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[align=center][b]尿液中新蝶呤和生物喋呤的检测[/b][/align]蝶呤类化合物属于蝶啶衍生物,是一种碱性物质,包括新蝶呤、生物蝶呤、黄蝶呤等,主要存在于人体的体液中。其中,新蝶呤(neopterin,NP)和生物碟呤(biopterin,BP)是体内三磷酸鸟苷(GTP)的代谢产物,用于多种疾病的辅助诊断,还与体内的苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸的代谢有关,BP缺乏会引起苯丙氨酸代谢紊乱和神经递质的改变,尤其在鉴别新生儿高苯丙氨酸血症分型时,尿液中的蝶呤含量起到关键作用。因此,有效分离分析尿液中的NP和BP具有很重要的临床意义。实验原理尿液中的NP和BP均以还原态和氧化态的形式混合存在,还原态的NP和BP没有荧光吸收,因此在测定前需先用碘氧化尿样,把还原态的NP和BP转化为氧化态再稀释上机测定。[b]色谱条件色谱柱:Kromasil Eternity XT C18(4.6×250mm,5μm)[/b]柱温箱温度:22℃波长:Ex=350nm,Em=460nm流动相:甲醇:水=10:90(V/V)流速:0.6 ml/min(其中4-11min时流速为1.0 ml/min)进样体积:20μL采集时间:20min[img=,554,241]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811051427358781_1429_2428063_3.jpg!w554x241.jpg[/img]图1:NP(1.0 μg/mL)与BP(1.08 μg/mL)标准品混合溶液色谱图[img=,554,240]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811051427543231_6823_2428063_3.jpg!w554x240.jpg[/img][b]总结[/b]尿液中的蝶啶衍生物较多,容易干扰NP和BP的检测。因此将NP和BP与其他蝶啶类衍生物分离至关重要。样本经前处理后,采用Kromasil Eternity XT C18色谱柱分离尿液中的NP和BP,具有很好的分离度(R1.5),可消除尿液中杂质对NP和BP的干扰,实现样品的精确分析。[b]Kromasil Eternity XT系列的色谱柱耐pH范围1-12,对复杂生物样品的分离分析具有重要意义。[/b]注:由深圳爱湾医学检验实验室验证
摘要:本文介绍了分子伴侣的基本概念,以及分子伴侣的几种主要类型;简要说明了蛋白质折叠的概念及特点;在此基础上,进一步阐述了分子伴侣的功能,并以GroEL和GroES为例简述了分子伴侣在蛋白质折叠过程中的作用机理。最后介绍了分子伴侣概念的延伸,及其研究意义和展望。关键词:分子伴侣 蛋白质折叠 折叠病 20世纪60年代,人们就发现了由于组成蛋白质的氨基酸错误可以导致分子病,后来人们发现,即使一级结构正常,蛋白质的二级结构乃至立体结构异常也可导致疾病,即蛋白质折叠病,如疯牛病、老年性痴呆、囊性纤维性炎等。蛋白质折叠病的发现激励人们去寻找蛋白质折叠的分子机理,近年来研究中发现,分子伴侣在在蛋白质折叠中起重要作用。1分子伴侣简介1.1分子伴侣的基本概念分子伴侣(Molecular Chaperone),也有人翻译为“分子伴娘”。1978年,Laskey等首先用“分子伴侣”描述核质素(nucleoplasmin)在核小体组装过程中的作用。1987年,Ellis将凡能促进蛋白质折叠和组装的蛋白质统称为分子伴侣。随后,Ellis等又提出了分子伴侣的基本概念:在蛋白质折叠和组装过程中,分子伴侣防止多肽链内或链间因疏水键等相互作用表面瞬间暴露而形成错误结构,并且还可以破坏已经形成的错误结构。分子伴侣本身不是折叠或组装产物的一部分。1.2分子伴侣的几个例子Nucleoplasmins:体内的一系列过程,如DNA复制,RNA转录与剪接,核小体或核糖体的装配,都涉及到带正电的蛋白质与带负电的核酸之间较强的离子键的相互作用。实验发现,这些过程都与Nucleoplasmin相类似的蛋白质的参与。Charperonin(Cpn):是指在细菌、线粒体、质体中发现的一类序列同源的Charperonins,该家族具有独特的双层7-9元环状结构的寡聚蛋白(Hemminngwen;cheng 1998),它们的作用是促进体内正常条件以及应急反应下的蛋白质折叠,这一过程需要ATP提供能量。Cpns包括细菌的GroEL、叶绿体的Rubisco亚基结合蛋白(RuSBP)与线粒体的热休克蛋白Hsp60。Stress-70家族:该家族首先在热休克反应中发现,并研究多年,近些年来,发现Stress-70也在蛋白质的折叠与装配过程中起作用,因而受到广泛关注。参与这些作用的Stress-70的成员有:E. coli的DnaK、酵母细胞质的Ssa1p和Ssa2p、内质网的Kar2p和线粒体的Ssc1p。哺乳动物细胞质的Hsp70蛋白和Prp73多肽识别蛋白、内质网的Bip。这些蛋白可被细胞内未折叠蛋白质的增多而诱导并识别靶分子,在其他热休克蛋白或细胞因子的参与下,水解ATP调节蛋白的构象或折叠状态。Stress-90家族:分子量在90ku左右,包括大肠杆菌胞
[align=center][font=DengXian]维生素[/font]B11([font=DengXian]叶酸[/font])[/align][font=DengXian]绿色蔬菜和动物肝脏中富含叶酸,乳中含量较低。蔬菜中的叶酸呈结合型,而肝中的叶酸呈游离态。人体肠道中可合成部分叶酸。[/font][font=DengXian]分子结构中含有蝶啶、对氨基苯甲酸和[/font]L-[font=DengXian]谷氨酸三部分。[/font][font=DengXian]叶酸缺乏时,脱氧胸苷酸,嘌呤核苷酸的形式及氨基酸的互变受阻,细胞内[/font]DNA[font=DengXian]合成减少,细胞的分裂成熟发生障碍,引起巨幼红细胞性贫血。[/font] [font=DengXian]小肠疾病能干扰食物叶酸的吸收和经肝肠循环的再循环过程,故叶酸缺乏是小肠疾病常见的一种并发症。[/font]