液相识谱仪

液相色谱柱维护之正向使用、反向冲洗前言： 液相色谱柱是比较昂贵的色谱耗材，正确的使用和维护对发挥色谱柱的最佳性能和延长寿命至关重要。对于新柱的首次使用要平衡活化、按照标签标示的方向使用、保证流动相和样品洁净、在规定pH范围使用等使用注意事项本文就不在此一一赘述，今天我们主要来讨论一下其维护方法。关键词： 色谱柱、维护、柱压、塌陷、冲洗、反向正文： 色谱柱维护是个长期复杂的工作，如果维护得当会得到满意的试验结果，即提高了工作效率，又延长了色谱柱寿命、节约成本。分析色谱柱受损伤的因素发现，填料被污染是最常见的问题。而解决这个问题最有效、方便、省钱的办法就是冲洗色谱柱。现在以大家应用最为常见的硅胶基质键合C18填料的色谱柱为例，如果您的色谱柱前后端筛板是相同的，那么，本文给您的这个建议对您的色谱柱维护将非常实用，即：正向使用、方向冲洗！ 色谱柱正常的工作状态即流动相在泵的外力下带着样品流入色谱柱，然后在柱内把样品分离，而后流出色谱柱进入检测器（如下图一）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012313_320698_1622024_3.jpg图一看似简单的过程却会由于流动相、样品的洁净度不够等原因把污染物带入色谱柱（如下图二），也就是说色谱柱本身的使用就是一个被污染的过程，随着时间越来越长，污染越来越来重，直到报废。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012313_320699_1622024_3.jpg图二 色谱柱最先被污染的部位就是柱前段，即使是添加保护柱或在线过滤器，也只能减少污染，而并不能杜绝污染。随着使用时间的延长，色谱柱长期接受来自一个方向的污染和冲击，会带来两个严重后果：一是柱前段被高度污染，柱压升高等；二是色谱柱头填料塌陷，即由于色谱柱头填料长期接受来自同一个方向的力量冲击造成的松懈，如果不及时修复会来到柱效下降、峰型变差甚至分叉等情况（如下图三）。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012314_320700_1622024_3.jpg图三被污染后得到的试验图谱自然不合我们的要求，如下图四为某样品在柱前段被污染的色谱柱中检测得到的图谱，理论塔板数、拖尾因子都明显下降，并不符合规定。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012314_320701_1622024_3.jpg图四 我们解决这个污染的办法就是冲洗色谱柱，如果您怕麻烦采用正向冲洗，很显然，根据污染物被流动相带出的方向看，污染物会进过整个柱管内的填料，因此这对色谱柱来说又是一次污染的过程。因此我在这里给您的建议是反向冲洗，使污染物经过最小的路线流出色谱柱（如下图五）。如果您在平时试验中使用此方法，不但能快速的把柱前段的污染物冲洗走，还能把由于流动相冲击照成的柱头填料塌陷修复好，并且采用此方法越早对柱子的修复率越高，色谱柱性能也能保持的越长久。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012315_320702_1622024_3.jpg图五经过反向冲洗后，对某样品同样方法检测，图谱明显变好（见下图六）塔板数、拖尾因子都恢复到原来水平。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/10/201110012315_320703_1622024_3.jpg图六 为保证反向冲洗时二次污染色谱柱，大家一定要保证色谱柱前端的管路、流动相等的洁净度。如不能保证流动相的纯度，建议使用前抽滤。因此，此种方法对于色谱柱的日常维护效果明显，值得大家借鉴！也欢迎大家共同讨论，发表自己看法！

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]图的基线发生偏移。这种好像叫包裹也不能叫负峰，哪位大佬给看看这样的峰是什么问题，这种峰能要吗？我觉得峰型还可以，不知道怎么解决了[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209130752380939_2835_5828199_3.jpg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209130752542603_5992_5828199_3.jpg[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209130753128983_6727_5828199_3.jpg[/img]

[align=center][font=宋体]如何解决[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]跑标准品，液相不出峰但是质谱有响应的问题？[/font][/align][font=宋体][size=14px]在贴吧经常遇到版友发类似求助帖“跑植物激素，液相不出峰，但是质谱图有相应，尝试Q3扫描也是不出峰，质谱图有很多杂峰（见下图），麻烦各位了”。今天我们给大家梳理一下此类问题的解决方法和应对技巧。[/size][/font][align=center][img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/07/202007262124209374_9410_3255306_3.jpg!w690x517.jpg[/img][/align][font=宋体][size=14px]首先这位版友的疑问中，“液相不出峰，质谱有响应”这个现象是很常见的，可大意理解为“没有出色谱峰，但质谱图上有离子对的响应”。那么色谱峰没有按照预想的出峰，其原因可能出自3个方面：一样品瓶搞错了，进样的物质根本不是目标物质；二目标物在色谱柱上并没有得到理想的洗脱，可能还在色谱柱上没有洗脱下来；三质谱参数设置有误，此时应仔细检查离子对及各项气路条件，有一个理解误区是很多版友看到文献上报道的离子对，直接应用于自己仪器的目标物检测，这样是不对的，因为每个仪器状态不同，校机情况不同，因而小数点后的数字极为重要，也应当先摸质谱条件后，再摸色谱条件。[/size][/font][font=宋体][size=14px]还有一个理解误区是“质谱上有响应，但不出峰”，这种情况也很正常，因为我们的样品中不管是纯溶液还是血浆样本，其基质是极为复杂的，就像我们的环境中存在诸多细菌病毒一样，因此质谱上存在响应，但响应极低，不成峰形的，我们都称作基线。此时应当找找仪器连接问题、参数设置问题或标准品配制是否出了问题。[/size][/font][font=宋体][size=14px]下面是其他几个版主的经典回复，遇见类似问题，均可在这些方面查找缘由。[/size][/font][font=宋体][size=14px]来自“Dxhuang”：1、拿你的样品直接进到质谱，看看仪器有没有响应。如果有响应就排查液相的故障。主要检测液相系统的压力是否正常，是否有泄漏。[/size][/font][font=宋体][size=14px]2[/size][/font][font=宋体][size=14px]、如果直接进质谱都没有响应。先排查质谱的问题，质量轴，分辨率有没有异常。也可以进调谐液标液看看仪器的响应情况。根据你待测物的分析模式选择正离子调谐液或负离子调谐液。一般调谐没问题仪器的响应也就没什么问题。[/size][/font][font=宋体][size=14px]来自“huangjiangtao”：楼主测的哪种植物激素啊，可以先查阅相关文献资料借鉴一下离子对，然后根据自己仪器调谐质谱参数，不太清楚楼主说的液相不出峰是什么意思，是在柱子上不保留吗？总之要先把目标物质谱参数优化好，然后再选择合适的色谱柱、优化流动相使其有合理的保留时间。质谱图上的杂峰有可能是背景，选好离子对用MRM模式就应该看不到了。[/size][/font][font=宋体][size=14px]最后感谢仪器信息网提供原创大赛让我们共同交流进步学习！[/size][/font][font=宋体][size=14px] [/size][/font][font=宋体][size=14px] [/size][/font]

[color=#444444][color=#444444]我的液相色谱图大家帮忙分析分析，峰型又不像是拖尾，但内标物和我的物质都市这情况[/color][/color][color=#444444][color=#444444][/color][/color][color=#444444][color=#444444][img=,600,397]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909041506566916_8196_1849104_3.jpg!w600x397.jpg[/img][/color][/color]

国产与进口液相色谱仪测试比对报告1.比对目的 选取2010年药典二部及美国药典中典型方法及食品添加剂国标方法对某国产品牌上海伍丰EX1600高效液相色谱仪及其他品牌（以waters仪器为主）液相色谱仪的各项性能进行比较，明确国产仪器优化与改进方向。2.比对依据与原理1. JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程2. EX1600高效液相色谱仪及其他品牌高效液相色谱仪使用说明书3. EX1600高效液相色谱仪系统适用性测试方案及综合改善测试方案4. GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法--高效液相色谱法5. VensuilAA氨基酸分析方法6. 2010年药典二部及美国药典中双氢青蒿素、可可碱与茶碱、维生素A及阿托伐他汀钙等相关物质的测定方法。7. 需比对的性能指标选取原理：与《JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程》要求直接相关；与仪器关键部件的技术指标直接相关；与仪器测定结果重复性，即仪器稳定性直接相关。8. 样品选取原理：测定结果直接反应仪器的稳定性；属于常用或者经典方法，单标、混标体系均有所涉及；等度和梯度方法均有所涉及（反映梯度误差指标）；与检测器的基本波段（低、中、高波段）均相关的项目（反映全波段检测稳定性）。3.比对内容 高效液相色谱仪对样品的分离与测定结果好坏与仪器的稳定性及色谱柱的柱效相关，现使用同样的色谱柱进行EX1600高效液相色谱仪及其他品牌的色谱仪各项性能比对，就需要了解构成液相色谱的各个系统及整机的稳定性情况。就仪器各个系统的稳定性来讲，按照《液相色谱仪计量检定规程》测试方法，对流量准确度与重复性、噪声与漂移的测定结果能够从仪器方面直接反映输液系统及检测器的运行情况，明确指出这两个核心部件的优化与改进方向。而就整机稳定性来讲，还需要配合标准样品的测试，对其检出限、线性范围和梯度误差及定性定量重复性结果进行比较和评价，作为应用测试指标进一步反映仪器的稳定性好坏。将仪器性能指标与应用测试指标相结合，才能全面、客观地对仪器各项性能的稳定性进行评价与改进。现将主要测试内容列在下表：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100229_476241_2369266_3.png 根据以上所列比对项目的比对内容，选择苏丹红ⅠⅡⅢⅣ、双氢青蒿素、阿托伐他汀钙、可可碱与茶碱、维生素A、氨基酸作为衡量输液系统、检测器、整机及软件性能综合指标优劣的标准测试样品，其特有的测定条件及测定结果可以综合反映色谱仪的稳定性，现将其优势测定条件与测定结果反映的综合指标列在下表并具体阐述如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100231_476242_2369266_3.png 据食品国家标准、药典二部及美国药典中的典型方法，我们选取了近年来与食品、药品质量可控性、有效性及安全性密切相关的六类标准样品，依据其测试结果来衡量高效液相色谱仪各项性能稳定性。 苏丹红作为化工试剂，被不法商家非法添加入调味品中，是近年来食品安全领域的热点问题。苏丹红ⅠⅡⅢⅣ易致癌，是我国明文禁止的非食品添加剂。在相关食品国家标准中对其含量有具体的限量值，鉴于其实际测定中响应值低，我们对苏丹红的检测结果可直接体现高效液相色谱仪的噪声、漂移、检出限及线性范围（下限）等指标优劣。同时，苏丹红ⅠⅡⅢⅣ作为四元混标体系，国标方法规定苏丹红Ⅰ检测波长为478nm，苏丹红ⅡⅢⅣ检测波长为520nm，在检测过程中须转换波长，测定结果能够直接反映高波段、波长转换时的噪声与检出限；分离条件为梯度洗脱，可反映输液系统的梯度误差及双泵在梯度洗脱的稳定性。 双氢青蒿素作为单标体系，色谱测定条件为检测波长210nm，测定结果可直接反映检测器在低波段的稳定性及单泵运行情况。 阿伐他汀钙液相色谱检测波长为244nm，位于检测器优势波段的相对低波长处，流动相中含有高比例、洗脱能力较强的试剂四氢呋喃，可直接反映检测器优势波段噪声及单泵稳定性。 氨基酸混标体系共包含17种氨基酸组分，为复杂难分离体系，检测波长为254nm，测定时为梯度洗脱，测定结果可直接体现检测器优势波中段噪声及梯度洗脱时双泵运行稳定性。 可可碱与茶碱的二元混标体系，测定时检测波长为272nm，位于检测器优势波段的相对高波长处，可进行等度分离，测定结果直接反映了检测器优势波段稳定性及双泵在等度洗脱时的稳定性。 维生素A的高效液相色谱测定体系为正相色谱，流动相为正己烷：异丙醇[font=Tim