三碘甲状腺原氨酸

2022年7月25日，特朗普的女婿自曝在白宫期间罹患甲状腺癌。 以往我们对“大脖子病”和甲亢比较熟悉，但近些年，甲状腺疾病逐渐走进人们的日常生活，甲状腺癌和甲减我们也不陌生。但甲状腺究竟是个什么器官，你真的了解甲状腺疾病吗？甲状腺是什么，在人体中发挥怎样的作用？甲状腺是脊椎动物体内一个非常重要的内分泌器官，形似蝴蝶和盾甲。在人体内，甲状腺有很重要的调控作用，它可以控制身体耗能速度、制造蛋白质、调节其他身体系统对其他激素的敏感性，对儿童而言，它还和儿童的智力和生长发育息息相关。甲状腺的这些调控作用主要依靠两种激素来完成：三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine，以下简称T3）和四碘甲状腺原氨酸（tetraiodothyronine，即甲状腺素，以下简称T4）。T3和T4是由碘和酪胺酸耦联作用形成的，这也是为什么我们常说需要补碘来预防甲状腺疾病。除了T3和T4之外，甲状腺也生产降钙素（Calcitonin）和少量的反三碘甲状腺原氨酸（rT3），其中降钙素可以调节体内钙的平衡。大约有80%的T4在肝脏、肾脏、脾脏等组织发生化学反应，转换成rT3和T3，在人体内，T3发挥作用时，效力比T4大上好几倍。 T3和T4的作用过程 图片来源：tsu.tw在T4转化为T3的过程中，由于碘离子会转化为碘原子，从而产生过氧化氢（H2O2），此时则需要硒元素来中和自由基，以有效抵御中间产物对甲状腺的伤害，维持甲状腺的正常机能。同时，硒在脱碘酶中也起着关键的作用，这个酶的功能是将T4转换为T3。 简单来说，甲状腺激素的合成和发挥作用都必须经过硒，但实际上很多人体内都严重缺硒，我国72%的地区都处于缺硒或低硒地带。坚果、肉、鱼、贝类等能给人体提供优质的硒元素，需日常适当摄入。了解了甲状腺的工作机理后，让我们来探讨一下甲状腺异常是什么样的情况。甲状腺异常主要分哪些情况？甲状腺是脊椎动物体内一个非常重要的内分泌器官。常见的甲状腺异常有甲状腺功能亢进症（甲亢）、甲状腺功能减退症（甲减）、甲状腺结节等，严重的话，还可能会出现甲状腺癌。如果甲状腺过度活跃，使身体产生的甲状腺激素过多，就会导致甲亢。甲亢的症状包括焦虑或紧张、心跳加快、手抖、出汗过多、体重减轻、失眠等，在极罕见的情况下，甲亢甚至可能会导致突发性瘫痪，这种症状也被称为甲状腺毒性周期性麻痹。甲亢的症状：体重减轻、食欲增加、腹泻、头发细软、心动过速、焦虑紧张等甲减的原因恰恰相反，它是甲状腺不能产生足够的甲状腺激素而导致的。甲减的致病原因往往有两个：甲状腺炎症和服用了影响甲状腺激素生成的药物。甲状腺炎症会导致甲状腺细胞受损或死亡，进而无法产生足够的甲状腺激素。最常见的甲状腺炎症是由自身免疫引起的，比如桥本氏甲状腺炎。除了这两种常见的原因之外，甲减还可能是由于大脑垂体无法产生足够的促甲状腺激素（TSH）、缺碘、先天性甲状腺功能减退症等。甲减的症状因人而异，这取决于激素水平的异常程度和患病时间的长短。在有些情况下，甲减的症状非常轻微，比如疲劳、皮肤干燥、脱发、畏寒、记忆力减退等。这些症状往往在非甲减患者身上也会出现，而有些甲减患者甚至根本没有症状。此外，由于身体处于缺乏甲状腺激素的状态，大脑垂体会分泌过多的TSH，以促进甲状腺分泌更多激素。这种额外的TSH可能导致甲状腺变大，导致代偿性甲状腺肿大，也就是大家俗称的大脖子病的一种。甲减的症状 图片来源wiki.org甲状腺结节是甲状腺组织的异常过度生长导致的，往往为良性，恶性结节的情况相对少见。在患者体内，结节的数目往往是一个到多个不等。实际上，甲状腺结节非常常见，大约有50%以上的人在60岁时都会有甲状腺结节。甲状腺结节，图片来源yxj.org值得庆幸的是，一般情况下甲状腺结节都是良性，不会改变腺体的功能。当甲状腺结节确实产生症状时（最常见的症状是颈部肿块和吞咽困难），也可以采取一些有效的治疗方法。此外，如果结节较大，也可能出现呼吸困难、声音嘶哑和颈部疼痛等症状。在极少数较为严重的情况下，甲状腺结节中可能会分泌过多的T3和T4，这可能导致甲亢。甲状腺疾病更为严重的状况是甲状腺癌。甲状腺癌主要有四种类型：甲状腺乳头状癌、滤泡性甲状腺癌、甲状腺髓样癌、间变性甲状腺癌。其中，乳头状癌和滤泡性甲状腺癌属于分化良好的肿瘤，比较容易治愈。值得庆幸的是，分化不良和未分化的甲状腺肿瘤（间变性甲状腺癌）虽然具有侵袭性，容易发生转移，但是它们不太常见。甲状腺癌早期可能不会有什么症状，但随着肿瘤变大，患者可能会出现呼吸和吞咽困难、声音嘶哑、发烧、厌食、体重减轻等症状。甲状腺癌发病率有升高迹象甲状腺癌是全球范围内十分常见的内分泌癌。在过去的50年里，全球甲状腺癌的发病率一直在上升。自1990年以来，甲状腺癌发病率是所有癌症中发病率上升最快的。2019年的数据显示，全球约有23万例甲状腺癌病例，有4.5万例死亡。从1990年到2013年，全球年龄标准化甲状腺癌患病率增加了20%。当比较不同的全球区域时，发病率似乎有很大的差异，这可能与诊断方式、环境和个人因素的差异有关。此外，也可能受到医疗保健服务和国家统计等因素的影响。美国2022年甲状腺癌发病人数估计，截图来源：cancer.org值得注意的是，女性比男性的患病比例更高，这也许是因为女性的情绪波动比男性更为明显，导致女性的甲状腺负担相对更大。除此之外，随着年龄的增长，人们患甲状腺结节的概率也会升高。甲状腺疾病的诊断和治疗由于碘是T3和T4必须的元素之一，因此可以考虑控制碘的摄入来缓解甲亢，比如少吃鱼、海藻、虾等。此外，钠也和甲状腺的肿胀有关，因此患者也需要注意盐的摄入量。同时，多吃新鲜水果和蔬菜保证身体维生素和矿物质水平的稳定。在生活中，瑜伽、太极拳、自我催眠、冥想等措施也可以帮助患者放慢身体的节奏，缓解甲亢引发的症状。由于甲减的症状不像甲亢那样明显，因此甲减检测往往是依靠测量血液中的激素水平，主要指标是T4和TSH在血液中的含量。前文中也提到，甲减的症状因个体差异而有所不同，甚至有时即使患者感觉良好，他体内的激素水平也可能已经十分不正常。如果不及时治疗，长期的甲减可能会引发一系列的并发症，包括不孕不育、低密度脂蛋白（LDL）胆固醇升高和心理健康问题。在极少数情况下，还可能会导致严重的抑郁症、心力衰竭、骨质疏松、粘液性水肿昏迷等。而甲状腺结节的治疗，需要先判断结节中是否含有癌细胞（恶性甲状腺结节的概率不到5%），或者是否伴有其他症状。如果结节已经引发了颈部不适或者甲状腺激素水平过高，可能才需要治疗。而如果甲状腺结节并无癌细胞，也没有引发其他症状，医生往往会推荐采取定期体检的方案来观察。至于甲状腺癌的治疗也是因人而异，这与癌症阶段、年龄、健康状况等因素有关，常用于治疗甲状腺癌的方法有手术治疗、放射性碘治疗、内分泌抑制治疗、靶向治疗等。总的来说，甲状腺的健康关乎着我们每个人的生活质量，身体是革命的本钱，一定在日常生活中关注自己的甲状腺健康，给自己一个健康的甲状腺。作者：云梦伊（西湖欧米） 参考资料1. Hyperthyroidism: Symptoms, Causes, Treatment and Support .endocrineweb.com.https://www.endocrineweb.com/conditions/hyperthyroidism#symptoms2.What Is Hypothyroidism?.endocrineweb.com https://www.endocrineweb.com/conditions/hypothyroidism3. What Are Thyroid Nodules? .endocrineweb.com.https://www.endocrineweb.com/conditions/thyroid-nodules4.Thyroid Cancer Symptoms.endocrineweb.com.https://www.endocrineweb.com/conditions/thyroid-cancer/thyroid-cancer-symptoms5.National, sub-national, and risk-attributed burden of thyroid cancer in Iran from 1990 to 2019.Nature.https://www.nature.com/articles/s41598-022-17115-0

大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的培养操作与应用！ 一、背景 大鼠甲状腺滤泡上皮细胞分离自甲状腺组织；甲状腺是脊椎动物非常重要的腺体，属于内分泌器官。在哺乳动物身体中，它位于颈部甲状软骨下方，气管两旁。甲状腺表面有结缔组织被膜，表面结缔组织深入到腺实质，将实质分为许多不明显的小叶，小叶内有很多甲状腺滤泡和滤泡旁细胞。甲状腺控制使用能量的速度、制造蛋白质、调节机体对其他贺尔蒙的敏感性。 甲状腺依靠制造甲状腺素来调整这些反应，有T3和T4。这两者调控代谢、生长速率还有调解其他的身体系统。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲状腺也生产降钙素，调节体内钙的平衡。其中，甲状腺滤泡上皮细胞（也称为滤泡细胞或主要细胞）是在甲状腺细胞是负责生产和分泌甲状腺激素，甲状腺素（T4）和三碘甲状腺原氨酸（T3）。 二、培养操作 1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。 1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。 4.将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为类； 1.细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2.4 min 1000rpm离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。 3.将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 三、应用 用于RCCS模拟微重力影响大鼠甲状腺滤泡上皮细胞生长特性和分泌功能的研究： 釆用微重力细胞培养系统（the rotary cell culture system,RCCS）,研究模拟微重力对大鼠甲状腺滤泡上皮细胞生长特性和相关分泌功能的影响,为航天员在失重环境中甲状腺应激和病理性改变的防治提供理论依据。 研究方法应用RCCS技术构建FRTL-5细胞模拟微重力培养系统。将大鼠甲状腺滤泡上皮细胞FRTL-5细胞株随机分为模拟微重力组（simulated microgravity group,SMG）和正常重力对照组（normal gravity group,NG）,分别于培养第6h、12 h、24 h、36 h取细胞及上清液,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,化学发光免疫分析法检测T3、T4、FT3、FT4,ELISA检测上清液中Tg和TPO水平 应用倒置相差显微镜观察培养第6 h、12 h、24 h、36 h后细胞表面形态 透射电镜观察培养12 h和36 h的细胞超微结构 激光共聚焦显微镜观察培养36 h的细胞微丝骨架荧光强度变化。 结果：（1）MTT结果显示,SMG组FRTL-5细胞经6 h、12 h、24 h、36 h培养后,各时相细胞增殖均较NG组受到明显抑制（P0.05）,其中24 h最为明显（P0.01） 36 h表现为两种情况,一是SMG组的细胞增殖恢复,二是NG组的细胞增殖速度快速提升。 （2）流式细胞仪测细胞周期显示,与NG相比,FRTL-5细胞微重力培养6 h、12 h、24 h、36 h后G1期细胞比例显著增高 除6 h外,S期细胞比例明显降低 而各时相的G2/M期细胞比例表现为模拟失重早期（6-12 h）降低,其中12 h出现低谷值,24 h一过性显著增高,36 h回落。研究结果提示,SMG组FRTL-5细胞培养6-12 h阶段DNA合成下降,24 h的DNA合成趋活跃,而36 h的DNA合成后期比例又呈现下降趋势并向NG组的比例靠近。 （3）化学发光免疫分析法检测结果显示,RCCS培养6 h组FRTL-5细胞上清液中FT3、T4和FT4水平显著降低（P0.05）,其余各时相的T3、T4、FT3、FT4则未受明显影响。 （4）ELISA测细胞上清液结果显示,与NG相比,SMG组FRTL-5细胞Tg和TPO分泌均明显升高（P0.01）,表现为6 h即显著升高,随后呈下降趋势,24-36 h阶段又趋上升,其中SMG组的6 h与24 h以及24 h与36 h之间有显著差异（P0.01）。 （5）倒置相差显微镜观察结果显示,模拟失重环境下FRTL-5细胞形态发生显著变化,实验早期细胞逐渐趋于死亡状态,24 h后细胞数量又有所增长。 （6）透射电镜结果显示,模拟失重第12 h,36 h的FRTL-5细胞超微结构发生显著变化。 （7）模拟微重力培养36 h后,激光共聚焦显微镜观察荧光素FITC标记的FRTL-5细胞,发现细胞微丝骨架局部解聚,张力纤维减少,结构和排列紊乱,细胞伪足少见,细胞形状呈不规则。 微生物菌种查询网自设细胞系板块，是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

碘是人体必需的矿物质，用以生产甲状腺激素(T3和T4)，从而调控人体的新陈代谢。碘对于甲状腺而言是必不可少的，缺碘会使T3和T4的合成量减少，地方性缺碘常常导致甲状腺肿成为地方性疾病，严重缺碘地区的人还会患先天性甲减。　　在科学史上，碘的发现源于一个“无心插柳”的意外：科学家在操作中倒多了硫酸，一团紫色的蒸汽便因此冉冉升起……　　有趣的是，碘在甲状腺的治疗史上经历了辉煌、衰落、质疑与正名，是与甲状腺演绎了一场精彩的“爱恨情仇”。　医生正在检查甲状腺的健康情况，图源自familydoctor.org　　甲宝玉(西湖欧米) | 撰文　　碘的意外发现之旅　　甲状腺是人体非常重要的一个器官，碘元素是人体必需的微量元素，是合成甲状腺激素的主要的“原料”。碘的多少与甲状腺疾病的关系十分密切：摄入太多容易引起甲亢，摄入不足容易引起甲减。　　有趣的是，历史上有关碘的发现，完全是一场美丽的意外。　　1811年，法国化学家伯纳德库尔图瓦(Bernard Courtois)正在提取制造火药硝石需要的钠盐——碳酸钠(Na2CO3)，它可以从海藻中被分离出来。　　伯纳德库尔图瓦(Bernard Courtois)，图源自gw.geneanet.org　　当他将海藻灰溶液和硝酸钠混合，正准备进行下一步的蒸发时，不慎将硫酸倒多了，过量的硫酸让海藻灰溶液呈现出了一副奇异的现象：一团紫色的蒸汽冉冉升起，看起来十分美丽，但味道却十分呛鼻。　　碘可以升华成为紫色的气体 图源：wikipedia　　随后，库尔图瓦发现这种紫色蒸汽遇冷后变成了紫黑色的颗粒状固体。　　库尔图瓦被这一颗颗神秘的紫色颗粒物吸引住了，他怀疑这是一种未知的新元素。但当时的他没有经济条件去开展试验，于是他把样本交给了他的几位物理学和化学家朋友。这些科学家在经历了几番对这个神秘物质的研究和讨论后，终于确定这是新的元素——碘。1813年11月29日，他们正式宣告了碘元素的诞生。　　至此，碘走到了世人眼前，关于碘的研究和应用也逐渐拉开帷幕。　　海绵治甲肿是碘在起作用?　　虽然碘是19世纪才正式被发现和命名的，但有关碘的传说，早在公元前就流传开了。　　早在公元前1600年起，中国古人就已经知道通过食用烧焦的海绵和海藻来治疗甲状腺肿。在西方，公元前40年时阿尔卑斯山附近的居民也会使用烧焦的海藻来治疗甲状腺肿。　　所以不难看出，虽然那个时候碘的身份还未被揭晓，但是它早已默默地在人们的食谱/药谱中初露头角了。　　直到19世纪碘元素被正式发现后，人们才开始真正探索它来自哪里，以及它与甲状腺之间的关系。　　19世纪初期，瑞士流行着一种很常见、但病因不明的疾病——甲状腺肿。民众对于这种疾病充满了未知和恐惧。当时，日内瓦医学博士让弗朗索瓦科因特(Jean-François Coindet)第一个意识到了碘可以成功治疗甲状腺肿。　　为了证明自己的猜想，科因特选择用海绵来进行检测，发现海绵里面确实含有碘成分。后来他放弃了使用海绵、海藻等产品，直接使用碘来治疗甲状腺肿，在当地的患者群体中取得了较好的疗效。　　1820年，科因特在瑞士发表了演讲，提出碘本身可能就是烧焦的海绵中能治疗甲状腺肿的活性成分。　　这个发现一石惊起千层浪，他的论文迅速在欧洲各地被转载，包括伦敦医学杂志也翻译转载了他的研究。用碘来治疗甲状腺疾病的方法就这样被推广开来。　　从此，碘正式进入了医学史。　　碘：都怪哥太红，人红是非多　　世事难料的是，碘的一夜成名，也给它带来了许多是非——碘能治疗甲状腺疾病的功能逐渐被“神化”了。　　由于碘对于甲状腺肿的治疗效果很好，并且当时人们不需要处方就能买到碘，因此有一些胆大的日内瓦人推断：如果少量碘是好的，那么大量碘就更好了，多多益善。　　有了这样的想法，一些当地人就开始在脖子上挂一小瓶碘酒，一有冲动就喝一小口。结果，让科因特懊恼的事出现了——一部分经常喝碘酒的人逐渐出现了体重下降、心悸及震颤、食欲持续增加等症状。　　第二年，也就是1821年，科因特报告了这些不寻常的病症。虽然我们现在知道这些病人是因为过量补充碘导致他们患上了甲亢，但当时这种疾病还未被发现和定性，所以在那时，碘的名声开始逐渐变差，有一部分人认为它是有毒的。　　但这样的质疑声很快就被碘的光芒掩盖，来自各地的科学家纷纷开始推荐用碘来预防和治疗甲状腺疾病。　　1825年，法国化学家让巴蒂斯特布辛戈(Jean Baptiste Boussingault)从安第斯山脉的天然盐中检测出了碘，他建议用碘盐来预防和治疗地方性甲状腺肿，这是碘第一次在天然的盐中被发现。　　到了1829年，法国医生让纪尧姆奥古斯特卢戈尔(Jean Guillaume Auguste Lugol)建议使用碘化钾制成的碘水溶液来治疗颈部淋巴硬化(颈部出现肿块)。　　此后的几十年中，不断涌现出科学家和医生论证碘对于甲状腺肿有预防和治疗作用，碘的“身价”也因此越来越高。直至1895年，德国化学家欧根鲍曼(Eugen Baumann)在甲状腺中检测到高浓度碘的存在，并指出动物的甲状腺提取物能治疗人们的甲减正是因为提取物中含碘。　　至此，碘被证明了在甲状腺中是天然存在的成分，是治疗甲状腺疾病的“天然良方”。　　也是从这个时候开始，碘的作用进一步被疯狂地夸大。在随后的很多年里，碘成了民众眼中的神药，几乎是临床上的每种疾病都要试一试，看能不能用碘解决问题。　　碘的“万能性”直到20世纪初才被公开质疑。　　质疑后的正名　　对“碘”的神奇性最有力的公开质疑，来自一名著名的瑞士外科医生西奥多科赫(Theodor Kocher)。　　西奥多科赫(Theodor Kocher)，图源自wiki　　在科赫的从医生涯中，他是非常典型的“手术派”医生。1883年，他报告了执刀的前100例甲状腺切除术 1906年增加到3000例 1909年，他描述了其在4250例甲状腺肿手术方面的经验，死亡率低至0.5%。同年11月，科赫因其在甲状腺生理学、病理学和外科手术方面的工作而被授予诺贝尔生理学或医学奖。　　就是这样一位手术派医生，在19世纪凭借精湛的医术将外科手术的死亡率拉低了许多——当时外科手术死亡率为75%，而他操刀的手术死亡率仅为0.5%，主张用手术治疗甲状腺疾病的他，公开表明碘无法治疗甲亢。　　也是因为科赫有获得诺奖的经历，当时许多临床医生在得知他的观点后，放弃了用碘，转而用手术来治疗甲亢。　　颁发给科赫的诺贝尔奖证书　　19世纪晚期时，科赫发现，完全切除甲状腺可能导致由甲状腺激素缺乏引起的克汀病症(当时他称为“甲状腺恶病质”)。　　当时，科赫精湛的手术技巧让刀下的甲状腺被切除得非常干净，而他在随访病人的过程中也发现他们出现了身体机能衰退的现象，这些积累对后人认识甲状腺的生长、发育和代谢是至关重要的。　　总的来说，在发现碘的第一个世纪中，碘不仅被用在甲状腺疾病方面，甚至还用在了许多其他广泛的临床疾病上(比如瘫痪、腹泻、淋巴结核等)。直至1917年至1924年，食盐碘化才作为一项控制甲状腺肿的公共措施在美国施行。　　据医学博士盖伊E亚伯拉罕(Guy E. Abraham)在综述中的介绍，食盐碘化能显著降低补充人群单纯性甲状腺肿的发病率。学者认为，适量补碘可以预防克汀病、地方性甲状腺肿和甲状腺功能减退症。　　我国从1995年开始实施全民补碘计划，到2005年已经成功消除了地方性碘缺乏病。随着食盐加碘在全球的普及，碘缺乏症在许多国家都已经成为了过去式。　　现在，碘更多是作为一种人体定期补充的元素，碘的同位素也在医疗领域发光发热。从19世纪初开始，碘与甲状腺的“不解之缘”延续至今，从未结束。　　参考文献　　1. Thyroid History Timeline | American Thyroid Association　　2. It's Elemental - The Element Iodine (jlab.org)　　3. Discovery and Early Uses of Iodine | Journal of Chemical Education (acs.org)　　4. https://www.thyroid.org/wp-content/uploads/timeline/sawin-discoverers-thyroid-landmarks-coindet.pdf　　5. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3509517/　　6. https://www.eurothyroid.com/about/met/coindet.html　　7. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2868208/　8.https://web.archive.org/web/20130718164615/http://www.jameslindlibrary.org/illustrating/articles/towards-endocrinology-theodor-kochers-1883-account-of-the-un　　9. Abraham, G.E., The history of iodine in medicine. Part 1: From Discovery to Essentiality. The Original Internist, 13(1):29-36, 2006.　　10. https://www.optimox.com/content/Iodine%20Research%20Resources/IOD16.pdf　　11. https://www.eurothyroid.com/about/met/kocher.html　　12. Kocher_ABEM_2009.pdf (thyroid.org)