各位大虾: 你们好,小弟有问题请教各位了。 老板给我了一瓶色素,溶剂是水,然后交待的任务是找这瓶色素中物质的分离条件,我用的液相色谱仪器是waters 600.pda检测器。哪位有这方面的经验或者建议还请不吝赐教,先谢了。
[b][color=#444444] [/color][color=#444444]用液相做合成色素的难点在哪?样品处理后进行检测怎么不出峰,标样一样也不出峰啊,希望大侠给以指导![/color][/b]
请问有没有用液相做过合成色素的朋友?国标里测定波长为254nm,流动相用的醋酸铵和甲醇,醋酸铵的pH值为4.0,但我用这个条件怎么检测不到出峰?
CNW液相色谱柱对大闸蟹色素的提取研究1、实验背景中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)(以下简称河蟹)又称毛蟹、螃蟹,属甲壳纲、十足目、方蟹科、绒螯蟹属。主要分布在中国东部海域沿岸及通海的河流、湖泊中,具有很高的经济价值,是我国主要的养殖蟹类。在过去的几十年中,中华绒螯蟹迅速成为我国重要农业产品,目前我国的河蟹人工养殖发展较快,技术趋于成熟,由于其高营养价值受到广大民众的喜爱,故市场需求越来越大。河蟹品质评价主要从“靓肥绿大鲜腥甜”七个方面进行评判,因此,河蟹外观的美丑对河蟹的价值有很大的影响,但我国有关色素对中华绒螯蟹体色的影响研究还未见报道。故该实验主要从河蟹蟹壳色素出发,弄清河蟹色素含量与体色的关系。2、实验目的本实验采用丙酮提取组织色素,高效液相色谱法检测色素种类及含量,弄清河蟹组织成色与色素种类和含量的关系。3、实验方法3.1样品前处理采集样品并冷冻干燥,将壳与性腺碾碎,肝胰腺可以不用碾碎。3.2色素提取(1)一般称取0.2-0.5g冷冻样品,(2)将蟹组织转移至20ml安培瓶中,加4ml丙酮浸提,盖上瓶盖,50℃水浴震荡5h(用摇摆恒温温床200r/min),取出安培瓶,吸出浸提液-20度保存,如此再浸提一次,最后将两次浸提液合并,并转移至15ml离心管中。(3)离心:将总浸提液进行离心,-4℃离心机离心,4000r/min , 5分钟。(4)定容:定容至25ml,用漩涡振荡器震荡均匀。3.3色素检测(1)用移液枪取1ml丙酮浸提液于小烧杯中,真空干燥箱蒸发丙酮。(2)再溶解:将小烧杯取出放于冰盒上(注意避光),加入1ml正己烷(HPLC)再溶解。(3)过滤:0.45um有机针式滤膜过滤,并将滤液转移至液相进样瓶中,盖好盖子。若不马上进行实验,则保存于-20℃。(4)液相检测:流动相:A:甲醇:水=75:25 和B :乙酸乙酯,流动相速度:0.5ml/min,进样量:20ul,温度:30 ℃ ,检测波长:470nm 。洗脱程序:B流动相 0.01----5min为30%,5- 15 min为30%-55%,15-20 min 为55% ,20-28min为55%-75%,28-35为75%,35-39 min为75%-30%,39- 50 min为30%。4、标准曲线绘制 分别精确称取虾青素和β-胡萝卜素标准品各5mg,用正己烷定容至100ml,则4种标准品的浓度均为100ug/ml,分别取0.5、1、1.5、2、2.5ml标准品溶液定容至25ml,摇匀,取2ml标准溶液于进样瓶,以备HPLC检测,绘制标准曲线,如表1,图1所示。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403181022_493537_2563834_3.jpg5、讨论5.1组织色素图谱分析通过实验得到了河蟹各组织色素图谱如图2所示,其中蟹壳中主要是虾青素,而肝胰腺中主要是叶黄素及少量虾青素,卵巢中则主要有虾青素、角黄素、叶黄素、β-胡萝卜素。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/03/201403181024_493538_2563834_3.jpg从图2可以看出三种标准品峰峰型对称、尖锐,表明组分谱带宽,检测灵敏度高。另外,该图谱基线平,除肝胰腺之外无毛刺,基线无漂移。整体效果还可以,但也存在一些问题,比如该实验中色素出峰时间延后,20min时才出第一个峰。另外,在20min左右时出现三个峰,而且三个峰未能完全分开,当然这对蟹壳和肝胰腺影响不大,但对于卵巢还是有点影响的。5.2 液相色谱柱使用评论及改进方法在上文提到出峰时间延后,这主要是与流动相及柱子的极性相关,并非液相色谱柱单方面的原因。一方面可以对柱子的极性进行改进,使出峰的时间提前。因为在使用安谱液相色谱柱(CNW: Athena C18-wp 4.6mm*250mm *5um)之前,该实验使用的是岛津([
急求,液相测食品中色素的原始记录表格,各位大哥大姐,若手头上有的话,请发到我邮箱,万分感谢![em09511]
[em51] [em51] [em53] [em53] [em52] [em52] 可以吗?请问:红曲色素能不能用液相做?
研究生第一次用液相建立方法,测合成色素的。以前用的好好的,最近突然色谱峰开始拖尾了~实在是不知道什么原因,想来问问各位大神,有没有懂的~会不会是因为赤藓红色素呢?或者柱子被菌污染了[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906101026251876_7960_3513231_3.jpg!w690x517.jpg[/img][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/06/201906101026339927_8422_3513231_3.jpg!w690x517.jpg[/img]
请问用高效液相色谱法测定植物黑色素(almelanin)时,应该设定的波长、流动相、进样量等条件是多少?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif
[color=#444444]用安捷伦液相跑色素,标液的曲线还可以。样品是雪碧,前处理有超声排二氧化碳,然后用水稀释10倍混匀上机,赤藓红却死活找不到峰,想请问大神们,这是什么原因?我是否要换一种样品做?[/color][color=#444444][img=,690,260]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907081108154167_6724_1801607_3.jpg!w690x260.jpg[/img][/color]
刚学会高效液相色谱色素和苯山糖的前处理和上机操作,接下来的数据分析一点也不会, 请问我怎么去克服搞懂它,基础知识比较薄弱,月底就要上岗考核了,谁救救我!感谢
[b][font=宋体]问题描述:[/font][font=宋体]国标里测定合成色素的波长为[/font]254nm[font=宋体],流动相用的醋酸铵和甲醇,醋酸铵的[/font]pH[font=宋体]值为[/font]4.0[font=宋体],按照该条件为什么检测不到色谱峰?[/font][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]([/font]1[font=宋体])液相色谱检测色素的仪器条件可以参考[/font]GB 5009.35-2016[font=宋体]《食品安全国家标准[/font] [font=宋体]食品中合成着色剂的测定》,以甲醇和[/font]0.02mol/L[font=宋体]乙酸铵溶液为流动相,通过紫外检测器或二极管阵列检测器检测。标准中未提及调节流动相酸性,而已作废的[/font]GB 5009.35- 2003[font=宋体]版本中将流动相[/font]pH[font=宋体]值调至[/font]4.0[font=宋体];实际检测过程中发现,当流动相[/font]pH=4[font=宋体]时,色素不出峰。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])从日落黄等色素分子结构来看,酸性环境中大多数呈分子状态,在反相[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]色谱柱上更倾向于保留,甲醇等有机相比例不够的话不容易将其从色谱柱上洗脱,可能会出现不出峰现象。同时[/font]254nm[font=宋体]是液相色谱紫外检测器通用波长,这些色素在该波长处有吸收,但并不是其最大吸收波长(如日落黄最大吸收波长为[/font]483nm[font=宋体]、柠檬黄为[/font]427nm[font=宋体]等),若紫外检测器氘灯使用时间较长能量下降的话,有可能导致色素在[/font]254nm[font=宋体]处吸收值较低影响目标物出峰。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])综上所述,解决该问题可以试着从两方面入手:一是流动相用甲醇和[/font]0.02mol/L[font=宋体]乙酸铵(不调[/font]pH[font=宋体]值,查阅很多文献用的也是这种流动相组成),梯度洗脱程序可以参照[/font]GB 5009.35-2016[font=宋体];二是使用二极管阵列检测检测器,可以不用考虑最大吸收波长问题,若没有可以查阅资料找到各种色素对应的最大吸收波长,然后再根据自己需要检测的组分确定更合适的波长。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]
我们实验室之前1年多是正常的 ,在今年5月份突然出现色素7种混标中有只能有两三个目标物出峰,响应也很低。当时我们排查了流动相、标准物质等,换了同一个实验室的其它[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]设备和色谱柱走,都不行,买了新的单标回来,也不行。我们把我们的标液寄给了同公司的其它实验室,他们的设备上标液可以正常出峰。后来实在没辙了 我们就怀疑到超纯水的问题上,但是超纯水的常规指标也都是正常的,我们就更换了制水机的所有耗材和买了新的色谱柱。但是在10月份的时候,这个问题又出现了,这次也还是不知道原因,又以为是水的问题,又更换了制水机的所有耗材和买了新的色谱柱。结果新的色谱柱才买回来,走了几次之后,又又不行了。现在就是新的色谱柱走7中混标的话苋菜红和胭脂红不出峰,走这两种的单标也不出峰。现在我们也不知道是什么原因了。大家有遇到过这种问题吗??头都秃了,也想不到啥原因了。哦哦,这些色谱柱除了走色素,用来检测其余的项目都是正常的。色谱柱是C18 5μm 4.6*250mm .
摘要:建立了高效液相色谱法同时测定食品中8种着色剂的分析方法,此法大大提高了色素亮蓝的响应值,同时也增大了柠檬黄与新红的分离度,通过优化前处理、固相萃取条件及洗脱条件,有效除去杂质的同时获得较高的回收率。样品的加标回收率均在87.73%~96.20%,8种色素的线性关系良好,相关系数在0.9996~0.9999,试验用于食品中多种着色剂的同时检测,很好的满足食品检验机构样品数量大的要求。关键词:高效液相色谱法;食品;合成着色剂;检测 合成色素作为一种人工合成的色素,广泛应用于食品生产加工中,因其色泽鲜艳,着色力强,色调多样,但是合成色素的毒性(包括毒性、致泻性和致癌性)也是不容置疑的。英国南安普顿大学研究人员发现,很多食品含有的着色剂,能够引起儿童多动症的症状,比如过度活跃、注意力不集中等,而这些有毒有害的物质在儿童食品中出现的频率及含量往往更高。因此GB2760-2011《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》对合成色素的使用范围有着严格的控制。新红、柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红都是常见的合成色素在使用,目前,食品中合成色素检验的国家标准中,实验过程中一般会出现新红、柠檬黄分离差甚至分不开的情况,以及前处理过程中操作繁琐的问题。目前食品检测部门工作量大,任务繁重,本文针对色谱条件及前处理做出一些改进,使柠檬黄与新红分离完全,同时简化了前处理过程,提高了工作效率,并且回收率高,测定结果令人满意。 1 实验部分1.1仪器与试剂日本岛津高效液相色谱仪(配有自动进样器);可见紫外检测器SPD-20A甲醇(HPLC级)、氨水、屈臣氏超纯水乙酸铵溶液:称取1.54g乙酸铵,加水溶解,转移到1000mL容量瓶中,定容至刻度,用酸度计调节pH为4.0,用0.45µm滤膜过滤。胭脂红标准品浓度0.500 mg/mL、日落黄标准品浓度0.500 mg/mL、亮蓝标准品浓度0.500 mg/mL、柠檬黄标准品浓度0.500 mg/mL、苋菜红标准品浓度0.500 mg/mL五种标准物质,购自中国计量科学研究院。靛蓝标准品纯度95%,购自农业部环境保护科研监测所,不确定度为1%。赤藓红标准品纯度91.7%,购自Certificate of Analysis,不确定度为±2.0%。新红标准品纯度92.0%,购自Certificate of Analysis,不确定度为±2.0%。1.2固相萃取柱前处理所用固相萃取柱:Welchrom® P-WAX(60mg/3mL)(上海月旭提供;货号:[font=Times Ne
大家在做色素的时候,有没有遇到过这种情况??按照GB/T 5009.35-2003第一法处理,加好聚酰胺粉吸附好色素后,上抽滤坩埚抽滤的时候,加甲醇甲酸(6:4),颜色会跟着洗下去。样品是果酱。果酱用GB/T 5009.35-2003第一法处理,果酱的配料表里有明胶之类的添加剂,最终用乙醇氨水洗脱下来后,最终洗脱液里面有气泡还有那种像明胶一样的东西,不是水很粘稠的,看上去就像是果冻的东西。最终蒸干以后,会出现一层薄薄的膜一样的。
哪位高手有高效液相色谱仪测食品中色素的原始记录表格?借来参考下。万分感谢!
液相色素在检测过程中发现出峰时间推迟了很多,一点也不正常,这是什么原因?
用液相测色素,样品是冰淇淋,请问前处理要怎么做?
请问有谁知道用液相色谱法测定植物黑色素的条件啊?例如:流动相、波长、流速等。。。万分感谢!!
一种测定肉制品中 12 种食用色素(苋菜、丽春红 4R、胭脂红、丽春红 SX、丽春红 3R、诱惑红 AC、胭脂红、赤藓红、苏丹 I、苏丹 II、苏丹 III和苏丹 IV)的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与紫外二极管阵列检测相结合的方法。使用乙腈、甲醇、水、氨水、50:40:9:1 (v/v/v/v) 作为溶剂和超声波浴完成萃取。使用 C 18 RP 色谱柱实现色谱分离,样品用梯度乙酸盐-乙腈流动相洗脱。在选择性、灵敏度、准确性和耐用性方面获得了确认。详见[url]https://doi.org/10.1016/j.foodchem.2019.01.133[/url]
食品中检测的几个常见成分:甜味剂(糖精和糖精钠)防腐剂:(苯甲酸、山梨酸)天然色素等,用液相做的话,能不能用等度就行了?我也知道梯度的好,可是价格贵呀,就探讨一下这个问题,如果用等度到底行不行?实在不行也只好买梯度了!
高效液相色谱法中色素的检测,为什么要调ph等于7,ph对检测有什么影响?
我用高效液相色谱方法检测虾青素(一种色素)时,若是信噪比太低,会是什么原因?也就是说,影响信噪比的主要因子有哪些?请详细告知,谢谢。
1、样品是冰淇淋,比较油腻,前处理时要注意什么问题?还是完全照GB/T5009.35-2003的标准来做。2、有的文献中提到亮蓝色素不能用甲醇-甲酸(6+4)洗脱,会被洗脱掉,回收率低,那么请问有没有什么好的处理方法替代国标。3、按照国标要求,各色素的标准品是粉末状,但是我们单位买的是液体的,请问稀释至使用液时,要不要用PH=6的水稀释,还是纯水就够了?(对水的PH有要求吗?)国标上是写,用PH=6的水溶解粉末定容到一定浓度,作为标准溶液,标准溶液稀释到使用液用普通纯水就好了。4、若样品是卤鸡爪之类的,就是样品中蛋白质和脂肪含量比较高,在样品处理时,要加入,哪些试剂(浓度)来沉淀蛋白质和脂肪?
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]作合成色素标液需要过滤吗?感觉吸附很严重,如果不过滤,做样品过滤就不一致了
最近做肉制品中的色素,防腐剂含量的测定,以前没做过,但是国标5009里关于色素、防腐剂的测定方法中,没有肉制品的前处理方法,找了一些资料与大家共享,希望一起讨论,来得出最佳方法![~155390~][~155391~][~155392~][~155393~][~155394~]
有个考核样,只说是测人工色素。现要手头只有一台等度液相色谱仪,不知从何下手,大家可以给点意见么,谢谢
用GB5009的方法测定饮料中的合成色素:柠檬黄,日落黄等5种,条件都是按照国标的,进每一种色素的表样,保留时间都在1分多钟,分不开啊。请做过这个实验的朋友给我找出问题,想想办法,谢谢先。
我要做花色素的定性实验,用液相色谱。买的色素标样是粉末的,要怎么配制成储备液,用什么配制呢?我的色素是芍药花素,矢车菊素和天竺葵素。
请教各位大侠:在固相萃取法对土茯苓的有机磷农药进行检测实验中,处理样品等其他条件都找到了,但是在处理样品时,洗脱剂把土茯苓的色素也洗脱下来,导致在用GC检测时,对目标物有影响,有什么方法可以除去浓缩液的色素,前提是保证当中的有机磷农药不被除去,其成分没有发生改变?不胜感激.
求助如何用液相测定果皮颜色色素,色谱柱?洗脱条件?试一试symmetry C18没见到峰.郁闷.