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圆盘式破碎机

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圆盘式破碎机相关的论坛

  • 【原创大赛】破碎机研究的目的和意义

    破碎机研究的目的和意义跟着我国国民经济的疾速开展,矿产资源的综合使用技能与其工业迅猛行进,到1999年我国已建成10 879座国有大中型矿山和227854个城镇集体企业,全国矿石采掘总量超越50亿吨,矿业总产值为4000亿元。物料的破碎是许多职业为了节能和进步出产功率,所以提出了“多碎少磨”的技能准则。这使破碎机向细碎、破坏和高效节能方向开展。 别的跟着工业自动化的开展,破碎机也向自动化方向跨进跟着挖掘规划的扩展,破碎机也在向大型化开展,如粗碎旋回破碎机的处置才能已达6000th。至于新原理和新方法的破碎尚在研讨实验中,暂时还不能用于出产。对粗碎而言,当前还没有研制出更新的设备以替代传统的颚式破碎机和旋回式破碎机,主要是使用现代技能,予以改善、完善和进步耐磨性,到达节能、高效、长命的意图。细碎方面新机型更多些。总的来看,值得提出的有:颚式破碎机、圆锥破碎机、冲击式破碎机和辊压机。而使用最广泛的就是鄂式破碎机。器功用,完成了产品的更新换代。 复摆颚式破碎机的组织归于四杆组织中曲柄摇杆组织的使用,曲柄为自动件。颚式破碎机以布局简略、功能牢靠、修理方便在物料破坏职业广泛使用。复摆鄂式破碎机的动鄂,是直接悬挂在偏疼轴上的饿,是曲柄连杆组织,没有独自的连杆。由于动鄂是由偏疼轴的偏疼直接股动,所以活动鄂板可还做笔直和水平的杂乱摇摆,鄂板上各点的摇摆轨道是由顶部的挨近圆形接连改变到下部的椭圆形,越到下部的椭圆形越扁,动鄂的水平行程则由下往上越来越大的改变着,因而对石块不但能起压碎、劈碎,还能起辗碎效果。由于偏疼轴的转向是逆时针方向,动鄂上各点的运动方向都有利于促进排料,因而破碎效果好,破碎率较高、产物粒度均匀且多。 复摆鄂式破碎机和简摆鄂式破碎机相比较,复摆鄂式破碎机的机器分量较轻,布局简略,出产功率较高级长处。但复摆鄂式破碎机的鄂板笔直行程大,石料对鄂板的磨削效果严峻,磨削较快,且能量消耗也大,任务时易发生较多的粉尘。在工程上使用较为广泛的是复摆鄂式破碎机。国产的鄂式破碎机数量最多的也是复摆鄂式破碎机。复摆鄂式破碎机主要由机架、鄂板、侧护板、主轴、飞轮、肘板和调整组织等组成。

  • 【分享】PCZ系列密封锤式破碎机

    PCZ系列密封锤式破碎机  密封锤式破碎机属于劈击式破碎型。依靠转子高速旋转并具有劈击力的锤头对物料进行破碎。整机为密封式制造,避免粉尘污染。依靠转子高速旋转并具有劈击力的锤头对物料进行破碎。整机为密封式制造,避免粉尘污染。PCS型密封锤式破碎缩分机,添加了1/8缩分系统,使物料更均匀。化验更准确,是实验室进行各种物料化验时理想设备。参数型号进料粒度(mm)出料粒度(mm)生产能力(T/h)配套动力(KW) PCZ180×1507060.3-0.51.5PCZ180×360140150.6-1.52.2PCS180×1507060.3-0.51.5

  • 高压细胞破碎机应用

    目前国内对细胞破碎机的研究局限于实验研究,仅对某种结构均质阀的均质效果进行验证与分析,或是选择结构参数。实验研究的局限性使这种分析不够全面。高压细胞破碎机是目前生物工程领域广泛使用的一种细胞破碎机。作者结合近期国外对高压细胞破碎机的理论研究工作,应用半经验半理论的方法,分析探讨了高压细胞破碎机的均质理论。高压细胞破碎机的结构及工作原理: 高压细胞破碎机由高压泵和破碎阀两部分组成,高压泵通常采用柱塞往复泵,其结构与一般柱塞泵相同。破碎阀安装在柱塞泵的排出管路上,一般由阀芯和阀座构成,阀芯和阀座的结构形式对破碎效果、能耗以及阀的磨损影响极大。国外对破碎阀的结构进行了大量研究,设计出许多不同结构的破碎阀,研究主要围绕下列问题进行:1,在较低操作压力下提高破碎效果2,提高阀的使用寿命。意大利Niro Soavi公司为此,开发出R型细胞破碎阀,经过多年的实际使用,获得用户的认可。高压细胞破碎机工作原理: 高压细胞破碎机有一个或数个往复运动的柱塞,物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中,经过特定宽度的限流缝隙(工作区)后,瞬间失压的物料以极高的流速(1000米/秒,最高可达1500米/秒)喷出,碰撞在阀组件之一的碰撞环上,产生三种效应: 空穴效应:被柱塞压缩的物料内积聚了极高的能量,通过限流缝隙时瞬间失压,造成高能释放引起空穴爆炸,致使物料强烈粉碎细化。(主要应用于均质) 撞击效应:物料通过可调节限流缝隙的以上述极高的线速度,喷射到用特殊材料制成的碰撞环上,造成物料粉碎。(主要应用于细胞破碎) 剪切效应:高速物料通过泵腔内通道和阀口狭缝时会产生剪切效应。(主要应用于乳化)经过这三种效应处理过的物料可均匀细化到0.1μm-2μm粒径。

  • 【原创大赛】怎样合理有效的使用破碎机

    破碎机工作时,难免会出现各种各样的情况,怎么才能更有效合理的运作破碎机?一、破碎机的合理运用 破碎机油压的电气联锁体系任何情况下不得撤除,机器工作时,在破碎机反转面内不得站人,工作过程中任何人员不得用手去取进入机内的大块矿石或其它物品,破碎机给料标准不该超过给矿口尺度的0.85倍。5破碎机必须空载起动,合理调配破碎机的运用,使破碎机的类型与相适应的矿石对应起来。二、工作前的预备与查看 破石机起动前必须首要查看各光滑点能否正常,有无阻塞、漏油表象,操作手柄干油泵使各光滑点加油足够,查看各外表能否无缺,查看破碎腔内有无矿石或其它非破碎物料,查看电器连锁设备,灯火接号及各防护设备能否完全正常,矿石的抗压和耐磨强度,湿度的异样,所以在进行破碎时也应该依据矿石的本身特色挑选恰当的破碎设备,还有一些中等硬度的矿石,如粘土质岩石、不巩固的石灰岩、砂岩、致密度泥灰岩等,此类矿石可以用颚式破碎机破碎,重锤反击式破碎机,也可用辊式破碎机,反击式破碎机,锤式破碎机进行破碎,可选的规模比较广,从矿石的含水量方面来讲,湿度过大的矿石不适宜用带有蓖板靠蓖板孔出料的锤式破碎机,例如粘土质的混合料。关于脆性矿石则不宜用研磨式的破碎机,不然产物中的过细粉磨就会太多,此类矿石宜用反击式破碎。

  • 详析颚式破碎机产生过粉碎都有哪些危害

    颚破是以电动机为动力,通过电动机皮带轮,由三角皮带和槽轮驱动偏心轴,使动颚按预定轨迹作往复运动,从而将进入由固定颚板,活动颚板和边护板组成的破碎腔内的物品予以破碎,并通过下部的排料口将成品物料排出。颚式破碎机破碎腔的侧壁上安有螺钉或楔条固定的锰钢侧衬板。固定颚衬板除用螺钉固定外,下端在机架上焊有钢板,上端有压板,使固定颚衬板不致上下活动。动颚衬板下方支承在动颚下部的凸台上,上方由楔铁压紧。定颚、动颚上都有衬板,衬板上有齿牙,有助于破碎物料。衬板的作用是防止定颚、动颚受到磨损。心轴的两端由轴承支承,其上安有连杆。连杆的连杆头与杆身分开制造,电动机通过V带带动带轮及偏心轴。在连杆下方的凹槽中,装有推力板支座,前推力板及后推力板分别支承于支座上。偏心轴除在破碎机一端安有带轮外,在另一端安装飞轮。在后推力板与后支座之间,有一组垫板,用来调整排料口宽度。增加垫板厚度,使推力板和动颚向左方推移,颚式破碎机排料口减小。反之,减少垫板厚度,颚式破碎机排料口将增大。颚式破碎机破碎物料是经常可以看到的现象,只有充分分析整个的破碎过程,才能真正了解它的流程和工艺特点。通常来讲,如果精矿品位低,尾矿品位高和中矿产率大,往往是解离度不够造成的。所以碎矿和磨矿是选别前必不可少的作业。就矿物的组织看,除了少数极粗粒嵌布的矿石,仅用碎矿即获得相当多的单体解离颗粒以外,一般都必须经过磨矿,才能得到充分高的解离度。矿石被破碎后,只含一种矿物的粒子,称为单体解离颗粒;而几种矿物连生着的颗粒称为连生体。矿物的解离度,就是该矿物的单体解离颗粒数,与含该矿物的连生体颗粒数及该矿物的单体解离颗粒数之和的比值,用百分率表示。破碎产物过于粗,达不到应有的单体解离度,选出的精矿品位及回收率都差。相反,破碎产物过细不仅没有必要,甚至可能造成危害,因为破碎矿石会发生难以选别的微细粒。过粉碎的危害体现在:难以控制的微细粒多,精矿品位和回收率都差,设备的处理能力降低,颚式破碎机破碎矿石的无益的功率消耗增多。过粉碎的发生以磨矿过程为主,碎矿过程也有少量呈现。处理脆性矿石的钨锡矿重力选矿厂,更须重视此问题。发生过粉碎的原因,通常是:1、操作不当;2、碎矿细度超过最佳粒度;3、碎矿与磨矿流程不合理;4、所用设备与矿石性质不适应。

  • 咨询实验室颚式破碎机

    请问哪家有实验室颚式破碎机破碎产品; 石灰石、煤炭出料粒度: 1mm 左右生产能力20kg/h电源: 220V

  • 【求助】实验室用的小型破碎机有哪些?

    我公司实验室在做煤分析时,只能用人工锤煤样再过筛,制备分析试样,又辛苦又没效率.想问各位大虾,有些什么型号的小型破碎机能满足这种分析要求,煤样粒度要破碎到0.2mm以下,价格怎样?谢谢!

  • 【讨论】采购遇到了江湖骗子--揭露“北京科伟”和“上海光地”!

    1,北京科伟:马沸炉发给我一台二手马沸炉,我给商家电话,人家说发错了,你把那个递过去,我再给你发一台新的,结果发给我们的是他们给别人维修过的。2,上海光地:鄂式破碎机, 圆盘式研磨机特别是上海光地 做的就不合格,我要求的事密封式鄂式破碎机(锰钢),来了一个不完整的,是铸铁。现在这些设备全无法使用,损失该有谁承担。实验室还等着开工,设备却不能使用。

  • 手持XRF前处理设备--矿石现场破碎机咨询

    想买一台便携式矿石粉粹机用于现场手持式XRF测试前处理,能够在矿场现场完成矿石样品的破碎处理,颗粒度能够达到100-200目,找了好几家国产的发现都刀口很容易磨损,哪位有合适的麻烦介绍介绍厂家和型号。谢谢。

  • 常用的几种细胞破碎方法介绍

    随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一下。   1. 高压匀浆法   设备是高压匀浆器,它由高压泵和匀浆间组成,美国Microfluidics公司和ATS公司均有产品出售。其破碎机理:细胞在一系列过程中经历了高速造成的剪刀,碰撞以及由高压到常压的变化从而造成细胞的破碎。   存在的问题;较易造成堵塞的团状或丝状真菌,较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器,质地坚硬,易损伤匀浆阀,也不适合用该法处理。   2. 高速珠磨法   设备是珠后机,瑞士WBC公司和德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机,其破碎机下:微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合,珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞,促使细胞壁破碎,释出内含物,在珠波分离器的协助下,珠子被滞留在破碎室内,浆液流出,从而实现连续操作,破碎中,生的热量由夹套中的冷却液带走。   存在的问题:操作参数多,一般赁经验估计并且珠子之间的液体损失30%左右。   3. 超声破碎   频高于15-20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理:可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。   存在问题;超声波破碎在实验室规模应用较普遍,处理少量样品时操作简便,液量损失少,但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递,散热均有困难。   4. 酶溶法   就是用生物酶将细胞壁和细胞腊消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。   存在的问题;易造成产物抑制作用,这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高,限制了大规模利用。若回收溶酶,则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌种需选择不同的酶。   5. 化学渗透法   某些有机溶剂(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理;化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。   存在的问题;时间长,效率低;化学试剂毒性较强,同时对产物也有毒害作用,进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂;通用性差:某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。   本文介绍了几种细胞破碎的方法,可谓各有千秋,在实际应用中,应尽量考虑全面,选择最科学、有效的方法。

  • 【原创大赛】【我爱创新】+流水线作业法破碎蔬菜

    【原创大赛】【我爱创新】+流水线作业法破碎蔬菜

    [align=center]【我爱创新】+流水线作业法破碎蔬菜[/align] 蔬菜中农残检测,每批一百个样品,蔬菜从基地采来,全部破碎成浆状,需要几个人几个小时,如何在有限的时间内提高工作效率呢?此次去N市采取蔬菜样品,在当地农业局破碎蔬菜样品时,他们的破碎蔬菜法让我耳目一新,笑称流水线作业法,我们也效仿了这个方法,大大提高了工作效率。 一、分组法 为了提高工作效率,我们买了两台破碎机,想着同时破碎,可以提高工作效率,这样安排人员,3人一组,每组1人切菜,1人开破碎机,1人装袋子,一共两组6人,一百个样品,全部破碎完要分上午与下午,大约6个小时,时间慢在破碎完,要洗破碎机的塑料桶,需要等待。[align=center][img=,464,463]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708231821_01_1645480_3.jpg[/img][/align][align=center]图1:分组法破碎蔬菜[/align] 二、流水线作业法 流水线法,需要再购买一台破碎机,不是需要这台破碎机,是需要破碎机上盛样品的塑料桶,这样就需要一台破碎机,三个塑料桶,2个人切菜,1人开破碎机,1人倒塑料桶里的样品,1人抻开样品袋,1人洗塑料桶,共6人,总共需要3个小时,为何能节省一半时间,是因为破碎机不停,塑料桶三个轮流上。洗塑料桶的人不停,洗完给切菜的人,装入蔬菜样。破碎过程中破碎机会发热,这时可更换第二台破碎机,破碎机也是轮流上,一上午时间就完成了。整个过程是一条龙,切菜、破碎、装袋、洗塑料桶,在一个工作台面上完成。 该法的要点是整个过程都要快,某个环节出问题会影响下一环节,比如桶洗的慢,切菜就快不了,装样品袋慢了,就洗不了桶,没有桶,就无法排队破碎,还有在传递过程中一定要注意桶里的样品与样品号相照应,编号不能出错。[align=center][img=,465,467]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708231822_01_1645480_3.jpg[/img][/align][align=center]图2:流水线作业法破碎蔬菜[/align] 三、结论 福特的创新是用于生产的流水线。放上零件的人不去固定它,放上螺栓的人不用装上螺帽,装上螺帽的人不用去拧紧它。正因为流水线有如此的速度,福特才得以在以后的十年中每年的生产量成倍地增长,并使零售价降低了三分之二。到1914年,路上行驶的每两辆汽车中就有一辆是福特汽车。 这个故事很多人都知道,但没想到会应用在蔬菜破碎上,相同的人数,相同的样品数量,不同的工作方法,差出一半时间,看来以后工作时还是要多动脑筋,在如何能节约时间,提高工作效率上面,多下功夫才行。

  • 关于旋转圆盘电极的一些疑惑

    关于旋转圆盘电极的一些疑惑

    旋转圆盘电极上的各处的扩散层厚度一样,测LSV时,由于线性电势扫描的电势不断改变,不是稳态,扩散层厚度应该不断的改变,是不是旋转圆盘电极上的扩散层厚度也在变化,只是各处都一样?

  • 寻找转动圆盘~

    电脑放在办公桌上,需要打资料的时候,就必须要坐到显示器所向的位置上面来。有没有一种圆盘,是可以放在显示器下面的,需要用电脑的时候,就可以很方便很随意地转动显示器到任何一个角度呀?

  • 【求助】关于旋转圆盘电极

    请教高手指教:旋转圆盘电极是独立装置吗,可以在所有工作站或恒电位仪上通用吗?旋转环-盘电极有成品卖吗,还是要自行设计?谁有相关资料和图片之类的给偶发一些吧:pfofp@163.com小女子不胜感激!

  • 【讨论】什么是“粗玻璃圆盘布赫氏漏斗”?

    [em09509]螯合物鉴别检测方法(本实验是鉴别螯合物中未螯合金属离子含量的,是先将样品溶解,再用“粗玻璃圆盘布赫氏漏斗”过滤,收集滤液,进行离子测定。)方法:称取2克样品进行试验。在室温为21℃度时加入150毫升的去离子水并搅拌30分钟。用[color=#DC143C]粗玻璃圆盘布赫氏漏斗[/color]经过过滤,将可溶和不可溶部分分离。然后再用25毫升的去离子水冲洗漏斗内的残渣,并将滤液调节至标准容量(200毫升)。但我有些问题,那“粗玻璃圆盘布赫氏漏斗”是什么漏斗?能把螯合物都过滤出来了?有关于它的具体说明吗?有图片更好。谢谢了具体内容如下:螯合物鉴别检测方法-—离子选择电法 有机微量元素的大量商业化应用因为缺乏良好的产品分析技术而受到较长时间的限制。客户无法测定所购商品的优劣,不得不完全依赖厂家的信誉和从应用现场获得的主观反馈。最后的决定几乎完全受每千克成本的影响。他们的困扰在于他们不能确定是否所购昂贵的螯合铜实质上是廉价的硫酸铜。对于最终用户,即饲料企业来说,具有重大意义的是,最近出现的对螯合物产品质量,有了一种相对简单的检测分析方法,一种迟到了很久的方法。 大多数金属螯合物(金属蛋白或氨基酸螯合物)的生产过程是使用可溶性无机盐作为有机微量元素的来源,通常是硫酸盐与水解蛋白、肽和某种氨基酸,在某种条件下发生反应,再经后处理工艺加工而成。 如果一个金属已与一个水解蛋白或氨基酸螯合,打破这种螯合或将其一分为二是比较困难的。本分析使用了一种温和的溶剂即中性去离子水,来溶解金属蛋白,再检测溶解部分当中分离的自由金属离子的量,即未螯合或弱螯合的量,就可以判定螯合产品的优劣。 方法:称取2克样品进行试验。在室温为21℃度时加入150毫升的去离子水并搅拌30分钟。用粗玻璃圆盘布赫氏漏斗经过过滤,将可溶和不可溶部分分离。然后再用25毫升的去离子水冲洗漏斗内的残渣,并将滤液调节至标准容量(200毫升)。

  • 纳米圆盘简介

    纳米圆盘简介

    [font='times new roman'][size=18px] [font=宋体]纳米圆盘简介[/font][font=宋体]1 [/font][font=宋体]纳米圆盘与生物膜[/font][font=宋体]去垢剂在膜蛋白质研究中具有重要的作用,但是基于去垢剂的膜蛋白质提取方法存在一定缺陷。一方面,去垢剂种类诸多,筛选出最适合目标膜蛋白质增溶、稳定和结构表征的去垢剂费时费力;此外,去垢剂胶束固有的动态性质会导致去垢剂[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]膜蛋白质复合物不稳定,从而导致随着时间的推移膜蛋白质有聚集/变性的趋势。另一方面,膜蛋白质的结构和功能与其所处的膜环境即脂质分子是息息相关的。传统上用于提取膜蛋白质的去垢剂是通过破坏脂质双分子层,将膜蛋白周围的脂质剥离,以胶束的形式将膜蛋白质包裹于疏水核心,去垢剂分子的极性头部则暴露于水相环境,以此为膜蛋白质提供了另一种溶解环境,这极大地影响了膜蛋白质的结构和活性。[/font][font=宋体]显然,去垢剂分子形成的胶束远不能模拟膜蛋白质所存在的脂质双分子层环境,因而并不是膜蛋白提取、增溶、稳定的最佳工具。近年来,膜蛋白质研究的发展方向之一是开发能够提供更好的细胞膜膜模拟效果的纯化方法,新型细胞膜膜模拟系统主要有[/font][font=宋体]liposome[/font][font=宋体]s[/font][font=宋体]、bicelles、amphipols[/font][font=宋体]和nanodiscs,其中nanodiscs即纳米圆盘为细胞膜研究提供了新的工具,并被公认为是一种最佳的膜模拟系统。纳米圆盘技术最早由Sligar等人提出,纳米圆盘的组成为两亲性膜支架蛋白[/font][font=宋体](MSP)[/font][font=宋体]围绕圆盘状的磷脂双分子层,可稳定地分散于水相。将去垢剂增溶的膜蛋白质、磷脂分子、MSP混合,就可以将膜蛋白质自组装至MSP纳米圆盘中。MSP结合的纳米圆盘潜在优势包括纳米圆盘尺寸可调、可对MSP进行基因工程修饰、纳米圆盘中的脂质成分可控、纳米圆盘中的膜蛋白质可以确定的低聚状态存在等。但是,MSP纳米圆盘形成过程中仍需要去垢剂进行初始增溶步骤,如图1-7所示,不能避免去垢剂分子对膜蛋白质的稳定性和活性的影响。此外,MSP纳米圆盘中脂质的组成与天然脂质双分子层的组成不同,这可能会影响蛋白质的结构、活性及其调控。基于SMA的纳米圆盘克服了MSP纳米圆盘的局限性,没有去垢剂的情况下,SMA能够溶解脂质膜形成盘状纳米颗粒(图1-8),近年来在细胞膜研究领域受到越来越多的关注。[/font][/size][/font][align=center][img=,662,487]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071551559682_8480_3237657_3.jpg!w662x487.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]7 MSP纳米圆盘和SMA纳米圆盘的形成过程[/font][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]7 [/font][font=宋体]The formation processes of MSP nanodiscs and SMA nanodiscs[/font][/align][font=宋体]1.2.[/font][font=宋体]2 SMA结合的纳米圆盘[/font][font=宋体]早在[/font][font=宋体]2001[/font][font=宋体]年,[/font][font=宋体]Tonge[/font][font=宋体]等人就证明了既含有疏水单元苯乙烯又含有亲水单元马来酸的[/font][font=宋体]SMA[/font][font=宋体][font=宋体]可以增溶脂质分子,并在[/font][font=宋体]2006年利用SMA将脂质双分子层转化成稳定的纳米圆盘形状的双层膜,获得专利。2009年,SMA首次被报道用于提取跨膜蛋白质,在脂质双分子层中加入SMA后,SMA与细胞膜结合,将其溶解为天然的纳米圆盘,又称为苯乙烯-马来酸脂质颗粒[/font][font=宋体]([/font][font=宋体]SMALPs)[/font][font=宋体],[/font][font=宋体]SMA包围在圆盘侧面,膜蛋白质则被包裹于圆盘之中,如图1-8所示。与去垢剂和MSP纳米圆盘相比,SMALPs的优势在于不需要去垢剂就可以直接从细胞膜上提取膜蛋白质,同时保留膜蛋白质周围的天然脂质环境。自2009年开始,[/font][font=宋体]关于利用[/font][font=宋体]SMALPs技术提取纯化膜蛋白质的文献数目[/font][font=宋体]迅速增加,(图[/font][font=宋体]1-9)。这些文献研究了多种重要的膜蛋白质,如G蛋白偶联受体、离子通道、ABC转运蛋白等,处于SMALPs中的膜蛋白质具有良好的稳定性和活性且显著优于去垢剂胶束中的膜蛋白质。此外,这些文献表明SMA对于单跨膜螺旋蛋白、多跨膜螺旋蛋白,甚至大型多亚基跨膜蛋白都具有良好的提取效果。[/font][/font][align=center][img=,662,406]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071552290358_7544_3237657_3.jpg!w662x406.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]8 SMALPs示意图[/font][sup][font=宋体][font=宋体][59][/font][/font][/sup][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]8 [/font][font=宋体]Schematic diagram of SMALPs[/font][sup][font=宋体][font=宋体][59][/font][/font][/sup][/align][align=center][img=,615,432]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071552556903_281_3237657_3.jpg!w615x432.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]9 利用SMALPs技术纯化膜蛋白质的文献数目[/font][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]9 Numbers of [/font][font=宋体]literatures describing membrane proteins purified by SMALPs technology[/font][/align][font=宋体][font=宋体]SMA可同时实现膜蛋白质和膜脂的提取,很多研究也对[/font][font=宋体]SMALPs[/font][font=宋体]中的脂质分子进行了定性定量分析。[/font][font=宋体]Teo等采用SMA对大肠杆菌的ZipA、FtsA和PgpB三种膜蛋白质进行提取纯化,并采用反相HPLC-MS/MS分别对三种膜蛋白质的SMALPs中的磷脂进行分离分析。结果表明,SMA本身不会优先从细胞膜中提取特定的磷脂[/font][font=宋体]。在[/font][font=宋体]ZipA和PgpB[/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]SMALPs中,磷脂分子种类类似且单不饱和PE和PG含量较高;在FtsA的SMALPs中,磷脂分子种类与ZipA和PgpB差异较大,具有更长碳链的PE和PG含量更高。Ayub等人采用SMA对酵母细胞膜上的CD81蛋白进行增溶和纯化,并采用“鸟枪法”对酵母细胞膜总脂质提取物、空SMALPs(不含CD81)[/font][font=宋体]中脂质[/font][font=宋体]和含[/font][font=宋体]CD81的SMALPs中[/font][font=宋体]脂质进行测定。结果表明,前两者所含磷脂分子种类差异不大,含[/font][font=宋体]CD81的SMALPs中磷脂分子种类变化明显,表现为带正电荷的PE和PC减少,带负电荷的PI相对增多。[/font][/font][font=宋体]1.2.[/font][font=宋体]3 SMA与磷脂双分子层[/font][font=宋体]近年来,关于[/font][font=宋体]SMALP[/font][font=宋体]s[/font][font=宋体]自组装机制的研究[/font][font=宋体]也[/font][font=宋体]得到开展[/font][font=宋体]。简单来说,在疏水效应驱动下,[/font][font=宋体]SMA吸附到磷脂双分子层[/font][font=宋体][font=宋体],苯乙烯基团插入到磷脂双分子层中,与酰基链紧密结合,在临界浓度下,带电的马来酸基团使膜失稳,导致膜破裂并形成被[/font][font=宋体]SMA聚合物带环绕的纳米圆盘。对于SMA与其它两亲性聚合物的区别,Scheidelaar等从苯环和羧基的性质进行了详细阐述:刚性苯环基团的存在,使SMA从溶液游离状态转化成围绕纳米圆盘的另一种状态,熵变小,这是有利的;羧基的偶极矩与膜的偶极势之间有良好的相互作用。SMA的这些特性使其对磷脂双分子层具有高增溶性能,可以增溶各种不同头部基团、不同酰基链、不同构型的脂质分子。特别是苯乙烯与马来酸摩尔比在2:1到3:1之间的SMA,其疏水性和极性达到最佳平衡,对磷脂双分子层增溶效果最佳[/font][/font][sup][font=宋体][font=宋体][71][/font][/font][/sup][font=宋体]。[/font][font=宋体]1.[/font][font=宋体][font=宋体]3 SMA[/font][font=宋体]及其衍生物[/font][/font][font=宋体]1.[/font][font=宋体]3[/font][font=宋体].[/font][font=宋体][font=宋体]1 SMA[/font][font=宋体]的性质与制备[/font][/font][font=宋体]SMA是苯乙烯[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体][font=宋体]马来酸酐共聚物([/font][font=宋体]SMAnh)的水解形式,SMAnh是被广泛研究的聚合物之一,由Alfey和Lavin在1945年首次制备。由于苯乙烯和马来酸酐存在极性差异,且苯环为给电子体,马来酸酐为吸电子体,在一定反应条件下两者竞聚率相近,聚合后可形成具有独特交替结构的聚合物链,经水解后,赋予SMA两亲性聚合物的性质。SMA不仅化学性质独特,还具有良好的生物相容性,可用作很多药物的载体,如坦螺旋霉素、两性霉素B等。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]用于膜蛋白质和膜脂研究时,[/font][font=宋体]SMAnh的制备方式通常有两种,即利用传统自由基聚合或[/font][font=宋体]可控[/font][font=宋体]/“活性”自由基聚合[/font][font=宋体]。传统自由基聚合因其慢引发、快增长、易终止的特点而导致聚合反应过程、聚合度、聚合物的结构和分子量分布难以控制。可控[/font][font=宋体]/“活性”自由基聚合技术的出现使得对聚合物进行分子设计和可控聚合成为可能,特别是可逆加成[/font][/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]断裂链转移[/font][font=宋体][font=宋体]([/font]RAFT)[/font][font=宋体][font=宋体]聚合已发展成为合成复杂聚合物结构的最通用和最强大的聚合技术之一。[/font][font=宋体]RAFT聚合中的关键试剂[/font][/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]链转移试剂[/font][font=宋体][font=宋体]([/font]CTA)[/font][font=宋体],在聚合过程中可以形成无聚合活性的休眠种,与活性自由基链相比,对体系中其它自由基的竞争力相当,使得整个反应体系始终存在自由基的可逆链转移,很大程度上抑制了双基终止,并实现了对聚合过程的调控。[/font][font=宋体]Craig等采用RAFT聚合法制备了三组具有低、中、高分子量的SMAnh,每组分别设置了不同的苯乙烯、马来酸酐摩尔比[/font][font=宋体][font=宋体]([/font]2:1-4:1)[/font][font=宋体][font=宋体],经体积排阻色谱法分析,证明了所得聚合物的分散度指数([/font][font=宋体]PDI)在1.25-1.35之间,且所有聚合物的实际分子量与理论值相近,说明聚合过程得到了很好的控制。将SMAnh进行水解,用于磷脂分子增溶,结果发现形成SMALPs的大小与SMA分子量无关,而与两个单体的比例有关。苯乙烯、马来酸酐摩尔比为2:1、3:1、4:1时,形成的纳米圆盘尺寸分别约为28 nm、10 nm、32 nm。因此,利用RAFT聚合方法可以控制SMA结构,通过扩大纳米圆盘的尺寸可为提取更多的膜脂和体积更大的膜蛋白质提供可能性。[/font][/font][font=宋体]Smith等在蒙特卡罗模拟的基础上,通过RAFT聚合法合成了六组16种具有不同苯乙烯/马来酸酐比例和不同单体/CTA比例的聚合物,经凝胶渗透色谱、核磁共振等技术表征,证实了RAFT聚合可以控制聚合物链中单体的含量、组成、分布情况。作者进一步比较了上述聚合物在磷脂增溶和SMALPs形成方面的性能差异,筛选出了聚合物D,与商业SMA2000相比,得到的纳米圆盘分散性更小,而较低的样品分散性可能有利于结构生物学研究。[/font][font=宋体]1.3.2 SMA衍生物的[/font][font=宋体]性质与[/font][font=宋体]制备[/font][font=宋体]SMA[/font][font=宋体]LPs[/font][font=宋体]已逐渐发展成为细胞膜组成研究的可靠工具,但其应用价值受到[/font][font=宋体]pH[/font][font=宋体]值[/font][font=宋体]和二价金属离子的限制。在酸性条件下,[/font][font=宋体]SMA[/font][font=宋体][font=宋体]中的羧基[/font][font=宋体]易发生质子化使共聚物疏水性增强而极易从溶液中沉淀析出,这不利于提取在酸性环境中发挥最佳功能的膜蛋白质;此外,在毫摩尔浓度的镁或钙离子存在下,[/font][/font][font=宋体]SMA[/font][font=宋体]中的羧基可与金属离子螯合而产生沉淀,使[/font][font=宋体]SMA[/font][font=宋体][font=宋体]无法用于钙[/font][font=宋体]/镁离子依赖性膜蛋白质的研究[/font][/font][sup][font=宋体][font=宋体][82-83][/font][/font][/sup][font=宋体]。[/font][font=宋体]为了拓宽[/font][font=宋体]SMALPs[/font][font=宋体][font=宋体]技术的适用范围,利用[/font][font=宋体]SMAnh中酸酐基团的高反应活性和衍生能力,可进一步通过酯化、酰胺化等反应进行后修饰制备[/font][font=宋体]SMA衍生物[/font][font=宋体],如图[/font][font=宋体]1-10所示。后修饰基团的引入可改变SMA的特性,增强了聚合物的pH值和金属离子耐受范围,如SMI在pH值为2.5-10范围内,二价金属离子浓度高达200 mM时,仍可发挥膜蛋白质及膜脂提取功能,形成的纳米圆盘显示出超强稳定性。上述SMA衍生物为后续更广泛的膜蛋白质和膜脂研究提供了更多的选择。[/font][/font][align=center][img=,690,343]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071553237687_6095_3237657_3.jpg!w690x343.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]10 SMA衍生物[/font][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]10 [/font][font=宋体]SMA derivatives[/font][/align][align=center][/align][font=宋体]1.4 SMALPs[/font][font=宋体]的扩展[/font][font=宋体]二异丁烯[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体][font=宋体]马来酸共聚物([/font][font=宋体]DIBMA[/font][font=宋体])在增溶磷脂,稳定膜蛋白质的性能上与[/font][font=宋体]SMA相当。同SMALPs一样,DIBMA以[/font][font=宋体]DIBMA[/font][font=宋体]脂质颗粒([/font][font=宋体]DIBMALPs[/font][font=宋体])的形式同时提取膜脂和膜蛋白[/font][font=宋体]质[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]SMA中苯基的存在使得提取的膜蛋白质不能直接进行紫外或圆二色谱等光谱学表征,而DIBMA可弥补这一缺陷。Gulamhussein等比较了SMA与DIB-MA两种聚合物对不同表达系统的具有不同形状和不同大小的膜蛋白质在增溶效率、提取纯度和稳定性能方面的差异,如图1-11所示[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]DIBMA[/font][font=宋体]对某些膜蛋白质的增溶效率并没有优于[/font][font=宋体]SMA,所提取膜蛋白质的纯度也不如SMA,这是由于[/font][font=宋体]DIBMALPs[/font][font=宋体]的尺寸较[/font][font=宋体]SMALPs大,提取出来的杂质随之增多。较大尺寸的DIBMALPs能包容更多的膜脂,膜脂的有序度因为空间的增大而下降,这可能不利于膜蛋白质结构和功能的稳定,但也可能为蛋白质构象变化和动力学研究提供更好的环境。[/font][/font][align=center][img=,580,473]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071553485075_347_3237657_3.jpg!w580x473.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]11 比较SMALPs与DIBMALPs[/font][/align][align=center][/align][font=宋体]Tribet等开发了一类新型两亲性聚合物([/font][font=宋体]APols[/font][font=宋体]),其结构特征为低分子量聚丙烯酸的羧基被辛胺和异丙胺随机酯化。[/font][font=宋体]APols[/font][font=宋体]这一命名是为了将这类两亲性聚合物与化学或工业等其它领域的两亲性聚合物区分,其中被应用和研究最为广泛的是[/font][font=宋体]A8-35[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体]A8-35[/font][font=宋体][font=宋体]中有[/font][font=宋体]25%的羧基被辛胺随机酯化,40%的羧基被异丙胺随机酯化,剩下35%的游离羧基,使其具有温和的表面活性。另外,与去垢剂分子相比,聚合物链具有一定粘度,与膜蛋白质接触位点更多,能使膜蛋白质在更长时间和更高温度下保持稳定状态。[/font][/font][font=宋体]A8-35[font=宋体]主要缺点在于其[/font][/font][font=宋体][font=宋体]临界缔合浓度较低,不能像[/font][font=宋体]SMA那样直接溶解细胞膜,提取膜蛋白质。基于此,Marconnet等作出假设,用环烷烃替代[/font][/font][font=宋体]A8-35[/font][font=宋体][font=宋体]中线性的烷基侧链,期望环烷烃能发挥[/font][font=宋体]SMA中苯环的作用,可以自发地吸附到磷脂双分子层上,这是实现生物膜增溶、膜蛋白质提取的第一步。结合SMA独特的膜增溶性能和[/font][/font][font=宋体]A8-35[/font][font=宋体][font=宋体]优异的膜蛋白稳定性能,[/font][font=宋体]Marconnet等制备了聚丙烯酸衍生物CyclAPols。[/font][/font][font=宋体]A8-35[/font][font=宋体][font=宋体]和[/font][font=宋体]CyclAPols结构如图1-12。经过一系列膜蛋白质提取实验,结果表明,所制备的CyclAPols可用于直接提取膜蛋白质和膜脂,提取速度甚至比SMA更快。例如,对于膜蛋白质YidC,CyclAPols可在1小时左右达到最大提取率,而SMA用时超过1小时。此外,CyclAPols对膜蛋白质的稳定性优于SMA。例如,对于HsBR膜蛋白质,[/font][/font][font=宋体]50[/font][font=宋体]℃加热处理6小时,在CyclAPols中可保留80-85%的原始构象,而在SMA中约保留20%。[/font][align=center][img=,412,473]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071554112299_7819_3237657_3.jpg!w412x473.jpg[/img][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体][font=宋体]12 [/font][font=宋体]A8-35和CyclAPols[/font][font=宋体]结构[/font][/font][sup][font=宋体][font=宋体][92][/font][/font][/sup][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]12 Structures of [/font][font=宋体]A8-35 and CyclAPols[/font][sup][font=宋体][font=宋体][92][/font][/font][/sup][/align][font=宋体]Yasuhara等[/font][sup][font=宋体][font=宋体][97][/font][/font][/sup][font=宋体][font=宋体]首次报道了[/font][font=宋体]聚甲基丙烯酸酯两亲性共聚物[/font][font=宋体],如图[/font][font=宋体]1-13所示,甲基丙烯酸丁酯可提供非极性侧链,而甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵可提供带正电荷的极性侧链。动态光散射、电镜、核磁共振测试证实了制备的聚合物可以有效溶解磷脂双分子层形成纳米圆盘结构。此外,与SMA相比,[/font][font=宋体]聚甲基丙烯酸酯衍生物[/font][font=宋体]中不含苯环和酰胺键,可将提取的膜蛋白质直接进行荧光、圆二色谱表征,这些表征可用于研究淀粉样蛋白质聚集的动力学和淀粉样蛋白质聚集过程中的结构变化。因此,该聚合物被进一步用于研究人胰岛淀粉样多肽([/font][font=宋体]hIAPP[/font][font=宋体]),[/font][font=宋体]而[/font][font=宋体]hIAPP[/font][font=宋体]产生淀粉样聚集变性与[/font][font=宋体]2型糖尿病中胰岛细胞的死亡息息相关。[/font][/font][align=center][img=,690,190]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209071554363037_3318_3237657_3.jpg!w690x190.jpg[/img][/align][align=center][font=宋体]图[/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]13 两亲性甲基丙烯酸酯共聚物[/font][sup][font=宋体][font=宋体][96][/font][/font][/sup][/align][align=center][/align][font=宋体][/font][align=center][font=宋体]Fig[/font][font=宋体]. [/font][font=宋体]1-[/font][font=宋体]13 [/font][font=宋体]Amphiphilic methacrylate copolymers[/font][sup][font=宋体][font=宋体][96][/font][/font][/sup][/align][font=宋体] [/font]

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