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有谁做过水中微囊藻毒素的测定,能否在前处理方面贡献一点经验,本人初做,感觉GB/T5750-2006中的方法不够严密且过于繁琐,谢了!
做吸附实验去除微囊藻毒素,水样要用什么样的滤膜过滤啊?用水系滤膜吗?滤膜有没有具体要求,求指导
[font='times new roman'][size=13px]前言[/size][/font]微囊藻毒素(Microcystin,MC)是一类具有生物活性的环状七肽化合物,为分布最广泛的肝毒素。其具有相当的稳定性,它能够强烈抑制蛋白磷酸酶的活性,还是强烈的肝脏肿瘤促进剂。中国生活饮用水卫生标准(GB 5749-2006)的颁布实施对水源水的质量提出了更高的要求。本文参照“GB/T 20466-2006水中微囊藻毒素的测定”利用 Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中的微囊藻毒素-LR进行固相富集萃取,采用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测,建立了一套水中微囊藻毒素-LR的检测方法,且方法的回收率及平行性良好,适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]关键词[/size][/font]Sepaths UP全自动固相萃取系统,水,微囊藻毒素-LR, GB/T 20466-2006[font='times new roman'][size=13px]1、设备及试剂[/size][/font] Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统; 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]:LC600 二元高压梯度高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url];标样:微囊藻毒素-LR标准物质(农业部环境保护科研监测所,20μg/mL,溶剂:甲醇);标样工作液:将20μg/mL标样用甲醇稀释至浓度为2μg/mL;甲醇(色谱纯, Fisher Chemical)三氟乙酸(分析纯)磷酸二氢钾(分析纯)磷酸(分析纯)超纯水固相萃取柱(Labtech C18 500mg/6mL)磷酸二氢钾溶液(0.05mol/L):称取6.8g磷酸二氢钾,用水溶解,定容至1000.0mL磷酸盐缓冲液:用20%(体积分数)磷酸溶液将磷酸二氢钾溶液调至pH到3洗脱液:用甲醇将0.1mL三氟乙酸定容至100.0mL[font='times new roman'][size=13px]2、测试过程[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2.1 样品准备[/size][/font] 1000.0mL 纯净水中加入200μL的 2μg/mL 微囊藻毒素-LR标准工作液。[font='times new roman'][size=13px]2.2 SPE富集及浓缩[/size][/font] 按照图1所示的方法进行Sepaths UP方法编辑,并加载方法到相应通道。Sepaths UP进行2.1中样品的SPE富集过程。 收集样品到收集瓶中,然后进行氮吹浓缩,当收集液浓缩到近干时,加入流动相定容到1.0mL,取出样品待检测。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210091029061085_5576_5237388_3.png[/img][/align][align=center][size=12px]图1 微囊藻毒素-LR[/size][size=12px] [/size][size=12px]SPE富集方法[/size][/align][align=center][/align][align=center][/align][font='times new roman'][size=13px]2.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]HPLC[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]检测方法[/size][/font]色谱柱:Promosil C18反相柱,5μm,4.6*250mm;波长:238nm;流速:1mL/min;柱温:35[font='宋体']℃[/font];进样量:20μL;流动相:甲醇:磷酸盐缓冲溶液= 65:35[font='times new roman'][size=13px]3、测试结果[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]3.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=13px]0.4[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font]图2为浓度为0.4ppm的微囊藻毒素-LR混标色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图2 0.4ppm微囊藻毒素-LR混标色谱图[/size][/font][/align]3.2 加标样品色谱图图3为加标样品的色谱图。[align=center][img]" style="max-width: 100% max-height: 100% [/img][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]图 3 加标样品色谱图[/size][/font][/align]3.3 加标回收率 表1为加标回收率结果,微囊藻毒素-LR类化合物的回收率在92.21~98.61%。[align=center][/align][align=center][/align][align=center][font='times new roman'][size=13px]表1 加标回收率结果[/size][/font][/align][table][tr][td=1,2][align=center][size=12px]标样[/size][/align][/td][td=4,1][align=center][size=12px]4 组平行样回收率,%[/size][/align][/td][td=1,2][align=center][size=12px]RSD,%[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]1[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]3[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]4[/size][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][size=12px]微囊藻毒素-LR[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.75[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]92.21[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]98.61[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]93.82[/size][/align][/td][td][align=center][size=12px]2.93[/size][/align][/td][/tr][/table][font='times new roman'][size=13px]4、结果与讨论[/size][/font]本方法参考GB/T 20466-2006方法,使用Sepaths UP 柱膜通用全自动固相萃取系统对水中微囊藻毒素-LR进行了富集固相萃取,利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]进行检测,得到方法回收率为92.21~98.61%。且通道间的平行性良好,适合水中微囊藻毒素-LR的检测。[font='times new roman'][size=13px]参考标准[/size][/font]GB/T 20466-2006 水中微囊藻毒素的测定