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各位大神们,本人小白一枚,最近在把重组的大肠杆菌破壁离心,取上清过柱子,纯化酶,但是酶活非常低甚至没有了,正在找问题,请各位大神指教啊,(1)用来破壁的液体,一般要用pbs缓冲液嘛,ph多少的,pbs里面要加氯化钠嘛,一般ph是多少?(2)我上的镍柱,结合液是20mmol/L的pbs.ph值为7.4的,里面还加了0.5mlo/L的氯化钠,5mmol/L的咪唑。洗脱液是20mmol/L的pbs.ph值为7.4的,里面加了0.5mlo/L的氯化钠,500mmol/L的咪唑,我这个有没有问题呀。(3)我当时透析用的水,透析了30小时吧,用的转子,里面加的冰,换了4次水,是不是应该也要用缓冲液透析呢,用pbs嘛,那这里面不需要加盐吧。(4)我们这个酶用来降解的物质会跟pbs还有盐酸反应,我也担心测酶活时会受缓冲液影响。请各位大神指教啊(5)这个破壁用的以及透析用的缓冲液需要灭菌或除菌嘛,一般都怎么操作
维纳斯是古希腊神话中爱与美的化身,断臂的维纳斯则是在米洛斯岛上出土的希腊女神像。哪脍炙人口的故事我们家喻户晓啊,那失去的双臂正浓浓地散发着种难以准确描绘的神秘气氛,或者可以说,正深深地孕育着具有多种多样可能性的生命之梦。换言之,米洛斯的维纳斯虽然失去了两条由大理石雕刻成的美丽臂膊,却出乎意料地获得了一种不可思议的抽象的艺术效果,向人们暗示着可能存在的无数双秀美的玉臂。这也正符合了中国古代的一中艺术创作方法“虚实相生”,比如 “深山藏古寺”和“赏花归来马蹄香”这两幅画。 当然,此次独一无二,花钱都买不上的这套精美茶具,被那可恶的快递公司无意中“亵渎”了一下,就让那具有核心力量,具有过滤“杂质”的漂亮无比的茶漏子破损了,试想,哪茶漏具有一定的核心技术,虽然破损,我仔细端详N秒钟静默无语,看哪只能透过水的,但眼睛却看不到的透明缝隙,看那独具匠心的设计,我只能展开丰富的想象力复原她美貌的样子,可惜碎片太多,不慎伤手就得不偿失了,因此,对快递那外包装看似完好无缺,里面却有核心破损的隔山打牛的功力是佩服至极啊。断臂维纳斯除了她的"缺陷"而形成的无尽的,幻化的有而生美的原因之外,她美的原因还在于她的沉默和微笑,"沉默是金"这话没错,它应该是相对于"言多必失"的,微笑,当然是世界上最美的笑容。现在上图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202220955_350465_1751239_3.jpg(小心翼翼的取出那包装完美的,我等待已久的、摄人心魄的精美茶具,隔着漂亮环保袋的下方,有种雾里看花的感觉吧?哈哈,美女隔层纱让各位欣赏了http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09506.gif)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202220955_350466_1751239_3.jpg(去掉安普的漂亮的环保袋,看到了包装盒的庐山真面目,此时,不为封面的美女所迷惑,我更期待里面那静躺几日,却颠沛流离的、一级水解玻璃造就的、品味人生的一套独具匠心的茶具) 我就如轻抚婴儿,或者说情人般的温柔来打开了包装盒,并小心翼翼地去掉了安普老师精心包装的各个部分,开始取出来的是四个茶杯,我轻轻的放在地板上,接下来取出的是四个没有一丝杂质的玻璃托盘,都完美无缺,我兴奋啊,也暗自庆幸,这次安普老师包装如此完美,加上快递的给力,应该都是完好的,从而对快递也稍微给了点好感。我继续小心,再小心的取出茶盖,完好无缺,可以看到茶壶也是好的,这时,更是喜上加喜啊,因为安普吴老师多次短信咨询,我也焦急等待,最后一个,哪就是用纸完全裹住的一个包装,我慢慢的、小心的拆开纸,当头棒喝,我傻了,这个,这个,这个不是茶漏吗?哪个独具匠心的特有技术含量的设计,怎么就破损了呢?此时对快递的所有好感都一扫而光。此时,我立即短信通知了吴老师,告知了这个情况,我说过会儿上传照片,特别感谢吴老师。他回信说:“说没关系,我会补发”,也许这就是安普精神,一丝不苟为客户的精神,值得钦佩!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202220957_350467_1751239_3.jpg(按照取出的先后顺序,我将精美无比的差距摆放到地面上,这就叫做“全家福”吧,一切都是这一点点的缺憾,这个……,就这么破损了??http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09508.gif可恶的快递公司http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09504.gif)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202220957_350468_1751239_3.jpg(因为在“全家福”里,她显得格格不入,她黯然神伤,http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09508.gif这不是她的错,因为她是核心技术,她负责过滤,她作用巨大,为什么会如此?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif这一切都是快递的错,才让她缺憾,虽然碎片全在,却生命已逝……http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09509.gif) 我们看见断臂维纳斯的塑像,顿生感动和感慨。感叹哪个残缺的美,不是因为她真的美,而是留给人们想象的空间,为什么会残缺,肯定有一段很凄美的故事,也仅仅是这样,才比完美更能震慑心灵。天有阴晴圆缺,地有旱涝冰雹,人有旦夕祸福,这个不完美的世界包含这样那样的太多的残缺!有的人身体是残缺的,有的人生活是残缺的,有的人事业是残缺的。残缺就像空气中的有害气体,无处不在。但谁又能拒绝呼吸它呢? 这次的茶具包装,安普的老师可以用完美来赞誉,但是为什么最后的茶漏却出现断垣残壁的现象?令人深思,客观的分析,找出问题的原因:一、运输有“暴力”倾向,当然途中搬运过程中的不经意和路途颠簸可能性更大,如果暴力稍大,那么其余的估计也没有完美之躯,唯独漏子残破,也有可能是她的构造决定的;二、茶漏子本身的结构决定了她的包装要与众不同,从包装盒彩图可以看出她的面貌,曲线玲珑,薄厚不一,因此稍微受外力就会让她破损,因此,在这个家族中,她的包装也要与众不同,也许这是破损原因之一;三、玻璃器皿本身容易破碎,这在平时购买实验室用品时经常发生,尤其像以前购买的测砷的发生器就如此,价格昂贵,但本身曲线玲珑,结构复杂,薄厚不一,不适宜包装运输,容易破损,和茶漏很相似,因为都凹凸有致。 当然,这是我个人的揣测而已,仅供参考。生活中,残缺的例子比比皆是。当然,我们人人都希望完美,都不愿意看到残缺。可是,已经发生了,也要正确面对。也只能用阿Q的精神来安慰安慰自己,维纳斯在残缺中面带微笑,创造了奇迹,折射了美丽!此次茶具中茶漏的残缺已经更加残缺,已经被丢弃到了垃圾桶里,她残缺得无法弥补,不管如何,一个人或一件事、一个故事就在残缺里结束了。(就此搁笔,各位研讨,我就不灌水了)
[b]问题:[b][b][b][/b][/b]艾司奥美拉唑镁肠溶片的检测,流动相是?[/b]答案:流动相: A:水-磷酸盐缓冲溶液-乙腈(80:10:10) B:乙腈-磷酸盐缓冲溶液-水(80:1:19)=======================================================================【活动内容】1、每个工作日上午10:00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题,版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15:10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖:抽奖软件,当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号(最后一个ID号,截止至下午15:00),每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color](抽奖人数≤10,抽取3个版友;抽奖人数>10,抽取5个版友);中奖名单:lijing320323(注册ID:lijing320323)999youran(注册ID:999youran)dahua1981(注册ID:dahua1981)PAEs(注册ID:v2911392)吕梁山(注册ID:shih20j07)[img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809041504163298_6848_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809041504189792_3148_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励:所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color](幸运奖获得者除外)。【注意事项】同样的答案,每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS:该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”,回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容,无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除,即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法:HPLC基质:药品应用编号:103783化合物:艾司奥美拉唑色谱柱:[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-855.html]Platisil ODS 5μm 250 x 4.6mm[/url]样品前处理:有关物质供试品:精密称取20mg样品置于100mL容量瓶中,加10mL甲醇,振摇,加20mL磷酸盐缓冲溶液(每1000mL水中加入磷酸钠0.0137mol和磷酸氢二钠0.0551mol),超声使其溶解,用水稀释到100mL,混匀,过滤,取续滤液。色谱条件:色谱柱: Platisil ODS 250*4.6 mm,5 μm(Cat#:99503)流动相: A:水-磷酸盐缓冲溶液-乙腈(80:10:10) B:乙腈-磷酸盐缓冲溶液-水(80:1:19)磷酸盐缓冲溶液:1000mL水+磷酸二氢钠0.0052mol+磷酸氢二钠0.0315mol流速: 1.0 mL/min柱温: 30 ℃检测器: 302nm进样量: 20uL文章出处:天津应用实验室关键字:艾司奥美拉唑镁肠溶片、Platisil ODS、99503、HPLC摘要:Platisil ODS检测艾司奥美拉唑镁肠溶片。图谱:[img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2017/01/05/1483598227111770.jpg[/img][img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2017/01/05/1483598227527569.jpg[/img][img]http://www.dikma.com.cn/u/image/2017/01/05/1483598227109068.jpg[/img]