液相色谱线测

鹿衔草高效液相色谱检测 鹿衔草为鹿蹄草科植物，具有祛风湿，强筋骨，止血，止咳之功效。常用于治疗风湿痹痛，肾虚腰痛，腰膝无力，月经过多，久咳劳嗽等疾病。 水晶兰苷（C16H22O16）是鹿衔草中重要的药用成分，所以为了保证中药或中药饮片的质量，鹿衔草中水晶兰苷检测必不可少。 下面我们就介绍下高效液相色谱法检测鹿衔草中水晶兰苷含量。实验部分原理 精密称取适量该样品，加水提取，经进样器进入高效液相色谱系统，随流动相流经色谱柱，经色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量计算（外标法）。仪器 高效液相色谱仪（等度+紫外检测器+柱温箱），超声波清洗器，溶剂过滤器，水浴锅，氮吹仪，针筒式过滤器，电子天平等试剂 甲醇（色谱纯），超纯水，磷酸等样品溶液配制 对照品溶液的制备：精密称取水晶兰苷对照品12.5mg于50ml容量瓶中，加水至刻度，配制成每0.25mg/ml水晶兰苷对照品的溶液，备用。 供试品溶液的制备：取本品适量，研碎，精密称取粗粉约2g，置于具塞锥形瓶中，精密加水50ml，称定重量，在80℃水浴中提取1小时，放冷，再称定重量，用水补足减少的重量，摇匀，精密量取续滤液5ml，氮吹仪吹至近干，残渣加水适量使溶解，并定容成1ml，摇匀，0.45um微膜滤过，待测。色谱条件检测器：紫外检测器色谱柱：Welchrom-C18 ( 250 mm × 4.6 mm，5μm)Serial Number：W13212255检测波长：235nm流动相：甲醇：0.1％磷酸溶液=5：95（V:V）流量：1.0ml/min柱温：30℃进样量：5μl对照品色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410251013_519938_2498430_3.png供试品色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410251014_519939_2498430_3.png 色谱图效果不错吧，这主要取决于以下几个方面。一是这个样品比较简单，溶液检测；二是色谱柱效果好，如果色谱柱不合适或是柱效不高时，色谱峰峰形较差，经常峰宽较宽，峰有拖尾或延展等现象；三是样品前处理得到位，否则会影响检测结果的准确性；四是仪器性能较好；五是色谱条件控制的较好。 总之该检测准确、可靠、方便、快捷，该方法简单、容易控制，色谱柱便宜、易买。该方法非常适合该样品检测。

国产与进口液相色谱仪测试比对报告1.比对目的 选取2010年药典二部及美国药典中典型方法及食品添加剂国标方法对某国产品牌上海伍丰EX1600高效液相色谱仪及其他品牌（以waters仪器为主）液相色谱仪的各项性能进行比较，明确国产仪器优化与改进方向。2.比对依据与原理1. JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程2. EX1600高效液相色谱仪及其他品牌高效液相色谱仪使用说明书3. EX1600高效液相色谱仪系统适用性测试方案及综合改善测试方案4. GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法--高效液相色谱法5. VensuilAA氨基酸分析方法6. 2010年药典二部及美国药典中双氢青蒿素、可可碱与茶碱、维生素A及阿托伐他汀钙等相关物质的测定方法。7. 需比对的性能指标选取原理：与《JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程》要求直接相关；与仪器关键部件的技术指标直接相关；与仪器测定结果重复性，即仪器稳定性直接相关。8. 样品选取原理：测定结果直接反应仪器的稳定性；属于常用或者经典方法，单标、混标体系均有所涉及；等度和梯度方法均有所涉及（反映梯度误差指标）；与检测器的基本波段（低、中、高波段）均相关的项目（反映全波段检测稳定性）。3.比对内容 高效液相色谱仪对样品的分离与测定结果好坏与仪器的稳定性及色谱柱的柱效相关，现使用同样的色谱柱进行EX1600高效液相色谱仪及其他品牌的色谱仪各项性能比对，就需要了解构成液相色谱的各个系统及整机的稳定性情况。就仪器各个系统的稳定性来讲，按照《液相色谱仪计量检定规程》测试方法，对流量准确度与重复性、噪声与漂移的测定结果能够从仪器方面直接反映输液系统及检测器的运行情况，明确指出这两个核心部件的优化与改进方向。而就整机稳定性来讲，还需要配合标准样品的测试，对其检出限、线性范围和梯度误差及定性定量重复性结果进行比较和评价，作为应用测试指标进一步反映仪器的稳定性好坏。将仪器性能指标与应用测试指标相结合，才能全面、客观地对仪器各项性能的稳定性进行评价与改进。现将主要测试内容列在下表：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100229_476241_2369266_3.png 根据以上所列比对项目的比对内容，选择苏丹红ⅠⅡⅢⅣ、双氢青蒿素、阿托伐他汀钙、可可碱与茶碱、维生素A、氨基酸作为衡量输液系统、检测器、整机及软件性能综合指标优劣的标准测试样品，其特有的测定条件及测定结果可以综合反映色谱仪的稳定性，现将其优势测定条件与测定结果反映的综合指标列在下表并具体阐述如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100231_476242_2369266_3.png 据食品国家标准、药典二部及美国药典中的典型方法，我们选取了近年来与食品、药品质量可控性、有效性及安全性密切相关的六类标准样品，依据其测试结果来衡量高效液相色谱仪各项性能稳定性。 苏丹红作为化工试剂，被不法商家非法添加入调味品中，是近年来食品安全领域的热点问题。苏丹红ⅠⅡⅢⅣ易致癌，是我国明文禁止的非食品添加剂。在相关食品国家标准中对其含量有具体的限量值，鉴于其实际测定中响应值低，我们对苏丹红的检测结果可直接体现高效液相色谱仪的噪声、漂移、检出限及线性范围（下限）等指标优劣。同时，苏丹红ⅠⅡⅢⅣ作为四元混标体系，国标方法规定苏丹红Ⅰ检测波长为478nm，苏丹红ⅡⅢⅣ检测波长为520nm，在检测过程中须转换波长，测定结果能够直接反映高波段、波长转换时的噪声与检出限；分离条件为梯度洗脱，可反映输液系统的梯度误差及双泵在梯度洗脱的稳定性。 双氢青蒿素作为单标体系，色谱测定条件为检测波长210nm，测定结果可直接反映检测器在低波段的稳定性及单泵运行情况。 阿伐他汀钙液相色谱检测波长为244nm，位于检测器优势波段的相对低波长处，流动相中含有高比例、洗脱能力较强的试剂四氢呋喃，可直接反映检测器优势波段噪声及单泵稳定性。 氨基酸混标体系共包含17种氨基酸组分，为复杂难分离体系，检测波长为254nm，测定时为梯度洗脱，测定结果可直接体现检测器优势波中段噪声及梯度洗脱时双泵运行稳定性。 可可碱与茶碱的二元混标体系，测定时检测波长为272nm，位于检测器优势波段的相对高波长处，可进行等度分离，测定结果直接反映了检测器优势波段稳定性及双泵在等度洗脱时的稳定性。 维生素A的高效液相色谱测定体系为正相色谱，流动相为正己烷：异丙醇[font=Tim

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 高效液相色谱方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。现在几乎每个医药、食品、化工等企业都会配备一到几台高效液相色谱，高效液相色谱法也已经成为了分析测试领域的标配了。 BCEIA2015已经过去一周，但是期间精彩纷呈的报告和各厂商展出令人眼花缭乱的仪器去还是让人久久回味。尤其是液相色谱，液相色谱厂商特点是国内与国外百花齐放，国外的厂商是几家知名的大厂商，安捷伦、赛默飞、岛津，国内也有好几家液相色谱的厂商参与此次BCEIA，像大连依利特、上海伍丰等，下面就让我们来回味一下，BCEIA期间都有哪些精彩的液相色谱。赛默飞： 赛默飞展出的是UHPLC系列，Ultimate3000和Vanquish Flex。这两款超高效液相都是赛默飞最新的超高效液相系统。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210110018_01_1947624_3.jpgUltimate3000 DGLC双三元液相系统 双三元液相色谱是赛默飞世尔科技的独特技术，从纳升液相、常规液相、超快速液相到生物液相均可提供双三元梯度分离技术。主要特点：1、能够进行在线固相萃取；2、可进行二维或多维色谱系统；3、在线柱后衍生和反梯度补偿满足特殊应用需求；4、并联、串联方式可实现超高的样品通量；5、流动相在线除盐，可谓质谱前端的不二选择。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210114647_01_1947624_3.jpgVanquish Flex UHPLC Thermo Scientific Vanquish Flex UHPLC系统是Vanquish色谱系列产品的新成员，仪器拥有1,000bar的泵耐压，可以加载进样器，整体进样量可达到8,832个样品，同时仪器可高精度地控制进样量。在检测器方面，Vanquish Flex UHPLC有着自己独特的LightPipe技术以及电雾式检测器，可以检测对紫外没有吸收的样品。Vanquish Flex 还是生物兼容液相色谱系统。安捷伦：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210124597_01_1947624_3.jpgAgilent 1290 Infinity II 液相色谱系统 Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统于2014年10月上市，与安捷伦过往的优秀产品一样，具有极高的稳定性和耐用性，辅以突破性的技术。主要特点：1、采用双针进样，进样周期更短（小于5s），从而实现更高的样品通量；2、使用新型Agilent 1290 Infinity II液相色谱系统HDR-DAD或Agilent 1290 Infinity II液相色谱系统ELSD，可实现极低的检测限和超宽的动态范围；3、智能系统模拟技术(ISET)实现了液相色谱系统间方法的无缝转移，不论什么品牌，均可获得不变的保留时间和峰分离度；4、可与色谱数据系统无缝集成—得益于安捷伦仪器控制框架(ICF)，在第三方色谱数据系统（例如，Waters Empower或Dionex Chromeleon）控制安捷伦液相色谱系统仪器时，其运行状况比之前更为流畅。5、提升单个实验台空间的样品容量—最多可容纳6144份样品，不会增加标准安捷伦仪器的占用面积。岛津：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210133725_01_1947624_3.jpgNexera-e全二维液相色谱系统 Nexera-e通过对第一洗脱液进行精细馏分捕集可以达到最大可能的峰容量，并且凭借其双样品环交替切换设计，连续地将所有馏分在线注入第二维系统。Nexera-e结合日本岛津公司的二维液相色谱阵容，使得主要推向制药和临床市场的Co-Sense系列（可用于生物样本分析（BA）或用于杂质分析）颇具特色。由于能对复杂基质的样品进行全面的分析，Nexera-e非常适用于各种研究领域和应用领域，包括蛋白水解、食品和天然提取物。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210144048_01_1947624_3.jpgNexera-i LC-2040高效液相色谱仪 Nexera-iLC-2040是一体化高效液相色谱系统，耐压 66 MPa / 9,500psi,Nexera-i还可以被广泛用作LCMS前端。Nexera-iLC-2040是以UHPLC规格设计的超高效液相色谱，66MPa的系统压力支持使用2.5um或更小粒径填料的色谱柱，以及使用“核壳式”填料色谱柱，这进一步扩大了所适用的分析方法范围。双重温度控制功能控制光学系统和流通池温度，保证了基线的稳定，使用流动相即使在易受室温波动的短波长区域测量，也可以获得高度精确的数据。这使得基线漂移水平是Alliance系统的1/20。即使在小于1L的微体积进样中，i-Series系列也可以获取高度精确的数据。这意味着高浓度样品无需任何稀释就可以直接进样，节省了时间并免除了制备样品的麻烦。低至0.0025%的交叉污染，满足从高极性到低极性物质的大范围样品的分析。 具有远程监控功能可以通过智能终端远程监控分析状态并且实时监控色谱图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015111210152422_01_1947624_3.jpg岛津Essentia LC-16主要特点：LC-16 送液单元LC-16通过改良公认的高精度结构，提高送液准确度和精确度，是能够长期、放心分析的新时代送液泵。SPD-16 紫外可见双波长检测器SPD-16延续广受好评的Prominence SPD-20A的设计，是高灵敏度的紫外可见双波长检测器。在此基础上进一步追求低噪音，实现超越等级的高灵敏度。使用选配件流动相循环阀，能够节约流动相，不仅降低分析成本，更有利于环保。SIL-16 自动进样器SIL-16是耐久性、可靠性和高性能并存的高性价比自动进样器。通过已有成熟使用经验的全量进样方式实现出色的定量重现性，同时也将交叉污染的影响降至最低。最短进样速度10秒以下的超高速进样动作使分析效率得到飞跃提高。还带有稀释、添加等前处理程序，广泛对应各种用途。日立：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201511