紫外吸光计

[color=#444444]用紫外可见扫了波谱图，紫外可见光谱图如何分析？因为要用摩尔吸光系数分析物质可能的结构，但不知道摩尔吸光系数是如何得出的？因为物质是未知的，所以无法查，束手无策了[/color]

官能团的紫外吸光值大小和什么有关？比如苯环和萘环相比？醛和酮。。。

722S紫外可见分光光度计测量吸光值的工作原理是怎样的？不同颜色对应多大的波长有什么规范吗？

我利用紫外可见吸光光度计读水的吸光值读出负值。我是先开机调零后，再利用空白的石英比色皿做对照调零显示的是254nm 0.000A，接着将纯化水做样品去读数，结果显示的是负数：-0.031 请问我的操作是不是有问题？还是我的方法有问题？ 有别的方法可以检测出纯水的吸光值吗？

我利用紫外可见吸光光度计读水的吸光值读出负值。我是先开机调零后，再利用空白的石英比色皿做对照调零，屏幕显示254nm 0.000A，接着将纯化水做样品去读数，结果显示的是负数：-0.031 请问我的操作是不是有问题？还是我的方法有问题？ 有别的方法可以检测出纯水的吸光值吗？

[font=微软雅黑][b]故障：吸光值信号上下摆动[/b][/font][font=微软雅黑]具体表现：当仪器波长固定在某个波长下时，吸光值信号上下摆动，特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。[/font][font=微软雅黑]原因：开关触点因长期氧化所致造成接触不良。[/font][font=微软雅黑]检查：用手加重力量按琴键时，吸光值随之变化。[/font][font=微软雅黑]处置：用金属活化剂清洗按键触点即可。[/font][font=微软雅黑][b]故障：噪声较大[/b][/font][font=微软雅黑]具体原因：样品室放入空白后做基线记忆，噪声较大，紫外区尤甚。[/font][font=微软雅黑]原因：比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈，使放大器超出了校正范围。[/font][font=微软雅黑]检查：将波长设定为250nm，先在不放任何物品的状态下调零，然后将空比色皿插入样品道一侧，此时吸光值应小于0.07Abs；如果大于此值，有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿；同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小。[/font][font=微软雅黑]处置：更换比色皿；更换空白液[/font]

各位好！有个问题想请教大家：具体情况如下：配制60mg/L 重铬酸钾溶液，用岛津UV2450(普通紫外分光光度计)测量235nm、257nm、313nm、350nm出的吸光值，然后计算吸光系数，结果符合药典要求。现在有一台超微量紫外分光光度计，加样量2ul左右，测试的吸光度比岛津偏低，计算出来的吸光系数自然就比药典要求低！现在有问题：1、超微量紫外分光光度计是否能够用重铬酸钾溶液衡量吸光准确度？2、是所有的紫外分光光度计（无论普通还是微量），只要在量程范围内，测试同一物质吸光度是否都要一致？个人理解是需要保持一致！3、超微量紫外分光光度计通常用于核酸和蛋白浓度测量，如果重铬酸钾吸光系数不准确，是否影响核酸和蛋白的测量结果？4、如何评价超微量紫外分光光度计的性能？5、测量蛋白溶液的浓度CV很好，但是测量重铬酸钾的吸光值总在变化（不同时间测试变化较大，偏差可大于5%），又是什么原因？虽然对于上面的问题，我认为只要是紫外分光光度计，原理一致，那么在量程内就应该保证结果一致！现在想听听大家的意见和看法！

各位大侠，小生最近在学习紫外光谱的基础知识，有一个问题看了很多教材还是不明白：在做紫外吸收的时候，溶剂极性对吸收的最大波长有影响，这个我是知道的，但是溶剂极性对吸光度的大小有影响吗？如果有影响，那么是什么机理呢？希望各位高手不吝赐教，谢谢了！[em0808]

（紫外/可见）吸光光度法讲座（1）吸光光度法是采用分光器（棱镜或光栅）获得纯度较高的紫外/可见单色光，基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。位于波长10～390nm之间的电磁辐射为紫外光，位于波长390～770nm之间的电磁辐射为可见光。各类电磁辐射的波长列于表1。表1 各类电磁辐射的波长‘辐 射－－－－－－－波长，λ/nm无线电波－－－－－－＞10（12）～10（9）【注：10的12次方到10的9次方】微 波－－－－－－－－－－109～106红外线a 、远红外－－－－－－－－106～3×104b、中红外－－－－－－－－3×104～3×103c 、近红外－－－－－－－－3×103～770可见光－－－－－－－－－－770～390紫外线－－－－－－－－－－390～10X射线－－－－－－－－－－－10～10－2【10的负2次方】γ射线－－－－－－－－－－－10－2～10－5吸光光度法是一种历史久远的分析手段，具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。它通常用于微量组分的测定，业已广泛应用于各个领域的分析测试。吸光光度法也称做分光光度法，但是分光光度法的概念有些含糊，分光光度是指仪器的功能，即仪器进行分光并用光度法测定，这类仪器包括了分光光度计与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法（AAS）仪。吸光光度法的本质是光的吸收，因此称吸光光度法比较合理，当然，称分子吸光光度法是最确切的。

（紫外/可见）吸光光度法讲座（1）吸光光度法是采用分光器（棱镜或光栅）获得纯度较高的紫外/可见单色光，基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。位于波长10～390nm之间的电磁辐射为紫外光，位于波长390～770nm之间的电磁辐射为可见光。各类电磁辐射的波长列于表1。 表1 各类电磁辐射的波长 辐 射 波长，λ/nm 无线电波 ＞1012～109 微 波 109～106 红外线 远红外 106～3×104 中红外 3×104～3×103 近红外 3×103～770 可见光 770～390 紫外线 390～10 X射线 10～10－2 γ射线 10－2～10－5 吸光光度法是一种历史久远的分析手段，具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。它通常用于微量组分的测定，业已广泛应用于各个领域的分析测试。 吸光光度法也称做分光光度法，但是分光光度法的概念有些含糊，分光光度是指仪器的功能，即仪器进行分光并用光度法测定，这类仪器包括了分光光度计与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法（AAS）仪。吸光光度法的本质是光的吸收，因此称吸光光度法比较合理，当然，称分子吸光光度法是最确切的。

求助各位大神，为什么我按中国药典做紫外的验证，杂散光，波长都符合规定，吸光度的准确度就不符合要求，应该怎么改进？称取60mg 基准重铬酸钾用0.005mol/L硫酸溶液定容至1000mL

请教大虾一个问题，我今天用紫外光分光光度计测吸光度得出了好几组负值，不知道正常不正常？出现问题的原因我怎么也找到!!

茶饮料需要用紫外－可见分光光度计测定不同波长下的吸光值，目的为何呀？最近一直在做，很想了解一下，还望各位大侠指教。多谢啦！

紫外的杂散光比如是0.01%T，它的线性范围最大能到多少？吸光度值呢？

今天对淀粉样进行400-900nm光谱扫描，所得结果和文献上基本一致，但在波长为530左右时吸光度骤然下降，一直持续到423nm之后又升高。换了多个样品都是一样的趋势，让后自己在可见光分光度计上重复测了这一段波长的吸光度发现紫外可见光分光光度计比可见光光度计在这一波段的吸光值低了0.035左右。个人觉得是紫外可见分光光度计没调试好，或者是仪器有问题，但不知道该如何处理。。。。。

用紫外光谱从200nm到310nm扫描样品，过一段时间后扫描同一样品，发现谱图整体下移，吸光度变小

不同型号的紫外分光光度计用滤光片检定均合格！但是检测样品溶液时不同型号的仪器的吸光度值相差很大。为什么？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005251138235092_9158_3442532_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/05/202005251138235922_5289_3442532_3.png[/img]

使用紫外分光光度计检测含量和溶出度前，都需要扫个最大吸收波长再测定吸光度吗？外标法和吸收系数法都要扫吗？有没有相关文件规定？

紫外测反应后油的吸光度，前几次的结果都是在360nm处出现峰值，且最大值不超过1.25。这次测吸光度曲线直升9.999，这是为什么呢？求大佬解答！[img=,137,927]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403041647232708_4539_6401627_3.png!w137x927.jpg[/img]

紫外可见分光光度计的吸光度范围是多少?在什么范围里最准确?

测定化合物的紫外吸收光谱时选择溶剂的原则是：（1） 样品在溶剂中溶解良好，能达到必要的浓度以得到吸光度适中的吸收曲线；（2） 溶剂不影响样品的吸收光谱，因此在测定的波长范围内溶剂应当是紫外透明的，即溶解本身没有吸收。透明范围的最短波长称为透明界限，测试时应根据溶剂的透明界限选择合适的溶剂；（3） 为了降低溶剂与溶质分子间的作用力，减少溶剂对吸收光谱的影响，应尽量采用低极性溶剂；（4） 溶剂挥发性小、不易燃、无毒性、价格便宜；（5） 所选用的溶剂应与待测组分不发生化学反应。

紫外可见分光光度计的吸光度范围是多少?在什么范围里最准确?

这两天在做紫外分光光计标准曲线，发现空白溶剂在280nm处吸光度是-0.462A，可去空白后，仪器界面就显示为-0.301A，这是什么原因？重做空白后又出现同样的结果，比色皿更换过后结果不变，是什么原因？？

总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1分光一般定量方法分光一般定量方法俺总结的一般定量方法有以下几个（不完整的请大家补充啊，当然有错误有意见大家也可以提出啊，哈哈），绝对法，标准对照法，吸收系数法，标准曲线法，解联立方程法等。1 绝对法以朗伯-比尔定律A=εbc为基础，且某一物质在一定波长下ε是一个常数，比色皿发光程也是已知的。因此，可用紫外-分光光度计在最大吸收波长处，测定样品溶液的吸光度A值，然后 由公式c=A/εb求得该样品溶液的含量或浓度2 标准对照法在相同条件下，在选定的波长处，分别测定标准溶液（浓度为C标）和样品溶液的吸光度值A标和A样然后按下面公式求得样品溶液的浓度或含量C样=（A样/A标）*C标3比吸收系数法不是很常用，就不说说，下面说说大家最常用的方法-标准曲线法4标准曲线法4.1 首先用基准物质配置一定浓度的标准储备溶液，然后再由储备溶液配置一系列标准溶液。俺个人经验：配置的过程中最好买国家标准物质，如果条件所限，那也没有办法；其次的最好能一次到位，别稀释次数太多，稀释次数多带来的误差和不确定度比较大；就是稀释也别超过1：20的稀释比例。4.2 在一定波长，最好是最大吸收波长下，测定每个标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液对于的浓度为横坐标，绘制标准曲线。俺个人经验：如果有未知最大吸收波长的组分，最好先做个光谱扫描；如果没有条件，可以查相关资料；如果没办法，那请联系俺，如有标准品，可以帮大家做一个。（哈哈，别让我们领导看见，以为我看私活呢，嘿嘿）还有，如果仪器不能绘制标准曲线，自己用EXCEL做也可以，如果仪器做了，自己又用EXCEL做了一个，会发现斜率和截距可能不太一样，因为两种方法涉及的算法不太一样。例如UVPROBE就采用双精度浮点数，给各位说句实话，其实我也不知道双精度浮点数具体什么意思，露怯了！！！4.3最后样品溶液按照标准曲线绘制程序测定的吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的含量或浓度。

紫外测水中阴离子洗涤剂的时候吸光度总是变动、 总是不断变小、、 是什么原因啊 ？？

GB/T 6682-2008规定，要达到一级水的要求，其中水的吸光度（254nm，1cm光程）要求小于等于0.001。现在我刚买了一台上海仪电分析的型号752N的紫外可见分光光度计，但它的读数最小只能是0.001，按我的想法，要满足要求，仪器应该可以直接读出譬如0.0009这样的值才是可以的吧！那我买的仪器应该是不能用于测一级水了吧！我的问题是：1、一般测出来的值，是多少？2、网上查了很多紫外可见分光光度计的吸光度测量范围，都是写-0.300A~3.999A，请问这种仪器能用于测量么？ 是否有的紫外可见分光光度计的吸光度测量范围会是-0.3000A~3.9999A的呢？3、我想买一台仪器用于测量，什么仪器能满足要求？请知道的朋友介绍一下！拜托了！感激不尽！