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标准显微物镜

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标准显微物镜相关的论坛

  • 显微镜知识--显微镜物镜分类

    物镜是显微镜的核心光学部件,各个厂家其型号和规格名目繁多,下面来介绍一下分类,供大家参考。大致可以有以下四种分类方式: 1.按色差校正程度分类 (1)一般消色差物镜:这是最常见的物镜,尽管各厂家的标示不一样,但一般都有“Ach”字样。 (2)平场消色差物镜:一般这种物镜标有PLAN字样,这种物镜的视场平坦,非常适合显微照相,观察起来也比较舒适。(3)半复消色差物镜,一般带有FL字样,能校正红、兰两色的色差和球差。这种可用于荧光观察等,是比较高级的物镜。 (4)复消色差物镜:标有APO字样,是观察和显微照相用的一流物镜,它们的性能只受物理定律的限制。该物镜具有优良的修正性和极其高的数值孔径,所以在观察和显微照相术方面具有最大的分辨率、色彩纯度、对比度以及图象平直度。如奥林巴司 UPLAN SAPO 100X/1.40 OIL物镜。 2.按功能分类(1)相差物镜(Phase contrast),用来观察无色透明的标本或活细胞,倒置显微镜上使用广泛,一般带有PH标志,且字体用绿色。(2)DIC物镜,可以做DIC的物镜,一般要求半复消色差物镜,DIC观察无色样品或或细胞。(3)HMC物镜,标有HMC标志,一种类似相差物镜的物镜,观察效果有立体感比较强,但不能用于荧光观察。(4)偏光物镜,一般标有POL字样,这种物镜装配了克服应力设备,是专做偏光的物镜。(6)多功能物镜,有的厂家生产一种多功能物镜,比如可以同时做相差,DIC,荧光等,这种物镜要稍微贵些。一般带有U标志,比如奥林巴斯的”UPLFLN”物镜和蔡司的”EC PLAN –NEOFLUAR”系列物镜。 3.按工作距离分类 (1)普通物镜:工作距离可以看切片,但不能看培养皿。 (2)长工作距离物镜:一般有LD标志,例如奥林巴斯的LUCPLFLN-PH物镜和蔡司的LD-A-PLAN PH物镜。 这些物镜可以用于培养皿、培养瓶等容器的观察。工作距离高至10.6mm,并可以进行光学修正,适用于0~2mm厚度的盖玻璃,通常由修正环或特殊的玻璃盖帽完成修正。4.特殊用途物镜 (1)水浸式物镜,一般有W标志,这些水浸入式物镜同直立显微镜一起主要应用于生理学,如脑片等较厚样品的观察。奥林巴斯XLUMPLFL20×W 和蔡司ACHROPLAN 40X W都是浸水式物镜。 (2)TIRF用专用物镜,要求数值孔径要大,NA一般在1.45到1.65。如NIKON公司的APO TIRF 60X 1.49物镜。 (3)超级荧光物镜:这种物镜的荧光透过率非常高,物镜用于对离子位移进行定性和定量的分析以及用于特别关键的荧光技术(如人体染色体的研究以及细胞遗传学)。这些物镜的突出特点是它们对340nm起的波长有特别高的数值孔径和高传输率(340nm时约为70%!)。视场平直足以可以使用CCD相机。如蔡司的FLUAR 20X 物镜。 当然还有其他更特殊的物镜,比如金相显微镜用的无盖玻片物镜和反射暗视野物镜、超低倍物镜等。 5.物镜上有很多的参数标记,来帮助大家识别物镜的等级和功能。下面用NIKON的一款物镜做例子以解释物镜的重要参数: (1) NIKON ---制造商名称: 尼康公司 (2) PLAN APO---物镜的名称: 平场复消色差物镜 (3) 60X 放大倍数: 60倍 (4) 0.95 数值孔径: 0.95 (6) DIC M 功能: 可以做DIC (7) ∞/0.11-0.23 表示无限远筒长/盖玻片厚度 (8) WD 0.15 表示工作距离 d 物镜利用光线使被检物体第一次成像,因而直接关系和影响成像的质量和各项光学技术参数,是衡量一台显微镜质量的首要标准。所以在选择显微镜时不仅仅要选择主机的型号,也一定要仔细选择物镜,结合自己的实际用途考虑合适的物镜等级和功能.这样您就能买到称心的产品了.

  • 金相显微镜的作战利器--特种物镜

    所谓"特种物镜"是在金相显微镜的其他一般物镜的基础上,专门为达到某些特定的观察效果而设计制造的。主要有以下几种:   (a)带校正环物镜(Correctioncollarobjective)   在物镜的中部装有环装的调节环,当转动调节环时,可调节物镜内透镜组之间的 距离,从而校正由盖玻片厚度不标准引起的覆盖差。调节环上的刻度可从0.11--.023,在物镜的外壳上也标科有此数字,表明可校正盖玻片从0.11-0.23mm厚度之间的误差。大多金相显微镜都可配备。  (b) 带虹彩光阑的物镜(Iris diaphragm objective)  在物镜镜筒内的上部装有虹彩光阑,外方也可以旋转的调节环,转动时可调节光阑孔径的大小,这种结构的物镜是高级的油浸物镜,它的作用是在暗视场镜检时,往往由于某些原因而使照明光线进入物镜,使视场背景不够黑暗,造成镜检质量的下降。这时调节光阑的大小,使背景变黑,使被检物体更明亮,增强镜检效果。这在微分干涉显微镜,粒子显微镜等配备较多。  (c) 相衬物镜(Phase contrast objective)  这种物镜是由于相衬镜检术的专用物镜,其特点是在物镜的后焦平面处装有相板。   (d) 无罩物镜(No cover objective)  有些被检物体,如涂抹制片等,上面不能加用盖玻片,这样在镜检时应使用无罩物镜,否则图象质量将明显下降,特别是在高倍镜检时更为明显。这种物镜的外壳上常标刻NC,同时在盖玻片厚度的位置上没有0.17的字样,而标刻着"0"。   (e) 长工作距离物镜  这种物镜是倒置显微镜的专用物镜,它是为了满足组织培养,悬浮液等材料的镜检而设计。  配置特种物镜的金相显微镜价格变化不大。

  • 光学显微镜物镜基础知识

    物镜((objective)对于传统显微镜来说应算最贵重的部件。一只高性能物镜的价格占这类显微镜本身的1/3-1/2。因为显微镜的最基本性能—成像和分辨本领决定于物镜。为了消除成像过程中的球面差和色差、物镜的透镜组由单透镜发展为许多层次的复合透镜组.由3-4透镜已增加到7-9片透镜或透镜复合体。物镜的镜体上都刻有物镜的性能,物镜的镜口率、放大倍数以及特殊物镜的标记字样。 消色差物镜的外壳上刻有英文,德文,法文Achromat字样或俄文AXP字样。这种物镜能够消除光谱中的红光和青光所造成的色差而不能消除其他色光形成的色差。 复消色差物镜是性能最好,价格最贵的物镜.其外壳上刻有英、德、法文Apochromat 字样或俄文字样。其透镜质料好,透镜组层次最多,组合得精确能够消除红光、黄光、蓝光造成的色差。这种物镜配用补偿目镜时能够发挥光学显微镜的最高性能。 荧石物镜外壳刻有英、德、法文Fluormat(或Flur)字样.这是能透过紫外光的专用于荧光显微镜的物镜。如果当普通物镜使用,则分辨率太低. 平像场系列物镜刻有Planochromat字样。Opton公司出售的有平像场荧石消色差物镜(Plan-Neofluor),平像场复消色差物镜(Plan-Achromat),平像场荧石消色差偏光物镜(Plan-Neofluor pol)等。 相差显微镜必须配备相差物镜.这种物镜刻有英、德、法文Pha或俄文0字样。单色物镜(monochromat)是全部透镜用融熔水晶制成的贵重物镜。这种物镜是透过紫外线的专用于紫外光干涉显微镜或用于紫外光显微分光光度计上。如果这种物镜不能到手时,可用复消色差物镜代替。 带有可变光栏的物镜的镜体上装有螺纹转动圈。转动圈的标号可移动在0.5-1.0之间.这种物镜是适用于暗视野显微镜.倒置显微镜的物镜是长焦距物镜。其他种类的物镜焦距短要求盖玻片的厚度不能过大(ti I 7pm)。倒置显微镜的物镜可以观察培养瓶壁上的贴壁生长细胞。

  • 显微镜物镜的分类和用途知识

    物镜是显微镜的核心光学部件,各个厂家其型号和规格名目繁多,下面来介绍一下分类,供大家参考。大致可以有以下四种分类方式: 1.按色差校正程度分类 (1)一般消色差物镜:这是最常见的物镜,尽管各厂家的标示不一样,但一般都有“Ach”字样。 (2)平场消色差物镜:一般这种物镜标有PLAN字样,这种物镜的视场平坦,非常适合显微照相,观察起来也比较舒适。 (3)半复消色差物镜,一般带有FL字样,能校正红、兰两色的色差和球差。这种可用于荧光观察等,是比较高级的物镜。 (4)复消色差物镜:标有APO字样,是观察和显微照相用的一流物镜,它们的性能只受物理定律的限制。该物镜具有优良的修正性和极其高的数值孔径,所以在观察和显微照相术方面具有最大的分辨率、色彩纯度、对比度以及图象平直度。如奥林巴司 UPLAN SAPO 100X/1.40 OIL物镜。

  • 显微物镜的景深问题

    我需求一种显微镜物镜放大倍数5-10倍之间,景深能达到100-200微米之间,工作距离能在3毫米以上,是否能有达到我的要求的物镜?

  • [ 国家标准物质网 ] 光学显微镜的使用常识

    [ [url=http://www.bzwz.com]国家标准物质网[/url] ] 光学显微镜是一种常用的显微镜产品,可以把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,以供人们提取微细结构信息的光学仪器。今天我们主要来介绍一下光学显微镜的使用常识,希望可以帮助用户更好的应用产品。一、 正确安装的问题使用显微镜前,首先要把显微镜的目镜和物镜安装上去。目镜的安装极为简单,主要的问题在于物镜的安装,由于物镜镜头较贵重,万一学生安装时螺纹没合好,易摔到地上,造成镜头损坏,所以为了保险起见,强调学生安装物镜时用左手食指合中指托住物镜,然后用右手将物镜装上去,这样即使没安装好,也不会摔到地上。二、正确对光的问题对光是使用显微镜时很重要的一步,有些学生在对光时,随便转一个物镜对着通光孔,而不是按要求一定用低倍镜对光。转动反光镜时喜欢用一只手,往往将反光镜扳了下来。所以教师在指导学生时,一定要强调用低倍镜对光,当光线较强时用小光圈,平面镜,而光线较弱时则用大光圈,凹面镜,反光镜要用双手转动,当看到均匀光亮的圆形视野为止。光对好后不要随便的移动显微镜,以免光线不能准确的通过反光镜进入通光孔。三、正确使用准焦螺旋的问题使用准焦螺旋调节焦距,找到物象可以说是显微镜使用中最重要的一步,也是学生感觉最为困难的一步。学生在操作中极易出现以下错误:一是在高倍镜下直接调焦 二是不管镜筒上升或下降,眼睛始终在目镜中看视野 三是不了解物距的临界值,物距调到 2 ~ 3 厘米时还在往上调,而且转动准焦螺旋的速度很快。前两种错误结果往往造成物镜镜头抵触到装片,损伤装片或镜头,而第三种错误则是学生使用显微镜时最常见的一种现象。针对以上错误,教师一定要向学生强调,调节焦距一定要在低倍镜下调,先转动粗准焦螺旋,使镜筒慢慢下降,物镜靠近载玻片,但注意不要让物镜碰到载玻片,在这个过程中眼睛要从侧面看物镜,然后用左眼朝目镜内注视,并慢慢反向调节粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看到物像为止,同时向学生说明一般显微镜的物距在 1 厘米 左右,所以如果物距已远远超过 1 厘米 ,但仍未看到物象,那可能是标本未在视野内或转动粗准焦螺旋过快,此时应调整装片位置,然后再重复上述步骤,当视野中出现模糊的物象时,就要换用细准焦螺旋调节,只有这样,才能缩小寻找范围,提高找到物象的速度。四、物镜转换的问题使用低倍镜后换用高倍镜,学生往往喜欢用手指直接推转物镜,认为这样比较省力,但这样容易使物镜的光轴发生偏斜,原因是转换器的材料质地较软,精度较高,螺纹受力不均匀很容易松脱。一旦螺纹破坏,整个转换器就会报废。教师应指导学生手握转换器的下层转动扳转换物镜。五、光学玻璃清洗的问题光学玻璃用于仪器的镜头、棱镜、镜片等。在制造和使用中容易沾上油污、水湿性污物、指纹等,影响成像及透光率。清洗光学玻璃,应根据污垢的特点、不同结构,选用不同的清洗剂,使用不同的清洗工具,选用不同的清洗方法。清洗镀有增透膜的镜头,如照相机、幻灯机、显微镜的镜头,可用 20% 左右的酒精和 80% 左右的乙醚配置清洗剂进行清洗。清洗时应用软毛刷或棉球沾有少量清洗剂,从镜头中心向外做圆运动。切忌把这类镜头浸泡在清洗剂中清洗,清洗镜头时不要用力擦拭,否则会损伤增透膜,损坏镜头。摘自:[url=http://www.bzwz.com]国家标准物质网[/url]

  • 望远镜和显微镜的目镜及物镜焦距的长短区别

    显微镜的物镜组和目镜组都相当于凸透镜。先说物镜: 物镜的物(载玻片)处于物镜的1倍和2倍焦距之间,物镜所成的像是倒立放大实像,处于物镜2倍焦距以外,但在目镜之前。由此可见,显微镜调整清晰后,通过观察物镜离载玻片的距离,就可以得出物镜的大致焦距。也就是说,物镜的焦距大致略小于载玻片到物镜组的组合中心的距离。而且越是放大倍数高的物镜,焦距越短,物镜离载玻片越近。再说目镜: 目镜的焦距较长。物镜所成的实像就是目镜的实物,这个实物位于目镜前1倍焦距以内靠近焦点的位置。目镜所成的是正立放大的虚像。因为此前物镜所成的像已经倒了,所以现在正立放大的像对于载物台上的真实物体而言就是倒的。 由于镜筒、物镜、目镜固定,所以我们调节镜筒的上下时,实际就是调节物镜所成的倒立放大实像在镜筒中的位置,当镜筒向载物台靠近时,倒立放大实像朝镜筒外移动(即远离物镜的方向),反之相反。当倒立放大的实像正落在目镜的观察点时,目镜才能成像清晰。

  • 【求助】显微镜物镜的清洗

    请教一下各位: 我们的显微镜物镜(40倍),镜头上有一个脏污,估计是在里面。我们使用了乙醇+乙醚混合后清洗,洗不掉。1.是不是只有找专业机构帮助处理? 2.能用超声波清洗器吗?会不会损坏啊?

  • 【求助】激光共聚焦显微镜物镜的选择问题

    [em09511]向各位求助:倒置显微镜实验用途:一方面做细胞的多组对照观察研究 另一方面做组织切片形态观察研究问题:激光共聚焦扫描显微镜的六个物镜该如何配置 比较好? 能否提个建议。。。 我正考虑油镜和水镜以及长工作距离物镜的取舍问题请大家多多提议,谢谢

  • 显微镜物镜转换器、粗调、微调的故障及解决方法

    显微镜物镜转换器的主要故障是定位装置失灵。一般是定位弹簧片损坏,如变形、断裂、失去弹性、弹簧片的固定螺钉松动等导致,更换新弹簧片时,暂不要把固定螺钉旋紧,先作光轴校正。等合轴以后,再旋紧螺丝。显微镜物镜若是内定位式的转换器,则应旋下转动盘中央的大头螺钉,取下转动盘,才能更换定位弹簧片,光轴校正的方法与前面相同。 显微镜粗调的主要故障是自动下滑或升降时松紧不一。导致显微镜粗调的主要原因是镜筒、镜臂、载物台本身的重力大于静摩擦力引起的。解决的办法是增大静摩擦力,使之大于镜筒或镜臂本身的重力。对于显微镜斜筒及大部分双目显微镜的粗调机构来说,当镜臂自动下滑时,可用两手分别握往粗调手轮内侧的止滑轮,双手均按顺时针方向用力拧紧,即可制止下滑。如不凑效,则应找专业人员进行修理。 显微镜的微调部分最常见的故障是卡死与失效。微调部分安装在显微镜内部,其机械零件细小、紧凑,是显微镜中最精细复杂的部分。显微镜的微调部分故障应由专业技术人员进行修理。没有足够的把握,不要随便乱拆。显微镜聚光器升降机构的主要故障也是自动下滑,直筒显微镜聚光器解决方法是一只手用双眼螺母扳手插入手轮端面上的双眼螺母内,另一只手用螺丝刀插入另一端的大头螺钉槽口内,用力旋紧即可制止下滑。

  • 【求助】显微镜加辅助物镜工作距离怎么解决

    我有一批显微镜,因为达不到要求的放大倍数,加了2倍的辅助物镜后工作距离太低,只能达到10mm左右,按说明是可以达到30mm的。请大虾指点一下,这是选配辅助物镜错了呢,还是其他原因?谢谢!工作愉快!![em61]

  • [求助]急求教,10x生物显微镜物镜是否少一块镜片?

    我刚买了一个生物显微镜,刚收到,物镜是无限远平场消色差的,4个物镜分别是4X、10X、40X、100X OIL。检查发现其它3个物镜上下两头看都有镜片惟独10X那个只有靠玻片那头有镜片而靠转换盘这头没有,上切片观察各镜头图象又好象正常视野大小变化也合理。请问有问题吗?10X物镜是只有一端有镜片吗?急,在线等!请各位大侠帮忙。

  • 0.01mm物镜测微尺与10X分划目镜的用法

    一、概念: 0.01mm物镜测微尺为格值0.01mm的玻璃尺。10X分划目镜(即目镜测微尺)由于10X便于计算,故在10X目镜上加十字分划板构成10X分划目镜,其格值为0.1mm。其X,Y方向均有坐标刻度。 二、物镜实际放大倍数的测量及样品的测量 根据国家标准,显微镜的物镜放大倍数允许有5%的误差,如物镜10X,其实际放大倍数可能为9.9X,9.8X,10.1X等。在进行精确测量时,往往需知道物镜的实际放大倍数。这时可采用下列方法得到: 在载物台上放置0.01mm物镜测微尺,把欲校测的物镜旋入转换器内,并调焦成象清晰。然后用10X分划目镜(内有0.1mm格值的刻尺)观察。例如:PC40X物镜,经0.01mm的格值放大后在目镜刻尺上量度,若正好放大成0.4mm,则正好是40X,实际测量并不是1小格(0.01mm)为一量度单位,而应以5格或10格(低倍时,甚至50格或者100格)为一量度,以消除测量误差。如PC10X物镜经50个0.01mm格值放大成49个0.1mm格值后,实际放大倍数为9.8X。然后取下物镜测微尺,放上切片,读出被观察区域在目镜的数值,假设为5个格值,即0.5mm,除以实际放大倍数9.8,得出被观察区域的实际大小为0.051mm。计算公式如下: 被观察区域的大小=被观察区域在分划目镜上的读数/物镜的实际倍数。

  • 【讨论】如何确定显微镜下的视野大小?

    我想知道显微镜下的视野大小,我如何做呢?首先你要确定你所使用的物镜的放大倍数,因为物镜的放大倍数,观察到的视野也会变的,可以用血球计数板来做一个标准(血球计数板上的小格子的距离是固定的)来确定镜下的视野大小。

  • 显微镜物镜油镜和水镜的区别简介

    物镜的分辨率很大程度上取决于物镜的NA值,NA值又受透镜与标本之间介质的折射率的影响。高折射率的介质可以聚集更多的光使图像更亮、更清晰。当使用空气作为透镜和标本之间的介质时,一般低NA值的物镜就可满足要求。但是,高NA值的物镜需要高折射率的介质,那么油可以达到高折射率。当NA值超过1.0时,在聚光镜的顶部透镜载玻片的底部点油可以达到更好的效果。浸油物镜通常会标记 “oil”或“oel”。一些物镜会应用于活体标本的观察,就需要水作为介质。这些物镜通常会标记“WI”。

  • 【分享】显微镜技术原理

    技术原理:微生物个体微小,用肉眼直接观察不到,必须借助显微镜才能观察到他的个体形态和细胞结构。在蛋白质结构等所需对物质的微观结构进行观察的研究中也都会用到各种显微镜。现有的各种显微镜基本上都是由物镜和目镜组成,目镜的焦距很短,目镜的焦距很长,目镜的作用是得到物体放大的实像,目镜的作用是将物镜放大的实像作为物体,进一步放大成虚像。显微镜将物体放大的总倍数是物镜放大倍数乘以目镜放大的倍数。这样虽然目镜和物镜放大的倍数有限,但是显微镜总放大倍数 就非常可观。 仪器结构和分类:普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。早期的显微物镜仅由少数几块透镜组成,难于消除物像的像差和色差。近代的显微物镜已由一套精密磨制的透镜组成,已能较好地消除像差和色差,并能将物体放大1500~2000倍。普通光学显微镜的构造可分为两大部分:即机械装置和光学系统。这两部分很好地配合,才能充分发挥显微镜的作用。1.显微镜的机械装置 显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋和微动螺旋等部件。(1)镜座:镜座是显微镜的基本支架,由底座和镜臂两部分组成。在其上部连接有载物台和镜筒,是用于安装光学放大系统部件的基础。 (2)镜筒:镜筒上接接目镜,下接转换器。形成接目镜与接物镜(装在转换器下)间的暗室。从镜筒的上缘到物镜转换器螺旋口之间的距离称为机械筒长。因为物镜的放大率是 对一定的镜筒长度而言的。镜筒长度的变化,不仅放大倍率随之变化,而且成像质量也受到影响。因此,使用显微镜时,不能任意改变镜筒长度。国际上将显微镜的 标准筒长定为160mm,此数字标在物镜的外壳上。(3)物镜转换器:物镜转换器上可安装3~4个物镜,一般是3个物镜(低倍、高倍、油镜),Nikon显微镜装有4个物镜。转动转换器,可以按需要 将其中的任何一个接物镜和镜筒接通,与镜筒上面的目镜构成一个放大系统。 (4)载物台:载物台中央有一孔,为光线通路。在台上装有弹簧标本夹和推动器。 (5)推动器:是移动标本的机械装置,由一横一纵两个推进齿轴和齿条构成。研究显微镜的纵横架杆上刻有刻度标尺,构成精密的平面坐标系。如需要重复观察已检查标本的某一 物像时,可在第一次检查时记下纵横标尺的数值,下次按数值移动推动器,就可以找到原来标本的位置。 (6)粗调螺旋:粗调螺旋用于粗放调节物镜和标本的距离,老式显微镜粗调螺旋向前扭,镜头下降接近标本。新近出产的显微镜(如Nikon显微镜)镜检时,右手向前扭动使载 物台上升,让标本接近物镜,反之则下降,标本远离物镜。(7)微调螺旋:用粗调螺旋只能粗放地调节焦距,难于观察到清晰的物像,因而需要用微调螺旋做进一步调节。微调螺旋每转一圈镜筒仅移动0.1 mm(100μm)。新近出产的研究显微镜的粗调螺旋和微调螺旋是共轴的。2.显微镜的光学系统显微镜的光学系统由反光镜,聚光器,物镜,目镜等组成,光学系统使标本物像放大,形成倒立的放大物像。

  • 显微镜的使用方法,你造吗?

    传统显微镜的使用方法传统显微镜可用于生物学、细菌学、组织学、药物化学等研究工作以及临床度验之用。具有粗微动同轴的调焦机构,滚珠内定位转换器,亮度可调的照明装置,并带有摄影、摄像接口。传统显微镜具有以下特点:1、无限远光学系统,提供了卓越的光学性能2、创新的物体机构、清晰的标本观察,便捷的操作方式,专为细胞培养观察而量身设计,是常规检查的革新方案。3、无限远平场长工作距离物镜,使得观察标本视野更平坦、亮度更高、反差更强,且更容易观察活细胞的状态。4、配备标准相衬环板,中心可调 ,可观察低反差或透明标本的鲜明图像。使用传统显微镜要注意如何正确对光,正确对光方法如下:⑴转动粗准焦螺旋,使镜筒上升。⑵转动转换器,使低倍物镜对准通光孔⑶转动遮光器,使遮光器上最大的光圈对准通光孔。⑷左眼注视目镜(右眼睁开),转动反光镜,直到看到一个明亮的视野。文章转载于网络更多文章资讯:上海全耀仪器设备有限公司http://www.microimaging.com.cn/

  • 【分享】光学显微镜的使用

    一、显微镜的光学系统 显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光器四个部件。广义的说也包括照明光源、滤光器、盖玻片和载玻片等。 (一)、物镜 物镜是决定显微镜性能的最重要部件,安装在物镜转换器上,接近被观察的物体,故叫做物镜或接物镜。 1、物镜的分类 物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜;其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜(常用放大倍数为90—100倍)。 根据放大倍数的不同可分为 低倍物镜(10倍以下)、中倍物镜(20倍左右)高倍物镜(40—65倍)。 根据像差矫正情况,分为消色差物镜(常用,能矫正光谱中两种色光的色差的物镜)和复色差物镜(能矫正光谱中三种色光的色差的物镜,价格贵,使用少)。 2、物镜的主要参数: 物镜主要参数包括:放大倍数、数值孔径和工作距离。 ①、放大倍数是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。例:放大倍数为100×,指的是长度是1μm的标本,放大后像的长度是100μm,要是以面积计算,则放大了10,000倍。 显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。 ②、数值孔径也叫镜口率,简写N• A 或A,是物镜和聚光器的主要参数,与显微镜的分辨力成正比。干燥物镜的数值孔径为0.05-0.95,油浸物镜(香柏油)的数值孔径为1.25。 ③、工作距离是指当所观察的标本最清楚时物镜的前端透镜下面到标本的盖玻片上面的距离。物镜的工作距离与物镜的焦距有关,物镜的焦距越长,放大倍数越低,其工作距离越长。例:10倍物镜上标有10/0.25和160/0.17,其中10为物镜的放大倍数;0.25为数值孔径;160为镜筒长度(单位mm);0.17为盖玻片的标准厚度(单位 mm)。10倍物镜有效工作距离为6.5mm,40倍物镜有效工作距离为0.48mm 。 3、物镜的作用是将标本作第一次放大,它是决定显微镜性能的最重要的部件——分辨力的高低。 分辨力也叫分辨率或分辨本领。分辨力的大小是用分辨距离(所能分辨开的两个物点间的最小距离)的数值来表示的。在明视距离(25cm)之处,正常人眼所能看清相距0.073mm的两个物点,这个0.073mm的数值,即为正常人眼的分辨距离。显微镜的分辨距离越小,即表示它的分辨力越高,也就是表示它的性能越好。 显微镜的分辨力的大小由物镜的分辨力来决定的,而物镜的分辨力又是由它的数值孔径和照明光线的波长决定的。 当用普通的中央照明法(使光线均匀地透过标本的明视照明法)时,显微镜的分辨距离为d=0.61λ/N• A 式中d——物镜的分辨距离,单位 nm。 λ——照明光线波长,单位 nm。 N• A ——物镜的数值孔径 例如油浸物镜的数值孔径为1.25,可见光波长范围为400—700nm ,取其平均波长550 nm,则d=270 nm,约等于照明光线波长一半。一般地,用可见光照明的显微镜分辨力的极限是0.2μm。

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