色谱分离系统

第五课 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]－分离系统 色谱柱是色谱仪的分离系统。试样中各组分的分离在色谱 柱中进行，因此，色 谱柱是色谱仪的核心部分。色谱往 主要有两类：填充柱和毛细管柱，现分别叙述如下: 1．填充柱 填充柱由柱管和固定相组成，柱管材料为不锈钢或玻璃， 内径为2—4毫米，长为1—3米。往内装有固定相，固定相 又包括固体固定相和液体固定相两种。 2．毛细管往 毛细管柱又叫空心柱，空心柱分涂壁空心柱，多孔层空 心柱和涂载体空心柱。 涂壁空心柱是将固定液均匀地涂 在内径0．1—0．5毫米的毛钢管内壁而成。毛细管的材 料可以是不锈钢、玻璃或石英。这种色谱柱具有渗透性 好、传质阻力小等特点，因此柱子可以做得很长(一般 几十米，最长可到三百米)。和填充柱相比，其分离效率 高，分析速度快,样品用量小。其缺点是样品负荷量小， 因此经常需要采用分流技术。柱的制备方法也比较复杂； 多孔层空心柱是在毛细管内壁适当沉积上一层多孔性物 质，然后涂上固定液。这种柱容量比较大，渗透性好， 故有稳定、高效、决速等优点。

多维液相色谱分离系统一般采用定量环(loop)或富集柱（trap ）作为中转环节，按照用途可分为分析型和制备型，按照运行原理可分为并行系统和串行系统。分析型一般采用并行模式，分离速度快，国外产品占用优势。制备型一般采用串行模式，国内产品具有领先优势。

因发展需要，本中心需购买一套凝胶渗透色谱分离系统，请问该装置价格大概多少？

第九课 液相色谱仪－进样系统，分离系统 进样系统一般高效液相色谱多采用六通阀进样。先由注射器将样 品常压下注入样品环。然后 切换阀门到进样位置，由 高压泵输送的流动相将样品送人色谱柱。样品环的容积 是固定的，因此进样重复性好。 分离系统 分离系统包括色谱柱、连接管、恒温器等。色谱柱是高 效液相色谱仪的心脏。它是 由内部抛光的不锈钢管制成 ，一般长10—50cm，内径2—5mm，柱内装有固定相。液 相色谱的固定相是将固定该涂在担体上而成。担体有两 类：一类是表面多孔型担体；另一类是全多孔型担体。 近年来又出现了全多孔型微粒担体。这种担体检度为5 —10 um，是由nm级的硅胶微粒堆积而成，又叫堆积硅 珠。由于颗粒小，所以柱效高，是目前最广泛使用的一 种担体。 在高效液相色谱分析中，适当提高柱温可改善 传质，提高桂效，缩短分析时间。因 此，在分析时可以 采用带有恒温加热系统的金属夹套来保持色谱拄的温度。 温度可以在室温到60℃间调节。

质中，质谱选择离子位置重要性。如果有重叠，将导致定量错误。俗话说得好：没有不好骑的马，只有骑不好马的骑师。只有把GC当朋友，好好了解它的习性、掌握维护保养要领并坚持保养它才能服服帖帖听你的话。GC主要有载气系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统共五个主要组成部分，要做好保养首先得先了解GC各部分构造以及可更换或清洁的零部件，这部分知识可参考各种GC产品使用说明书。下面主要就GC各功能部分维护保养经验、要领一一列举：（续）三、分离系统（色谱柱）：色谱柱在色谱系统中主要起到分离的作用。气相色谱柱有多种类型。从不同的角度出发，可按色谱柱的材料、形状、柱内径的大小和长度、固定液的化学性能等进行分类。这里我主要就填充柱和毛细管柱的常规保养维护讲述。1、老化：1)填充柱：新制备的填充柱在使用前必须经过老化处理，以便把柱内的残存溶剂、低分子量固定液以及低沸点杂质除去，使固定液在载体表面涂得更均匀牢固。老化的方法比较简单:在室温下将色谱柱的入口端与进样器相连结。为了避免污染，出口端与检测器断开。然后接通载气，调节载气流速10～20毫升/分，再以程序升温的方式缓慢将柱温升至比使用温度高20℃，并在此温度下老化4～8 h。注意，老化温度不能高于固定液允许的最高使用温度。如果使用氢气作载气，还应注意将出口端流出的氢气引出室外。老化处理后，将柱温降至室温，把色谱柱出口端与检测器相连结，在分析条件下观察基线。若能获得平稳的基线，说明色谱柱已经老化合格，一般即可进行正式分析试验。日常老化可不必断开检测器，老化时间也可酌情减少。2)毛细管柱：通用老化程序可在比最高分析温度高20℃或最高柱温（温度更低者）的条件下老化柱子2h，如果在高温10min后背景不下降，立即将柱子降温并检查柱子是否有泄漏；如果用Vespel密封垫圈的话，老化完后重新检查密封程度；注射非保留物质以确定合适的平均线速度。也可采用程升温度老化，一般可用慢升快降原则，50度下以5度/分钟升到最高限温下20度，恒温30分钟，20度/分钟下降到50度，如此循环3个来回即可。2、清洗：通常情况下不建议清洗色谱柱，除非严重污染，经老化效果不明显情况下可以对键合交联固定相的毛细管色谱柱进行。清洗色谱柱可采用色谱柱冲洗装置把溶剂注入色谱柱，该装置接有一个有压力的气源上（氦气或氮气），并把色谱柱插到冲洗装置中，把溶剂加入样品瓶里，往溶剂瓶中施加压力，把溶剂压到毛细管色谱柱里，残留物溶解到溶剂中，然后用溶剂把它反吹出色谱柱，再用容积吹扫色谱柱，并把色谱柱进行适当的老化处理。在冲洗色谱柱之前，把它切去半米（即靠近进样口一端），把连接检测器的一端插入溶剂冲洗装置，常使用多种溶剂冲洗色谱柱，后面继续使用的溶剂必须要和前一种溶剂互溶，一定不要使用高沸点溶剂，特别是最后使用的溶剂，溶解样品的溶剂常常是最佳的选择。决多数情况下建议使用甲醇、二氯甲烷和己烷。丙酮是二氯甲烷的代替品（在避免使用含氯溶剂时），但是二氯甲烷是一种最好的冲洗溶剂，如果注射的是水性样品（如生物液体和组织），在使用甲醇以前要用水来冲洗，一些源于水性样品的残留物只能溶解在水中而不溶于有机溶剂，应当使用水和醇类（如甲醇、乙醇和异丙醇）冲洗键和聚乙二醇为基的固定相（如DM-WAX、DM-Innowax），只作为最后使用的溶剂。

Agilent 1200系列快速高分离液相色谱系统培训文档安捷伦1200系列快速高分离 LC 系统，与常规 HPLC 相比，在没有牺牲分辨率、精密度和灵敏度的前提下，分析速度提高20倍，高分辨率提高60%。安捷伦1200系列快速高分离液相系统可提供最快分析速度、最高分辨率，同时最大限度地保持系统低压力而设计的。因此，它保留了常规 HPLC 仪器和方法的耐用性和工作原理。这种独特的设计使1200 RRLC成为了一种通用的液相分析流速范围适合的柱尺寸从1 到4.6-mm ID, 10 到 300-mm 柱长，粒度1.5到 10 µ m。 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=67227]安捷伦1200系列快速高分离系统[/url]

安捷伦1260液相色谱仪工作站怎么找到系统适用性，打图谱需要理论板数，分离度，怎么找不到？

[color=#444444]各位大神，欧洲药典2.2.46色谱分离技术中，系统适用性的%RSD的要求列了表（如图），表格中的B（%）指的是什么，该怎么理解这个表格中RSD的要求？个=各位大神，帮帮忙。[/color][color=#444444][img]http://muchongimg.xmcimg.com/oss2/img/2018/0816/w91h1336024_1534380504_753.png[/img][/color]

液相色谱中死时间几种测定方法1：有响应的溶剂出峰时间为死时间。2：进样后的阀切换峰，对应的时间为死时间。3：工作站中输入色谱柱的空余体积或孔隙率，自动计算。（对于C18柱，也可以用硝酸钠或硫脲等在色谱柱上完全不保留组分的出峰时间来测定死时间。）影响分离度的因素有三个因素控制两个色谱峰之间的分离度——容量因子，选择性，柱效容量因子反映样品分子和固定相及流动相之间的作用力，选择性是说明色谱系统区分两个或多个色谱峰的能力，柱效与色谱峰的宽度有关，很明显要达到一定的分离度，宽色谱峰要比窄色谱峰需要更大的分离度选择性。理论塔板数越高柱效越高，柱效的高低受柱内效应和柱外效应的影响。选择性是固定相区分两个被分离样品组分的能力，用容量因子之比进行计算，它是两个被分离色谱峰顶点距离的量度，如果选择性是Ⅰ，则两个组分完全不能分离。选择性数值越高，分离越好。由于选择性取决于被分离物的物理和化学结构，流动相和固定相，流动相组成，PH，色谱柱温度，流动相添加剂，因此，尽量优化实验条件提高选择性以降低成本。容量因子为物质的特性，当分析条件一定时，容量因子为固定值。溶剂的洗脱强度与其极性有关：反相色谱：溶剂的极性越强，洗脱强度越弱。正相色谱：溶剂的极性越强，洗脱能力越强。（注意：不可以使用纯水作为正想色谱的流动相）一般样品分析要求：容量因子大于2小于5

最近，研究二维液相色谱系统，发现岛津和湖南德米特的二维液相色谱系统，几乎独家垄断，价格比两套lc20还高。

我想购买[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析仪器的阴离子和阳离子分离柱，不知有人知道相关的生产厂家和代理商。

做正相。方法流动相→ 无水乙醇：二乙胺=100：0.4（100ml无水乙醇要加0.4ml二乙胺）用过大赛璐的柱子，用过赛分的柱子。最初使用时异构体分离效果还挺好，使用几次后就不行了。无水乙醇冲洗，反着冲也是不行。使用前无水乙醇小流速冲洗，使用后小流速冲洗。那台仪器也一直做正相。我问色谱柱厂家，说二乙胺浓度有点高，如果反着冲后还是不行的话色谱柱就废了。想问下各位老师，遇到过类似的情况吗？或者这个浓度是对色谱柱内基质影响大不。感谢

[font=&][size=15px][color=#2f3034]1.仪器因素1.1仪器状态不佳色谱仪的某些部件如检测器、泵、进样器等可能处于非正常工作状态，影响系统性能。1.2色谱柱问题色谱柱型号不匹配：色谱柱的选择应根据分析物的性质进行优化，不合适的色谱柱可能导致分离度不佳。1.3色谱柱污染或损坏长时间使用或不当操作可能导致色谱柱污染或损坏，影响分离效果和峰形。1.4气体供应问题载气或辅助气体的纯度不足、压力不稳或流量设置不当，都可能影响色谱分离效果。2.样品因素2.1样品处理不当样品前处理步骤中的任何失误，如提取、净化、浓缩等，都可能导致样品组成发生变化，进而影响系统适用性。2.2样品浓度或体积不合适样品浓度过高或过低，以及进样体积不准确，都可能影响峰面积、峰高和分离度等参数。3.实验条件因素3.1流动相条件不合适流动相的组成、pH值、流速等条件设置不当，可能导致分离度下降、峰形拖尾等问题。3.2温度设置不当柱温、检测器温度等设置不合理，可能影响样品的汽化、分离和检测效果。3.3分流比设置不当在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]中，分流比设置过大或过小都可能导致灵敏度下降或峰形失真。4.操作因素4.1进样技术不佳进样量不准确、进样速度过快或过慢，以及进样针头的污染或损坏，都可能影响峰面积和峰形的重复性。4.2系统维护不当定期对色谱系统进行清洗、维护和校准是确保系统适用性的关键。忽视这些维护工作可能导致系统性能下降。5.其他因素5.1环境干扰实验室环境中的温度、湿度、电磁干扰等因素也可能对色谱系统产生一定影响。5.2软件或硬件故障色谱仪的数据处理软件或硬件出现故障，可能导致数据不准确或无法处理。[/color][/size][/font]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]抑制电导检测器、氢氧根系统，请问怎么改善乙酸和乙酰丙酸的分离度流速、梯度、浓度方面已经尝试过了，都没有什么效果。还有没有其他的方法，比如加入改良剂，请大佬帮忙指点一下

如下图是色谱质谱联用仪的接口与色谱仪组成的进样系统示意图。样品由色谱进样器引入色谱仪，经色谱柱分离的各个组分依次通过接口进入质谱仪的离子源。最常用的是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]质谱(GC/MS)和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]质谱(LC/MS)两种进样模式。该进样系统的关键部分是接口，应满足以下三个条件:[img=48ee648290cf0d2c445f899c1d26b6e.jpg]https://i2.antpedia.com/attachments/att/image/20220126/1643177994667223.jpg[/img]GC/MS进样器①接口不破坏离子源的真空，也不影响色谱柱分离的柱效(不增加色谱系统的死时间)。②接口应能使色谱分离的各组分尽可能多地进入质谱仪离子源，而使色谱流动相尽可能不进入。③接口的存在不改变色谱分离的各组分的组成和结构。GC/MS进样系统主要用于气体有机物的同位素测定，由GC分离的有机物，经燃烧炉焚烧后转变为C、H、O的氧化物，如二氧化碳和水，供质谱仪测定其同位素比和组成。

在生物大分子纯化分析特别是蛋白质纯化分析中，色谱是非常重要而且常用的一种技术。 一、凝胶过滤　　凝胶过滤又叫分子筛色谱，其原因是凝胶具有网状结构，小分子物质能进入其内部，而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤色谱柱时，溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。 二、离子交换色谱　　离子交换色谱是在以离子交换剂为固定相，液体为流动相的系统中进行的。离子交换剂是由基质、电荷基团和反离子构成的。离子交换剂与水溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行，或借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。 三、吸附色谱　　1、 吸附柱色谱　　吸附柱色谱是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种色谱方法。 2、 薄层色谱　　薄层色谱是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种色谱方法。这种色谱方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸色谱操作进行展层。 3、 聚酰胺薄膜色谱　　聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。色谱时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。　　四、 亲和色谱 　　亲和色谱是根据生物大分子和配体之间的特异性亲和力，将某种配体连接在载体上作为固定相，而对能与配体特异性结合的生物大分子进行分离的一种色谱技术。亲和色谱是分离生物大分子最为有效的色谱技术，分辨率很高。 亲和色谱的原理与众所周知的抗原一抗体、激素一受体和酶一底物等特异性反应的机理相类似，每对反应物之间都有一定的亲和力。正如在酶与底物的反应中，特异的废物（S''）才能和一定的酶（E）结合，产生复合物（E－S''）一样。在亲和色谱中是特异的配体才能和一定的生命大分子之间具有亲和力，并产生复合物。而亲和色谱与酶一底物反应不同的是，前者进行反应时，配体（类似底物）是固相存在；后者进行反应时，底物呈液相存在。实质上亲和色谱是把具有识别能力的配体L（对酶的配体可以是类似底物、抑制剂或辅基等）以共价键的方式固化到含有活化基团的基质M（如活化琼脂糖等）上，制成亲和吸附剂M－L，或者叫做固相载体。而固化后的配体仍保持束缚特异物质的能力。 因此，当把围相载体装人小色谱柱（几毫升到几十毫升床体积）后，让欲分离的样品液通过该柱。这时样品中对配体有亲和力的物质S就可借助静电引力、范德瓦尔力，以及结构互补效应等作用吸附到固相载体上，而无亲和力或非特异吸附的物质则被起始缓冲液洗涤出来，并形成了第一个色谱峰。然后，恰当地改变起始缓冲 液的PH值、或增加离子强度、或加人抑③剂等因子，即可把物质S从固相载体上解离下来，并形成了第M个色谱峰（见图6－2）。显然，通过这一操作程序就可把有效成分与杂质满意地分离开。如果样品液中存在两个以上的物质与固相载体具有亲和力（其大小有差异）时，采用选择性缓冲液进行洗脱，也可以将它们分离开。用过的固相载体经再生处理后，可以重复使用。　　上面介绍的亲和色谱法也是特异性配体亲和色谱法。另外还有通用性配体亲和色谱法。这两种亲和色谱法相比，前者的配体一般为复杂的生命大分子物质（如抗体、受体和酶的类似底物等），它具有较强的吸附选择性和较大的结合力。而后者的配体则一般为简单的小分子物质（如金属、染料，以及氨基酸等），它成本低廉、具有较高的吸附容量，通过改善吸附和脱附条件可提高色谱的分辨率。　　五、聚焦色谱　　聚焦色谱也是一种柱色谱。因此，它和另外的色谱一样，照例具有流动相，其流动相为　多缓冲剂，固定相为多缓冲交换剂。　　聚焦色谱原理可以尝试从PH梯度溶液的形成、蛋白质的行为和聚焦效应三方面来阐述。 1、PH梯度溶液的形成　　在离子交换色谱中，PH梯度溶液的形成是靠梯度混合仪实现的。例如，当使用阴离子 剂进行色谱时，制备PH由高到低呈线性变化的梯度溶液的方法是，在梯度仪的混合室（这色谱柱者）中装高PH溶液，而在另一室装低PH极限溶液，然后打开色谱柱的下端出口，让洗脱液连续不断地流过柱体。这时从柱的上部到下部溶液的PH值是由高到低变化的。而在聚焦色谱中，当洗脱液流进多缓冲交换剂时，由于交换剂带具有缓冲能力的电荷基团，故PH梯度溶液可以自动形成。 　　2．蛋白质的行为　　蛋白质所带电荷取决于它的等电点（PI）和色谱柱中的PH值。当柱中的PH低于蛋白质的PI时，蛋白质带正电荷，且不与阴离于交换剂结合。而随着洗脱剂向前移动，固定相中的PH值是随着淋洗时间延长而变化的。当蛋白质移动至环境PH高于其PI时，蛋白质由带正电行变为带负电荷，并与阴离子交换剂结合。由于洗脱剂的通过，蛋白质周围的环境PH 再次低于PI时，它又带正电荷，并从交换剂解吸下来。随着洗脱液向柱底的迁移，上述过程将反复进行，于是各种蛋白质就在各自的等电点被洗下来，从而达到了分离的目的。 　　不同蛋白质具有不同的等电点，它们在被离子交换剂结合以前，移动之距离是不同的，洗脱出来的先后次序是按等电点排列的。

[align=center][font=&][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的定义是什么？[/color][/font][/align][font=&][color=#333333][/color][/font][font=&][size=14px]利用色谱技术（用于分析的一种分离技术）测定离子型物质（在水溶液中电离，具有正/负电荷的元素）的方法。ＩＣ主要分离极性和部分弱极性的化合物。[/size][/font][font=&][size=14px][font=宋体]阴离子：[/font]Ｃｌ[sup]－[/sup]，ＮＯ[sup]2[/sup][sup]－[/sup]，ＳＯ[sub]４[/sub][sup]２－[/sup]，ＣｒＯ[sub]４[/sub][sup]２－[/sup][font=宋体][/font][/size][/font][font=&][size=14px]阳离子：[/size][/font][font=&][size=14px]Ｎａ[sup]＋[/sup]，ＮＨ[sub]４[/sub][sup]＋[/sup]，Ｃａ[sup]２＋[/sup]，Ｆｅ[sup]３＋[/sup][/size][/font][align=center]构成[/align][color=#333333][font=&][color=#333333][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]系统主要由：进样部分（样品环）、分离部分（离子交换分离）和检测部分（电导检测）构成。[/color][/font][/color][align=center][color=#333333][font=&][color=#333333]分离原理[/color][/font][/color][/align][color=#333333][font=&][color=#333333][/color][/font][/color][font=&][size=14px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的分离机理主要是离子交换，有3种分离方式，它们是高效离子交换色谱（HPIC）、离子排斥色谱（HPIEC）和离子对色谱（MPIC）。3种分离方式各基于不同分离机理。HPIC的分离机理主要是离子交换，HPIEC主要为离子排斥，而MPIC则是主要基于吸附和离子对的形成。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]1、离子交换色谱[/size][/font][font=&][size=14px]高效离子交换色谱，应用离子交换的原理，采用低交换容量的离子交换树脂来分离离子，这在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中应用最广泛，其主要填料类型为有机离子交换树脂，以苯乙烯二乙烯苯共聚体为骨架，在苯环上引入磺酸基，形成强酸型阳离子交换树脂，引入叔胺基而成季胺型强碱性阴离子交换树脂，此交换树脂具有大孔或薄壳型或多孔表面层型的物理结构，以便于快速达到交换平衡，离子交换树脂耐酸碱可在任何pH范围内使用，易再生处理、使用寿命长，缺点是机械强度差、易溶易胀、受有机物污染。[/size][/font][font=&][size=14px]硅质键合离子交换剂以硅胶为载体，将有离子交换基的有机硅烷与基表面的硅醇基反应，形成化学键合型离子交换剂，其特点是柱效高、交换平衡快、机械强度高，缺点是不耐酸碱、只宜在pH2-8范围内使用。[/size][/font]离子交换色谱是最常用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]。[font=&][size=14px]2、离子排斥色谱[/size][/font][font=&][size=14px]它主要根据Donnon膜排斥效应，电离组分受排斥不被保留，而弱酸则有一定保留的原理，制成离子排斥色谱主要用于分离有机酸以及无机含氧酸根，如硼酸根碳酸根和硫酸根有机酸等。它主要采用高交换容量的磺化H型阳离子交换树脂为填料以稀盐酸为淋洗液。[/size][/font][font=&][size=14px][/size][/font][font=&][size=14px]3、反相离子对色谱[/size][/font][font=&][size=14px]目前离子对色谱的保留机理还未完全弄清楚，仅处于理论假设阶段。现在提出的能够阐述离子对色谱保留机理的理论（或模式）主要有离子对形成理论、离子相互作用理论和动态离子交换理论。[/size][/font]（1）生成离子对－待测离子与离子对试剂生成中性““离子对”分布于固定相与流动相之间，其分离类似传统的反相分离。[font=&][size=14px]（2）动态离子交换－离子对试剂的疏水部分吸附于固定相形成动态的离子交换表面，其分离机理类似于离子交换。[/size][/font][font=&][size=14px]（3）离子间相互作用－除包括以上两种分离机理和固定相表面双电层结构的分离机理。[/size][/font][align=center][font=&][size=14px][font=PingFangSC-Semibold, &][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]使用的注意事项[/font][/size][/font][/align][font=&][size=14px][font=PingFangSC-Semibold, &]1、淋洗液淋洗液作为系统的流动相，其品质对分析结果有重要影响。流动相的脱气是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析过程中的一个重要环节。输液泵的扰动或色谱柱前后的压力变化以及抑制过程都可能导致流动相中溶解的气体析出，形成小气泡。这些小气泡会产生很多尖锐的噪声峰，较大的气泡还可能引起输液泵流速的变化，因此对流动相要进行脱气处理。2、分离柱分离柱柱体材料为PEEK（聚醚醚酮）。分离相由聚乙烯醇颗粒组成，粒径为9?m，表面有季铵基团。这种结构可保证高度的稳定性，并对可穿过内置过滤板的极细颗粒具有很高的容耐性，适用于水分析的日常测试任务。为保护分离柱不受外来物质侵害（这些物质会对分离效率产生影响），对淋洗液、也对样品作微孔过滤（0.45μm 过滤器），并通过吸液过滤头吸取淋洗液。分离柱堵塞会导致系统压力上升，分离能力变差会导致保留时间波动、样品重复测量平行性差。分离柱接入系统时，需要先冲洗10分钟以上再接检测器，冲洗时出口向上，便于将气泡赶出。 分离柱的保存：短时间不用，可直接将柱子两端盖上塞子，放在盒中保存。阴离子柱长时间不使用（1个月以上），应保存到10mmol/LNa2CO3中。分离柱的再生：（1）低价亲水性离子的污染：a）用超纯水进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗15分钟）b）用10倍浓的淋洗液进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗60分钟） c）用超纯水进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗15分钟）d）用淋洗液进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗60分钟）（2）高价亲水性离子的污染：a）用超纯水进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗15分钟）b）用5%的乙腈进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗10分钟）c）用100%的乙腈进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗60分钟）d）用50%的乙腈进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗10分钟）e）用超纯水进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗30分钟）f）用淋洗液进行冲洗（在0.5ml/min流速下冲洗60分钟）3、高压泵高压泵是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的动力源，其作用是将流动相输入到分离系统，使样品在分离柱中完成分离过程。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]用的高压泵应具备下述性能：流量稳定、耐腐蚀、压力波动小、更换溶剂方便、死体积小、易于清洗和更换溶剂。高压泵工作正常的情况下，系统压力和流量稳定，噪音很小，色谱峰形正常。4、抑制器抑制器由3个抑制元件组成，这些元件应用于循环回路中的抑制作用，可利用硫酸进行再生及用纯净水进行冲洗，分析流路外再生， 可彻底去除有害物质。采用微填充床抑制器，其优为点：平稳提供H+，基线噪音低，适合各种浓度分析，耐高压、耐有机溶剂、耐重金属，耐腐蚀，噪音低，只有0.2-0.5nS。抑制器要避免在未通液体时空转。淋洗液或再生液流路堵塞、抑制器饱和均会造成系统压力突然上升、背景电导率过高等问题。若经过较长时间后，抑制元件受到污染，平常使用的再生溶液无法再将其彻底清除干净，将导致基线大幅上升。5、检测器所有的离子化合物（有机离子、无机离子、强酸和强碱）以及可被解离的化合物（弱酸和弱碱）的水溶液都能够导电。电导检测器是以[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]流动相中电导的变化作为定量依据的。电导检测器测量双铂电极两端间的电导，离子在该双铂电极两端间迁移：阴离子向阳极迁移，阳离子向阴极迁移，从而测量溶液的电阻。电导与电阻成反比。电导检测器具有极好的温度稳定性，这样便可保证测量条件的重现性。[/font][/size][/font][color=#333333][font=&][color=#333333][/color][/font][/color][color=#333333][font=&][color=#333333][/color][/font][/color]

就GC色谱柱固定相的膜厚而言，其可能会以不同方式影响早期和之后洗脱峰的柱效，k'值5时反之亦然。但是，除非大幅度改变膜厚度（例如，从0.1mm改变为1mm），否则改变膜厚度的效果不会太剧烈。　　这些值在等温分离中适用，而在梯度温度编程分离中则不同，但是趋势仍然适用。　　综上所述的信息将使我们可以估计我们选择用于分析的色谱柱的预期塔板数，从而可以评估效率，因此，偏离这些预期值的任何重大偏差都可以视为值得研究与故障排除。　　关于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]效率的基本理论的最后一部分是所选载气的影响及其通过色谱柱的流速。从图3可以看出，各种载气在不同载气线速度下的效率最高（最低高度相当于理论塔板（HETP，H））。线速度是色谱柱内径和流速的函数。　　我们之所以特别提到这一点，是因为有一些非常普遍的问题与无法通过仪器设置达到最佳效率有关。以下几点尤其值得注意：　　需要检查所用色谱柱的线速度和所需的载气流速，以确保该组合产生最佳效率和最低的板高度（如图3中的蓝色区域所示）。氢气显示出约50 cm / sec的最佳线速度，氦气显示出30 cm / sec的最佳线速度，氮气显示出15cm / sec的最佳线速度。载气的线速度将通过数据采集系统或仪器前面板显示。　　确保色谱柱尺寸在采集方法中设置正确（包括通过调整色谱柱长度进行的任何调整）。如果色谱柱尺寸不正确，则载气通过色谱柱的线速度将不正确，分离效率将受到影响。　　当然，如果将不正确的色谱柱尺寸或载气设置到仪器中，我们可能会看到除了色谱效率降低之外，保留时间也会改变，这些变化将是一个很好的诊断线索。　　除了这些方法上的考虑之外，还有哪些其他因素会导致分离效率降低？这个问题有很多答案，但是，我在下面概述了导致柱效率降低的一些常见问题。　　1 柱安装问题：　　确保正确准备（切割和清洁）GC色谱柱并以正确的方式将其安装到GC进样口和检测器中，这一点非常重要。色谱柱切割不良会导致样品入口内部分析物的转移变慢，如果该方法未建立热聚焦或溶剂聚焦过程，则可能导致峰变宽。通常，此问题还将伴随某种程度的峰分叉或拖尾。　　色谱柱在进样口和检测器中的正确定位也至关重要。入口色谱柱的位置将再次使分析物最佳地转移到色谱柱中，当以分流模式操作入口时尤其重要。色谱柱在检测器中的位置将决定色谱柱出口与仪器内检测区域之间未清扫体积的量。这一点特别重要，因为载气是存在分散展宽，任何空隙体积都会对系统效率产生不利影响。　　2 色谱柱污染和老化：　　所有GC色谱柱都会老化，并且使用寿命有限。随着时间的流逝，色谱柱的入口端可能会被样品基质成分覆盖，固定相可能会被破坏，这通常会导致固定相在色谱柱下方“蠕变”，从而形成一个较厚的“气泡状”可降分离效率的固定相区域。样品遇到的色谱柱初始区域对于色谱质量至关重要，因此，我们必须确保该区域的相质量是原始的。通常，通过修整较短的色谱柱并重新安装可以解决此问题，并且可能需要一部分或更多的色谱柱修整才能恢复性能。始终修剪最少的量以恢复良好的性能，如果进行了重大修剪，请不要忘记调整仪器内的色谱柱长度，以确保保留时间重现性和正确的载气线速度。在载气供应管线中安装气阱总是一个很好的解决办法，以确保色谱柱（相）的寿命（最小的水分和氧气阱），并确保以正确的方式调节色谱柱。　　适当的样品预处理对于色谱柱的使用寿命也很重要，在分析之前制备清洁的样品，会延长色谱柱的使用寿命，减少进样口维护操作。　　3 样品引入条件：　　影响分离效率的因素很多，都与将样品引入GC系统的方式直接相关。进样口衬管的清洁度和失活是主要考虑因素，在分流进样中，衬管中的任何活性部位的破坏可能会影响分析物向GC色谱柱顶部的转移，这在处理极性分析物时尤为明显。如果衬管清洁度不高或未显示出来，则衬管清洁度通常与峰拖尾有关仅出现轻微的活动迹象（失活涂层消失），然后可能会导致峰的总体变宽。确保衬管清洁，并在必要时定期更换衬管。　　以下是重要的要点总结：　　维持足够长的不分流时间，以将所有分析物转移至色谱柱，但也应足够短，以免溶剂从进样口缓慢流失，从而导致色谱破坏，柱箱的初始温度应至少比样品溶剂的沸点低10 ℃，固定相的极性应与样品溶剂的极性相匹配，反之，则应在进样口和分析柱之间留出至少1 m长的未涂层保留间隙。如果不满足，上述条件将导致分析物峰形展宽，这主要是由于分析物谱带从入口缓慢进入GC色谱柱时缺乏聚焦，因此效率会降低。　　1 热点：　　重要的是，在载气中通过系统的分析物必须以不间断的方式进行。因此，气流路径中任何比其周围环境凉爽的“斑点”都将破坏或减慢分析物通过色谱柱的通过，并有效地充当系统中死体积的区域。　　如果消除了进样口和GC色谱柱之间的热滞后，通常在进样口上会出现冷点-杯内有滞后的小杯位于进样口下方是有原因的，因此不应将其移除。位于检测器单元下方的绝缘层也是如此，这也是为什么进入MS检测器的任何传输线也要分别加热的原因，应仔细检查传输线温度以确保其温度至少位于顶部温度与您的烤箱程序一致！　　2 温度程序：　　由于不当的温度程序将造成许多不良的分离。当考虑初始柱箱温度和分批进样的保持时间时，尤其如此。如前所述，程序升温的分离确实会产生更高效的峰，尤其是对于后来的洗脱组分，但是确保初始程序条件适合被测样品和分离的要求以及分离条件至关重要。样品引入方法，不分流或不分流进样。对于分流进样，通常的规则是我们不希望过慢的“分析物”穿过色谱柱的过程太快，因为会发生过量的样品分散。理想情况下，初始温度应比色谱图中第一种组分的洗脱温度低45℃左右，这可以通过筛选实验计算得出（典型值为50 ℃至色谱柱的梯度上限，每分钟10℃）。然而，作为初始保留时间，这实际上是一个反复试验的问题，从保留1分钟开始，然后提高或降低初始保留时间，以评估对选择性，效率和分离度的影响。　　3 检测器采样率：　　任何色谱系统中峰的正确“建模”将取决于跨峰捕获的数据点的数量。对于高效技术（例如毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]），必须特别注意检测器的采样频率，而质谱检测器尤其如此，质谱检测器的固有采样频率往往较低，尤其是在全扫描模式下。如果检测器仅捕获跨越峰的几个数据点，尤其是当峰顶点被检测器遗漏时，则它们看起来可能比其宽。请按照制造商的说明为使用中的检测器找到最佳采样频率。　　无论如何，建议在新色谱柱保留常规方法的参考色谱图，该色谱图可用作评估柱效率随时间下降的幅度的参考。使用系统适应性测试（SST），也是明智的选择，以便在分析之前评估仪器的性能，并且柱效评估通常是SST的考察指标之一。　　尽管柱效是毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法成功分离的关键驱动力，但从以上讨论中可以明显看出，在解决低柱效问题时要考虑许多因素。大多数问题是由仪器设置和GC色谱柱的老化引起的，因此对方法中的设定点进行故障排除以及色谱柱与进样口维护，是进行柱效诊断研究的考虑要点。

[align=center][size=21px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/size][size=21px]新技术场流分离[/size][size=21px]技术[/size][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]（[/size][size=16px]FFF[/size][size=16px]）[/size][size=16px]技术是[/size][size=16px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url][/size][size=16px]色谱发展的新技术，德国和美国在[/size][size=16px]这方面已做了好多年的研究，[/size][size=16px]现在已有新产品[/size][size=16px]上市，我[/size][size=16px]国现在[/size][size=16px]也已[/size][size=16px]开始[/size][size=16px]投入这方面的研究。[/size][size=16px] 场流分离技术[/size][size=16px]无需[/size][size=16px]色谱柱，分离是靠一种或几种场作用力[/size][size=16px]来实现[/size][size=16px]。典型的[/size][size=16px]几种场[/size][size=16px]有[/size][size=16px]流体场、[/size][size=16px]重力场、电场、磁场、热场、光场、离心力[/size][size=16px]场[/size][size=16px]、[/size][size=16px]压力场[/size][size=16px]等，[/size][size=16px]也有在某种场中叠加[/size][size=16px]半透膜、分散膜、其它流体[/size][size=16px]等[/size][size=16px]。[/size][size=16px]场流分离[/size][size=16px]技术[/size][size=16px]是一种有效分离大分子化合物、胶体[/size][size=16px]、[/size][size=16px]颗粒的[/size][size=16px]新兴[/size][size=16px]技术，[/size][size=16px]在[/size][size=16px]生物[/size][size=16px]、药物、[/size][size=16px]医学、材料、化工[/size][size=16px]等流域等有应用空间[/size][size=16px]。[/size][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术[/size][size=16px]主要用来分离大分子或粒子[/size][size=16px]物质[/size][size=16px]（目前技术是这样，以后随着技术的发展也可能会分离其它类型物质），[/size][size=16px]有[/size][size=16px]人[/size][size=16px]称[/size][size=16px]之[/size][size=16px]为[/size][size=16px]粒子色谱[/size][size=16px]。[/size][size=16px]场流分离[/size][size=16px]分析系统包括输液[/size][size=16px]系统（输液泵，[/size][size=16px]由于系统没有色谱柱，压力不高，输液泵一般需要[/size][size=16px]中压泵即可[/size][size=16px]）、进样[/size][size=16px]系统（进样器）[/size][size=16px]、场分离系统（场分离器）、[/size][size=16px]检测系统（检测器）[/size][size=16px]、数据采用与处理[/size][size=16px]系统[/size][size=16px]等，[/size][size=16px]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系[/size][size=16px]统类似度[/size][size=16px]很高，[/size][size=16px]有[/size][size=16px]人[/size][size=16px]称之为场流色谱[/size][size=16px]（以下我们[/size][size=16px]称场流[/size][size=16px]色谱）。[/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210191759544595_2705_2369266_3.jpeg[/img][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术有的采用一种场，有的同时采用多种场叠加，场作用力有的是水平的，有[/size][size=16px]的是垂直的，有的是有角度直线型的，也有是弧线或特定曲线的等。由于样品本身特性[/size][size=16px]差异[/size][size=16px]，[/size][size=16px]流经[/size][size=16px]场[/size][size=16px]分离器所受到的作用力[/size][size=16px]不同[/size][size=16px]（不管采用的是[/size][size=16px]那种场[/size][size=16px]或那些叠加场）[/size][size=16px]，[/size][size=16px]在场分离器中流动的速度就不同，[/size][size=16px]从而达到分离目的。[/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210191759546728_6036_2369266_3.jpeg[/img][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术可以与色谱等其它分离技术联用，一般场分离在系统最后端（[/size][size=16px]目前场分离器[/size][size=16px]耐不了高压），比如分离系统[/size][size=16px]C18[/size][size=16px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱[/size][size=16px]+[/size][size=16px]场分离器，分离效果更佳。[/size][size=16px] 场[/size][size=16px]流[/size][size=16px]分离[/size][size=16px]系统[/size][size=16px]能够[/size][size=16px]和[/size][size=16px]多种[/size][size=16px]检测器，[/size][size=16px]如[/size][size=16px]紫外[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]、[/size][size=16px]红外检测器、[/size][size=16px]荧光[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]、质谱[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]等[/size][size=16px]连接，[/size][size=16px]检测范围[/size][size=16px]较广[/size][size=16px]。[/size][size=16px] 场流色谱[/size][size=16px]的优点：选择性强；分离速度快[/size][size=16px]（一般一分钟或几分钟）[/size][size=16px]；[/size][size=16px]适用[/size][size=16px]范围[/size][size=16px]宽[/size][size=16px]（分子[/size][size=16px]粒径[/size][size=16px]在[/size][font='times new roman'][size=16px]1nm~100[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]μ[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]m[/size][/font][size=16px]）[/size][size=16px]；前处理简单[/size][size=16px]（有些样品无需处理，可直接进样）[/size][size=16px]等。[/size][size=16px] 场流[/size][size=16px]分离[/size][size=16px]技术现在还是起步或发展阶段，[/size][size=16px]已[/size][size=16px]在蛋白质[/size][size=16px]、病毒、糖类物质[/size][size=16px]等[/size][size=16px]分离方面发挥[/size][size=16px]很大[/size][size=16px]作用[/size][size=16px]。随着技术的发展，科技的进步，自动化程度的进一步提高[/size][size=16px]，[/size][size=16px]该技术[/size][size=16px]还有[/size][size=16px]很大的提升与[/size][size=16px]完善[/size][size=16px]空间[/size][size=16px]，有望发展成[/size][size=16px]为[/size][size=16px]最具潜力的分离[/size][size=16px]应用[/size][size=16px]技术之一。[/size]

下式为分离度计算公式http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/R.JPGN：柱效(Efficiency)反映色谱柱性能，柱效越高，分离度越好。在其他条件恒定的情况下，塔板数增加一倍，分离度仅提高40%。操作中，可通过下面两种方式增加塔板数进而提高分离度：其一，使用长柱或双柱串联，但也会使分离时间大大延长；其二，使用细粒径填料的色谱柱，但这需要耐更高压力的液相色谱系统。相比之下后者更为可取。α：选择性(selectivity)是指色谱柱-流动相体系分离两个化合物的能力。选择性主要与固定相、流动相组成以及柱温等因素有关，与保留值也密切相关，其中固定相和流动相组成影响较大。以最常见的反相模式为例，反相柱(包括C18、C8、PH等)是以分配作用对化合物进行保留的，不同化合物的分离是基于它们在键合相与流动相中分配系数的差异，如果两种化合物的水溶性、在烷烃-水体系的分配系数等方面存在明显差异，那么这些化合物通常是能够利用反相柱达到分离；PH柱对具有苯环的化合物具有特殊保留。正相模式下，硅胶柱、胺基柱、氰基柱与带有极性基团的化合物之间存在极性相互作用，对化合物的基团具有选择性，常常用于结构类似物、异构体化合物的分离。流动相方面，降低流动相的洗脱强度通常可以增大分离度；而有机溶剂类型也会影响分离，比如反相条件下，乙腈和甲醇的选择性就存在很大差异，这种差异需要在实践中摸索，但无论如何，多种溶剂类型带给我们更多的实现分离的可能。k：随着容量因子k的增大，分离度也随之增加，这种影响在k值较低时非常明显，当k值大于10时，k值增加对分离度的影响就不再显著，这就告诫无原则地提高k值以增大分离度是没有意义的。增加键合相密度能够提高k值；另外改变键合基团类型也能改变k值，比如在反相色谱中，随着键合相碳链长度的增加，k值逐渐增大。

1 样品浓度过高，减小进样量，增大分流2 温度不合适，调整柱温，或使用程序升温3 载气流速过快，调低载气流速4 色谱柱不适合，更换色谱柱5 色谱柱污染，老化色谱柱6 色谱柱柱效下降，更换色谱柱7如果因为基线噪声大，引起杂质与要分离的物质无法分开，可能是系统污染，污染可能来自于载气不纯，进样垫污染。更换不同厂家气体，新的进样垫。8 衬管污染，清洗或者更换衬管。

HPLC 系统：样品鉴定和分离的工具高效液相色谱法(HPLC)已经从早期的色谱技术发展成为一种具有许多专门用途的精调处理方法了。这种技术可以广泛地用于分离混合物样品中的溶质——这对于辨认混合物样品中的成分来说意义重大。例如，HPLC经常用于鉴定组织匀浆中出现的多肽的丰度。另外HPLC对少量样品来说也十分有用，因为这种技术十分灵敏，而且不会破坏样品，所以对于热不稳定样品来说比较安全。和其他类型的液相色谱一样，HPLC操作流程首先是将样品注入到装有小颗粒填料的色谱柱（固相色谱柱）中。色谱柱的长度一般为5-30 cm(近期更多的倾向于小型化) ，内直径一般为1-9 mm，内部填料颗粒的直径为3-10 mm。样品在流动的液相中移动，液相可以根据样品和分离物的性质来选择不同的溶剂混合物。当液相流过柱子之后，样品中的每一种成份会被分别洗脱；液流检测器记录下每一种洗脱的成分，从而能够测量单个成分特有的保留时间。样品中与固相相互作用较强的成分具有较长的保留时间，并且洗脱较迟；而与固相相互作用较弱的成分则保留时间较短，在色谱柱内流动更快，洗脱较早。如果要选择HPLC系统，个人觉得必须首先了解你所需要的色谱柱的特性，这是由样品的性质决定的。目前有许多种色谱柱：利用离子交换、分子筛、生物亲和、和样品的手性等等。同时也要根据所需的色谱层析规模来选择合适的HPLC系统。总的来说，分析型色谱适合用于样品中成分的鉴定和定量，通常在皮克到毫克的水平；而制备型色谱的则适合于获得纯化的分离样品，通常在毫克到千克的水平。选择时同样也需要考虑选择一种合适的检测器，如紫外光，折射率、荧光和质谱检测器等。以下是根据Biocompare网站选择的目前市场上提供的HPLC系统的不同特点。

色谱是一种分离分析手段，[b]分离是核心[/b]，因此担负分离作用的色谱柱则可以称之为是色谱系统的心脏，会直接影响到整个实验的进程和结果。那么实验中如何正确使用色谱柱？出现问题如何解决？快跟仪小宝一起来看！[b]色谱柱的使用注意事项[/b]1.使用前要阅读柱子的使用说明书，关键是老化方法，老化温度，最高使用温度。2.使用中不能超过最高使用温度。3.在使用前用超过试验最高温度10~20℃老化10~30分钟。4.如果较长时间不使用，在开机前要通载气30~40分钟，使系统中可能有的空气全部被排除后才能开机升温。5.试验完毕后要将柱箱温度降至室温后再关机、关载气的总阀，并让气路中的载气全部排出，防止柱箱温度小幅回升可能给柱子带来不利的影响。载气压力尽可能不要太高。6.柱子必须置于柱架上，毛细管柱的任何部分都不能接触柱箱壁。如果不通入载气就对色谱柱进行加热，会快速且永久性的损坏色谱柱。[b]色谱柱被样品或者杂质污染[/b]1、即便是最干净的样品也会含有痕量或微量的非挥发或半挥发性物质。在反复的多次进样后，无论是干净的或是相对较脏的样品都会有非挥发性的杂质沉积在色谱柱的入口端内表面。2、色谱柱的柱前几米对于样品是很重要的，在程序升温的分析过程中，样品谱带首先堆积在这一段上，所以大部分的保留也是在这一段产生。3、柱内污染物的存在会导致一系列的问题：峰型变差，柱效降低，前后两次进样的峰面积再现性差，这都是由于污染物的存在，使固定相对样品的保留（吸附或吸收）不同所致。4、半挥发性的杂质也会导致峰型变差，因为他们会聚集在柱头，干扰流动相和固定相之间的正常分配和样品谱带的结构。5、用一个色谱柱测试液（醇类混合溶液）可以更深入的研究半挥发性杂质存在的影响。如果柱内吸附有半挥发性杂质或存在活性部位，醇类会有明显的拖尾，而且保留时间长的醇（较后流出、挥发性较低）的拖尾现象更加严重。但若经测试，醇类没有拖尾现象，则可认为色谱柱还未被污染。6、即便在样品提取和准备时很仔细小心，但处理后的样品中仍会含有半挥发性或不挥发的杂质，即便其含量很小。但好的样品前处理方式和使用清洁的容器还是能减少进样带入系统的污染物。7、可使用预柱来保护色谱柱，或在色谱柱前接一段1至5米长的未涂敷硅土柱，用以捕获那些半挥发性及非挥发性的杂质。8、将色谱柱的进样端截去0.5至1米，通常也会解决或者部分的解决这个问题。当然，在实际的色谱分析中，我们有更多问题亟待解决。基于此，我们有更好的解决方案。[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif[/img]仪课通邀请了北京化工大学的杜振霞教授、Neos Therapeutics公司的廖洪柱博士以及岛津、天美的工程师等等行业专家及企业精英为您深度讲解色谱。从色谱仪的维护保养到各种色谱方法的应用，从色谱的基础理论到相关软件的操作，帮您由浅入深、笃实基础、稳步进阶。快戳链接，查看详情吧~[url]https://www.instrument.com.cn/ykt/Course/Course/Album?id=16[/url]

色谱是一种分离分析手段，[b]分离是核心[/b]，因此担负分离作用的色谱柱则可以称之为是色谱系统的心脏，会直接影响到整个实验的进程和结果。那么实验中如何正确使用色谱柱？出现问题如何解决？快跟仪小宝一起来看！[b]色谱柱的使用注意事项[/b]1.使用前要阅读柱子的使用说明书，关键是老化方法，老化温度，最高使用温度。2.使用中不能超过最高使用温度。3.在使用前用超过试验最高温度10~20℃老化10~30分钟。4.如果较长时间不使用，在开机前要通载气30~40分钟，使系统中可能有的空气全部被排除后才能开机升温。5.试验完毕后要将柱箱温度降至室温后再关机、关载气的总阀，并让气路中的载气全部排出，防止柱箱温度小幅回升可能给柱子带来不利的影响。载气压力尽可能不要太高。6.柱子必须置于柱架上，毛细管柱的任何部分都不能接触柱箱壁。如果不通入载气就对色谱柱进行加热，会快速且永久性的损坏色谱柱。[b]色谱柱被样品或者杂质污染[/b]1、即便是最干净的样品也会含有痕量或微量的非挥发或半挥发性物质。在反复的多次进样后，无论是干净的或是相对较脏的样品都会有非挥发性的杂质沉积在色谱柱的入口端内表面。2、色谱柱的柱前几米对于样品是很重要的，在程序升温的分析过程中，样品谱带首先堆积在这一段上，所以大部分的保留也是在这一段产生。3、柱内污染物的存在会导致一系列的问题：峰型变差，柱效降低，前后两次进样的峰面积再现性差，这都是由于污染物的存在，使固定相对样品的保留（吸附或吸收）不同所致。4、半挥发性的杂质也会导致峰型变差，因为他们会聚集在柱头，干扰流动相和固定相之间的正常分配和样品谱带的结构。5、用一个色谱柱测试液（醇类混合溶液）可以更深入的研究半挥发性杂质存在的影响。如果柱内吸附有半挥发性杂质或存在活性部位，醇类会有明显的拖尾，而且保留时间长的醇（较后流出、挥发性较低）的拖尾现象更加严重。但若经测试，醇类没有拖尾现象，则可认为色谱柱还未被污染。6、即便在样品提取和准备时很仔细小心，但处理后的样品中仍会含有半挥发性或不挥发的杂质，即便其含量很小。但好的样品前处理方式和使用清洁的容器还是能减少进样带入系统的污染物。7、可使用预柱来保护色谱柱，或在色谱柱前接一段1至5米长的未涂敷硅土柱，用以捕获那些半挥发性及非挥发性的杂质。8、将色谱柱的进样端截去0.5至1米，通常也会解决或者部分的解决这个问题。当然，在实际的色谱分析中，我们有更多问题亟待解决。基于此，我们有更好的解决方案。[img]https://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif[/img]仪课通邀请了北京化工大学的杜振霞教授、Neos Therapeutics公司的廖洪柱博士以及岛津、天美的工程师等等行业专家及企业精英为您深度讲解色谱。从色谱仪的维护保养到各种色谱方法的应用，从色谱的基础理论到相关软件的操作，帮您由浅入深、笃实基础、稳步进阶。快戳链接，查看详情吧~[url]https://www.instrument.com.cn/ykt/Course/Course/Album?id=16[/url]

中药材薄层色谱展开系统之浅见 　　工作几年以来，主要运用薄层色谱分离方法对中药材成分进行分析。薄层色谱直观的色彩图像表达方式是一大特点，通过各种展开剂的灵活运用可将中药材分成不同极性组分进行分离，充分展现出层析分离的意义。根据这几年的摸爬滚打，反复实践，总结出一点展开系统的经验。由于接触的药材有限，有些仍不够深入，因此观点可能有些片面，鄙薄之处望多多包涵！说明：以下使用的板为硅胶正相薄层板 1 黄酮类经典展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：4：1），该系统还可用于香豆素类，三萜类成分分离，比例应作适当调整。 2 正己烷-乙酸乙酯或环己烷-乙酸乙酯系统，可分离极性相对较小的系统，如单萜类，木脂素类成分。可适当加甲酸，因己烷系统易使斑点扩散，甲酸对酸性成分分离有帮助。 3 乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：1：1：2）是甘草的展开系统，但其适用性很广，可用于中等极性的成分如绿原酸，DCQ，黄芩苷等。人参系统氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）(冰箱分层取上层溶液)也是一个不错的分离中等极性的展开剂。 4 若改变展开系统对分离帮助不大时，可考虑用变性板，如0.5％或1％NaOH溶液，0.1M NaH2PO4，0.1M Na2HPO4等。变性板还可调整斑点的Rf值，可将其减低。 5 氯仿是药典和文献广泛使用的展开溶剂，由于毒性较大，现在正逐渐用其他溶剂替代。有氯仿的两相系统易产生边缘效应，这与其沸点较低易挥发有关，若在其中加入些许酸或碱对分离可能产生意想不到的结果，特别是中药复方制剂时排除阴性干扰时，用量视情况而定。　　总之，展开系统的千变万化使薄层色谱有了更多可操作可摸索的空间，因此有了更为丰富多彩的色谱图像，若能结合其它色谱得知化学成分的一一归属关系就更加深刻了。