色谱洗脱法

这种拆分方法是液相色谱的制备拆分中最常规的方法，与一般的柱层析方法相似，所不同的只是固定相的材料。随着固定相材料的不断发展，色谱法制各拆分也随之进步。早期人们使用的填充材料是天然的手性聚合物或对其进行―些修饰，曾获得一些成功。从20世纪70年代中期开始，手性的聚酰胺作为手性固定相开始被人们使用。当时，这些手性固定相成功地用于一些用合成法很难或不可能得到的单一对映体药物的拆分。　　分批洗脱色谱法是利用固定相对不同手性化合物的吸附能力不同而分别洗脱，从而达到分离的效果。其中，流动相对洗脱也有影响，可以通过选择不同的流动相或在流动相中加入―些辅助物质而起到不同的分离效果，但添加辅助物质就又相当于带入了杂质，又会涉及拆分后的纯化问题。因此人们主要还是通过改变固定相来获得令人满意的制备拆分效果。　　这种拆分方法是微量制备药物单一对映体的―个重要方法，从它刚获得成功开始，人们就将它向能进行千克或吨这样规模的生产来改进，但由于手性填充材料价格昂贵，载样量小，高纯度的有机试剂价格也太高，而且洗脱液浓度太低以及如此昂贵(有时危险)的拆分试剂回收等问题影响了工业化的进程。

在液相色谱分析中梯度洗脱与等度洗脱差异？

岛津的液相色谱中等浓度洗脱和二元高压梯度洗脱有什么区别？有人说混标需要梯度洗脱，单表不需要梯度洗脱对吗?流速和浓度成正比吗？

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的梯度洗脱和等度洗脱都是用在什么操作中呢？梯度洗脱有什么优势呢？

正相硅胶_选择洗脱-气相色谱法、液相色谱-质谱法检测食品中甲胺磷残留及其作用机理研究.pdf

反相色谱中，极性是怎么影响洗脱能力的，微观些

[color=#444444]本人近期要做红球菌多环芳烃（萘）降解的中间代谢产物检测，问一下各位大神做高效液相色谱我应该用什么洗脱液洗脱比较合适？A和B的比例应该怎样选择？在此谢过~~[/color]

戴安的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]要靠自动淋洗液发生器才能进行梯度洗脱（除了ICS-3000,太贵了），万通的能不能直接靠泵进行梯度洗脱？

能得出梯度曲线是否证明液相色谱仪能做梯度洗脱！！我很想知道！！请知道的朋友尽快和我联系！！谢谢！！

大家好！在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中，为了尽快把各成分都洗脱出来，我们会使用梯度洗脱的方式进行洗脱。然而，为了抑制基线受到梯度影响而漂移，也为了追求好的信噪比，我们会加一定抑制电流于抑制器。不过，抑制电流的大小选择是个技术活。太大，会损坏抑制器，仪器也会自动停止 报错。太小，就起不到很好的作用。尤其在梯度差距很大时，这种影响特别明显。大家在日常使用中，有什么好的方法来设置抑制电流呢？我用的ADES 600抑制器

怎么分析薄层色谱的结果及由此选择柱色谱的洗脱剂？好友们帮忙啊

[b][font=宋体][back=white]解答：[/back][/font][/b][font=宋体][back=white]在进行梯度洗脱时，由于多种溶剂混合，而且组成不断变化，因此带来一些特殊问题，必须充分重视：[/back][/font][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）要注意溶剂的互溶性，不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定的比例内互溶，超出一定的范围后就不会互溶。例如：乙腈和[/font]1 mol/L[font=宋体]的醋酸铵（[/font]pH=5.16[font=宋体]）做梯度洗脱，乙腈含量超过[/font]70%[font=宋体]时就会出现不溶。当有机溶剂和缓冲溶液混合时还可能析出盐的结晶体，尤其使用磷酸盐时需特别小心。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高，以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辨认溶剂杂质峰，因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头上后会被强的溶剂洗脱出来，用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气，以防止溶剂混合时产生气泡。[/font][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）混合溶剂的黏度常随其组成而变化，因此在梯度洗脱时常会出现压力变化，例如纯水或甲醇的黏度都比较小，但是当二者以相近的比例混合时黏度会增大很多（甲醇[/font][font=宋体]-[/font][font=宋体]水体积比为[/font]1[font=宋体]：[/font]1[font=宋体]时压力最大），因此要防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱所能承受的最大压力。[/font][font=宋体]（[/font]4[font=宋体]）每次梯度洗脱程序运行完之后必须对色谱柱进行彻底平衡，使其恢复到初始的状态，需让[/font]10~30[font=宋体]倍柱容积的初始流动相流经色谱柱，使固定相和初始流动相达到完全平衡，平衡不好会影响下一针样品的分离度和保留时间。[/font][font=宋体]（[/font]5[font=宋体]）注意梯度洗脱用水的有机物残留。往往在等度洗脱时用的水，在梯度洗脱时发生问题（鬼峰）。这是因为在梯度过程中，水占的比例很高时的流动相洗脱能力很低，此时水中的有机物残留就被色谱柱吸附并浓缩，等到强溶剂占高比例时，浓缩的有机物被高洗脱能力的流动相洗脱而流出色谱柱，并成为一个色谱峰，从而干扰分析。[/font][font=宋体]（[/font]6[font=宋体]）梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器（如紫外吸收检测器或荧光检测器），而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器（如示差折光检测器）。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

请教各位大峡梯度洗脱是怎么回事，最近想买一台液相色谱，实验室本来只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]，所以对液相不太了解．如果想买一台液相色谱，能做梯度洗脱，对设备有什么要求，是不是一定需要两台泵．

胸腺素的提取中最后要过SwphadezG-150和SwphadezG-25两个色谱柱,洗脱剂是什么?

由于样品需要，使用两种不同能力洗脱剂洗脱，氢氧化钠和醋酸钠洗脱方式是前30分钟氢氧化钠后面用醋酸钠洗脱20分钟，发现一个问题，我单单用氢氧化钠洗脱需要物质时，洗脱峰型很好，但是后面再加上醋酸钠时，每个氢氧化钠洗脱时的样品就会影响，这是什么问题？醋酸钠会对之前氢氧化钠洗脱能力影响吗？醋酸钠洗脱后我都平衡至基线平稳了。

[color=#444444]我准备用离子对反相高效液相色谱对核苷酸进行分析，查文献得到的洗脱程序如下：[/color][color=#444444] 100%缓冲液A 5min[/color][color=#444444] 0--77%缓冲液B 27min[/color][color=#444444] 77%缓冲液B 5min[/color][color=#444444] 0--100%缓冲液A 1min[/color][color=#444444] 100%缓冲液B 10min[/color][color=#444444]想请教各位：1.在第2、3步反应中，只有溶液B吗？剩余的一些百分比是水还是溶液A？2. 这种洗脱程序在岛津工作站中如何设定？谢谢各位的指教。。。。。。。。。[/color]

主题：液相色谱进阶讲座之梯度洗脱简介：通过实例详细介绍“梯度洗脱”的意义、应用领域、操作方法以及优化，相信能够使广大网友的液相色谱技术有一些崭新的提高讲座办法：在讲座时间内，由主讲人上传资料；讲座时间结束，网友可以参与讨论提问等；讲座内容长期保存，网友可在任何时间进行浏览或下载讲座时间：2010-7-8,14:30~16:00主讲人：Godblesschina欢迎各位朋友届时参与！

请问大家[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]NaOH洗脱液用的都是什么样的试剂？分析纯还是优级纯或者是进口试剂？有用直接购买液体NaOH的同行吗，用的是哪家的，大概需要多少Money?谢谢！

大家在日常使用液相过程中，会经常用到缓冲盐类的流动相，也经常会碰到含盐量较高的样品，这样一来，我们的柱子的柱效会下降的很快，不知大家在日常的色谱柱使用维护中，有些什么比较好的洗脱方式呢？

[color=#444444]同样的色谱条件，同样的洗脱梯度，做同一个物质时，原来25-30min之间没有大包，现在出现大包，洗脱流动相，A，B均为不同比例的盐和乙腈，前25分钟完全由A相转换为B相，25-26min完全由B相转换为A相，此时出现大包。以前也是这个梯度，但是没有大包，求大家帮忙分析一下原因。[/color]

高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题?

安捷伦1260液相色谱从哪设梯度洗脱

依利特P200II高效液相色谱仪可以做梯度洗脱吗?

我是使用液相色谱的菜鸟，现在遇到了一点点问题，请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定，一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=75：25，在10分钟左右出峰，流速1ml/min；另一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=5:95，在6分钟左右出峰，流速0.5ml/min，如果我想同时测定，可以用梯度洗脱吗？如果可以的话，流动相比例过程中的变化改怎么设置，请各位大神赐教，谢谢。

我是使用液相色谱的菜鸟，现在遇到了一点点问题，请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定，一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=75：25，在10分钟左右出峰，流速1ml/min；另一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=5:95，在6分钟左右出峰，流速0.5ml/min，如果我想同时测定，可以用梯度洗脱吗？如果可以的话，流动相比例过程中的变化改怎么设置，请各位大神赐教，谢谢。

有什么办法能让单泵液相色谱进行梯度洗脱?大家讨论下[em52] 我想到一个办法,不知道行不行但是现在还没想好[em53]

[color=#444444]请问0.02M磷酸二氢钾和甲醇这样比例和时间梯度洗脱可以吗[/color][color=#444444]时间 0.02M磷酸二氢钾 甲醇[/color][color=#444444]0 99 1[/color][color=#444444]15 0 100[/color][color=#444444]15.1 99 1[/color][color=#444444]经过0.1分钟从纯甲醇变为0.02M磷酸盐溶液可以吗？ 柱子为SB-C8色谱柱[/color]

离子色谱，用氢氧化钠和醋酸钠测定单糖，当洗脱液变为醋酸钠时基线就会漂移，随醋酸钠浓度变化改变。之前没遇到这种情况。亲大神看看，离子色谱基线漂移基本属于哪些问题。还有求个方法能分开鼠李糖，阿拉伯糖，半乳糖，葡萄糖，木糖和甘露糖的方法

姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。