液相色谱替代

[color=#DC143C][size=4]既然液相质谱灵敏度这么高，并且能够确证药物，那么在不久的将来液相质谱会替代液相色谱么，大家都过来讨论下吧，[color=#00008B]可以结合自己实际的经历加以说明[/color]。[/size][/color]总结一下各位板油的讨论。[color=#DC143C]不可能完全取代的原因：[/color]1、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的价格太高昂，运行成本高，对操作人员要求高；2、有些物质用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]测定效果可能还不如液相，常规检测用液相足够；3、液相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]功能各有千秋，基础研究液相足够完成；4、有些化合物不适合使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]测，定量方面液相比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]好，离子化效率低的物质不适合使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]（如长链脂肪醇等）；5、流动相的选择面也比较窄，很多缓冲盐体系都受到限制；6、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]只是作为一个确证手段，并不使用于常规检测；7、质谱检测器不可能替代荧光、紫外、折光检测器的功能；8、质谱可以当作液相的一个高端的检测器，在定性能力及痕量灵敏度方面优势明显。但在定量范围及分析结果稳定性方面并没有什么明显优势；9、液相色谱-质谱主要用于科研机构，运行费用高、没有标准谱库，依赖于标准品建立的图谱， [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS后一质谱推断前一物质。重现性依赖于个人的手法。液相色谱更适于工厂，价格低，维护费用低。[color=#DC143C]可能完全取代的原因：[/color]1、在农残检测领域由于外国的技术壁垒越来越高，用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]甚至UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]MS代替LC的趋势越来越明显；2、研究单位和检测服务单位倒用得越来越多；3、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]在定性方面确实比液相优越多；4、性价比达到企业认可可取代；5、开发成本降到“白菜价"，液-质联用才能替代液相色谱。谢谢各位的热情参与！！！

如题，为什么离子色谱不能被液相+电导检测器替代？欢迎发表您的见解！

液相色谱校验用的咖啡因哪里能买到，或者有什么代替品吗，最近要做校验，咖啡因管制了买不到。

国产耗材系列之液相色谱柱---请你来罗列！你知道几种国产的液相色谱柱？你觉得这些可以替代国外的吗？如果给你免费试试的机会你要吗？你敢给国产液相色谱柱一个机会吗？请知道国产液相色谱柱的发言，让我们一起了解国产的柱子！

毛细管电泳是一个新的研究课题，通过毛细管为分离柱，用电色谱的方法进行分离分析，价格低廉。但是液相色谱法是当今社会色谱分析的基本方法。希望大家积极讨论，毛细管电泳替代液相色谱的可能性又多大？毛细管电泳的发展方向是什么？

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纯德国制造的UltiMate LC3000，Pittcon上与agilent 1200同时获奖全新的UltiMate LC and LC/MS系统为实验室分析带来了更高层次的功能与稳定的操作性。一个更宽的硬件选配范围可以提供完整的纳升级到半制备级分析。Dual LC 戴安独创的“×2” 双梯度技术正处于智能液相的引领地位—它为您提供更快的分析，更高的样品通量和自动的完成复杂样品色谱分析任务的能力。Solutions UltiMate 3000 LC and LC/MS系统可为您的实验室提供整套的智能液相色谱系统，不论您是进行常规的分析还是复杂的高通量纯化工作，您会发现我们的产品就是为您设计的。Systems 可以从纳升级，毫微级，微升级，分析级以及制备流速多种系统中进行最优化的选择。Modules 液相色谱的灵活性是在对其使用者的价值高低评定中起重要作用。最新的Ultimate3000 HPLC 系统可以进行任意的选择单，双纳升级、毫微级、微升级、分析以及半制备配置。任意一台Ultimate3000 HPLC 液相色谱系统可以为您的实验室分析工作带来灵活的配置、优异的性能、重现性及易用性。

[back=#ffffff][color=#0162f4][size=4]请问各位大侠，我的液相色谱，新换的柱子，可是基线却上漂，采用二元梯度，乙腈和水作流动相，梯度洗脱，走样过程中当流动相全为乙腈时基线上漂，请问是什么原因呢？我查了一下应该是柱子或是流动相脏，可是都是新换的啊！我现在比较怀疑水的问题，我们用的是娃哈哈瓶装水，不知道各位在用液相时水要怎样处理，（Ps我们的纯水机的柱子坏掉了，所以买了娃哈哈替代！）[/size][/color][/back]

大家好，我想选出一种新的大蒜辣素的替代对照品，可是不知从何下手，有没有懂的前辈们给我教教，替代对照品选择有没有具体的书籍可以看看，有没有什么要求，一般要怎么选择

大家谈谈液相色谱中的氘灯怎么选择，如何区别是原厂灯还是替代灯。最近，选氘灯真是头大了，有的说是OEM 有的说是替代灯。麻烦大家说说你们如何选氘灯，，如何区别的谢谢大家

液相色谱仪的维护事项1、给色谱柱加温，温度升高的目的，部门在于增加溶质的溶解度，但更重要的是降低溶剂的黏度，从而改进峰形和分离度。C18柱的柱温一般不要超过40摄氏度，否则健合相轻易脱落的。温度升高会降低留存时间，这对分离度也有影响，温度的变化对谱带宽度的影响甚大，而塔板高度受温度的影响固然也取决于所采用的色谱类型，而温度升高老是要降低塔板高度的。 　　 2、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持不乱；泵中有气泡，可通过排气等操纵将气泡赶出；活动相分歧适，解决办法为改换活动相或使活动相在控制室内进行适当混合　3、液相色谱仪中峰泛起拖尾或泛起双峰的原因是什么? 筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲刷柱子，替代筛板或更换柱子；存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换活动相或更换选择性好的柱子 4、进样器使用，除每次用水清洗外，隔一段时间后，最好用甲醇或乙腈反复吸取，清洗一下。

昨天参加了戴安液相色谱和离子色谱CDC座谈会，听了他们刘经理讲解了下戴安双三元液相色谱在液相色谱分析中的优势，特别是其在线固相萃取的应用，我觉得真的可以大大减轻我们检验人员的工作量，大大的缩短了我们的检测时间哦。请问有朋友用过戴安双三元的液相色谱吗？我要是说 话能算数的话我肯定马上就开始计划购买哦

有人用过戴安的液相色谱吗？？？梯度洗脱怎么设置啊、？？谢谢~~~~~~~~

最近翻看近红外光谱介绍，看到基本上有机物都能够检测，实现定量定性检测。我就在想现在好多的原料检测都用的是色相或液相色谱仪，如果用近红外是不是这些都可以替代了？他们两个有什么区别和优缺点呢？哪位大侠能帮忙解释一下，不胜感激呀！

最近买了台CAD检测器，感觉和1200配合起来不是很好用，想买台戴安的液相色谱，不要检测器，要求能做反梯度（梯度补偿）。求个配置，最好能有指导价格，谢谢大家

XX公司已研制成功并已生产的用于液相色谱‘脉冲离子检测器’采用独特的检测原理和结构；美国的WATERS和AGILENT公司没有该产品戴安公司的结构繁琐又不同，价格高昂40~50万元/台，比该检测器高近10倍左右，由于该产品采用世界前所未有的双重专利技术：自动消除仪器的噪音，又同时能降低漂移；使仪器的主要技术指标：灵敏度，噪音和漂移超越大多数现有液相色谱的其他检测器（已与国内外多数检测器进行多次当场比试并有比试的实验图谱可提供参阅）；还想找不同的戴安进口产品进行多样品的比较试验：该产品的创新点如下：1，灵敏度，稳定性（仪器的噪音和漂移）和性价比超越大多数现有的液相检测器。2，一机多用，可替代多种其他检测器的分析检测功能，如紫外，示差，荧光，电导和电化学检测器。3，克服其他检测器因背景信号大，难以调节零点影响稳定性和使用范围的问题；一般其他检测器不能检测和分析的样品，该检测器能很好进行分析检测；因此能很好应用于难度大的食品，中/西药，生化保健产品等的分析检测。4，自动消除负峰的技术，国内外液相色谱仪中也没有该技术；该技术使分析图谱清晰，去掉负向干扰。（也已用于气相色谱仪中）

最近，看一些资料中有提到“液相色谱的谱带展宽问题”，不太明白什么是谱带展宽，谱带展宽到底是怎么回事，请教大家了。

1月23日，安捷伦科技推出了该公司最新一代Agilent 1200系列液相色谱系统，该系列将是安捷伦科技著名的1100系列液相色谱的换代产品。作为一种常规的分析测试手段，全球有超过250，000家的用户在使用液相色谱产品，其市场规模约为二十亿美金，这也是安捷伦科技LSCA部收入的主要来源之一。 自从1995年1100系列液相色谱问世以来，安捷伦总计售出了大约60，000套液相色谱系统（如果按单个系统模块计算，则超过400，000），使得1100系列成为液相色谱市场最为成功的产品之一。最新推出的1200和现在的1100具有良好的兼容性，从而最大限度地保障了用户单位在资金和时间方面的投入不受损失。用户单位可以根据自己的需要，选择新的模块和现有的模块进行组合，也可以继续使用已有的分析方法而无需花费资金去开发新的方法以及重新培训操作人员。对于那些暂时使用非安捷伦操作软件的用户，安捷伦科技还可以专门为他们提供一种1100仿真模拟模式。 据安捷伦科技有关人士介绍，Agilent 1200是一款功能极其完善的液相色谱系统，其可选的仪器模块数量超过60个，可以灵活组合以满足液相色谱不同应用领域的需要，包括：快速分离液相（最新推出）、制备液相、标准液相、窄柱液相、毛细管液相、纳升级液相以及安捷伦科技开创性的芯片液相等。目前，芯片液相技术既可以用于小分子领域也可用于大分子领域，即可用于色谱分离，也可作为进样装置。而采用纳流喷雾离子化的HPLC-Chip/MS技术，其灵敏度较之常规的LC/MS提高了1000倍。

迪马科技作为全球领先的色谱消耗品制造商，拥有雄厚的研发实力，尤其在色谱柱生产技术上处于领先地位，并深受用户的信赖。为更好提升产品客户体验，迪马科技决定从12月8日起国内销售的高端液相色谱柱将使用全新的包装，旨在为新老用户提供更高品质、更高品位的享受。 此次使用新包装的高端液相色谱柱包含：Endeavorsil（奋进）系列、Leapsil（飞跃）系列、Inspire（英帕尔）系列、Spursil（思博尔）系列、Platisil （铂金）系列、Bio-Bond系列、EasyGuard系列。新升级的高端液相色谱柱盒从外观、密封性、安全性等方面进行了大幅度的提升。一、外观 在外包装方面，全新升级的柱盒运用了更加精湛的工艺与合理设计，使得新包装看起来更为大气、美观、实用。同时新柱盒体积更为精巧，便于存放和节省空间。http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417105154785.jpg http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417347140296.jpg 新包装 原包装二、密封性 在产品密封方面，新的色谱柱盒采用柱盒整体密封的方式，替代了旧的色谱柱盒局部密封标签，使得密封效果更好。http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417500103375.jpg http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417574105294.jpg 新包装 原包装三、安全性 在安全性方面，新的色谱柱盒里面是采用防震海绵成型托盘，切割平整，具有更好的固定效果，在运输过程中对色谱柱有了更好的保护。http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417617407381.jpg http://www.dikma.com.cn/u/image/2014/12/01/1417417669881549.jpg 新包装 原包装 迪马科技一直坚持技术创新和发展，不断追求和完善细节，着力提升用户的体验。我们承诺，迪马将始终为您提供高品质的产品和服务，包装与时俱进，品质始终如一。

液相色谱柱Diamonsil(钻石二代) 柱压高 1.5的流速柱压在2500左右这个正常吗？ 用钻石一代的柱压才1400左右 高手帮忙解释一下

戴安双三元液相色谱如何性价比如何，价格多少？

弱弱问一下，戴安液相色谱的流动相和淋洗液与A,B,C,D是怎么个对应法？

近几年，液相色谱仪器在硬件方面最大了突破就是推出了UHPLC或UPLC系统;但在色谱柱填料及形式方面也还是有一些新的技术，我收集了相关资料，简单回顾一下此方面相关的新技术。　　一、色谱柱填料新技术　　1、亚2微米填料　　首当其冲就是很热门的亚2微米填料。根据色谱速率理论，粒径越小，柱效越高，而且当粒径小到亚2微米左右时，线速度的提高，其分离度就不再降低，而亚2微米填料的优势也正在与此。这个理论很早就有，但是为什么UPLC或UHPLC直到2004年才出现呢?原因主要是粒径减小，柱压的急剧升高，因此亚2微米填料对系统的耐压性能要求很高，长久以来，材料及工艺不能满足亚2微米填料对系统的要求。　　随着材料及技术的进步，2004年沃特世推出了首款商品化地UPLC系统及配套的亚2微米填料的色谱柱。如今已有沃特世、安捷伦、赛默飞（戴安）、岛津、日立、珀金埃尔默等10余家公司推出UHPLC系统;国内上海伍丰也推出了国内首台UHPLC系统。但在填料方面，相比于常规的液相色谱填料，能够生产亚2微米色谱柱的公司还不是很多，色谱柱的种类也偏少。但毫无疑问，UPLC或UHPLC、亚2微米填料是液相色谱发展的主流。沃特世公司首席科学官Thomas E.Wheat先生认为，“未来10-15年，UPLC有可能完全取代HPLC。”　　2、核壳型填料　　最近，多家公司推出了一种新型液相色谱填料——核壳型填料。这种填料的优势在于，其可以缩短分析时间，提高柱效，但是对系统压力的增加却不是很多。换句话说，可以部分实现亚2微米填料的优势，但是由于对系统耐压要求不高，其可以在常规的HPLC上运行，可视为UPLC/UHPLC好的替代品。　　核壳型填料就是在坚实的硅胶核心上生成一个均匀的多孔外壳。由于核心硅球是实心的，这样样品在通过色谱柱时，只需要花费少量的时间便能扩散出硅球表面的颗粒孔中，在较短时间完成扩散，更快地传质，因此分析速度及柱效都较原来普通的色谱柱有很大提高。目前，生产和供应核壳型填料的厂家有安捷伦、菲罗门、Sigma-Aldriich等。　　3、整体柱(monolithic column)　　整体住也是近年来液相色谱柱填料研究的又一大方向。整体柱,又称为棒状柱、连续床层、无术塞术，是一种用有机或无机聚合方法在色谱柱内进行原位聚合的连续床固定相。与常规装填的液相色谱柱相比具有更好的多孔性和渗透性，以及具有灌注色谱的特点，即色谱柱中既有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔(几十个纳米)，目前多应用于对生物大分子进行快速分离分析，应用还具有一定的局限性。目前，商品化的整体柱产品也不是很多，主要还处于科研阶段。在售的整体柱比较有名的是默克公司的ChromolithTM。　　二、色谱柱新形式　　1、色谱饼　　色谱饼这一说法源自西北大学现代分离科学研究所、现代分离科学陕西省重点实验室耿信笃教授课题组，其与普通的色谱柱最大区别在于，其柱直径远远大于柱长，因而呈现饼的形状，故称为色谱饼。　　此种形式的改变带来的好处是，色谱柱的平衡时间、进样、洗脱及色谱柱的平衡时间都显著地缩短，从而实现了快速。当然使用色谱饼的前提是，分离度不能有很大的损失。目前，这一形式的色谱柱在分析蛋白方面有很好地效果。　　2、固定相优化液相色谱(Phase Optinized Liquid Chromatography POPLC)　　固定相优化色谱产品来自于德国BISCHOFF公司，上海通微是该产品在中国的代理。POPLC改变了我们原来创建分析方法的传统思路，不从改变流动相或更换色谱柱来改善分析效果的角度出发，而是从“优化固定相”的角度出发来摸索分析方法。据悉，目前商品化的固定相种类非常多，如何从中选出适合的固定相是头疼的问题。研发者希望通过固定相的组合能帮助方法开发人员更快更好地找到适合的固定相。　　德国BISCHOFF公司开发的POPLC系统由迷你柱管、填装不同填料的可替换短柱芯和分析软件三部分组成。在实验中，先选择几根装有不同填料的短柱芯作为一个实验组，通过单根柱子先做基础实验，然后用配套软件计算可能的柱连接方式(即将各种固定相串联)，再预测分离效果，最后做验证实验。实验表明，这种方式可以有效缩短分离时间，相应提高检测灵敏度。

——————————小木新作—一未知化合物液相色谱质谱分析方法的建立————————.. ......................................Ultimate柱的试用体验.......................................1.前言第二届原创大赛开展了四个月，参赛作品异常精彩。可我的参赛“原材料”刚刚出炉，我就乘着冬日的寒风，赶着原创大赛的末班车——姗姗来迟。我分析的这个化合物，是从一中药中分离提取出来，由于涉及到课题申报，化合物的结构和名称需保密，就暂用A来替代。 “极限”体验风暴再次来临，丰厚奖品等您来拿，快来参与！

高效液相色谱仪的使用1．色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷（含0.05%甲醇）或甲醇：水（83：17）为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。为防止柱污染，常用1个50mm长，4~5mm内径，装有硅胶（40-50mm）或立柱相同填料的保护柱（预柱）接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。　　2．流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，最后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法（isocratic dlution），即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。另一类为梯度洗脱法（gradicnt clution）,即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相高效液相色谱法中。　　3．检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。紫外检测器有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。80年代应用激光替代氙灯光源，光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。　　4．数据处理现代高效液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法 1 液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成（如图1所示）。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件，同时也是容易出事故的主要场所。 2 常见问题及解决方法2．1 针对柱压问题（表1）柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在50PSI之间。压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题，但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。值得注意的是在使用梯度洗脱时，进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。首先考虑柱子是否被堵，此时可更换一根新柱子进行检测。2．2 针对保留时间漂移的问题 [2，3] （表2）保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题，其包括了保留时间增大和减小。它的产生与很多原因有关。2．3 针对异常色谱峰问题[2-4] 异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3．1 HPLC的日常操作条件 工作温度10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 3．2 泵的保养 使用流动相尽量要清洁；进液处的沙芯过滤头要经常清洗；流动相交换时要防止沉淀；避免泵内堵塞或有气泡。3．3 进样器的保养 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。3．4 柱的保养 柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净；要注意流动相的脱气；避免使用高粘度的溶剂作为流动相；进样样品要提纯；严格控制进样量；每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。3．5 检测器(UV)的保养 紫外灯的保养要在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。同时样品池要保养。4 结语 在高效液相色谱使用过程中故障排出时要遵守以下原则：一次只改变一个因素，从而确定假定因素与问题之间的联系；如果通过更换组件来排查故障时要注意将拆下的完好组件装回原位，从而避免浪费；养成良好的记录习惯，一个良好的记录是成功地进行故障排除的关键。 总之，在使用高效液相色谱时一定要注意样品的前处理与仪器的正确操作和保养，仪器系统的干净是用好仪器和维护维修仪器的关键。

1．色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷（含0.05%甲醇）或甲醇：水（83：17）为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。为防止柱污染，常用1个50mm长，4~5mm内径，装有硅胶（40-50mm）或立柱相同填料的保护柱（预柱）接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。　　2．流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，最后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法（isocratic dlution），即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。另一类为梯度洗脱法（gradicnt clution）,即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相高效液相色谱法中。　　3．检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。紫外检测器有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。80年代应用激光替代氙灯光源，光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。　　4．数据处理现代高效液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法 1 液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成（如图1所示）。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件，同时也是容易出事故的主要场所。 2 常见问题及解决方法2．1 针对柱压问题（表1）柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在50PSI之间。压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题，但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。值得注意的是在使用梯度洗脱时，进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。 在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。首先考虑柱子是否被堵，此时可更换一根新柱子进行检测。2．2 针对保留时间漂移的问题 [2，3] （表2） 保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题，其包括了保留时间增大和减小。它的产生与很多原因有关。2．3 针对异常色谱峰问题[2-4] 异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3．1 HPLC的日常操作条件 工作温度10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 3．2 泵的保养 使用流动相尽量要清洁；进液处的沙芯过滤头要经常清洗；流动相交换时要防止沉淀；避免泵内堵塞或有气泡。3．3 进样器的保养 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。3．4 柱的保养 柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净；要注意流动相的脱气；避免使用高粘度的溶剂作为流动相；进样样品要提纯；严格控制进样量；每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。3．5 检测器(UV)的保养 紫外灯的保养要在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。同时样品池要保养。4 结语 在高效液相色谱使用过程中故障排出时要遵守以下原则：一次只改变一个因素，从而确定假定因素与问题之间的联系；如果通过更换组件来排查故障时要注意将拆下的完好组件装回原位，从而避免浪费；养成良好的记录习惯，一个良好的记录是成功地进行故障排除的关键。 总之，在使用高效液相色谱时一定要注意样品的前处理与仪器的正确操作和保养，仪器系统的干净是用好仪器和维护维修仪器的关键。

大家好，有几个化合物分别带2个或4个羧基，想通过高效液相色谱C18柱分离，一般采用什么流动相？请有经验的版友多多指导。目前试了甲醇水效果不好。

液相色谱柱年鉴（2013）目录tables of contents第1章 中国品牌液相色谱柱 31.1. Dikma(迪马.中国) 31.1.1. 介绍 31.1.2. 迪马液相色谱柱 31.2. Anpel(安谱.中国) 31.2.1. 介绍 41.2.2. CNW液相色谱柱 41.3. Welch(月旭.中国) 41.3.1. 介绍 41.3.2. 月旭液相色谱柱 41.4. Bonna-Agela(博纳-艾杰尔.中国) 51.4.1. 介绍 51.4.2. 博艾液相色谱柱 5第2章 美国品牌液相色谱柱 72.1. Agilent(安捷伦.美国) 72.1.1. 安捷伦ZORBAX液相色谱柱 7(1). 硅胶类别 72.1.2. 安捷伦Poroshell液相色谱柱 82.2. Waters(沃特世.美国) 82.2.1. 沃特世液相色谱柱 8(1). 颗粒类型 82.2.2. ACQUITY UPLC Columns 92.2.3. HPLC分析和制备柱 9(1). Xbridge 9(2). Xselect 9(3). Atlantis 10(4). Sunfire 102.2.4. SFC（超临界流体色谱）柱 112.3. Phenomenex(菲罗门.美国) 112.3.1. Phenomenex HPLC/UHPLC色谱柱 112.4. Thermo-Fisher(赛默飞.美国) 112.4.1. 主要色谱柱产品 122.4.2. 生物分子色谱柱 122.4.3. 极性和可选择性色谱柱 132.4.4. 扩展pH型色谱柱 132.4.5. 经典型色谱柱 132.4.6. LC/MS色谱柱和工具包 132.4.7. 保护柱 132.4.8. 离子交换型色谱柱 142.4.9. 体积排阻色谱柱 142.5. Dionex(戴安.美国Thermo旗下) 142.5.1. 介绍 142.5.2. 戴安公司液相柱 15(1). DIONEX Acclaim Surfactant色谱柱 15(2). DIONEX Acclaim OA色谱柱 15(3). DIONEX Acclaim PA2色谱柱 15(4). DIONEX Acclaim PA色谱柱 15(5). DIONEX Acclaim 120 C18分析柱 15(6). DIONEX Acclaim 120 C8分析柱 16(7). DIONEX Acclaim 300色谱柱 16(8). DIONEX Acclaim explosives色谱柱 162.6. Sigma-Aldrich(西格玛-奥德里奇.美国) 162.6.1. Supelco(色谱科.美国) 162.6.2. 美国Sigma-Aldrich公司（美国西格玛奥德里奇公司） 172.7. GRACE-Alltech(格雷斯-奥泰.美国) 172.8. Restek(瑞斯泰克.美国) 172.9. Kromat.KB(科瑞迈.美国) 182.10. Sepax(赛分.美国) 18第3章 欧洲品牌液相色谱柱 193.1. Machery Nagel.Nucleodur(闪电.德国) 193.2. Merck(默克.德国) 193.3. Hamilton(哈美顿.瑞士) 203.3.1. Hamilton液相色谱柱 213.4. Kromasil.Eka(克罗马斯,作者暂定.瑞典) 22第4章 日本品牌液相色谱柱 234.1. CAPCELL PAK(资生堂.日本) 234.2. Shimadzu(岛津.日本) 244.3. Showa Denko.Shodex(昭和.日本) 254.4. TSKgel(东曹.日本) 254.5. YMC(山村化学.日本) 264.6. Nacalai Tesque.Cosmosil(纳采,作者暂定.日本) 274.7. Daicel(大赛璐.日本) 274.8. DAICEL历史介绍 284.9. DAICEL大赛璐(中国) 304.9.1. 大赛璐手性柱 31