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β-内酰胺酶各检测方法优缺点比较[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/08/200908111906_165045_1641058_3.jpg[/img]目前已有的检测β-内酰胺酶方法大体可以分为两类:一类是测定底物分解产物的方法,如碘量法、pH 测定法、产色头孢菌素法;另一类是测定未分解底物的方法,如UV法、羟肟酸测定法、生物测定法等。但是上述检测方法都存在一定的缺陷。测定底物分解产物的方法目前来说还不能做到定量化,而通过未分解底物的方法又存在时间长、成本高的缺陷。
β-内酰胺酶是指能催化水解β-内酰胺环酰胺键的灭活酶,可分为青霉素酶、头孢菌素酶、 金属酶和超广谱酶四种。其对青霉素的分解效率非常高,因此,添加在牛奶中确实可以完全水解青霉素, 使之不被检测出来。但是同样其风险也是存在的:第一,β-内酰胺酶的安全性以及是否可以在食品中添加 尚未有定论;第二,在分解β-内酰胺药物后,可能引进其他有害物质;第三,这种做法纵容了奶牛饲养过 程中抗生素的滥用。【反应原理】根据碘量法快速高效重复性好的特点,能快速测定β-内酰胺酶的残留量。根据青霉素经β-内酰胺酶作用而产生的裂解酸与碘结合,可使蓝色的碘淀粉复合物褪色的原理:青霉素+β-内酰胺酶 → 青霉素裂解酸青霉素裂解酸 + 淀粉碘(蓝色)→ 褪色【试剂盒组成】试剂盒组份数量规格试剂A(棕色瓶)16ml试剂B (本色瓶)16ml样品处理液130ml稀释液(本色瓶)125ml样品管(蓝色离心管)24/4848孔板/96孔板1说明书1样品处理管24/48【注意事项】1. 本试剂盒仅供体外诊断用,不要将不同批号的试剂混合用,并请在有效期内使用。2. 如试剂盒不能一次用完,请使用灭菌的移液头进行取样。3. 本试剂盒适用于生乳中β-内酰胺酶检测,线性范围0~10U/ml,如有必要请用稀释液将样 品稀释后在进行试验。4. 含大量脂质或变质的标本可能影响检测结果;如有需要可在实验前对样品进行离心(4000rpm,10min)后取中间清液待测。【试验方法】1. 将试剂盒于室温回温30min 以上。2. 取1000ul 待测样品加入样品管中。
要做β-内酰胺酶的实验,用到舒巴坦,不知道哪里可以买到舒巴坦?