质谱中质量

p style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "中药发展几千年，如今已在世界各地广泛使用。近年来，随着人们用药安全意识的普遍提升，中药质量标准不一致、临床安全性及有效性的不稳定性和不确定性越来越受到被行业内外诟病。而各种分析技术的快速发展，极大的推动了中药质量控制的进步。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 479px height: 319px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201906/uepic/4911cd41-6d52-40c3-9a89-e2bfe9cd7bdd.jpg" title="微信截图_20190604225110.png" alt="微信截图_20190604225110.png" width="479" height="319" border="0" vspace="0"//pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "在上一篇文章a href="https://www.instrument.com.cn/news/20190531/486312.shtml" target="_self"《中药质量控制中的科学仪器——色谱、光谱篇》/a中，小编对中药质量控制中应用到的色谱和光谱技术及相关仪器进行了梳理盘点，本文中，将从核磁共振波谱技术、质谱及其联用技术和DNA分子标记技术等几种重要分析技术进行梳理。/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "strongspan style="color: rgb(255, 0, 0) "中药质量控制之核磁共振波谱/span/strong/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "核磁共振最主要的应用是通过物理方法测定化合物的分子结构，而中药有效性的物质基础研究是中药质量控制中的重要环节。利用核磁共振技术能够获得中药中有效成分的化学结构。/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "除单独利用核磁共振技术，HPLC-NMR联用技术也被应用到中药质量控制中。通过该联用技术，能够实现色谱分离和波谱结构鉴定连续进行，避免了传统分析方法中，先分离纯化再进行鉴定从而浪费时间及人力物力的问题。/ptable border="0" cellspacing="0" cellpadding="0" width="556" style="border-collapse:collapse"tbodytr style=" height:35px" class="firstRow"td width="100" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="35"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:15px font-family:宋体 color:black"技术类型/span/strongstrong/strong/p/tdtd width="140" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="35"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:15px font-family:宋体 color:black"技术原理/span/strongstrong/strong/p/tdtd width="100" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="35"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:15px font-family:宋体 color:black"应用方向/span/strongstrong/strong/p/tdtd width="215" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="35"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:15px font-family:宋体 color:black"应用举例/span/strongstrong/strong/p/td/trtr style=" height:144px"td width="100" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="144"p style="text-align:center vertical-align:middle"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/43.html" target="_self"span style="font-size: 15px font-family: 宋体, SimSun "NMR技术/span/a/p/tdtd width="140" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="144"p style="text-align:left vertical-align:middle"span style="font-family: 宋体, SimSun "span style="font-size: 15px font-family: 宋体 "通过化学位移值、谱峰多重性/span span style="font-family: 宋体, SimSun font-size: 15px "、偶合常数值、谱峰相对强度和在各种二维谱及多维谱中呈现的相关峰，提供分子中原子的连接方式 、空间的相对取向等定性的结构信息。/span/span/p/tdtd width="100" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="144"p style="text-align:left vertical-align:middle"span style="font-size:15px font-family:宋体"（span1/span）结合其他分析手段如质谱对化合物进行定性分析spanbr/ /span（span2/span）span1H /span核磁共振波谱适用于定量分析/span/p/tdtd width="215" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="144"p style="text-align:left vertical-align:middle"span style="font-size:15px font-family:宋体"（span1/span）崖藤生物碱的碳谱和氢谱全归属spanbr/ /span（span2/span）预测青蒿素分子的核磁共振碳谱和氢谱spanbr/ /span（span3/span）根据有无原小檗碱型生物碱的特征峰，鉴别黄连与黄连伪品/span/p/td/tr/tbody/tablep style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong中药质量控制之质谱及其联用技术/strong/span/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "质谱主要用于分析鉴定天然产物中提取的化合物，有机质谱能够给出有机化合物的分子量、分子式及碎片离子裂解方式和有机分子结构类型规律等信息。因质谱及其联用技术在物质化学结构鉴方面功能强大，被广泛应用于多种中药材的质量控制中。/ptable border="0" cellspacing="0" cellpadding="0" width="556" style="border-collapse:collapse"tbodytr style=" height:36px" class="firstRow"td width="96" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="36"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:13px font-family:宋体 color:black"联用技术类型/span/strongstrong/strong/p/tdtd width="236" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="36"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:13px font-family:宋体 color:black"技术简介/span/strongstrong/strong/p/tdtd width="224" nowrap="" style="background: rgb(220, 230, 241) border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="36"p style="text-align:center vertical-align:middle"strongspan style="font-size:13px font-family:宋体 color:black"应用举例/span/strongstrong/strong/p/td/trtr style=" height:124px"td width="96" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="124"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size: 13px font-family: 宋体, SimSun "质谱/span/p/tdtd width="236" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="124"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-family: 宋体, SimSun "span style="font-size: 13px font-family: 宋体 "质谱法可提供分子质量和结构的信息/span span style="font-family: 宋体, SimSun font-size: 13px "，定量测定可采用内标法或外标法/span/span/p/tdtd width="224" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="124"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"（span1/span）确定朝鲜淫羊藿分离组分的化学成分spanbr/ /span（span2/span）通过比较炮制乌头与乌头质谱智文峰的差异，作为乌头类中药是否经炮制的判断/span/p/td/trtr style=" height:95px"td width="96" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="95"p style="text-align:center vertical-align:middle"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/290.html" target="_self"span style="font-size:13px font-family:宋体"气质联用/span/a/p/tdtd width="236" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="95"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"具有高灵敏度和强抗干扰能力，是分析鉴定具有挥发性成分的首选/span/p/tdtd width="224" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="95"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"（span1/span）冬虫夏草中挥发性成分鉴定spanbr/ /span（span2/span）比较不同来源莪术中莪术醇等物质的含量/span/p/td/trtr style=" height:92px"td width="96" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="92"p style="text-align:center vertical-align:middle"a href="https://www.instrument.com.cn/zc/51.html" target="_self"span style="font-size:13px font-family:宋体"液质联用/span/a/p/tdtd width="236" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="92"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"同事进行多成分检测，可通过保留时间、分子量和碎片等信息用于目标化合物鉴别/span/p/tdtd width="224" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="92"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"（span1)/span判断东北红豆杉及其伤愈组织粗提物中紫杉醇色谱峰归属spanbr/ /span（span2/span）鉴定八味地黄方与人参汤共煎时产生的毒性物质/span/p/td/trtr style=" height:56px"td width="96" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="56"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"毛细管电泳span-/span质朴联用/span/p/tdtd width="236" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="56"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"多数毛细管电泳操作模式可与质谱联用。选择接口时/span span style="font-size: 13px "，span style="font-size: 13px font-family: 宋体, SimSun "应注意毛细管电泳的低流速特点并使用挥发性缓冲液/span/span/p/tdtd width="224" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="56"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"粉防己甲醇提取物中的生物碱分离鉴定/span/p/td/trtr style=" height:81px"td width="96" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="81"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"超临界流体色谱/spanspan style="font-size:13px font-family:' Times New Roman' ,serif"-/spanspan style="font-size: 13px font-family: 宋体, SimSun "质谱联用/span/p/tdtd width="236" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="81"p style=" vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family:宋体"主要采用大气压化学离子化或电喷雾离子化接口。色谱流出物通过一个位于柱子和离子源之间的加热限/spanspan style="font-size: 13px font-family: 宋体, SimSun "流器转变为气态，进入质谱仪分析/span/p/tdtd width="224" nowrap="" style="border: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 5px " height="81"p style="text-align:center vertical-align:middle"span style="font-size:13px font-family: 宋体"//span/p/td/tr/tbody/tablep style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "span style="color: rgb(255, 0, 0) "strong中药质量控制之DNA分子标记技术/strong/span/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "DNA分子标记技术可用来比较药材间DNA分子遗传多样性差异，从而鉴别药材基源、确定学明的方法。DNA指纹图谱技术在药材鉴别、GAP实施、道地药材研究、遗传育种和种植资源研究以及中成药质量控制等领域有重要价值和广阔的应用前景。/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "目前已有研究人员利用DNA分子标记技术对不同地区的三七进行DNA指纹图谱的鉴别研究，根据其遗传特征的不同，鉴别不同地域的三七药材。此外，有研究人员利用此技术建立起了中药材鹿鞭的分子分类学鉴定试剂盒。/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "除上述技术方法外，近年来有更多先进的分析方法也在被不断被发展应用，如超高效液相色谱、二维液相色谱、联合在线鉴定技术等等，在中药材真伪鉴别、成分分离鉴定、毒性物质检出等等方面，发挥重大作用。/pp style="margin-top: 10px line-height: 1.5em text-indent: 2em "随着科学技术不断提升，相应的仪器设备更加精密、高效，色谱、质谱、光谱、核磁共振波谱及DNA分子标记等多种分离、分析、检测技术共同推动中药质量控制的发展，确保中药更好的履行维护人类健康的使命。/pp style="margin-top: 10px text-indent: 2em line-height: normal "span style="font-size: 14px "注：本文部分内容引自/span/pp style="margin-top: 10px text-indent: 2em line-height: normal "span style="font-size: 14px "1. 蒋庆峰, 金松子, 蔡振华,等. 现代分析技术在中药质量控制中的应用[J]. 现代仪器与医疗, 2007, 13(3):1-8./span/pp style="margin-top: 10px text-indent: 2em line-height: normal "span style="font-size: 14px "2. 马艳芹, 张蓉蓉, 房吉祥, et al. 现代分析技术在中药质量控制中的应用进展[J]. 首都医药, 2013(16):14-15./span/p

大家好，本周为大家分享一篇发表在Journal of the Ameican Society for Mass Spectrometry上的文章，Top-Down Characterization and Intact Mass Quantitation of a Monoclonal Antibody Drug from Serum by Use of a Quadrupole TOF MS System Equipped with Electron-Activated Dissociation1，通讯作者是来自美国宾州葛兰素史克的John F. Kellie博士。　　最近，SCIEX开发了一种新的Q-TOF质谱系统，该系统具有允许调节的电子能量，能够将快速ECD作为电子激活解离(EAD)技术的一种操作模式，并能实现灵敏的大蛋白检测和定量。此外，通过采用一种新的trap-and-release特性，促进TOF加速器(Zeno阱)中心离子的空间质量聚焦，提高了碎片离子检测的占空比和信噪比(S/N)。本研究使用这个新型质谱仪器，对从血清中提取的一种生物治疗性单克隆抗体(mAb)进行了LC-MS分析，并进行了完整质量的检测、定量和亚单位表征实验。　　样品处理和数据分析的流程如图1所示。简单来说，将研究的治疗性单抗药物注射到恒河猴中，使用自动免疫亲和试剂盒从猴血清中免疫捕获抗体。完整的单抗和还原的轻、重链进行LC-MS分析，并选择重链和轻链进行MS/MS分析和片段离子测定。在SCIEX OS软件中使用完整单抗和还原轻链的MS1数据进行定量。通过ProteoWizard文件转换处理亚基的片段离子数据，然后使用MASH软件套件中的THRASH脱同位素算法进行处理。最后将去卷积质量列表导入ProSight PC进行表征。　　图1. 从血清中免疫捕获GSKmAb的LC-MS样品分析及数据处理流程。治疗性单抗轻链的Top-down MS示例数据如图2所示。抗体亚基达到电荷态分辨率 ，通过去卷积计算平均质量为23197 Da。对于碎片离子，实现了同位素分辨率，从中可以确定碎片离子质量(图2C)。在图2B中，使用SCIEX的内部研究软件，MS/MS谱显示了可能匹配的片段的叠加。图2C展示了去卷积后的片段离子的代表性数据。为了确定匹配的片段离子，使用THRASH脱同位素算法生成了高达30000 Da的精确质量。　　　　图2. 从血清中免疫捕获和TCEP还原后GSKmAb轻链的表征分析示例。该Q-TOF仪器同时配备了EAD和CID功能，虽然两种解离方式可以在一次注射中进行，但作者进行了两次单独的注射。一次注射用于ECD MS/MS，第二次注射用于CID MS/MS。亚基的MS/MS覆盖率如图3A所示。ECD和CID结合时，轻链有49%的氨基酸残基被裂解。对于重链(图3B)，获得了21%的残基覆盖率。　　　　图3. 使用CID和EAD的组合对(A)轻链和(B)重链的表征结果。在这里，b-和y离子用蓝色钝角表示，c-和z离子用红色直角表示。接着，作者介绍了使用提取离子色谱图累积面积和去卷积质谱图累积面积两种方式的完整抗体定量研究。这里，将不同水平的mAb作为标准物质添加到血清中，建立2 ~ 50 μg/mL范围内的浓度与测定面积的线性关系。选取了两个电荷态的离子提取色谱和去卷积质量峰进行面积的累积(图4A, B)。MS数据显示，定量下限时(LLOQ=2 μg/mL)，观察到完整的单抗电荷态分布的S/N约为4。对于定量上限(HLOQ=50μg/mL)，观察到的S/N约为50(图4C, D)。在这里，校准曲线显示出良好的线性响应(所有数据的r2≥ 0.97)，完整单抗定量的准确度和精密度值在15%以内。　　　　图4. 完整单抗定量示例数据，使用基于XICs和去卷积数据的两种不同的定量方法。　　本文介绍了自上而下的数据处理工作流程，这对于从MS/MS数据中获取信息至关重要。在XIC或去卷积质量水平上的生物分子定量也得到了证明，并表明这两种方法都足以从血清中测定单抗浓度。最后，作者预期这类能够实现完整蛋白质表征的多功能质谱系统将被更广泛地用于生物样本分析。　　撰稿：夏淑君　　编辑：李惠琳　　文章引用：Top-Down Characterization and Intact Mass Quantitation of a Monoclonal Antibody Drug from Serum by Use of a Quadrupole TOF MS System Equipped with Electron-Activated Dissociation

各有关单位及专家：根据《中华人民共和国标准法》文件精神，由广西大学、广西西大检测有限公司、广西亚热带作物研究所、广西壮族自治区产品质量检验研究院、广西思浦林科技有限公司共同起草的《葡萄植株中7种植物激素含量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》征求意见稿已完成，依据《团体标准管理规定》和《广西农产品质量安全服务协会团体标准管理办法》的有关规定，现向社会公开征求意见，并于2023年11月30日将书面意见以文件形式反馈到广西农产品质量安全服务协会，谢谢！联系人：高专电话：15177796006邮箱：664987261@qq.com广西农产品质量安全服务协会2023年10月30日广西团体标准《葡萄植株中7种植物激素含量的测定 液相色谱-质谱质谱法》征求意见稿编制说明.pdf广西团体标准《葡萄植株中7种植物激素含量的测定 液相色谱-质谱质谱法》征求意见稿文本.pdf广西团体标准《葡萄植株中7种植物激素含量的测定 液相色谱-质谱质谱法》征求意见表.pdf