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http://file1.foodmate.net/file/upload/201202/17/16-21-31-65-410687.jpg关于对《木聚糖酶》行业标准征集意见的通知 附件: http://www.foodmate.net/member/fckeditor/editor/images/ext/zip.gif 木聚糖酶征求意见稿.zip
之前,小编采用几丁质作为载体固定化PPL,但是固定化后的PPL没有活性,这次换了一种类似的载体,而这次奇迹粗线了,终于测出了酶活,特此在这里跟大家一起分享。1.实验部分壳聚糖可溶于稀的盐酸,稀的醋酸等,实验选用稀的醋酸来溶解壳聚糖。壳聚糖小球的制备称取不同质量的壳聚糖粉末,加入到一定体积的含1.5%(V/V)醋酸溶液中,在40℃下搅拌2小时,使壳聚糖粉末完全溶解,得到澄清透明的像胶水一样的粘稠液体。配制1mol/L的NaOH溶液,其中含30%的甲醇。待壳聚糖溶液冷却至室温时,用注射器吸取壳聚糖溶液,逐滴加入氢氧化钠-甲醇溶液中,同时轻轻搅拌,使壳聚糖小球析出,形成白色半透明的壳聚糖小球。滴完后,倒掉碱液,将壳聚糖小球用大量纯水冲洗,直至洗液呈中性。再将壳聚糖小球浸泡在纯水中,于冰箱上层保存。壳聚糖小球的活化称取1g壳聚糖小球(湿重),用4ml含不同质量浓度的戊二醛,0.02mol/L的pH=8.0的磷酸钾缓冲溶液,在25℃下,于恒温摇床中以200rpm的转速活化4h。将活化好的壳聚糖小球用大量的纯水进行冲洗,直至没有戊二醛残留。洗好后,将小球浸泡在纯水中,置于冰箱上层保存。PPL的固定化 称取1g活化的壳聚糖小球(湿重)于10ml的烧瓶中,加入2ml通过双水相纯化过的PEG层的PPL,于摇床中4℃,200rpm进行固定化。将PPL固定化一定时间后,取出小球,用适量pH=7.0的0.1mol/L磷酸钠缓冲溶液洗去其表面残留的蛋白质,测试洗液的蛋白含量,以及固定化PPL的酶活。2.结果与讨论2.1 壳聚糖浓度的选择通过大量查阅文献以后,决定用1.5%的醋酸溶解壳聚糖。实验考察了不同壳聚糖浓度,对壳聚糖小球成球的影响,以及制作出的小球经过不同戊二醛浓度活化以后固定PPL的能力。壳聚糖含量NaOH-CH3OH成球情况1.0%1M是1.5%1M是2.0%[font='Ti
【序号】:1【作者】: 陈江燕邬国铭【题名】:纤维素酶对壳聚糖降解作用的研究【期刊】:广东医学院学报【年、卷、期、起止页码】:2003年02期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2003&filename=GDYY200302005&v=MDk1MDV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNtVmIzQklpblNkN0c0SHRMTXJZOUZZWVI4ZVgxTHU=【序号】:2【作者】: 刘天富戚秋鹏【题名】:不同取代度的羟丙基壳聚糖生物降解性研究【期刊】:中国海洋药物【年、卷、期、起止页码】:2004年01期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFD2004&filename=HYYW200401008&v=MDg4MTQzbVc3ckxMVFRTZWJHNEh0WE1ybzlGYklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnk=【序号】:3【作者】: 新型【题名】:天津工业生物所壳聚糖酶酶解机制研究取得新进展【期刊】:化工新型材料【年、卷、期、起止页码】:2016年08期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2016&filename=HGXC201608100&v=MTcwNTVGWklSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMMmZaZVJvRnkzblVMdk5MU3JUYmJHNEg5Zk1wNDU=【序号】:4【作者】: 杨贵杰高星爱【题名】:壳聚糖降解酶及伽马辐射降解壳聚糖的研究概述【期刊】:安徽农学通报【年、卷、期、起止页码】:2014年22期 【全文链接】:http://kns.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?dbcode=CJFQ&dbname=CJFDLAST2015&filename=AHNB201422016&v=MjE4NzRxVHJXTTFGckNVUkwyZlplUm9GeTNuVzd2T0pDWEZiTEc0SDlYT3JZOUVZb1I4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDM=