色谱正相柱

正相色谱柱与反相色谱柱的区别本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明： 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。 2、反向色谱 反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。

正相色谱柱与反相色谱柱的区别本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。以下是详细说明：1、正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。2、反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等

在正相色谱中，一般采用极性键合固定相，硅胶表面键合的是极性的有机基团，键合相的名称由键合上去的基团而定。最常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)键合相。流动相一般用比键合相极性小的非极性或弱极性有机溶剂，如烃类溶剂，或其中加入一定量的极性溶剂(如氯仿、醇、乙腈等)，以调节流动相的洗脱强度。通常用于分离极性化合物。一般认为正相色谱的分离机制属于分配色谱。组分的分配比K值，随其极性的增加而增大，但随流动相中极性调节剂的极性增大(或浓度增大)而降低。同时，极性键合相的极性越大，组分的保留值越大。该法主要用于分离异构体，极性不同的化合物，特别是用来分离不同类型的化合物。　　在反相色谱中，一般采用非极性键合固定相，如硅胶-C18H37(简称ODS或C18)硅胶-苯基等，用强极性的溶剂为流动相，如甲醇/水，乙腈/水，水和无机盐的缓冲液等。　　正相色谱和反相色谱的区别：　　本质上是填料(固定相)的不同,正相色谱柱填料极性强,洗脱顺序由弱到强 反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。　　1、正相色谱　　正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)以及其他具有极性官能团胺基团，如(NH2，APS)和氰基团(CN，CPS)的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如正已烷(Hexane)，氯仿(Chloroform)，二氯甲烷(Methylene Chloride)等。　　2、反相色谱　　反相色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。　　常用的反相填料有：C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。

在正相色谱中，固定相的水分含量常常是个影响选择性的关键参数。大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分(正己烷20摄氏度下水分含量是0.0111% w/w ), 正相色谱柱中水分含量随时间的不同是导致选择性变化的最普通的一个因素。用含2.5 % 二甲氧基丙烷(dimethoxypropane)和2.5 % 冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱30个柱体积，可以去除色谱柱中水分并恢复色谱柱原来或所需要的选择性。　　考虑到从流动相和色谱柱中完全去除水分非常困难，还有个尚有争议的简单方法可以采用。使用水分含量可控的流动相(譬如和水半饱和)以一直保持最初的方法选择性，而不需要每次进行冗长的除水分步骤。不管何种情况，最重要的都是保持水分条件的一致性。

之前一直用的C18反相柱，现在因为样品需要，得换成正相柱进行样品分析，请问各位高手，液相色谱从使用反相色谱柱到正相色谱柱需要做哪些工作？

各位大虾，本人现在用正相色谱做曲酸双酯含量，流动相为：甲醇：正己烷=3:1，色谱柱为C18，请问用什么溶剂冲洗色谱柱较好呢?

前面看到有版友说到色谱柱如果长期不用，应该怎样保存，相关帖子：[url=http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100610/2605049/]柱子不用时如何长期保存？[/url]多数版友都提到用有机相充满并将柱子两端封好保存。如题，正相柱又是如何保存呢？有一位朋友，在用waters亲水柱 HILIC时，流动相中水相可以达到100%，但乙腈的比例不会超过50%。在每次实验后色谱柱要保存时，他会用100%的乙腈充满柱子，这样做前后矛盾吗？应该怎么做？您在使用和保存正相色谱柱时有没有什么心得？

正相柱一般包括硅胶、CN基、Diol和氨基柱。最好是事先采用预防性的措施，如样品过滤、用预柱和保护柱的方法，以尽可能的减少色谱柱的污染。下面的方法有助于延长正相色谱柱的使用寿命，运用方法中的理念，也可以用来诊断解决色谱柱使用中的疑难问题。　　清洗步骤　　1. 每次清洗都用低流速起步，当检测到柱压稳定在一定水平后再增加流速。　　2. 先用10柱体积不含其它添加剂的流动相中的弱溶剂，如正己烷、氯仿等反冲色谱柱。　　3. 再用20柱体积的诸如二氯甲烷或异丙醇等流动相中的强溶剂反冲色谱柱。　　4. 100%异丙醇的极性和正相洗脱能力足够把正相柱上的所有残留物清洗掉。如果异丙醇的清洗还不足以恢复色谱性能，则说明色谱柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法无法解决这个问题。色谱症状和清洗再生过后的色谱性能恢复情况往往能提供色谱柱真正存在问题的线索。

正相色谱柱使用一段时间后，他的拖尾因子就从1.2左右到了2.0，峰型变得很不好看，是柱子没有保存好嘛？使用的流动相是正己烷：异丙醇：三氟乙酸=850：150：1，使用完后会用正己烷和异丙醇冲洗，保存在高正己烷中，还请大家教教我

请问一下反相色谱柱用于了正相系统，对色谱柱有什么影响？

一般情况下正相色谱柱的清洗和再生的操作：清洗：每次清洗先用低流速，当检测到柱压稳定在一定水平后再增加流速。先用10柱体积不含其它添加剂的流动相中的弱溶剂，如正己烷、氯仿等反冲色谱柱。再用20柱体积的诸如二氯甲烷或异丙醇等流动相中的强溶剂反冲色谱柱。再生：用四氢呋喃，甲醇，四氢呋喃，二氯甲烷，正己烷分别冲洗20个柱体积。

[b][font='Times New Roman'][font=宋体]解答[/font][/font][font=宋体]：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]（[/font]1[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]正相色谱柱与反相色谱柱本质上是填料[/font][/font][font=宋体]（[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]固定相[/font][/font][font=宋体]）[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]的不同。正相色谱柱填料极性强[/font][/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]洗脱顺序由弱到强；反相色谱柱填料极性弱，洗脱顺序由强到弱。[/font][/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]正相色谱柱用的固定相通常为硅胶以及其他具有极性官能团胺基团，如（[/font]NH[/font][sub][font='Times New Roman']2[/font][/sub][font='Times New Roman'][font=宋体]，[/font]APS[font=宋体]）和氰基团（[/font][font=Times New Roman]CN[/font][font=宋体]，[/font][font=Times New Roman]CPS[/font][font=宋体]）的键合相填料。由于硅胶表面的硅羟基（[/font][font=Times New Roman]SiOH[/font][font=宋体]）或其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。正相色谱柱使用的流动相极性相对比固定相低，如正己烷，氯仿，二氯甲烷等。[/font][/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体][font=宋体]（[/font]3[font=宋体]）[/font][/font][font='Times New Roman'][font=宋体]反[/font][/font][font=宋体]相[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]色谱柱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反[/font][/font][font=宋体]相[/font][font='Times New Roman'][font=宋体]色谱柱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。常用的反向填料有：[/font]C[/font][sub][font='Times New Roman']18[/font][/sub][font='Times New Roman'][font=宋体]（[/font]ODS[font=宋体]）、[/font][font=Times New Roman]C[/font][/font][sub][font='Times New Roman']8[/font][/sub][font='Times New Roman'][font=宋体]（[/font]MOS[font=宋体]）、[/font][font=Times New Roman]C[/font][/font][sub][font='Times New Roman']4[/font][/sub][font='Times New Roman'][font=宋体]（[/font]Butyl[font=宋体]）、[/font][font=Times New Roman]C[/font][/font][sub][font='Times New Roman']6[/font][/sub][font='Times New Roman']H[/font][sub][font='Times New Roman']5[/font][/sub][font='Times New Roman'][font=宋体]（[/font]Phenyl[font=宋体]）等。[/font][/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]领取更多《实战宝典》请进：[/font][/font][url=http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI][u][font=微软雅黑][color=#0000ff]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/color][/font][/u][/url][font=微软雅黑] [/font]

不知这里有多少人做过正相色谱，请大家讨论一下做正相色谱时应注意的问题好吗？

正相色谱柱内的水分对柱子的分离效果，特别是保留时间，影响很大！好几位老师都这样告诉我。要想稳定，最好是除去其中的水分。问一下，除正相色谱柱内水分的溶剂是什么？用过异丙醇了，效果不好。

第一次做正相色谱，AD-H手性柱，流动相是正己烷：乙醇：冰醋酸 92:8:0.3 想问一下实验结束之后如何冲洗色谱柱？

亲水性色谱是正相色谱的一个变种。 HILIC HPLC Column亲水性色谱柱是以超纯硅胶为基质，表面键合有二氧化硅(silica，弱酸性)，氰基（cyano，弱酸性）, 二羟基（diol，中性），二丙基乙酰胺基（valpromide，弱碱性），丙基酰胺基（Venusil，弱碱性），氨基（amino，弱碱性）, 吡啶基（Pyridine，弱碱性），咪唑基（Imidazole，弱碱性）等亲水基团的极性固定相。请问大家它与正相柱有什么区别都体现在什么地方？

正相HPLC色谱柱的清洗、再生和维护方法正相柱一般包括硅胶、CN基、Diol和氨基柱。最好是事先采用预防性的措施，如样品过滤、用预柱和保护柱的方法，以尽可能的减少色谱柱的污染。下面的方法有助于延长正相色谱柱的使用寿命，运用方法中的理念，也可以用来诊断解决色谱柱使用中的疑难问题。清洗步骤1. 每次清洗都用低流速起步，当检测到柱压稳定在一定水平后再增加流速。2. 先用10柱体积不含其它添加剂的流动相中的弱溶剂，如正己烷、氯仿等反冲色谱柱。3. 再用20柱体积的诸如二氯甲烷或异丙醇等流动相中的强溶剂反冲色谱柱。4. 100%异丙醇的极性和正相洗脱能力足够把正相柱上的所有残留物清洗掉。如果异丙醇的清洗还不足以恢复色谱性能，则说明色谱柱柱床有塌陷和空洞了，用清洗的方法无法解决这个问题。色谱症状和清洗再生过后的色谱性能恢复情况往往能提供色谱柱真正存在问题的线索。正相柱除水分诸如保留时间漂移等选择性改变的一些色谱症状，可以归因于固定相的变化，而填料可能还是完好的。在正相色谱中，固定相的水分含量常常是个影响选择性的关键参数。大部分溶剂都内含有小部分的溶解水分（正己烷20摄氏度下水分含量是0.0111% w/w ), 正相色谱柱中水分含量随时间的不同是导致选择性变化的最普通的一个因素。用含2.5 % 二甲氧基丙烷（dimethoxypropane）和2.5 % 冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱30个柱体积，可以去除色谱柱中水分并恢复色谱柱原来或所需要的选择性。考虑到从流动相和色谱柱中完全去除水分非常困难，还有个尚有争议的简单方法可以采用。使用水分含量可控的流动相（譬如和水半饱和）以一直保持最初的方法选择性，而不需要每次进行冗长的除水分步骤。不管何种情况，最重要的都是保持水分条件的一致性。

分析条件：正相液相色谱，硅胶柱，正己烷做流动相，因为试样对正己烷溶解性不好，考虑在流动相中加入一定比例的丙酮（考虑过醇类，但加醇类效果不好），但看到有文章中说硅胶柱不能进带醛基、羰基的物质，究竟正相液相色谱硅胶柱能用丙酮做流动相吗？

[color=#444444]我们新装了一个正相液相分析色谱柱，因为以前我都是用的反向分析，所以不知道拿到正相柱后开始怎样做，正相不经过处理可以直接用流动相过柱吗？我们样品需要的流动相为乙酸乙酯：甲醇：水，甲醇和水是少量的，但正相不能进入水，说需要完全脱水吗？而参考文献却在用，我应该怎么处理？[/color]

以前没做过正相，我知道样品能溶于二氯甲烷，不溶于异丙醇、乙醇、正庚烷、正己烷，我该用什么样的正相色谱柱和流动相呢？

硅胶柱（正相色谱）用完后如何冲洗柱子？用过后是不是先用甲醇冲，然后用正庚烷－异丙醇（95：5）冲洗？谁用过硅胶正相色谱请指点一下。

[color=#444444]之前高效液相色谱上接的一根C18柱子，现在由于分析需要，我想换上新的正相的纯硅胶色谱柱，流动相也要相应的从甲醇换成异丙醇，应该样操作，要注意哪些问题，求高手指点！[/color]

氨基、氰基、芳硝基、二醇基、醚基键合色谱柱都可作正相色谱，它们主要以氢键力与目标物相互作用。氢键力从强到弱依次为：胺基、氰基、芳硝基、二醇基、醚基。胺基键兼有质子接受和给予的双重性能，具有强极性，它对具有氢键作用的样品显示强的分子间相互作用。氰基键为质子接受体，具有中等极性，分离选择性与硅胶类似。芳硝基键具有电荷转移功能，弱极性，对芳香族化合物分离效果好。醚基键也呈弱极性，可分离能形成氢键的化合物。

大家好! 我以前都是用的反相色谱柱,配对的是紫外分光光度计,现在开始要用正相色谱柱拉,可是用紫外分光光度计时,溶剂对它有干扰作用,请问大家谁知道应该用什么样的检测器,或者不换检测器就能消除干扰啊!你们有用正相色谱柱的踊跃发言啊![em26] [em26][em27] [em40]

如题 正相系统转反相系统时没用异丙醇充系统 只用水冲了1个多小时 不知道想什么去了 唉 可能太急躁了 后悔莫及 然后接上色谱柱 再用10甲醇冲柱 再上流动相 谱图的新出现一个小倒峰 在4到5min的地方,理论塔板数没降低 但峰变前延 拖尾因子从1.05变成0.84 这样是否判断色谱柱受损 有没有什么补救办法 正相系统流动相是正己烷异丙醇三氟乙酸 反相系统流动相是乙腈水已采取的办法 卸下色谱柱接双通，异丙醇冲系统1到2h 色谱柱HC C18用异丙醇0.5ml per min冲了2个小时 然后用95%甲醇水0.5ml per min过夜

大家好，我想询问一下，高效液相检测黄原酸盐、磷酸盐和硫氮酯类选用什么型号的正相色谱柱子阿？急切求知中...先向关注的老师感谢一下，呵呵

做正相。方法流动相→ 无水乙醇：二乙胺=100：0.4（100ml无水乙醇要加0.4ml二乙胺）用过大赛璐的柱子，用过赛分的柱子。最初使用时异构体分离效果还挺好，使用几次后就不行了。无水乙醇冲洗，反着冲也是不行。使用前无水乙醇小流速冲洗，使用后小流速冲洗。那台仪器也一直做正相。我问色谱柱厂家，说二乙胺浓度有点高，如果反着冲后还是不行的话色谱柱就废了。想问下各位老师，遇到过类似的情况吗？或者这个浓度是对色谱柱内基质影响大不。感谢

[em0810]如题，该如何判断一个色谱柱是否具有正相的能力？

正相液相色谱一般用什么柱子？流动相？