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亚沸酸纯化器

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亚沸酸纯化器相关的资讯

  • 新品推介—— AP200全自动亚沸酸纯化仪
    对于痕量、超痕量元素分析,酸的质量尤为重要——酸的纯度越高,背景值就越低。市售超纯酸由于价格昂贵,且开盖后纯度会急剧下降,很难满足日常分析需求,因此,通过提纯普通酸的质量,是最为经济可行的途径。亚沸酸纯化器利用亚沸蒸馏原理,亚沸状态下温和蒸发低纯度的酸,再将酸蒸气冷凝,从而制备纯度更高的酸,广泛应用于AAS、ICP-OES、ICP-MS、原子荧光等光谱分析。为什么要亚沸? 为了保证纯化效果,必须控制酸液的温度,确保其始终处于亚沸状态下温和蒸发,这是酸纯化器能否成功的最基本要素。 怎么确保亚沸的? 采用专利的RTC真实温度控制技术,温度探头经过特殊处理,具有与特氟龙一样的抗酸能力,直接插进酸液,监控酸液的真实温度,控制器根据温度信号,自动调节加热器功率,确保始终在亚沸状态下产生高纯度的酸蒸汽。优势:1、图形化显示、10寸彩色触摸屏操作。蓝牙无线通讯。多种语言可选(含中文)。所有参数自动保存,下次开机自动调用。温度、液位等传感器可被校正。2、可实时记录温度、液位等曲线,用户可在事后随时查看纯化过程是否正常,以确认纯化后的酸是否可用,杜绝了因纯化质量不好而浪费大量的微波消解仪、ICP-MS的时间与金钱。 AP200使用廉价的低纯度酸来制备高纯酸。与购买商品化的昂贵的高纯酸相比,AP200制备高纯酸所节约的试剂购置费用是惊人的! 根据不同用量,AP200可以在几个月甚至几周内收回它自身的购置成本!
  • 屹尧新品:酸纯化?可以更实惠一点了!
    做ICP-OES、ICP-MS、AFS、GFAAS/AAS 等实验室痕量、超痕量元素分析的,都知道试剂纯度的重要性。唯有解决了试剂纯度不够带来的高空白值,才能提升分析结果的可靠性。高纯金属、半导体等材料领域,更是对试剂纯度有着严苛要求。可是高纯试剂价格昂贵且不说,还不易运输和存放,更不要说采购程序是多么复杂。那么,何不买一台高品质、高效、高安全性的酸纯化仪? 屹尧隆重推出全新S1 亚沸酸纯化仪,采用亚沸蒸馏模式,自动控制热辐射与蒸发之间的动态平衡。更人性化的智能结构设计,操作简单方便,可置于通风厨中工作并实现无人看管。没有任何石英与金属部件,彻底杜绝腐蚀和二次污染的潜在问题。可连续不间断地制备硝酸、盐酸、氢氟酸和水,能将1 ppb级金属元素原酸转换成10ppt级高纯酸。无耗材、维护简便、超低运行功耗。 好吧,这些不稀奇,卖得够贵的那几款据说也有。那么,24小时内就能蒸馏出1.8L高纯硝酸这个谁能做到?屹尧S1可以。怎么实现的呢?咱们来看点不一样的加热和冷凝,还有什么叫真正的安全。 S1 亚沸酸纯化仪,效率为王:■ 3D聚能环绕加热蒸馏方式:加热更高效、更均匀■ 大角度球形冷凝腔:冷却更迅速,高效产率的源头■ 入底式注酸:从源头避免交叉污染?■ 更直观的软件界面:方法库即调即用,温度曲线实时显示? 六重安全防护,安全至上:■ 自动温控保护系统,高温停止工作,待恢复到既定温度范围内,重新启动■ 过热保护装置防干烧■ 灵敏的压力气阀设计,自动泄压■ 稳固提手,轻松移动,便捷操作■ 直观液位观测■ 特制接收区稳固底座,防倾倒 这台全新S1 亚沸酸纯化仪在正式发布之前,已经在上面提到的那些ICP等仪器的某家国际巨头的应用实验室里被全方位操练了一年,报告结论是意料之中的出彩,对得起屹尧这个品牌。所以,大家就放心用吧,趁着它刚发布所以价格特别实惠,买两台囤着都行,能保值增值哦。用得好,记得上来给我们点个赞。
  • 滨海正红发布CH酸纯化器,高纯酸提纯器新品
    酸纯化器一、 产品简介:南京滨正红---酸纯化器:又称酸纯化系统,高纯酸提纯器,酸试剂提纯器,高纯酸蒸馏纯化器等,可用于实验室酸如HNO3、HCl、HF、碱溶液和有机溶剂的纯化,纯化后的酸和Merck的一样好,可用于痕量和超痕量分析的样品制备,纯化器带有液位计方便观察里面的溶液,一个出酸口,一个排废液口,操作维护方便,是超纯净实验室化学反应的必备产品。 实验后期可配套我单位Teflon特氟龙系列试剂瓶收取高纯酸。为了满足更多客户的需求,我厂研发了更大规格的酸纯化器(2000ml)二、工作原理:酸纯化器是利用热辐射原理,保持液体温度低于沸点温度蒸发,再将其酸蒸气冷凝从而制备高纯水和高纯试剂,广泛应用于样品处理及分析中。目前市场上的超纯酸由于价格较贵,很难满足日常分析需求,因此提纯优化酸的质量,是最为经济可行的途径。是超纯净实验室提取高纯酸的得力助手。典型用户:中国地质大学、中国计量科学研究院、中国科学院地球化学研究所、中国工程物理研究院、中核建中核燃料元件有限公司、长沙核工业230研究所、广西壮族自治区海洋环境监测中心站、中国建材地勘中心陕西总队等。 三、 产品特点:1、可以满足ICP、ICP-MS极低的检测限需要及苛刻的分析应用中提供实验室级超纯酸,所用容器均采用Teflon耐腐蚀无吸附塑料,可处理如HNO3、HCl、HF等实验室的常用酸。2、实验证明将金属杂质含量约10ppb的酸经过一次蒸馏后,金属杂质含量可以降低到0.01ppb左右。若对酸要求更高,可增加提纯次数。四、相关参数:型号CH-I 500mlCH-II 1000mlCH-Ⅲ 2000ml名称酸纯化器酸纯化器酸纯化器产酸率30ml/h50ml/h70ml/h温控方式PID温控数显PID温控数显PID温控数显控温精度±1℃±1℃±1℃材质FEP、PTFE、硅胶(冷却水管)电压220V/50Hz功率(W)350优势1.密闭环境下提纯酸,不受环境污染,确保酸纯度2.纯PFA、FEP、PTFE材质制造,空白值低无腐蚀3.技术先进,结构合理,操作简单,一键式操作,蒸干自我保护4.提纯过程中,极少量酸气逸出5.节约成本,方便实验:较短时间内纯化低成本的酸试剂以达到痕量分析要求实验数据(仅供参考):仪器:CH-I 酸纯化器;试剂:优级纯HF 蒸馏后,经中国地质大学地质过程与矿产资源国家重点实验室ICP-MS检测出HF中杂质的含量:元素测量浓度(ng/g=ppb)元素测量浓度(ng/g=ppb)Be0.01Ba0.01Mg0.02La0.01Sc0.01Ce0.01V0.01Pr0.01Cr0.03Nd0.01Mn0.01Eu0.01Co0.01Gd0.01Ni0.01Tb0.01Zn0.02Er0.01Ga0.01Tm0.01Rb0.01Yb0.01Sr0.02Lu0.01Zr0.01Hf0.01Cd0.01Pb0.01Sn0.01Th0.01Cs0.01U0.01 创新点:顶部驻酸,从源头上避免交叉污染底部硅胶片加热,PID温控数显,人性化结构设计,可置于通风橱中工作并实现无人看管所有部件均采用特氟龙塑料、彻底杜绝腐蚀和二次污染的问题可连续不间断地制备硝酸、盐酸、氢氟酸、碱溶剂及有机溶剂CH酸纯化器,高纯酸提纯器
  • 新品推荐!喜瓶者​全自动酸蒸清洗/纯化一体机——AC300
    全自动酸蒸清洗/纯化一体机——AC300酸蒸超净清洗是一种自动、密闭、酸蒸汽清洗方法。通过内置可控温加热系统,利用酸蒸汽安全高效地对所 有可溶于酸中的任何痕量金属污染物进行超净清洗,并将其留在液体酸中,绝不会接触正在清洗的反应容器。功能特点:蒸汽单循环技术(OWV)——脏酸不回流,不污染净酸确保洗过的脏酸直接排出系统,而不会回流进酸池造成污染。而传统技术的脏酸要回流进酸池,然后再次蒸发出来去清洗,不断循环,导致脏酸不断污染净酸,从而酸蒸汽也越来越脏,无法胜任稍高污染度的清洗。真实温度控制技术(RTC)——确保蒸汽的高纯度准确测量,是控温精确的前提。采用RTC真实温度控制技术,温度探头经过特殊处理,具有与特氟龙一样的抗酸能力,直接插进酸液,监控酸液的真实温度,从而准确控制温度,确保酸蒸汽的纯度,杜绝其他品牌只监控加热器温度而无法准确控温,酸蒸汽纯度低的问题。PTC半导体加热器——最安全的加热器,没有之一!最适合长时间无人值守! 加热器具有自我温度保护功能,在所有温控系统都失灵的极端情况下,其 最高温度也不会超过250℃,避免烧毁仪器甚至火灾。 清洗流程表:AC300让您的酸循环起来!废酸重复使用,节约资金,保护环境AC300不但完美胜任酸蒸清洗任务,还具有自我酸纯化功能,用户只需在软件中勾选酸纯化选项,甚至不用更换酸瓶,AC300即自动抽取废酸瓶中的废酸进行亚沸蒸馏纯化,纯化后的酸自动收集到纯酸瓶,以备下次使用。随后整个系统会自动被超纯水润洗和热空气干燥,以备下一轮的酸蒸清洗任务。废酸纯化流程图:
  • 艾默莱发布美国Amerlab酸蒸逆流清洗/酸纯化一体 AC300 全自动版新品
    洁净的样品前处理容器是获得可靠分析结果的前提。痕量分析所使用的微波消解罐、常压消解罐、玻璃器皿(试管、烧杯、容量瓶等)等的痕量清洗,对于实验室人员来说,始终是一个非常繁琐而又非常重要的挑战。美国Amerlab艾默莱AC300系列酸蒸超净清洗器(酸逆流清洗器),完美地解决了这个问题。世界领*先的全自动酸蒸清洗器让您清洗无忧!2015年,Amerlab公司推出了世界第/一台全自动的酸蒸清洗器AC100,该酸蒸清洗器能够自动进行酸洗、清洗和干燥,解决了用户的真正烦恼,使得酸蒸清洗器真正为实验室所接受。这一创新提供了新的效率和质量控制水平,并受到市场的高度赞扬。AC100设置了酸蒸清洗器的标准。2017年,Amerlab推出AC100的升级型号AC200,它结合了我们的传统优势和许多创新功能,受到了市场的高度评价。2020年,Amerlab在AC200基础上又推出了AC300,不但对酸蒸清洗功能进行了进一步的优化,而且增加了酸纯化选项,可自动纯化清洗后的废酸,完美实现了酸的循环利用。全部流程自动化是我们首先发明的!自动纯化清洗后的废酸!经济、环保!AC300不但完美胜任酸蒸清洗任务,还具有自我酸纯化功能,用户只需在软件中勾选酸纯化选项,甚至不用更换酸瓶,AC300即自动抽取废酸瓶中的废酸进行亚沸蒸馏纯化,纯化后的酸自动收集到纯酸瓶,以备下次使用。随后整个系统会自动被超纯水润洗和热空气干燥,以备下一轮的酸蒸清洗任务。废酸重复使用,节约资金,保护环境!何乐而不为?中空导汽管和顶层清洗架更专业的清洗能力微波消解管清洗架超级微波管清洗架特点:• 清洗架采用双层结构,下层清洗消解管,可选上层托架,清洗塞子等小件物品。• 中空导汽管,四周有多列喷汽孔,保证尽可能好的清洗效果,用于清洗微波消解内管或其他器皿。• 一批可清洗40个55mL消解管。特点:• 清洗架采用双层结构,下层清洗消解管,可选上层托架,清洗塞子等小件物品。• 中空导汽管,四周有多列喷汽孔,保证尽可能好的清洗效果,用于清洗微波消解内管或其他器皿。• 一批可清洗77个15mL消解管.容量瓶清洗架移液管清洗架特点:• 清洗架采用双层结构,下层清洗消解管,可选上层托架,清洗塞子等小件物品。• 中空导汽管,四周有多列喷汽孔,保证尽可能好的清洗效果,用于清洗微波消解内管或其他器皿。• 清洗位数可根据容量瓶大小而定制.特点:• 一批可清洗多个0.2/1/2/5mL移液管.多项专利技术更可信赖的清洗效果• 保持亚沸,确保蒸汽的高纯度准确测量,是控温精确的前提。Amerlab采用RTC真实温度控制技术(专利号201510906287.9),温度探头经过特殊处理,具有与特氟龙一样的抗酸能力,直接插进酸液,监控酸液的真实温度,确保在亚沸状态下产生高纯度的酸蒸汽,杜绝其他技术只监控加热器温度而无法准确控温而导致的爆沸问题(所产生的酸蒸汽纯度低)。• 脏酸不回流,不污染净酸确保洗过的脏酸直接排出系统,而不会回流进酸池造成污染(专利号201521021203.5)。传统技术的脏酸要回流进酸池,然后再次蒸发出来去清洗,不断循环,导致脏酸不断污染净酸,从而酸蒸汽也越来越脏,清洗效果变差,只能达到ppb级别的清洗效果。• 一体成型无死角,确保长期数据一致性采用国际名厂高纯PTFE材料,机加工一体成型,可轻松耐受长期乃至几十年的高温和强酸,不存在拼接造成的开裂问题。腔体内部圆滑无死角,内部不积存脏物,长期数据稳定性好。某些清洗器采用PTFE板拼接而成,不可长期耐高温和强酸,拼接处易开裂,导致严重的高温强酸泄露问题。其长方体结构,内部死角甚多,清洗下来的脏物不易排走,无法保证清洗效果的稳定性。针对高温强酸采取特别的措施自动稀释真空方式抽废液螺纹密封无需通风柜蠕动泵按照用户设定的体积,精密输送浓酸和纯水,并用洁净空气混匀,尽可能的减少了用户接触浓酸的机会避免浓酸对隔膜泵密封性的破坏而导致的泄漏,也避免浓酸对蠕动泵管的破坏而导致频繁更换蠕动泵管清洗腔顶盖与主体之间通过螺纹密封,确保无酸气泄漏自带高效废气回收装置,可实时吸附排出系统的酸气,除酸效率高达99%多项安全措施让您用得安心• “净酸”“净水”液位实时监控,一旦净酸净水液位偏低,软件不允许运行,避免酸洗/水洗不彻底;• “脏酸” “脏水”液位实时监控,一旦脏酸脏水液位偏高,软件不允许运行,避免液位偏高导致的溢流问题。• 在温度探头失灵情况下,PTC自控温加热器可自行控制自身功率,确保不会超温,避免失控烧毁系统甚至实验室;此特点尤其适合无人值守运行。• 软件具有自我纠错功能,避免使用者错误设置过高温度。直观的图形化软件让您了然于胸用户评语“相对于微波空消方式,Amerlab全自动酸蒸清洗器,具有清洗更彻底、更省酸、更节约人力的显著优势。” ——国内某国级食品检测单位“相比其他类似产品,Amerlab酸蒸清洗器设计得更紧凑、更人性化。”——国内某省级质量检测单位“Amerlab酸蒸清洗器大大减轻了我们的工作负担。"实时曲线记录"功能,让我们终于可以监控和评估清洗这一步骤。”——美国某知名第三方检测实验室美国原装进口 创新点:相对于上一代产品AC200,AC300具有以下重要改进:(1) 酸蒸清洗方面:在同时具备蒸汽单循环功能的基础上,实现了清洗架的可更换性,更加灵活,适用性更强;(2) 新增酸纯化功能:可全自动纯化废酸,并润洗和干燥系统。最大程度上减少了废酸的排放。(3) 酸气回收装置:增加了在线pH监测和报警。(4) 重新设计了电子部分:增加了wifi无线通讯功能,距离更远,信号更稳。(5) 重新编写了软件:更加直观和友好。美国Amerlab酸蒸逆流清洗/酸纯化一体 AC300 全自动版
  • 艾杰尔-飞诺美第1000台中压纯化色谱落户康龙化成
    p  strong仪器信息网讯/strong 2019年4月3日,艾杰尔-飞诺美第1000台CHEETAH系列中压纯化色谱交付仪式在宁波康龙化成工厂举行。康龙化成副总裁魏忠勇、艾杰尔-飞诺美中国区总经理施扬等双方高层以及相关员工出席活动。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/6a8f28b0-fa14-48bd-9c7e-ef26a646e53d.jpg" style="" title="1.jpg"//pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/5a4d89f6-9db1-4927-87b7-231e9a2cdbed.jpg" style="" title="2.jpg"//pp style="text-align: center "  交付仪式现场/pp  艾杰尔的CHEETAH中压快速纯化制备色谱诞生于2009年,型号先后更新为CHEETAH MP100、CHEETAH MP200等 2018年推出了该系列的第二代产品CHEETAH II型,至今已近十年,纯化仪器数量也达到了1000台。/pp  第1000台CHEETAH的用户是康龙化成,即是巧合也是必然。艾杰尔-飞诺美与康龙化成的合作源于色谱耗材。其关于仪器设备的合作开始于2010年,也就是CHEETAH上市的时间。至今,康龙化成拥有的CHEETAH仪器设备数量已经将近400台,占整个公司纯化设备的50%。而且据介绍,这些仪器是在10年间陆续购入的。当编辑问到康龙化成副总裁魏忠勇为何康龙化成会一直采购CHEETAH时,魏忠勇提到了三点,一是药物研发非常需要中高压纯化色谱;二是艾杰尔-飞诺美的纯化色谱仪器非常稳定,及长期稳定性好;最后一点即是艾杰尔-飞诺美的售后服务及时、质量好。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/b3a01786-1f95-4460-8155-5cc38270d7bf.jpg" title="3.jpg" alt="3.jpg"//pp style="text-align: center "  艾杰尔-飞诺美中国区总经理施扬/pp  艾杰尔成立于2007年,是一家专业从事色谱分离材料和自动化设备的高新技术企业。2014年,其生产的CHEETAH MP 200中压制备色谱入选国产好仪器(仪器信息网联合中国仪器仪表行业协会组织的项目)。2016年,艾杰尔与美国Phenomenex公司先后加入丹纳赫集团。2018年Phenomenex与艾杰尔联合。2019年3月新的LOGO在中国范围内正式启用,意味着,艾杰尔-飞诺美全面贯彻并推广Agela(艾杰尔)与Phenomenex(飞诺美)双品牌发展策略,从而全面打造双品牌“并驾齐驱”的市场格局。施扬说到,今天的活动是新LOGO的第一次亮相。今后,艾杰尔-飞诺美提供给用户的不仅仅是色谱耗材,而是从前处理、分析、制备全方位的解决方案。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/cadba6bc-d979-4d12-8520-95af5ee65837.jpg" style="" title="4.jpg"//pp style="text-align: center "艾杰尔-飞诺美推出双品牌LOGO标识/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/cca7e77f-51ca-4124-bbc3-2b25eb5951a0.jpg" style="" title="5.jpg"//pp style="text-align: center "  康龙化成副总裁魏忠勇/pp  康龙化成新药技术股份有限公司成立于2003年,是国际化的生命科学研发服务企业。其主营业务涉及新药研发临床前的全流程,包括化学、生物、药物代谢及药代动力学、药理、毒理等各个领域,目前在全球员工总人数已达6000多人。康龙化成于2014年在宁波杭州湾新区投资建设康龙化成生命科技产业园,此次新购入的CHEETAH II即是在这里交付使用的。魏忠勇谈到,康龙化成与艾杰尔-飞诺美这些年来共同发展,都取得了非常快速的发展成果,未来也将携手发展。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/db09bd28-e623-4a28-ab92-eeec326854c0.jpg" title="6.jpg" alt="6.jpg"//pp style="text-align: center "  艾杰尔-飞诺美中国区销售总监牛玉峰主持活动span style="text-align: justify "  /span/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/85dace24-5d2d-41e1-9109-057ffde23b66.jpg" title="7.jpg" alt="7.jpg"//pp style="text-align: center "艾杰尔-飞诺美服务团队/pp  就像康龙化成副总裁魏忠勇说到的,康龙化成一直采购CHEETAH的原因之一就是艾杰尔-飞诺美的售后服务好。这次的交付仪式上,艾杰尔-飞诺美服务团队也“隆重”亮相。艾杰尔-飞诺美非常重视应用方法的开发,目前公司已拥有国际水准的色谱分离材料的自主研发、应用和生产队伍,拥有装备精良的分析和纯化应用服务实验室,并积累了相当多的分离纯化应用的宝贵经验。/pp  而对于具有重要意义的第1000台CHEETAH中压纯化色谱仪器用户,艾杰尔-飞诺美服务团队成员纷纷保证将提供更及时、高质量的售后服务。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/8f57c43f-be19-46b3-8e2a-1d3691f88f1c.jpg" style="" title="8.jpg"//pp style="text-align: center "双方领导共同揭幕交接牌/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/b1f233bd-2679-48ec-b961-4b80c365b6aa.jpg" style="" title="9.jpg"//pp style="text-align: center "双方领导切蛋糕,答谢会正式开始/pp style="text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/9b5cf754-7039-4853-85f7-01e26db5fb39.jpg" style="" title="10.jpg"//ppspan style="text-align: justify "/span/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201904/uepic/dc09c0b8-b573-44d5-b916-a0897f96f1f1.jpg" title="IMG_1218_meitu_1.jpg" alt="IMG_1218_meitu_1.jpg"//pp style="text-align: center "span style="text-align: justify "用户体验/span/pp  本次交接的第1000台中压纯化色谱于2018年10月上市,已入围仪器信息网2018年度科学仪器行业优秀新产品名单。该新品具有很多功能,如控制单元通过无线网络与主机连接,可实现远程控制,实验人员可以坐在隔壁办公室操作实验室内的仪器,免受化学试剂对身体的伤害 软件具有数据权限管理功能,可设计不同账户权限级别,登录后获得相应权限,保障实验数据安全 使用PDA检测器实现全波长扫描,创新地对扫描的峰给出一个光谱角度的纯度值。/p
  • 【和泰纯水知识集锦】第3期-水的纯化方法
    一、微孔过滤法微孔过滤法包括三种类型:深层过滤(depth)、筛网过滤(screen)及表面过滤(surface)。深层滤膜是以编织纤维或压缩材料制成的基质,利用随机性吸附或是捕捉方式来滞留颗粒。筛网滤膜基本上是具有一致性的结构,就像筛子一般,将大于孔径的颗粒,都滞留在表面上(这种滤膜的孔径大小是非常精确的),而表面过滤则是多层结构,当溶液通过滤膜时,较滤膜内部孔隙大的颗粒将被滞留下来,并主要堆积在滤膜表面上。由于上述三种滤膜的功能不同,因此对滤膜之间的分辨非常重要。由于深层过滤是一种较为经济的方式,可去除98%以上的悬浮固体,同时保护下游的纯化单元不会败坏或堵塞,因此通常被作为预过滤处理。表面过滤可去除99.99%以上的悬浮固体,所以也可作为预过滤处理或澄清用。微孔薄膜(筛网滤膜)一般被置于纯化系统中的最终使用点,以去除最终残留的微量树脂碎片、碳屑、胶质颗粒和微生物。例如:0.22μm微孔滤膜,其可滤过所有的细菌,通常用于将静脉注射用的液体、血清及抗生素进行除菌用。二、活性碳吸附法有机物可能是阳离子、阴离子或非离子性的物质,离子交换树脂可去除原水中一些可溶性的有机酸和有机碱(阴离子和阳离子),但有些非离子性的有机物却会被树脂包覆,这过程称为树脂的“污染阻塞”现象,不但会减少树脂的寿命,而且降低其交换能力。为保护离子交换树脂,可将活性碳过滤器安装在离子交换树脂之前,以去除非离子性的有机物。活性碳的吸附过程是利用活性碳过滤器的孔隙大小及有机物通过孔隙时的渗透率来达到的。吸附率和有机物的分子量及其分子大小有关,某些颗粒状的活性碳较能有效的去除氯胺。活性碳也能去除水中的自由氯,以保护纯水系统内其他对氧化剂敏感的纯化单元。活性碳通常与其他的处理方法组合应用。在设计纯水系统时,活性碳与其他相关纯化单位的相关配置,是一项极为重要的项目。三、反渗透法反渗透(RO)法是可达到90%~99%杂质去除率中最经济的方法。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密,RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。RO膜的滤孔结构较UF膜还要致密,RO膜可去除所有的颗粒、细菌以及分子量大于300的有机物(包括热源)。当二种不同浓度的溶液,由一个半透膜隔开时,渗透现象会自然发生。渗透压将水压过半透膜,水将浓度较高的溶液稀释,后造成浓度平衡。在水纯化系统中,施加压力于高浓度的溶液中,以抗衡渗透压。如此迫使得纯水由高浓度的液体通过RO膜,并可加以收集。由于RO膜致密度极高,因此,产出的水流很慢,需要经过相当的时间,贮水箱内才会有足够的水量。RO膜可执行离子排除,使得只有水可通过RO膜,其余所有的离子及溶解的分子都被截留,并加以排除(包括盐类和糖)。RO膜以电荷反应将离子排除,带电荷愈大,排除性愈高,所以RO膜几乎可排除所有的(99%)强离子性的高价离子,但是,对于弱离子性的单价离子(如钠离子)的效果只有95%。不同的进水需要不同种类的RO膜,RO膜包括由乙酸纤维酯制成,或是以聚硫胺与聚砜基质的混合薄层聚合物。如果以原水水质及产水水质为基准,经过适当设计后,RO是将自来水纯化的最经济有效方法。RO同时也是试剂级纯水系统很好的前处理方法。四、离子交换法离子交换法是以圆球形树脂(离子交换树脂)过滤原水,水中的离子会与固定在树脂上的离子交换。常见的两种离子交换方法分别是硬水软化和去离子法。硬水软化主要是用在反渗透(RO)处理之前,先将水质硬度降低的一种前处理程序。软化机里面的球状树脂,以两个钠离子交换一个钙离子或镁离子的方式来软化水质。离子交换树脂利用氢离子交换阳离子,而以氢氧根离子交换阴离子;以包含磺酸根的苯乙烯和二乙烯苯制成的阳离子交换树脂会以氢离子交换碰到的各种阳离子(例如Na+、Ca2+、Al3+)。同样的,以包含季铵盐的苯乙烯制成的阴离子交换树脂会以氢氧根离子交换碰到的各种阴离子(如Cl-)。从阳离子交换树脂释出的氢离子与从阴离子交换树脂释出的氢氧根离子相结合后生成纯水。阴阳离子交换树脂可被分别包装在不同的离子交换床中,分成所谓的阴离子交换床和阳离子交换床。也可以将阳离子交换树脂与阴离子交换树脂混在一起,置于同一个离子交换床中。不论是那一种形式,当树脂与水中带电荷的杂质交换完树脂上的氢离子及(或)氢氧根离子,就必须进行“再生”。再生的程序恰与纯化的程序相反,利用氢离子及氢氧根离子进行再生,交换附着在离子交换树脂上的杂质。若将离子交换法与其他纯化水质方法(例如反渗透法、过滤法和活性碳吸附法)组合应用时,则离子交换法在整个纯化系统中,将扮演非常重要的一个部分。离子交换法能有效的去除离子,却无法有效的去除大部分的有机物或微生物。而微生物可附着在树脂上,并以树脂作为培养基,使得微生物可快速生长并产生热源。因此,需配合其他的纯化方法设计使用。五、EDI纯水技术电渗析(EDI)是一项结合了离子交换树脂和离子选择性通透膜,并结合直流电去除水中离子化杂质的技术。该项技术的发展克服了离子交换树脂的局限性,特别是离子交换柱耗竭时离子杂质的释放及重填或再生离子交换柱的工作。水通过一个或多个在阳离子或阴离子选择膜之间填满离子交换树脂的管腔,在电场的作用下,离子在离子交换树脂间向管腔的两侧移动并进入另外的管腔,这个过程中也会电解产生维持树脂处于再生状态所需的H+和OH- 。流向两侧独立管腔的离子被水冲刷掉。六 、超滤法超滤(UF)是一个过滤术语,指能去除如蛋白质大小的颗粒的过滤器。膜孔径通常在1-50nm之间,中空纤维结构的超滤膜通常有较高的滤过速率。超滤膜根据其降低相关污染物浓度的效率来分级微孔薄膜是依其孔径大小来去除颗粒,而超滤(UF)薄膜则是一个分子筛,它以尺寸为基准,让溶液通过极细微的滤膜,以达到分离溶液中不同大小分子的目的。超滤膜是一种强韧、薄、具有选择性的通透膜,可截留大部分某种特定大小以上的分子,包括:胶质、微生物和热源。较小的分子,例如:水和离子,都可通过滤膜。所以,超滤法可将截留液中的大分子加以浓缩,但是,仍有些大分子会渗漏至滤过液中。超滤膜有数种不同的范围,在所有的实例中,超滤膜会留在大部分大于其分子筛所定义分子量的分子。七 、紫外线照射法紫外线照射法已广泛的使用在水处理上,低压水银灯所放射出来的254nm的紫外线是一种有效的杀菌方法,因为细菌中的DNA及蛋白质会吸收紫外线而导致死亡。近来在UV灯制造技术方面的进步,已可制造同时产生185nm和254nm波长的紫外灯管,这种光波长组合可利用光氧化有机化合物,接着这种特殊灯泡,将纯水中的总有机碳浓度降低至5ppb以下。八、蒸馏法蒸馏法是通过改变水的形态,从液态到气态再回到液态,将水和污染物分离。蒸馏法的每一个转换过程都为纯水与污染物的分离提供了机会。理论上,除蒸汽压力与水接近的物质和共沸化合物,蒸馏法能去除所有种类的水中污染物。像RO一样,蒸馏法生产纯水的速度较慢,所以蒸馏水必须先储存起来以备日后使用。蒸馏水器非常耗电,每生产1升纯水通常耗费1KW电力。依据蒸馏水器的不同设计,蒸馏水的电阻率大约能达到1 MΩ-cm,因为空气中的CO2会溶入蒸馏水中迅速降低其电导率。新鲜蒸馏水是无菌的,但如果保存不当,一段时间后就不再是无菌的了。九、凯得菲(KDF)凯得菲(KDF)的作用及功效:凯得菲(KDF)是高纯度的铜/锌合金颗粒,它通过微电化学氧化-还原反应(Redox)进行水处理工作,在与水接触时,合金中的两种金属在亚微观尺度上构成无数小的原电池系统,这种材料在水中具有强大的反应能力和极快的反应速度,可以清除水中高达99%的氯和水中溶解的铅、汞、镍、铬等金属离子和化合物。对抑制细菌、真菌、污垢、水藻的滋生效果卓著。被用于预处理、主处理与废水处理设备。凯得菲(KDF)完善或取代现有技术,可大辐度延长了系统寿命,减少重金属、微生物、污垢,降低了总费用,减化系统维护。(1) 去除强氧化剂(余氯)凯得菲(KDF)具有强大的还原能力,能去除水中的各种强氧化剂,对余氯特别有效。(2)去除重金属凯得菲(KDF)处理介质可以去除水中的多种重金属离子,如铅、汞、铜、镍、镉、砷、锑、铝和其他许多可溶性重金属离子,它们的去除是通过置换反应和物理和化学吸附反应来完成的。凯得菲(KDF)去除重金属离子的机理如下:金属离子吸附于凯得菲(KDF)处理介质的表面并与凯得菲(KDF)中的锌发生置换反应,生成的金属或吸附在凯得菲(KDF)表面,或进入凯得菲(KDF)晶格中,从而使有毒重金属污染物结合在凯得菲(KDF)上。例如,水中溶解的铅离子还原成不溶性的铅原子,并吸附于凯得菲(KDF)介质的表面,汞离子与凯得菲(KDF)也发生类似的反应,X射线衍射研究发现汞的去除是形成了铜-汞合金。(3)去除硫化氢在应用膜法进行水处理时,如果选用地下水作水源,水中可能存在硫化氢,硫化氢如被氧化成硫磺就会污染滤膜表面,凯得菲(KDF)过滤介质有去除硫化氢的功能,生成的硫化铜不溶于水,可在凯得菲(KDF)介质反冲洗时去除(4)减少悬浮固体凯得菲(KDF)处理介质的颗粒平均尺寸大约为60目,最小的颗粒约110目,也能起到物理过滤去除悬浮物质的作用,通常凯得菲(KDF)过滤介质能够有效地去除直径小于至50μm的颗粒。(5)减少矿物质结垢(6)抑制微生物繁殖凯得菲(KDF)处理介质不是通过一种机理、而是几种机理控制微生物的生长繁殖,通过每一种的单独作用或协同作用来达到抑制微生物的作用。主要机理包括:氧化还原电位的变化,氢氧根离子和过氧化氢的形成,介质中锌的溶出等。在一般情况下,凯得菲(KDF)处理介质作为反渗透膜的预处理手段时,能够抑制细菌、藻类等微生物的繁殖,从而防止了微生物对膜的破坏。【本文由和泰仪器发布,未经允许,禁止转载、抄袭!部分内容整理摘编自网络,如有侵权,请联系改正!】
  • 本草奇遇记——分离纯化之旅
    3本草奇遇记分离纯化之旅”在上一期的本草奇遇记中,我们详细介绍了步琦在中药萃取浓缩方面的解决方案,希望能通过先进且高效的萃取浓缩方式助力“十四五”中医药的发展。这次,我们将带大家另外了解奇遇记之分离纯化之旅,领略其在步琦产品线中是如何占有一席之地的。分离纯化天将降大任于斯人也。中药研究当中,分离纯化过程是“痛苦”的也是重中之重的。以往我们在此过程必将苦其心志,劳其筋骨,稍有不慎就会使得我们前功尽弃。而如今步琦公司推出的全息中高压制备色谱可以使得分离纯化过程变得异常的简单与高效。中高压制备色谱 Pure C-850智能高效,分离纯化理想伴侣全息中高压一体制备色谱 Pure C-850 功能十分强大,尤其适用于中药化学当中复杂成分的有效拆分。其优异的参数上限为用户提供更多的选择性。C-850 所搭载的 DAD+ELSD 双检测器系统可以更加完善的检测有紫外吸收和无紫外吸收的化合物,保证用户样品检测全面性。 Flash 与 Prep 双模式功能可允许用户在前期样品粗分及后期单体化合物高压制备两种需求中自由切换。除该型号之外,用户还可以根据自己样品特性及实验室条件选择最适合的一款型号:低复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓对于低复杂度样品,可以轻松或妥善地分离感兴趣的峰与杂质。使用中至大粒径 (15 - 60 μm) 颗粒是标准应用最经济的解决方案高复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓高复杂度样品难以分离并显示出部分重叠的峰需要使用小粒径 (5 - 15 μm) 硅胶颗粒以提供出色的分离度 (=纯度),但会产生高背压从低到高样品浓度的进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 300g可支持 Flash 预填充色谱柱尺寸:最大 5000g可支持耐高压玻璃柱尺寸:直径 46-100mm支持固体上样和液体上样两种方式低样品浓度进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 1g可支持高压色谱柱直径尺寸:4.6-70mm支持液体进样检测生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓生色团化合物吸收紫外波段或可见光波段 (200 - 800 nm) 的光线适用于紫外线检测的化合物通常含有不饱和键、芳族基或含杂原子的官能团。检测非生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓非生色团化合物不吸收光,因此不能通过紫外线检测器显现典型化合物为碳水化合物非生色团化合物可通过蒸发光散射 (ELS) 检测装置来检测应用:中药化学、天然产物和有机合成领域的组分分离方法:吸附色谱法、体积排阻色谱法等溶剂:有机溶剂/水应用实例一从银杏提取物中分离纯化类黄酮仪器:全息制备色谱 Pure C-815▲左右滑动查看更多应用实例二使用 Pure 制备色谱对五倍子中有效成分进行分离仪器:全息制备色谱 Pure C-815▲左右滑动查看更多应用实例三使用 Pure 制备色谱对水溶性抗坏血酸和烟酸的分离纯化仪器:全息制备色谱 Pure C-850▲左右滑动查看更多好啦,分离纯化之旅到这里就结束啦,如果您想要对这次“旅行”有更深入的了解的话,可以随时联系我们。步琦公司作为全球知名样品前处理设备供应商,致力于以丰富的经验与方案帮助用户解决实验难题。
  • Oligo赛道想超车,纯化干燥工艺如何选择?
    众所周知,随着寡核苷酸的应用越来越广泛,不少企业相继加入寡核苷酸合成的赛道。想得到*高纯度的核酸不是一件简单的事,寡核苷酸的合成通常会导致不可避免的杂质积累,它们可能会与全长产品竞争,或者抑制反应,因此选择高效率高质量的纯化和干燥工艺是很有必要的。那么对于工业级别的寡核苷酸纯化,一般又有哪些方法呢?且听小编跟您慢慢分享。寡核苷酸的应用Oligo即寡核苷酸链,分子实验室常用的PCR引物、NGS捕获探针、qPCR探针和FISH探针等都是寡核苷酸。除了引物探针以外,还可作为核酸药物用于遗传疾病、肿瘤、病毒感染和感觉器官等疾病的治疗或预防。 探针及引物主要用于IVD试剂盒,面对需求量巨大的检测试剂盒,上游原材料的质量和供应速度应该同幅度进步和增长,在引物和探针的制备过程中,提高生产效率以及产物纯度更是重中之重。纯化方式对于不同的寡核苷酸链,应该如何选择合适的纯化方法?下面列举了几种常见的纯化方法。DSL(脱盐)纯化利用反相 C-18 层析柱进行脱盐,它对 DNA 有特异性的吸附,一些杂质,如氨、盐,不能被吸附,所以能有效地去除盐分等杂质。该方法不能有效去除比目的DNA短的小片段,所以适用于要求较低的PCR普通引物。 图1:DSL纯化制备流程图OPC纯化根据 DNA 保护基( DMTr 基)和 Cartridge 柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的 DNA 片段。该方法得到目的DNA的纯度能达到 95%以上,但受柱容量影响,适用于 40mer 以下的普通引物。 图2:OPC纯化制备流程图PAGE纯化聚彬稀酰胺凝胶电泳使用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,对引物DNA进行分离,然后从凝胶中回收目的DNA。PAGE纯化法也是一种非常有效的DNA纯化方法,纯化后的DNA纯度大于90%,对长链 (大于50mer)普通引物的纯化特别有效。 图3:PAGE纯化制备流程图HPLC高效液相色谱法根据寡核苷酸的疏水性对DNA片段进行纯化分离,该方法能达到极高的纯度和灵敏度,可以有效去除N-1短片段,目标DHA的纯度大于95%。适用于对纯度要求高的短链(小于40 mer)普通引物、修饰引物,尤其适合及荧光标记探针的纯化。若想得到纯度极高的寡核苷酸片段,HPLC法也常被用于与其他方式双重联合(如HPLC_PAGE、HPLC_CE、2xHPLC等)。 图4:HPLC纯化制备流程图引物干燥过程中的质量控制考虑引物合成纯化后都会产生一定的有机溶剂(如乙腈、甲醇、水等),需要采用真空离心浓缩设备将寡核苷酸干燥成干粉状,一般包装至EP管或者96孔板中。 图5:引物生产流程作为分子诊断qPCR试剂盒中的核心原料,qPCR引物及Taqman探针的质量直接影响了靶标检测的准确性,所以选择干燥工艺也十分关键,在干燥过程的质量控制需尽考虑以下几个方面:样品保护和温度控制在寡核苷酸的干燥过程中,尽量避免加热源直接照射在样品上而导致样品局部过热。红外加热模式,不直接加热样品,这样确保了样品的温度不会高于样品支架的温度,保证了样品的安全。SampleShield温度控制系统,采用非接触式温度探测用以在整个离心过程中,检测样品和离心腔的温度变化,确保整个蒸发过程受到质控。 避免交叉污染由于溶剂蒸发的过程中,低沸点溶剂和混合溶剂容易产生暴沸而导致样品损失和交叉污染,这会直接影响样品纯度。Dri-Pure防爆沸技术,控制真空度下降梯度和施加500g的离心力,让用户处理96孔板或384孔板等密集型容器时,无需担心样品交叉污染。 高通量选用通量高、干燥效率快的干燥手段对寡核苷酸的制备过程事半功倍,GeneVac浓缩仪可批量处理样品:一次可以处理几百个甚至上千个样品,全系列产品都有专门适配EP管和96孔板的铝制实心转子。如HT-12一次可以浓缩384个1.5ml EP管或24块96孔板,大大提高了研发和生产效率。 自动停机在制备大量的寡核苷酸样品时,无需值守的自动停机功能派上用场,使寡核苷酸样品干燥后立即自动停止蒸发,为核酸样品提供双重保护机制。应用案例WTCHG(牛津大学人类遗传学威康信托中心) 使用Sequenom MassARRAYSNP 基因分型系统用于SNP分析,样品前制备过程分别使用风干(左)和Genevac&ensp EZ-2真空离心浓缩仪(右)干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。下图结果表明,使用EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品,可以大大降低样品降解率,保证样品不会被污染,消除了样品损坏的潜在来源。 图6:在空气干燥(左)和EZ-2蒸发器干燥(右)后的序列样品质量分析 *深绿色-高样本数据质量 *浅绿色-中等样本数据质量 *红色-样品质量差或无数据 图7:空气干燥(左)和EZ-2蒸发器干燥(右)后的SNP分析Genevac真空离心浓缩仪离心浓缩作为IVD原料合成制备的关键技术之一,具有通量高、干燥效率高、保护样品等特点,真空离心使浓缩过程都保持在较温和的环境中,提高寡核苷酸的产品纯度与收率,在工艺选择开发和放大中建立良好的工艺空间。一台高通量真空离心浓缩仪就可以做到浓缩干燥一步到位,可以直接作为生产设备投入到生产中,缩短整个Oligo制备过程,例如上述实验中所提到的Genevac&ensp EZ-2真空离心浓缩仪。这边我们为大家推荐下面几款Genevac旗下的真空离心浓缩仪。
  • 纯化标签蛋白时填料的选择
    基因工程提供了人们改变蛋白质性质的机会,因而可以借此改善蛋白质的纯化特性。通过在目的DNA的3’端或5’端插入DNA序列,可以改变蛋白质两端的氨基酸序列,进而作为可纯化的融合蛋白。这些融合子可帮助蛋白质形成包含体,用于稳定蛋白质,免受蛋白酶的攻击,还可以赋予蛋白质特定的纯化性质,使其适用于免疫亲和、金属螯合、离子交换、疏水色谱以及其他分离操作。此外,对于已知特性的蛋白质,改变其中特氨基酸可引入具有特定基质吸附亲和力的片段。市面上有两种很常见的标签,分别为组氨酸标签和GST标签,这两种标签可插入蛋白形成重组蛋白,月旭科技现有针对这两种标签蛋白纯化的填料可供选择。His-Tag(组氨酸标签)是重组蛋白表达最常用的标签,无论表达的蛋白是可溶的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和层析纯化。6×His-tag是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。纯化组氨酸标签蛋白最常用的配体是亚氨基二乙酸(IDA)和次氨基三乙酸(NTA),可使用月旭科技Ni Tanrose 6FF(NTA)或Ni Tanrose 6FF(IDA)来纯化。技术参数✦✦谷胱甘肽-S-转移酶(GST)是一种亲和标签,用GST标记真核蛋白可增强融合蛋白的溶解性。此外,带有 GST 标签的蛋白可以在细菌中高水平表达,但可能会由于蛋白聚集而形成包涵体。一般将GST标签添加到目标蛋白质的N或C末端。 GST对谷胱甘肽具有很相对强的亲和力,这意味着可以在固定的基质(如键合谷胱甘肽的填料)上捕获GST蛋白融合物。这种结合特性可用于蛋白质纯化以及通过蛋白质的结合,来捕获对应的蛋白质。因此可使用月旭科技GST Tanrose 4FF来纯化GST标签蛋白。
  • 核酸提取纯化和浓缩方法应该选_____
    自20世纪诞生以来,分子生物学迅速发展并在整个生命科学领域广泛渗透和应用,推动了传统医学进入基于分子层面实验科学的现代生物医学时代。核酸提取和纯化是分子生物学试验的基础,在以下应用实验中都需要进行核酸提取: ● 分析基础研究和疾病研究中的基因表达;● 跟踪对药物治疗的反应(例如,在抗病毒治疗期间和之后监测病毒滴度);● 识别新物种并深入了解进化过程 (例如,Ancient DNA分析);● 对人类、动物和植物中引起传染病暴发的病原体进行监测和分类;● 通过微生物检测和量化监测食品和水安全;● 诊断疾病 (如基因疾病,癌症,免疫学缺陷)。核酸提取纯化基本步骤 核酸纯化方法是影响提取核酸质量高低的最重要因素之一,也是下游分子生物学试验成败的关键,遵循提取纯化原则以及选择合适的纯化、浓缩方法,可以使核酸的质量及回收率达到最大化。 核酸提取纯化原则和要求 ● 需要保证核酸一级结构的完整性,为下游实验做准备;● 排除其它核酸分子的污染(提取DNA时排除RNA的干扰,反之亦然);● 核酸样品中没有对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子;● 将核酸样品中其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染降到最低程度。 核酸提取纯化的常见方法溶液抽提法经典的DNA提取方法:酚氯仿抽法,主要是使用两种不同的有机溶剂交替抽提将蛋白去除。通过苯酚氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解的是以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是多糖和脂类物质,蛋白质则沉淀于两相之间。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含核酸的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀核酸,之后再离心分离和溶解洗脱,最后通过将洗涤后的核酸沉淀进行浓缩干燥即可得到高纯度核酸。 离心柱法(柱膜法)通过特殊硅基质吸附材料,能够特定吸附DNA,而RNA和蛋白质顺利通过。硅胶膜表面的硅醇基团呈弱酸性,其水化后带负电。当溶液中存在一定浓度的阳离子后,形成的阳离子桥能够中和DNA和硅醇基团之间的表面负电荷,从而使DNA牢固地吸附在硅胶膜表面。反之,处于低盐水溶液状态下时,由于硅胶膜的硅醇基团与DNA磷酸基团之间的静电排斥,硅胶膜释放DNA。 利用高盐低PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。离心柱纯化也是试剂盒提取中广泛的使用方法。磁珠法运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。磁珠法利用了磁性颗粒活性基团在一定条件下可与核酸结合和解离的原理,先使用细胞裂解液裂解细胞,带有活性基团的磁性颗粒可特异性吸附从细胞中游离出来的核酸分子,而样品中的其他干扰物则很好的移除了,在磁场作用下,磁性颗粒与液体分开完成,最后回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱,纯化浓缩后即可得到纯净的DNA,获得质量较高的核酸模板。 提取纯化方法的选择一般地,分离纯化步骤越多,核酸的纯度也越高,但得率会逐渐下降,完整性也愈难以保证。相反,通过分离纯化步骤少的实验方案,我们可以得到比较多的完整性较好的核酸分子,但纯度不一定很高。这需要结合核酸的用途而加以选择。如果对核酸提取的质量要求不高,可以选择经济实惠的溶液法,选择柱膜法还是磁珠法自动化提取,基本上取决于样本数量,针对大批量的样本,优选磁珠法自动化提取。如果对样本数量较少,则可以选择柱膜法,既快速又经济实用。对于Oligo寡核苷酸的纯化,实验要求更高。(可参考往期推文) 不管采用哪一种核酸提取纯化方法最后都离不开浓缩干燥! ● 再浓缩核酸样品,随着核酸提取试剂的逐步加入,以及去除污染物过程中核酸分子不可避免的丢失,样品中核酸的浓度会逐渐下降,甚至影响到后面的实验操作或不能满足后继研究与应用的需要时,需要对核酸进行浓缩,可将150uL DNA水溶液浓缩至10uL再进行测序;● 去除DNA样品中醇的残留,当DNA样品中有乙醇的残留会影响测序反应;● 干燥DNA样品。DNA沉淀后可能会含水或水/乙醇混合液,浓缩去除后可以得到干燥的DNA样品。常用的干燥方法:风干VS真空离心浓缩仪应用案例分享WTCHG(牛津大学人类遗传学威康信托中心) 使用Sequenom MassARRAYSNP 基因分型系统用于SNP分析,样品前制备过程分别使用风干(左)和Genevac EZ-2真空离心浓缩仪(右)干燥含有寡核苷酸样品的384孔板。下图结果表明,使用EZ-2真空离心浓缩仪干燥寡核苷酸样品,可以大大降低样品降解率,保证样品不会被污染,消除了样品损坏的潜在来源。深绿色-高样本数据质量浅绿色-中等样本数据质量红色-样品质量差或无数据使用真空离心浓缩仪,可以避免核酸浓缩干燥遇到的过度加热、绝对干燥、交叉污染及紫外损害保证核酸样品的完整性。Genevac真空离心浓缩仪浓缩干燥DNA样本,Genevac真空离心浓缩仪是合适的选择,Genevac系统广泛应用于DNA样品制备与纯化处理,不论是处理PCR前的简单的小体积浓度DNA pellets,还是高通量处理许多纯化DNA或寡核苷酸的样品,都有不同的机型可供选择。如果你对上述产品或方案感兴趣,欢迎随时联系德祥科技,可拨打热线400-006-9696。 Genevac英国Genevac是德祥集团资深合作伙伴之一。英国Genevac公司成立于1990年,隶属SP Scientific旗下,一直专注于研究和生产各种离心蒸发浓缩设备,其产品广泛应用于生命科学、制药、化学、分析等领域。德祥科技德祥科技有限公司成立于1992年,总部位于中国香港特别行政区,分别在越南、广州、上海、北京设立分公司。主要服务于大中华区和亚太地区——在亚太地区有27个办事处和销售网点,5个维修中心和2个样机实验室。30多年来,德祥一直深耕于科学仪器行业,主营产品有实验室分析仪器、工业检测仪器及过程控制设备,致力于为新老客户提供更完善的解决方案。公司业务包含仪器代理,维修售后,实验室咨询与规划,CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研发、生产、销售、售后。与高校、科研院所、政府机构、检验机构及知名企业保持密切合作,服务客户覆盖制药、医疗、商业实验室、工业、环保、石化、食品饮料和电子等各个行业及领域。2009至2021年间,德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度最佳代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念,致力于成为优秀的科学仪器供应商,为此我们从未停止前进的脚步。我们始终相信,每一天都在使这个世界变得更美好!
  • 聚焦新技术 | AIS puriFlash® 制备纯化系统与流动化学集成,搭建连续分离纯化平台!
    流动化学创新地将传统独立分开的合成操作过程整合起来,在连续流动的系统中完成化学反应,加快了合成的速度,对于绿色化学和实验室自动化领域具有非常重要的意义。此前,我们与爱丁堡赫利瓦特大学 VilelaLAB 和流动化学实验室进行合作,借助 Advion Interchim Scientific puriFlash5.250 纯化制备系统,搭建了全新的连续分离纯化平台,进一步加快实验流程。AIS puriFlash5.250 纯化制备系统ONE平台搭建 平台大致上分为三部分:流动反应池部分、在线输送部分以及AIS puriFlash 5.250 制备纯化部分。实验平台搭建示意图ONE基本思路step 1:流动反应池系统用于进行合成并将粗反应混合物直接或通过在线萃取器输送到 AIS puriFlash 5.250 色谱仪的进样口处。step 2:puriFlash 5.250 通过仪器的 10 通阀,将原料交替切换注入到其中一个样品环中。step 3:两根相同的色谱柱:一个加载反应混合物,另一个用于平衡和执行色谱方法,确保样品环中的样品不损失。 step 4:使用 UV+ELSD 检测器监测并进行馏分收集。 ONE 实验关键点1、优化流动反应池的设置,以获得产品的最大产率;2、优化纯化方法,尽量减少离线实验中粗反应混合物纯化所需的时间;3、色谱方法与流动反应池的进料流速同步,以实现成功的耦合。ONE应用实例(A) 乙二醇和苯甲酰氯酯化反应的在线快速纯化流程示意图。 (B) 40 个连续分离的酯产物的色谱堆叠图。DMAP:4-(二甲氨基)吡啶,FBR:固定床反应器。 实验体系证明了流动化学集成 puriFlash 5.250 从粗反应混合物中同时分离两种产品(以克/小时为单位,纯度 99%)的潜力。在乙二醇和苯甲酰氯的连续流动酯化中,两种酯的产率分别为 9.9 和 7.6 mmol/h。ONE讨论 使用测试混合物(4-甲氧基苯酚和2,5-二溴对二甲苯,正己烷/乙酸乙酯体系)成功进行了原理验证研究,证明了流动化学-puriFlash5.250集成的可行性,并确认了 Advion Interchim Scientific Flash 柱的耐用性。 受到该方法成功的启发,另外几种不同的反应也得到了验证,连续分离出纯度为 97-99% 的产品。 除此之外,puriFlash 5.250 纯化制备系统还可以提供重要的辅助功能。 • 以4,7-二苯基-2,1,3-苯并噻二唑为均相光敏剂,催化 fmoc-l-蛋氨酸生成相应的亚砜为例,证明了均相催化剂在线回收的可能性。 • 可以实现 AIS puriFlash 纯化制备色谱系统与您的流动化学无缝集成,这种联合能够满足实验需求,有助于加速化学新反应的发现。
  • PALL蛋白纯化填料试用申请活动即将开始
    PALL蛋白纯化填料试用申请活动即将开始蛋白纯化新选择:多一次尝试,多一种选择,不同的结果。PALL蛋白纯化填料试用申请活动即将开始申请有效期2011年5月4号-2011年6月4号 您是否为蛋白纯化结果不理想而烦恼?试试PALL的层析填料吧,提供与传统填料不同的层析选择性!你是否为蛋白纯化过程耗时而烦恼?试试PALL的高流速层析填料吧,满足您在高流速下高结合性的要求。您是否为填料的载量不高而烦恼?试试PALL的Q/S HyperCel 层析填料吧,结合载量大于134-190mg/ml(BSA)您是否为抗体纯化费时、费经费而烦恼?试试PALL的MEP HyperCel层析填料吧,单抗纯化步骤,经济而简单 众多填料如何选择?请参考选择推荐。MEP HyperCel、HEA HyperCel、PPA HyperCel:混合模式层析填料:能替代传统的疏水层析模式,支持在低盐或者无盐状态下上样,洗脱PH更温和,最大限度保留蛋白生物活性的同时简化下游纯化流程。MEP HyperCel 同时含亲和层析模式,替代传统的Protein A 亲和层析,优势: 无需调整料液,直接上样:直接从各种培养系统中捕获蛋白。省去微滤、超滤浓缩的步骤。 支持低浓度捕获,即使单抗浓度为50μg IgG/mL也能高效捕获。省掉浓缩的步骤。 温和的条件下洗脱:IgG一般在pH 5.5 to 4.0 的范围洗脱。 有效降低多聚体,同时去除DNA和HCP。 价格更经济。Ceramic HyperD 系列:如果您追求超高流速下高结合能力,Ceramic HyperD绝对是首选,在满足高流速下,同样拥有高分辨率。CM Ceramic HyperD:在具备高流速下的高结合能力外,同时能接受180mM的盐浓度下上样,简化了上样流程,上样前无需脱盐操作。推荐Ceramic HyperD 混合包装,货号:IEXVP-C001。内含四种1ml预装柱,DEAE、CM、S、Q 任您选择不同的离子交换。(不参加试用活动)。此次参与试用申请的填料还有Protein A 亲和层析填料,IMAC HyperCel 亲和纯化His标签填料等,如需更多的具体性能的资料,请登录PALL的网站http://www.pall.com/查询。 样品申请货号及数量可见下表,详情请下载产品试用清单(附件一)层析类型货号产品描述配基应用可申请总数混合模式(离子交换;疏水层析;亲和层析)12035-C001ACROSEP MEP HYPERCEL,1ml 预装柱甲基嘧啶●直接捕获多种不同类型、压型和种属的多抗和单抗;●酶和重组蛋白;●重组抗体片段;●从多聚体中分离单抗单体;●低盐浓缩物中蛋白的直接捕获5支20250-C001ACROSEP HEA HYPERCEL, 1ml 预装柱乙胺基5支20260-C001ACROSEP PPA HYPERCEL,1ml 预装柱苯基5支12035-069MEP HyperCel 5mL, 瓶装甲基嘧啶3瓶20250-012HEA HyperCel 5mL,瓶装乙胺基3瓶20260-015PPA HyperCel 5mL,瓶装苯基3瓶24775-075HA Ultrogel 5mL 羟基磷灰石交联的琼脂糖和羟基磷灰石●免疫球蛋白;●糖蛋白;●疫苗2瓶亲和层析20078-C001ACROSEP PROTEIN A HYPE 1ml 预装柱重组蛋白A●免疫球蛋白;●MAbs5支20078-036Protein A Ceramic HyperD F 5mL瓶装2瓶20093-C001ACROSEP IMAC HYPERCEL 1ml 预装柱亚胺-乙酰乙酸(IDA)●His-tag重组蛋白5支20093-069IMAC HyperCel 5mL,瓶装3瓶离子交换20050-C001ACROSEP CM Ceramic HyperD F,1ml 预装柱羧甲基(CM)●重组蛋白;●质粒纯化;●蛋白,疫苗;●Mabs;●捕获阶段;●免疫球蛋白纯化2支20050-084CM Ceramic HyperD F,5mL 瓶装2瓶20062-C001ACROSEP S Ceramic HyperD F;1ml 预装柱磺酸基(S)2支PRC05X050SHCEL01PRC05X050 S HCEL01,1ml 预装柱(工业放大推荐)2支20195-013S Hypercel 5ml瓶装3瓶20066-C001ACROSEP Q Ceramic HyperD F 1ml 预装柱季氨基(Q)2支20196-012Q Hypercel 5ml 瓶装3瓶PRC05X050QHC001PRC05X050 QHCEL01,1ml 预装柱2支20067-C001ACROSEP DEAE Ceramic HyperD F 1ml 预装柱二乙基氨基乙基(DEAE)2支20067-070DEAE Ceramic HyperD F 5mL 瓶装2瓶申请方式:网上申请下载并完整的填写产品试验申请单(附件二),Email到Jessie_Jing_Chen@ap.pall.com经过审核后(完整的填写能方便您拿到样品),送出样品. 6月10号公布配送单号。配送方式:送货上门或.邮寄配送时间:2011年6月13号-6月17号申请要求:1.限高校、科研单位实验室客户;数量有限,每个实验室限申请一种填料。 2.申请的客户承诺开始试用后两个月内,给PALL公司提供使用反馈情况颇尔公司保留对该活动的解释权。
  • 分离纯化有难题-月旭新品来助力
    曾经有多少个夜晚,你守在层析柱的身旁,眼睛盯着产物从柱管中缓慢流下。曾经有多少做有机合成的苦逼科研狗,一遍一遍的浇上展开剂,就为了回收那宝贵的产物。曾经有多少实验室中回荡着产物纯度不够的哀嚎声。 对于学有机的人来说,“过柱子”几乎是无人不知无人不晓无人不会的基础技能,你可以理解为不同的物质在同一个介质中跑的速度不一样,所以跑久了就会有个一二三名,我们就可以根据滤出的先后顺序来把他们分离出来,从中获得我们的产品。 听起来似乎很简单,但别说是有机合成的新人,就是前辈们往往也会抹一把辛酸泪。过柱子是非常累和枯燥的一件事,但是又是几乎每个大有机方向的科研人员和研究生都逃不开的一件事。 在化合物分离纯化过程中,拥有高效、稳定、高性价比的中低压制备柱对于建立可靠的分离、纯化工艺具有极为关键的作用。 月旭科技,作为业内分离纯化的实力派厂商,为您献上WelFlash SiO2 LS中低压制备色谱柱,为您的分离纯化工作添上一份助力。 WelFlash SiO2 LS 是有自己个性的制备柱 产品特点 月旭新一代WelFlash SiO2 LS正是您分离纯化的得力助手。新款中低压制备柱具有耐压高、柱效好、耐腐蚀等优点。每批WelFlash SiO2 LS制备柱的性能参数都经过精密的控制和严格的测试,以确保产品批次间具有较高的回收率和良好的重现性。WelFlash SiO2 LS中低压制备柱采用优质硅胶装填,性价比优越;使用标准luer接头( 无锁死结构),可用于只能兼容标准luer 管路连接的仪器设备;优化装填工艺,分离度高,重现性好;聚丙烯柱管和接头采用新型技术设计,最高耐压200psi,无漏液;规格齐全,可以有多种装填尺寸;提供丰富的技术应用实例和完整解决方案。 WelFlash SiO2 LS 是有出色分离度的制备柱 产品性能测试(良好的峰形及其分离性能) WelFlash SiO2 LS规格:220gFlow Rate: 150 ml/minSolvent: A1 HexaneSolvent: B1 Ethyl Acetate进样方式: 液体样品Wavelength 1 (red): 254nmWavelength 2 (purple): 280nm WelFlash SiO2 LS 是有完整规格的制备柱 产品规格及货号 月旭隆重推出800g与1600g大规格Flash柱,满足客户大规模制备的需求 产品规格及货号
  • 真空控制在旋蒸分离纯化中的应用
    在使用旋转蒸发仪过程中,分离纯化过程中,所用的温度和真空度是重要的设置参数。物质的饱和蒸气压是温度和真空度控制的参考标准(见附表)。* 什么是饱和蒸气压? 无论是液体还是固体,时时刻刻都存在蒸发(升华)、凝结过程,而气化后的气体分子会对物质表面形成压力。而蒸气压指的就是液体或固体表面存在着的该物质的蒸气,这些蒸气对液体或固体表面产生的压强。  饱和蒸气压就是指在密闭条件中、一定温度和气压下,物质的蒸发(升华)与凝结处于动态平衡状态时,那个时候该物质的蒸气压。 以常见的水为例(纯水),密闭容器中,抽走空气,水会不断蒸发,随着温度的不同,其蒸气形成的饱和蒸气压也会不同。如果温度稳定在100℃,那蒸气就会不断形成,直至蒸气压到101.32kPa,也就是那个时候水的饱和蒸气压。这个时候如果温度不再升高,101.32kPa的蒸气压下,随后蒸气虽然在继续产生,但同时也会有等量的蒸气重新凝结为水,形成平衡,压力不再升高;如果温度为30℃,那么水蒸汽形成的蒸气压就不会超过4.2455kPa;20℃时,饱和蒸气压就是2.3388kPa。* 真空控制与旋蒸分离纯化 旋转蒸发仪在进行分离纯化的过程中,要考虑到目的产物在高温下会出现变性或分子结构损坏的情况。因此需要到较低的温度下进行分离纯化。在较低的温度下形成分离试剂的饱和蒸气压,需要借助真空泵进行抽真空。通过对真空度的控制,可以在目的产物变性的安全温度以下对混合溶剂进行快速分离提纯。* WIGGENS防腐蚀真空控制器 WIGGENS的DVR480 型防腐蚀真空控制器,专用于旋蒸的真空度控制。最低可控制真空度达到0.1mabr ,支持最多5 段编程控制,可以高效自动地实现多种溶剂的回收。接触气体材料均为PTFE 或高性能陶瓷,可耐受酸、碱、以及各种有机溶剂气体。数字式显示,按键控制,具有USB 数字接口,以及模拟输入输出接口。可以连接泵电源控制,在达到稳定真空度后暂时关停泵电源,节能环保;也可工作在泵的常开状态。* 附表:常用有机溶剂饱和蒸气压(40℃)需要的真空度溶剂分子式40℃(104℉)下的饱和蒸汽压 (mbar)摩尔质量 (g/mol)水H2O7418.0四氯化碳CCl4285153.8三氯甲烷CHCl3477119.4甲酸CH2O211446.0二氯甲烷CH2Cl2~atm.84.9甲醇CH4O35232.0四氯乙烯 (PCE)C2Cl453165.8三氯乙烯C2HCl3191131.4五氯乙烷C2HCl514202.3反式-1,2-二氯乙烯C2H2Cl277796.9顺式-1,2-二氯乙烯C2H2Cl248896.91,1,2,2-四氯乙烷C2H2Cl419167.81,1,1-三氯乙烷C2H3Cl3307133.4乙腈C2H3N22941.1乙酸C2H4O24760.01,2-二氯乙烷C2H4Cl221499.0乙醇C2H6O17846.1丙酮C3H6O56358.1二甲基甲酰胺(DMF)C3H7NO1373.1正丙醇C3H8O7060.1异丙醇C3H8O13660.1四氢呋喃 (THF)C4H8O40272.1丁酮C4H8O26572.1(1,4-)二氧己环C4H8O210288.1乙酸乙酯C4H8O225188.1正丁醇C4H10O2574.1异丁醇C4H10O4274.1叔丁醇C4H10O14074.1乙醚C4H10Oatm.74.1二乙胺C4H11N58173.1吡啶C5H5N6079.1正戊烷C5H12atm.72.2正戊醇C5H12O1188.2甲基叔丁基醚C5H12O59788.2异戊醇C5H12O1488.2氯苯C6H5Cl34112.6苯C6H623678.1环己烷C6H1225084.2乙酸丁酯C6H12O235116.2己烷C6H1437386.2二异丙醚C6H14O372102.2甲苯C7H87792.1正庚烷C7H16124100.2二甲苯C8H1027106.2
  • 东曹在京沪两地举办生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会
    2019年6月11日、13日,由东曹(上海)生物科技有限公司(TOSOH)主办的“生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会”在北京、上海两地成功召开。研讨会首次携手藤森工业株式会社、岛津上海实验器材有限公司,并邀请资深技术人员,围绕生物医药(单克隆抗体、ADC药物等)在研发、生产中所涉及的分离、分析、一次性技术等内容展开介绍及讨论,北京场共吸引100余位专业人士参加。仪器信息网作为特邀媒体参与并报道北京场的研讨会。北京场研讨会现场东曹(上海)生物科技有限公司副总经理潘明祥主持研讨会报告主题: Ground-breaking Application to therapeutic antibody by FcγReceptor ⅢA immobilized Affinity chromatography column TSKgel FcR-ⅢA-NPR -Separation of mAb based on ADCC activity-演讲人:冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)   糖链结构差异会影响抗体与引起免疫反应的效应细胞上的Fc受体之间的结合,因此对抗体药物糖链结构的分析在质量控制中至关重要。TOSOH于今年2月在全球范围内推出一款高性能亲和TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱,将重组人FcγIIIA作为配基键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上,并充填至PEEK色谱柱内,以识别不同糖链结构并根据ADCC活性强弱来分离不同抗体组分,为抗体药物糖链结构的分析和活性测定带来全新思路和方法。  报告对该色谱柱的分离原理、性能参数、主要用途、使用要点进行了介绍,列举其在抗体药物质量控制、细胞培养条件优化、细胞器筛选、细胞培养过程监控等环节的应用。相比传统方法,FcR-IIIA-NPR色谱柱可在30分钟内快速完成抗体分离并获得重复性良好的分析结果,降低成本且无需样品预处理。这款色谱柱推出不久便获得2019年PITTCON会议颁发的“卓越奖银奖”。报告主题: TSKgel色谱柱新产品UP-SW2000在小分子蛋白、多肽、寡核苷酸领域的应用演讲人:冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)  冨泽洋先生还介绍了TOSOH另一超高效液相色谱柱新产品,用于生物大分子分离的尺寸排阻色谱分析柱TSKgel UP-SW2000。该色谱柱的填料粒径为2μm,可针对小分子蛋白、多肽、寡核苷酸等生物大分子/中型分子进行快速分离和高效率分析 与TSKgel SW系列色谱柱有相同的填料表面特性,可兼容于UHPLC和常规HPLC系统。与现有SW系列色谱柱相比,UP-SW2000对蛋白质具有相同的分离选择性,且峰形更尖锐,分辨率更高。各类多肽样品在UP-SW2000上可以保持良好峰形。冨泽先生在报告中分享了该色谱柱对多种中小分子量蛋白、多肽(胰岛素、胸腺肽)、寡核苷酸、抗生素等的分析应用。报告主题: 生物大分子药物生产中一次性技术的介绍演讲人:矢野贵之(藤森工业株式会社)  藤森工业株式会社成立于1914年,是一家拥有精密涂布技术,可为电子行业提供精细材料,并且为医疗、化妆品、食品行业提供各种包装材料的“百年老店”。藤森工业生命科学事业部提供颗粒分包、铝箔袋、灭菌袋、药用离型膜、药用输液袋等各类包装产品。公司近年来大力拓展一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件。在日本生物制药行业的一次性生物工艺的应用研究和行业标准制定中,几乎都有藤森工业的参与。报告重点介绍了藤森工业提供的一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件的定制服务、应用以及验证工作。报告主题: 岛津在生物药领域的解决方案:细胞上清液组分分析包、抗体药物分析、nSMOL技术介绍演讲人:涂奇奇(岛津上海实验器材有限公司)  为应对生物药领域日益复杂的分析需求,报告重点介绍了岛津推出的细胞上清液组分分析方法包和纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL)技术。细胞上清液组分分析方法包可同时分析95种化合物,分析时间最快可达17分钟一个样品,在葡萄糖、谷氨酰胺等高浓度组分,以及维生素等低浓度组分中均呈现优化的MRM参数。nSMOL技术则是通过特异性酶解CRD区域的肽段降低分析的目标肽段数,再结合质谱方法实现各类抗体药物的分析。该技术在曲妥珠单抗定量分析、百日咳毒素S4亚基肽段覆盖度分析中已得到较好应用。报告主题: Technical trend of biopharmaceuticals purification演讲人:桥本佳巳(东曹株式会社 生命科学事业部)  桥本佳巳先生汇报了生物制药纯化技术的发展趋势,方向是更高的结合能力,以及碱性条件下更强的稳定性。报告介绍了TOSOH针对下游纯化工艺,推出的TOYOPEARL AF-rProtein L-650F、 rProtein A HC-650F和羟基磷灰石Ca++ Pure-HA三种新型层析填料。Protein L可对一些无法使用Protein A填料纯化的抗体样品(不含有Fc区域的抗体)进行有效纯化。Ca++ Pure-HA适用于生物分子的分离纯化,其高选择性可以分离电泳或其他层析模式难以分离的蛋白。据悉,TOSOH还参股位于美国的Semba Biosciences公司,以推进连续流色谱技术及产品的研发。
  • 诚邀参加——东曹色谱分离纯化技术研讨会
    随着2017年初《“十三五”生物产业发展规划》的发布,中国的生物技术产业迎来新的快速发展阶段。其中生物医药产业将重点发展生物技术药物等多个创新药物品类,推动医疗向精准医疗和个性化医疗发展。如何加快研发项目进展,提高产品质量是生物医药研发和生产企业关注的焦点。东曹(上海)生物科技有限公司(TOSOH)将于近期在武汉、成都和上海举办技术应用研讨会,围绕生物医药(单克隆抗体、ADC药物等)在研发或生产中所涉及的HPLC分析分离及中低压层析纯化技术展开介绍及讨论,助力中国生物医药产业的技术进步。 【会议主题】单克隆抗体HPLC分析领域的最新技术介绍;TSKgel色谱柱在生物样品分析实验中条件优化与应用举例;抗体药物在中低压层析技术方面的最新话题。 【会议日程】城市时间地点武汉11月28日(周二)9:00-13:00武汉华美达光谷大酒店成都11月29日(周三)9:00-13:00四川锦江宾馆上海12月1日(周五) 9:00-13:00博雅酒店 【报名方式】请致电东曹公司:021-34610856-212或发送邮件:info@tosoh.com.cn (标题注明:技术研讨会报名)名额有限,请尽早报名参加。 本次参会免费,安排自助午餐及茶歇,会后更有精彩抽奖环节,期待您的参与! 关于东曹东曹集团生命科学事业部是全球知名的液相色谱仪器耗材和工业层析填料产品供应商。其产品包括EcoSEC系列凝胶渗透色谱仪、离子色谱仪、TSKgel高效液相色谱柱、TSKgel高压层析填料、TOYOPEARL中低压层析填料、TOYOPEARL PAK、TOYOSCREEN层析工艺方法筛选用预装柱。广泛应用于蛋白、多肽、多糖、寡聚糖、DNA、低聚核苷酸、抗生素、合成高分子、天然产物和其他小分子量化合物的分析、分离及纯化工作中。东曹(上海)生物科技有限公司作为东曹集团在中国的全资子公司,秉承东曹集团通过化学创新、实现幸福、回报社会的理念,为中国客户提供优质的产品和完善的服务。
  • 基于岛津C2P系统的甾体化合物纯化馏分自动粉末化处理
    制备液相色谱所收集馏分的后处理方式一般常用的有减压旋转蒸发和低温冷冻干燥,两种方法各有特点,但都需要消耗大量的时间和人力,另外还具有样品污染、样品损耗等风险,在处理大规模样品数量时将尤为明显。 岛津的全自动纯化系统,即Crude2Pure 系统(以下简称C2P 系统)提供了一种全新的制备分离所得馏分后处理模式,可在短暂的时间内完成从馏分溶液到目标物固体粉末的获得。并且在这一过程中,有效地除去了流动相中加入的添加剂,即便是已经和化合物结合成盐的,也可以通过置换的手段得到满足后续实验要求的盐的形态,有效降低了目标化合物分解的危险。由于可以直接生成固体粉末,免去了转移等操作,极大程度的降低了由于多步骤操作而引入杂质或损失产物的风险。 本实验使用提供了快速、安全、有效的全新分离制备后处理方法的岛津Crude2Pure 系统,对某甾体化合物进行了溶剂回收及固体粉末化处理,实验可在3小时内快速完成,同传统的样品分离纯化后处理方法相比,节省处理时间3倍以上;粉末直接生成于标准的样品瓶中,减少转移操作,避免了相互污染的产生,最终得到高纯度的化合物粉末,为合成产物的制备纯化后处理操作提供一种简便、实用和可靠的方式。本实验中所涉及的甾体化合物是含有环戊烷骈多氢菲母核的一类中等极性化合物,多数会含有多个羟基,从极性和疏水性考虑,在上样和补偿液均含有一定比例的有机相以增大溶解性防止捕集过程中析出损失;由于分离纯化过程中往往在流动相中加入了甲酸等挥发性酸来改善峰形和分离度,在溶剂回收和粉末化时以纯水洗除流动相中的添加剂,获得高纯度目标样品。 有关详情,请点击《应用C2P 系统对某甾体化合物纯化馏分的自动粉末化处理》 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。
  • “左右开弓”——为什么说 HILIC 也是您纯化极性化合物时所需方法?
    当我们面对一些实验的时候,潜意识里总是更倾向于用自己非常熟悉的某种方式或方法并尝试进行稍微调整就可以让它适用于当前面对的所有应用研究。但这就像是说,您拥有一把切菜非常好用的刀并不意味着它是锯木的最佳方法。亲水相互作用色谱(HILIC)今天呢,“小布”同学在这里和您再介绍一种分离方法:亲水相互作用色谱(HILIC)。认识它,熟悉它,装备它!让您面对不同实验可以做到“左右开弓”!OK!让我们看看它可以为您的极性化合物的纯化做些什么!HILIC 是分离高极性化合物的理想选择高极性化合物通常不能用我们熟知的典型色谱柱分离,即正相色谱(NP)或反相色谱(RP)。在正相色谱当中,由于化合物本身相对极性固定相来说过于粘稠,所以会导致洗脱时间过长。而高极性化合物的特点是在水性流动相中具有良好的溶解性,并且与典型的 NP 所用溶剂不兼容。而即使使用 RP 体系,高极性化合物却几乎不与非或弱极性的固定相进行相互作用,最终与溶剂前沿一起被洗脱,达不到分离的目的。每当遇到这种情况的时候,就是 HILIC 的 Showtime!它的分离往往发生在极性固定相且可使用水的反相溶剂条件下。在这种情况下,与无水的流动相相比,含水流动相在极性固定相的表面形成了富水层。梯度洗脱从低极性有机溶剂开始,通过增加极性水的比例来洗脱极性化合物。在正相色谱中固定相具有更高的极性,在反相色谱中流动相通常由水与有机溶剂组成,而水则是色谱常用流动相体系当中使用的最强极性洗脱剂。因此,HILIC 结合了正相色谱的固定相与反相色谱的流动相的特点来专门“对付”高极性化合物。简单总结就是:HILIC 采用反相色谱流动相体系,而按照正相色谱顺序出峰。尽管 HILIC 的混合模式机制至今仍在研究中,但主要的保留机制被认为是化合物在富含有机物的流动相和后来的富含水的流动相之间分配系数的不同。除此之外,还包括其他相互作用,如氢键、静电相互作用和偶极-偶极相互作用都有助于 HILIC 分离:如果您对 HILIC 色谱也感到跃跃欲试的话,我推荐您使用乙腈,因为它与水具有良好的互溶性以及良好的 HILIC 保留和低粘度特点。当然,您也可以根据实验具体情况选择其他有机溶剂。HILIC 中的相对溶剂强度如下:丙酮 丙醇 乙腈 乙醇 二恶烷 DMF ~甲醇 水就您的色谱固定相而言,任何极性相均可用于 HILIC 分离。例如:固定相示例中性二醇;酰胺带电离子Slica;氨基丙基相两性离子氨基酸、氨基磺酸固定相相组成中性极性官能团,如:酰胺、天冬酰胺、二醇、交联二醇、氰基和环糊精带电离子阴离子或阳离子官能团两性离子永久带正电荷(铵)和带负电荷(磺酸)的官能团适用应用中性亲水化合物和混有中性、阴离子、阳离子的混合物带电离子中性极性化合物氨丙基相的伯氨基带正电荷;因此,它对阴离子酸性化合物表现出较高亲和力。Slica 表面含有 pKa 为 3.5 的酸性表面硅烷醇基团,这意味着 ≥3.5 pKa 的 pH 值时,这些基团将被离子化,从而使 Slica 固定相可以作为阳离子交换剂,与带正电荷的碱基相互作用并对待分析物进行保留。两性离子由于它们的亲水性和弱离子交换特性,这些固定相适用于分离中性、酸性和碱性分析物以及极性和亲水性化合物以及无机离子。保留机制中性亲水相互作用;无静电相互作用带电离子来自阴离子或阳离子官能团的强静电相互作用两性离子弱静电相互作用选择理想 HILIC 固定相的一个好的原则是,通常来讲中性化合物的亲水性低于带电化合物,而高亲水性固定相需要保留它们(例如两性离子和酰胺固定相)。另一方面,由于静电引力,带电化合物在带电色谱柱上的保留太强,因此中性和两性离子相提供更好的结果。其实,不管正相色谱、反相色谱还是 HILIC 色谱等,都有其最适合的应用领域。即便 HILIC 结合了正相色谱与反相色谱的部分特征,也不代表其满足所有应用。就如同我们日常吃饭时,吃面往往用筷子是最简单高效的方式;喝汤则是用勺子最佳。实验亦如此,所以在实验过程中还是要根据实际情况选择最佳纯化方式。好啦,今天“小布”同学关于 HILIC 色谱的分享就到这里啦,相信诸位小伙伴们也对其有了一定的了解。希望在今后的实验当中它能够助您摆脱纯化高极性化合物的麻烦!各位,我们下期再见!低复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓对于低复杂度样品,可以轻松或妥善地分离感兴趣的峰与杂质。使用中至大粒径 (15 - 60 μm) 颗粒是标准应用最经济的解决方案高复杂度样品纯化左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓高复杂度样品难以分离并显示出部分重叠的峰需要使用小粒径 (5 - 15 μm) 硅胶颗粒以提供出色的分离度 (=纯度),但会产生高背压从低到高样品浓度的进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 300g可支持 Flash 预填充色谱柱尺寸:最大 5000g可支持耐高压玻璃柱尺寸:直径 46-100mm支持固体上样和液体上样两种方式低样品浓度进样左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓可支持上样量最大 1g可支持高压色谱柱直径尺寸:4.6-70mm支持液体进样检测生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓生色团化合物吸收紫外波段或可见光波段 (200 - 800 nm) 的光线适用于紫外线检测的化合物通常含有不饱和键、芳族基或含杂原子的官能团。检测非生色团化合物左右滑动色块查看系统适合的应用范围↓非生色团化合物不吸收光,因此不能通过紫外线检测器显现典型化合物为碳水化合物非生色团化合物可通过蒸发光散射 (ELS) 检测装置来检测
  • 【瑞士步琦】通过SFC-UV分离纯化贝达喹啉的四种异构体
    分离纯化贝达喹啉的四种异构体结核病(TB)是导致残疾和死亡的全球性流行病。据估计,世界上多达三分之一的人口感染了结核病,主要由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, M. tuberculosis)感染引起。由于患者停药或不正确的药物处方导致病原体突变,结核分枝杆菌对一线结核病治疗产生了多药耐药。2005 年,Andries 及其同事报告了第一种耐多药抗结核药物 TMC 207,现在被称为富马酸贝达喹啉(BDQ),成为40年来首个抗结核特异性药物。Andries 等人进行了实验测试四种立体异构体对耐多药结核分枝杆菌菌株的活性。他们报告了每种异构体以及两种异构体的混合物对细菌生长产生 90% 抑制的浓度(IC90)。如图1所示,(R,S)和(S,R)的值分别为 0.03 和8.8μg/mL,组合后的值为 1.8μg/mL。(R,R)和(S,S)同分异构体的IC90值分别为 4.4 和 8.8μg/mL,而混合物的 IC90 值为 4.4μg/mL。这些结果表明,需要对(R,S)异构体进行优化分离,以专门治疗结核分枝杆菌。▲图1:贝达喹啉的四种异构体,及其抗结核分枝杆菌活性(IC90)本文介绍了一种利用 BUCHI Sepiatec SFC-50 仪器分离纯化 BDQ (R,S)异构体的方法。SFC 仪器与蒸发光散射检测器(ELSD)相连。为了提高生产效率,采用了堆叠注入模式。▲图2:BUCHI Sepiatec SFC-501实验条件设备 BUCHI Sepiatec SFC-50色谱柱 Chiralpak IA (4 x 100mm)流动相条件 93.7%二氧化碳、6%(50/50甲醇: 异丙醇)和 0.3%异丙胺,等度洗脱流速 5ml/min背压 150 bar柱温 40℃样品 (RS, SR)对映体BDQ进样量 285mg 叠层进样,每次 100uL检测波长 220nm2结果与讨论通过图3我们可以观察到 BDQ 的两种异构体(RS,SR)在 Sepiatec SFC-50 上能呈现有效的基线分离,并且分离时长控制在 10 分钟以内。▲图3:通过Sepiatec SFC-50以叠层进样的方式获取BDQ (R,S)异构体由于本次实验使用的色谱柱规格较小(4x100mm),不适用于大量样品(285mg)的纯化分离,因此我们采用叠层进样的方式,通过多次进样来高效获取大量目标化合物。
  • 抗体药物质量和成本遇瓶颈:下游分离纯化技术明显滞后
    漫谈离子交换层析之生物大分子分离纯化应用——江必旺博士全球生物制药产业发展迅猛,根据Frost&Sullivan市场调研,2018年全球生物制药市场规模约为2642亿美元。单抗类药物由于特异性好,靶向性高,副作用小,疗效显著,成为发展最快的一类生物药。单抗药物在2020年市场已达到1550亿美金。生物药的生产可分为上游发酵过程和下游纯化分离过程,上游工艺主要包括细胞复苏、传代、发酵生产。而下游工艺主要包括膜过滤及多步层析分离纯化。过去十多年来,基因工程获得突飞猛进的进步,细胞培养的表达量从原来的不到0.5 g/L 到现在普遍达到5g/L,有的甚至超过10g/L。这些进步是由细胞表达载体的开发,单克隆筛选以及细胞培养基优化等技术创新所驱动的。由于发酵产率的大幅度提升,使得上游细胞培养成本大幅度降低。与上游十多倍生产效率提升相比,下游分离纯化技术进步明显滞后,导致下游工序成为生产瓶颈,抗体主要生产成本也转移到下游。下游纯化在整个生物药生产中占据主要生产成本,也被认为是最需要改进的技术领域。下游工艺先进性决定了药品的质量,及药品生产效率和成本。生物药生产的技术瓶颈:实现高效、经济的分离纯化生物制药下游生产工艺目的就是把目标药物分子从复杂发酵液体系中分离出来以满足药品纯度及质量的需求。一方面监管部门对生物药的纯度和质量要求越来越高,另一方面用于治疗用的生物分子种类越来越多,结构越来越复杂,且生物分子对外部条件敏感,稳定性差,杂质多,使得生物制药分离纯化的挑战更大。比如说治疗用抗体不仅对其含量有严格的要求,还必须去除工艺相关杂质如HCP, DNA,Endotoxin, 聚集体及降解片段等(表2)。 因此如何经济、高效的从发酵的复杂组分中浓缩、分离和纯化目标生物分子已成为全球生物药生产的技术瓶颈。在蛋白类生物药生产过程中,分离成本可占总生产成本的50~80%,分离纯化技术还对生物药的分子形态、收率、质量和成本具有关键作用。色谱或层析技术对复杂生物分子具有极高的分离纯化效率, 且条件温和, 在分离纯化过程中容易保持目标生物分子的活性,因此层析技术是目前生物药分离纯化最重要的手段,甚至是唯一的手段,几乎所有生物分离纯化都离不开层析技术。离子交换层析技术的优势生物分子的分离可以根据其尺寸大小、表面电荷、疏水性能、及与配基的亲和作用性能的差异分别采用分子筛,离子交换,疏水,亲和等层析分离模式。由于蛋白类生物分子是由氨基酸组成,几乎都带有电荷,因此蛋白分子在不同pH 条件下其带电状况不同,当pH等于蛋白的等电点时,蛋白处于电中性,当pH 小于等电点时,蛋白带正电荷,当pH 大于等电点时,蛋白带负电。不同生物分子带的表面电荷正负性质及表面电荷数量不同而且会随着流动相的pH改变而改变,使得不同组份的生物分子在离子固定相的电荷作用力有较大差异,因此绝大多数生物分子可以通过离子交换进行分离纯化。离子交换层析在生物分离纯化具有较多优点:第一,载量高,离子交换对蛋白的吸附量可超过100 mg/ml, 有利于提高批处理量及大规模纯化效率;第二,离子交换分离纯化选择条件比较多,既可选择不同的离子强度,也可选择不同的pH值作为分离条件。而且色谱出峰顺序可根据蛋白质的等电点进行预测。第三,离子交换层析操作简单,流动相便宜,蛋白质活性回收率高,综合成本低。第四,离子交换在蛋白的纯化过程中可同时实现产品的浓缩,有利于低浓度蛋白样品的分离纯化。减少后续浓缩工艺。总之,离子交换具有交换载量高,适用性广,且容易保持生物分子的活性而使得离子交换成为生物大分子分离纯化最常用的分离模式,根据Markets and Markets 市场报告离子交换介质用量已超过所有其它层析介质(包括SEC,亲和,疏水、复合模式及其它)用量总和。离子交换层析介质的种类离子交换色谱(IEC)是利用带有不同电荷的样品组分与固定相的离子功能基团形成电荷作用力而吸附在固定相上, 然后通过增加流动相的盐的浓度或改变pH来以降低样品组分与固定相的电荷作用力从而达到洗脱分离的目的。因此离子交换过程是低盐上样,高盐洗脱的过程。按所使用的离子交换介质所带基团的不同,可分为强碱性阴离子型(含季胺基,Q型)、弱碱性阴离子型(含伯、仲胺基,DEAE型)、强酸性阳离子型(含磺酸基,SP型)和弱酸性阳离子型(含羧酸基,CM型)等四种类型。为了增加离子交换的选择性,同时含有离子和疏水功能基团的混合模式离子交换介质也已问世,由于混合模式离子交换层析可以同时提供疏水作用力和静电作用力,因此其具有独特的选择性在分离纯化上具有广泛的应用。另外由于有疏水作用力混合模式离子交换介质耐盐性好,生物样品可以在高盐条件上样。离子交换基团要发挥离子交换作用,必需在溶液中解离成离子。季胺盐(Q)强阴离子交换介质和磺酸型(SP)的强阳离子交换介质离解的pH范围很大,在水溶液中几乎百分之百离解。而羧甲基(CM)型弱阳离子型交换介质和二乙胺乙基(DEAE)型弱阴离子交换介质离解的pH范围小得多。羧甲基(CM)弱阳离子型交换介质在pH 变大后逐渐离解成羧基负离子,pH大到一定程度就可完全离解;二乙胺乙基(DEAE)弱阴离子交换介质在pH 变小后氮原子上逐渐结合质子,pH小到一定程度就可完全让氮原子都结合上质子,达到完全离解。离解度越大,对应的柱子吸附量也大,不离解的弱离子交换介质是无吸附能力的。当然,吸附量还与目标蛋白质在此pH下的电荷情况有关。从羧甲基(CM)弱阳离子型交换介质在pH 变大后离解度逐渐变大看,pH值大有利于弱阳离子型交换介质使用。但是此时蛋白质带的正电荷减少,不利于蛋白质的吸附。当pH值大到一定程度,蛋白质可能带负电荷,就不被弱阳离子型交换介质吸附。从二乙胺乙基(DEAE)弱阴离子型交换介质在pH 变小后离解度逐渐变大看,pH值小有利弱阴离子型交换介质使用,但是此时蛋白质带的负电荷减少,不利于蛋白质的吸附。当pH值小到一定程度,蛋白质可能带正电荷,就不被弱阴离子型交换介质吸附。很多情况下,只要介质在使用pH范围,也就是在离子状态,蛋白质的带电性质和电荷多少是影响蛋白质吸附量的决定因素。另外,蛋白质样品一般要求在分离后保留生物活性,而保留蛋白质活性需要一个合适的pH值。所以选择离子交换分离纯化生物分子时,要综合考虑样品组分的等电点、蛋白质稳定的pH 范围和交换基团离解范围选择交换基团类型。常规四种离子交换结构图基质组成对离子交换层析介质的影响目前市场上用于生物分离层析介质主要由两大类材料组成:第一类是以琼脂糖,葡聚糖为代表的天然高分子层析介质;第二类是以聚苯乙烯和聚丙烯酸酯为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强,生物兼容性好,能减少对生物分子的非特异性吸附等特点,因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构,因此多糖介质表面积大,容易做成高载量的介质。但如果软胶在干燥状态下脱去水孔道结构容易塌陷,因此,软胶填充的层析柱一般不能干,否则介质容易孔道结构容易塌陷从而失去分离性能。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久,应用最广泛的层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶,其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等。相反,合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高,化学稳定性好等特点,因此可以耐受更大的压力、更快的流速,从而提高分离效率,其市场应用增速最快。另外合成高分子微球粒径大小,粒径均匀性更容易控制,使得合成高分子介质更容易装柱,柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀,分子进不去,因此其表面积比琼脂糖基质的小,但孔径通透性更好,因此分子传质速度快,在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大,导致非特异性吸附大,容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点,但它们的目标都是一致的,都是往高载量、高机械强度、高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质,交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度,而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。未来离子交换层析介质的发展方向就是融合软硬胶的优点,做成载量高,机械强度大的介质。介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外,孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果,层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一,可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上,而内孔表面积主要由孔径大小,孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大,但如果孔径太小,目标生物分子进不去,这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大,比表面积也会降低,因此对于不同分子量大小的生物分子,有个最优的孔径大小,其可及表面积最大,分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子,孔径一般选择小于30纳米以下,而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右,而对于病毒这种大尺寸的生物,需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大,比表面积越大,载量也会越大,同时机械强度越差,因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求。不同孔径大小的单分散聚合物色谱填料图层析介质粒径大小及均匀性对生物分离的影响单分散与多分散层析介质分离性能对比示意图层析介质粒径大小和分布是影响其分离性能最重要的参数之一。粒径越小,分布越均匀,柱效越高,分辨率越高。因此制备精确的粒径大小及高度的粒径均一性单分散层析介质一直是业界追求的目标。纳微成功开发出单分散大孔聚合物层析介质可以用于高效分离生物大分子。另外粒径均匀,填充的柱床稳定,重复性好,不容易堵塞筛板,而且可以使用更大孔径的筛板以降低反压。表面亲水改性对离子交换性能的影响大分子分离纯化介质的一个共性要求就是介质表面亲水性要好,以达到降低蛋白的非特异性吸附并保持生物分子的活性的要求。因此商业化的聚合物层析介质一般有两种合成方法:第一种就是选择具有足够亲水的单体直接合成亲水聚合物多孔微球,然后通过表面键合不同功能基团以制备离子、疏水、分子筛及亲和层析介质。比如说日本Tosoh 和美国 Biorad公司都是采用亲水较强的带多羟基丙烯酸酯或丙烯酰胺单体,这类介质与糖基组成的软胶类似不需要进行表面亲水化处理就可以直接键合功能基团做成离子交换层析介质。第二种方法是用疏水性较强的单体如苯乙烯,丙烯酸酯合成疏水聚合物多孔微球。这种微球由于疏水性较强不能直接用于蛋白分离纯化的层析介质,而是要先经过表面亲水化改性,才可以键合功能基团制备生物大分子分离纯化用层析介质。Thermofisher 生产的POROS 离子交换层析介质就是在疏水的聚苯乙烯微球表面通过亲水化改性后再键合不同功能基团制成离子交换层析介质。多孔聚苯乙烯微球表面亲水化改性是由Purdue 大学 Regnier教授研究组发明的专利技术( US Patent No. 5503933)。因此Thermofisher利用该技术成功地开发出用于蛋白药物如抗体分离纯化的亲水化聚苯乙烯层析介质,该介质目前已被广泛地用于抗体及疫苗的纯化,在去除抗体多聚体等杂质方面具有明显优势。显然,第二种方法制备聚合物层析介质步骤多、工艺复杂、技术门槛高、成本高,但其制备的介质具有更高的机械强度,更小的压缩系数和更低的溶胀系数,可耐受更高的压力和流速,而且具有传质速度快、寿命长等优势。间隔臂对离子交换层析介质的影响除了介质基质材料组成,表面亲水性能及功能基团种类及密度会影响离子交换层析介质分离效果外,其功能基团与基球表面之间的间隔臂长短以及接方式也很重要。尤其是对于生物大分子的分离纯化,由于生物分子体积大,相比于小分子,其表面电荷的可及性差,因此间隔臂越长,越有利用介质表面离子功能基团与生物大分子带电功能基团起作用。对于小分子的分离纯化,由于空阻比较小,离子交换载量与离子功能基团的密度基本成正比,与基团与介质表面之间手臂长短关系不大。因此用于小分子分离纯化的离子交换介质,其离子功能基团可以直接连接到介质表面,中间不需要长间隔臂。但对于大分子分离纯化的离子交换介质,间隔臂对载量和分离效果都有较大影响。 德国默克开发出触角型的离子交换介质就是把离子功能基团通过高分子链从微球表面延伸出来,这种触角型的离子交换介质更容易与生物大分子有效结合,同时也有利于孔道空间的利用,解决了聚合物由于表面积比软胶小从而导致聚合物离子交换介质载量低的问题。触角型离子交换不仅载量高,而且传质速度快,分辨率高。单分散离子交换层析介质的最新进展为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来,并保持其生物活性,用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。粒径分布均匀,形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好,流动相在柱床中的流速均匀,流动相经过柱床的路径长短一致,从而有效降低涡流扩散系数,使色谱峰宽变窄,理论塔板数升高。粒径分布与流速特征关系图另外粒径大小一致,可以保持分子在填料微球的扩散迁移路径基本保持一致,相应的保留时间也一致,减少分子扩散系数,从而获得更高的柱效。因此高度粒径均一的单分散色谱填料既可以降低涡流扩散系数又可以减少分子扩散系数,从而提高柱效。另外粒径越精确、分布越窄、其柱床越稳定、反压越低、批间稳定性好。纳微生产的单分散色谱填料不仅完全可以替代SOURCE 系列产品,而且粒径,孔径及材质的选择都远远超过SOURCE产品种类和规格。纳微单分散聚合物层析介质包括聚苯乙烯和聚丙烯酸酯系列。聚苯乙烯表面改性层析介质系列可以替代POROS用于抗体和蛋白的分离纯化,而聚丙烯酸酯系列可以替代Tosoh, Merck, Biorad等生产的聚丙烯酸酯或聚丙烯酰胺层析介质。层析介质关系到药品生产的成本和质量。不同厂家生产的离子交换层析介质都有各自的特点,没有最好的,只有选择最合适的。但层析介质的国产化无疑对中国生物制药产业链安全供应至关重要。越来越多像纳微这样的中国公司已经具备生产一流的层析介质的能力,这些国产化的层析介质也得到越来越多的药企认可。后记在问及江必旺博士对该技术的期望时,他表示:“色谱和层析是药物分离和分析最重要手段,尤其是生物制药领域,层析几乎是生物制药分离纯化的唯一方法。中国生物制药快速崛起会带动中国色谱和层析介质的发展,同时色谱和层析技术的进步及国产化会降低中国生物药的成本,提高药品的纯度和质量。因此中国的色谱和层析技术遇到千载难逢的发展机遇, 相信一定会得到迅猛的发展。”作者简介苏州纳微科技董事长 江必旺博士 江必旺博士,国家特聘专家,获北京大学化学系学士, State University of New York at Binghamton博士学位,在University of California at Berkeley 从事博士后研究。 回国后创建了北京大学深圳研究生院纳微米材料研究中心并任该中心主任。于2007年,江必旺博士创建了苏州纳微科技股份有限公司,专门从事高性能微球材料的研发及产业化。江博士带领团队突破了单分散硅胶色谱填料精确制备技术难题,成为全球唯一一家可以大规模生产单分散硅胶色谱填料的公司。江博士团队还开发出世界领先的单分散聚合物层析介质、如离子交换、亲和,疏水及分子筛等系列亲和层析介质,打破国长期垄断。江博士创建的纳微科技成为色谱领域第一家在科创板上市公司。【专家约稿招募】若您有生命科学相关研究、技术、应用、经验等愿意以约稿形式共享,欢迎邮件投稿邮箱:liuld@instrument.com.cn微信/电话:13683372576扫码关注【3i生仪社】,解锁生命科学行业资讯!Webinar预告(点击报名)
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width="132" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "pspan style="font-family:' 微软雅黑' ,sans-serif"卢伟/span/p/tdtd width="198" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px "pspan style="font-family:' 微软雅黑' ,sans-serif"Tosoh Bioscience LLC /spanspan style="font-family:' 微软雅黑' ,sans-serif"应用科学家/span/p/td/tr/tbody/tablepbr//p
  • 【ISCO】手动与自动化 Flash 色谱法: 合成(2S-3S)-环氧香叶醇的纯化
    01 摘要通过使用手性催化剂对烯丙醇香叶醇进行环氧化反应,可以通过夏普莱斯不对称合成法选择性地制备出(2S,3S)-环氧香叶醇。合成后的(2S,3S)-环氧香叶醇通过自动化 Flash 色谱法和手动玻璃柱色谱法进行了纯化。为了确定哪种纯化方法对化学家在专业和教学环境中更有益处,我们对每种纯化方法的成功率、效率、质量和经济性进行了分析和比较。结果发现,使用 Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+ 系统的自动化色谱法在成功率、效率和成本效益方面均优于传统的手动玻璃柱色谱法。02 背景 Flash 色谱法通常作为本科生实验室实验的一部分而被广泛使用。在研究生研究中,由于需要对合成化合物进行纯化,它也是常规使用的技术。Flash 色谱法是一种简单、低成本的色谱技术入门方法,它在纯化化合物方面非常有效。 开放柱的优点开放柱的缺点 尽管自动化 Flash 色谱系统的出现,开放柱在大学中仍然非常流行。它们的初始资金成本很低,因此可以同时使用多个。它们还提供了一种直观的感受,展示了 Flash 色谱是如何进行的。 开放柱由易碎的玻璃制成,一旦破损,需要清理尖锐的碎片和松散的硅胶。在实验结束时,需要对玻璃柱进行填充和拆卸,这会使学生们接触到硅胶粉尘、溶剂以及柱子上残留的任何化合物。开放柱只能使用等度或阶梯梯度。柱子运行需要更多时间,并且需要持续监控,管理溶剂和组分。由于缺乏任何检测器,需要大量的 TLC 板来识别感兴趣的组分。 自动化 Flash 柱的优点自动化 Flash 柱的缺点自动化 Flash 柱是自成一体的,因此在实验完成后,不会接触到硅胶或柱子上残留的任何产品或溶剂。这些柱子填充得当,提高了分辨率,减少了共洗脱峰的可能性。尽管这些柱子是用塑料包装的,但由于检测器可以显示哪些组分应该合并,而不是使用薄层色谱(TLC)板来观察化合物何时被洗脱,因此减少了固体废物。自动化系统允许对梯度进行实验(以梯度冲洗进行纯化测试),并且比开放柱更好地展示了梯度改变与分辨率之间的关系。由于无需填充或清洁柱子,而且纯化过程更快,所以在给定时间内可以处理更多样本,开放柱可同时运行的优势因此被抵消了。 自动化系统的主要缺点是 Flash 色谱设备的初始投资较高,因此与开放的玻璃柱相比,可用的色谱系统数量更少。此外,还需要持续投资预装填的柱子,以及与设备相关的任何维护成本。 03 结果与讨论测试编号 手动(管柱)纯化回收率或产率(%)自动(管柱)纯化回收率或产率(%)#429.0452.85#549.7356.14产率和时间分析成功合成了(2S,3S)-环氧香叶醇,并通过手动与自动化 Flash 色谱法进行了纯化。为了评估两种方法的优劣,我们对比了它们的成功率、效率、产物质量和成本。 通过分析产率,我们发现自动化纯化的产率较高,实验显示分别为 52.85% 和 56.14%,而手动纯化产率仅为 29.04% 和 49.73%。自动化纯化使用预装填柱,紧实充填的硅胶提高了分离效率,减少了样品在柱中的停留时间,避免了环氧环的潜在不稳定。 从纯化质量来看,自动化纯化也表现更佳。NMR 谱图显示,自动化纯化的产物杂质和溶剂残留较少。尽管两种方法都去除了大部分杂质,但自动化技术在纯化效果上更为出色。 在时间效率方面,自动化纯化显著优于手动纯化。自动化过程仅需 26 分钟,而手动纯化需 135 分钟,大大节省了时间和劳力,并减少了操作错误的风险。自动化系统还提供用户友好的操作界面,减少了人为错误并提高了重现性。 经济效益分析表明,自动化纯化的总成本低于手动纯化,为教学实验室提供了一种经济有效的解决方案。此外,自动化纯化减少了对环境的负担,使用了更少的一次性材料,更易于处理废物,并且更安全,因为操作人员无需直接接触硅胶。 综上所述,自动化 Flash 色谱法不仅提高了纯化效率和产物质量,而且更加经济和环保,是化学家们在专业及教育环境中的理想选择。 04 经济分析 平均来说,每个手动玻璃柱纯化所需的材料如表 1-3 所示,用量一致。而自动 Flash 色谱纯化的溶剂用量则根据所选参数和柱子大小(在本例中为 12 克和 4 克柱子)而定。以下是每次纯化所用的材料和溶剂详情。需要注意的是,初始需要的可重复使用设备未包含在价格明细和比较中,如手动纯化用的玻璃器皿和自动纯化用的 Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+,未包含在价格明细和比较中。 以下比较中使用的化学产品供应商是 Sigma Aldrich;因此,列出的所有价格都基于这家供应商。 表 1:一次手动玻璃柱纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used (£ ) 70% hexane/30% EtOAc (600 mL)49.59230-400 mesh Silica Gel (100 g)10.90Dust mask2.37Sand (5 g)0.39TLC plates (7 total)11.48Pipette tips (26 total)0.39KMnO4 (100 mL) (TLC plate detection)4.39一次纯化的总材料成本:79.51£ 表 2:使用 4 克柱进行一次自动 Flash 纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used (£ ) Hexane (100 mL)9.80EtOAc (100 mL)4.694 g RediSep Gold silica column5.00Hexane chaser (1 mL)0.0981 mL Syringe (2 total)0.22一次纯化的总材料成本:19.81£ 表3:使用12克柱进行一次自动 Flash 纯化所用材料的价格细目Materials UsedPrice per quantity used(£ )Hexane (300 mL)29.40EtOAc (200 mL)9.3812 g RediSep Gold silica column500Hexane chaser (3 mL)0.291 mL Syringe (1 total)0.1110 mL Syringe (1 total)0.52一次纯化的总材料成本:44.70£ 05 实验步骤 将粉末状分子筛(0.28克)和无水二氯甲烷(15毫升)一起加入并混合,同时冷却至 -10°C。然后在前述混合物中加入 L-(+)-二乙基酒石酸酯(0.13毫升)和钛(IV)异丙醇盐(0.15毫升),随后再加入叔丁基氢氧化物的癸烷溶液(5.5 M,约3毫升)。混合物在 -10°C 下搅拌 10 分钟,然后冷却至 -20°C。将香叶醇(1.54克)溶解在无水二氯甲烷(1毫升)中,并确保温度不超过 -15°C 的情况下加入到混合物中。加入后,混合物在 -15 至 -20°C 下搅拌 60 分钟。然后将混合物升温至 0°C,并加入水(3毫升)。当溶液升温至室温时,加入饱和氯化钠的氢氧化钠溶液(30%,0.7毫升)。混合物搅拌 10 分钟。然后用二氯甲烷(2 × 10毫升)萃取水层。合并的有机层用 MgSO4 干燥,并在减压下浓缩以得到粗制的(2S,3S)-环氧香叶醇。 表4:实验 4(使用4克柱)的固定参数项目所用参数 Wavelengths254 nm (red)280 nm (purple)Mobile phasesSolvent A: HexaneSolvent B: Ethyl acetateFlow Rate13 mL/minEquilibration Volume7.0 CVGradient% Solvent B0.00.0100.0100.0100.0MinuteInitial0.510.03.52.8Run Length11.4 min, not includingequilibration timeNotesELSD used表5:实验 5(使用12克柱)的固定参数项目所用参数Wavelengths254 nm (red)280 nm (purple)Mobile phasesSolvent A: HexaneSolvent B: Ethyl acetateFlow Rate30 mL/minEquilibration Volume6.0 CVGradient% Solvent B0.00.0100.0100.0MinuteInitial0.510.03.5Run Length8.3 min, not includingequilibration timeNotesELSD used 06 结论 通过手动和自动 Flash 色谱法纯化了合成的(2S-3S)-环氧香叶醇。研究发现,与手动纯化相比,自动 Flash 纯化在纯化合成的粗产品方面更为成功,因为它能从产品中去除更多的杂质和残留溶剂峰。这一点通过分析获得的 NMR 光谱得以证实。此外,通过分析获得的产量比较了每种纯化技术的效率。结果表明,自动纯化的产量更高。此外,自动柱纯化比手动柱纯化耗时少得多,从而蕞大化了实验室的时间利用。这消除了采用手动玻璃柱纯化所需的劳动力投入,并避免了可能发生的高风险错误。与自动纯化相比,手动纯化成本更高、对环境更不友好,并且对用户的危险更大。因此,可以得出结论,自动纯化仪器(如Teledyne ISCO CombiFlash NextGen 300+)是一项值得投资的设备,因为它效率更高,能更成功地纯化合成产品,并且是一种更经济、对环境更有意识的投资。这一结论适用于专业环境中的化学家,如研究或工业领域,以及本科化学教学设施中的化学家。07 补充信息 实验4 手动纯化使用的粗产品 = 1.000 g获得的纯手动纯化产品 = 0.2933 g产率 = 0.2933/1.000 × 100 = 29.33 %自动纯化使用的粗产品 = 0.4 g获得的纯自动纯化产品 = 0.2114 g产率 = 0.2114/0.4 × 100 = 52.85 % 实验5 手动纯化使用的粗产品 = 1.0441 g获得的纯手动纯化产品 = 0.2855 g产率 = 0.2855/1.0441 × 100 = 49.73 %自动纯化使用的粗产品 = 1.0 g获得的纯自动纯化产品 = 0.5614 g产率 = 0.5614/1.000 × 100 = 56.14 % 自动 Flash 管柱纯化结果:实验4(上图,4克柱)和实验5(下图,12克柱)参考文献1. Purification of Delicate Compounds with RediSep Gold Diol and Cyano Columns Retrieved 19 Nov 2021
  • 160万!复旦大学超微量纯化仪采购项目
    项目编号:0705-224002028237项目名称:复旦大学超微量纯化仪采购国际招标项目预算金额:160.0000000 万元(人民币)最高限价(如有):156.8000000 万元(人民币)采购需求:招标项目编号:0705-224002028237招标项目名称:超微量纯化仪采购项目实施地点:中国上海市招标产品列表(主要设备):序号产品名称数量简要技术规格备注1超微量纯化仪2套用于纯化生物分子,包含但不限于蛋白质、多糖、肽类、寡核苷酸、核苷酸疫苗、病毒及天然小分子(TCM),适合分离纯化活性物质预算金额:人民币160万元 最高限价:人民币156.8万元 合同履行期限:签订合同后8个月内合同履行期限:签订合同后8个月内本项目( 不接受 )联合体投标。
  • 政策利好助力科研 梦想成真就在此刻!AIS 优选分离纯化、质谱监测方案
    政策利好助力科研 梦想成真就在此刻减税贴息!重磅利好! 为进一步加快高校科技创新体系建设,大力提升创新能力,国家近期对高校科学研究所需重大仪器设备购置与更新、配套设施建设等新增贷款,实施阶段性鼓励政策。重点围绕战略科技力量建设、关键核心技术攻关和基础研究原创引领突破等方面强化创新能力建设。新益求新!就在此刻! 创新和发展的核心是技术驱动,Advion Interchim Scientific 作为一家以质谱、制备纯化产品研发为核心的全球化企业,始终专注于科学仪器的研发,以优质的产品与服务,推出完善的整体解决方案,积极响应客户需求,帮助实验室提质增效,协助政策落地。‍‍‍‍‍‍‍‍‍AIS 仪器选购攻略,邀您一起清空购物车‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍01质谱系列产品 expression CMS 小型台式质谱仪 1、实验室变形金刚:expression CMS小型台式质谱仪 expression CMS 采用独特的 API 接口设计(专利技术),30min快速抽真空,先进的设计理念简化了操作规程,可为实验过程提供快速高效准确的信息,多种进样方式无需样品前处理,30s 即可获得结果,节省时间成本,最大限度提高工作效率,可直接快速的得到高质量的质谱数据,是实验室反应监测、纯化鉴定的重要工具,为科研人员快速出成果加油提速。2、有机合成实验室高效利器:TLC薄层色谱质谱接口 Plate Express 提供了一种自动提取的方法,可以直接从薄层色谱板获得样品,结合 expression CMS 可以快速识别产物,无需额外样品制备,与传统方式相比,更省时高效。3、多种标准化离子源接口:您的样品,我全包了! AIS CMS 的六种配套离子源,主要包括 ESI 和 APCI ,以及衍生出来的 OPSI 开放式进样端口、ASAP 大气压直接进样分析探头、iASAP 惰性气体大气压固体分析探头、vAPCI 气体常压化学电离源。离子源种类多,可满足不同的检测需求!ASAP 离子源,即大气压直接进样分析探头,与ESI、APCI互为补充,为科研工作者提供了快速可靠的固液体样品直接分析手段。 ASAP 大气压直接进样分析探头 ASAP 离子源,即大气压直接进样分析探头,与ESI、APCI互为补充,为科研工作者提供了快速可靠的固液体样品直接分析手段。 OPSI 开放式进样端口 Touch Express OPSI 开放式进样端口是一项独特的进样技术,为操作人员提供了快速、简便的方案: 1、可用于药物研究、食品安全、环境、司法鉴定等应用领域; 2、可用于大分子物质检测,如:蛋白质、脂质、核苷酸、聚合物等; 3、固体、液体均可直接进样,无需样品前处理,30s 即可获得实验结果。 vAPCI 气体常压化学电离源 气体常压化学电离源(vAPCI)与 Advion 小型台式质谱仪 expression CMS 结合,无需样品预处理,即可便捷、快速分析挥发性物质,如样品顶空,呼吸气体或空气等。02 纯化系列产品 puriFlash 纯化制备仪 1、puriFlash 制备纯化系统:全系列任您选择! AIS 新一代 puriFlash® Gene5 快速纯化&制备系统,从低压 20bar 到高压 400bar,覆盖流速 125 mL/min 到 825mL/min,配置完备的检测技术,可使用 UV(UV-Vis),iELSD,MS 检测器,适用各类型色谱柱(正相,反相,离子交换),获得 4-800g 超大范围的制备量。创新的 Flash&Go,Boost&GO,Load&Go 技术,无论是正相还是反相实验,人工智能系统都会给出最佳的纯化方案。2、实验室的另一双眼睛:TLC-FlashReader 读板仪 TLC-FlashReader 读板仪是一款紧凑、高效的多功能设备,适用于有机合成研究,可通过高清摄像头拍摄图片并上传和储存。仪器灵活性强,可作为独立模块单独使用,即插即用,也可以与 AIS 的制备纯化仪 puriFlash Gen5 配套使用,可将图像、Rf、溶剂信息、ΔCV 自动传输到 puriFlash 制备纯化系统 InterSoft X 软件上。3、样品旋蒸的守护者:puriFlash XS-Vap 蒸发仪 使用 puriFlash XS-Vap,您的样品浓缩不再受困扰!集成创新技术,减少蒸发时间和气体消耗。超直观的软件控制,操作精准,即插即用,节省时间。无限可能的扩展性、实验室的技术创新 expression CMS 处于实验室工作流程中的核心位置,可以将固、液体直接进样(ASAP 大气压直接进样分析探头、OPSI 开放式直接进样接口)、TLC 薄层色谱质谱接口、HPLC、制备色谱、手动注射等多种进样方式即时整合,轻松转换,满足实验室现阶段的需求以外,为后续实验室功能扩展(HPLC/SFC/Flash/ 微流体化学等与 expression CMS 联用)提供更多可能性。
  • 兽用疫苗分离纯化研究进展
    p  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "兽用疫苗很重要/span/strong/pp  我国是全球最大的家禽、家畜生产国和消费国。兽用疫苗在家禽、家畜疾病的预防和控制中发挥了重要作用,为畜牧业的健康和可持续发展提供了重要保障。我国的兽用疫苗从无到有,从粗放式到规范化快速发展,已发展成为一个品种多、覆盖面广的高增长行业。2015年的市场规模已达120多亿元,近7年年均复合增长率超过17%,在未来的5-10年里仍将保持13-15%的高速增长。/pp  为保证疫苗的安全性和有效性,降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰,需要对疫苗进行有效的分离纯化,去除细胞培养液中的其它杂质,提高疫苗有效成分的含量和纯度。/pp  由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高,以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究,传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法,杂质去除效果有限,导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。/pp  随着市场对高端疫苗需求的日益扩大,疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入,以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比,兽用疫苗对生产成本极其敏感,对纯度要求相对较低,如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本,对于兽用疫苗的产业化尤其重要。/pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "需要什么样的兽用疫苗/span/strong/pp  为保证疫苗的安全性和有效性,降低接种疫苗的副作用和杂质的免疫干扰,需要对疫苗进行有效的分离纯化,去除细胞培养液中的其它杂质,提高疫苗有效成分的含量和纯度。/pp  由于兽用疫苗对生产成本控制要求极高,以及早期人们对兽用疫苗纯化技术与工艺缺乏系统的研究,传统的纯化技术大多采用微滤、超滤、沉淀(PEG沉淀、硫酸铵沉淀等)、超速离心等初级的纯化方法,杂质去除效果有限,导致疫苗纯度低、安全性差、副作用大。/pp  随着市场对高端疫苗需求的日益扩大,疫苗研发机构及生产厂家对提高疫苗质量的重视和投入,以往人用疫苗纯化所采用的各种层析技术及分析检测技术逐渐开始应用于兽用疫苗的分离纯化和分析检测中来。与人用疫苗相比,兽用疫苗对生产成本极其敏感,对纯度要求相对较低,如何简化纯化工艺、提高纯化效率、降低纯化成本,对于兽用疫苗的产业化尤其重要。/pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "传统疫苗纯化技术/span/strong/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "沉淀法/span/strong/pp  沉淀法,即通过向蛋白质溶液中加入盐、有机溶剂、聚合物,改变溶液的pH或温度,从而使蛋白质沉淀出来的方法。最常用的沉淀剂主要有硫酸铵、硫酸钠、乙醇、丙酮、PEG等。例如在口蹄疫病毒的纯化中,所采用的沉淀方法主要包括硫酸铵沉淀法、PEG沉淀法、等电点沉淀法、鱼精蛋白沉淀法等。沉淀法对疫苗的纯化效果有限,单步处理所得到的疫苗纯度质量较低,往往作为样品预处理的一种有效方法。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "超滤法/span/strong/pp  超滤法是利用超滤膜在一定的驱动力下使水、无机盐等小分子通过,截留一定大小的大分子或病毒等颗粒,进而使大颗粒得到浓缩的方法。超滤法已成为蛋白质浓缩和缓冲液置换的首选方法。超滤膜的材料一般选用聚砜、聚醚砜等多聚物 而在疫苗等生物大分子领域,应用最多的是再生纤维素。超滤法是从大量病毒原料液中浓缩病毒样品的一种非常快捷高效的方法,其优点是操作条件简单、处理量大、疫苗损失小 在进行浓缩的同时还可以根据分子大小的差异(类似凝胶过滤层析)起到一定的纯化效果,但超滤法的选择性不高,只能透过或截留一定分子量的物质,使得最终得到的浓缩液中还会含有大量的大分子杂质,分辨率低于凝胶过滤层析。在超滤过程中,选择合适的膜组件以及优化合适的操作条件,对疫苗回收率的影响非常大。此外,疫苗等分子在膜上的吸附和超滤过程中的浓差极化现象,对超滤的应用效果也有显著的负面影响。/pp  王振辉等[1]采用超滤方法对效力检验不合格的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒灭活液进行浓缩和纯化处理(0.6/0.8/1.0微米的微滤膜过滤碎片等杂质、陶瓷膜过滤器(10k)浓缩和纯化、0.22微米滤膜无菌过滤)。结果表明,杂蛋白去除率达到62-70% 免疫至63 d时中和抗体效价(ELISA)平均高达245.7 稀释倍数,比常规疫苗中和抗体效价平均高出66.3 稀释倍数。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "超速离心法/span/strong/pp  超速离心技术主要包括差速离心和密度梯度离心2种类型,可用于样品浓缩、样品分析和生物大分子(病毒颗粒等)的分离纯化。差速离心法常用于对纯度和产量要求不高时的分离,通过不同的离心速度使颗粒从溶液中沉淀出来,并根据目的蛋白所在的位置选择保留上清还是沉淀。差速分离最常见的实际应用是通过其他手段浓缩和纯化上清液中的病毒之前,用差速离心法去除病毒裂解物中的细胞碎片等杂质。通过差速离心法能够将病毒离心沉淀与小颗粒的杂质分开,但是在沉淀或重悬过程中,病毒的结构可能会被破坏 此外一些病毒沉淀后难以再溶解,这就影响后续的纯化或分析。如果要得到活性和结构良好、分散均一并且纯度较高的病毒样品,那么就应该考虑密度梯度离心法。/pp  Kaaden O R等[2]人先用PEG沉淀法(PEG 6000、8-10%(W/V)浓度)从BHK-21型细胞病毒养液中对口蹄疫病毒(FMDV)进行预处理,然后采用蔗糖密度梯度离心,得到高纯度的口蹄疫病毒。Barzilai R[3]等人通过氯化铯密度梯度离心,直接从细胞质裂解液中获得了FMDV纯品,回收率达到95%。但超速离心存在操作繁琐、离心时间长、重复性差、设备成本高、处理量小、不易于放大等问题,只适用于实验室规模的病毒纯化和分析,难以满足工业化生产需求。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "新型疫苗纯化技术/span/strong/pp  层析技术具有分辨率高、操作条件温和、重复性好、易于放大、分离系统可实现管道化和自动化(更好满足密闭无菌要求)等突出优势,在生物制品(重组蛋白、疫苗、抗体等)的分离纯化中扮演着极其重要的角色。层析技术应用广泛,在疫苗纯化中已有大量成功的案例,绝大多数人用疫苗(乙肝疫苗、百日咳疫苗、狂犬疫苗等)都采用层析技术进行纯化和大规模生产[3]。/pp  层析技术根据分离原理的不同,主要包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析和亲和层析4大类。各种层析技术的特点和应用情况如表1所示,其中离子交换层析技术的应用最为广泛。/pp  strong表1.层析技术的特点和应用情况/strong/pp/ptable border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="648"colgroupcol width="72" span="5" style="width:54pt"//colgrouptbodytr height="18" style="height:13.5pt" class="firstRow"td height="13" class="xl63" style="border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width="129"层析技术/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"特点/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"捕获 /tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"精纯 /tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"精制/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"离子交换/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、高载量、高流速;低盐上样/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"台风(TY)/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、中等载量、高流速;高盐上样/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"**/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"*/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"凝胶过滤/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率;低载量、低流速/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"-/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"*/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"亲和/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"高分辨率、中/高载量、高流速/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="129"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"***/tdtd class="xl64" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="130"**/td/tr/tbody/tablep  随着市场需求的扩大、研发机构及疫苗厂家的研发投入和技术积累,越来越多的兽用疫苗开始使用层析技术进行分离纯化,工艺开发和小批量制备取得了重要进展,部分产品已进入后续的中试放大阶段。中科院过程工程研究所生化工程国家重点实验室是我国分离纯化领域的知名机构和优势单位,拥有一支高水平的人才队伍、配置齐全的分离纯化和分析检测平台,在人用疫苗领域具有10多年的研发和产业化经验(与企业合作)。近年来在兽用疫苗的分离纯化、分析检测、结构稳定性研究等领域也开展了一系列富有成效的工作[4-7]。/pp  苏志国、张松平等[4]通过对口蹄疫病毒结构特点的研究、培养液中杂质的组成和特性分析,在对介质选型、操作条件优化的基础上,建立了1条由离子交换层析和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺,口蹄疫灭活病毒的纯化倍数达到217倍,纯度达到95%以上,收率为37.5%。为提高疫苗的收率和降低纯化成本,又进一步研究疏水层析技术在口蹄疫病毒分离纯化中的应用效果,最终建立的由疏水层析、超滤浓缩和凝胶过滤层析组成的分离纯化工艺,取得了更好的分离纯化效果,纯化倍数达到247倍,收率达到75.4%,纯度接近电泳纯 该工艺进一步提高了疫苗收率,更有利于提高纯化效率和降低疫苗的纯化成本,为大规模制备口蹄疫灭活病毒疫苗奠定了基础。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/d040dc05-cfd0-42b9-87a8-be93c3088b2e.jpg" style="" title="1_副本.jpg"//pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/a7545038-4f01-43fb-89d8-cd7b9eda952f.jpg" style="" title="2_副本.jpg"//pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/8a3f7210-7fb4-4ec4-aa4b-89e9aec73c98.jpg" style="" title="3_副本.jpg"//pp  图1:丁基疏水层析分离纯化FMDV层析谱图/pp  图2 :凝胶过滤层析精制纯化FMDV层析谱图/pp  图3:图3 SDS-PAGE和Western blot分析(1、FMDV培养液,2、HIC初纯样品,3、超滤浓缩样品,4、凝胶过滤样品 5、凝胶过滤样品的VP1条带进行Western blot分析)/pp  除了灭活病毒疫苗,基因工程重组疫苗(重组蛋白抗原或重组融合(标签)蛋白抗原)也可以有效抑制病毒感染,有望发展成为更为安全有效的疫苗品种。基因工程重组疫苗,特别是带有标签的重组疫苗,分离纯化难度大大降低,分离效率大大提高。熊毅等[8]分别构建了带His和GST标签的重组表达载体,成功表达了A型口蹄疫病毒(FMDV)的结构蛋白VP1(包涵体形式),并分别采用金属螯合层析和GST亲和层析进行纯化,得到电泳纯的VP1蛋白 活性鉴定结果表明重组蛋白具有良好的特异性和抗原性,可用于易感动物的免疫及血清抗体筛查。/pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "疫苗检测技术/span/strong/pp  分析检测技术应用于疫苗培养、纯化、质控的各个阶段。快速、准确地对疫苗进行分析表征,对于疫苗分离纯化工艺的开发和优化,意义重大。人用疫苗研究历史悠久、技术完善,相关技术都可以直接用于兽用疫苗的分析检测。疫苗表征内容主要包括纯度、结构和活性 相应的分析检测技术主要包括电泳(以及Western blot)、ELISA、高效液相色谱、超速离心、动态光散射、透射电镜、差示扫描量热等技术[4-8]。/pp  strong表2 疫苗分析检测技术/strong/ptable border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="648"colgroupcol width="72" span="3" style="width:54pt"//colgrouptbodytr height="18" style="height:13.5pt" class="firstRow"td height="13" class="xl65" style="border-color: windowtext border-width: 1px border-style: solid " width="215"技术名称/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"特点 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"应用 /td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"电泳 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"操作简单,定性半定量 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"ELISA/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"体外活性 /tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"活性表征/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、准确/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、颗粒大小、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"场流分级/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"无损伤表征疫苗真实结构/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度、颗粒大小、分子量/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"分析速度慢、操作繁琐/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"纯度/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"动态光散射/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、准确/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"颗粒大小和分布/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"高效液相色谱/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"方便快捷直观昂贵/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"分子大小和形貌/td/trtr height="18" style="height:13.5pt"td height="13" class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="215"差示扫描量热/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"快速、疫苗稳定性条件筛选/tdtd class="xl65" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext " width="216"结构稳定性/td/tr/tbody/tablep/pp  在上述分析检测技术中,疫苗结构及其变化的表征对于疫苗分离纯化工艺和产品保存稳定性的研究越来越引起研究者的关注。高效液相色谱(或场流分级)与光散射技术(如多角度激光)联用,广泛用于各种疫苗的颗粒大小、分子量,以及结构变化的表征[4, 6, 7]。差示扫描量热技术也被广泛应用于疫苗稳定性研究中,无论是分离纯化过程中疫苗稳定结构条件(温度、缓冲液(pH、盐种类和浓度)、添加剂等)的筛选,还是疫苗成品的制剂研究[5]。  /pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "结论与展望/span/strong/pp  我国兽用疫苗市场潜力巨大,未来一段时间都将保持高速发展的态势。近年来,疫苗品质不断提高,市场逐步由政府招标向市场化转变,因此,疫苗分离纯化必将成为今后疫苗发展的重要趋势,只有经过浓缩、纯化等技术处理的高品质疫苗,才有可能在越来越激烈的市场竞争中占有一席之地。/pp  单从技术层面来看,兽用疫苗和人用疫苗的分离纯化与分析检测技术是相通的。目前广泛用于各种人用疫苗分离纯化和分析检测的技术都可用于兽用疫苗研发和生产中。但在市场价格方面,与人用疫苗相比,兽用疫苗市场价格相对较低,因此兽用疫苗的工业化生产对分离纯化技术及成本控制的要求也极为苛刻。如何借鉴人用疫苗的分离纯化技术和成功经验,设计和简化纯化工艺、提高疫苗稳定性和疫苗收率、降低介质等关键材料的使用成本,对于高端兽用疫苗的研发和产业化,意义重大。/pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "作者介绍/span/strong:黄永东,博士,中科院过程工程研究所副研究员,长期致力于蛋白质分离纯化工艺研发和层析分离介质研制工作。先后主持了9项国家自然科学基金、国家重点研发计划等课题,以及多项和生物医药企业的合作课题 先后开发了乙肝疫苗、百日咳疫苗、胸腺肽等多种生物活性物质的分离纯化工艺,以及10多种层析分离介质,相关技术和产品在200多家科研单位和企业得到应用。在纯化工艺开发和介质筛选等方面具有高超的理论水平和丰富的实战经验。/pp  strongspan style="color: rgb(112, 48, 160) "参考文献/span/strong/pp  [1] 武桂梅, 何玉友, 王振辉, 李鹏, 郑洪娟. 膜分离法纯化浓缩猪繁殖与呼吸综合征灭活病毒的效果试验. 中国兽医杂志, 2015, 51 (9): 99-102./pp  [2] Kaaden OR, Dietzschold B, Matheka HD, Tokui T. Konzentrierung und Reinigung von Maul-und-Klauenseuche-(MKS-) Virus durch Polyä thylenglykol (PEG). Archiv fü r die gesamte Virusforschung, 1971. 35(1): 104-113./pp  [3] Barzilai R, Lazarus L H, Goldblum N. Viscosity-Density Gradient for Purification of Foot-and-Mouth Disease Virus. Archly fü r die gesamte Virusforschung, 1972, 34: 141-146./pp  [4] Li H, Yang YL, Zhang Y, Zhang SP, Zhao Q, Zhu YY, Zou XQ, Yu MR, Ma GH, Su ZG. A hydrophobic interaction chromatography strategy for purification of inactivated foot and mouth disease virus. Protein Expression and Purification, 2015, 113: 23-29./pp  [5] Yang YL, Zhao QZ, Li ZJ, Sun LJ, Ma GH, Zhang SP, Su ZG. Stabilization study of inactivated foot and mouth disease virus vaccine by size-exclusion HPLC and differential scanning calorimetry. Vaccine, 2017, 35: 2413-2419./pp  [6] Chen Y, Zhang Y, Zhou YF, Luo J, Su ZG. Asymmetrical flow field-flow fractionation coupled with multi-angle laser light scattering for stability comparison of virus-like particles indifferent solution environments. Vaccine, 2016, 34: 3164-3170./pp  [7] Yang YL, Li H, Li ZJ, Zhang Y, Zhang SP, Chen Y, Yu MR, Ma GH, Su ZG. Size-exclusion HPLC provides a simple, rapid, and versatile alternative method for quality control of vaccines by characterizing the assembly of antigens. Vaccine 33 (2015) 1143–1150/pp  [8] 颜健华, 何奇松, 蒋家霞, 冯淑萍, 黄胜斌, 韦达有, 易春华, 许瑞胜, 梁晟, 熊毅. A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的原核表达、纯化及鉴定. 南方农业学报, 2016, 47 (2): 301-305./ppbr//p
  • 拜泰齐推出全新Selekt快速纯化系统
    p style="line-height: 1.5em " strong仪器信息网讯/strong 日前,拜泰齐推出了全新一代快速纯化系统Selekt以及纯化色谱柱Sfä r。这两个新产品将共同为有机和多肽领域的实验人员提供全新的快速纯化解决方案,以改善他们的分离体验。br//pp style="text-align: center line-height: 1.5em "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/ee7f9dc1-ee15-4525-9aeb-90e90d64c894.jpg" title="biotageselekt5863_800x800.jpg" alt="biotageselekt5863_800x800.jpg" width="450" height="397" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 397px "//pp style="line-height: 1.5em text-align: center "strongspan style="color: rgb(0, 176, 240) "span style="font-family: " times new roman" "Selekt /spanspan style="font-family: 宋体, SimSun "系统/span/span/strong/pp style="line-height: 1.5em "  span style="font-family: 宋体, SimSun color: rgb(247, 150, 70) "strongspan style="font-family: 宋体, SimSun font-size: 20px "性能提升 小身材有大智慧/span/strong/span/pp style="line-height: 1.5em "  拜泰齐全新的快速纯化色谱系统Selekt小巧紧凑,占地面积很小,并且可以将色谱柱安装在仪器的一侧或前面,最大限度的节省了实验室的空间。同时该仪器在性能参数上做了大幅提升,包括双通道设计,避免了单通道运行所需的准备时间,也可以保证系统在正反相之间轻松转换,提高了仪器使用效率;全新高速流量设计,流速最高可达300mL/min,拓宽了耐压范围,由原来的10bar提升至30bar,使纯化过程能够以更快的速度进行;多项优化提升有助于在提高样品纯度的同时减少溶剂的使用,更加绿色环保。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/a1cc65a3-eac2-45ee-a4f4-e152f35aae0e.jpg" title="sfar column.jpg" alt="sfar column.jpg" width="450" height="494" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 494px "//pp style="line-height: 1.5em text-align: center "strong style="color: rgb(0, 176, 240) text-align: center "Sfä r 色谱柱/strong/pp style="line-height: 1.5em "  与新系统一起推出的纯化色谱柱Sfä r,是拜泰齐全新的快速纯化柱系列,具有从5g到350g的各种尺寸和条件类型。色谱柱使用具有更高表面积的的填料填充,因此具有更高的负载能力,使用户能够选择更小的柱子分离更多的样品,减少了溶剂的用量和分离的成本。同时, Sfä r色谱柱具有灵活多样的上样方式,满足用户的多种选择。/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "  span style="font-size: 14px "strongspan style="color: rgb(0, 176, 240) "Selekt 技术参数/span/strong/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  重量: 23 kg/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  大小: (W x D) 335 mm x 393 mm/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  高度: 545 mm./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  触屏面积: 15.0英寸./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  色谱柱通道: 两个/span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  流量范围: 1–300 mL/min./span/pp style="line-height: 1.5em text-align: left "span style="font-size: 14px "  压力范围:0–30 bar (0–3000 kPa 0–435 psi)./span/pp style="line-height: 1.5em "  strongspan style="font-size: 20px color: rgb(247, 150, 70) "智慧交互 细节带来良好用户体验/span/strong/pp style="line-height: 1.5em "  Selekt在全面提升仪器性能的同时,也针对用户体验做了多项优化,整体提高了仪器的易用性。全新设计的15英寸大屏灵活交互界面,集成所有功能,使操作更简便更直观。独家研发的操作系统,为使用者提供了更深度的智能体验,可以记录实验人员的使用习惯,预先加载常用的分析方法。拜泰齐的产品经理也表示,Selekt系统第一次在系统推出的同时搭载了专业的中文操作软件,更有利于国内的用户在第一时间获得良好的使用体验。/pp style="line-height: 1.5em "  而Sfä r色谱柱,每一个柱子上都有专属的二维码,可以记录柱子的使用数据,使得用户可以通过扫码清楚地知道柱子的使用时间以及分析方法,带来更智能化的体验。/pp style="line-height: 1.5em "  span style="color: rgb(247, 150, 70) font-size: 20px "strong全面升级 拓展应用领域范围/strong/span/pp style="line-height: 1.5em "  本次新产品,是拜泰齐近年来最重要的一次产品革新,拜泰齐对于全新的分离纯化解决方案充满信心,随着产品的全面升级,拜泰齐将瞄准更多应用领域。随着流速和耐压的提升,Selekt能够支持部分高压制备液相的功能,可以支持10um粒径填料的应用。Selekt支持从小分子到大分子的样品分离纯化需求,大大拓展了应用范围,除了应用于以往的小分子制药等传统领域之外,也可用于天然产物、生物大分子等领域。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/3467a369-769c-4221-b515-812260b08be0.jpg" title="35391535431917963.jpg" alt="35391535431917963.jpg" width="450" height="300" border="0" vspace="0" style="width: 450px height: 300px "//ppbr//p
  • 东曹携手合作伙伴举办生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会
    p  strong仪器信息网讯/strong 2019年6月11日、13日,由东曹(上海)生物科技有限公司(TOSOH)主办的“生物医药中下游分离纯化技术应用研讨会”在北京、上海两地成功召开。研讨会首次携手藤森工业株式会社、岛津上海实验器材有限公司,并邀请资深技术人员,围绕生物医药(单克隆抗体、ADC药物等)在研发、生产中所涉及的分离、分析、一次性技术等内容展开介绍及讨论,北京场共吸引100余位专业人士参加。仪器信息网作为特邀媒体参与并报道北京场的研讨会。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/31ec2b44-39ba-44d7-926a-83ccbc3c3f69.jpg" title="IMG_5067_副本.jpg" alt="IMG_5067_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong北京场研讨会现场/strong/ppstrong/strong/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/ff796c28-99fa-4a57-8146-1429979f1684.jpg" title="IMG_5051_副本_副本.jpg" alt="IMG_5051_副本_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong东曹(上海)生物科技有限公司副总经理潘明祥主持研讨会/strong/ppstrong/strong/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/e81c12e6-79c4-400c-83a2-35bd198f1da4.jpg" title="IMG_5053_副本.jpg" alt="IMG_5053_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong报告主题: Ground-breaking Application to therapeutic antibody by FcγReceptor ⅢA immobilized Affinity chromatography column TSKgel FcR-ⅢA-NPR -Separation of mAb based on ADCC activity-/strong/pp style="text-align: center "strong演讲人:冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)/strong/pp  糖链结构差异会影响抗体与引起免疫反应的效应细胞上的Fc受体之间的结合,因此对抗体药物糖链结构的分析在质量控制中至关重要。TOSOH于今年2月在全球范围内推出一款高性能亲和TSKgel® FcR-IIIA-NPR色谱柱,将重组人FcγIIIA作为配基键合到非多孔亲水聚合物基质的填料上,并充填至PEEK色谱柱内,以识别不同糖链结构并根据ADCC活性强弱来分离不同抗体组分,为抗体药物糖链结构的分析和活性测定带来全新思路和方法。/pp  报告对该色谱柱的分离原理、性能参数、主要用途、使用要点进行了介绍,列举其在抗体药物质量控制、细胞培养条件优化、细胞器筛选、细胞培养过程监控等环节的应用。相比传统方法,FcR-IIIA-NPR色谱柱可在30分钟内快速完成抗体分离并获得重复性良好的分析结果,降低成本且无需样品预处理。这款色谱柱推出不久便获得2019年PITTCON会议颁发的“卓越奖银奖”。/pp style="text-align: center "strong报告主题: TSKgel色谱柱新产品UP-SW2000在小分子蛋白、多肽、寡核苷酸领域的应用/strong/pp style="text-align: center "strong演讲人:冨泽洋(东曹株式会社 生命科学事业部)/strong/pp  冨泽洋先生还介绍了TOSOH另一超高效液相色谱柱新产品,用于生物大分子分离的尺寸排阻色谱分析柱TSKgel® UP-SW2000。该色谱柱的填料粒径为2μm,可针对小分子蛋白、多肽、寡核苷酸等生物大分子/中型分子进行快速分离和高效率分析 与TSKgel SW系列色谱柱有相同的填料表面特性,可兼容于UHPLC和常规HPLC系统。与现有SW系列色谱柱相比,UP-SW2000对蛋白质具有相同的分离选择性,且峰形更尖锐,分辨率更高。各类多肽样品在UP-SW2000上可以保持良好峰形。冨泽先生在报告中分享了该色谱柱对多种中小分子量蛋白、多肽(胰岛素、胸腺肽)、寡核苷酸、抗生素等的分析应用。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/39ee150a-320e-4773-ad21-1f41a6b0c5f2.jpg" title="IMG_5058_副本.jpg" alt="IMG_5058_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong报告主题: 生物大分子药物生产中一次性技术的介绍/strong/pp style="text-align: center "strong演讲人:矢野贵之(藤森工业株式会社)/strong/pp  藤森工业株式会社成立于1914年,是一家拥有精密涂布技术,可为电子行业提供精细材料,并且为医疗、化妆品、食品行业提供各种包装材料的“百年老店”。藤森工业生命科学事业部提供颗粒分包、铝箔袋、灭菌袋、药用离型膜、药用输液袋等各类包装产品。公司近年来大力拓展一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件。在日本生物制药行业的一次性生物工艺的应用研究和行业标准制定中,几乎都有藤森工业的参与。报告重点介绍了藤森工业提供的一次性细胞培养用反应袋以及各种连接件的定制服务、应用以及验证工作。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/cf5da81f-ae52-492a-9b10-6fd84e7962ae.jpg" title="IMG_5076_副本.jpg" alt="IMG_5076_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong报告主题: 岛津在生物药领域的解决方案:细胞上清液组分分析包、抗体药物分析、nSMOL技术介绍/strong/pp style="text-align: center "strong演讲人:涂奇奇(岛津上海实验器材有限公司)/strong/pp  为应对生物药领域日益复杂的分析需求,报告重点介绍了岛津推出的细胞上清液组分分析方法包和纳米表面分子导向限制性酶解(nSMOL)技术。细胞上清液组分分析方法包可同时分析95种化合物,分析时间最快可达17分钟一个样品,在葡萄糖、谷氨酰胺等高浓度组分,以及维生素等低浓度组分中均呈现优化的MRM参数。nSMOL技术则是通过特异性酶解CRD区域的肽段降低分析的目标肽段数,再结合质谱方法实现各类抗体药物的分析。该技术在曲妥珠单抗定量分析、百日咳毒素S4亚基肽段覆盖度分析中已得到较好应用。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/cc2818cb-1217-4264-b9dc-ef245f0f1b09.jpg" title="IMG_5087_副本.jpg" alt="IMG_5087_副本.jpg"//pp style="text-align: center "strong报告主题: Technical trend of biopharmaceuticals purification/strong/pp style="text-align: center "strong演讲人:桥本佳巳(东曹株式会社 生命科学事业部)/strong/pp  桥本佳巳先生汇报了生物制药纯化技术的发展趋势,方向是更高的结合能力,以及碱性条件下更强的稳定性。报告介绍了TOSOH针对下游纯化工艺,推出的TOYOPEARL AF-rProtein L-650F、 rProtein A HC-650F和羟基磷灰石Ca++ Pure-HA三种新型层析填料。Protein L可对一些无法使用Protein A填料纯化的抗体样品(不含有Fc区域的抗体)进行有效纯化。Ca++ Pure-HA适用于生物分子的分离纯化,其高选择性可以分离电泳或其他层析模式难以分离的蛋白。据悉,TOSOH还参股位于美国的Semba Biosciences公司,以推进连续流色谱技术及产品的研发。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/1cc66e66-f0bb-4296-85ca-21e4e7d6bc1a.jpg" title="1.jpg" alt="1.jpg"//pp style="text-align: center "strong研讨会上举办精彩纷呈的抽奖环节/strong/p
  • 从CISILE 2014看生物制药分离纯化技术发展
    仪器信息网讯 近年来,全球医药市场的发展中心逐渐由小分子化学药转向大分子生物药,预计到2020年,全球生物医药的销售额将达到1400亿美元,生物医药的全球销售比重将超过三分之一。而各大跨国药企对生物制药的投入不断扩大,如2013年罗氏宣称拟投资8亿瑞郎用于全球生物药品的生产,2014年三星公司宣布以至少20亿美元的投资进军生物制药市场。  当今影响生物制药发展的重要技术之一是分离纯化技术。来自北京赛升药业股份有限公司的孔双泉在CISILE 2014&ldquo 药物纯化、检测技术专题论坛&rdquo 上分析了现有生物制药行业所用的分离纯化技术特点以及新兴纯化技术的发展。  从机理上划分,生物制药行业现行的分离纯化技术主要有五大类:基于溶解度差异的分离纯化技术、基于分子大小差异的分离纯化技术、基于选择性吸附差异的分离纯化技术、基于电荷不同的分离技术 、基于对配体亲和力差异的分离技术。  以基于溶解度差异的分离纯化技术为例,其主要包括盐溶盐析法、有机溶剂沉淀法、等电点法、双水相萃取法和反胶团萃取法,每种方法均有其明显的特点或适合分离的对象。 方法特点盐溶盐析法优点是温度系数小而溶解度大有机溶剂沉淀法多用于生物小分子、多糖及核酸产品的分离纯化;低温一般先冷却&mdash 20度;常与其他沉淀方法联用。等电点法适用于低温操作.因对于许多生物分子等电点比较接近,故此法常与其他方法结合使用,较难扩大生产。双水相萃取法与传统的分离技术相比,具有操作条件温和、处理量大、易连续操作等优点。反胶团萃取法具有选择性高、萃取过程简单,正萃、反萃同时进行,能有效防止大分子失活、变性。其不足之处包括:普通离子型表面活性剂可能对产品产生污染;常用的离子型表面活性剂容易造成蛋白质的变性和失活。  从报告中获悉,现行的膜分离技术常用的膜有四种:用于细菌和病毒分离的微滤膜 用于蛋白质和多肽分离的超滤膜 用于抗生素、合成药物、核苷酸、无机盐分离的纳滤膜 用于无机盐分析的反渗透膜。  从纯化策略上看,生物制药的分离纯化主要分四个阶段:样品准备(破碎、过滤和离心)、粗提(分离、浓缩和稳定样品)、中度纯化(去除大部分杂质)和精细纯化(高纯度)。当前较为成熟的生物分离纯化技术如IEX、HIC等具有不同的特色。 层析技术主要特色粗提中度纯化精细纯化IEX高分辨率、高载量、快速★★★★★★★★★HIC分辨率好、载量一般、快速★★★★★★AC高分辨率、高载量、快速★★★★★★★★GF高分辨率 ★★★★RPC高分辨率 ★★★★  分离纯化工业化影响因素主要来自设备和分离介质,目前生物制药企业纯化工业所使用的设备主要有GE AKTA Pure 蛋白质层析纯化系统、 高分辨率的分析制备平台&mdash &mdash BioLogic DuoFlow中高压层析系统以及北京创新通恒第三代工业化生产HPLC系统 分离介质主要有BIO&mdash RAD公司适合工业化的耐受高压层析介质-UNOsphere SUPrA 亲和介质和UNOsphere Q 阴离子交换介质、利用灌注层析技术制备层析介质-POROS胶体是灌注层析技术的填料以及PALL公司HEA和PPA HyperCelTM混合模式填料。  基于生物制药纯化对高通量、高分辨率等的追求,分离纯化技术也得到了快速发展,主要有三种:第一,扩张床吸附技术,该技术结合了澄清、浓缩及产品捕捉三个步骤,在基因工程产品的分离纯化过程中得到较好的发展 第二,径向膜层析技术,该技术由于流向的截面积大,具备了纯化速度快处理量大以及简单通过改变柱长便可增加上样量的特点,利于放大生产 第三,置换层析技术,与传统的洗脱层析技术相比,其明显的优势在于高上样量、高产率、高分辨率、易于操作等。  目前生物纯化技术的设备主要是以GE公司的AKTA系统,据了解,该产品在生物制药企业的全球市场占有率在90%左右,中国生物制药市场的占有量几近100%。相关消息显示,国内有研究机构和仪器制造企业已经着手生物纯化设备产品的研发,并已进入研发后期。在生物制药快速发展的今天,生物纯化设备也将得到快速的发展。(撰稿:杨改霞)
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