程序4.1. 概述：在纯化水系统的终端，设计与安装的ZX-2型紫外灭菌器，系采用特制高强度无臭氧紫外线杀菌灯管。筒体用优质不锈钢制成。被处理的纯化水在流过筒体时受到波长为253.7nm紫外线足够量的照射，其有较强的灭菌效果。4.2. 操作与注意事项：4.2.1. ZX-2型紫外灭菌器为卧式，处理流量 2-3m3/小时，杀菌功率60W的装置。电源要求220V，50HZ。使用时应核对并满足之。要注意避免强烈震动和冲击。4.2.2. 灯管寿命及更换准则：紫外灯的杀菌能力随使用时间增加而减退。灯管的寿命定义是：以点燃100h的输出功率为额定输出功率，把紫外灯点到70%额定功率的点灯时间定为平均寿命，紫外灯使用超过平均寿命时，就达不到予期效果，则必须更换。本设备选用的紫外灯平均寿命为2000h。4.2.3. 可根据水质监测，菌检情况来判定紫外灯管的运行情况，并决定是否提前更换。

除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。 1．试验材料(1) 嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillus stearothermophilus) ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-l05 CFU/片。(2) 121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。(3) 溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。(4) 0-150℃留点温度计。2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层，则需放10处。留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存1℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次，共做六次。5个点六次试验表明温度均在121℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明高压蒸气灭菌效果合格。高压灭菌器属于强检仪器，但强检只是对仪器物理参数的考核。所以做过强检的灭菌器还必须进行灭菌效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提灭菌器，往往仪器指针达到所需的温度，但灭菌物品的实际温度却未达到要求。导致灭菌物品不彻底，影响实验结果。培养基灭菌不彻底，影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气灭菌器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。

做实验用的盐水和BPW量太大了，用三角瓶装不多少又占空间，请问一下大家有没有圆柱形的瓶子或者耐高温高压的袋子，可以大批量的灭菌又节省高压锅空间的？大神们有别的什么解决办法吗？

高压蒸汽灭菌是生物实验常用的灭菌方法，根据容量大小不同可分为手提式、立式、卧式三种。高压灭菌锅广泛应用于各大专院校、医疗卫生、食品化工、生物科研等单位对器械、敷料、器皿、药液、培养基等物品的灭菌处理。可千万别不重视它，一不小心，可能酿成大祸！使用中要注意什么？1．灭菌温度应是一个温度范围，而不是一个固定值通常，高压蒸汽灭菌温度是一个固定值，如，试管斜面培养基和摇瓶液体培养基的灭菌要求为：121℃，20min，但在121℃只是灭菌温度的下限，实际的灭菌温度在121℃～124℃（或123℃）之间波动。如果是自动控温型灭菌锅，设定好灭菌温度下限为121℃后，当温度升到124℃（或123℃）时，自动断电停止加热，当温度降到121℃时，自动开始加热；如果是手动控温型灭菌锅，当温度升到124℃时，手动切断电源停止加热，当温度降到121℃时，手动接通电源开始加热。2．不同类型高压蒸汽灭菌锅对排放冷空气的不同要求1）非自动控温型灭菌锅多为小型灭菌锅对于这类灭菌锅必须排净冷空气，如果不排净冷空气，冷空气热膨胀后对压力锅的工作压力有所贡献，此时压力和温度不能一一对应，显示的温度比锅内的实际工作温度高，灭菌锅的工作温度不能达到设定的杀菌温度，会影响灭菌效果。2）自动控温型灭菌锅自动控温型灭菌锅通过热敏电极监测锅内温度变化，显示屏上显示的温度是锅内真实的工作温度，在冷空气没有排净的情况下，也能够保证灭菌的温度要求。由于饱和水蒸汽的灭菌效果最好，所以在使用自动控温型灭菌锅时，也应该排放冷空气，提高灭菌效果，锅下通常设有排水排气阀，灭菌时可将排水阀向左（向右为排水）旋转少许，让少量蒸汽排出，也有的灭菌设备上设有可调排气阀，灭菌时，始终保持排气阀处于微开状态，可起到排出冷空气的作用。初次使用的安全检查很有必要非自动控温型灭菌锅：①手动打开安全阀，看安全阀是否正常；②加热升温过程中，看压力表指针的上升状况是否有受阻情况发生，没有受阻，可正常使用。自动控温型灭菌锅的简易安全检查：①手动打开安全阀，看安全阀是否正常；②加水时，观察水位指示灯是否正常显示水位状况；③在排除冷空气的前提下， 观察显示屏上的温度和压力表指示温度的差，通常情况下，压力表上的温度略高于显示屏上的温度，此压力差如果不超过3℃，可正常使用。影响灭菌效果的因素（1）水：水温过高可能会导致预定的真空水平改变，水温应尽量低。灭菌锅使用的水应符合应用水质量，并且温度不超过15℃。水的硬度值在0.7～2.0mmoL /L之间。超出该范围的硬度值可能会引起水垢和腐蚀等问题。从而缩短灭菌锅的使用寿命，使用的水需经过过滤和处理，应保持锅体清洁。（2）蒸汽的干燥程度灭菌锅应使用干燥程度不小于0.9的饱和蒸汽，即蒸汽含水量不超过10%，金属负载状态下，干燥程度不小于0.95，以保持温度与压力符合线性关系。（3）灭菌时间灭菌时间是指灭菌过程中灭菌室内达到规定温度后灭菌所需时间。操作中，应注意观察蒸汽的进汽速度和压力, 一般保持压力和温度同步上升。液态物质灭菌要注意些神马？实际工作中常需要对液体灭菌，高压灭菌锅说明书中，表明能够对瓶状的液体进行灭菌处理，但在实验中却遇到了意外的情况：用敞口的玻璃瓶灭菌，其结果是玻璃瓶中的液体减少了1/3；用塑料薄膜紧紧封住瓶口，封口塑料薄膜中间破裂，玻璃瓶中的液体仍减少1/3。在对液态物质进行灭菌时，当灭菌结束注意卸压不能过快，尽量将排气阀关小，保持自然降压，保持系统原有的平衡，以防产生液体减少或喷溅现象。小结为保证高压灭菌锅安全有效的工作，应加强灭菌锅的日常维护与保养，定期检测各类控制阀门，保证其正常的工作状态。

[font=宋体]我可以根据通用的实验室设备使用经验和知识，提供一些关于使用蒸汽灭菌器的心得体会。以下是一些可能的心得分享：[/font] [font=宋体][font=Calibri]1. [/font][/font][font=宋体]操作熟悉度：熟悉蒸汽灭菌器的操作界面和功能是至关重要的。这包括了解如何设置温度、压力和时间，以及如何监控灭菌过程。[/font] [font=宋体][font=Calibri]2. [/font][/font][font=宋体]预处理：在装载灭菌器之前，确保所有物品都经过适当的预处理，比如清洗和干燥，以避免污染和损坏灭菌效果。[/font] [font=宋体][font=Calibri]3. [/font][/font][font=宋体]装载技巧：装载物品时，要确保它们之间有足够的空间，以便蒸汽可以均匀地渗透到每个物品。这有助于提高灭菌效率。[/font] [font=宋体][font=Calibri]4. [/font][/font][font=宋体]参数设置：根据灭菌物品的不同，可能需要调整灭菌参数。例如，液体、固体和包装材料可能需要不同的温度和时间。[/font] [font=宋体][font=Calibri]5. [/font][/font][font=宋体]安全第一：在整个灭菌过程中，始终将安全放在首位。这包括在操作前检查设备，确保所有安全措施都已到位，并在操作后正确地关闭设备。[/font] [font=宋体][font=Calibri]6. [/font][/font][font=宋体]灭菌验证：使用生物指示剂或化学指示剂来验证灭菌效果，确保灭菌过程的有效性。[/font] [font=宋体][font=Calibri]7. [/font][/font][font=宋体]记录保持：记录每次灭菌的详细信息，包括日期、时间、参数和任何异常情况，这对于追踪和质量控制非常重要。[/font] [font=宋体][font=Calibri]8. [/font][/font][font=宋体]设备维护：定期对蒸汽灭菌器进行维护和清洁，以保持其性能和延长使用寿命。[/font] [font=宋体][font=Calibri]9. [/font][/font][font=宋体]问题解决：遇到问题时，不要急于操作，而是应该先查找原因，必要时联系技术支持。[/font] [font=宋体][font=Calibri]10. [/font][/font][font=宋体]持续学习：随着技术的发展和更新，持续学习新的操作技巧和最佳实践，以提高灭菌效率和安全性。[/font][font=宋体] [/font] [font=宋体][font=宋体]请注意，这些心得是基于一般性的理解，具体使用[/font][font=Calibri]Yamato[/font][font=宋体]立式压力蒸汽灭菌器[/font][font=Calibri]SQL[/font][font=宋体]系列产品时，应遵循制造商提供的详细操作指南和安全标准。如果你需要更具体的操作心得或遇到问题，建议咨询有经验的同事或直接联系设备制造商。[/font][/font] [img=,690,1095]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408171730523592_2779_6642979_3.jpg!w690x1095.jpg[/img] [font=Calibri] [/font]

想问下，国内哪家蒸汽灭菌锅有智能ARM嵌入式内核系统哈

灭菌时为什么会有115℃灭菌与121℃灭菌两种温度呢，灭菌时间也不一样，可不可以都是115℃灭菌，或者是121℃灭菌呢

污染是导致细胞培养失败的一个主要因素，因而，二氧化碳培养箱的制造商们设计了多种不同的装置去减少和防止污染的发生，其主要途径都是尽量减少微生物可以生长的区域和表面，并结合自动排除污染装置来有效防止污染的产生。例如，鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长，为确保培养箱免受污染并且保证仪器箱体内的生物清洁性，相继问世了多种消毒灭菌方式，如带有紫外消毒功能的CO2培养箱；还有的设计生产了HEPA过滤器能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3微米以上的颗粒；此外，还开发设计了能使箱内达到高温湿热的环境从而杀死污染微生物，达到消毒灭菌目的的培养箱。这些装置对于细胞培养来说是必不可少，但选择何种清洁装置呢？首先，我们考虑的当然是各种方式的灭菌能力，紫外消毒能力是与紫外灯距离目标的距离的二次方成反比，距离越远，消毒能力越差，所以紫外消毒方式有其局限性，难以达到彻底灭菌的要求；HEPA过滤器由于受到过滤膜孔径的影响，无法去除病毒和一些微小细菌，也有其局限性；相比较而言，高温消毒是目前比较有效消毒灭菌的方法，高温消毒又分为两类，一是传统的高温干热消毒，另一种是先进的高温湿热灭菌。接下来我们重点说一下高温干热和高温湿热两种方法的优劣。高温湿热由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，因此该法的灭菌效率比干热灭菌法高。其原因有三：①蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关，含水量愈大，发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分，所以较同一温度的干热空气中易于凝固。②湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热，加速提高湿度。因而湿热灭菌比干热所需温度低，如在同一温度下，则湿热灭菌所需时间比干热短。③湿热的穿透力比干热大，使其深部也能达到灭菌温度，故湿热比干热收效好一些。所以高温消毒并不是简单的看消毒温度，主要是看是否湿热消毒。另外，从使用角度看，湿热消毒一般控制在90°C就能达到很彻底的消毒效果，整个消毒过程中培养箱内的所有附件都不用取出，可以全部进行消毒；而干热消毒为了达到较好的效果，温度一般都在100°C以上，在这种温度下消毒培养箱内的传感器、HEPA过滤器等都要在消毒过程中取出，等消毒结束再装上，这样即麻烦，附件又不能同时消毒，而且增加二次污染的几率，再者要达到100°C以上的高温，培养箱的加热系统的电热丝必然要加粗，这会导致培养箱的温度控制难度增加，均一性变差。所以我们建议用户在选购二氧化碳培养箱时选择含高温湿热灭菌方式的培养箱。

在115度灭菌与121度灭菌时，温度会超过一部分，对灭菌有影响不？怎样才做做恒温呢，真的只能精确至115度或者121度吗，恒温的时候能不能上下浮动点？

[font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]实验室14种常用消毒、灭菌的方法汇总[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]1.热力消毒灭菌[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]2.干热消毒灭菌[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]干热是指相对湿度在20％以下的高热。干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]2.1燃烧法 ：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]2.2烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]2.3焚烧[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]4.电热培养箱[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]利用培养箱的热空气消毒灭菌。培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]5.微波消毒[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。若物品先经1％过氧乙酸或0.5％新洁尔灭湿化处理后，可起协同杀菌作用，照射2分钟，可使杀芽胞率由98.81％增加到99.98％－99.99％。 [/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤睾丸、眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱。使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼镜等。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]6.煮沸法[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]将水煮沸至100℃，保持5－10分钟可杀灭繁殖体，保持1－3小时可杀灭芽胞。在水中加入碳酸氢钠至1％－2％浓度时，沸点可达105℃，能增强杀菌作用，还可去污防锈。在高原地区气压低、沸点低的情况下，要延长消毒时间（海拔每增高300m，需延长消毒时间2分钟）。此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]煮沸前物品涮洗干净，打开轴节或盖子，将其全部浸入水中。大小相同的碗、盆等均不能重叠，以确保物品各面与水接触。锐利、细小、易损物品用纱布包裹，以免撞击或散落。玻璃、搪瓷类放入冷水或温水中煮；金属、橡胶类则待水沸后放入。消毒时间均从水沸后开始计时。若中途再加入物品，则重新计时，消毒后及时取出物品，保持其无菌状态。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]7.蒸汽灭菌法[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103－206kPa时，湿度可达121.3-132℃。高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，公众号“食品微生物检测”提醒，此法为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]潜热是指当lg100℃的水蒸汽变成lg100℃水时，释放出2255.2J的热量。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]蒸汽灭菌的关键问题是为热的传导提供良好条件，而其中最重要的是使冷空气从灭菌器中顺利排出。因为冷空气导热性差，阻碍蒸汽接触欲灭菌物品，并且还可减低蒸汽分压使之不能达到应有的温度。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]8.手提式高压蒸汽灭菌器[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽。锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应升高。该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]操作方法如下：在灭菌器中盛水3000ml；将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般在水沸后排气10－15分钟左右），关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa，温度达121.3℃,维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子。如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。后再关闭放气开关，待夹层压力表达到灭菌所需压力时（约10分钟后），将蒸汽控制阀移至“消毒”位置，使蒸汽进入柜室 ，柜室内的冷空气及冷凝水可由柜室阻气器排出，待柜室的压力升到103－137kPa，温度达121.3～126.2℃时，转动压力调节阀，使压力与温度保持恒定。维持30分钟后，将蒸汽控制阀移至“排气”位置，排气毕，将蒸汽控制阀移至“干燥”位置；物品干燥后，将蒸气控制阀移至“关闭”位置，待压力指针到“0”位置和热空气排尽后，才能打开柜门，取出物品；关紧进气阀。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]9卧式高压蒸汽灭菌器[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品。操作人员须经专业培训，合格后方能上岗。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]10.真空式高压蒸汽灭菌器[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至2.6kPa（空气排除约98％），所以，预真空高压蒸汽灭菌器除有下排气式所具备的灭菌系统、蒸汽输送系统、控制系统、安全系统和仪表监测指示系统外，增加抽负压系统和空气过滤系统。机器运转由电脑控制。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]11.紫外线消毒[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]在室温20℃～25℃时，220V 30W紫外灯下方垂直位置1.0m处的253.7nm紫外线辐射强度应70W/cm2，低于此值时应更换，公众号“食品微生物检测”提醒，适当数量的紫外灯，确保平均每立方米应不少于1.5W。紫外线消毒时，无菌室内应保持清洁干燥。在无人条件下，可采取紫外线消毒，作用时间应30min，室内湿度20%或40%、相对湿度大于60%时，应适当延长照射时间。用紫外线消毒物品表面时，应使照射表面受到紫外线的直接照射，且应达到足够的照射剂量。人员在关闭紫外灯至少30min后方可入内作业。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]12.臭消毒[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]封闭无菌室内，无人条件下，采用20mg/m3浓度的臭氧，作用时间应30min。消毒后室内臭氧浓度0.2mg/m3时方可入内作业。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]13.甲醛消毒[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]按照甲醛（40%）10毫升／立方米、高锰酸钾5克／立方米计算用量。不同情况下，用量有所不同，但比例为2：1。盛药容器要大、耐热、耐腐蚀：一般用陶瓷或玻璃容器，因为高锰酸钾和甲醛都具有腐蚀性，且混合后反应剧烈，释放热量。房间要密闭：这样熏蒸效果才会好。容器应尽量靠近门，以便操作人员迅速撤离；先将温水倒入容器内，后加入高锰酸钾，搅拌均匀；再加入甲醛；加入甲醛后人立即离开，密闭房间。注意顺序：是将甲醛倒入高锰酸钾溶液内。消毒时间一般为20-30分钟。消毒后要打开门窗通风换气。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液，也就是福尔马林，一般包装上写的是37%。公众号“食品微生物检测”提醒，甲醛对人体危害太大了，一般不推荐这种方法。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]可以考虑用40%乳酸熏蒸，效果很不错的。[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]14.乳酸重蒸法消毒[/color][/font][font=Tahoma, Helvetica, SimSun, sans-serif][color=#444444]室内温度22 ℃，湿度75%～90%，按0.6 g/m3乳酸量共用9.6 g进行室内熏蒸，使蒸汽弥散全室，密闭门窗1 h。[/color][/font]

微生物房间的，污染的有菌灭菌和无菌灭菌还需要分房间吗？

下表是对比汽化过氧化氢与干雾过氧化氢灭菌的优劣，供大家学习参考项目德国PEA汽化过氧化氢灭菌干雾过氧化氢灭菌过氧化氢形态以分子形态存在，直径在10-10m数量级，均匀分布于密闭空间的每个角落以小液滴存在，直径7.5微米，即10-6m，需要压缩空气给压力储罐施加压力，不能进行布朗运动（需要10-9m），扩散不均匀所用试剂35%体积比过氧化氢溶液，100m3只需1L，成本低4.5％的过氧乙酸和22％过氧化氢，其余为赋形剂和稳定剂。在使用时，需人工添加约9倍的水，稀释为可使用的浓度为0.5％的过氧乙酸和2.5％的过氧化氢溶液。对湿度要求可自动除湿不能除湿，要求湿度在50%以下灭菌效果6-log4-log或5-log,特别是房间高处，很容易达不到灭菌效果环保和安全过氧化氢达到灭菌的效果相比其他强氧化性的消毒灭菌剂腐蚀性甚微，甚至可以反复作用于设备带电运行的房间当中，其对金属、树脂地板、橡胶、电子设备的兼容性研究已经进行了多年，可出具完整的兼容性报告。单纯2.5％的过氧化氢溶液的消毒效果甚微，实际起作用的仍是过氧乙酸。消毒剂会迅速对人体造成损害，不得吸入。过氧乙酸对材料和设备有很强的侵蚀和影响，即使很低浓度也会造成很强烈的破环，会使环氧地坪气泡。试剂残留过氧化氢消耗量低、分解需时短，灭菌完成后，自动分解剩余的H2O2，浓度1PPM过氧乙酸会在接触面产生残留物—乙酸，这会造成污染，需人工清除残留物。GMP应用过程控制，温湿度、过氧化氢浓度、消耗量、压力等完整的参数监控，标准配置A4纸打印机可追朔操作记录，无需复印，微电脑储存并记录灭菌条件与过程，符合GMP管理要求，完整的4Q及生物挑战报告没有过程参数控制。没有过程参数记录。由于没有过程控制和监视，该系统是无法验证的。重复性差，靠经验及手工计算试剂用量，不符合GMP操作规范

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=35089]制药行业臭氧灭菌系统技术手册[/url]“一个东西不能少”，有了好东西一定要与大家分享！！！

日常维护　　1.1灭菌器的外表及灭菌室内要保持清洁干燥。　　1.2探头、水位计要定期清洗。　　1.3门框、胶圈无损坏，进汽口不可堵塞。最好每天使用完后在胶条上涂滑石粉。以延长胶条寿命。　　1.4门的联锁装置要灵活可靠，开启自如。　 1.5疏水阀每月清洗一次，以利于排冷气，保持温度。　　2、检修周期　　使用一年之后，每年要请有资格的检测部门做一次全面系统的检查。包括：简体、门、管路系统、电器系 统等。安全阀、温度表、压力表要定期校验，以确保设备的安全和正常使用

产品简介： 快速灭菌器YN-A型利用强光辐射及远红外的综合作用达到灭菌,适用于手术室、口腔科、眼科对金属器械的快速灭菌以及供应室对油脂、油纱的灭菌。特点： 快速、方便、安全、容积大,尤其适用于骨科器械的快速灭菌。 快速：■全过程5—10分钟左右 ，设有散热装置，仅需4—5分钟即可再次使用。 方便：■全自动控制：设置好参数，启动“工作”键，自动完成全过程。 ■出现故障时，发出警报声，数码管闪烁显示“Err”，提醒操作者注意。 ■结束有有提示音，无需专人监管。 安全：■灭菌源为对人体无害的光源。 ■超高温保护系统，超过310℃，自动断电停止工作。 [~54895~]

灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。 灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性，从而达到灭菌的作用，实验室中最常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160～170℃），时间长 （1～2h）。但干热灭菌温度不能超过 180℃。否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。 高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低，二是湿热的穿透力比干热大，三是湿热的蒸气有潜热存在。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力培养基

大家习惯讲高压灭菌器还是高压灭菌锅？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1010.gif

手提式灭菌锅 ，当温度达到设定好的温度，不会保持在设定的温度 灭菌时间在走的同时 温度也在下降 这种灭菌会成功吗