紫外色谱法

我是一名实习生，在做毕业论文课题时，导师设计高效液相色谱法还用紫外对照品比较法做参考，其参考的因素是什么？？做对照品比较法的目的是什么？？？

作者:陈岚； 张震华； 谢之微；文题:反向高效液相色谱法紫外测定缬沙坦含量的方法学研究期刊名:西部医学期刊年份:2015年卷(期),起止页码:03期

[b][font=宋体]问题描述：为什么有些药品需要用紫外分光光度法，而有些药品用高效液相色谱法？两种方法有何区别？是否可以相互取代？[/font][font=宋体]解答：[/font][/b][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）高效液相色谱法通常分离混合样品，能够对各个单体成分进行检测；紫外分光光度法主要用于对纯度非常高的或者对总类物质进行分析，通常测定的是某类物质的总含量。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）高效液相色谱法可以依据不同待测物质的性质选择不同的检测器进行检测。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）有些物质即可以用紫外分光光度法检测，也可以用高效液相色谱法进行检测，此时两者是通用的，可以互相取代；而有些指标，例如计算杂质比或者有效成分比例时，用紫外分光光度法的导数去计算也可以实现，但是会增加工作难度。[/font][font=宋体]（[/font]4[font=宋体]）不管是分光光度法还是高效液相色谱法，使用之前都需要进行方法验证或方法确认，确定检测方法的专属性、检测精度、准确度等能够满足要求。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

氟苯尼考的检测选用紫外分光光度法好还是液相色谱法好点？

请问专家，有紫外吸收的挥发油可以用高效液相色谱法测含量吗？选什么样的柱子和流动相？

以V氯仿∶V甲醇∶V二氯甲烷∶V正己烷=2.6∶1.2∶1∶5为展开剂， 建立了薄层色谱扫描法测定痕量药物尼莫地平的新方法。 其Rf值为0.48。 扫描波长为365 nm， 该法的最低检出限为0.005 μg，相对标准偏差为2.94％， 工作曲线的线性范围为0.005～1 μg。 用该法测定了加有尼莫地平的血清和尿样， 尼莫地平的平均回收率为96.7％～103％。关键词　尼莫地平， 紫外薄层色谱法　　尼莫地平(nimodipine)为一钙离子拮抗剂， 能有效地调节细胞内钙的水平， 具有抗缺血和抗血管收缩作用[1]， 是近年来治疗高血压和脑血管疾病的一种新药， 其结构式如右所示。　　　有关该药的测定方法， 曾报道过的有高效液相色谱法[2]、 分光光度法[3]， 但用紫外薄层色谱扫描法测定尼莫地平至今未见文献报道。 本文首次采用紫外薄层色谱法， 以氯仿－甲醇－二氯甲烷－正己烷为展开剂， 对尼莫地平的测定进行了研究。 该法具有简单、 快速、 灵敏、 准确的特点， 我们成功地做了血清和尿样中不同浓度的加标回收实验， 结果令人满意。 该法可用于临床作为测定尼莫地平血药及尿药浓度的一种简单、 有效的新方法。1 实验部分1.1 仪器与材料　　CS－9000双波长薄层色谱扫描仪(日本岛津)； 毛细管定量点样器(美国Drummond)； UV－1型紫外分析仪(上海顾村电光分析仪器厂)； 硅胶GF254 板(青岛海洋化工厂)； 尼莫地平(山东新华制药厂提供)。　　其它试剂均为分析纯以上规格。1.2 实验方法　　用1 μL定量毛细管点样， 标样与试样点于同一板上 待溶剂挥发后， 放入盛有展开剂的层析缸中， 用蒸汽预吸附3～5 min， 然后用展开剂展开, 展开剂为V氯仿∶V甲醇∶V二氯甲烷∶V正己烷=2.6∶1.2∶1∶5, 展开到距板上端1 cm处， 展距9 cm 取出板， 待溶剂挥发干净， 置于紫外分析仪， 在254 nm波长下可观察到样品暗红色斑点， 尼莫地平的Rf值为0.48 然后用薄层色谱扫描仪扫描， 以外标两点法定量。　　紫外薄层扫描条件： 以尼莫地平光谱λmax=365 nm为测定波长，锯齿扫描， 数据累加4， 数据平滑11，高灵敏度。2 结果与讨论2.1 展开剂的选择　　我们根据Glajch三角形最优化法[4]及参照Snyder溶剂参数法[4]对展开剂的组成及配比进行了选择,确定了以氯仿－甲醇－二氯甲烷－正己烷作为四元混和展开剂，其配比为V氯仿∶V甲醇∶V二氯甲烷∶V正己烷=2.6∶1.2∶1∶5 。

高效液相色谱法分离/蒸发光散射和紫外检测法 测定天麻中天麻甙含量 魏 泱 丁明玉* 李红霞 （清华大学化学系，北京，100084） 关键词 高效液相色谱法；蒸发光散射检测法；紫外检测法；天麻；天麻甙 中图分类号 O658 天麻(Gastrodia elata Blume)系兰科多年生寄生植物，用于治疗头昏，眩晕，肢体麻木等症。冯孝章等 [1]和周俊等 [2]分离并鉴定出天麻的活性成分有天麻甙(对羟甲基苯 b-D-吡喃葡萄糖甙，亦称天麻素)、 天麻甙元(对羟基苯甲醇)等.其中天麻甙为主要成分。之后的一些药理实验[3]也证实了这一点. 在测定天麻甙含量的方法中, 高效液相色谱法(HPLC)采用得最多. 正相HPLC[4]和反相HPLC[5]都可用于天麻及其制剂中天麻甙的分离，通常采用紫外检测法，检测波长在220 nm或270 nm处. 蒸发光散射检测器(ELSD)作为一种半通用型质量检测器，可用于检测类酯[6]、糖[7]等物质. 近年来，它在对天然药物的检测方面应用也越来越多，如对人参皂甙[8]、银杏内酯[9]的检测。HPLC/ELSD测定天麻甙尚未见报道. 1.实验与方法 1.1仪器与试剂 HP1100高效液相色谱仪(美国Hewlett Packard公司产品)配有四元梯度泵、二极管阵列检测器(DAD)和化学工作站. 另配有Alltech 500 ELSD(美国Alltech公司产品). 天麻甙为分析纯，购自中国药品生物制品检定所；对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛为分析纯，购自Sigma公司；甲醇为色谱纯，其他试剂均为国产分析纯试剂. 流动相使用前用0.45 mm滤膜过滤. 天麻原药材购自四川省，并经中国中医研究院鉴定. 1.2 色谱条件 ELSD和DAD检测均使用同样的色谱条件. 色谱柱： Zorbax RX-SIL (4.6 mm i. d. ´ 25 cm, 5 mm)硅胶柱，HP公司产品；配有预柱Micro Pak SI-5 (4 mm i. d. ´ 4 cm, 5 mm)硅胶柱，Parker公司产品. 流动相：正己烷/甲醇/乙酸乙酯(体积比6:3:2)，流速0.8 mL/min；进样量20 mL；ELSD参数：漂移管温度65 ℃，氮气流速1.55 L/min；DAD检测波长270 nm。 1.3 样品处理 天麻干燥块茎粉碎后，准确称取100 g. 用70%的乙醇水溶液热回流3次，每次回流后再用超声提取. 提取液过滤后经浓缩得浓缩液. 浓缩液用甲醇稀释至适当浓度，放入冰箱冷冻。澄清液经0.45 mm滤膜过滤后直接进行HPLC分析。 1.4 标准溶液的配制 分别称取89.0 mg和21.3 mg的天麻甙溶于100 mL甲醇中配制成两个储备液. 使用前以甲醇稀释成适当浓度的工作溶液. 2. 结果与讨论 2.1 天麻甙的分离 天麻的乙醇提取物中成分很多. 当流动相正己烷/甲醇/乙酸乙酯的体积比为5:3:2时，从DAD检测的色谱图来看，各种物质已经得到了较好的分离，但从ELSD检测色谱图上发现，天麻甙峰左侧有肩峰，说明有弱极性物质与天麻甙分离不完全，只是该物质在270 nm处无紫外吸收。增大正己烷比例，当正己烷/甲醇/乙酸乙酯的体积比达6:3:2时，无论从DAD检测结果〔图1(B)〕，还是ELSD检测结果〔图2(B)〕来看，提取物中的天麻甙与其他成分完全分离。从图1(B)可知，天麻提取物中的天麻甙元和对羟基苯甲醛与其后相邻的其他组分的分离不完全，因为本文的重点是比较ELSD和DAD检测天麻甙，故未对其它组分的分离条件进行优化。继续增大正己烷比例，各组分之间的分离度可进一步提高，但将导致分析时间过长。天麻甙也可以使用反相条件进行分离. 由于反相条件下，流动相中含水较多，ELSD工作时需要较高的漂移管温度和氮气气速，从而降低天麻甙的检测灵敏度. 故我们选用正相色谱条件来分离天麻甙. 天麻甙元和对羟基苯甲醛的挥发性较大， 即使在正相色谱条件下，也不能被ELSD检测. Fig.1 The chromatograms of the standards(A) and ethanol extracts of Gastrodia elata Blume.(B) detected by DAD 1. 4-hydroxybenzyl alcohol 2. 4-hydroxybenzaldehyde 3. Gastrodin. Fig.2 The chromatograms of the standards(A) and ethanol extracts of Gastrodia elata Blume.(B) detected by ELSD 1. Gastrodin 2.unknown. 3.2 ELSD条件优化 通过改变漂移管温度和氮气流速,选定在较小噪音水平上产生最大检测响应值的条件为:漂移管温度65 ℃，氮气流速1.55 L/min。 3.3 线性关系考察 将贮备液稀释配成21.3-890 mg/L的一系列浓度，依次进样20 mL，根据ELSD和DAD测得的峰面积对相应的标准溶液浓度进行线性回归。将最小浓度的标准溶液再逐级稀释，依次进样20 mL，计算当信噪比为3时，对应的标准溶液的浓度以确定检出下限。结果见表1. Table 1 Some parameters of gastrodin for quantitative analysis by ELSD and DAD Detector Linear range /(mg L-1) Calibration curve Calibration coefficient (r) Detection limit / (mg L-1) ELSD 21.3~890 Y=-56720.51+2534.46X 0.998 3.0 DAD 21.3~890 Y=-89.31+4.75X 0.999 1.0 3.4 天麻样品的测定 同一份样品重复进样5次，用ELSD和DAD测定其峰面积，取5次测定平均值计算样品中天麻甙含量. 在样品溶液中加入已知量的天麻甙标准溶液，测定回收率. 结果见表2. Table 2 Determination results of gastrodin in Gastrodia elata Blume by ELSD and DAD Detector Mass fraction (%) Recovery (%) RSD (%) ELSD 1.39 104.22 2.79 DAD 1.21 97.65 2.99 3.5 ELSD和DAD检测的比较 ELSD和DAD作为两种不同类型的检测器，其适用范围不尽相同. DAD所能检测的物质必须具有紫外吸收，而所采用的流动相应当在检测波长下无紫外吸收. 对于无紫外吸收的物质，可以通过衍生化的方法接上生色团. ELSD要求被测物比流动相难于挥发，对于一些半挥发性的物质，其检测灵敏度很低。同时，应当尽量避免使用高沸点的溶剂作为流动相. 对于一些分离中常加入的添加剂，如乙酸盐，磷酸盐等，ELSD检测时应用易挥发的盐来代替. 使用DAD和ELSD同时检测, 可以获得更多的物质信息, 且可以获得更准确的定量结果.

各位专家咨询一个小问题,液相色谱法选用甲醇做流动相,用水做检测物的溶剂和用甲醇做溶剂的区别在哪,用水做溶剂的话紫外色谱图上会出现水峰吗?

紫外和色谱分析法产生的干扰及其消除方法?

酒精度的测定？？？谁知道高效液相色谱法、紫外分光光度法怎么测酒精度？？？？知道的朋友们。一定要写清楚方法啊！！！谢谢诶

紫外光度法测定环境空气臭氧等六项环保标准发布中华人民共和国环境保护部 2010-10-27 关于发布《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项国家环境保护标准的公告　　为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，现批准《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项标准为国家环境保护标准，并予发布。　　标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外光度法（HJ 590-2010）；　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法（HJ 591-2010)；　　三、水质　硝基苯类化合物的测定　气相色谱法（HJ 592-2010)；　　四、水质　单质磷的测定　磷钼蓝分光光度法（暂行）（HJ 593-2010)；　　五、水质　显影剂及其氧化物总量的测定　碘-淀粉分光光度法（暂行）（HJ 594-2010) ；　　六、水质　彩色显影剂总量的测定　169成色剂分光光度法（暂行）（HJ 595-2010)。　　以上标准自2011年1月1日起实施，由中国环境科学出版社出版，标准内容可在环境保护部网站(bz.mep.gov.cn)查询。　　自以上标准实施之日起，由原国家环境保护局批准、发布的下述三项国家环境保护标准废止，标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外分光光度法 (GB/T 15438-1995);　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法(GB 8972-88);　　三、工业废水　总硝基化合物的测定　气相色谱法(GB 4919-85)。　　特此公告。　　二○一○年十月二十一日

关于发布《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项国家环境保护标准的公告　　为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，现批准《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项标准为国家环境保护标准，并予发布。　　标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外光度法（HJ 590-2010）；　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法（HJ 591-2010)；　　三、水质　硝基苯类化合物的测定　气相色谱法（HJ 592-2010)；　　四、水质　单质磷的测定　磷钼蓝分光光度法（暂行）（HJ 593-2010)；　　五、水质　显影剂及其氧化物总量的测定　碘-淀粉分光光度法（暂行）（HJ 594-2010) ；　　六、水质　彩色显影剂总量的测定　169成色剂分光光度法（暂行）（HJ 595-2010)。　　以上标准自2011年1月1日起实施，由中国环境科学出版社出版，标准内容可在环境保护部网站(bz.mep.gov.cn)查询。　　自以上标准实施之日起，由原国家环境保护局批准、发布的下述三项国家环境保护标准废止，标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外分光光度法 (GB/T 15438-1995);　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法(GB 8972-88);　　三、工业废水　总硝基化合物的测定　气相色谱法(GB 4919-85)。　　特此公告。　　二○一○年十月二十一日

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法紫外测定海水中亚硝酸盐、硝酸盐、溴盐阴离子 原文：袁丽霞， 顾海宁， 王慕华， 沈星， 陈朝晖， 蒋银土， 朱京平， 朱岩现代分析仪器 2000年5期　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法紫外测定海水中亚硝酸盐、硝酸盐、溴盐阴离子袁丽霞 顾海宁 王慕华 沈星 陈朝晖 蒋银土 朱京平 朱岩 (浙江大学西溪校区应化所 杭州 310028) 摘要：本文报道利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法结合紫外检测的方法，采用Dionex Ionpic AS9HC(2mm)，以0.25mL/min流速的9mol/L NaCO3作为淋洗液，在高氯化钠含量条件下，同时成功的分离和检测痕量的亚硝酸盐、硝酸盐和非痕量的溴盐。各离子在紫外检测条件下有很好的线性，其检测下限分别为NO2- 0.170μg/mL，NO3- 0.081μg/mL，Br- 0.048μg/mL。对不同地区的海水进行测定，其回收率在74%至103%。 关键词：[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法；紫外检测；海水 中图分类号：X834 文献标识码：B 文章编号：1003-8892(2000)06-0043-02Anion Chromatographic Method with UV Absorbance Detector for SimultaneousDetermination of NO2-，NO3- and Br- in SeawaterYuan Lixia Gu Haining Wang Muhua Shen Xing Chen Zhaohui Jiang Yintu Zhu Jingpin Zhu Yan (Department of Chemistry，Zhejiang University HangZhou 310028) Abstract：An ion chromatographic method with UV absorbance detector for the simultaneous separation and determination of NO2-，NO3-，Br- in the high content of NaCl. Separation was performed on a Dionpic Ionpic AS9-HC2mm column by using 9mol Na2CO3 as eluent. Good linearities of the concentrations of all and relevant peak area responses were achieved. The detection limits were 0.170μg/mL for NO2-，0.081μg/mL for NO3-，0.048μg/mL for Br- by absorbance detection. The method has been successfully applied to seawater in different regions，and the average recoveries for various ions ranged from 74% to 103%. Key words：Ion chromatography；absorbance detection；seawater 　 摘录：dujinx(发表时间：2001-5-17 22:28:11

我最近对一种物质进行检测，发现用紫外光谱仪和液相色谱的紫外检测器扫描出来的最大吸收波长不一致，相差2～3nm，这样的话哪个数据更准确些呢？而且峰形也有点不同，紫外检测器扫描的是单峰，而紫外光谱仪扫描出来的是有重叠的双峰。

紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用郑　健　陈焕文　刘宏伟　李宝华　张寒琦　于爱民　金钦汉(长春分析仪器研究和技术开发中心,吉林大学化学系分析教研室,长春,130023)摘　要：本文着重评述了1998年以来国内紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用,展望了其在该领域的发展趋势。关键词:紫外-可见分光光度分析法 药物分析 综述中图分类号:O657.32 R917　　　文献标识码:A　　以分子吸收光谱为基础的紫外-可见区分光光度分析法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点,已在地质[1]、环境[2]、能源[3]、材料[4]、食品[5]等科学中发挥着重要作用,尤其是随着多元络合物、胶束增敏光度法、有机试剂等的发展,它已经成为应用最广泛的分析手段之一[6]。分光光度法的早期应用集中在无机分析化学领域,即对为数众多的无机离子和化合物进行定性分析或定量测定[7]。　　有机物的光度分析较无机物的开展晚,但发展十分迅速,已经从定性、半定量分析发展到定量分析,方法的灵敏度和选择性也有了很大的提高,能够用光度法进行分析测定的物质种类也在不断增多[8-10]。近几年来,随着生命科学的发展,有机物光度分析的研究和应用热点主要集中在生物[11]、临床、药物[12]等方面。光度法在药物分析中的应用历来受到大家的广泛关注和重视,世界各国都进行这一领域的相关研究[13,14]。据统计,在药物分析中,分光光度法占29.1%,色谱法占25.5%,荧光、化学发光法占2.4%,与光度法有关的方法共计占31.5%,由此可见,光度法是药物分析最常用的方法之一[12]。研究结果表明,光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相蓖美[15],但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的。因此,可以相信,光度法在药物分析中将大有作为。　　我国学者在药物光度分析领域开展了大量工作,取得了喜人的成果。建立了紫外-可见分光光度法[16]、发光光度法[17]、荧光光度法[18]等许多新的测量方法和体系[12,19],测定的药物涉及生物碱、苯磺酰胺、芳胺、芳烃、巴比妥、甾体激素、咪唑、噻吩、吡啶、季胺盐、磺酰胺、氯胺酮类、醇、醛、醚、某些杂环化合物、某些糖及苷、抗生素和维生素等几大类。本文只评述1998～2000年间紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用和进展,在药物分析中的其它光度分析方法,如荧光光度法[20-22]、发光分析[23],可以参阅相应的近期综述。

关于发布《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项国家环境保护标准的公告　　为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，现批准《环境空气 臭氧的测定 紫外光度法》等六项标准为国家环境保护标准，并予发布。　　标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外光度法（HJ 590-2010）；　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法（HJ 591-2010)；　　三、水质　硝基苯类化合物的测定　气相色谱法（HJ 592-2010)；　　四、水质　单质磷的测定　磷钼蓝分光光度法（暂行）（HJ 593-2010)；　　五、水质　显影剂及其氧化物总量的测定　碘-淀粉分光光度法（暂行）（HJ 594-2010) ；　　六、水质　彩色显影剂总量的测定　169成色剂分光光度法（暂行）（HJ 595-2010)。　　以上标准自2011年1月1日起实施，由中国环境科学出版社出版，标准内容可在环境保护部网站（bz.mep.gov.cn）查询。　　自以上标准实施之日起，由原国家环境保护局批准、发布的下述三项国家环境保护标准废止，标准名称、编号如下：　　一、环境空气　臭氧的测定　紫外分光光度法 (GB/T 15438-1995)；　　二、水质　五氯酚的测定　气相色谱法（GB 8972-88）；　　三、工业废水　总硝基化合物的测定　气相色谱法（GB 4919-85）。　　特此公告。　　二○一○年十月二十一日主题词：环保 标准 发布 公告http://www.mep.gov.cn/gkml/hbb/bgg/201010/t20101026_196662.htm

大家好,我今天看了一篇资料,但是觉得有问题,请大家帮助解决一下.这篇资料用液相色谱法分析一个胺类的产品,用的是岛津液相色谱,紫外可见光检测器,色谱柱VP-ODS4.6mm*150mm,225nm能出一个很大的氯化钠的色谱峰!有这个可能吗?

无意间看到一本书籍，现在就来介绍一下液相常用，简单，实用的一种 ，大家有时间下载看看，是一本比较久远，但是很经典的一本书籍.中 文： 纸色谱法英 文： paper chromatography拼 音： zhisepufa说 明： 又称纸上层析、纸上层离。液相色谱的一种。使用滤纸作为载体的色谱法，都叫纸色谱法。在滤纸的一端，用毛细管或微量注射器滴上样品，置于密闭容器中，流动相借助于滤纸毛细管的渗透作用而在纸上移动，达到色谱分离的目的。随流动相运动方向的不同，有上行法和下行法两种。通常在纸色谱进行的分离机理是分配。经过分离后的样品，如有紫外吸收则直接在紫外灯下观察，或经显色剂生色后观察。纸色谱的设备简单，操作方便，也很灵敏。色谱图可保存。使用专门的光密度计，或将色点取下用溶剂淋出后，用分光光度法测定，都可以得到定量的结果。在医药、环境、食品、石油、染料、农药残留物及添加剂等领域有广泛的应用。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=165591]纸色谱法及其应用[/url]

用高效液相色谱-紫外检测器检测某物质。紫外光谱是因为分子电子能级发生跃迁产生的，我的理解是：电子吸收能量，从基态到激发态，吸收了光谱，但激发态不稳定，应该又回到基态，又会发射光谱，这两个过程应该都是很短的，ns至ms级的，而且应该是不断循环的过程（即只要有紫外光照射，改分子就一直处于基态到激发态，再从激发态到基态，如此循环），也就是说该物质及吸收了紫外光，又发射了紫外光，那检测器搜集到的的发射的紫外光能量基本可以认为是不变的？这种理解对吗？

色谱法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同，以使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称固定相；另一相为液体或气体，称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂，流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱，是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同，以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等，可根据载体和试样的性质，选用水或有机溶剂为流动相。色谱法的分离方法，有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。色谱所用溶剂应与试样不起化学反应，并应用纯度较高的溶剂。色谱时的温度，除气相色谱法或另有规定外，系指在室温下操作。分离后各成分的检出，应采用各单体中规定的方法。通常用柱色谱、纸色谱或薄层色谱分离有色物质时，可根据其色带进行区分，对有些无色物质，可在245-365nm的紫外灯下检视。纸色谱或薄层色谱也可喷显色剂使之显色。薄层色谱还可用加有荧光物质的薄层硅胶，采用荧光熄灭法检视。用纸色谱进行定量测定时，可将色谱斑点部分剪下或挖取，用溶剂溶出该成分，再用分光光度法或比色法测定，也可用色谱扫描仪直接在纸或薄层板上测出，也可用色谱扫描仪直接以纸或薄层板上测出。柱色谱、气相色谱和高效液相色谱可用接于色谱柱出口处的各种检测器检测。柱色谱还可分部收集流出液后用适宜方法测定。

介绍：公司生产一次性注射用品需要测：环氧乙烷残留评估方案：一、气相色谱法二、紫外分光光度法请比较下两种方法哪种会更好？

苁蓉酒中松果菊苷含量的测定采用反相高效液相色谱法测定苁蓉酒中松果菊苷的含量。该法能有效地排除复方中其他组分的干扰，使色谱峰得到完全的分离。色谱条件：固定相：ODS，流动相：ACN 1%乙酸溶液（14 86），柱温：25℃，紫外波长：330nm.反相高效液相色谱法测定枳实、枳壳中橙皮甙和柚皮甙的含量采用高效液相色谱法测定了枳实、枳壳中橙皮甙和柚皮甙的含量。色谱柱为Hypersil ODS柱（250mm×4.6mm i.d),流动相为ACN 0.5%乙酸溶液（体积22 78），FLOW=1.0ml/min，波长：283nm.人血清中的阿西美辛和吲哚美辛的测定建立测定人血清中的阿西美辛及其活性代谢物吲哚美辛的高效液相色谱法。色谱条件：色谱柱：Spherisob-C8(5

[b]高效液相色谱紫外检测器需要信噪比指标[/b][i]法洋，许旭，雷晓玲[/i]摘 要：紫外吸收光学检测器是高效液相色谱中最常用的检测器。厂家采用的性能指标包括检测器的噪音，基线漂移等。考虑到该仪器用于分析测试实验的需求，增加信噪比指标可以较全面的评价不同型号检测器的性能差异。关键词：紫外吸收光学检测器 高效液相色谱 信噪比1 引 言紫外检测器是高效液相色谱中最常用的检测器，目前市场上生产厂家及型号很多，厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。考虑到样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器的关系不大，一般认为这可以基本反映仪器在灵敏度方面的性能。本文在实验的基础上证明对同一样品各检测器的响应值实际上也存在不同程序的差异，说明仅使用噪音和基线漂移的指标不能准确显示仪器在灵敏度方面的性能差异，因此，提出用信噪比来评价仪器的灵敏度性能。2 灵敏度评价指标设置的目的和依据高效液相色谱及其紫外检测器主要用于化学样品的分析测试。其评价指标必然与其用途相关联。一个分析方法对检测器的要求主要在灵敏度、选择性、精确度和准确性方面。在色谱分析中灵敏度是非常重要的指标。对于灵敏度，在分析测试方法研究中主要使用信噪比、最低检测限，或最低定量限来评价。其中信噪比是评价的核心，因为最低检测限和最低定量限通常用信噪比在2~3和10的量来定义。但目前厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。这实际上是基于样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器关系不大的假设。根据朗伯比尔定律，对于同样长度的检测池，同样浓度的样品溶液应该具有相同的吸光度。这样，对同样浓度的样品溶液，检测器的响应值应该是相同的，所以上述噪音，基线漂移的参数应该可以用来评价检测器的灵敏度性能。

紫外-可见光谱法概述： 熟练掌握紫外可见吸收光谱与分子结构的关系　了解生色团、助色团、共轭效应、取代基效应及其相互关系　熟练掌握朗伯-比尔定律及其成立条件　了解紫外-可见光谱仪器的基本构成、主要部件的构成材料及其作用　了解差示分光光度法、导数分光光度法、双波长分光光度法等的测定对象及其原理　初步掌握荧光、磷光和化学发光的产生原理及其与分子结构的关系　了解重要发光参数的物理意义　了解发光光谱仪与紫外-可见吸收光谱仪的异同　掌握荧光分析的定量关系式

色谱法在药品研发中的应用及常见问题分析 摘要：色谱方法在药物研发中占据重要地位，本文介绍了一些常用的色谱方法原理以及在药物研发，尤其质量控制中应用的注意之处，并列举了申报资料中色谱法应用的一些常见问题，以引起大家的关注。 关键词：色谱法　　类型　　常见问题 色谱法是一种分离分析技术，通过将样品中的组分分离，再逐个分析，因此是分析混合物、检测化合物纯度的有力手段，因而在药物研发中广为应用，包括原料药、中间体、制剂和生物体液中化合物的定性和定量，涉及的待测物包括手性或非手性药物、过程杂质、残留溶媒、附加剂（如防腐剂）、分解产物、从容器和密闭包装或制造过程中带入的杂质、植物药中的农药和代谢物等，包括制备工艺研究、中间体控制、质控检验、稳定性及药物动力学研究等过程。因此，色谱方法在药物研发中占据举足轻重的地位。 一、色谱法的几种常见类型 1、HPLC法： （1）手性液相色谱 将“手性识别”或“手性环境”引入色谱系统中，以形成暂时非对映异构体复合物，从而直接分离药物对映体；或将对映体衍生化生成非对映体，而得以分离。即分离光学异构体可用手性固定相、衍生化后在非手性固定相上或在非手性固定相上用流动相手性添加剂形成非对映体来实现。 （2）离子交换色谱 使用表面有离子交换基团的离子交换剂作为固定相。带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可以用于阳离子的分离；带正电荷的交换基团（如季胺盐）可以用于阴离子的分离。不同离子与交换基的作用力大小不同，在树脂中的保留时间长短不同，从而被相互分离。可用pH程序洗脱。 （3）离子对/亲和色谱 常用反相离子对色谱，用缓冲液和加入的对离子（与被分离的样品荷相反电荷）分离。分离受pH、离子强度、温度、浓度和共存的有机溶剂类型的影响，亲和色谱，一般用于大分子，使用配合体（共价结合在固体基质上的生物活性分子），与其同类的抗原（分析介质）反应，生成可逆转的复合物，通过改变缓冲条件洗脱。 （4）正相色谱 将各种不同的有机官能团通过化学反应共价结合到固定相惰性载体上，固定相极性＞流动相极性。常用固定相：二醇基、醚基、氰基、氨基等极性基团的有机分子。适于分离水溶性的极性、强极性化合物，此时较小极性的组分比较大极性组分更快地洗脱。 （5） 反相色谱 将各种不同的有机官能团通过化学反应共价结合到固定相惰性载体上，固定相极性＜流动相极性。常用固定相：烷基、苯基等非极性有机分子，最常用ODS柱或C18柱，其极性很小，适于分离非机性、弱极性离子型样品。是目前药物研发中液相色谱的主要分离模式，通常用紫外检测器，用水作基本溶剂，选择性受溶剂强度、柱温和pH的影响，一般来说较大极性比较小极性组分洗脱更快。 紫外检测器可以用于各类液相色谱，这类检测器要注意的是氘灯老化后的灵敏度降低，其灵敏度因仪器的设计和/或者制造厂家的不同而异。用紫外检测器和反相HPLC组合得到的色谱图不一定能真实的反映实际情况，原因是：①极性比目标化合物大得多的化合物可能被掩盖（在溶剂前沿或死体积时同时洗脱）；极性比目标化合物小得多的化合物洗脱出来晚，甚至保留在柱上。为避免此情况发生，最好使用梯度洗脱法。②无紫外吸收或在检测波长处吸收相差较大的多种化合物，有时在某一检测波长处不能被检出，因为通常只用一个检测波长。为避免此情况发生，可改用其它类型检测器，如示差折光检测器；流动相许可时，最好使用蒸发光散射检测器。 （6） 分子排阻色谱 以多孔凝胶（如葡萄糖，琼脂糖，硅胶，聚丙烯酰胺等）作固定相，依据样品分子量大小达到分离目的。大分子不进入凝胶孔洞，沿多孔凝胶胶粒间隙流出，先被洗脱；小分子进入大部分凝胶孔洞，在柱中被滞留，后被洗脱。 　　根据样品性质可分为两类：凝胶过滤（GFC）—用于分析水溶性样品，如多肽、蛋白、生物酶、寡聚核苷酸、多聚核苷酸、多糖；凝胶渗透（GPC）—用于分析脂溶性样品，如测定高聚物的分子量。SEC主要依据分子量大小进行分离，因此与样品、流动相间的相互作用无关，因此不采用改变流动相的组成来改善分离度。

液相色谱法 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]不能由色谱图直接给出未知物的定性结果，而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时，定性鉴定就很困难，这时需借助质谱、红外和化学法等配合。另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。此缺点可高效液相色谱法来克服。液相色谱法就是用液体作为流动相的色谱法。1903 年俄国化学家M.C.茨维特首先将液相色谱法用于分离叶绿素。 原理和分类 液相色谱法的分离机理是基于混合物中各组分对两相亲和力的差别。根据固定相的不同，液相色谱分为液固色谱、液液色谱和键合相色谱。应用最广的是以硅胶为填料的液固色谱和以微硅胶为基质的键合相色谱。根据固定相的形式，液相色谱法可以分为柱色谱法、纸色谱法及薄层色谱法。按吸附力可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶渗透色谱。近年来，在液相柱色谱系统中加上高压液流系统，使流动相在高压下快速流动，以提高分离效果，因此出现了高效（又称高压）液相色谱法。 品质软件试用下载：[URL=http://www.gztaiyou.com/jian/download.asp?instrument=315]http://www.gztaiyou.com/jian/download.asp?instrument=315[/URL]　　①液固吸附色谱。高效液相色谱中的一种，是基于物质吸附作用的不同而实现分离。其固定相是一些具有吸附活性的物质如硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等。 　　②液液分配色谱法。基于被测物质在固定相和流动相之间的相对溶解度的差异，通过溶质在两相之间进行分配以实现分离。根据固定相与流动相的极性不同，分为正相色谱和反相色谱。前者是用硅胶或极性键合相为固定相，非极性溶剂为流动相；后者是硅胶为基质的烷基键合相为固定相，极性溶剂为流动相，适用于非极性化合物的分离。 　　③离子交换色谱法。基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子对离子交换基具有不同的亲和力而实现分离。薄壳型离子交换树脂柱效高，主要用来分离简单的混合物；多孔性树脂进样容量大，主要用来分离复杂混合物。 　　④凝胶渗透色谱法[1] 。又称为尺寸排阻色谱法 。1959年首先用于生物化学领域。以溶剂为流动相，多孔填料（如多孔硅胶、多孔玻璃）或多孔交联高分子凝胶为分离介质的液相色谱法。当混合物溶液入凝胶色谱柱后，流经多孔凝胶时，体积比多孔凝胶孔隙大的分子不能渗透到凝胶孔隙里去而从凝胶颗粒间隙中流过，较早地被冲洗出柱外，而小分子可渗透到凝胶孔隙里面去，较晚地被冲洗出来，混合物经过凝胶色谱柱后就按其分子大小顺序先后由柱中流出达到分离的目的。用凝胶渗透色谱的优点是：分离不需要梯度冲洗装置 ；同样大小的柱能接受比通常液相色谱大得多的试样量；试样在柱中稀释少，因而容易检测；组分的保留时间可提供分子尺寸信息；色谱柱寿命长。它的缺点是：不能分离分子尺寸相同的混合物，色谱柱的分离度低；峰容量小；可能有其他保留机理起作用时引起干扰。凝胶渗透色谱法为测定高聚物分子量和分子量分布提供了一个有效的方法，此外还可用来分离齐聚物、单体和聚合物添加剂等。 　　⑤[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法。采用柱色谱技术的一种高效液相色谱法，样品展开方式采用洗脱法。根据不同的分离方式，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]可以分为高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url] 、离子排斥色谱和流动相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]3类。高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法使用低容量的离子交换树脂，分离机理主要是离子交换。离子排斥色谱法用高容量的树脂，分离机理主要是利用离子排斥原理。流动相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]用不含离子交换基团的多孔树脂，分离机理主要是基于吸附和离子对的形成。 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]由淋洗液贮存器 、泵 、进样阀 、分离柱 、抑制柱、电导检导器和数据处理单元等组成。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]最重要的部件是分离柱，装有离子交换树脂。抑制柱是抑制型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱仪[/color][/url]的关键部件，其作用是将淋洗液转变成低电导部分，以降低来自淋洗液的背景电导，同时将样品离子转变成其相应的酸或碱，以增加其电导。分离阴离子，抑制柱填充强酸性阳离子交换树脂；分离阳离子，抑制柱填充强碱性阴离子交换树脂。检测器分通用型检测器与专用型检测器。前者如电导检测器，对检测池中所有离子都有响应；后者如紫外-可见分光光度计，对离子具有选择性响应。 　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法具有快速、灵敏、选择性好和同时测定多组分的优点。尤其对于阴离子的测定，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的出现是分析化学中的一项突破性的新进展。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]法主要用于测定各种离子含量，广泛应用于水、纸浆和漂白液、食品分析、生物体液、钢铁和环境分析等各个领域。 　　设备 高效液相色谱仪由输出泵、进样装置、色谱柱 、梯度冲洗装置、检测器及数据处理和微机控制单元组成。输出泵的功能是将冲洗剂在高压下连续不断地送入柱系统，使混合物试样在色谱中完成分离过程 。常用的进样方式有3种：注射器隔膜进样、阀进样和自动进样器进样。色谱柱的功能是将混合物中各组分分离。梯度冲洗又称溶剂程序，通过连续改变冲洗剂的组成，改善复杂样品的分离度，缩短分析周期和改善峰形，其功能类似于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中的程序升温。检测器的功能是将从色谱柱中流出的已经分离的组分显示出来或转换为相应的电信号，主要有紫外吸收检测器、荧光检测器、电化学检测器和折光示差检测器，其中以紫外吸收检测器使用最广。现代化的仪器都配有计算机，以实现自动处理数据、绘图和打印分析报告。

随着中药理化鉴定技术的发展，色谱、光谱鉴定方法成为中药定性定量分析的主要物理化学方法。近些年来，中药鉴定常用光谱法有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]近红外光谱[/color][/url]法（Near Infrared Spectrometry，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]）、中红外光谱法（Mid-infrared Spectroscopy，MIR）、质谱法（Mass Spectrometry，MS）与X射线衍射法（X-ray Diffraction，XRD）、紫外－可见光谱法、拉曼光谱鉴定法等。其中红外光谱法是根据待鉴定药材中所含化学成分在红外光区产生的吸收与叠加光谱特征同正品药材进行对比，以判定药材的真伪；紫外-可见光谱法鉴定中药材的原理与红外光谱法类似，也是通过待鉴定药材所含化学成分的吸收叠加形成复合谱，根据紫外叠加光谱的特异性和稳定性，以及相同药材间紫外叠加光谱存在的规律性而作出正伪品的判别。色谱法在中药鉴定中得到广泛应用，根据流动相与固定相的分子聚集状态以及操作形式的差异，色谱法又分为纸色谱法、柱色谱法、薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，TLC）、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法（Gas Chromatography，GC）、高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）等。薄层色谱法（TLC）最早广泛应用于中药材的鉴定中，高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法（HPLC）是目前中药材鉴定中主要采用的方法。此外，色谱与光谱联用技术也被广泛应用于中药材的鉴定中，该方法是将具高效分离性能的色谱技术和能够获取丰富的化学成分结构信息的光谱技术相结合而形成的新的鉴别技术，包括高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱（High Performance Liquid ChromatographyMass Spectrometry，HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]）技术、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]质谱（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]）技术、红外光谱-质谱（Infrared SpectraMass Spectrometry，IR-MS）技术、质谱-质谱（Mass Spectrometry-Mass Spectrometry，MSMS）技术、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]-傅里叶变换红外光谱（Gas Chromatography-Fourier Translation Infrared Spectroscopy，GC-FTIR）技术、高效毛细管电泳质谱（High Performance Capillary ElectrophoresisMass Spectrometry，HPCE-MS）技术，以上这些技术在中药品种鉴定与质量评价方面产生了重大的作用，其中应用最广泛的是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]（HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]）联用技术。

以下为2010版药典“天麻钩藤颗粒”中钩藤的TLC鉴别试验：取本品6g或3g（无蔗糖），研细，用浓氨试液湿润后，加氯仿50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取钩藤对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5~10μl，分别点于同一以1%NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-氯仿-丙酮-甲醇-浓氨试液（4:5:4:3:0.8）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。小弟有一点不明：上述提取方案，包括浓氨泡、氯仿提，应该是针对钩藤的主要成分--生物碱类成分的吧，这样的话，为何后面的紫外检测波长选365nm，而不是选254nm呢？钩藤中的主要成分-吲哚类生物碱，都是在230~250左右有紫外吸收啊，此处很纠结，请达人指教，非常感谢！！另外，用NaOH制备的硅胶板，也是利于生物碱类成分形成斑点吗？还是其他作用呢？再谢！bow~~

效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有吸附、分配、离子交换和排阻作用。1．对仪器的一般要求所用的仪器为高效液相色谱仪。仪器应定期检定并符合有关规定。（1）色谱柱最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基硅烷键合相和氨基硅烷键合相等）也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子交换色谱；凝胶或高分子微球等填充剂用于分子排阻色谱等；手性键合填充剂用于对映异构体的拆分分析。填充剂的性能（如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等因素）以及色谱柱的填充，将直接影响待测物的保留行为和分离效果。孔径在150?以下的填料适合于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物则应选择孔径在300?以上的填料。以硅胶为载体的键合固定相填充剂适用pH2～8的流动相。当pH大于8时，可使载体硅胶溶解；当pH小于2时，与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。当色谱系统中需使用pH大于8的流动相时，应选用耐碱的填充剂，如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶、包覆聚合物填充剂、有机-无机杂化填充剂或非硅胶填充剂等；当需使用pH小于2的流动相时，应选用耐酸的填充剂，如具有大体积侧链能产生空间位阻保护作用的二异丙基或二异丁基取代十八烷基硅烷键合硅胶、有机-无机杂化填充剂等。（2）检测器最常用的检测器为紫外吸收检测器，其他常见的检测器有二极管阵列检测器（DAD）、荧光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器、电化学检测器和质谱检测器等。紫外、二极管阵列、荧光、电化学检测器为选择性检测器，其响应值不仅与待测物的质量有关，还与化合物的结构有关；示差折光检测器和蒸发光散射检测器为通用型检测器，对所有的化合物结构均有响应；蒸发光散射检测器属质量型检测器，对结构类似的化合物，其响应值几乎仅与待测物的质量有关；二极管阵列检测器可以同时记录待测物在规定波长范围内的吸收光谱，故可用于待测物的光谱管制和色谱峰纯度的检查。紫外、荧光、电化学和示差折光检测器的响应值与待测物的质量呈线性关系，但蒸发光散射检测器响应值与待测物的质量通常并不呈线性关系，必要时需对响应值进行数学转换后进行计算。不同的检测器，对流动相的要求不同。当采用紫外检测器时，所用流动相应至少符合紫外分光光度法（附录Ⅳ A）项下对溶剂的要求；采用低波长检测时，还应考虑有机相中有机溶剂的截止使用波长，并选用色谱级有机溶剂。蒸发光散射检测器和质谱检测器通常不允许使用含不挥发盐组分的流动相。（3）流动相由于C18链在水相环境中不易保持伸展状态，故对于十八烷基硅烷键合硅胶为固定相的反相色谱系统，流动相中有机溶剂的比例通常不应低于5％，否则C18链的随机卷曲将导致组分保留值变化，造成色谱系统不稳定。正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组成、检测器类型不得任意改变外，其余如色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、流动相流速、混合流动相各组成的比例、柱温、进样量、检测器的灵敏度等，均可适当改变，以适应具体的色谱系统并达到系统适用性试验的要求。但对某些品种，必须用特定牌号的填充剂方能满足分离要求，可在该品种项下注明。