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质谱高通量

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  • 药物高通量筛选技术

    简单介绍一下关于药物高通量筛选技术的知识一.概念高通量筛选(High throughput screening,HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础,以微板形式作为实验工具载体,以自动化操作系统执行试验过程,以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据,以计算机对实验数据进行分析处理,同一时间对数以千万样品检测,并以相应的数据库支持整个体系运转的技术体系。二. 高通量筛选技术体系的组成1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可分为常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具,简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统的组分,根据需要可配置加样、冲洗、温解、离心等设备以进行相应的工作。3.高灵敏度的检测系统检测系统一般采用液闪计数器、化学发光检测计数器、宽谱带分光光度仪、荧光光度仪等。4.数据库管理系统数据库管理系统承担4个方面的功能: 样品库的管理功能;生物活性信息的管理功能; 对高通量药物筛选的服务功能; 药物设计与药物发现功能。三. 高通量筛选模型常用的筛选模型都在分子水平和细胞水平,观察的是药物与分子靶点的相互作用,能够直接认识药物的基本作用机制。1. 分子水平的药物筛选模型:受体筛选模型;酶筛选模型;离子通道筛选模型1.1受体筛选模型:指受体与放射性配体结合模型。以受体为作用靶的筛选方法,包括检测功能反应、第二信使生成和标记配体与受体相互作用等不同类型。1.2酶筛选模型:观察药物对酶活性的影响。根据酶的特点,酶的反应底物,产物都可以作为检测指标,并由此确定反应速度。典型的酶筛选包括1) 适当缓冲液中孵化;(2)控制反应速度,如:温度,缓冲液的pH值和酶的浓度等;(3)单时间点数器, 需测量产物的增加和底物的减少。1.3离子通道筛选模型: (1)贝类动物毒素的高通量筛选,其作用靶为Na+通道上的蛤蚌毒素结合位点,用放射性配体进行竞争性结合试验考察受试样品。(2)用酵母双杂交的方法高通量筛选干扰N型钙通道β3亚单位与α1β亚单位相互作用的小分子,寻找新型钙通道拮抗剂。2.细胞水平药物筛选模型观察被筛样品对细胞的作用,但不能反映药物作用的具体途径和靶标,仅反映药物对细胞生长等过程的综合作用。包括: 内皮细胞激活; 细胞凋亡; 抗肿瘤活性; 转录调控检测; 信号转导通路; 细菌蛋白分泌; 细菌生长。四.问题及展望高通量筛选技术与传统的药物筛选方法相比有以下几个优点:反应体积小;自动化;灵敏快速检测;高度特异性。但是,高通量筛选作为药物筛选的一种方法,并不是一种万能的手段,特别是在中药研究方面,其局限性也是十分明显的。首先,高通量筛选所采用的主要是分子、细胞水平的体外实验模型,因此任何模型都不可能充分反映药物的全面药理作用;其次,用于高通量筛选的模型是有限的和不断发展的,要建立反映机体全部生理机能或药物对整个机体作用的理想模型,也是不现实的。但我们应该相信,随着对高通量筛选研究的不断深入,随着对筛选模型的评价标准、新的药物作用靶点的发现以及筛选模型的新颖性和实用性的统一,高通量筛选技术必将在未来的药物研究中发挥越来越重要的作用。

  • 人血清中多种农兽药及其代谢物的高分辨、高通量检测技术与方法学研究

    [align=center][size=16px]人血清中[/size][size=16px]多[/size][size=16px]种农兽药及其代谢物的高分辨、高通量检测技术与方法学研究[/size][/align][size=16px]通过制备具有[/size][size=16px]多功能化超大比表面积[/size][size=16px]的[/size][size=16px]CMPs[/size][size=16px]和桥连硅烷化试剂修饰磁性纳米富集净化材料,并将其制备成萃取分离装置,构建集样品富集浓缩、高效净化的集成化前处理平台。进一步利用[/size][size=16px]LC-QTOF-MS[/size][size=16px]和[/size][size=16px]LC-Q Exactive Orbitrap-MS/MS[/size][size=16px]高分辨质谱,建立[/size][size=16px]300[/size][size=16px]种以上农兽药及其主要代谢物的标准质谱匹配信息库和保留时间数据库,并初步用于京津冀地区人血清样本中农兽药及代谢物的全面筛查,构建不同检测技术下农兽药化学污染物在人体内蓄积水平数据库,实现农兽药残留数据获取、污染等级判定、多维度表达及分析的自动化,为后续规模化样品分析和农兽药残留与疾病的关联性分析提供技术支撑。[/size][size=16px]2.1 [/size][size=16px]研究内容[/size][size=16px]([/size][size=16px]1[/size][size=16px])人血清中农兽药及代谢物高效净化技术研究[/size][size=16px]针对[/size][size=16px]人血清中农兽药及代谢物[/size][size=16px]残留水平低、结构特性多样等特征[/size][size=16px],以多粒径磁性纳米粒子为基质,制备具有超大比表面积的[/size][size=16px]桥连硅烷化试剂修饰材料和[/size][size=16px]共轭微孔聚合物材料,提高农兽药及[/size][size=16px]其代谢物的富集效率;通过修饰引入多羟基、磺酸基、卤代烃等多功能化基团,实现[/size][size=16px]不同结构特征[/size][size=16px]农兽药及其代谢物的高通量富集;将研制的富集净化材料进一步制备成萃取分离装置,构建集样品富集浓缩、高效净化的集成化前处理平台,实现人血清中农兽药及代谢物的高通量靶向[/size][size=16px]/[/size][size=16px]非靶向富集净化。[/size][size=16px]([/size][size=16px]2[/size][size=16px])人[/size][size=16px]血清中农兽药及代谢物的高通量筛查与定量分析方法研究[/size][size=16px]针对人血清中农兽药代谢复杂、残留水平较低的特点,利用[/size][size=16px]LC-QTOF-MS[/size][size=16px]和[/size][size=16px]LC-Q Exactive Orbitrap-MS/MS[/size][size=16px]高分辨质谱,建立[/size][size=16px]300[/size][size=16px]种以上农兽药及主要代谢物的标准质谱匹配信息库和保留时间数据库;结合课题开发的高通量农兽药残留分离富集前处理技术,建立覆盖[/size][size=16px]300[/size][size=16px]种以上农兽药及代谢物的血清样品高通量非靶向高分辨质谱检测技术,实现人血清农兽药残留由靶向检测向非靶向筛查的跨跃式发展;对所建立的方法进行方法学验证评价,形成方法标准操作规程。[/size][size=16px]([/size][size=16px]3[/size][size=16px])人血清样本中农兽药及代谢物全面筛查与数据库构建[/size][size=16px]基于所研发的人血清中[/size][size=16px]300[/size][size=16px]种农兽药及代谢物高通量非靶向高分辨质谱检测技术,开展京津冀地区人血清样本中农兽药及代谢物的初步筛查,构建不同检测技术下农兽药化学污染物在人体内蓄积的数据库,实现农兽药残留数据获取、污染等级判定、多维度表达及分析的自动化[/size][size=16px],[/size][size=16px]为后续规模化样品分析和农兽药残留与疾病的关联性分析提供技术支撑。[/size][size=16px]2.2 [/size][size=16px]研究目标[/size][size=16px]([/size][size=16px]1[/size][size=16px])针对人血清基质复杂,农兽药及代谢物残留浓度低、形态多样化等特点,筛选并制备出[/size][size=16px]多功能化超大比表面积磁性纳米材料[/size][size=16px],[/size][size=16px]实现不同结构特征的农兽药及其代谢物的[/size][size=16px]高效、[/size][size=16px]高通量富集[/size][size=16px]。[/size][size=16px]([/size][size=16px]2[/size][size=16px])[/size][size=16px]建立人血清中农兽药及其代谢物的高通量非靶向高分辨质谱检测技术,实现农兽药及其代谢物的快速筛查与精准定量分析。[/size][size=16px]([/size][size=16px]3[/size][size=16px])通过结合开发的高通量非靶向检测技术,初步用于京津冀地区人血清[/size][size=16px]中[/size][size=16px]农兽药的高通量非靶向高分辨质谱检测,构建人血清中农兽药残留蓄积形态数据库,筛查出高残留的农兽药及其代谢物。[/size][size=16px]([/size][size=16px]1[/size][size=16px])[/size][size=16px]通过设计开发[/size][size=16px]多功能化超大比表面积磁性纳米材料[/size][size=16px],实现[/size][size=16px]复杂[/size][size=16px]的人[/size][size=16px]血清[/size][size=16px]样本中[/size][size=16px]结构特征[/size][size=16px]多样[/size][size=16px]的农兽药及其代谢物[/size][size=16px]高效富集和净化。[/size][size=16px]([/size][size=16px]2[/size][size=16px])针对农兽药及代谢物种类繁多、性质各异限制其高通量非靶向筛查的问题,通过建立[/size][size=16px]300[/size][size=16px]种以上农兽药及代谢物的标准质谱匹配信息库和保留时间数据库,为农兽药高通量非靶向筛查方法的研发奠定基础。[/size]

  • 何谓“高通量”,你真正了解这个仪器行业词汇吗

    发现现在很多仪器设备都用“高通量”这个词汇,比如:高效液相色谱仪高通量自动进样器高通量密闭微波消解系统高通量组织冷冻研磨仪 高通量平行色谱分离系统何谓“高通量”,你真正了解这个仪器行业词汇吗?

  • 高通量抗体库技术的特点及筛选步骤简要分析

    [font=宋体]高通量抗体库技术是一种创新的生物技术,能够高效快速地开发单克隆抗体。通过使用高通量抗体库技术,研究人员可以同时对多个抗原进行免疫反应,从而在短时间内产生大量的单克隆抗体。下面为大家介绍其特点和筛选步骤:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]高通量抗体库技术的特点包括:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]高通量:该技术可以同时对多个抗原进行免疫反应,从而在短时间内产生大量的单克隆抗体。[/font][font=宋体]快速:通过该技术,可以在短时间内得到针对特定抗原的单克隆抗体。[/font][font=宋体][font=宋体]高效:该技术采用合成生物学细胞重编程方法,建立了能够识别多样性未知抗原的合成免疫细胞组库,可以识别超过[/font][font=Calibri]10^6[/font][font=宋体]种抗原,大大提高了单克隆抗体的开发效率。[/font][/font][font=宋体]无偏见:该技术可以对任何抗原进行免疫反应,不受免疫原性限制。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]高通量抗体库技术的筛选步骤包括:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]提取抗原:从目标组织、细胞器或全蛋白组中提取蛋白。[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白组分拆分:将蛋白组按照分子量进行拆分,每个组分包含[/font][font=Calibri]300-500[/font][font=宋体]个蛋白,从而降低蛋白组的复杂度并保证不同分子量的蛋白均获得满意的免疫效果。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]免疫小鼠:将拆分后的蛋白组分分别免疫小鼠,制备[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]万[/font][font=Calibri]-5[/font][font=宋体]万个特异性识别目标蛋白组的单抗文库。[/font][/font][font=宋体]抗体筛选:通过抗体筛选试验,选择能够与目标抗原特异性结合的抗体。[/font][font=宋体]抗体优化:对筛选得到的抗体进行优化,以提高其亲和力和特异性。[/font][font=宋体]抗体鉴定:通过生物学实验和临床试验等方法,对优化后的抗体进行鉴定,确认其功能和特性。[/font][font=宋体]应用研究:将鉴定合格的抗体应用于研究和临床实践中,以解决实际问题。[/font][font=宋体]总之,高通量抗体库技术是一种高效、快速、无偏见的技术,可以用于开发针对任何抗原的单克隆抗体。其筛选步骤包括提取抗原、蛋白组分拆分、免疫小鼠、抗体筛选、抗体优化、抗体鉴定和应用研究等步骤。该技术的应用范围广泛,可以应用于基础研究、药物研发、诊断试剂开发等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了满足抗体药物筛选等对抗体高通量、快速表达不断增长的需求,义翘神州的重组抗体[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量表达纯化服务[/b][/url]结合了专业的高通量基因合成、载体构建和优化的瞬时抗体表达技术,充分利用义翘优势哺乳动物细胞表达平台,能够提供在[/font][font=Calibri]HEK293/CHO[/font][font=宋体]细胞中快速生产重组抗体服务。详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service[/font][/font]

  • 【转帖】中国计量院高通量蛋白质检测技术研究取得重大突破

    “高通量蛋白质分离检测关键技术研究取得的突破给我们很大鼓舞,但这只是我们大规模系统集成研究的一部分,我们正在着力于系统后续的研究。相信,在不久的将来,这套集成系统将为蛋白质组的分析提供一个完整规范的平台。”谈起不久前通过项目鉴定的《高通量蛋白质分离检测关键技术研究》和取得的成果,中国计量科学研究院生物、能源与环境研究所科学仪器研究室主任刘新志显得踌躇满志。  随着全球性的国际人类基因组计划的初步完成,一个以蛋白质和基因调节为研究重点的后基因组时代已经拉开序幕。蛋白质是生理功能的执行者,是生命现象的直接体现者,对蛋白质结构和功能的研究将直接阐明生命在生理或病理条件下的变化机制。伴随人类基因组研究而发展的蛋白质组学则是研究细胞内各种蛋白质的组成及其活动规律的一门新兴学科。后基因组时代,蛋白质组将成为重点研究方向之一,并将有力推动生物产业的持续性高速发展。  “蛋白质组研究是一门极为年轻的科学,从诞生到蓬勃发展也不过七八年历史,我国的研究时间也只有六年而已。但其发展速度非常迅猛,应用范围也非常广泛。”刘新志说。  蛋白质组研究对生命科学、化学分析、食品安全、人类健康等诸多领域都有着重要意义。例如,几乎所有的药物都是通过蛋白质发挥作用,蛋白质组学在药学研究中的应用不仅可直接产生新的药物,更重要的是可减少对新药开发研制的盲目性,大大加速和简化新药研制的过程;通过对疾病不同阶段蛋白质组的研究,还可帮助诊断和防治疾病。目前,蛋白质组学已成功用于肿瘤、糖尿病、艾滋病、关节炎等多种疾病的诊断和治疗。  “蛋白质组研究的核心技术分为两个部分:蛋白质分离技术和蛋白质鉴定技术。实验数据表明,现阶段依赖质谱分析的蛋白质鉴定技术的发展水平远高于蛋白质分离技术的发展水平。但对大分子、复合物、细胞的分离纯化是进行更详尽的生物鉴定和工程化应用所必需的重要步骤,如果不能快速有效地进行蛋白质分离,后续的鉴定也无法进行。所以,蛋白质组研究的瓶颈来自于蛋白质分离技术的限制。”刘新志打了一个比喻:“蛋白质鉴定技术好比一条宽敞的高速路,但通往这条高速路的必经路——蛋白质分离技术就好比一条小胡同,这条小胡同严重影响了车辆的快速通行。”  据介绍,目前蛋白质分离技术主要有两种——双向电泳技术和高效液相色谱技术。“这两种传统技术与生俱来的缺点是很难分解出难溶性蛋白,而且不能分解出不溶性蛋白。要打通这条小胡同,就必须找到一种新的方法、研制一种新的装置,能够有效地分离出难溶性蛋白和不溶性蛋白,并且要实现高通量快速分离。”刘新志介绍。  由中国计量科学研究院完成的《高通量蛋白质检测关键技术的研究》课题在解决蛋白质的快速分离技术方面取得了重大突破。研究建立了以反向加样连续自由流电泳(FFE)分离方法为核心的高通量蛋白质分离检测技术中最为关键的高稳定度自由流电泳(HSFFE)装置。“该装置最显著的特点就是解决了两种传统的分离技术所不能解决的问题——从蛋白混合物中有效地分离出可溶性蛋白、难溶性蛋白、不溶性蛋白,实现了对这三种蛋白的完全分离;其次,装置的通量高,速度快,能够满足蛋白质快速分离鉴定的需要。”刘新志说。

  • 高通量(场发射)扫描电子显微镜技术进展

    分享一篇关于高通量SEM的文献。《电子显微学报》2023年4月,第42卷第2期。本文重点阐述高通量扫描电镜概念与发展的过程,具体介绍了高通量扫描电镜拟要解决的问题和对应的设计思路,给出了综合数据通量的定义和影响因素。同时阐述了相应的实现手段,分别从重要模组角度介绍高通量扫描电镜的核心性能。通过实际案例计算,分析比较了高通量扫描电镜与标准场发射扫描电镜间的结果差异。探讨了高通量扫描电镜适合应用的领域,同时指出了目前的设计还存在的不足并展望该技术今后的发展前景。

  • 义翘神州:高通量重组抗体生产的优势及常见问题解答

    [font=宋体][font=宋体]在生物医药领域,抗体的质量和生产效率对于科研和临床应用至关重要。义翘神州作为一家领先的生物技术公司,其高通量重组抗体生产技术备受瞩目。通过该技术,抗体生产周期最快仅需[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]天,极大地提升了抗体研发的效率和速度。下面将详细介绍义翘神州的高通量抗体表达服务内容,并解答常见问题([/font][font=Calibri]FAQ[/font][font=宋体])。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、高通量抗体表达服务内容介绍:[/font][/font][font=宋体]①基因合成及密码子优化(可选)[/font][font=宋体]客户可提供抗体序列或质粒作为起始材料。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②载体构建[/font][font=宋体]克隆至表达载体[/font][font=宋体]质粒测序[/font][font=宋体]质粒制备[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③高通量表达及纯化[/font][font=宋体][font=宋体]瞬时转染[/font][font=Calibri]HEK293/CHO[/font][font=宋体]细胞[/font][/font][font=宋体]纯化抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][font=Calibri]QC[/font][font=宋体]分析[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]UV[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]SEC-HPLC ([/font][font=宋体]可选[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体]内毒素分析(可选)[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤交付内容[/font][font=宋体]纯化抗体[/font][font=宋体][font=宋体]质量检验报告[/font] [font=Calibri](CoA)[/font][/font][font=宋体][font=宋体]克隆于商业表达载体质粒[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]可选[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体][font=宋体]细胞培养液上清[/font] [font=Calibri]([/font][font=宋体]可选[/font][font=Calibri])[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、为什么选择义翘神州的高通量重组抗体表达服务?[/font][/font][font=宋体]义翘神州提供的高通量抗体表达服务具有以下优势:[/font][font=宋体]? 我们拥有北京和泰州双生产中心,近地化服务,更便捷,满足您生产的要求。[/font][font=宋体][font=宋体]? 速度快,从基因序列到纯化抗体最快[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]天完成。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 高通量适用范围广,可适用于常规[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]型抗体的表达以及单链抗体的表达,[/font][font=Calibri]1000[/font][font=宋体]抗体[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]项目生产能力。[/font][/font][font=宋体]? 自动化水平高,配备自动化构建平台,更准确高效。[/font][font=宋体]? 义翘神州成熟且先进的哺乳动物细胞表达平台,适用于各种类型抗体的表达。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、高通量抗体生产一般使用什么培养体系和纯化方法?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州的高通量抗体的培养主要以摇瓶为主,利用[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞培养实现抗体的高通量表达。原因有以下两点:该培养体系对比孔板,体积更大,获得抗体的收率较高;摇瓶培养体系获得的产品信息对后期放大更有相关性。通常使用[/font][font=Calibri]protein A/G[/font][font=宋体]纯化方式获取纯度相对较高的抗体,同时也会根据不同复杂抗体的类型应用离子交换、分子筛等方法进行纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、义翘神州的高通量抗体表达服务可以生产哪些抗体类型,具体流程是什么样的?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州可生产全长、[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VHH[/font][font=宋体]、嵌合抗体多种形式,我们可以根据客户的具体要求最快[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]天时间实现定制化从基因到抗体的高通量生产,满足您的生产需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘的重组抗体[url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][b]高通量表达纯化服务[/b][/url]结合了专业的高通量基因合成、载体构建和优化的瞬时抗体表达技术,充分利用义翘优势[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/mammalian-cell-expression][b]哺乳动物细胞表达平台[/b][/url],能够提供在[/font][font=Calibri]HEK293/CHO[/font][font=宋体]细胞中快速生产重组抗体服务。详情关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service[/font][/font]

  • 高通量微阵列清洗器优势及应用

    [url=http://www.f-lab.cn/microarray-manufacturing/washstation.html]高通量[b]微阵列芯片清洗器[/b][/url]专业为[b]玻片清洗[/b]和[b]微阵列芯片清洗[/b]而设计的[b]玻片清洗器[/b],拥有耐用的载玻片架,可容纳1-25个25×76毫米规格的玻璃玻片微阵列,可浸入到500ml的缓冲溶液槽。[b]高通量微阵列清洗器特色[/b]大大了微阵列芯片干燥前的清洗效率和效果。该缓冲溶液槽配备有磁力搅拌棒和盖子,可以防止缓冲物蒸发。含独立的缓冲液加快微阵列芯片的处理和清洗速度。是提高基因学,生物医学,制药和农业研究的质量和速度的理想的工具[img=高通量微阵列清洗器]http://www.f-lab.cn/Upload/microarray-wash.jpg[/img]高通量微阵列清洗器:[url]http://www.f-lab.cn/microarray-manufacturing/washstation.html[/url]

  • [资料]:高通量药物开发-waters

    waters工程师给的高通量药物开发[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=15542]waters-高通量药物开发[/url]

  • 高通量重组蛋白表达技术在大肠杆菌中的应用

    [b][font=宋体]前言[/font][/b][font=宋体]在当今的生物技术领域,高通量重组蛋白表达技术在基础研究和商业应用中扮演着非常重要的角色。随着后基因组时代的到来,研究人员对大规模蛋白表达和纯化的需求日益增长,大肠杆菌因其易于遗传操作、低成本、生长迅速成为生产重组蛋白的首选微生物宿主。本文将综述大肠杆菌中高通量重组蛋白表达的现状和未来展望,探讨从目的基因获取到蛋白表达和纯化的先进技术,并讨论如何克服[/font][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-expression][u][font=宋体][color=#0000ff]重组蛋白表达[/color][/font][/u][/url][font=宋体]过程中的挑战。[/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]高通量重组蛋白表达技术[/font][/b][font=宋体][font=宋体]高通量研究是一种能够同时检测数千个生物分子,使大规模重复成为可能的研究。[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]世纪[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代初,第一台[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]测序仪被开发出来,人类基因组计划随之开启,高通量技术在[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]、蛋白质、脂质和代谢物检测的需求也急剧增加。自该技术提出以来,大肠杆菌中高通量重组蛋白表达和纯化已经得到了广泛的应用。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri]1. [/font][b][font=宋体]目的基因的制备[/font][/b][font=宋体][font=宋体]获取目的基因是重组蛋白表达的第一步。传统的方法是从[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体]文库中直接克隆基因,但这种方法存在局限性,如从库中筛选基因较为费时以及难以添加融合标签等。高通量[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]技术是目前获取目的基因最常用的技术,设计引物并调整好参数后,即可在[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]仪中自动完成目的基因的制备。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri] [/font][font=Calibri]2. [/font][b][font=宋体]表达载体的高通量构建[/font][/b][font=宋体][font=宋体]研究人员开发了多种构建表达载体的克隆方法,包括基于限制性内切酶的克隆、重组克隆和不依赖于连接反应的克隆等。这些方法各有优势和局限性,但在近年来都有显著改进。例如,基于限制性内切酶的克隆因其简单、高效、通用和成本效益而备受关注。一个理想的大肠杆菌表达载体应具备选择标记、复制起点、转录启动子、[/font][font=Calibri]5'[/font][font=宋体]非翻译区([/font][font=Calibri]5'UTR[/font][font=宋体])和翻译起始位点。此外,融合标签的添加对于目的基因的转录和蛋白表达同样至关重要。[/font][/font][b][font=Calibri] [/font][/b][font=Calibri]3. [/font][b][font=宋体]大肠杆菌表达菌株的选择和细胞培养[/font][/b][font=宋体][font=宋体]为保证蛋白质表达成功及其表达质量,应选择合适的大肠杆菌菌株,如[/font][font=Calibri]BL21[/font][font=宋体]及其衍生菌株是较常用的重组蛋白生产菌株。培养大肠杆菌比较简单的方法是分批培养,但此方法对生长的控制比较有限。近年来,高通量培养技术使研究人员能够在一系列发酵条件下处理大量样品,大大加快了生产时间。[/font][/font][b][font=Calibri] [/font][/b][font=Calibri]4. [/font][b][font=宋体]高通量蛋白表达和纯化[/font][/b][font=宋体][font=宋体]高通量平台可以快速克隆基因、挑选菌落、分离质粒[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]、转化细菌、表达和纯化蛋白质。这些平台虽然成本高昂,但为复杂的分子生物学实验操作提供了极大的便利。[/font][/font][font=Calibri] [/font][b][font=宋体]结论与展望[/font][/b][font=宋体]大肠杆菌中的[/font][url=https://cn.sinobiological.com/services/high-throughput-antibody-production-service][u][font=宋体][color=#0000ff]高通量重组蛋白表达技术[/color][/font][/u][/url][font=宋体][font=宋体]极大的推进了重组蛋白的表达进程。尽管存在挑战,但通过不断优化和创新,研究人员正在朝着更高效可靠的蛋白质生产系统改进。未来的发展方向包括进一步优化克隆方法、开发新的融合标签、改进表达载体和菌株,以及利用高通量技术实现从[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]到大规模蛋白质生产的快速转变等。[/font][/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]参考文献:[/font][font=Calibri]Jia B, Jeon CO. High-throughput recombinant protein expression in Escherichia coli: current status and future perspectives. Open Biol. 2016 6(8):160196. doi:10.1098/rsob.160196[/font]

  • 农药残留高通量检测技术

    想问下各位有没看过 农药残留高通量检测技术 庞国芳所写的 小弟打算入手 但怕上当 毕竟300多大洋 我想问 这本书上的内容的实用性如何 在此感谢

  • 高通量组织研磨仪液氮冷冻研磨实验

    高通量组织研磨仪液氮冷冻研磨实验

    TJ2011高通量组织研磨仪对植物叶片的液氮冷冻研磨实验处理材料:植物叶片 (水稻、玉米、小麦、草、蔬菜叶等)1 装物料:将植物叶片截成所需的小段,用镊子夹住,放入1.5/2ml的离心管管底,对离心管进行编号。现以24空离心管适配器为例;2 装研磨珠:每个离心管内装上1个5mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠,或3mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠5个;3 冷冻保存:将铝合金夹具夹住24孔,固定好,放到专业液氮盒中,加液氮冷冻,3-5分钟,充分冷冻夹具及管内样品。4 溶剂加入:如有需要,在每个离心管中,小心加入裂解液或其他溶剂;4 主机运转:设定转速与时间例如1500转/分钟 3min,点击Start5 研磨过程:在典型研磨时间(2~3min)内,研磨结束。可同时得到2*24=48个通量的样品;6 取下夹具,进行下一步实验。注意事项:在上夹具时,要注意一是要带上厚一点的手套,防止被液氮冻伤;一是要迅速,且要保证螺栓拧紧,卡上保险扣。然后,启动研磨。TJ2011高通量组织研磨仪同时适用动物组织(骨骼、肌肉、内脏、毛发等)的研磨,高通量提取DNA/RNA。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349211_1812435_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202141110_349212_1812435_3.jpg

  • 【资料】用于氯霉素、克伦特罗和雌二醇三种兽药残留检测的高通量悬浮芯片技术研究

    用于氯霉素、克伦特罗和雌二醇三种兽药残留检测的高通量悬浮芯片技术研究摘要:目的建立一种氯霉素、克伦特罗和雌二醇(17-beta-estradiol,E2)的3种兽药残留的新型高通量悬浮芯片检测技术。方法:合成3种兽药的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)结合物,并进行紫外和质谱鉴定。绘制出3种兽药残留检测的标准曲线;对不同浓度的干扰物和待测物分组,以此进行特异性检测和盲样测定。并用扫描电子显微镜(简称电镜)进行微球表面微观结构观察。悬浮芯片检测的标准曲线方程和方程相应的决定系数(R^2)表现良好,R^2〉0.99;3种兽药悬浮芯片的检测区间分别为(40.00~6.25)×10^5ng/L,(50.00-7.81)×10^5ng/L和1.00×10^3~7.29×10^5ng/L;最低检出限为:40ng/L、50ng/L和1μg/L;同时,悬浮芯片的特异度测试良好,与其他药物无明显交叉反应;对盲样测定的检测浓度值与实际浓度偏差在8.09%-17.03%,可认为偏差较小。原文:资料中心。

  • 网络讲堂:10月9日 高通量代谢物鉴定---AB SCIEX 快速高分辨TripleTOF 系统

    http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif高通量代谢物鉴定---AB SCIEX 快速高分辨TripleTOF 系统讲座时间:2014年10月9日 14:00 主讲人:张克荣AB Sciex公司 药物市场发展部经理http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】LC/MS在代谢产物鉴定的进展AB SCIEX TripleTOF 高分辨质谱数据采集:一次进样,同时获得MS/MS数据非依赖性采集工作流程:SWATHMetabolitePilot™: 应用PCVG 过滤MS/MS 质谱MetabolitePilot™: 结构解析AB SCIEX TripleTOF TM 系列定量策略-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件:只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间:2014年10月9日13:304、报名参会:http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg

  • 睿科MPE高通量真空平行浓缩仪的使用操作

    平行蒸发浓缩仪已成为有机前处理浓缩过程中不可缺少的设备具备,此类设备操作便捷,使用方便,具备批量处理样品的能力,浓缩过程中化合物不易损失,大大降低样品浓缩时间,已经成为当下实验室分析人员的得力帮手。本文主要介绍睿科MPE高通量真空平行浓缩仪的一般操作。

  • 高通量农药残留检测仪检测结果准确吗

    [font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b][size=16px]高通量农药残留检测仪检测结果准确吗,高通量农药残留检测仪的检测结果通常是准确的。这种仪器利用先进的检测技术,对农产品中的农药残留进行快速、准确的检测和分析。它具有高灵敏度、高准确性、多种农药检测、高通量等特点,可以检测多种不同类型的农药,包括有机磷、有机氯、有机氮、杀菌剂等,适用于不同类型的食品样品。同时,仪器还具备自动化功能,可以降低人为误差,提高检测的一致性和可重复性。然而,检测结果的准确性也受到多种因素的影响,如样品处理、仪器精度和校准、实验操作等。因此,在使用高通量农药残留检测仪时,需要遵循正确的操作步骤和注意事项,确保检测结果的准确性。总之,高通量农药残留检测仪在农药残留检测领域具有广泛的应用前景,能够提供准确、可靠的检测结果,有助于确保食品的质量和安全性。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/05/202405161007024160_155_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size][/color][/font]

  • 高通量微波消解仪的功能特点和技能要求

    高通量微波消解仪是具备化学反应过程控制的微波加速反应系统,控制, 显示和操作系统一体化集成, 具有可靠的整机防腐设计, 节省空间, 同时仪器一机多能, 可用于分析化学的样品消解, 萃取, 蛋白水解, 浓缩, 干燥,实验化学的有机/无机合成, 以及化学工艺模拟数据条件中试等各种微波化学应用。高通量微波消解仪功能特点:仪器采用微波非脉冲连续自动变频控制,延长了仪器的使用寿命和电磁波的均匀性,腔体采用66L大容积316L不锈钢腔体材料特制而成,自锁式缓冲防爆炉门,当反应异常时,缓冲结构确保操作人员人身安全和炉门结构完整无损,炉门和腔体结合紧密,微波泄漏符合国家标准。仪器采用温、压双控系统对消解实验的压力和温度进行控制,实时显示。360°往返连续旋转,微波均匀,保证各个样品微波环境相同,提高实验结果的一致性。当罐内的压力超过设定的保护值时,微波会自动停止加热。安全防爆膜具有双保险功能,当罐内的压力超过防爆膜所能承受的压力时,防爆膜先行破裂,气体泻出,防止罐体受损和对人体的伤害。技能要求质检员熟悉仪器的各部件功能及检测原理质检员了解仪器的环境要求并实时维护要求环境技术负责人熟练掌握易损部件的维护和维修工作

  • 【讨论】CEM MARS Xpress高通量微波消解的缺点?

    最近用CEM MARS Xpress高通量微波消解塑料、陶瓷样品,发现这个仪器有很多问题,高温肯定是达不到(如210度),这是缺点一,其次就是漏气,消解温度即使到190度消解样品就会漏气,现在消解样品经常会漏气。郁闷的仪器。

  • 镁伽科技与迅识生物达成战略合作,助推高通量测序及CRISPR检测应用

    日前,[b][color=#ea5504]镁伽科技与迅识生物达成战略合作,双方将围绕高通量测序自动化检测整体解决方案及基于CRISPR检测技术的自动化应用开展合作[/color][/b],深度挖掘基因测序及CRISPR检测自动化应用场景和用户需求,聚焦提升核心产品能力,共同推动高通量测序技术和CRISPR检测技术在疾病机理研究、早期筛查诊断和病原检测等领域的创新应用。[img=图片]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/34b1bb6c-5fbb-4275-8279-48bafe4c459f.jpg[/img][align=center]▲镁伽科技与迅识生物签署战略合作协议[/align]作为分子生物学领域的重要技术之一,高通量基因测序能够同时进行数百万个DNA序列检测,为测序技术带来了革命性的突破,在基因诊断、基因治疗、基因调控等领域发挥着重要作用。自动化技术的引入使得基因测序的实验通量得以迅速提升,并大幅降低了操作成本,有助于加速开拓多样本处理场景,带动高通量测序技术在体外诊断、生物医药、农业育种等行业的持续增长。迅识生物专注于NGS样本整体解决方案和以CRISPR为核心的即时诊断产品的开发和推广,其中NGS产品线覆盖自动化文库制备平台和配套试剂等,诊断产品线覆盖包括医疗、海关和疾控等多个领域的基因检测需求。镁伽作为专注于生命科学、临床诊断、应用化学等领域的智能及自动化专家,多款高通量基因组学、蛋白组学自动化解决方案已获得市场认可,能够满足多种规模和类型的高通量测序研究项目需求。此次合作依托迅识生物在高通量基因测序、CRISPR检测领域的先进技术和产品,结合镁伽成熟的开放性应用软件和自动化平台整合能力,双方将共同开发具备智能化、数字化、可扩展等优势的实验室整体解决方案,完善高通量测序产品组合,为生命科学领域提供更加精准、高效的核心自动化工具。[b][color=#ea5504]迅识生物创始人陈重建先生表示:[/color][/b][color=#ea5504][color=#000000]“[/color][/color]非常荣幸能和镁伽科技合作,迅识生物一直致力于实现‘触手可及的核酸检测’,无论是在NGS 样本处理全流程解决方案还是在基于 CRISPR 的检测领域,我们都践行着这个目标。迅识在这两个领域已经深耕多年,积累了很多开发和应用经验。镁伽科技在自动化和智能化领域有着非常丰富的积累和实践,希望双方加强在生命科学及相关应用领域的合作,发挥各自优势,互相赋能,携手向前!”[b][color=#ea5504]镁伽科技创始人兼首席执行官黄瑜清先生表示:[/color][/b][color=#ea5504][color=#000000]“[/color][/color]随着基因测序技术、高通量实验、AI等技术的发展,生命科学的智能化正在向着更精准、更经济、更安全的方向发展。镁伽期待与迅识生物携手并进,借助高通量测序自动化技术的优势,进一步拓展多组学自动化解决方案,构筑核心技术的护城河,丰富生命科学自动化技术和生态储备,驱动产业链上下游协同发展。”[img=图片]https://img1.17img.cn/17img/images/202401/uepic/1fddf3c2-e3d0-4b93-8c7c-defa66ec45ad.jpg[/img][align=center]▲镁伽科技与迅识生物签约仪式大合影[/align][来源:仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

  • PreeKem发布高通量石墨消解仪-食品领域

    PreeKem发布高通量石墨消解仪-食品领域

    刚刚结束的慕尼黑展会中,上海屹尧仪器科技发展有限公司推出了高通量石墨消解仪,最高54位,可以满足大批量样品处理的客户需求,尤其是食品检测领域。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/09/201409301140_516482_543_3.jpg

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