色谱反向柱检测方案_色谱反向柱行业应用

使用高分辨色谱-质谱联用系统和最新反相色谱柱改善单克隆抗体和抗体偶联药物表征
本研究使用新型反相色谱柱来解决这些问题，以期改善抗体偶联药物的表征分析。在此之前，已有研究表明,抗体偶联药物因含有疏水性极强的Fd' 亚基(负载数为3)而更加难以进行有效分析。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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用于 mAb 和 ADC LC/MS 分离的 PLRP-S 聚合物型反相色谱柱——完整和片段化 mAb 与 ADC 的分析
本应用简报介绍了聚合物型反相色谱柱在单克隆抗体 (mAb) 和抗体药物偶联物 (ADC) 等生物大分子表征中的应用。通过研究完整和片段级 mAb 了解聚合物色谱柱的性能。结果表明该色谱柱具有卓越的分离性能，并适用于 mAb 和 ADC 的常规 LC/MS 分析。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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肽-类肽杂交体的反相快速色谱纯化
肽-类肽杂交体或“肽聚体”是寡聚合成的聚合物，其中一个或多个氨基酸被类肽亚单体取代。其关键结构特征是氨基酸的侧链从α -碳重排到肽键的相邻氮原子（参见图1）。通常，这类物质表现出与亲本肽相似的理化特性。肽-类肽杂交体的纯化可以通过具有出色回收率和分辨率的反相色谱法获得。通常，优化肽和类似化合物混合物的分离，最好是考虑调整参数，比如上样量和固定相的粒径。本应用将讲述，使用Teledyne ISCO的RediSep® C18反相色谱柱作为固定相，从肽副产物中分离出肽聚体。

厂商：培安有限公司

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【应用分享】罗替高汀对映异构体反相色谱的分离
上海汉尧使用YMC Chiral Art Cellulose-SB (250*4.6mm,5um)，P/N: KSB99S05-2546WT手性色谱柱，对罗替高汀中对映异构体检测中使用反相色谱模式进行分离。

厂商：上海汉尧仪器设备有限公司

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利用 HILIC 和反相色谱法分析促红细胞生成素糖肽和糖型
肽图分析是一种综合表征蛋白生物治疗药物的重要技术。通常采用反相UHPLC/HPLC 法进行分析，但是如果消化物中含有亲水性多肽，例如糖肽，则会丢失一些重要信息。本应用简报报导了将Agilent ZORBAX 快速高分离度300-HILIC 1.8 μ m LC 色谱柱与飞行时间质谱(TOF MS) 联用，可实现糖蛋白红细胞生成素（EPO，一种控制红细胞生成的糖蛋白激素）消化物的肽图分析。利用HILIC（亲水作用色谱）流动相中的高有机溶剂体系，可在HILIC 色谱柱上实现糖肽的有效溶解、保留及分离。本应用简报通过比较分离效果、序列覆盖率以及反相和HILIC 数据，证实了HILIC 是RPLC/MS 多肽分析的一种正交、互补的方法。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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使用柱前在线自动衍生-反相色谱法测定精草铵膦原药中 L-草铵膦的质量分数和比例
本研究利用自动进样器将草铵膦衍生后进样分析，完成对精草铵膦原药中 L-草铵膦的质量分数以及 L-草铵膦占整个草铵膦对映体的百分含量的测定。相比于手动衍生方法，自动进样器自动衍生方式可以准确地控制吸样量、混合速度和次数，衍生反应时间等参数，从而保证方法的稳定性以及高通量分析的可行性。从标样和样品的分析结果看，可以保证本文衍生方法峰面积重现性低于1.5% (n = 6)，保留时间重现性低于 0.1% (n = 6)。另一方面，衍生后的草铵膦具有很强的紫外吸收官能团，因此与手性分析直接测定相比，可以达到更低的检测限和定量限。同时，草铵膦衍生产物的极性减小，可以利用常规反相 C18 色谱柱进行保留和分离，使用成本也较手性柱有所降低。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱在 mAb 的 LC/MS 分析中的应用——一维和二维 LC/MS 研究
本应用简报介绍了经液相色谱分离的单克隆抗体 (mAb) 在质谱表征前，如何通过 Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱进行高效脱盐处理。高度重现的质谱和总离子流色谱图 (TIC) 表明 AdvanceBio 脱盐反相小柱具有始终如一的性能。Agilent 1290 Infinity 二维 LC/MS 解决方案可以使用中心切割技术对 mAb 进行在线脱盐和表征。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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使用新型反相色谱柱对蛋白治疗药物进行高通量、高分辨表征
综上所述，BioResolve RP色谱柱可协助色谱工作者提高分析通量和改善分离度，还有助于他们探索温度更低、MS兼容性更好的色谱条件。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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用1.8 μm反相(RP)色谱柱进行快速氨基酸分析 (AAA)
氨基酸分析(AAA)常被用作蛋白质组学和食品质量检测中测定样品中氨基酸(AA)准确组成的工具。为了及时分析样品，需要分析周期短；为了测定有限量的样品需要高灵敏度的方法；为了提高实验室效率，需要自动化的方法。本文报道了用新开发的1.8 μ m 粒径色谱柱测定氨基酸的新方法。这种专利的填料经过专门设计，其产生的反压比市场上任何其它亚2 微米填料都小，可以在400 bar HPLC 系统以及耐压更高的仪器上使用。我们采用惠普/安捷伦公司1988 年首次推出的OPA/FMOC化学衍生法，并改善了以前方法的精密度、分析时间、柱寿命和耐用性。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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反相高效液相色谱法检查中药保健品中8种激素类成
目的鉴别中药保健品中掺入的激素类成分。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(200 x 4.6 mm, 5 μm) ，流动相为乙腈/ 水，梯度洗脱，流速:1.0 mL/min，检测波长:240 nm，柱温为室温，进样量10 μm。结果8种激素类成分分离效果良好，保留时间合理。结论反相高效液相色谱法可检测出中药保健品中掺入的8种激素类成分。

厂商：迪马科技

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使用反相色谱分离水溶性维生素
近来，水溶性维生素的分析和定量在制药领域受到越来越多的关注。反相梯度（无离子对）分离可替代常规的等度分离，能够分析包含B 族维生素、泛酸、叶酸和维生素C 等物质的8 组分样品。本研究使用 ZORBAX SB-C8 柱进行分析。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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使用反相色谱法分析药用肥皂中的有效组分异丙基甲基苯酚
有关使用反相模式进行药用肥皂中IPMP分析，比较了两种检测方法，并且探讨了高效化分析。此次分析的试样中均不含有羟苯丁酯，因此使用混合标准溶液确认IPMP与羟苯丁酯的分离后发现，使用Shim-pack GIST C18可以达到2以上的分离度。此外，荧光检出器比UV检测器高约20倍的灵敏度。并且UV检测器也可定量分析添加量达到下限浓度0.1%的样品，以及可以根据UV光谱将IPMP与其他组分分离确认。因此，分析时可以使用PDA检测器提高鉴定精度，使用荧光检测器进行高灵敏度分析。并且通过使用同系列的高效分析色谱柱，在确保分离的情况下，实现分析时间及流动相消耗量分别减少约50%和约40%。

厂商：岛津企业管理（中国）有限公司/岛津（香港）有限公司

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【攻略】（原资生堂）ADME：键合金刚烷基色谱柱的使用攻略
C18色谱柱在反相色谱中应用最广泛，适用于分析很多化合物，但是在反相模式下很难对强极性化合物进行分析。而且随着药物代谢产物分析技术的发展，在以药代动力学为代表的多个相关领域中，对于含有多种成分的强极性代谢产物与强疏水性代谢前体进行共同分析的需求也越来越多。对此，敝社开发了导入与迄今为止的常规C18基团结构完全不同的金刚烷基填料。这种填料的官能团结构虽然与常规C18色谱柱的烷基不同，但仍然是烷基，因此完全可以作为反相色谱柱来使用。

厂商：三耀精细化工品销售（北京）有限公司

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固相萃取-反相高效液相色谱法检测水产品中孔雀石绿和结晶紫及其代谢物
迪马科技在参考《SN/T 1479-2004进出口水产品中孔雀石绿残留量检验方法》和《GB/T 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》的基础上开发出中性氧化铝和阳离子交换固相萃取柱串联净化后，反相高效液相色谱柱检测。该方法准确可靠，重复性好，回收率高，可作为水产品中孔雀石绿和结晶紫及代谢物的检测方法。

厂商：迪马科技

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用于 2D-LC/MS mAb 分析中在线脱盐的 Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱
本应用简报介绍了在第二维中使用脱盐小柱并利用 2D-LC/MS 配置进行单克隆抗体 (mAb) 的脱盐和表征。第一维分离中使用了离子交换 (IEX) 和亲和色谱（主要是基于盐的洗脱条件）。在第二维中，在进行质谱分析之前使用 Agilent AdvanceBio 脱盐反相小柱对馏分脱盐。结果表明脱盐小柱具有出色的性能，可提供高质量的质谱数据。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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使用反相色谱-单四极杆质谱分析喷气燃料中抗氧剂 2,6-二叔丁基对甲酚
本文采用 Agilent 6100 系列单四极杆质谱，反相色谱法，建立了航空煤油中抗氧剂 2,6-二叔丁基对甲酚的检测方法，检测限为 0.35 μ g/mL，线性范围为 0.35 μ g/mL-50 μ g/mL，保留时间 RSD 为 0.03%，峰面积 RSD 为 1.72%。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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利用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD 二苯基亚 2 μm 色谱柱分析 IgG1 中的二硫键 (PDF)
本应用简报报导了一种简易的反相 HPLC 方法，用于分析单克隆抗体 (mAb) 中的二硫键。其中通过 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD300 二苯基亚 2 μm 粒径色谱柱实现分离。在完整蛋白质及肽段消化物的反相分离中，二苯基 1.8 μm 色谱柱能够提供 UHPLC 级别的性能。当与 UHPLC 仪器联用时，这种通用型色谱柱可在更短的分析时间内获得更全面的表征结果。1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统的耐压能力高达 600 bar，能够承受采用更低粒径（低至 1.7 μm）的新型色谱柱技术所要求的更高压力。

厂商：天津市普伦科技开发有限公司

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利用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD 二苯基亚 2 μm 色谱柱分析 IgG1 中的二硫键 (PDF)
本应用简报报导了一种简易的反相 HPLC 方法，用于分析单克隆抗体 (mAb) 中的二硫键。其中通过 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD300 二苯基亚 2 μm 粒径色谱柱实现分离。在完整蛋白质及肽段消化物的反相分离中，二苯基 1.8 μm 色谱柱能够提供 UHPLC 级别的性能。当与 UHPLC 仪器联用时，这种通用型色谱柱可在更短的分析时间内获得更全面的表征结果。1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统的耐压能力高达 600 bar，能够承受采用更低粒径（低至 1.7 μm）的新型色谱柱技术所要求的更高压力。

厂商：天津市普伦科技开发有限公司

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使用BioResolve RP色谱柱对完整抗体进行高效分离
本研究开发了一种能够高效分离完整抗体的反相分离方法，该方法充分利用了BioResolve RP色谱柱专为这类应用而设计的各项特性。BioResolve RP色谱柱中填充有经过优化的硅基实心核颗粒，这些颗粒被具有450 Å 孔径的创新多苯键合相多孔涂层包裹，有效提高了完整抗体分离的效率和选择性。与目前业内先进的多孔和非多孔色谱柱相比，这种色谱柱在分离度、峰宽、峰形和残留方面的性能均有所提升。文中所示的数据表明，与传统的RP色谱柱相比，BioResolve RP色谱柱所得的峰宽窄20%，残留降低50%，对完整抗体的分离能力大幅提升，是抗体表征和分析的理想工具。

厂商：沃特世科技（上海）有限公司(Waters)

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利用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD 二苯基亚 2 μm 色谱柱分析 IgG1 中的二硫键
本应用简报报导了一种简易的反相 HPLC 方法，用于分析单克隆抗体 (mAb) 中的二硫键。其中通过 Agilent 1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统及 Agilent ZORBAX RRHD 300 二苯基亚 2 μ m 粒径色谱柱实现分离。在完整蛋白质及肽段消化物的反相分离中，二苯基 1.8 μ m 色谱柱能够提供 UHPLC 级别的性能。当与 UHPLC 仪器联用时，这种通用型色谱柱可在更短的分析时间内获得更全面的表征结果。1260 Infinity 生物惰性液相色谱系统的耐压能力高达 600 bar，能够承受采用更低粒径（低至 1.7 μ m）的新型色谱柱技术所要求的更高压力。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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岛津：反相离子对色谱法检测冰淇淋中三聚氰胺
对于许多食品，人们需要获悉其中蛋白质的含量，但是直接测定蛋白质的含量比较困难，通常通过测定氮原子的含量来间接推算其中蛋白质的含量。三聚氰胺（含氮量66%)与蛋白质（平均含氮量16%）相比含有更高比例的氮原子，因此被一些造假者利用，添加在食品中以造成食品蛋白质含量较高的假象。继2008年9月国内发生三鹿奶粉三聚氰胺事件后，伊利雪糕、大白兔奶糖、亨氏米粉、立顿奶茶等奶制品也相继被检测出含有三聚氰胺，严重损害了国内消费者的利益。本文参考国标GB/T 22388—2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法中的样品提取纯化过程，采用反相离子对色谱法测定冰淇淋中三聚氰胺含量，重现性好，灵敏度高。

厂商：岛津
氨基酸中柱前衍生检测方案(液相色谱仪)
LC－2010的柱前衍生氨基酸分析柱前衍生氨基酸分析是先将氨基酸衍生成具有可见光吸收或荧光发射的衍生物，然后在反相柱上分离，它不需要柱后反应装置，因此也可以在配有相应检测器的普通高效液相色谱仪上分析。为了解LC-2010高效液相色谱仪在使用柱前衍生法进行氨基酸分析时的精密度和稳定性，我们作了以下实验。岛津GC-2010气相色谱仪

厂商：苏州莱顿
【应用分享】氟比洛芬手性异构体正相及反相两种不同模式的分离
上海汉尧选用Chiral Art Amylose-SA (250*4.6mm,5um)，P/N: KSA99S05-2546WT手性色谱柱，对氟比洛芬两种异构体可以分别使用正相及反相两种不同的分离模式及液相条件进行分离，异构体分离度均大于1.5，结果表明相关色谱柱满足分离要求。

厂商：上海汉尧仪器设备有限公司

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参考GB/T 33108-2016采用TSKgel色谱柱测定海参皂苷
本实验中采用的TSKgel ODS-100V（4.6 mmIDX15cm,5um)反相色谱柱，可以将海参皂苷水解后的各单糖衍生物分离，且对喹诺糖衍生物有较高的理论塔板数，峰型对称，完全符合国家标准GB/T 33108-2016海参及其制品中海参皂苷的测定的要求。

厂商：东曹（上海）生物科技有限公司

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TSKgel色谱柱参考GB 5009.169-2016检测牛磺酸
本文采用TSKgel ODS-100Z（4.6 mmIDX250mm,5um）反相色谱柱，参照国标GB 5009.169-2016对奶粉样品中牛磺酸含量进行了测定（荧光检测）。结果表明，该分析方法可以满足国标对牛磺酸分析测定的要求。

厂商：东曹（上海）生物科技有限公司

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用 ZORBAX Eclipse PAH 色谱柱分离多环芳烃 (PAH) — 从 6 种到 24 种 PAH 进行分析
使用ZORBAX Eclipse PAH 色谱柱和乙腈/水流动相通过反相液相色谱(HPLC) 分离各种多环芳烃(PAH) 混合物。这些分析包括从6 种到24 种不等的PAH 混合物的分离。为了分离这一系列的PAH，需要调节梯度以及温度来优化分离度。对于这些多环芳烃的分离，各种规格的多环芳烃色谱柱能够为食品和环境化学家提供最佳的色谱柱选择，从而改进和优化了分离度、分析时间、检测器选择、样品量或系统压力。

厂商：安捷伦科技(中国)有限公司

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采用TSKgel色谱柱检测化妆品中维生素D2和维生素D3
本应用采用东曹反相色谱柱TSKgel ODS-120T(4.6 mm I.D.×25 cm，5 μm)，分析维生素D2、D3的分离效果，标准曲线符合DB 37/T 3309-2018标准，达到要求。

厂商：东曹（上海）生物科技有限公司

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采用TSKgel色谱柱参考2015版《中国药典》分析重组人表皮生长因子凝胶
参照2015版中国药典三部，采用反相HPLC分析法，使用东曹TSKgel Protein C4-300色谱柱（3μ m，4.6mm I.D.× 150mm）分析重组人表皮生长因子凝胶（酵母），柱效可达到4000以上，远高于标准值500，达到药典标准的分离要求。

厂商：东曹（上海）生物科技有限公司

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亲水交互作用鄄反相二维液相色谱鄄串联质谱同时测定乳制品中20 种抗生素残留
建立了亲水作用鄄反相二维液相色谱鄄串联质谱测定乳制品中茁鄄内酰胺、四环素、大环内酯、氨基糖苷、酰胺醇、喹诺酮和磺胺7 类20 种抗生素残留的方法。样品与C18 和CN 填料混合,进行基质固相分散萃取,以乙腈和水洗脱,洗脱液旋转蒸发至近干,残渣流动相溶解后分析。对样品前处理条件、色谱流动相、质谱参数进行了优化。各分析物回归方程的相关系数为0. 9945 ~0. 9998 以定量离子信噪比为3 和10 时所对应的样品中分析物浓度计算检出限和定量限,分别为0. 10 ~ 2. 40 滋g/ kg 和0. 33 ~ 7. 92 滋g/ kg。奶粉和牛奶中添加水平25 滋g/ kg 的加标回收率分别为72. 5% ~97. 2%和70. 1% ~96. 8%,相对标准偏差为4. 2% ~8. 8%和3. 7% ~9. 9%。本方法应用于实际样品测定,结果满意。

厂商：赛默飞色谱与质谱

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柱切换离子色谱法测定乙酰苯胺中的硫酸根离子
采用国产离子色谱仪（CIC-200型）建立了测定乙酰苯胺中硫酸根离子的离子色谱分析方法。使用SH-RP (4.6 mm×150mm)反相柱将所需分析的SO42-离子从乙酰苯胺中分离出来，再将被分离组分通过阴离子交换富集柱SH-AC-1（4.6 mm×50mm）进行富集，最后将富集后的样品通过SH-AC-1(4.6 mm×250mm)色谱柱进行分离，抑制型电导检测器进行检测。用于实际样品分析时，SO42-的加标回收率分别为92.7-97.7%。线性良好，且具有较好的重现性和较低的检出限。

厂商：青岛盛瀚

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