手谱分离柱

比如两个标液峰的分离度不好，用同样的型号的色谱柱，内径用小的，分离度会较好，但内径小会不会使用寿命较短呢？

[font=宋体]发帖人[/font]:lneng2010[font=宋体]链接[/font]:[url=https://bbs.instrument.com.cn/topic/5930545][color=windowtext]https://bbs.instrument.com.cn/topic/5930545[/color][/url][b][font=宋体]问题描述：[/font][/b][font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱的使用过程中，哪些操作会影响色谱柱的使用寿命[/font]?[font=宋体]为最大限度的延长色谱柱的使用寿命，又如何确保[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱的分离效果？[/font]

美国赛分科技（Sepax Technologies Inc. ）致力于开发生产化学与生物分离科学、生物表面科学和蛋白质组学研究（proteomics）领域的产品，包括高分辩率的高效液相仪器、色谱柱、配件和用于DNA测序和蛋白质分离的新型毛细管涂布材料与毛细管电泳仪，以及为微芯片分离和DNA、蛋白质微序列提供最好的表面技术与分离技术。 Sepax Technologies Inc.创新的尺寸排阻色谱柱（凝胶色谱柱）的填料是以刚性的高纯度球型硅胶为基质，利用独特的表面修饰技术在表面通过共价化学键合亲水性基团而成，该固定相具有亲水性并且是中性的，可以消除与生物大分子（特别是蛋白质）的非特异性相互作用，Sepax Nanofilm SEC系列尺寸排阻色谱柱具有分离的高效率与高选择性。pH适用范围为2-8.5，可使用与水完全互溶的有机溶剂，如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。Sepax Nanofilm SEC系列尺寸排阻色谱柱适用于分离蛋白质和多肽类生物大分子样品以及天然与合成高分子物质。Sepax CNT SEC尺寸排阻色谱柱可以用于分离制备纳米物质，如碳钠米管、钠米棒。流动相不仅可以用缓冲溶液，也可以使用有机溶剂，如乙腈、甲醇、四氢呋喃等。 Sepax Proteomix系列离子交换色谱柱的填料是以刚性、球形、化学和机械性能都非常优异的高度交联的聚苯乙烯-二乙烯基苯（PS/DVB）聚合物为基质、树脂表面涂覆一层纳米厚度的中性的亲水性聚合物薄膜、在亲水性薄层的表面通过共价化学键合致密且均匀的离子交换功能基团而成。亲水性的薄层完全覆盖疏水的树脂表面，可以消除与生物分子之间的非特异性结合作用，从而达到高效分离，并且可以获得非常高的回收率。PS/DVB 树脂分为无孔与有孔两种。Sepax Proteomix离子交换固定相有键合磺酸根的强阳离子交换（SCX）、羧酸根的弱阳离子交换（WCX）、季胺的强阴离子交换（SAX）、叔胺的弱阴离子交换（WAX）四种。Sepax Proteomix系列离子交换色谱柱可以耐受高温（80℃）与高压（4,000psi），其pH适用范围为2-12，适用于分离蛋白质、低聚核苷酸和多肽类生物样品。流动相的选择范围广，可以是水，也可以是乙腈、甲醇等有机溶剂，还可以是缓冲盐溶液，如磷酸盐、tris、醋酸盐等。 Sepax Technologies Inc.已开发出独特的表面涂布技术，使聚合反应仅在表面上发生，可用于涂布目前市场上最细的毛细管柱（直径小于5μm）。此独特的技术能够在毛细管的内表面均一涂布厚度可控（1～50nm）的中性、阳性或阴性聚合物薄层。这些涂布的毛细管柱具有可控或可逆转的EOF，在毛细管电泳中是一高度可靠和高效率的分离工具，它已广泛应用于高通量分析中，如蛋白质组学研究。 在生物化学分离领域，Sepax Technologies Inc.也为小分子分离提供完整系列的、高质量的正相与反相HPLC柱，包括C18、C8、C4、C2、苯基柱、腈基柱、氨基柱、硅胶柱、混合型的离子交换柱HP-SCX与SAX以及宽pH范围的聚合物填料（poly-PS/DVB）柱等。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=19417]产品资料[/url]

色谱柱温度，不仅影响色谱过程的热力学因素，也影响传质过程的动力学因素。柱温变化，不仅影响柱前端压力、载气流速等，更重要的是对物质的分离、分析结果带来影响。气相色谱中，根据升温方式，程序升温可分为线性程序升温和非线性程序升温，前者更普遍。线性程序升温，即随时间线性变化的升温方式，可分为一阶线性程序升温和N阶线性程序升温。对于每阶程序升温，都包含初温、程升速率、终温以及不同温度下的保持时间四个基本参数。 气相色谱恒温分析中，对化学性质相似的同类型的化合物，保留时间和沸点呈对数关系，随着保留时间增加，峰宽迅速增加，导致先流出峰相互叠加，后流出峰又因峰展宽，使检测灵敏度下降。因此一般通过柱温程序升温来解决这个问题。 那么，程序升温时，柱温N阶程序如何确定，是否N越大越好？ 程序升温时，在最佳分离条件下，保留时间与沸点近似成线性关系，即随着柱温的升高，峰底宽基本不变或增加很小。程序升温中各组分均在最佳柱温下出峰，但并不是N越多越好。 气相色谱分析中，对于组分沸点范围窄、化学性质类似的样品，如同系物，可选用一阶升温；样品组分沸点范围宽、性质差异大的，应选择N阶程序升温。N应根据化合物的多少、需要达到的分离效果、仪器的条件等各方面来选择。 每阶程序升温中，设置初温、程升速率和终温这三个基本参数优化分离条件，要从分离效果和分析速度两方面考虑。 对于初温，一般比样品中沸点最低的组分沸点要低，可参考低沸点组分恒温分析时的温度。初温的选择，主要是依据低沸点组分，但要高于固定液的凝固温度。 升温速率的选择，在了解样品组分复杂程度的基础上，既要保证较小的保留时间，又要保证较大的分离度，一般在0-10℃/min之间。 终温的选择，主要根据固定相、样品组分的热稳定性和高沸点组分的沸点确定。同样的样品组分，流出时的柱温，在毛细管柱上的温度比填充柱低，毛细管柱上的温度一般比样品的沸点约低50℃。 此外，气相色谱中，柱温是影响化合物保留时间的重要因素。使用中，应注意柱温的选择，因为柱温关系到：① 色谱柱固定液的寿命。若柱温高于固定液的最高使用温度，则会造成固定液随载气流失，不但影响柱的寿命，而且固定液随载气进入检测器，将污染检测器，影响分析结果。② 分离效能和分析时间。若柱温过高了，会使各组分的分配系数K值变小，分离度减小；但柱温过低，传质速率显著降低，柱效能下降，而且会延长分析时间。③ 化合物保留时间。柱温越高，出峰越快，保留时间变小。柱温变化会造成保留时间的重现性不好，从而影响样品组分的定性结果。一般柱温变化1℃，组分的保留时间变化5%；如果柱温度变化5%，则组分的保留时间变化20%；④ 色谱峰峰形。柱温升高，正常情况下会导致半峰宽变窄，峰高变高，峰面积不变。但是组分峰高变高，以峰高进行定量时时分析结果可能产生变化；反之柱温降低，则相反。 而在色谱定性方法中，柱温变化对定性结果的影响如下：① 当采用绝对保留值定性时，其他色谱条件不变，柱温变化时，保留时间就会发生变化，这样就直接影响定性结果判断。② 当采用相对保留值α定性时，α只是柱温和固定液的函数，只与待测组分的热力学性质有关，消除了外界因素的影响，因此跟柱温变化关系不大，但是柱温变化影响判断结果。③ 当采用保留指数定性时，恒温分析，保留指数与保留时间有关，而柱温影响保留时间变化；程序升温分析，除了保留时间，保留指数还与保留温度有关。因此，这种定性方法易受柱温变化影响。④ 当采用纯样叠加法定性时，已知混合物中含某组分，将该组分的纯样加入，观察加入前后的响应信号变化。柱温变化，保留时间变化，但是加入前后的样品影响信号变化是一致的，因此柱温变化不影响采用这种方法定性的结果。 而在定量计算时，经常要用到校正因子，如重量校正因子，和组分的质量以及响应信号有关。柱温变化，峰高变化，峰面积不变，因此，在柱温变化不影响峰形正常的前提下，以峰高为响应信号的重量校正因子，受柱温影响，而以峰面积为响应信号的重量校正因子将不受影响。常见定量方法中，在柱温波动不影响出峰效果的前提下，对定量结果的影响如下：① 采用归一化法时，定量时需要各组分的校正因子，当以峰面积为响应信号时，定量结果不受影响，以峰高为响应信号则受影响。② 采用内标法时，需要计算定量校正因子，影响规律和①同。③ 采用外标法时，即标准曲线法，当以峰面积为响应信号时，不受影响，但是当以峰高为响应信号时，影响很大。 总之，柱温变化可能会导致定性、定量分析结果的变化。 既然柱温变化对分析结果有重要影响，那么选择合适的柱温以及对柱温进行控制就很重要了。 首先，应保证柱温不高于固定液的最高使用温度（即色谱柱的最高耐受温度），避免固定液流失而影响色谱柱柱效和使用寿命； 其次，选择合适的柱温，柱温的选择应使难分离的两组分达到预期的分离效果，峰形正常而分析时间又不长为宜，一般柱温应比试样中各组分的平均沸点低20-30℃，通过试验决定。对于沸点范围较宽的试样，应采用程序升温，按预定的加热速度随时间呈线性或非线性地增加温度。一般升温速度是呈线性的。 最后，特别是要保证仪器柱温控制的稳定性、均匀性，以及实际温度与预设温度之间的一致性。一般气相色谱仪柱温控温精度为±1℃，有些厂家的可达到±0.1℃。

柱子可以分为：加压，常压，减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。 减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。 加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。特别是在容易分解的样品的分离中适用。压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。 关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好。柱子长了，相应的塔板数就高。柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。

1. 是不是所以的混合物均可用柱色谱分离？柱色谱是万能分离方法吗？2.含有金属物质的分离一般用什么样的溶剂较好？

各位专家、学者，大家好，最近想分离N2，H2，CO,CH4,CO2，C2H4，C2H6几种气体，用的是GDX-502色谱柱和5A分子筛色谱柱，氩气作载气，请问一下大家，柱温，检测器温度，柱流速大约多少，分离效果好点，由于没有经验，一直在调试，效果不太好，还有就是柱温以及载气流速分别影响气体分离的那些方面。比如出峰时间、峰型等。谢谢各位专家热心的帮助。

极性化合物完美分离保留 Atlantis色谱柱 给极性化合物和非极性化合物的保留提供了完美的平衡下载Atlantis色谱柱介绍资料(PDF) Atlantis 色谱柱使用高纯度硅胶及双键键合 C18 技术，并对填料的孔径大小、端基封口以及 C18 的键合密度进行优化，从而使 Atlantis 色谱柱具有: 对极性化合物保留能力强，在水流动相中性能稳定，低 pH 条件下色谱柱寿命长，与质谱兼容，色谱峰形优异，重现性好等优点。Atlantis 色谱柱目前提供3um和5um两种粒度填料，键合相类型则有dC18和HILIC（亲水交互作用）两种类型。Atlantis 资料目录：极性化合物的保留ATLANTI dC18 反相HPLC分析的理想选择极性化合物的保留增强色谱柱的长寿命和低pH稳定性为使用水溶液流动相优化的填料即使没有内嵌极性官能团也与水溶液兼容完全端基封口色谱柱的优势极性和非极性化合物保留的最佳平衡ATLANTI dC18 色谱柱在肽谱方面的应用ATLANTI dC18快速分析柱优异的重现性轻松放大、更长、可预计的色谱柱寿命保留和高上样量的优化亲水相互作用色谱柱（HILIC）ATLANTIS HILIC 硅胶色谱柱适合于在反相色谱柱上不能保留的化合物的分离HILIC能够提高ESI-MS的灵敏度简化样品制备过程Atlantis dC18 色谱柱使用过程中的问题解决方案与故障排除HILIC Silica 色谱柱HILIC与反相色谱互补的选择性提高LC/MS灵敏度世界一流的宽PH值 极限色谱柱 Waters XTerra色谱柱 PH1-12 无与伦比的批间重现性 极佳的对称性 纯水流动相 Symmetry色谱柱100%纯水流动相 宽PH值 XTerra RP纯水极限色谱柱 PH2-12SunFire色谱柱 最好的低PH值稳定性 最佳粒度和批次重现性 满足制药行业最严格的性能要求

[color=#444444]各位大佬，有机磷盐能用柱色谱进行分离吗。[/color]

某色谱柱长1m时，其分离度为1.0，问要完全分离时，色谱柱应为多少

本人最近用薄层板分离某样品，使用二氯甲烷、正己烷、乙醚组成的三元溶剂，极性参数约为2.2，能在薄层板上看见3个不太明显的斑点，但用此溶剂作为洗脱剂在柱色谱上分离时为何分得特别慢，第一层还比较好流出，但第二层和第三层虽然分层了，但很难流出，这是为什么？另外，一般在柱色谱柱中加入待测分离液体大约多少高度或多少体积？

就GC色谱柱固定相的膜厚而言，其可能会以不同方式影响早期和之后洗脱峰的柱效，k'值5时反之亦然。但是，除非大幅度改变膜厚度（例如，从0.1mm改变为1mm），否则改变膜厚度的效果不会太剧烈。　　这些值在等温分离中适用，而在梯度温度编程分离中则不同，但是趋势仍然适用。　　综上所述的信息将使我们可以估计我们选择用于分析的色谱柱的预期塔板数，从而可以评估效率，因此，偏离这些预期值的任何重大偏差都可以视为值得研究与故障排除。　　关于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]效率的基本理论的最后一部分是所选载气的影响及其通过色谱柱的流速。从图3可以看出，各种载气在不同载气线速度下的效率最高（最低高度相当于理论塔板（HETP，H））。线速度是色谱柱内径和流速的函数。　　我们之所以特别提到这一点，是因为有一些非常普遍的问题与无法通过仪器设置达到最佳效率有关。以下几点尤其值得注意：　　需要检查所用色谱柱的线速度和所需的载气流速，以确保该组合产生最佳效率和最低的板高度（如图3中的蓝色区域所示）。氢气显示出约50 cm / sec的最佳线速度，氦气显示出30 cm / sec的最佳线速度，氮气显示出15cm / sec的最佳线速度。载气的线速度将通过数据采集系统或仪器前面板显示。　　确保色谱柱尺寸在采集方法中设置正确（包括通过调整色谱柱长度进行的任何调整）。如果色谱柱尺寸不正确，则载气通过色谱柱的线速度将不正确，分离效率将受到影响。　　当然，如果将不正确的色谱柱尺寸或载气设置到仪器中，我们可能会看到除了色谱效率降低之外，保留时间也会改变，这些变化将是一个很好的诊断线索。　　除了这些方法上的考虑之外，还有哪些其他因素会导致分离效率降低？这个问题有很多答案，但是，我在下面概述了导致柱效率降低的一些常见问题。　　1 柱安装问题：　　确保正确准备（切割和清洁）GC色谱柱并以正确的方式将其安装到GC进样口和检测器中，这一点非常重要。色谱柱切割不良会导致样品入口内部分析物的转移变慢，如果该方法未建立热聚焦或溶剂聚焦过程，则可能导致峰变宽。通常，此问题还将伴随某种程度的峰分叉或拖尾。　　色谱柱在进样口和检测器中的正确定位也至关重要。入口色谱柱的位置将再次使分析物最佳地转移到色谱柱中，当以分流模式操作入口时尤其重要。色谱柱在检测器中的位置将决定色谱柱出口与仪器内检测区域之间未清扫体积的量。这一点特别重要，因为载气是存在分散展宽，任何空隙体积都会对系统效率产生不利影响。　　2 色谱柱污染和老化：　　所有GC色谱柱都会老化，并且使用寿命有限。随着时间的流逝，色谱柱的入口端可能会被样品基质成分覆盖，固定相可能会被破坏，这通常会导致固定相在色谱柱下方“蠕变”，从而形成一个较厚的“气泡状”可降分离效率的固定相区域。样品遇到的色谱柱初始区域对于色谱质量至关重要，因此，我们必须确保该区域的相质量是原始的。通常，通过修整较短的色谱柱并重新安装可以解决此问题，并且可能需要一部分或更多的色谱柱修整才能恢复性能。始终修剪最少的量以恢复良好的性能，如果进行了重大修剪，请不要忘记调整仪器内的色谱柱长度，以确保保留时间重现性和正确的载气线速度。在载气供应管线中安装气阱总是一个很好的解决办法，以确保色谱柱（相）的寿命（最小的水分和氧气阱），并确保以正确的方式调节色谱柱。　　适当的样品预处理对于色谱柱的使用寿命也很重要，在分析之前制备清洁的样品，会延长色谱柱的使用寿命，减少进样口维护操作。　　3 样品引入条件：　　影响分离效率的因素很多，都与将样品引入GC系统的方式直接相关。进样口衬管的清洁度和失活是主要考虑因素，在分流进样中，衬管中的任何活性部位的破坏可能会影响分析物向GC色谱柱顶部的转移，这在处理极性分析物时尤为明显。如果衬管清洁度不高或未显示出来，则衬管清洁度通常与峰拖尾有关仅出现轻微的活动迹象（失活涂层消失），然后可能会导致峰的总体变宽。确保衬管清洁，并在必要时定期更换衬管。　　以下是重要的要点总结：　　维持足够长的不分流时间，以将所有分析物转移至色谱柱，但也应足够短，以免溶剂从进样口缓慢流失，从而导致色谱破坏，柱箱的初始温度应至少比样品溶剂的沸点低10 ℃，固定相的极性应与样品溶剂的极性相匹配，反之，则应在进样口和分析柱之间留出至少1 m长的未涂层保留间隙。如果不满足，上述条件将导致分析物峰形展宽，这主要是由于分析物谱带从入口缓慢进入GC色谱柱时缺乏聚焦，因此效率会降低。　　1 热点：　　重要的是，在载气中通过系统的分析物必须以不间断的方式进行。因此，气流路径中任何比其周围环境凉爽的“斑点”都将破坏或减慢分析物通过色谱柱的通过，并有效地充当系统中死体积的区域。　　如果消除了进样口和GC色谱柱之间的热滞后，通常在进样口上会出现冷点-杯内有滞后的小杯位于进样口下方是有原因的，因此不应将其移除。位于检测器单元下方的绝缘层也是如此，这也是为什么进入MS检测器的任何传输线也要分别加热的原因，应仔细检查传输线温度以确保其温度至少位于顶部温度与您的烤箱程序一致！　　2 温度程序：　　由于不当的温度程序将造成许多不良的分离。当考虑初始柱箱温度和分批进样的保持时间时，尤其如此。如前所述，程序升温的分离确实会产生更高效的峰，尤其是对于后来的洗脱组分，但是确保初始程序条件适合被测样品和分离的要求以及分离条件至关重要。样品引入方法，不分流或不分流进样。对于分流进样，通常的规则是我们不希望过慢的“分析物”穿过色谱柱的过程太快，因为会发生过量的样品分散。理想情况下，初始温度应比色谱图中第一种组分的洗脱温度低45℃左右，这可以通过筛选实验计算得出（典型值为50 ℃至色谱柱的梯度上限，每分钟10℃）。然而，作为初始保留时间，这实际上是一个反复试验的问题，从保留1分钟开始，然后提高或降低初始保留时间，以评估对选择性，效率和分离度的影响。　　3 检测器采样率：　　任何色谱系统中峰的正确“建模”将取决于跨峰捕获的数据点的数量。对于高效技术（例如毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]），必须特别注意检测器的采样频率，而质谱检测器尤其如此，质谱检测器的固有采样频率往往较低，尤其是在全扫描模式下。如果检测器仅捕获跨越峰的几个数据点，尤其是当峰顶点被检测器遗漏时，则它们看起来可能比其宽。请按照制造商的说明为使用中的检测器找到最佳采样频率。　　无论如何，建议在新色谱柱保留常规方法的参考色谱图，该色谱图可用作评估柱效率随时间下降的幅度的参考。使用系统适应性测试（SST），也是明智的选择，以便在分析之前评估仪器的性能，并且柱效评估通常是SST的考察指标之一。　　尽管柱效是毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法成功分离的关键驱动力，但从以上讨论中可以明显看出，在解决低柱效问题时要考虑许多因素。大多数问题是由仪器设置和GC色谱柱的老化引起的，因此对方法中的设定点进行故障排除以及色谱柱与进样口维护，是进行柱效诊断研究的考虑要点。

色谱柱和毛细管柱哪个分离得好,为什么？

大家都用什么类型的色谱柱来分离分析蛋白质、多肽等生物大分子物质？国内越来越多的人在该领域进行研究，我也希望在生物大分子物质分离纯化方面能够与大家进行交流，请各位多多指教。 我公司代理销售专门用于分离生物大分子的高质量的离子交换柱与体积排阻柱，如有需要资料，请留下联系方式或与我联系。赛分销售与技术中心，0755-26031977 谭先生，sepax@126.com。 [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=9650]Sepax Proteomix离子交换色谱柱[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/images/upfile/2005115103055.pdf]Sepax Nanofilm SEC 体积排阻色谱柱[/url]

做中药产品，有什么好推荐的液相色谱柱，250 的那种，要分离度好点的有没有推荐下做中药分离度大点的色谱柱？有的告诉我下！

样品的有个主杂质峰，峰各个位置的紫外吸收不同表明杂质不纯，可能有多个杂质，目前用100水c18 250＊4.6洗脱，未分出杂质，各位大神还有没有别的方法分离一下

HP-5的色谱柱初始温度40，保持10min进样0.2ul，样品含有甲醇，乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯，丙酮五个峰在6min都出峰了，但都不能分开在不更换色谱柱的情况下，改变什么色谱条件可以改变分离效果？

购买的毛细管柱KB-WAX 60m*0.32mm*0.25μm分析邻二甲苯的各个组分，用了不到两个月，分离效果就变得很差，分离不开，而且拖尾很严重，柱温100℃恒温，进样器280℃，检测器280℃，拿出色谱柱，发现色谱柱上有很多黑点，请问是什么原因？

[font=arial, helvetica, sans-serif][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱购买网站：www.hplcs.cn[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]（Liquid Chromatography, LC）是一种用液体作为流动相的色谱技术，它以化学分子在移动相与定相之间的相互作用力不同而分离化合物。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱分离中，样品通过液体载流剂（流动相）在拥有化学成分不同的柱填充剂（定相）中分离。柱填充剂可以选择性地吸附特定成分，或者在某些情况下，通过反应改变样品分子的表面性质，以分离成分。[/font][font=arial, helvetica, sans-serif]具体来说，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱分离的原理是样品分子在流动相和定相之间发生不同的相互作用力。这些相互作用力包括静电作用、疏水作用、亲水作用、氢键作用、离子键作用、金属络合作用等。在柱填充剂中，这些样品分子会与柱填充剂中的固定相发生相互作用，被吸附或排斥，使得化合物在柱中的滞留时间不同。因此，化合物分离时，需要根据样品分子的特性和柱填充剂之间的相互作用选择不同的流动相和柱填充剂。[/font][font=arial, helvetica, sans-serif]总体而言，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱分离是一种在流动相和定相之间通过吸附、反应或其他相互作用力将样品分离的技术。这种分离方法主要用于药物分析、天然产物分析、食品化学分析、石油化学分析等各种领域。[/font][img=空柱管柱筛板5]https://www.hplcs.cn/uploads/4ec892851.jpg[/img]

三月份的时候用TG—5MS 弱极性柱子打的乙醇，峰的分离看上去还行，可前几天再去打了一遍，发现峰分离不开，色谱条件都没改，唯独是换了衬管，之前的衬管是分流/不分流衬管，，后面换的是分流直式衬管，结果发现甲醇和乙醇峰分不开，后面再把之前用的那个衬管换上，可以分离出来，可分离得不好，改了进样口温度为170度，其余条件不变后，稍微好点，附上图谱，和原色谱条件 进样口温度200 ， 分流流量 50 ，柱流量1 ，分流比50：1，吹扫3；检测器220℃，空气400， 氢气 40 ，尾吹30。 图一为三月打的色谱，图二为三月份用的衬管，图三为最近打的色谱，图四为最近用的衬管，图五为最近用三月份的衬管和修改了进样口为170摄氏度打的色谱。如果弱极性柱子能分离出乙醇甲醇峰，还有没有必要用强极性柱子，这些色谱图都是用弱极性柱子打的，以及换了衬管后分离不出峰，是不是分流比不对还是衬管不合适的问题，用了直通式的衬管打的，峰都是分离不开。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006101744320408_8756_4115190_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006101744321453_8101_4115190_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006101744325997_7107_4115190_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006101744330020_1747_4115190_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/06/202006101744341085_5576_4115190_3.png[/img]

[size=3] 问一下大家使用的分离柱大概可以用多久时间咯，我用的是万通的A supp4的柱子（250*4.0mm），每天都有使用，现在这根用了1年，分离效果已经很差了，氯峰和亚硝酸根的峰都有了重叠~~~麻烦大家帮帮忙，看我这根柱子使用的时间是不是比较短~谢啦。[/size]

分离甲氰菊酯、联苯菊酯、氟氰戊菊酯和氯氰菊酯用什么型号的色谱柱呢？现在用-1的色谱柱，联苯菊酯和甲氰菊酯分不开...求助各位前辈~

我是新手，刚接手液相，用的是沃特斯液相色谱仪，请问分析环丙沙星、土霉素用什么型号的柱子分离效果比较好，请推荐沃特斯或安捷伦色谱柱，万分感谢！！！

为什么可用分离度R作为色谱柱的总分离效能指标？

色谱分离原理比喻样品：胖丁丁，Luna样品性质点评，胖丁丁高大威猛略胖，Luna形象[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]佳……（只是为了剧情需要，大家多包涵，我吐口先 ：）1、反相柱分析机理：色谱柱：为一间屋子，有一门可进，一门可出，屋里有大群美女。结果：众美女都喜欢帅哥，不断有人拉Luna的手，并要求合影签名等等，拉胖丁丁的少了些，结果胖丁丁和Luna的距离越来越远，出门的时候，已经分离的很好拉，分离度3.0，柱效15万/m反相柱使用范围：1)、不可用于分离帅得离谱的人，会造成美女互相踩伤践踏拥挤的现象，造成柱堵塞，柱压升高；心脏不好的美女过于激动会造成休克，严重者甚至兴奋而死，造成柱子过早老化，降低柱效。另外分离此种物质会造成强吸附现象，出峰时间太久甚至不出峰，2)、不可用于分离过于猥琐丑陋可怕的人，结果会造成美女流失，柱效下降，出峰时间太快，影响分离效果，不过有方法可以恢复柱效，就说此地正莱尔斯丹的鞋正挥泪大甩卖，美女将迅速赶回，柱效即可恢复！注：此恢复方法并不适用于分离杀人犯强*犯！2、正相柱分离原理色谱柱：为一间屋子，有一门可进，一门可出，屋里有大群男子。结果：Luna被率先赶出，胖丁丁被同胞悻悻相惜，留下来吃完饭，吃完后大家含泪送别，分离度2.8，柱效13万/m正相柱分离注意事项：并不适用于分离BT男3、体积排租色谱分离原理色谱柱：钻溶洞结果：溶洞里洞有大有小，非常好玩，本以为Luna个头小灵活会早点爬出来，其实是体积庞大的胖丁丁先爬出来拉：）分离度2.5，柱效12万/m原因：两人一钻溶洞便发现仿佛回到了童年，逮着洞就想钻，不过胖丁丁突然发现自己已不是3岁时的胖胖拉，要是卡住不崴了嘛：）于是只好作罢，沿大路走出来了，扼腕叹息“时光蹉跎，青春少年已不复4、离子对色谱色谱柱：为一间屋子，有一门可进，一门可出，屋里有大群美女。胖丁痛苦回忆：众美女都喜欢帅哥，不断有人拉Luna的手，并要求合影签名等等，拉胖丁丁的少了些，结果胖丁丁和Luna的距离越来越远，出门的时候，已经分离的很好拉，分离度3.0，柱效15万/m胖丁对策：往事不堪回首，所以第二天再过这间屋子的时候，胖丁想到了他的必杀技——小胖。结果，胖丁抱着小胖和Luna一起穿过，众美女发现居然还有如此帅的小男生，纷纷过来掐掐小脸蛋，小胖搭讪美女的工夫也不含糊，“美女，敢吃青椒吗？”。老胖也不手软，为小胖报仇，把众美女脸蛋一一掐个遍 ，正当老胖还色迷迷的看着众美女的时候，Luna已经顺利离开了美女屋，最后小胖发话拉“爸爸，我饿！”老胖才恋恋不舍的抱起小胖，发话“最后再重掐一遍！……”Luna在门口，顿倒……拍摄花絮：1）观众问：美女为什么喜欢小帅哥不喜欢Luna？女人总是有母爱的，这是与生俱来的本能。所以此处美女年龄要大点：）2）排完这段之后，导演“卡”了N次，因为小胖被掐后没有表现出天真浪漫可爱的样子，反而哭了N次，最终排得小胖又累又饿又疼才终被导演放行！3）该CASE结束时，镜头正面是胖斑得意而归的表情，远端发现众美女正在揉脸，忿忿曰“死胖子，手够狠啊！……5555555！”影片悬念：胖斑得意是因为给小胖报仇呢？还是因为别的什么呢？……

色谱柱污染冲洗后，检测有主峰，峰面积比之前的，是不是分离度下降，或掺杂杂志峰，对检测含量有影响，如何看出有杂峰混合呢

谁能分享一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]柱分离的原理

大家都知道哪些较好的分离蛋白与多肽的液相色谱柱呢，可以罗列一下

离子色谱的分离机理主要是离子交换，有3种分离方式，它们是高效离子交换色谱（HPIC）、离子排斥色谱 （HPIEC）和离子对色谱 （MPIC）。那选用色谱柱是否要根据这个来呢？