黄曲霉毒素柱

本文使用Essentia黄曲霉毒素分析系统，参考国标GB 23200.112-2018《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》柱后碘衍生法，对辣椒中黄曲霉毒素进行方法建立和测定。以外标法定量，4种黄曲霉毒素在各自浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数r均大于0.999，准确度在93.1~109.9%之间。对标准溶液连续进样5次，重复性结果（RSD%表示）显示，4种黄曲霉毒素的保留时间RSD%在0.17~0.22%之间，峰面积的RSD%在3.31~4.64%之间，加标回收率在72.3 ~84.3%之间。上述结果表明，该方法准确度高，重复性好，可为辣椒中黄曲霉毒素的测定提供参考。

黄曲霉毒素经常出现在花生，花生制品，面籽制品，谷物和干辣椒等中，然而霉菌的生长并不一定意味着毒素的出现，因为黄曲霉毒素的产生往往需要一定的生长环境，例如湿度﹑温度和通风等。黄曲霉毒素中的B类霉素要在蓝色荧光下进行检测，而G类霉素要在绿色荧光下进行检测。数字下标显示了相对的色谱流动性。除了毒素经常在蔬菜中被发现（B1,B2,G1和G2），黄曲霉毒素M（牛奶中）也经常在吃了有毒饲料的奶牛的牛奶中被发现。M的高毒性代谢物就是B的4羟化物。 这里所提供的柱后方法最重要的特征就在于可以一次性地在同一荧光发射波长下对所有四种黄曲霉毒素进行检测。在此方法中我们推荐您使用带有1.4mL反应器的Pickering PCX5200。

为了确保玉米的安全和品质，黄曲霉毒素检测仪被广泛应用于检测玉米中的黄曲霉毒素含量。

收获后的花生在流通和储藏过程中，容易受到霉菌的污染而发生霉变。其中，黄曲霉毒素在霉变花生中常被检出。花生受到黄曲霉毒素B1（AFB1）污染后不仅会降低花生的营养和商业价值，更重要的是影响花生及其制品的可食性和安全性。免疫亲和法具有方法准确、回收率高、精密度好等优点。逗点生物结合自身产品优势，建立了免疫亲和-高效液相色谱串联质谱法测定花生中AFB1含量的方法，试样经提取后，经免疫亲和柱净化，经质谱分析，同位素内标法定量。经验证，加标回收率范围90-110%，RSD值小于5%，满足测试要求。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

本应用介绍了 “柱后衍生法对食品中黄曲霉毒素分析”的实验，包括实验条件、柱后衍生条件以及黄曲霉毒素分析实验结果。黄曲霉毒素M的代谢产物是4-羟基化Bs,具有较高的毒性。

污染食品的真菌毒素 (霉菌毒素) 中，虽有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇 / 雪腐镰刀菌烯醇、棒曲霉毒素等多种，但黄曲霉毒素为肝脏毒素，被称为最强的天然致癌物质。自然界中可产生黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 等，其中 B1 的致癌性强。现已知黄曲霉毒素 B1 在生物体内经代谢可部分转化为黄曲霉毒素 M1。因此，牛食用被黄曲霉毒素 B1 污染的饲料后，其乳汁中可能含有黄曲霉毒素 M1。 在美国和中国，已将乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定方法确立为国家标准。另一方面，日本也有将其列入官方分析方法的动向，日本的霉菌毒素测定方法评估委员会正在推动相关课题的研讨。 此次，我们参考中华人民共和国国家标准《GB 5413.37-2010 乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定方法》的第二法 HPLC-荧光检测法，进行了黄曲霉毒素M1的测定。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

本文按照2020年版《中国药典》四部2351真菌毒素测定法中黄曲霉毒素测定法（第一法），采用岛津Essentia黄曲霉毒素分析系统对莲子中黄曲霉毒素进行方法建立和测定。以外标法定量，4种黄曲霉毒素在各自浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数r均大于0.999，准确度在95.5~102.4%之间。对加标样品溶液连续进样6次，重复性结果（RSD%表示）显示，4种黄曲霉毒素的保留时间RSD%在0.06~0.08%之间，峰面积的RSD%在0.55~1.01%之间，加标回收率在78.7 ~95.0%之间。上述结果表明，该方法准确度高，重复性好，可为莲子中黄曲霉毒素的测定提供参考。

黄曲霉毒素作为一种霉菌毒素，被公认为强致肝癌的物质，其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的致癌性最强。长期食用含有低水平黄曲霉毒素食物的人肝脏将受到较大损害。最近，有些第三世界的国家报道了许多会由黄曲霉毒素引起急性中毒的新证据，其综合病症的显著特征为呕吐、腹痛、肺水肿、惊厥、痉挛、昏迷，并且由大脑水肿引起死亡和肝脏、肾形矿脉和心脏的脂肪过多。因此，国家相关部门对食品中的黄曲霉毒素含量进行了严格的规定。

本文参考《GB5009.24-2016食品中黄曲霉毒素M族的测定》第二法，采用免疫亲和柱净化，高效液相色谱检测，建立了奶粉中黄曲霉毒素M1高灵敏度的前处理和分析方法，得到黄曲霉毒素M1的加标回收率在88%-95%之间，RSD值小于5%。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。 黄曲霉毒素B1存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热，280℃才可裂解，故一般烹调加工温度下难以破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。 本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的粮谷中黄曲霉毒素B族检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B族的净化，并用液相荧光检测器进行检测，黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B1存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热，280℃才可裂解，故一般烹调加工温度下难以破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的粮谷中黄曲霉毒素B族检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B族的净化，并用液相荧光检测器进行检测，黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

紫外光激发下，黄曲霉毒素B1/B2会被激发出蓝色荧光，黄曲霉毒素G1/G2则会发出绿色荧光。利用这种荧光特性，可以准确定量分析食品中的黄曲霉毒素含量。日立荧光具有的高灵敏度和超高扫描速度，微小含量的黄曲霉毒素也可以快速准确分析。

黄曲霉毒素M族在0.2-6.4 μ g/L的浓度范围内线性关系良好，R2为0.9997，重现性良好。对牛奶、酸奶、米粉、奶油和奶酪等样品进行测定，均未检出M族黄曲霉毒素。对牛奶和酸奶样品进行加标回收率实验，在0.2μ g/kg的添加浓度下，样品中黄曲霉毒素M族的加标回收率在 99.37%-101.36%。对奶粉、奶油和奶酪样品进行加标回收率实验，在0.8μ g/kg的添加浓度下，样品中黄曲霉毒素M族的加标回收率在94.02%-103.29%。

试样中的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2,用乙腈-水溶液或甲醇-水溶液的混合溶液提取,提取液经免疫亲和柱净化和富集,净化液浓缩、定容和过滤后经液相色谱分离,柱后衍生,经荧光检测器检测,外标法定量。

黄曲霉毒素检测仪检测乳制品中黄曲霉毒素是否超标的操作步骤

黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用高效液相色谱法测定药材、饮片及制剂等基质中的黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，以陈皮药材中的检测为例，采用了柱后衍生法测定，灵敏度高，实验人员不需要直接接触更多有害的物质，更加绿色环保安全。

黄曲霉毒素检测专业解决方案

本文使用岛津Essentia黄曲霉毒素分析系统建立一种高效、快捷的黄曲霉毒素测定方法。参照《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》柱后碘衍生法，对样本进行前处理并上机测定。结果表明：AFT G2和AFT B2在0.03~12 ng/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数在0.999以上，AFT G1和AFT B1在0.1~ 40 ng/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数在0.999以上；0.5 ng/mL（以AFT B1浓度计）标准品溶液连续6针进样，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.026~ 0.043 %和0.54~0.92 %；玉米粉不同浓度的加标回收率结果在71.80~114.70%之间；奶粉不同浓度的加标回收率结果在81.33~92.63 %。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素M1柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素G1柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素B1 柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素G2柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

本方法利用双三元液相色谱系统左右两个泵的附注作用，实现了黄曲霉毒素柱后碘衍生—荧光检测。其中左泵做衍生泵，右泵做分析泵，柱温箱提供70 ℃的衍生反应温度，在一套系统上即可实现柱后衍生，大大节省了试验成本，方法易操作，重现性高，回收率好。 本实验完全采用国标方法GB/T 18979-2003的实验条件，柱后碘衍生实现了芝麻中黄曲霉毒素的测定，水样2.5 mL进样，检出限可达0.013-0.075 μ g/Kg，灵敏度高。本方法同样适用于国标方法规定的其他食品如玉米、花生及其制品、大米、小麦、植物油脂、酱油、食醋等食品中黄曲霉毒素的测定。

Pribofast黄曲霉毒素总量免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的毒素，从而对毒素样品起到非常针对性的纯化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系统可以有效的测定黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2浓度，提高检测的准确性和灵敏度。 免疫亲和柱/KRC衍生法特点：特异性很强使得样品净化效果极佳；使用免疫亲和柱操作架可以使样品净化快速，提高检测效率高；HPLC＋FLD+KRC柱后衍生化，有效提高检测灵敏度，实现较低的检测限(黄曲霉毒素B1 0.05ppb)；衍生化操作方便，光化学衍生化无需使用衍生试剂（通常电化学柱后衍生均需要使用衍生试剂，分析成本高，操作麻烦，仪器故障率较高）；回收率高，达到90％以上。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）产生的次生代谢产物，是目前粮油中毒性最大、波及面最广的霉菌毒素之一。B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物，与致癌性有关。黄曲霉毒素的主要分子型式含B1、B2、G1、G2、M1、M2等。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）产生的次生代谢产物，是目前粮油中毒性最大、波及面最广的霉菌毒素之一。B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物，与致癌性有关。黄曲霉毒素的主要分子型式含B1、B2、G1、G2、M1、M2等。