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显微照相系统

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显微照相系统相关的论坛

  • 【讨论】有关数码显微照相装置

    现在，基本上是采用彩色CCD摄像。那么，如果显微镜放大倍数足够的情况下，摄像头像素与观察精度什么样的关系呢？比如说，观察并测量1微米的物体，需要多少万象素的？使用过程中，从目镜观察物体很清晰，但是通过数码显示在pc上比较模糊。偶尔还有颜色不符合的情况。显微镜是Olympus

  • 显微镜物镜的分类和用途知识

    物镜是显微镜的核心光学部件，各个厂家其型号和规格名目繁多，下面来介绍一下分类，供大家参考。大致可以有以下四种分类方式： 1．按色差校正程度分类 （1）一般消色差物镜：这是最常见的物镜，尽管各厂家的标示不一样，但一般都有“Ach”字样。 （2）平场消色差物镜：一般这种物镜标有PLAN字样，这种物镜的视场平坦，非常适合显微照相，观察起来也比较舒适。 （3）半复消色差物镜，一般带有FL字样，能校正红、兰两色的色差和球差。这种可用于荧光观察等，是比较高级的物镜。 （4）复消色差物镜：标有APO字样，是观察和显微照相用的一流物镜，它们的性能只受物理定律的限制。该物镜具有优良的修正性和极其高的数值孔径，所以在观察和显微照相术方面具有最大的分辨率、色彩纯度、对比度以及图象平直度。如奥林巴司 UPLAN SAPO 100X/1.40 OIL物镜。

  • 【原创】显微数码相机

    【原创】显微数码相机

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/07/200807301007_100602_1734324_3.jpg[/img]DCM系列显微照相机，可以立刻把您的普通显微镜升级为一台数码视频显微镜。价格仅为成套数码显微镜的二十分之一，配套的高级图像分析软件可以对视野中的图像进行长度测量、直径测量、切线测量（内切或外切）、细胞计数，还可以轻松地进行拍照、录像、打印和图象传输。产品采用高分辨率图像传感器、USB2.0高速接口，光学部分由国家光学重点实验室设计，性能优异、体积小巧，更适合教师教学和装备数字化实验室。 实现了图像信息实时共享，使科研和教学工作更直观更高效。

  • 显微镜知识--显微镜物镜分类

    物镜是显微镜的核心光学部件，各个厂家其型号和规格名目繁多，下面来介绍一下分类，供大家参考。大致可以有以下四种分类方式： 1．按色差校正程度分类 （1）一般消色差物镜：这是最常见的物镜，尽管各厂家的标示不一样，但一般都有“Ach”字样。 （2）平场消色差物镜：一般这种物镜标有PLAN字样，这种物镜的视场平坦，非常适合显微照相，观察起来也比较舒适。（3）半复消色差物镜，一般带有FL字样，能校正红、兰两色的色差和球差。这种可用于荧光观察等，是比较高级的物镜。 （4）复消色差物镜：标有APO字样，是观察和显微照相用的一流物镜，它们的性能只受物理定律的限制。该物镜具有优良的修正性和极其高的数值孔径，所以在观察和显微照相术方面具有最大的分辨率、色彩纯度、对比度以及图象平直度。如奥林巴司 UPLAN SAPO 100X/1.40 OIL物镜。 2．按功能分类（1）相差物镜（Phase contrast）,用来观察无色透明的标本或活细胞，倒置显微镜上使用广泛，一般带有PH标志，且字体用绿色。（2）DIC物镜，可以做DIC的物镜，一般要求半复消色差物镜，DIC观察无色样品或或细胞。（3）HMC物镜，标有HMC标志，一种类似相差物镜的物镜，观察效果有立体感比较强，但不能用于荧光观察。（4）偏光物镜，一般标有POL字样，这种物镜装配了克服应力设备，是专做偏光的物镜。（6）多功能物镜，有的厂家生产一种多功能物镜，比如可以同时做相差，DIC，荧光等，这种物镜要稍微贵些。一般带有U标志,比如奥林巴斯的”UPLFLN”物镜和蔡司的”EC PLAN –NEOFLUAR”系列物镜。 3．按工作距离分类 （1）普通物镜：工作距离可以看切片，但不能看培养皿。 （2）长工作距离物镜：一般有LD标志,例如奥林巴斯的LUCPLFLN-PH物镜和蔡司的LD-A-PLAN PH物镜。 这些物镜可以用于培养皿、培养瓶等容器的观察。工作距离高至10.6mm，并可以进行光学修正，适用于0~2mm厚度的盖玻璃，通常由修正环或特殊的玻璃盖帽完成修正。4．特殊用途物镜 （1）水浸式物镜,一般有W标志，这些水浸入式物镜同直立显微镜一起主要应用于生理学，如脑片等较厚样品的观察。奥林巴斯XLUMPLFL20×W 和蔡司ACHROPLAN 40X W都是浸水式物镜。 （2）TIRF用专用物镜，要求数值孔径要大，NA一般在1.45到1.65。如NIKON公司的APO TIRF 60X 1.49物镜。 （3）超级荧光物镜：这种物镜的荧光透过率非常高，物镜用于对离子位移进行定性和定量的分析以及用于特别关键的荧光技术（如人体染色体的研究以及细胞遗传学）。这些物镜的突出特点是它们对340nm起的波长有特别高的数值孔径和高传输率（340nm时约为70%！）。视场平直足以可以使用CCD相机。如蔡司的FLUAR 20X 物镜。 当然还有其他更特殊的物镜，比如金相显微镜用的无盖玻片物镜和反射暗视野物镜、超低倍物镜等。 5．物镜上有很多的参数标记,来帮助大家识别物镜的等级和功能。下面用NIKON的一款物镜做例子以解释物镜的重要参数： (1) NIKON ---制造商名称: 尼康公司 (2) PLAN APO---物镜的名称: 平场复消色差物镜 (3) 60X 放大倍数: 60倍 (4) 0.95 数值孔径: 0.95 (6) DIC M 功能: 可以做DIC (7) ∞/0.11-0.23 表示无限远筒长/盖玻片厚度 (8) WD 0.15 表示工作距离 d 物镜利用光线使被检物体第一次成像，因而直接关系和影响成像的质量和各项光学技术参数，是衡量一台显微镜质量的首要标准。所以在选择显微镜时不仅仅要选择主机的型号，也一定要仔细选择物镜，结合自己的实际用途考虑合适的物镜等级和功能.这样您就能买到称心的产品了.

  • 请推荐一个显微境照相软件

    用电脑控制Canon数码相机在显微镜上拍照片直接存入电脑。请问有什么软件可以在拍照片时直接在照片上显示标尺。我用Canon的RemoteCapture照相，可是无法显示标尺。

  • 【求助】显微镜照相中间有一亮圈

    【求助】显微镜照相中间有一亮圈

    这几天在做细胞划痕实验，需要显微镜下照相，不过照片上中间老是有一亮圈，怎么调也弄不掉，不知道那位高手能帮忙给些建议，不胜感激！我们实验室用的显微镜是Olympus CK2 倒置显微镜，相机是用的尼康D90。照片如下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103300846_285956_2262445_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103300847_285957_2262445_3.jpg

  • 【资料】显微镜基础知识和原理（三）

    第四章 显微镜的光学附件显微镜的光学部件包括物镜，目镜，聚光镜及照明装置几个部分。各光学部件都直接决定和影响光学性能的优劣，现分述如下：一．物镜物镜是显微镜最重要的光学部件，利用光线使被检物体第一次成像，因而直接关系和影响成像的质量和各项光学技术参数，是衡量一台显微镜质量的首要标准。国际物镜的检测标准是以蔡司物镜为基准的。物镜的结构复杂，制作精密，由于对像差的校正，金属的物镜筒内由相隔一定距离并被固定的透镜组组合而成。物镜有许多具体的要求，如合轴,齐焦。齐焦既是在镜检时，当用某一倍率的物镜观察图像清晰后，在转换另一倍率的物镜时，其成像亦应基本清晰，而且像的中心偏离也应该在一定的范围内，也就是合轴程度。齐焦性能的优劣和合轴程度的高低是显微镜质量的一个重要标志，它是与物镜的本身质量和物镜转换器的精度有关。传统物镜的种类很多，可从不同的角度分类，现分类介绍。根据物镜位置色差校正的程度进行分类，可分为：1．消色差物镜（Achromatic objective）: 这是常见的物镜，外壳上常有“Ach”字样。这类物镜仅能校正轴上点的位置色差（红，蓝二色）和球差（黄绿光）以及消除近轴点慧差。不能校正其它色光的色差和球差，且场曲很大。最早的消色差物镜是由蔡司制造的。2．复消色差物镜（Apochromatic objective）： 复消色差物镜的结构复杂，透镜采用了特种玻璃或萤石等材料制作而成，物镜的外壳上标有“Apo” 字样 ，这种物镜不仅能校正红绿蓝三色光的色差，同时能校正红，蓝二色光的球差。由于对各种像差的校正极为完善，比响应倍率的消色差物镜有更大的数值孔径，这样不仅分辨率高，像质量优而且也有更高的有效放大率。因此，复消色差物镜的性能很高，适用于高级研究镜检和显微照相. 完善的复消色差物镜由蔡司制造的. 2004年蔡司推出了研究级ICCS物镜是在传统的平场复消色差物镜的基础上进一步校正倍率色差和无应变，增强短波长的透过率，并且增强反差,明显提高分辨率。3．半复消色差物镜（ Semi apochromatic objedtive）： 半复消色差物镜又称氟石物镜，物镜的外壳上标有“FL”字样，在结构上透镜的数目比消色差物镜多，比复消色差物镜少，成像质量上，远较消色差物镜为好，接近于复消色差物镜。平场物镜是在物镜的透镜系统中增加一快半月形的厚透镜，以达到校正场曲的缺陷。平场物镜的视场平坦，更适用于镜检和显微照相。4．特种物镜：所谓“特种物镜”是在上述物镜的基础上，专门为达到某些特定的观察效果而设计制造的。主要有以下几种：（1） 带校正环物镜（Correction collar objective）：在物镜的中部装有环装的调节环，当转动调节环时，可调节物镜内透镜组之间的距离，从而校正由盖玻片厚度不标准引起的覆盖差。调节环上的刻度可从0 .11--.023,在物镜的外壳上也标有此数字，表明可校正盖玻片从0.11—0.23mm厚度之间的误差。（2） 带虹彩光阑的物镜（Iris diaphragm objective ）：　在物镜镜筒内的上部装有虹彩光阑，外方也可以旋转的调节环，转动时可调节光阑孔径的大小，这种结构的物镜是高级的油浸物镜，它的作用是在暗视场镜检时，往往由于某些原因而使照明光线进入物镜，使视场背景不够黑暗，造成镜检质量的下降。这时调节光阑的大小，使背景变黑，使被检物体更明亮，增强镜检效果。（3）相衬物镜（Phase contrast objective ）：这种物镜是由于相衬镜检术的专用物镜，其特点是在物镜的后焦平面处装有相板。（4）无罩物镜（No cover objective ）：有些被检物体，如涂抹制片等，上面不能加用盖玻片，这样在镜检时应使用无罩物镜，否则图像质量将明显下降，特别是在高倍镜检时更为明显。这种物镜的外壳上常标刻ＮＣ，同时在盖玻片厚度的位置上没有０.17的字样，而标刻着“０”。（5）长工作距离物镜：这种物镜的焦距大于普通物镜，它是为了满足液态材料（高温金相）、液晶、组织培养、悬浮液等材料的镜检而设计。　二． 目镜目镜的作用是把物镜放大的实像（中间像）再放大一便，并把物像映入观察者的眼中，实质上目镜就是一个放大镜。已知显微镜的分辨率能力是由物镜的数值孔径所决定的，而目镜只是起放大作用。因此，对于物镜不能分辨出的结构，目镜放的再大，也仍然不能分辨出。由于不同系列目镜光学设计不同，所以不能混用。三． 聚光镜聚光镜又名聚光器，装在载物台的下方。小型的显微镜往往无聚光镜，在使用数值孔径0.40以上的物镜时，则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量的不足和适当改变从光源射来的光的性质，而且将光线聚焦于被检物体上，以得到最好的照明效果。聚光镜的的结构有多种，同时根据物镜数值孔径的大小 ，相应地对聚光镜的要求也不同 。1． 阿贝聚光镜（Abbe condenser）这是由德国光学大学大师恩斯特。阿贝.(Ernst Abbe 蔡司公司的创始人之一)设计。阿贝聚光镜由两片透镜组成，有较好的聚光能力，但是在物镜数值孔径高于0.60时，则色差，球差就显示出来。因此，多用于普通显微镜上。2． 消色差聚光镜(Achromatic aplanatic condenser ) 这种聚光镜又名“消色差消球差聚光镜”和“齐明聚光镜”它由一系列透镜组成，它对色差球差的校正程度很高，能得到理想的图像，是明场镜检中质量最高的一种聚光镜，其NA值达1.4 。因此，在高级研究显微镜常配有此种聚光镜。它不适用于4 X以下的低倍物镜，否则照明光源不能充满整个视场。 3． 摇出式聚光镜（ Swing out condenser）在使用低倍物镜时（如4X），由于视场大，光源所形成的光锥不能充满真整个视场，造成视场边缘部分黑暗，只中央部分被照亮。要使视场充满照明，就需将聚光镜的上透镜从光路中摇出。4． 其它聚光镜：聚光镜除上述明场使用的类型外，还有作特殊用途的聚光镜。如暗视野聚光镜，相衬聚光镜，偏光聚光镜，微分干涉聚光镜等，以上聚光镜分别适用于相应的观察方式。四．显微镜的照明装置显微镜的照明方法按其照明光束的形成，可分为“透射式照明”，和“落射式照明”两大类。前者适用于透明或半透明的被检物体，绝大数生物显微镜属于此类照明法；后者则适用于非透明的被检物体，光源来自上方，又称“反射式或落射式照明”。主要应用与金相显微镜或荧光镜检法。1． 透射式照明透射式照明法分中心照明和斜射照明两种形式：（1） 中心照明：这是最常用的透射式照明法，其特点是照明光束的中轴与显微镜的光轴同在一条直线上。它又分为“临界照明”和“柯勒照明”两种。A． 临界照明（Critical illumination）:这是普通的照明法。这种照明的特点是光源经聚光镜后成像在被检物体上，光束狭而强，这是它的优点。但是光源的灯丝像与被检物体的平面重合，这样就造成被检物体的照明呈现出不均匀性，在有灯丝的部分则明亮；无灯丝的部分则暗淡，不仅影响成像的质量，更不适合显微照相，这是临界照明的主要缺陷。其补救的方法是在光源的前方放置乳白和吸热滤色片，使照明变得较为均匀和避免光源的长时间的照射而损伤被检物体。B． 柯勒照明：柯勒是十九世纪末蔡司厂的工程师,为了纪念他在光学领域的突出贡献,后人把他发明的二次成像叫做柯勒照明. 柯勒照明克服了临界照明的缺点，是研究用显微镜中的理想照明法。这中照明法不仅观察效果佳，而且是成功地进行显微照相所必须的一种照明法。光源的灯丝经聚光镜及可变视场光阑后，灯丝像第一次落在聚光镜孔径的平面处，聚光镜又将该处的后焦点平面处形成第二次的灯丝像。这样在被检物体的平面处没有灯丝像的形成，不影响观察。此外照明变得均匀。观察时，可改变聚光镜孔径光阑的大小，使光源充满不同物镜的入射光瞳，而使聚光镜的数值孔径与物镜的数值孔径匹配。同时聚光镜又将视场光阑成像在被检物体的平面处，改变视场光阑的大小可控制照明范围。此外，这种照明的热焦点不在被检物体的平面处，即使长时间的照明，也不致损伤被检物体。2004年蔡司公司又在传统柯勒式照明基础上推出了带有反光碗的全系统复消色差照明技术，消除照明色差，增强光的还原性，进而提高分辨率，同时照明均匀而光效高。（2） 斜射照明：这种照明光束的中轴与显微镜的光轴不在一直线上，而是与光轴形成一定的角度斜照在物体上，因此成斜射照明。相衬显微术和暗视野显微术就是斜射照明。2． 反射式照明这种照明的光束来自物体的上方通过物镜后射到被检物体上，这样物镜又起着聚光镜的作用。这种照明法是适用于非透明物体，如金属，矿物等。

  • 【原创大赛】关于显微镜的柯勒照明

    【原创大赛】关于显微镜的柯勒照明

    柯勒(August Kohler) 是十九世纪末蔡司厂的工程师,为了纪念他在光学领域的突出贡献,后人把他发明的二次成像叫做柯勒照明柯勒照明优点：柯勒照明克服了临界照明的缺点，是研究用显微镜中的理想照明法。这种照明法不仅观察效果佳，而且是成功地进行显微照相所必须的一种照明法。1.灯丝不落在被检物平面上，照明均匀；2.照明的热焦点不在被检物，不会灼伤被检物；3.聚光镜将视场光阑成像在被检物平面处，改变大小可控制照明范围。我们在使用显微镜时。有的时候图像有眩光、明暗不均匀（有的时候视场左亮右暗。或者相反）、视场无亮光、观察dic时效果很差等等。都与柯勒照明没有调整好有关。。下面我来介绍具体怎么调整柯勒照明。。以olympus ix71为例。。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/09/201309041740_462245_2535415_3.jpg

  • 【求助】徕卡Leica DMILM显微镜，是怎么照相的？

    【求助】徕卡Leica DMILM显微镜，是怎么照相的？

    对于徕卡Leica DMILM显微镜，使用数码相机照相时，是怎么把数码相机与镜筒相连的？是怎么把目镜光源转换到照相镜筒这边来的？我不会照相，期望你的答复[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/05/200705082252_51167_1624517_3.jpg[/img]

  • 光学显微镜怎样防尘以及保养的细节

    在使用光学显微镜的朋友都会遇到除尘的问题，认为自己已经做的很小心的防尘了，为什么还是有灰尘还是进入到了镜筒，物镜镜体内部呢？首先拧下物镜时，必须将其旋座向下倒放在干净的台面上，或立即装入物镜盒中；拔出目镜后，随手用镜筒塞或干净纸帽盖上镜筒口；置换显微照相暗箱、光电倍增器、光栏基座时，随手盖好连接口盖，绝不留下跌入尘埃的空隙；如果有些尘粉颗粒仍不脱落时，可用干净、干操、细软毛笔扫除干净，经常的除尘，擦拭也可以增加显微镜的使用寿命，搜科网简单的为您介绍显微镜日常维护的要素有哪几点？1、首先调焦时，不要使物镜碰到试样，造成物镜的划伤。2、调整亮度时不要忽大忽小，灯泡过亮会影响到自身的寿命，同时也会影响到视力。3、关机时要将亮度调到最小。4、关机不使用时，要将物镜调整到最低的状态。5、关机后要等冷却后在罩上防尘罩，同时要注意防火。6、非专业人员不要尝试擦物镜及其它光学部件。目镜可以用脱脂棉签蘸1:1比例（无水酒精：乙醚）混合液体甩干后擦拭，不要用其他液体，以免损伤目镜。

  • 显微摄影技术二

    第二章 进行显微摄影一． 显微摄影的基础知识1． 显微摄影装置的放大倍率照片的放大倍率，决定于照相目镜的型号和显微摄影装置的投影长度。如前所述，目前光学显微镜的光路系统是万能无限远光学校正系统，与以前的有限远光学校正系统有了很大的改进。所以两种系统的照片放大倍率计算方法不同。(1) 有限远光学校正系统：　照片总放大倍率=物镜放大倍率X照相目镜放大倍率（没有中间附件时）或 照片总放大倍率=物镜放大倍率X照相目镜放大倍率X中间附件系数（连接有中间附件时）。(2) 万能无限远光学校正系统：　照片总放大倍率=物镜放大倍率X照相目镜放大倍率（中间附件不影响放大倍率）。(3) 大版照相：照片总放大倍率=物镜放大倍率X照相目镜放大倍率X 3。照片的总放大倍率是指底片上图象的放大倍率，而不是指底片冲洗到相纸后的放大倍率。2． 物镜与目镜的不同组合，得到的分辨率不同即使照片的总放大倍率相同，它的分辨率是根据物镜、目镜的不同组合而不同的。在显微摄影时应尽量使用低倍照相目镜与高倍物镜组合，这样能改进底片平面象的分辨率。3． 标本画面的构图显微摄影时，视场中的标本往往不适合摄影构图，克服这个问题的办法是转动照相机，以使标本成比例得适合构图的要求。但这时要进行操作显微镜来适合摄影构图就更困难了。一般人们乐用的方法是转动载物台，将标本调到画幅理想的构图中。 二． 显微摄影技术1． 工作前的准备(1) 光路系统的清洁　　显微摄影必须保证光路系统的清洁，任何光学部件有了污垢及灰尘，均会影响照片的质量。物镜、目镜及聚光镜等部件，如污垢长期得不到清理，还会引起霉菌的生长，致使不能应用。各部件在擦拭时，只能清理表面，而不应任意拆卸。(2) 光轴中心的调整　　显微摄影时光轴中心的调整是绝对不可忽视的，否则拍出的图象，各部分的感光不匀。关于调整的方法前已述及，这里不予重复。(3) 其它准备工作　　检查镜体与照相系统的安装是否正确；根据被检物体的情况选用何种感光片；如为半自动和全自动照相系统，需调节好相应的按钮。拍摄前需用观察目镜观察，先调好两眼的瞳距，使两个视场的象合而为一，再调节好两眼的屈光度以适应观察者的视力。 2． 视场光阑与孔径光阑的应用[color=#3333

  • 【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    植物的一切生命活动，都是以细胞作为基本结构和功能单位进行的。因此，对植物的组织、器官的研究就显得非常重要。石蜡切片法是动物、植物和病理组织切片制作上最重要、最常用的一种方法。由此方法制作的切片在显微镜下观察清晰，能显示其细致结构，反映其真实性，而且可以长期保存。除某些材料确实经不住石蜡法中各种药剂的处理或加温而不能应用外，一般的材料都可以采用石蜡切片法来制成装片在显微镜下观看或长期保存。本法的优点是可以极薄的切片，并可制作大批或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块还可以长期保存。番红-固绿染色法可以区分开结构中的木质化和纤维化部分。　　显微摄影是一项重要的显微技术，在生物科学的研究中，从再现显微镜中物体影像的各种方法中比较，显微摄影是最好的方法。基建的结果除文字的描述外，显微照相能客观而生动的记录下生物体的细微结构或形态，它常与生物绘图技术配合，起到相辅相成的作用。本实验采用盆中冲洗的方法。整个冲洗过程需在暗室中进行。若为涂塑像纸则直接晾干，普通像纸要进行上光。　　1 材料　　1.1 材料　　某植株(完整植株，长有新鲜叶片)、乐凯全色黑白胶卷(ASA100)、涂塑相纸、普通像纸　　1.2 试剂　　1.2.1 浓度为35%、70%、85%、95%、100%的酒精　　1.2.2 二甲苯、二甲苯酒精等量混合液　　1.2.3 包埋剂：纯石蜡配制　　1.2.4 染色剂：浓度为2% 番红水溶液(用水配制)、0.1% 固绿(由95%酒精配制而成)　　1.2.5 固定液FAA(福尔马林 、冰醋酸、70%酒精以1:1:6比例配制)　　1.2.6 封固剂：加拿大树胶　　1.2.7 D-72显影液： 50℃温水 750ml，米吐尔 3.1g，无水亚硫酸钠 45g，无水碳酸钠67.5g，对苯二酚 12g，溴化钾 1.9g，然后加冷水至1000ml。　　1.2.8 定影液F-1和F-5。　　F-5定影液：50℃温水600ml，结晶硫代硫酸钠240g，无水亚硫酸钠15g，28% 乙酸 48ml，硼酸 7.5g硫酸铝钾 15g，然后加冷水至1000ml。　　1.2.9 停影液: 水　　1.3 工具及仪器　　双面刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、染色缸、镊子、旋转切片机、金属温台、毛笔、OlympusBH2型显微照相系统、放大仪、印相仪、上光仪等。　　2 石蜡装片的制作　　2.1 取材　　从植株上取新鲜、健康、有代表性的叶片，用锋利的刀片切取幼茎、叶柄、叶片，并用水清洗干净。将幼茎与叶柄切成约5毫米长的小段，将叶片从主脉处切取5mm× 8mm的长方形，并保证切主脉两侧的叶片相等且主脉与短边平行，底部能立于包埋盒内。　　2.2 固定　　将已经配制好的FAA固定液倒入一个小试剂瓶中，再把已经切好的材料浸入其中，在瓶上贴好标签，待用。　　2.3 浸洗　　用50%酒精或70% 酒精浸洗一、二次就可以进行脱水。　　2.4 脱水　　包埋前的第一个重要步骤为脱水。本实验以酒精为脱水剂，采用逐渐提高酒精浓度来减少材料中水分的含量。可以以此梯度进行操作，70% 酒精、85%酒精 、95%酒精、无水酒精I、无水酒精II，在每级酒精中浸2～24小时，使脱水充分。　　2.5 透明　　酒精不能作为石蜡的溶剂，因此必须经过透明剂透明。二甲苯可以溶解石蜡，有利石蜡透入，同时还有脱去酒精的功效。但二甲苯易使组织收缩变脆，故浸留时间不宜过长。同时若脱水不干净，就会引起不良后果。为了避免组织收缩，在纯酒精或丙酮脱水以后，并不直接移入二甲笨中，其间必须经过几个梯度，逐渐置换，在每一级中停留的时间为1—2小时，二甲苯易挥发，在切片透明之后，从染色缸中取出封藏，手段要敏捷，不宜久置。在纯酒精中脱水后需要经过的几种溶液配比如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259410_1856701_3.jpg　　2.6 浸蜡　　石蜡能溶于透明剂二甲苯中。把已透明的材料投入熔化的石蜡中，即可取代透明剂，而使组织中的一切空隙为石蜡透入而填满，即为浸蜡。为了使石蜡更好地浸透到组织中去，浸蜡一般需要经过四个不同配比的溶液，在前三杯溶液中停留半小时左右，在温箱中或在包埋箱中进行。然后取出在经第四种溶液。保温箱的温度要适宜，太高，会使材料收缩，太低，石蜡会冻结而不能透入组织。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259411_1856701_3.jpg　　2.7 包埋　　包埋是将浸过蜡的组织块包埋于石蜡中以利于切片。将已熔化的石蜡倒入做好的包埋盒内，然后用酒精灯加热的镊子将材料从石蜡液中取出，迅速放入纸盒里的石蜡中。放置的方向要按照切片的方向而定，最好把切面向下，并且放正。若石蜡中有气泡，也可用热针刺入石蜡中，将气泡烫去。材料块放置妥当后，以左右手分持纸盒两耳，半浸于冷水中，并用口吹气使蜡表面凝结，蜡凝后，除去纸盒即成蜡块。　　包埋过程中应注意的事，包埋蜡的温度不宜过高，否则会将组织烫坏。　　2.8 切片　　首先要修块，将已凝固的蜡块取出，用刀片把它切至何时大小，修整平滑。然后将蜡块底部稍融化贴在一小木块上，再用融化的蜡粘在蜡块的四周使蜡块牢固帖在木块上。将带石蜡的木块装在旋转式切片机上，将切片刀装在夹刀部位上，调整切片刀的角度，进行切片。将切下的条状蜡带，用毛笔取下放于一张纸上，挑取较好的一小条蜡带做切片。　　2.9 粘片和展片　　以手指涂一薄层Mayer甘油蛋白于干净载玻片上，再用滴管滴一滴蒸馏水于载玻片上，然后用镊子挑取一段切片蜡带置于载玻片的水面上(注意：要以石蜡切片背面比较光滑的一面放在水上，才易展平)。然后将载玻片放在金属温台上加热，使切片蜡带自由展平。注意，载玻片上的水要多放一点，加热温度不要过高，否则石蜡会熔化，组织脱落。自然风干。　　2.10 番红-固绿染色　　2.10.1 溶蜡　　将切片放入二甲苯溶液中，5～10分钟，彻底除去切片上的石蜡。如果室温过低，需延长脱蜡的时间，脱蜡要彻底，否则染色困难。　　2.10.3 复水　　将切片经纯酒精和二甲苯的1:1的溶液，100%、95%、70%、35%酒精溶液各3分钟。逐步过渡，防止材料收缩。　　2.10.4 蒸馏水浸洗　　因为染色液番红是用蒸馏水配置的，应将切片放入蒸馏水中3分钟，以便彻底复水，然后进行染色。　　2.10.5 初染　　将切片放入2%的番红水溶液中染色10～20分钟，使红色染透，否则材料容易褪色。如果番红染色过度，应返回到酒精中进行轻微脱色，再进行以下操作。　　2.10.6 流水冲洗　　用流水冲去多余染液，以冲洗去切片上的番红余色。而且对一些不易被固绿着色的幼嫩组织材料，其切片经水冲洗后吸水膨胀，染色剂易于渗入组织进行染色。　　2.10.7 镜检　　将载玻片放在显微镜的载物台上，进行镜检，染色效果良好，则可进入下一步操作。　　2.10.8 脱水　　将切片依次经过35%，70%的酒精各30秒。因为固绿是用95%酒精配置的，因此应脱去水分再进行固绿染色。　　2.10.9 复染　　用0.1%固绿染色5～10秒，时间不宜过长，否则绿色太深，将切片变为蓝绿色或深绿色，失去的双重染色的意义。　　2.10.10 镜检　　将切片放入95%的酒精过一下后，进行镜检。所染材料的木质化部分呈红色，纤维素部分呈绿色。　　2.10.11 浸洗　　用100%的酒精溶液浸洗3分钟，以洗去切片上固绿的余色，同时也使切片过度到纯酒精中。该步时间不宜过长，由于固绿在纯酒精中易褪色。　　2.10.12 透明　　将切片放入纯酒精和二甲苯的1:1的混合溶液中浸3分钟，使切片从酒精中逐步过渡到纯的二甲苯溶液中。然后将切片放入纯的二甲苯溶液中，浸5分钟，使切片完全过渡到二甲苯溶液中。至材料完全透明后应立即进行封片(为防止二甲苯使组织收缩)。　　对于脱水不彻底的材料投入到二甲苯溶液中时会出现乳白色雾状，这表明该材料无法进行透明，应该退回到无水酒精和95%的酒精进行重新脱水。　　2.11 封片　　把切片从二甲苯溶液中取出，用纸擦去载玻片上的多余液体。滴一滴加拿大树胶于组织上，用镊子夹取一片盖玻片，与载玻片成一倾斜的角度，使盖玻片的一个边缘与加拿大树胶完全接触，然后轻轻地覆盖下，防止产生气泡。树胶的量要适中，使盖玻片与载玻片之间没有空隙。　　3 显微照相　　3.1 安装好显微照相系统　　将小型显微照相连接器连接到OlympusBH2型显微镜上。　　3.2装胶片　　打开相机后盖，装入35毫米胶片，盖好后盖。注意把胶片头部放入收片轴的片槽里时，不要使它超出片槽的另一端。　　3.3 设置自动曝光器　　根据胶片感光度(ASA)选择控制器上感光度标记，按下感光片类型标记按钮(35)。将胶片倒易律失效特性的修正数设置在中间档。　　3.4 试拍　　通过自动

  • 金相显微镜改造

    我公司现有一台德国莱兹公司生产的MM6型金相显微镜，想改造照相系统，即改为数码照相系统，但由于连接照相系统的电源线已丢失，不知已有改造此型显微镜的专家能否想办法进行改造。

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    一、计算机及图像分析系统　　将金相显微镜上的观察/照相切换旋钮调至PHOT位置，金相显微镜里观察到的信息便转换到视频接口和摄像头，打开计算机，启动图象分析软件，即可观察到来自金相显微镜的实时的图像，找到关心的视场后将其采集、处理。二、显微镜部分　　 1、去掉防尘罩，打开电源。　　 2、将试样置于载物台垫片，调整粗/微调旋钮进行调焦，直到观察到的图像清晰为止。　　 3、调整载物台位置，找到关心的视场，进行金相分析。三、金相显微镜日常维护、保养及注意事项　　为保证系统的使用寿命及可靠性，注意以下事项：　　 1.试验室应具备三防条件：防震、防潮、防尘；电源：220V±10%，50HZ；温度：0°C—40°C。　　 2.调焦时注意不要使物镜碰到试样，以免划伤物镜。　　 3.当载物台垫片圆孔中心的位置远离物镜中心位置时不要切换物镜，以免划伤物镜。　　 4.亮度调整切忌忽大忽小，也不要过亮，影响灯泡的使用寿命，同时也有损视力。　　 5.所有（功能）切换，动作要轻，要到位。　　 6.关机时要将金相显微镜亮度调到最小。　　 7.非专业人员不要调整照明系统，以免影响成像质量。　　 8.更换卤素灯时要注意高温，以免灼伤；注意不要用手直接接触卤素灯的玻璃体。　　 9.关机不使用时，将物镜通过调焦机构调整到最低状态。　　 10.关机不使用时，不要立即该盖防尘罩，待冷却后再盖，注意防火。　　 11.不经常使用的光学部件放置于干燥皿内。　　 12.非专业人员不要尝试擦物镜及其它光学部件。目镜可以用脱脂棉签蘸1:1比例（无水酒精）混合液体甩干后擦拭，不要用其他液体，以免损伤目镜。

  • MM6金相显微镜 改造

    金相显微镜改造 我公司现有一台德国莱兹公司生产的MM6型金相显微镜,想改造照相系统,即改为数码照相系统

  • 关于金相显微镜无法照相?

    各位老大,请问我的金相显微镜为什么不能拍照吖?显微镜是三目倒置金相显微镜4XC,摄像头是ikowan的+天敏视频捕捉卡,驱动安装完成.在显微镜下观察可以看到试样的缺陷,可开启软件准备拍照,软件内图像区域一片漆黑,没有任何图像显示,请问这是怎么一回事?

  • 显微摄像知识一

    第一章 显微摄影的准备和观察一． 显微摄影装置1． 适合显微摄影的显微镜(1) 照相目镜筒要能承受住显微摄影装置的重量。(2) 通过双目镜筒，能对图象进行对焦。(3) 使用光路选择移动杆（Optical Path Selector），能将光亮调到适合标本需要的强度。(4) 物镜要有高分辨率和良好的平场性（整个圆形视场图象都在一个平面上）。(5) 载物台能够移动。(6) 聚光镜带有孔径光阑和调节光轴中心的机构。(7) 显微镜要有视场光阑。(8) 光源要保证有足够的亮度，可以按照观察和 摄影的需要来调节光亮强度。物镜从低倍到高倍变化时，要求光亮度都能均匀。(9) 要能够安装滤色镜 。2． 适合显微摄影的显微摄影装置(1）显微摄影装置一般有：A. 手控曝光显微摄影装置：包括专为显微摄影用的不带镜头的镜箱。需要目测或测光表，测出光值后，先推出正确的曝光时间，再进行手控曝光。如OLYMPUS 老型号的PM-6，PM-10-35和测光表EMM-7。B. 单镜头反光镜箱显微摄影装置。如OLYMPUS OM系列，镜箱内有内测光系统，可以自动曝光。C. 自动曝光显微摄影专用装置。具有自动卷片、自动测光、自动控制曝光以及测量色温和倒易律失效的补偿等功能。如OLYMPUS PM-10-AD系列，PM20/30系列。(2）显微感光记录的方式一般有：A. 35毫米卷片照相记录。B. 120卷片照相记录。C. 4X5英寸，大画面单页片照相记录。D. 31/4X41/4英寸、4X5英寸等尺寸规格的一步成象（Polaroid Film）的照相记录。E. 16毫米的电影摄影记录。需要注意的一点是：只要有合适的显微镜照相连接器（附有观察、取景装置），不论是生物显微镜、临床显微

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    近日，Applied Precision推出了一台高性能的显微镜系统DeltaVision OMX Blaze。这台仪器采用专利的超快速结构照明模块和先进的高速照相机，首次提供了大范围的活细胞3-D超高分辨率荧光图像。因此，这种显微镜能够分辨出的细胞间结构的细节比此前任何光学显微镜都高。DeltaVision OMX Blaze系统突破在于对运动的物体使用结构照明，包括活细胞。此前使用结构照明的商品光学显微镜只能对固定或非移动的样本进行成像。它的图像获取速度让研究人员能够在三维空间内追踪活细胞内的标记蛋白，而分辨率接近分子水平。这意味着使用者可以开始回答新型的研究问题，如细胞中的某些结构如何工作，它们如何相互作用，以及事件持续多长时间。这台仪器的特点包括：超高分辨率，能够对最小1/10微米的物体成像；对比度是传统显微镜的8倍；同时观察两种荧光波长的能力，用于双色图像；以及每秒对样本进行一组15片的3D成像——这是迄今为止在商品显微镜上实现的罕见的高速度。

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    显微镜到底要怎么保养才能保持最好的清晰度显微镜光学部件防潮湿的重要性和方法在前节中已述及。这l章讲讲防尘间题。光学部件的表面落下尘埃极难清除，所以防止尘埃落入镜筒、物镜镜体内部和一切光路管道内部极为重要。为此，显微镜操作者必须养成一种生活习惯:随时注意防尘。例如拧下物镜时，必须将其旋座向下倒放在干净的台面上.或立即装入物镜盒中;拔出目镜的方法请参考，随手用镜简塞或干净纸帽盖上镜简口;置换显微照相暗箱、光电倍增器、光栏基座时，随手盖好连接口盖，绝不留下跌入尘埃的空隙;拔出滤光片和插板时，即时堵塞插板孔.一旦发现透镜、棱镜和反射镜等光学表面上有尘埃时，先用洗耳球反复吹拂，直至完全消除尘埃颗粒为止。有些尘粉颗粒仍不脱落时，可用干净、干操、细软毛笔扫除干净。当然这种清除工作是极为麻烦的，特别需要耐心。绝不能用手指或粗布硬性磨擦。 光学具组表面沾污油脂时，既要清洗油污，同时特别注意保护镜面的光学光洁度。最常要清洗的是油浸物镜的前透镜。每次使用此类物镜完毕时，都要清拭干净，绝不能叫浸油干涸在物镜面上。为此最常用的方法是在擦镜纸上滴一滴纯净二甲苯，放在物镜前透镜上轻轻地用手指压着抽过擦镜纸一次或几次.对物镜前透镜绝不能用粗布用力擦拭，更不能用手指尖磨擦。粗布纤维和手指角化表皮细胞对于光学表面的损伤程度是非常严重的，光学表面磨出一条划痕就足以干挠成像光束的同心性行程。 在日常工作中往往容易把干燥系物镜上也沾染镜油，因此当发现显微镜视野不清晰时应该取下物镜加以检查。检查方法并不复杂.首先取下物镜用手把持物镜，同时拿目镜.物镜的前透镜向上，目镜的接目透镜向下，对准物镜，在斜射光线下观察物镜是否沾污(图5-6),检查结果说明油演已清除，但仍有二甲苯挥发后留下的彩纹时，可用柔软的鹿皮轻轻擦拭。揉制好的皮皮的纤维远比细绸布纤维柔软。在日常工作中，常常遇到未经专门训练的显微镜操作者用手指擦拭物镜或用粗布粗鲁地擦拭物镜，这是绝对不允许的恶习。 反射镜、聚光镜和棱镜镜面不清洁时，也可用下列配方配制清洗液加以清洗: 甲基醋酸钠65% 乙醇30 % 二乙基乙醚5% 当擦拭光学元件表面时，特别要注意保持各个光学元件的原有位置、角度。在清理过程中，触动了某一元件使之偏离光路时，请不要自己整修。

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