色谱峰容量

[b][color=#444444]一根极性柱对极性化合物的容量一定大于对非极性化合物的容量；[/color][color=#444444]厚膜和大口径的色谱柱，其相对柱常量也会较高；[/color][color=#444444]而溶质的保留度增加会使柱容量降低；[/color][color=#444444]如果两种溶质极性类似，后出峰的化合物更容易发生超载现象。[/color][color=#444444]其中，第三句中的保留度指的是什么？[/color][color=#444444]还有第四句为什么后出峰的更容易发生超载现象？[/color][/b]

[list][*]在色谱仪分析检测过程中，我们会接触到这样两个概念：分配系数和容量因子。然而有绝大部分色谱使用者对这两个概念并不十分了解，今天咱们就说一说什么是色谱柱的分配系数和容量因子？二者是什么关系？[/list][size=14px]分配系数和容量因子一定程度上展现色谱柱的柱效，了解影响色谱柱分离度的因素，有助于有效地使用和保养色谱柱，提高色谱柱分离度和色谱仪检测灵敏度。[/size][size=14px][/size][size=14px]分配系数是指在一定温度下，待测样品在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的浓度之比。分配系数与组分、流动相和固定相的温度、压力有关。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]中，固定相确定后，分配系数主要受流动相的性质影响。在试验中主要靠调整流动相的组成配比及pH值，以获得组分间的分配系数差异及适宜的保留时间，达到分离的目的。[/size][size=14px][/size][size=14px]在流动相、固定相、温度和压力一定条件下，样品浓度很低时，分配系数只取决于组分的性质，而与浓度无关。在大多情况下，分配系数随着浓度的增大而减小，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度增大，分配系数也增大，这时色谱峰为前延峰。因此，只有尽可能减少进样量，使组分在柱内浓度降低，分配系数恒定时，才能获得正常峰。[/size][size=14px]在同一色谱条件下，样品中分配系数值大的组分在固定相中滞留时间长，后流出色谱柱；分配系数值小的组分则滞留时间短，先流出色谱柱。混合物中各组分的分配系数相差越大，越容易分离，因此混合物中各组分的分配系数不同是色谱分离的前提。[/size][size=14px][/size][b][size=14px]分配系数K和分配比k的关系：[/size][/b][size=14px][/size][b][size=14px]K=kβ[/size][/b][size=14px]β为相比率，是反映各种色谱柱柱形特点的又一个参数，β=Vm/Vs，Vm为流动相的体积，即死时间(t0)与流动相流速的乘积，Vs为色谱柱中固定相的体积。对填充柱其β值一般为6~35，对毛细管其β值为60~600。[/size][size=14px][/size][size=14px]容量因子是待测样品在两相间达到分配平衡时，在固定相与流动相中的量之比。因此容量因子也称质量分配系数。容量因子的物理意义：表示一个组分在固定相中停留的时间是不保留组分保留时间的倍数。分配系数为0时，化合物全部存在于流动相中，在固定相中不保留，停留的时间为0；分配系数越大，说明固定相对此组分的容量越大，出柱慢，保留时间越长。[/size][size=14px][/size][b][size=14px]分配系数K，容量因子k与保留时间之间有如下关系：[/size][/b][size=14px][/size][b][size=14px]k=t'R/t0，t'R=tR-t0[/size][/b][size=14px]上式说明容量因子的物理意义：表示一个组分在固定相中停留的时间(t'R)是不保留组分保留时间(t0)的几倍。[/size][size=14px]k=0时，化合物全部存在于流动相中，在固定相中不保留，t'R=0；k越大，说明固定相对此组分的容量越大，出柱慢，保留时间越长。[/size][size=14px][/size][size=14px]容量因子与分配系数的不同点是：k取决于组分、流动相、固定相的性质及温度，而与体积Vs、Vm无关 K除了与性质及温度有关外，还与Vs、Vm有关。由于t'R、t0较Vs、Vm易于测定，所以容量因子比分配系数应用更广泛。[/size]

如题：离子色谱柱的柱容量有高、中、低之分，一个分析方法中所涉及的色谱柱，其柱容量是如何选择的啊，可以随意进行选用吗

我是新手，向大家请教个问题：1. 怎么把样品浓度控制在色谱柱容量内呀？2. 如果超过色谱柱容量会出现什么结果？会损坏色谱柱吗？结果不准确吗？谢谢各位前辈了！

容量因子对色谱柱选择的影响大吗？有什么样的影响呢？

最近单位招标[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]，想了解戴安、瑞士万通、岛津分离柱及保护柱的容量，同时想了解各企业抑制器的抑制容量是多少，分阴阳离子，有知道的麻烦告知，谢谢了！！！

如题，高效液相色谱柱柱容量是多少？

请问应用液相色谱时，怎么将容量因子（K）显示在报告里？先谢谢了

[align=center][font=DengXian]色谱峰前伸峰的原因[/font][/align][font=DengXian]前伸峰一般是由于色谱柱过载。当一种或多种化合物的进样量超过色谱柱固定相容量时，可能发生这种情况。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]膜越薄，色谱柱中保留的每种化合物就越少。这涉及到进样体积和进样中每个峰的化合物浓度。通过减少进样量、分流样品或进样浓度较低的样品，可减小进样体积。另外色谱柱和化合物不匹配也可能会引起前伸峰。有些化合物的特殊保留性质也会引起峰异常。[/font]

请问[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的定量进样环最大有多大容量？

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=95263]高效液相色谱柱柱容量[/url]

动态色谱法　　动态色谱法是将待测粉体样品装在U型的样品管内，使含有一定比例吸附质的混合气体流过样品，根据吸附前后气体浓度变化来确定被测样品对吸附质分子（N2）的吸附量；静态法根据确定吸附吸附量方法的不同分为重量法和容量法；重量法是根据吸附前后样品重量变化来确定被测样品对吸附质分子（N2）的吸附量，由于分辨率低、准确度差、对设备要求很高等缺陷已很少使用；容量法是将待测粉体样品装在一定体积的一段封闭的试管状样品管内，向样品管内注入一定压力的吸附质气体，根据吸附前后的压力或重量变化来确定被测样品对吸附质分子（N2）的吸附量；　 　　动态色谱法和静态法的目的都是确定吸附质气体的吸附量。吸附质气体的吸附量确定后，就可以由该吸附质分子的吸附量来计算待测粉体的比表面了。　 　　由吸附量来计算比表面的理论很多，如朗格缪尔吸附理论、BET吸附理论、统计吸附层厚度法吸附理论等。其中BET理论在比表面计算方面在大多数情况下与实际值吻合较好，被比较广泛的应用于比表面测试，通过BET理论计算得到的比表面又叫BET比表面。统计吸附层厚度法主要用于计算外比表面； 　　动态色谱法仪器中有种常用的原理有固体标样参比法和BET多点法；动态色谱法之固体标样参比法　　固体标样参比法也叫直接对比法，国外此种方法的仪器叫做直读比表面仪。该方法测试的原理是用已知比表面的标准样品作为参照，来确定未知待测样品相对标准样品的吸附量，从而通过比例运算求得待测样品比表面积。以使用氮吸附BET比表面标准样品为例，该方法的依据是有2个：一、BET理论的假设之一在吸附一层之后的吸附过程中的能量变化相当于吸附质分子液化热，也就是和粉体本身无关；二、在相同氮气分压（5%-30%）、相同液氮温度条件下，吸附层厚度一致；这就是以此种简单的方法所得出的比表面值与BET多点法得到的值一致性较好的原因；动态色谱法之BET多点法　　BET多点法为国标比表面测试方法，其原理是求出不同分压下待测样品对氮气的绝对吸附量，通过BET理论计算出单层吸附量，从而求出比表面积；其理论认可度相对固体标样参比法高，但实际使用中，由于测试过程相对复杂，耗时长，使得测试结果重复性、稳定性、测试效率相对固体标样参比法都不具有优势，这是也是固体标样参比法的重复性标称值比BET多点法高的原因； 　　动态色谱法和静态容量法是目前常用的主要的比表面测试方法。两种方法比较而言动，态色谱法比较适合测试快速比表面积测试和中小吸附量的小比表面积样品（对于中大吸附量样品，静态法和动态法都可以定量的很准确），静态容量法比较适合孔径及比表面测试。虽然静态法具有比表面测试和孔径测试的功能，但静态法由于样品真空处理耗时较长，吸附平衡过程较慢、易受外界环境影响等，使得测试效率相对动态色谱法的快速直读法低，对小比表面积样品测试结果稳定性也较动态色谱低，所以静态法在比表面测试的分辨率、稳定性方面，相对动态色谱并没有优势；在BET多点法比表面分析方面，静态法无需液氮杯升降来吸附脱附，所以相对动态法省时；静态法相对于动态色谱法由于氮气分压可以很容易的控制到接近1，所以比较适合做孔径分析。而动态色谱法由于是通过浓度变化来测试吸附量，当浓度为1时的情况下吸附前后将没有浓度变化，使得孔径测试受限。静态容量法　　在低温（液氮浴）条件下，向样品管内通入一定量的吸附质气体（N2），通过控制样品管中的平衡压力直接测得吸附分压，通过气体状态方程得到该分压点的吸附量； 　　通过逐渐投入吸附质气体增大吸附平衡压力，得到吸附等温线；通过逐渐抽出吸附质气体降低吸附平衡压力，得到脱附等温线；相对动态法，无需载气（He），无需液氮杯反复升降； 　　由于待测样品是在固定容积的样品管中，吸附质相对动态色谱法不流动，故叫静态容量法； 比表面积测试相关仪器简介　　动态法比表面积仪测试比表面积精度影响因素 　　对具有风热助脱、检测器恒温、低温冷阱的动态法仪器，其相对不具有该装置的动态法比表面仪，其精度得到明显提高；动态法比表面仪，与其它分析仪器类似，其精度和灵敏度大小主要取决于信噪比；也就是要提高精度和灵敏度，就需要从提高信号强度、抑制背景噪声、消除外界干扰三方面来控制。增加信号强度的方法一般有增加称样量、增加检测器电流，但增加检测器电流一般噪声也会同时增大，所以检测器电流会有个最佳范围；所以在抑制噪声、消除外界干扰方面可做的工作就比较多了；其源于仪器自身的误差来源主要有：检测器温漂，信号锐度；以检测器恒温装置来抑制温漂，风热助脱装置可以提高信号锐度，其对于比表面1m2/g的样品0.5g对氮气的吸附量在分压0.2左右时脱附峰面积与背景可以保证在2%以内的误差； 　　所以对于小比表面样品，对具有风热助脱、检测器恒温、低温冷阱的动态法仪器，其灵敏度和分辨率的优势就体现出来了；但对中大比表面样品，由于信号强，普通动态法比表面积仪和静态法比表面积仪都可以保证精度；这点就像万分之一分析天平和千分之一天平的区别； 　　静态法比表面积仪测试小比表面积样品精度分析 　　以比表面积1m2/g的样品为例，该样品0.5g对氮气的吸附量在BET分压范围内在标况下约0.1ml，在测试过程中的吸附环境液氮温度下的体积约0.03ml；样品管装样部分的剩余体积（也就是背景体积）约在3-5ml左右，要在3-5ml的样品管体积中准确定量出0.03ml的总吸附量且保证精度达到3%以内，可以算出要求压力传感器的精度要达到0.03%以上；但目前进口最好的压力传感器的精度只有0.1%，而且通常比表面及孔径分析仪用的压力传感器精度为0.15%，也就是说目前最高精度的压力传感器，即使温度场理想测定，液氮面理想恒定，环境温度理想准确条件下，对吸附量确定量的不确定度也只能达到0.003ml，即不确定度达到10%；若对于比表面再小或堆积密度小也就是装样量也难以很大的样品，其准确度就可想而知了。 但对于中大比表面样品，一般吸附量不会那么微小，静态法的精度很容易保证在2%甚至1%以内便不是问题； 　　所以在小比表面样品的测试方面，静态法仪器测试的误差相对高精度的动态法仪器的误差大；静态法只能通过增加装样量来降低误差，常见的是静态一般都会为小比表面积样品配备大容量样品管，但由于背景体积（吸附腔体积）也随之增大，所以准确度提高也是有限的；这点是采用静态法仪器测试比表面积应考虑的因素。 　　比表面积计算公式 　　　参考国标GB/T24533-2009　 　　放到气体体系的样品，其物质表面在低温下将发生物理吸附。当吸附达到平衡时，测量平衡吸附压力和吸附的气体流量，根据BET方程式（1）求出试样单分子层吸附量，从而计算出试样的比表面积。 　　（P/P0 ）/ V(1-P/P0) = (C-1 )/( VmC ) × P/P0 + 1/( VmC )

[color=#444444]我最近在做顶空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法检测溶残苯和2-甲基四氢呋喃时，用的1,4-二氧六环做内标，配制方法如下：量取20μl内标物溶DMSO定容与100ml容量瓶中，作为内标物贮备液。从工作对照液贮备液移取1.0ml到50ml容量瓶中，加5.0ml内标物贮备液，定容。称取约2g样品于10ml容量瓶中，加1.0ml内标物贮备液，定容，平行六份。在计算结果时发现理论上浓度相同的内标物在工作对照液中的峰面积平均约为2700，RSD小于2.0%，而在样品溶液中的平均峰面积却约为3300，RSD小于2.0%。请问这是什么原因啊？[/color]

1 色谱柱几乎没人提到色谱柱的好坏也是前伸峰产生的一个原因。我曾发现当色谱柱损坏、柱头塌陷，管内填料流失，形成短路时，会形成明显的前伸峰，这时只有一个办法，更换色谱柱。其实形成这种情况很可能使用了不当的流动相，或者长时间不注意保护色谱柱造成的。我在使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的糖柱(Ionpac PA10)，柱子出问题后，也出现这种前伸峰，这时峰不拖尾，用高浓度的再生液再生，前伸峰有改善，但不明显。这时不管色谱柱正做还是反做都是一样的。造成这种原因应该是，由于糖柱的特性，其对阴离子的保留特性非常强，样品中各种强保留离子会牢牢结合在色谱柱的树脂上，使得色谱柱的交换性能降低，容量下降，在色谱柱中形成一些死交换的断路，当被分离物质经过时，不被交换而直接通过，旁边的物质因交换而延迟。2 进样量与溶剂极性如果进样量超过了柱容量，样品不被交换而直接通过形成前伸峰，这时只有减少进样量，才能得到良好的峰。另一种情况是，进了过多的强洗脱溶剂，相当于强流动相的洗脱作用，但缓慢被后来的流动相稀释，这时会出现分离物的前伸峰，选用与流动相合拍的体系是解决的最佳方法。对于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]。可以调节分流比达到一个比较好参数，从而有效降低进样量。3 pH的影响在使用离子排斥、离子抑制时，这时被测样品在分离体系中，一般是酸性，是处于弱电离的状态，保留时间相对较强。如果进样样品的pH值与体系相差很大，在分离的过程中无法快速平衡，如较强的碱性，这时分析的局部过程会出现pH颠倒，被分离物部分离子化而快速出峰，形成前伸峰。减少进样量，调整pH是可行的方案。同样，在碱性体系中，也会出现类似这样的情况。4 盐浓度的影响有一篇文献提到，当用高浓度的盐溶液淋洗时，盐浓度太大对分离的负面影响增加，例如普洛托品碱，提高盐浓度会使柱效降低，峰不对称因子随盐浓度增大而变小，由对称的高斯峰变为前伸峰，可解释为缓冲液的盐抑制效应对峰形不利。5 温度在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]中，如果进样器或柱温太低，会很容易产生前伸峰，提高柱温和检测器的温度可有效解决前伸峰的出现。

色谱分析中标液稀释后，是放在容量瓶内，还是直接移入样品瓶中？

如题：两根相同的色谱柱串联，是不是有如下效果？1 增加分离效果2 增加柱容量3 系统压力上升求解。。。。。

公司大概有40个[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法的项目，都要用微量注射器，也不可能每个项目都配，还有容量瓶买多少ml的合适呢？求大神帮忙

[color=#444444]做液相色谱药物分析时，第一次进样在一个位置出现了一未知杂峰，随后将原进样瓶溶液和原容量瓶溶液又进了一次（原仪器，原色谱柱），结果在那个位置又没峰了，说明配的溶液没问题，这是仪器或色谱柱有什么问题吗？各路大神有没有遇到过类似情况，怎么解决和预防这种情况？[/color]

我们在此讨论的峰形异变是指在色谱分析方法确定后，与曾经记录的已知色谱图比较时，出现某些色谱峰形的偏离畸变或多余峰。或者说，对于一已经设立好的色谱分析方法，由于不要求或出于无奈时有些峰分离不开、拖尾或峰形不对称等并不影响方法的实施情况，不属于上述因仪器故障、经验不足或操作失误造成的峰形异变。否则需要重新审定或修改原来的分析方法。另外，还应指出：由于无乱安装使用没有评价过的色谱柱可能出现的峰形拖尾，分离不好或峰形畸变，也不属于讨论内容。显然叫一个普通色谱分析工作者，在常规工作条件下去判断色谱柱的优劣，要求似乎高了一些。在怀疑峰形异变寻找可能原因、排除方法之前最好先做以下工作：[b]仔细核查操作条件，与分析方法要求是否一致；和当初分析所存的标准色谱图对照，判断是否真出了问题；逐项仔细观察仪器或设备工作状态，看有无操作失误而引起的出峰失常；然后在依据以下15种异常峰形分析可能原因与排除方法。[color=#0070c0][/color][b]1.台阶峰：[/b][/b](1)TCD热丝被样品中所含卤素、氧、硫等元素腐蚀；(2)气体流量突变如：注射垫突然漏气，气路受阻等；(3)记录色谱峰装置故障如：拉线松；[b][color=#0070c0][/color][b]2.负峰：[/b][/b](1)TCD用氮做载气，由于待测组分在N[sub]2[/sub]中浓度不同，热传导值呈现非线性而可能出现负峰,有时可以通过改变载 气流量或进样量克服；(2)操作ECD时进样量过大而出负峰，这是由于工作原理由电子捕获转变为电离检测，此时灵敏度还会大大降低；(3)操作FID，低电离效率的溶剂(如，CS[sub]2[/sub])或杂质出现，使原基流较高的输出基线减小而显示为负峰；(4)操作FID，在无极化电压，样品量较大可能出现负峰；(5)操纵NPD、FPD时气流比不合适，溶剂或某些组分会出现负峰；[b][color=#0070c0][/color][b]3.“N”或 “W”峰：[/b][/b](1)TCD操作，用N[sub]2[/sub]作载气由于热传导率非线性引起；(2)FID操作时，样品溶剂电离效率低(如，CS[sub]2[/sub])，或气流比欠佳时；(3)ECD操作时，由于检测器被污染，溶剂峰或待测组分含量较高，或脉冲电源有毛病；[b][color=#0070c0][/color][b]4.舌头峰(前延峰)：[/b][/b](1)汽化温度偏低 (2)载气流量小：(3)进样量大，汽化时间长 (4)汽化室被污染，样品有吸附效应 (5)样品在柱头有冷凝或色谱柱被污染 (6)进样技术差(挥发性组分的进样速度太慢) (7)峰前出现了“鬼”峰。[b][color=#0070c0][/color][b]5.拖尾峰：[/b][/b](1)色谱柱安装不合格，样品不能以“塞子”形进入色谱柱，柱与检测器安装的死体积太大 (2)样品未能注射入柱头中(柱头进样方式) (3)汽化管没有安装好或破损，样品只能脱尾进入色谱柱 (4)化室的温度低或偏高 (5)载气流量偏低 (6)进样量大 (7)载气系统(如注射垫处)有漏气 (8)进样器(汽化室)，被样品中高沸点杂质或注射垫残渣污染 (9)色谱柱被污染至使被分析组分和高沸点污染物作用 (10)补充气未开或偏低 (11)色谱柱温度偏低或失效 (12)甲烷化Ni催化剂失效 (13)进样技术差(如速度不合适) (14)正好有干扰峰(鬼峰)出现(如误用被污染的注射针) (15)无极化电压(FID)，此时伴随灵敏度偏低 (16)样品前处理有毛病 [b][color=#0070c0][/color][b]6.出峰后基线下移：[/b][/b](1)样品量大，特别是溶剂改变了工作状态 (2)FID被污染状况发生改变，或气流比发生变化 (3)系统出现漏气，或出现堵塞 (4)色谱柱被污染 (5)样品处理不当，如：样品中有些物质和固定相发生作用 [b][color=#0070c0][/color][b]7.程序升温时基流增加(漂移大)，噪声增加：[/b][/b](8)色谱柱需重新老化或失效 (9)新换载气纯度欠佳 (10)过滤器失效 (11)样品前处理不当，如：杂质干扰物太多 (12)灵敏度太高。(13)数据处理装置的判峰参数设置不合理。[b][color=#0070c0][/color][b]8.圆顶宽峰：[/b][/b](17)样品量大起出了色谱柱容量 (18)汽化温度低 (19)色谱柱没按要求安装 (20)检测器工作状态不对，如载气太小、没开补充气 (21)数据处理装置的判峰参数(半峰宽)设置偏大 [b][color=#0070c0][/color][b]9.平顶峰(未到满量程)：[/b][/b](1)样品量大，放大器量程高，衰减大，信号输出饱和 (2)检测器已工作在饱和区 (3)数据处理输入信号极性接错，或零点失调 [b]10.基线出现波浪状峰：[/b](1)高灵敏度操作仪器未稳定之前 (2)操作TCD、ECD时，柱箱或检测器箱温度周期变化 (3)环境温度对仪器控温影响 (4)电压不稳，对柱温控制精度影响 (5)过温保护设置低于控制温度 (6)压力(流量)调节阀失调，周期变化 [b][color=#0070c0][/color][b]11.原来能分开的峰分不开：[/b][/b](1)色谱柱安装不合要求 (2)色谱柱被污染，需重新活化 (3)色谱柱寿命已到，需更换 (3)新更换的气源，纯度不佳 (4)滤器失效，重新老化或更换 (5)色谱柱温度和载气流量需要微调优化(色谱分析一般允许) (6)检测器工作状态变化(如ECD漏气、FID气流比欠佳) (7)汽化室被污染，注射垫漏气 (8)样品处理不当，杂质干扰物太多 (9)样技术太差 (10)进样量超出了色谱柱容量 (11)数据处理的判峰参数，半峰宽或斜率设置不合理 (12)放大器量程或衰减设置失误 [b][color=#0070c0][/color][b]12.直角峰：[/b][/b](1)仪器输出负信号超出了数据处理的范围 (2)数据处理装置零点未校正，或量程设置太大无法判断基线位置 (3)数据处理装置输入信号极性接反，零点设置不对 [b][color=#0070c0][/color][b]13.带毛刺峰：[/b][/b](1)仪器工作不稳定，噪声大于要求 (2)数据处理装置的判峰参数，半峰宽和斜率设置太小 (3)极化电压(FID)不稳 [b][color=#0070c0][/color][b]14.操作条件未变，原来能判别的峰不见了：[/b][/b](1)色谱柱被污染或失效 (2)气路系统被污染(如气源纯度低，过滤器失效) (3)注射垫漏气 (4)注射针密封性差 (5)数据处理的判峰参数，如：半峰宽和斜率设置偏大 (6)进样方法不对 [b][color=#0070c0][/color][b]15.“鬼峰”(怪峰，多余峰，记忆峰)：[/b][/b](1)上一次进样的高沸点杂质峰自然流出 (2)载气不纯过滤器失效使低沸点的污染物冷凝在色谱柱头，程序升温时正常流出 (3)注射垫未经老化或无隔垫清洗而出的污染峰 (4)汽化温度太高或严重污染至使样品某些组分分解 (5)样品某些组分与被污染固定相产生了作用 (6)色谱柱温度太高固定相分解 (7)使用了被污染的注射针( 本身不合格，手摸或进过易污染的样品) (8)样品予处理不完善或用错溶剂 (9)样品中有空气 (10)TCD、ECD等密封性差(漏气) (11)电源不稳，对控温或放大器有不良影响(12)色谱柱堵塞物使用不当，如玻璃棉未按要求进行处理。来源：实验与分析

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]做废气中氟离子有氯离子，打电话问了氟的标准溶液中没有氯离子，一直怀疑是不是玻璃器皿没洗干净，用去离子水泡洗后容量瓶和移液管都做了实验氯峰高0.038、面积0.007。想问问各位大佬是哪里出了问题，

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法测定样品中的DHA和EPA不出峰仪器安捷伦7890B。检测器FID。色谱柱：安捷伦HP-5MS UI柱子是新的所以有老化程序。40℃开始不保持。然后1℃/min升温到250℃。保持3小时然后1℃/min升温到280℃。保持3小时。然后以1℃/min降到40℃，结束。样品配置：称取DHA甲酯55mg，DPA5mg。至10ml容量瓶中。用2,6-二叔丁基对甲酚的三甲基戊烷溶液（50mg/l）定容。PS：很久之前的的同事也做过。条件同上。但是他出峰。我就没出峰。所以求助各位大佬看看是什么原因。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210281050043965_1425_5607773_3.png[/img]

液相色谱中死时间几种测定方法1：有响应的溶剂出峰时间为死时间。2：进样后的阀切换峰，对应的时间为死时间。3：工作站中输入色谱柱的空余体积或孔隙率，自动计算。（对于C18柱，也可以用硝酸钠或硫脲等在色谱柱上完全不保留组分的出峰时间来测定死时间。）影响分离度的因素有三个因素控制两个色谱峰之间的分离度——容量因子，选择性，柱效容量因子反映样品分子和固定相及流动相之间的作用力，选择性是说明色谱系统区分两个或多个色谱峰的能力，柱效与色谱峰的宽度有关，很明显要达到一定的分离度，宽色谱峰要比窄色谱峰需要更大的分离度选择性。理论塔板数越高柱效越高，柱效的高低受柱内效应和柱外效应的影响。选择性是固定相区分两个被分离样品组分的能力，用容量因子之比进行计算，它是两个被分离色谱峰顶点距离的量度，如果选择性是Ⅰ，则两个组分完全不能分离。选择性数值越高，分离越好。由于选择性取决于被分离物的物理和化学结构，流动相和固定相，流动相组成，PH，色谱柱温度，流动相添加剂，因此，尽量优化实验条件提高选择性以降低成本。容量因子为物质的特性，当分析条件一定时，容量因子为固定值。溶剂的洗脱强度与其极性有关：反相色谱：溶剂的极性越强，洗脱强度越弱。正相色谱：溶剂的极性越强，洗脱能力越强。（注意：不可以使用纯水作为正想色谱的流动相）一般样品分析要求：容量因子大于2小于5

所用仪器为安捷伦7890B。FID检测器。柱子是新的HP-5M UI色谱柱。进样前一天已经老化了很长时间了。老化程序为40℃不保持。1℃/min升到250℃。然后250℃保持3小时。再以1℃/min升到280℃。280℃保持3小时。然后再以1℃/min降到40℃。结束。今天开始进样。结果目标物EPA和DHA一个都没出峰。求助各位大佬怎么解决啊EHA称取55mg，DPA称取5mg。放入同一个10ml容量瓶。然后用2,6-二叔丁基对甲酚的三甲基戊烷溶液（50mg/l）定容。PS：前一个同事做的时候就正常出峰。条件同上。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210281039266404_3379_5607773_3.png[/img]

峰型异常问题 峰型问题是液相的主要问题，在做液相过程中，我们就是要变换不同的条件来改善不好的峰型，对于各种各样的异常峰，要区别对待，从主要问题出发，一个一个加以解决。 1、色谱图中未出峰。解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。 2、一个峰或几个峰是负峰。解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。 3、所有峰均为负峰。解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。 4、所有峰均为宽峰。解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。 、 5、所出峰比预想的小。解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确．定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。 6、出现双峰或肩峰。解决方法：进样量过大；样品浓度过高；保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护拄或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。 7、前伸峰。解决方法：进样量或样品浓度高；溶解样品的溶剂较流动相极性强；保护柱或色谱柱污染或失效。 8、拖尾峰。解决方法：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；硅羟基作用，加入三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值；柱内烧结不锈钢失效，更换烧结不锈钢；加在线过滤器，对样品进行过滤；死体积或柱外体积过大，将连接点降至最低；尽可能使用内径较细的连接管；柱效下降，更换柱子；采用保护柱，对柱子进行再生。 9、出现平头峰。解决方法：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度太高。 10、出现鬼峰。解决方法：进样阀残余峰，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的预处理；流动相污染，更换新流动相，尽可能现配现用，隔夜的流动相再次使用时要过滤；尽可能使用HPLC级试剂；流路中有小的气泡，打开Purge阀，加大流速排除。

[align=center][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]峰分叉的原因以及如何解决这个问题[/font][/align][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]色谱柱污染：[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]在开始时没问题，在使用一段时间后出现这个问题，可能是由于污染引起的。[/font]这时需要对色谱柱加强冲洗，即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。[/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]保护柱失效：[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]如果样品基质比较脏，使用一段时间之后，发现的峰分叉或拖尾等问题，很有可能是保护柱失效造成的。[/font]一般粗略判断标准，塔板数、压力或分离度的改变超过 10%，就需要更换保护柱了。保护柱是消耗品，建议直接更换，不需要再生。[/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]接头连接不正确：[/font]如果色谱柱在使用过程中发现每个峰的峰形都出现问题，先考察是否有连接问题。管线可能太长或太短——这种情况可能导致渗漏或峰分叉/拖尾。如果管线太长，密封圈位置不当，将发生渗漏。如果管线推出的距离不够，将会产生一段死空间，形成混合腔，导致柱外体积，使峰形变坏。如果您使用的是不同厂商的色谱柱，一定要确保使用正确的接头，并保证色谱柱末端接头位置正确。[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]溶剂效应：[size=14px]在反相 HPLC 中，[/size][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &] 如使用 100% 有机溶剂或 100% 强溶剂（图4中为乙腈），大体积进样时，将使色谱峰过早洗脱出色谱柱，导致峰变形。如需解决这个问题可以对分析物进行蒸发浓缩，从而减少进样体积。或者进样溶剂改为用水稀释，与流动相更为兼容，即使进样体积较大也不会出现峰变形。较早流出的峰或靠近溶剂前沿的峰更容易出现拖尾。在液相色谱中用溶于流动相的小体积进样最为理想。[/font][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]样品过载：[size=14px]当进样量超过柱子的容量，样品峰会呈现分叉或拖尾，解决方案就是减少进样量。[/size][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]这种问题一般在使用小体积色谱柱是表现更为明显，所以色谱柱方法从常规250mm或150mm长色谱柱转化到体积较小的快速分析柱时，进样量要按照柱体积的减小的比例而减小。[/font][/font][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]色谱柱塌陷：[size=14px]由于柱塌陷引起的峰分叉，很难修复。如果流动相pH7或在色谱柱pH耐受范围临界点附近长时间使用，是比较容易造成硅胶填料溶解塌陷。如果出现色谱柱塌陷，[/size][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]短时间内可以反方向运行，建议直接更换色谱柱。日常使用的过程中注意将温度降低到 40 ℃以下，特别是使用高 pH 流动相时；使用高温兼容色谱柱，如立体保护的硅胶柱、混合型柱、聚合物柱、氧化锆柱等。使用特别适合在较高 pH 下操作的高覆盖率或双交联固定相（比如，ZORBAX Extend-C18），或使用聚合物、混合型或氧化锆反相柱。[/font][/font][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]柱前筛板部分堵塞：[size=14px]长期分析脏样品，如果没有保护柱或在线柱前过滤器，颗粒物和强吸附物很可能在柱入口筛板发生堵塞，同时伴随着压力升高，解决办法一般是色谱柱反冲[/size][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]。1.8um粒径的色谱柱尽量避免反冲。由于现在使用的是高效装柱工艺，不建议更换色谱柱入口筛板，在许多色谱柱上也不可能更换。如果更换筛板，可能影响柱效。所以最好在色谱柱前安装在线过滤器和保护柱。[/font][/font][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]色谱柱性能下降：[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]在您使用色谱柱时，[/font]会用其分析各种目标物、使用各种流动相并分离不同的样品基质，经过长时间的使用，色谱柱会受到这些物质的影响发生一些微妙的变化，从而引起峰分叉、拖尾或保留时间的改变[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]。在使用新色谱柱时保留其测试样品色谱图非常重要，在使用一段时间后进行比较，就能发现性能上的变化。如果分离度下降导致不能进行良好定量，这根色谱柱就应该丢弃并更换了。[/font][/font][/font]

今天微信上看到的一篇文章，觉得不错，分享给大家哈在日常色谱定量分析中，出现色谱峰形异变或鬼峰，不但严重影响定量精度，甚至使分析工作无法进行，为此我们把峰形异变常见类型（15种）加以分析，并给出可能原因，供工作经验不足的色谱工作者参考。我们在此讨论的峰形异变是指在色谱分析方法确定后，与曾经记录的已知色谱图比较时，出现某些色谱峰形的偏离畸变或多余峰。或者说，对于一已经设立好的色谱分析方法，由于不要求或出于无奈时有些峰分离不开、拖尾或峰形不对称等并不影响方法的实施情况，不属于上述因仪器故障、经验不足或操作失误造成的峰形异变。否则需要重新审定或修改原来的分析方法。另外，还应指出：由于无乱安装使用没有评价过的色谱柱可能出现的峰形拖尾，分离不好或峰形畸变，也不属于讨论内容。显然叫一个普通色谱分析工作者，在常规工作条件下去判断色谱柱的优劣，要求似乎高了一些。在怀疑峰形异变寻找可能原因、排除方法之前最好先做以下工作：仔细核查操作条件，与分析方法要求是否一致；和当初分析所存的标准色谱图对照，判断是否真出了问题；逐项仔细观察仪器或设备工作状态，看有无操作失误而引起的出峰失常。然后在依据以下15种异常峰形分析可能原因与排除方法。1．台阶峰：（1）TCD热丝被样品中所含卤素、氧、硫等元素腐蚀；（2）气体流量突变如：注射垫突然漏气，气路受阻等；（3）记录色谱峰装置故障如：拉线松；2．负峰：（1）TCD用氮做载气，由于待测组分在N2中浓度不同，热传导值呈现非线性而可能 出现负峰,有时可以通过改变载 气流量或进样量克服；（2）操作ECD时进样量过大而出负峰，这是由于工作原理由电子捕获转变为电离检测，此时灵敏度还会大大降低；（3）操作FID，低电离效率的溶剂（如CS2）或杂质出现，使原基流较高的输出基线减小而显示为负峰；（4）操作FID，在无极化电压，样品量较大可能出现负峰；（5）操纵NPD、FPD时气流比不合适，溶剂或某些组分会出现负峰；3."N" 或 “W”峰：（1）TCD操作，用N2作载气由于热传导率非线性引起；（2）FID操作时，样品溶剂电离效率低（如CS2），或气流比欠佳时；（3）ECD操作时，由于检测器被污染，溶剂峰或待测组分含量较高，或脉冲电源有毛病；4．舌头峰（前延峰）：（1）汽化温度偏低；（2）载气流量小：（3）进样量大，汽化时间长；（4）汽化室被污染，样品有吸附效应；（5）样品在柱头有冷凝或色谱柱被污染；（6）进样技术差（挥发性组分的进样速度太慢）；（7）峰前出现了“鬼”峰。5．拖尾峰：（1）色谱柱安装不合格，样品不能以“塞子”形进入色谱柱，柱与检测器安装的死体积太大；（2）样品未能注射入柱头中（柱头进样方式）；（3）汽化管没有安装好或破损，样品只能脱尾进入色谱柱；（4）化室的温度低或偏高；（5）载气流量偏低；（6）进样量大；（7）载气系统（如注射垫处）有漏气；（8）进样器（汽化室），被样品中高沸点杂质或注射垫残渣污染；（9）色谱柱被污染至使被分析组分和高沸点污染物作用；（10）补充气未开或偏低；（11）色谱柱温度偏低或失效；（12）甲烷化Ni催化剂失效；（13）进样技术差（如速度不合适）；（14）正好有干扰峰（鬼峰）出现（如误用被污染的注射针）；（15）无极化电压（FID），此时伴随灵敏度偏低；（16）样品前处理有毛病；6．出峰后基线下移：（1）样品量大，特别是溶剂改变了工作状态；（2）FID被污染状况发生改变，或气流比发生变化；（3）系统出现漏气，或出现堵塞；（4）色谱柱被污染；（5）样品处理不当，如：样品中有些物质和固定相发生作用；7．程序升温时基流增加（漂移大），噪声增加：（8）色谱柱需重新老化或失效；（9）新换载气纯度欠佳；（10）过滤器失效；（11）样品前处理不当，如：杂质干扰物太多；（12）灵敏度太高。（13）数据处理装置的判峰参数设置不合理。8．圆顶宽峰（17）样品量大起出了色谱柱容量；（18）汽化温度低；（19）色谱柱没按要求安装；（20）检测器工作状态不对，如载气太小、没开补充气；（21）数据处理装置的判峰参数（半峰宽）设置偏大；9．平顶峰（未到满量程）：（1）样品量大，放大器量程高，衰减大，信号输出饱和；（2）检测器已工作在饱和区；（3）数据处理输入信号极性接错，或零点失调；10．基线出现波浪状峰：（1）高灵敏度操作仪器未稳定之前；（2）操作TCD、ECD时，柱箱或检测器箱温度周期变化；（3）环境温度对仪器控温影响；（4）电压不稳，对柱温控制精度影响；（5）过温保护设置低于控制温度；（6）压力（流量）调节阀失调，周期变化；11．原来能分开的峰分不开：（1）色谱柱安装不合要求 ；（2）色谱柱被污染，需重新活化 ；（3）色谱柱寿命已到，需更换；（3）新更换的气源，纯度不佳；（4）滤器失效，重新老化或更换；（5）色谱柱温度和载气流量需要微调优化（色谱分析一般允许）；（6）检测器工作状态变化（如ECD漏气、FID气流比欠佳）；（7）汽化室被污染，注射垫漏气；（8）样品处理不当，杂质干扰物太多；（9）样技术太差；（10）进样量超出了色谱柱容量；（11）数据处理的判峰参数，半峰宽或斜率设置不合理；（12）放大器量程或衰减设置失误；12．直角峰（1）仪器输出负信号超出了数据处理的范围；（2）数据处理装置零点未校正，或量程设置太大无法判断基线位置；（3）数据处理装置输入信号极性接反，零点设置不对；13．带毛刺峰（1）仪器工作不稳定，噪声大于要求；（2）数据处理装置的判峰参数，半峰宽和斜率设置太小；（3）极化电压（FID）不稳；14．操作条件未变，原来能判别的峰不见了：（1）色谱柱被污染或失效；（2）气路系统被污染（如气源纯度低，过滤器失效）；（3）注射垫漏气；（4）注射针密封性差；（5）数据处理的判峰参数，如：半峰宽和斜率设置偏大；（6）进样方法不对；15．“鬼峰”（怪峰，多余峰，记忆峰）：（1）上一次进样的高沸点杂质峰自然流出；（2）载气不纯过滤器失效使低沸点的污染物冷凝在色谱柱头，程序升温时正常流出；（3）注射垫未经老化或无隔垫清洗而出的污染峰；（4）汽化温度太高或严重污染至使样品某些组分分解；（5）样品某些组分与被污染固定相产生了作用；（6）色谱柱温度太高固定相分解；（7）使用了被污染的注射针（ 本身不合格，手摸或进过易污染的样品）；（8）样品予处理不完善或用错溶剂；（9）样品中有空气；（10）TCD、ECD等密封性差（漏气）；（11）电源不稳，对控温或放大器有不良影响（12）色谱柱堵塞物使用不当，如玻璃棉未按要求进行处理；