液相色谱经验

“液相色谱之家”是仪器信息网官方创建的微群，聚集了来自各地的实验员 ，化验员以及具有丰富经验的色谱维修员，在群中欢聚一堂畅所欲言，探讨技术总结经验，呈现出了勃勃生机的新局面，在群友的共同努力下，不同风格的作品不断涌现，为了使其服务于众而不失流传，现特汇总呈现于论坛。=======================================================================~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 帖子汇总如下：1：【原创】【液相色谱之家】1260压力异常的解决 来自群友：六卖神剑 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/61127772：【原创】【液相色谱之家】晒晒形形色色的自动进样器 来自群友：众群友 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/61110823：【讨论】【液相色谱之家】安捷伦1260 入口单向阀不出液 来自群友：液相-demo 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/61147264：【原创】【液相色谱之家】waters2996 色谱管路连接的困惑 来自群友：质量检测-曾 链接： http://bbs.instrument.com.cn/topic/6115674_15：【原创】【液相色谱之家】色谱仪故障 工作站异常 —— 01 来自群友：陌生人 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/6115927_16：【原创】【液相色谱之家】微聊ABC，交流又学习 来自群友：微聊ABC 链接： http://bbs.instrument.com.cn/topic/61160747：【求助】【液相色谱之家】 液质联用API3200进样底座转不动怎么办 来自群友：食品检测cherish 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/61172568：【求助】【液相色谱之家】这样的图谱如何定性积分 来自群友：食品检测—小Z 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/6117391_19：【原创】【液相色谱之家】安捷伦1200马达驱动出异常 来自群友：农药-NPS-小路 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/611838810：【讨论】【液相色谱之家】肉苁蓉含量检测梯度不好做 来自群友：吉林-中药检测-丰丰 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612269011：【讨论】【液相色谱之家】甲醇和水混溶总是出现很高的尖峰 来自群友：武汉-药物分析 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612268412：【讨论】【液相色谱之家】工作站离线分析中断 来自群友：食品-小书童 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612267013：【讨论】【液相色谱之家】 挨在一起的两个峰难道是柱子不适应 来自群友：生物工程检测-洋洋 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612266514：【讨论】【液相色谱之家】奇葩的基线噪声让你想不通 来自群友：江阴-石化-板寸 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612265015：【原创】【液相色谱之家】晒仪器图片 猜仪器名称——01 来自群友：江阴-石化-板寸 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612382416：【原创】【液相色谱之家】晒仪器图片 猜仪器名称——02 来自群友：陌生人 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612382617：【原创】【液相色谱之家】色谱柱的接头如何连接 来自群友：质量检测-曾 链接： http://bbs.instrument.com.cn/topic/612502118：【原创】【液相色谱之家】一则压力曲线引起的讨论 来自群友：食品检测欧小欧 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612501919：【讨论】【液相色谱之家】仪器故障 工作站异常——02 来自群友：陌生人 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612594420：【原创】【液相色谱之家】 晒仪器图片 猜仪器名称——03 来自群友：陌生人 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/612753121：【原创】【液相色谱之家】 晒仪器图片 猜仪器名称——04 来自群友：@LC+职卫，食品+色谱+小V @白酒检测-润飞 @医药液相液质-fiyinghplc 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613059322：【讨论】【液相色谱之家】己烯雌酚的检测为何要在三氯甲烷中侵泡5小时 来自微友：质量检测-曾 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613062223：【讨论】【液相色谱之家】同样的条件不同的仪器出现了不同的图谱 来自微友：吉林-石化-板寸 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613064624：【讨论】【液相色谱之家】拖尾因子不在范围内咋办 来自微友：食品-小书童 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613066025：【讨论】【液相色谱之家】压力突然下降什么原因 来自微友：安捷伦液相-涛 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613069626：【讨论】【液相色谱之家】你们的仪器数据完整性都恁上了吗 来自微友：药品检测-蕾 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613074027：【讨论】【液相色谱之家】心塞的12针测试 来自微友：方法开发-小海 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613076728：【讨论】【液相色谱之家】方法失灵 运行不停 来自微友：@广东-第三方-陈 @色谱维修-摩羯座 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613182329：【讨论】【液相色谱之家】岛津A B两泵压力大小不同 来自微友：北京，药物分析 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613179530：【讨论】[液相色谱之家】流量不够锁定排液阀故障 来自微友：药品检测~蕾 链接：http://bbs.instrument.com.cn/topic/613177731：【讨论】【液相色谱之家】仪器故障 工

粪便提取类固醇激素，想用液相色谱测浓度，有大神做过吗？求经验。

安捷伦1200压力经验值：当用某种溶剂冲洗高效液相色谱仪的色谱柱（4.6*250mm）时及对应压力值，根据此压力值可判断色谱仪的通道是否被堵塞。 溶剂种类 比率（%） 压力值范围（bar） 甲醇 100% 82~85 乙腈 100% 33~35

[font=宋体][font=宋体]超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]是在传统高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的基础上升级改进，使之获得更高的系统耐受压力。这样就可以适配更小填料粒径的色谱柱，因为越小粒径的色谱柱，柱效越高，反压也越高。常规的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统无法承受亚[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]微米的色谱柱带来的高反压。超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]搭配小粒径色谱柱，能够提供更高的分辨率、更快的分离速度和更高的灵敏度，是搭载质谱检测器的理想分离系统。目前超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]国产与进口品牌种类繁多，如何选择合适的设备，这里谈谈我的经验。[/font][/font][font=宋体]1、[/font][font=宋体]输液系统[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]输液泵[/font][font=宋体]目前市面上主流的是凸轮往复泵和直线电机泵两种。凸轮泵因为设计上的原因需要加装阻尼器来稳定压力脉冲，系统的延迟体积要大于电机泵。流量的准确度与精密度上电机泵也要更出色。但成本上电机泵会更高一些。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]泵组合[/font][font=宋体][font=宋体]分为二元泵系统和四元泵系统，二元泵是两组输液泵分别控制有机相与水相流路，混合比例靠控制[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]泵跟[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]泵的流量，混合点位于泵后，属于高压混合，混合效果更好，不足是只能同时使用四路溶剂中的两路。四元泵系统只有一组输液泵，通过控制比例阀的开合时间，控制溶剂混合比例，混合器位于泵前段，属于低压混合，混合精度上不如二元泵系统。但四元泵可以灵活使用四路流动相中的任意[/font][font=Calibri]1-4[/font][font=宋体]种，更适合方法开发。因为四元泵系统中，有机相和水相共用一组输液泵，泵内更容易析出结晶盐损害密封组件。所以在使用四元泵时，需要特备注意缓冲盐溶液与有机相的混合比例，避免结晶盐析出。[/font][/font][font=宋体]3）[/font][font=宋体]电动放空阀，手动是真的不方便。溶剂压缩补偿技术，这也是很重要的参数，但各厂家技术的优劣难以把握。各厂商一般都会提供流量准确度与紧密度参数，但测试条件各厂家都不一样。漏液传感器、真空脱气、柱塞清洗等功能基本都是标配了。[/font][font=宋体]2、[/font][font=宋体]自动进样器[/font][font=宋体]1）[/font][font=宋体]进样器[/font][font=宋体]主要关注的就是进样误差和进样重复性，这两个厂商基本都会提供，可比性还是很高的。虽然各厂家都会提供交叉污染的测试数据，但我们用户在选择时，更应该关注进样针时流路设计还是旁路设计。旁路设计的进样方式有个天然缺陷，就是无法清洗进样口，导致交叉污染会比流路设计大。而流路针也有缺陷，因为针跟针座会在运行样品时连接到流路中，针座密封就需要做到耐高压。但是在反复进样的过程中，针座密封圈不不断磨损而漏液。[/font][font=宋体]2）[/font][font=宋体]附加功能[/font][font=宋体][font=宋体]类似于瓶位检测、顶针堵针保护等附加功能可以很好避免误操作时带来的仪器损害。温控功能主要考虑组件的耐用程度，温控的准确度和稳定性在[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]℃以内都是可接受的。[/font][/font][font=宋体]3、[/font][font=宋体]柱温箱[/font][font=宋体]主要关注温控范围、准确度、稳定性，最关键的参数是温度的稳定性，这将直接影响分析测试时保留时间的稳定性与峰面积的重现性。流动相预加热功能可以保障进入色谱柱的流动相与色谱柱的温差尽可能小，提供更好的色谱峰重现性。温控组件目前市面上性能最好的是帕尔帖元件。[/font][font=宋体]近年来国产[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的发展越来越好，性能上并不比进口产品差。但是由于超高效设备主要配置质谱检测器，进口质谱厂商多有配套[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]设备，加上国产质谱发展水平受限，国产超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的市场占有率并不高。希望此次分享能为大家在今后的仪器选购中提供帮助，也祝愿国产仪器越来越好。[/font]

液相色谱柱如何再生，谁有实际的操作经验还有液相色谱柱柱头的不锈钢烧结滤网怎么拆掉啊？

液相色谱仪不接色谱柱，做的烷烃类，新手求方便的专家的联系方式求指导刚接手高效液相色谱仪，没接色谱柱那种，我不是学化学的，周围也没给个懂得人咨询。遇到问题时，即使是对有经验的专家们很简单的问题，我也经常不知道如何下手。

液相色谱的前处理需要免疫亲和柱或者净化柱听说***质量不错，过柱什么都挺好的！不知道大家有没有什么好的其他建议？？？？？

我们单位打算买一台液相色谱，但是对备件这块不是很熟悉，请多给予宝贵的经验。另外，新买的液相色谱还需要配什么？已知的有：超声波清洗器，溶剂过滤器、超纯水仪、稳压电源、色谱流动相（甲醇）。感谢

请问各位高效液相色谱流动相配制过程中甲醇是否可以用分析纯的代替。曾经比较过色谱醇和分析纯甲醇高效液相色谱图区别的最有发言权。如果经验丰富，请予以指导，甚为感谢！如果一般不行的解释是苍白的。谢谢各位！

新进的液相色谱仪（自动进样器、荧光检测器、二极管阵列检测器、柱温箱等）在验收时应该注意哪些方面呢？有经验的朋友欢迎过来一起讨论啊！！！

[color=#444444]反相高效液相色谱柱方法的设定有什么经验吗？为什么跑的峰基线有点高[/color][color=#444444]?[/color][color=#444444]谢谢大家了[/color]

据08年帖子[B]“[color=#9e9e00]你对液相的哪一部分最感兴趣[/color]（投票奖励）【[URL=http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20081117/1590648/]http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20081117/1590648/[/URL]】”[/B]获悉，共338人参与投票，其中对“液相色谱经验心得”投票总人数为222人，占总人数的65.68%，对“液相色谱的数据处理”投票总人数为40人，占总人数的11.83%，接下来分别是“液相仪的结构组成”、“液相图谱分析”、“液相的基础理论”及“色谱工作站的使用”，现通过投票结果对08部分和09年的帖子、资料进行整理，[B][color=#9e9e00]同时希望各位版主能够参与并共同整理。[/color][/B][color=#00008B][B][color=#DC143C]【版面推荐】液相色谱精华附件合集-仪器操作http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070326/782577/ [/color]目录：==================================1楼 本周热门讨论话题2楼 液相经验心得3楼 液相色谱工作站及数据处理4楼 液相仪器的结构、维修及购买5楼 液相图谱分析6楼 液相仪器展览7楼 液相色谱基础知识8楼 各仪器使用资料9楼 液相色谱应用篇10楼 液相色谱版征集活动11楼 液相色谱版比赛作品==================================[/B][/color]

如题，招聘液相色谱专家，名额有限，大家踊跃报名哦要求：1、有一定液相色谱经验，积极热心。2、有乐于助人的心态，上网时间基本稳定3、热爱液相色谱版，积极参与液相色谱讨论。好处：1、基本上是自愿，没有太多利益2、可以下载资料积分减半。3、可以享受仪器信息网对专家的各项优惠条件。总体上，是基于自愿，出于对技术的热心讨论，有一定的经验。

由于液相色谱版面问题较多，涉及分析面也较广。因此针对目前系统设定的“专家”职位。特用自己的积分征集有一定空余时间，具有一定高效液相色谱使用经验、在液相色谱版活跃的版友，作为专家。可以自荐或推荐。也可以在这里跟帖，由我推荐。一经审核通过，我就发积分。为期2个月。推荐提前结束！

色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45µ m的过滤膜过滤除去微粒杂质。 2、流动相的配制： 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。 d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。 e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

做液相的同事临时有事，领导安排我来暂时接管液相色谱的检测任务虽说液相色谱偶尔做过，但是并没有系统的学习和了解液相色谱的整个检验流程，今天是第一天接收显得格外手忙脚乱，之前我主要做的是气相色谱和液质，检测项目相对比较少，也能够游刃有余的完成日常的检测任务。这一次临危受命，也显得有些仓促，原本的任务还未弄利索，又来了这么繁琐的任务。作为质检部门，检测的样品数量比较大，食品添加剂的种类特别多，刚一入手真是有些乱了阵脚，不知道各位版友是否有什么成功的经验可以借鉴呀？希望大家给点建议吧，谢谢！

反相高效液相色谱柱方法的设定有什么经验吗？为什么跑的峰基线有点高?谢谢大家了

[size=3][b]儿茶酚胺测定[/b][/size]最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺，不知各位有否这方面的经验，能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件，谢谢！

有用液相色谱做过硝酸盐的吗求经验谢谢

使用液相色谱时，经常会遇到压力异常的情况，并对分析结果和仪器造成不好的影响。[color=#DC143C][size=4]那么，本期我们就来讨论下液相色谱的压力异常。范围如下：1、压力异常的表现（仪器情况和分析情况），造成什么后果； 2、压力异常的原因； 3、针对上面的情况该如何解决（排除）。说自己的经验可，搜寻相关资料亦可，鼓励自己总结和举实例。[/size][/color]

[color=#333333]请教大家一个问题，本人实验室用的福立2200液相色谱，国产的当然，这两天色谱使用时压力逐渐降低，基线平稳，后经验证原来接上色谱柱使用时流动相流速比设定值越来越小，不接色谱柱流速正常，泵头接头和柱子接头无漏液现象，单向阀也清洗，系统也充分排过气，但使用混合一个小时左右，压力就开始下降，求各位高手指教[/color][img=,30,30]https://gsp0.baidu.com/5aAHeD3nKhI2p27j8IqW0jdnxx1xbK/tb/editor/images/client/image_emoticon1.png[/img]

最近经常浏览仪器信息网，发现很多人提出液相色谱购买品牌推荐问题，很少有详细的回答，为了仪器信息网尽一份绵薄之力，把本人积累7年的液相色谱使用经验，分享一下，纯粹是个人观点，仅供参考，主要涉及的液相品牌有：Agilent、 Waters、Dionex、Shimadzu。1、AgilentAgilent液相色谱仪算是比较早进入中国市场的一款，从工作之初到目前，接触到最老的型号是1100（当时还挂着HP的牌子，那时候Agilent还没有收购HP），最新的是1260。1100，标配的，性能非常好，Chemstation操作系统，原始的双泵四通道，能满足所以HPLC分析需要，泵的功能强大，流动相、样品前处理如果按照标准规范原则去制备，几乎不会出现泵方面的故障。1200，标配的，性能好，耐压400bar，操作界面同1100，非常简洁，工作站操作简单，易于入手掌握。1260（可以当UPLC使用的），耐压600bar，说是UPLC，其实是1290的一个过渡，可以作UPLC使用，前提是选用粒径小（一般都小于3μm）的色谱柱，能达到快速分离的效果，为研发节省了很多时间。同时，也可以作为一般HPLC使用。优点点之处就是可以把当UPLC使用时快速开发的分析方法，通过agilent开发的一个转换软件转换成HPLC常规方法。工作站方面，操作界面卡通了一些，其他数据处理功能基本同1200和1100。值得一提的是，售后服务非常好，几乎是随叫随到，但上门维修服务费比较高，大约是980元/小时。 2、[font='Time

是针对纳升级、毛细管、窄径分离而设计的，目的在于获得最高效色谱分辨率、灵敏度及重现性。 直接纳升流速在常规纳升流纳升级液相色谱速分离技术的基础上又有了重大改进。用户将看到改进后的峰容量和峰形，每次分离后检测得到的组分数量增加。 纳升级液相色谱可高效分离各种多肽和蛋白质，与质谱联用后是蛋白组学研究的最佳工具，纳升液相色谱采用微流控制系统，可在20 nL/min 的流量水平下实现精确控制和梯度洗脱；微流控技术也极大地提高了质谱检测的灵敏度，可对更多的低丰度多肽进行分离和鉴定。 此外，纳升级液相色谱还可拓展应用至代谢靶分子、致病蛋白分子的鉴定，在纳升级稳定流量下质谱检测器可获得很好的灵敏度、分辨率和重现性。[color=#f10b00][size=6]说说你的认识、见解、或者使用经验吧？[/size][/color]

[u][size=12px] 刚踏入工作岗位，小白一枚，接触了液相色谱仪。在校期间学习了液相色谱仪的的工作原理和注意事项，实验课上进行了标准曲线制作，仅此而已。 工作后，通过实际检测项目的开展，和细心指导的单位老师的培养，对于液相色谱仪的了解更加深入了。通过工作多年的实践积累，正好有仪器信息网的本次线上活动，在工作之余，总结凝练了一些经验心得，在这里分享给大家，希望对大家的工作有一定的帮助：一、[u]液相色谱仪[/u]器发展简介 [u]液相色谱仪[/u]根据所要分析的化合物性质的不同，可以选择不同类型的检测器进行检测。同时因检验检测效率要求的不断提高，该类仪器已逐渐向超高效[u]液相色谱仪[/u]发展。 二、使用心得1理论联系实际： 使用[u]液相色谱仪[/u]器之前，要做好理论知识的学习和积累，如它的工作原理、仪器结构、关键部件、色谱柱、流动相等方面；之后如有相关检验检测项目，建议开展一两项，检测的样品量可以由少至多，通过实际操作实践，进一步理解理论知识；在此基础上，如有相关仪器公司、网络培训、单位内部培训等，建议再进行专业系统的知识培训，对自己以往掌握的知识进行查缺补漏，进一步丰富知识树。2遇到问题多思考，多与工程师交流： 在实践操作过程中，难免会出现各种状况，包括压力过高、压力过低、不进样、进样器堵塞等情况，遇到问题建议第一时间回忆仪器经历了什么，与本次出现的这种状况是否有关系，找到可能的问题所在，通过自己动手、查找资料（一些仪器公司有专门的维修维护操作模块，或者一些相关视频）、咨询工程师等，对怀疑的问题所在进行检查或维修等操作，使得仪器恢复正常。因每家仪器的具体结构，易出状况等各不相同，所以建议出现问题自己不能解决时，及时联系工程师，他们处理的状况比较多，经验也更为丰富，可以更好的进行指导。3要把[u]液相色谱仪[/u]看做是有生命的个体，待测成分在仪器中要以流动的状态进行思考： 尽管我们工作中所使用的仪器是没有生命的，但还是建议大家把它内部的相关工作想象为动态的过程，比如说进样的过程想象为一个生命体吃饭的过程，流动相载着样品经过色谱柱、检测器等，想象为生命体摄入的食物经过体内相关器官，当出现柱压过高情况，想象为脑梗等，这样对于一些故障等就更容易理解，也有助于我们快速的解决。[/size][/u][size=24px][font=微软雅黑][/font][/size]

[color=#156200][size=3]超高效液相色谱是大家谈论的热点，你认为是厂家故意炒作还是真的有其发展的空间和生存的价值？超高效液相色谱会取代高效液相色谱么？他们的关系如何？超高效液相色谱的发展前景如何？你使用过超高效液相色谱么？使用的情况如何？欢迎大家一起来PK~[/size][/color]============================================================2010中国科学仪器发展年会的下午让我们一起与业内专家和知名厂商一起解读此问题。

大家好，有几个化合物分别带2个或4个羧基，想通过高效液相色谱C18柱分离，一般采用什么流动相？请有经验的版友多多指导。目前试了甲醇水效果不好。

液相色谱 VS [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]借用这个帖子，waters液相改装成双柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]经验谈，http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090621/1964376/，虽然原理类似，但是仪器系统还是有很大的区别。[color=#DC143C][B]让你来谈谈液相色谱与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的区别，无论是泵、流路、柱子、检测器、仪器维护上都可以谈谈你的认识，不少于20个字。[/B][/color][color=#00008B]你的认识是我们版友学习的资料哦！[/color]