无菌脱纤维马血

我司专业销售兔血浆/脱纤维羊血(无菌脱纤维绵羊血)。烟台开发区品格林实验室配套设备有限公司何 13589859348 0535-6936183

如题所述，希望知道的朋友告知详细方法，或者有成品无菌脱纤维兔血最好，急用，恳请大家帮忙！万分感激！PS:据说不能高压灭菌的培养基或试剂要用到一种杀菌过滤器（或者滤膜来杀菌），希望了解的朋友发言说一下，十分感谢[em45] [em61]

请教大大们，哪里有兔血浆、无菌脱纤维羊血 、杆菌肽纸片卖呀

无菌实验室检查菌落用的显微镜用多少倍数的？谢谢

1、进入无菌室人员请遵守下列规定：欲使用无菌室之研究人员，请于每学期初先至医学生物科技研究所办理。请填妥申请表格并签名盖章以示认同并愿意遵守使用规范，经核准后领用无菌室大门钥匙及卡片，新进人员请到任后依相同规定办理。申请长期使用者，将排入无菌室值日生之轮值工作。临时使用者，请到医学生物科技研究所办理无菌室临时使用申请，经塡妥申请表格并签名盖章以示认同并愿意遵守使用规范后，核准使用无菌室，有效期限为14天。每次使用前请先至医学生物科技研究所办理登记预约，再领用无菌室大门钥匙及卡片，并请当天归还钥匙及卡片。无菌室内禁止任何食物入内，并请换穿实验衣、专用拖鞋并戴上口罩后进入。进出无菌室时，请务必关上第一道门后再开启下一道门。闲杂人等不得进入无菌室。因本无菌室有感染性微生物实验进行，为维护生物安全起见，请于下班后确实将无菌室大门上锁。使用者请务必保持无菌室及操作台台面的清洁与整齐，操作完毕后laminar flow中请收拾干净，确实消毒并将UV灯打开及关闭瓦斯后再行离开，请勿留下私人器材。若有事暂时离开请标示注明。

1、洁净室（无菌室）要符合规范要求：无菌室应采光 良好、避免潮湿、远离厕所及污染区。面积一般不超过10m2，不小于5m2；高度不超过2.4m。由1—2个缓冲间、操作间组成（操作间和缓冲间的门不应直对），操作间和缓冲间之间应具备灭菌功能的样品传递箱。在缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物；无菌室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。操作间内不应安装下水道。 无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置，操作区洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温度控制18—26℃，相对湿度45%—65%。缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10Pa。无菌室内的照明灯应嵌装在天花板 内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300lx。缓冲间和操作间所设置的紫外线杀菌灯（2—2.5w/m3），应定期检查辐射强度，要求在操作面上达40uw/m2。不符合要求的紫外杀菌灯应及时更换。 2、建立使用登记制度在登记册中可设置以下项目内容：如使用日期、时间、使用人、设备运行状况、温度、湿度、洁净度状态（沉降菌数、浮游菌数、尘埃粒子数 ）、报修原因、报修结果、清洁工作（台面、地面、墙面、天花板、传递窗、门把手）、消毒液名称等。3、建立使用标准操作规范（SOP）并严格管理:SOP内容至少要有以下几点： （1）规定净化系统使运转时间要求每次实验前应开启净化系统使运转至少1h以上，同时开启净化台和紫外灯。 （2）物品进入洁净室（无菌室）基本要求：凡进入洁净室（无菌室）的物 品必须先在第一缓冲间内对外部表面用消毒剂消毒灭菌，再经物流缓冲间、传递窗1h以上，及无菌空气吹干后送入无菌室。注意带纤维、易发尘物品不得带进净化实验室。无菌室内固定物品不得任意搬出。 （3）人员进入洁净室（无菌室）要求：实验人员进入洁净室（无菌室）不得化妆、带手表、戒指等首饰；不得吃东西、嚼口香糖。应清洁手后进入第一缓冲间更衣，同时换上消毒隔离拖鞋，脱去外衣，用消毒液消毒双手后戴上无菌手套，换上无菌连衣帽（不得让头发、衣等暴露在外面），戴上无菌口罩。然后，换或是再戴上第二副无菌手套，在进入第二缓冲间时换第二双消毒隔离拖鞋。再经风淋室30s风淋后进入无菌室。 （4）温湿度观察要求：观察温度计、湿度计上显示的温湿度是否在规定的范围内，并作为实验原始数据记录在案。如发现问题应及时寻找原因，及时报修和及时报告实验室主管，并将报修原因和结果记录归档。 （5）沉降菌落计数与浮游菌测定要求：在每次实验同时，对操作室和层流台做微生物沉降菌落计数，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。每周1次，或在无菌检查等必要时，在每次实验同时对操作室和净化台进行浮游菌测定，将结果记录在使用登记本上，并作为实验环境原始数据记录在实验报告上。 （6）消毒要求：无菌室每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或2%甲酚液或其他适宜消毒液（常用消毒剂的品种有：5—20倍稀释的碘伏水溶液、0.1%新洁尔灭溶液、1：50的84消毒液、75%乙醇溶液、3%碘酒溶液、5%石炭酸（来苏儿）消毒溶液、2%戊二醛水溶液、尼泊金乙醇消毒液（处方：对羟基苯甲酸甲酯21.5g；对羟基苯甲酸丙酯8.6g，75%乙醇10ml）等，所用的消毒剂品种与使用要进行有效性验证方可使用，并定期更换消毒剂的品种）擦拭操作台及可能污染的死角，方法是用无菌纱布浸渍消毒溶液清洁超净台的整个内表面、顶面、及无菌室、人流、物流、缓冲间的地板、传递窗、门把手。清洁消毒程序应从内向外，从高洁净区到低洁净区。逐步向外退出洁净区域。然后开启无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1—2h，以杀灭存留微生物。在每次操作完毕，同样用上述消毒溶液擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌30min。 （7）其他要求：如遇停电，应立即停止实验，离开无菌室。关闭所有电闸。重新进入无菌室前至少开启机房运转1h以上。4、洁净度检查的要求与方法：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度，常有沉降菌和浮游菌测定方法。 （1）沉降菌检测方法及标准：以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开平板盖，在空气 中暴露30min后将平板盖好，置32.5℃士2.5℃培养48h，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均小于1个。 （2）浮游菌检测方法及标准：用专门的采样器，宜采用撞击法机制的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定时校检，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其他培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5min，调节流量、转盘、转速 。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。全部采样结束后，将培养皿置32.5℃士2.5培养48h，取出检查，浮游菌落数平均不得超过5个/m3。 每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。 无菌操作台面或超净工作台还应定期检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测，并根据无菌状况必要时置换过滤器。5、定期进行洁净度再验证：定期（每季度、半年、1年）或当洁净室设施发生重大改变时，要按国家标准GB/T16292-16294-1996《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》进行洁净度再验证，以确保洁净度符合规定，保存验证原始记录，定期归档保存，并将验证结果记录在无菌室使用登记册上，作为实验环境原始依据及趋势分析资料。并定期对洁净室的环境检测数据进行趋势分析和评估，根据评估结果，了解洁净室设施环境质量的稳定状况及变化趋势，决定是否有必要修订相应的警戒和纠偏限度。6、定期更换新的紫外灯管、更换净化系统的初效、中效、高效头：定期（至少每年1次）更换新的紫外灯管，以确保紫外灯管灭菌持续有效。并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。至少2年1次，或按洁净度验证实际情况，定期更换初效、中效、高效头。以确保净化系统的功能持续有效，并同时在使用登记本上做好更换记录，定期归档保存。7、使用过程中应尽可能减少人员的走动或活动：平时实验室内应尽可能减少人员的走动或活动，同向洁净室的门要关闭或安装自动闭门器使其保持关闭状态。8、洁净度不符合规定时立即停止使用：发现洁净度不符合规定时，应立即停止使用，寻找原因，彻底清洁、必须经洁净度再验证符合规定后，才再使用，并同时将情况记录在无菌室使用登记册上，定期归档保存。9、对进入的外来人员或维修人员进行指导和监督：非微生物室检验人员不得进入洁净室（无菌室），对必须进入的外来人员或维修人员要进行指导和监督。10、洁净室（无菌室）的日常管理：建立安全卫生值日制度，一旦发现通风系统、墙壁、天花板、地面、门窗及公用介质系统等设施有损坏现象，要及时报告并采取相应的修复措施，并保存记录及时归档。从洁净室（无菌室）环境中检测到的微生物应能鉴别至属或种，保留鉴别实验原始记录及菌种，作为无菌生产、无菌检查洁净室环境质量、消毒剂有效性评估及污染源调查的依据，并且也是为无菌检查阳性结果的调查提供第一手资料。

微生物实验室，分无菌室和普通微生物室，致病菌在无菌室做，大肠杆菌啥的在普通微生物室，可以吗？做房间压差只做无菌室那个屋就行对吗？画圈的是无菌室，放2级生物安全柜[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212021054348591_8820_5632371_3.png[/img]

[font=微软雅黑][size=16px]从事无菌制剂委托生产的药品上市许可持有人质量负责人应在满足《药品生产质量管理规范》（2010版）第二十三条 第一款“质量管理负责人应当至少具有药学或相关专业本科学历（或中级专业技术职称或执业药师资格），具有至少五年从事药品生产和质量管理的实践经验，其中至少一年的药品质量管理经验，接受过与所生产产品相关的专业知识培训”基础上，同时满足132号文第三条要求“委托生产无菌药品的，持有人的生产负责人、质量负责人、质量受权人均应当具有至少五年从事药品生产和质量管理的实践经验，其中至少三年无菌药品生产和质量管理的实践经验”要求。[/size][/font]

普通微生物检测，如霉菌，哪些步骤需要在无菌室里操作？还有显微镜需要什么样的，体式，普通显微镜或生物显微镜？

有谁知道无菌脱纤维羊血的执行标准.QB...?

咱学发酵的，或者学微生物的，还有学细胞的，等等，很多时候都需要在无菌环境下进行操作，那么咱大家就讨论下怎么确保无菌操作，大家都来唠唠嗑啊^_^比如，通风橱风稍微开的大点儿，手一定要用75%的酒精棉球擦拭，而且指甲缝最好也好好擦擦，等等，大家还能想起什么来，各抒己见吧^_^

无菌操作技术不仅在微生物学研究和应用上起着举足轻重的作用，在许多生物技术中也被广泛应用，例如转基因技术、单克隆抗体技术等。 无菌室，微生物实验室内专辟的一个小房间，室外设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭，无菌室内的地面、墙壁必须平整，不易藏污纳垢、便于清洗，室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。工作台的台面应该处于水平状态，无菌室和缓冲间都装有紫外线灯（距离工作台面1米），工作人员进入无菌室应穿戴灭过菌的服装、帽子。 超净台，主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃，通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。在条件较困难的地方，也可以用木制无菌箱代替超净台（正面开有两个洞，不操作时用推拉式小门挡住，操作时可以将双臂伸进去；正面上部装有玻璃，便于在内部操作，箱内部装有紫外线灯，从侧面小门可以放进去器具和菌种、细胞株等）。 微生物的培养 在微生物的培养过程中，要保持培养物纯净性；培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。 （一）培养基1.认识培养基的基本组成成分，从生物体构成的基本元素这一角度理解培养基中为什么都需要具备这些基本成分。2.培养基的用途和种类：液体和固体两大类。3.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方；尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。4.培养基是否合格（无菌试验）：培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生长（液体不变浑浊），说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 （二）无菌技术 1. 无菌技术的概念无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。日常的生活环境中，每时每刻每处都存在着微生物，任何一个不经意的动作都可能将某种微生物引入到培养物中。在具备无菌环境和获得无菌材料后，还要始终保持无菌状态，才能对某种特定的已知微生物进行研究或利用它们的功能，否则外界的各种微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的现象，在微生物学叫做污染杂菌。防止污染是微生物学工作中十分关键的技术：彻底灭菌和防止污染是无菌技术的两个方面。此外，要有效避免操作者自身被微生物感染，还要防止所研究的微生物，特别是致病微生物或经过基因工程改造了的本来自然界不存在的微生物从我们的实验容器中逃逸到外界环境中去（生物安全）。无菌操作非常重要，无论是倒平板、平板划线操作，还是平板稀释涂布法，其操作中的每一步都需要做到“无菌”，只有熟练、规范地进行无菌操作，才可能成功地培养微生物。 2. 消毒与灭菌的概念（1）培养细菌用的培养基与培养皿（需要灭菌）（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（需要灭菌）（3）实验操作者的双手（需要消毒）（4）接种环、针、涂布棒：灼烧灭菌（外焰）。 3.倒平板（1）灭菌后，培养基冷却到55 [font='宋

[color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]，又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器，无菌均质器的应用范围如下：[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、无菌均质器广泛用于动物组织、生物样品等均质处理，在食品、药品、化妆品、临床、分子学、毒素及细菌检测等领域均可应用，特别适合于微生物检测样本的制备。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、无菌均质器[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]拍打式匀浆器[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]是在国外系列产品技术基础上改进并放大的先进产品，具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、无菌均质器也适合肿瘤组织[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝癌、肠癌、胃癌、乳腺癌[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]的匀浆，既可得到大量的单细胞，必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞[/color][color=#333333]([/color][color=#333333]如肝脏等[/color][color=#333333])[/color][color=#333333]实现柔软的破碎。[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、无菌均质器可有效地分离固体样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品装在一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，运行快速、结果准确、重复性好的要求。[/color][color=#333333]该装置设有全开启式玻璃透明窗口门，易于清洗，玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织（如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌）的匀浆，既可得到大量的单细胞。必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔软的破碎。 [/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域：食品微生物分析；动物组织、生物样品、化妆品的均质处理；鱼、肉、蔬菜、水果、饼干；药品的微生物分析等[/color][color=#333333]。[/color][color=#333333]在使用[/color][color=#333333]biosafer[/color][color=#333333]无菌均质器时正确对待这些问题，可以使均质器更好的为您服务。 [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]） 电源插头必须插紧到位，出现松动可能影响电脑控制器造成死机，如出现死机现象，请关闭后侧电源开关，关机[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]分钟后重新启动。[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]） 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门，以免样品液溢出。应按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建，设备自动停止运行。当把门关上后，再按“开[/color][color=#333333]/[/color][color=#333333]停”建，设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]） 仪器长期不使用应切断电源，拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]） 均质器门底部为防止均质袋意外破裂，便于清洗溢出物，底部设计为空的，可放置接水盘，所以仪器运转时请勿用手从底部伸入，以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门，造成不必要的损失。 [/color][color=#333333]5[/color][color=#333333]） 机器在运转前，请仔细查看均质箱内有无异物，以免工作时发生故障和损伤均质袋。[/color][color=#333333]6[/color][color=#333333]） 硬块，骨状，冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用，以免破坏均质袋。 [/color][color=#333333]7[/color][color=#333333]） 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射，特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方，以免老化。 [/color][color=#333333]8[/color][color=#333333]） 量少时，需加快速度时，均质物纤维比较坚韧时，则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距，来达到更好的均质效果。注意调整的距离，避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。 [/color][color=#333333][url=http://www.chinanoted.com/][color=#e53333]无菌均质器[/color][/url]正确使用步骤为： [/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、把需处理的试品放入无菌均质袋中。 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、打开均质器门（可全开启），将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。 [/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、设定使用程序（如拍击速度、拍击时间等），进行拍击均质工作。 [/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、实验完毕后，打开均质器门，取出样品。 [/color][color=#333333]无菌均质器的使用如果做到以上几点，可以极大延长其使用寿命和使用效果。 [/color]

罐头商业无菌染色镜检怎么做，结晶紫单染色后，怎么选择显微镜倍数啊？还有都是糖水感觉染色后都用水冲没了。

微生物实验室,必须达到一定程度的无菌状态,避免微生物污染。假如在一个不洁的实验室或者早先打翻过样品的地方做微生物实验,引入新的微生物污染样品的几率是很大的。微生物的实验可以分为两大部分：前期准备和样品检验。事实上，保持整个实验室清洁是非常重要的，这样就不用在灭菌前担心太多了，然而，灭菌后必须保证样品或者培养基免受污染。其实，可以把灭菌想像成”一扇门”，在培养基中或者一些设备比如吸管的微生物都在灭菌过程中被杀死了，没有微生物困扰实验了。必须保证灭菌后的环境(门后的部分)的洁净，杜绝灭菌后的培养基和设备受到污染。无菌的重要性1. 无菌技术 – 高压湿热灭菌要点描述原理在压力下产生的湿热的蒸汽杀死微生物的营养体和孢子。密封灭菌锅必须密闭以阻隔外部空气， 避免空气的存在会影响压力并降低灭菌锅里面的温度。灭菌压力在灭菌锅内， 合适的灭菌温度是通过压力达到的， 压力对于灭菌没有效用但是使蒸汽温度上升。 对于标准操作来说，15lbs/inch2时的121℃并赶走所有空气可以达到灭菌的效果。灭菌时间当到达一定的温度和压力时， 需要保持一定的时间来达到效果，为了杀灭微生物，121℃必须保持至少15分钟。培养基灭菌大部分情况下， 实验室配置培养基后应灭菌，灭菌时应根据供应商指导， 使用合适的温度时间； 有些培养基不适合灭菌的。器皿灭菌当灭菌器皿时，需要考虑使用数量，比如，一天用10根吸管，在灭菌时， 一般就可以以10根为一包， 这样可以减低器皿在使用过程中遭受微生物的污染的可能性。灭菌条在灭菌过程中， 可以用灭菌条来监控效果， 灭菌条在灭菌前是有颜色的，灭菌后会变成黑色。重新灭菌假如一次灭菌无效， 可以重新进行灭菌过程， 但是，培养基是不可以进行第二次灭菌的， 应抛弃。储存灭菌完成后， 培养基和器皿应妥善储存。 一般来说， 培养基应存放于避光的洁净空间，同时应参照供应商的指示。2.无菌技术 – 过滤 (Filtration)要点描述简述物理分离方法， 使用高效过滤将微生物从液体培养基分离。由于不需要加热和冷却过程，过滤比高温湿热灭菌省时间。过滤头0.2微米的过滤头可以分离所有的细菌营养体, 把它安装在针筒末端。3.无菌过程注意点要点描述综述一旦培养基或者器皿经过灭菌过程, 这种灭菌状态应保持直到实验结束。区域最好能把培养基准备区域(门外)和实验区域(门内)之间应该设有缓冲间。工作台面工作前必须消毒, 可以用70%的酒精, 也可以用含氯的消毒剂。消毒时间不管使用何种消毒剂， 需要提供充分的消毒时间来杀灭微生物，一般5-10分钟， 可以用纸巾擦干表面。洁净台必须有2个光源：普通照明用和杀菌紫外光。紫外灯用于保持工作台面免于微生物污染， 在使用前仍然需要使用消毒剂清洁。摆放应该有好习惯把工作桌面的物品摆放好,，把移动放到最低限度， 避免带来污染。镊子如果使用薄膜过滤法， 需要准备一个小烧杯并有少量酒精， 镊子不用时就放在杯子里。培养基培养基使用前， 应该有相关日期， 比如配置日期， 或者实验室收到日期(直接使用的培养基)。假如没有所需日期, 这个培养基不能使用。实验服穿着干净的实验服， 袖子应卷起至肘部以避免碰到培养基或样品带来污染，当然。做实验前要洗手。4. 实验的无菌技术注意点采样个人酒精灯样品应无菌采得，使用无菌采样袋或者采样瓶，采样员应戴防护手套, 在采样前烧采样口，样品容器应紧闭并安全储存。万一培养基或者样品溅到实验服上应在做完一个实验后换上干净的。咳嗽或者鼻塞可能会带来微生物并影响实验，应戴好防护手套面罩 。使用本森灯或者酒精灯, 在实验前点燃。火焰在实验区域产生一个防层， 可以防止那些悬浮在空气中的微生物掉落在工作台面上或者培养基上。开瓶瓶口培养皿开瓶前， 应用清洁剂的纸巾清洁瓶盖和附近区域，除去盖子上可能留存的微生物。盖子打开后，玻璃瓶口应进行灭菌，可以在酒精灯上方旋转瓶口和螺纹， 一般2-3秒。当打开培养皿时, 不能完全移除盖子, 而应该保持在培养皿的上侧, 从而能够倒入培养基或者样品, 这样可以减少空气灰尘或者微生物的污染。倒完培养基或者样品后, 瓶口重新过火, 盖盖子, 用消毒剂清洁。滤膜镊子打开薄膜装， 绝对不能碰到薄膜!用镊子把薄膜移除包装并放到过滤头上， 过滤的漏斗不能完全移开，只需移开一点点放入滤膜即可，过滤完后，用镊子把滤膜转到培养皿中， 放置于中间。用镊子转移滤膜过火时，拿住镊子的尾部， 放到火焰上， 保持一下能够到火好， 时间太长会在尖部结碳，拿镊子的时候， 尾部向上直至烧完。实验结束打扫废弃物实验结束后，培养皿放入培养箱；剩余的培养基可以放回储存区域， 盖子必须盖紧。抛弃废弃物，比如样品袋 可回用的物品放在远离工作区域的地方以回收, 清洗, 灭菌。用含有消毒剂的纸巾清洁工作台面。在实验过程中暴露于微生物的物品应作为有害废弃物这些废弃物可能含有微生物并致病 假如含有致病菌可能会产生公共卫生的事件.最好废弃物能够进行湿热灭菌从微生物的实验室布局角度一个设计合理的实验室能提供一个合格的环境以支持实验能够安全有效地进行。 首先，需要为实验室选择一个合适的物理位置：远离其他操作区域，比如，生产或者储运；没有从其他区域进入实验室的直接入口；实验室必须是微生物实验专用；应有专门微生物检测无菌间，并通过缓冲间与准备间等进行区隔。通风和气流安保工作区域微生物实验室应该有单独的通风系统, 与其他操作区域的空气供给分开；空调系统的排气必须直接排出实验室, 空调系统应定时清洗, 并关注空气过滤器的清洁。实验室应该是限制进入的, 可以是卡片控制或者其他方式, 只有那些被允许进入实验室的人员才能进入。实验室人员应该有充足的工作区域, 从GLP标准来说, 每人应有20平方米的区域. 充足的工作区域可以避免工作中人员的碰撞, 也避免了交叉污染。易清洁照明反馈实验室的墙面, 屋顶和门都应该是平滑的, 光洁易于清洗消毒的；墙的接缝包括强和墙之间, 强和地面之间应该是弧形的；任何地方都应该不能聚集灰尘, 例如窗台或者窗帘；柜子应该是可移动的或者是不着地的以方便清扫。实验室应有充足的照明, 包括不间断电源或者备用发电机.反馈遵照GLP相关的安全规则1. GLP要点 – 工作区域要点描述总体安排实验前应做好仪器, 试剂和培养基的所有准备工作, 这样可以合理利用时间并得到稳定的实验结果。桌面安放多余的培养皿, 烧瓶或者滤纸可能会干扰实验并带来潜在的溅出, 打碎或者交叉污染。实验前消毒在配制培养基或者开始试验前, 应该清洁并消毒工作桌面。 可以采用70%的酒精溶液, 含氯水的溶液, 或者其他消毒剂。清洁后, 应等待几分钟以使有充分的时间杀灭微生物。试验后消毒实验结束后, 彻底清洁工作区域, 仍然使用70%酒精溶液或者其他消毒剂, 保持一段时间, 然后擦干。有害废弃物的处置必须有效管理微生物的有毒废弃物, 任何和微生物培养或者培养基相关的物品都应被看作有害物质 因为他们可能含有致病菌, 需要小心处理。废弃物的灭菌湿热灭菌是最简单也是最有效的处理污染物质和有害物质的方法。 用过的培养皿应放在灭菌袋中。 灭菌后, 可以当作一般废弃物处理。重复使用器皿的灭菌当需要对小件物品(比如移液管)灭菌时, 可以根据实际用量分组包装。 湿热灭菌后, 袋包装冷却并保存。避免浪费合理安排是非常重要的 实验室工作需要精准, 但是有时候我们也需要快速工作, 因为花非常多时间会延长设备, 培养基, 或者样品暴露在环境中的时间。 把需要用的物品放在手边可以用的地方可以节约时间并提高工作的有效性。2. GLP要点 – 洁净工作台简介使用监控洁净工作台提供了控制来自环境的污染并提供工作区域的洁净空气. 洁净空气吹向工作区域, 同时, 可以避免外部空气进入工作区域使用时, 紫外光线(或者紫外灯)应关闭, 但是使用后应打开. 如果紫外灯没有打开工作台没有开启, 工作台不能开始使用 必须清洁工作台, 开启电源并打开紫外灯, 保持30分钟.洁净工作台需要进行日常的确认, 一般有第三方公司进行一个有效的实验室应该是一个安全的实验室。假如疏忽安全的话，许多每天使用的培养基或者设备会产生危害。减少这些危害带来的风险不仅仅保护了工作场所，更重要的是，保护了自身免于危险。利用常识并遵照GLP相关的安全规则,我们就能把由于微生物相关的行为带来的潜在危害降低到最小。安全用品移动安全用品包含口罩, 手套和眼部防护。口罩防止培养基和样品受到污染, 可能来自于咳嗽或者鼻涕 根据当地的要求和习惯, 每个实验室会有不同的要求。戴手套是为了防止培养基或者其他刺激性物质接触皮肤 在从湿热灭菌锅内取出容器或则器皿时, 需要戴防热手套。在配置培养基和实验中佩戴防护眼镜是一个很好的习惯, 能够购买带有屈光度的防护眼镜为佳。当移动培养基或者样品时, 应小心注意以避免溅出或者泼出；突然的移动会产生安全危害或者导致实验无效；不要使用夸张的动作或者行为同时, 不要把任何东西, 比如吸管, 放到嘴里。明火湿热灭菌锅实验中需要用到酒精灯或其他明火, 但是假如使用不当会带来比较高的安全危险；确保酒精灯不用时完全关闭, 当有阀门时经常检查垫圈是否有裂痕或者泄露；操作酒精灯时, 应确保火焰不会接触衣物或者皮肤. 可燃物品, 比如记录本, 应远离火焰以避免意外点燃；同时, 要注意可燃液体的容器. 每次使用后应盖好盖子并远离酒精灯火焰；使用火焰进行灭菌工作时, 可使用镊子. 把镊子放在含有95%酒精的烧杯中, 使用时, 把镊子在火焰上灼烧1-2秒, 移开镊子并等待火焰熄灭；拿着镊子是尖端应向下, 使热的酒精不会流到手上。湿热灭菌锅使用高压下产生的蒸汽, 温度可达1210C, 杀死了微生物, 同样可以带来人类组织的灼伤, 所以必须特别小心地操作 如此高的温度以及蒸汽能带来极大的潜在伤害, 即使是残留的蒸汽也能带来很大的危险. 打开灭菌锅时需要特别小心, 站在边上避免面对热量和蒸汽, 缓慢的打开门, 同时, 戴好防热手套.把需要灭菌的培养基和器皿平均放置在托盘上, 大的物品放在边上, 确保物品不会相互碰撞. 这样可以是热量均匀扩散并平衡整个托盘洁净台样品操作在洁净台工作时必须关闭紫外灯. 紫外光线是危险的；不要把手或者手指放在紫外灯下, 以免灼伤皮肤；不要直接看紫外光线以免损伤眼睛。培养基和样品: 用火焰灼烧瓶口时, 停留4-5秒, 旋转使整个表面都能被灼烧, 不要停留太久, 不要溅出样品或者培养基；假如样品是瓶装的, 不要直接灼烧以免爆开. 可以取2个烧杯, 倒入70%酒精, 把瓶子倒置放入一个烧杯中, 使盖子和瓶颈的2.5厘米处能浸没在酒精中, 拿出瓶子用干净的布擦干 同理, 放入第二个烧杯, 拿出瓶子直立待酒精自然蒸发；开瓶时应特别小心不能污染样品, 可以用消毒纸巾开旋盖的瓶子 用浸没在95%酒精并灼烧的开瓶器打开压盖瓶；打开瓶子后, 使用相同的方法灼烧瓶口, 并确保用于消毒的酒精完全挥发；拉罐可以使用相同的程序或者用含70%酒精的棉球擦拭顶部, 假如罐子必须用开罐器, 这个开罐器操作同开瓶器；无菌包装的产品用含70%酒精的棉球擦拭。微生物防护用具1.一级防护（设备）①移液辅助器，如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url]②生物安全柜③一次性塑料接种环、电热接种环④螺口盖试管及瓶子⑤高压灭菌器⑥一次性塑料移液管2.二级防护（人员）①工作服、防护服②手套（乳胶手套等）③安全眼镜、面罩或其他防护用品检测中常见问题解答细菌和霉菌培养箱必须分开放置吗？在CNAS-CL01-A001-2018《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》有此规定：6.3.4 b)检测样品中的霉菌时，要有适当的措施控制孢子在空气中的扩散。但未见到明确规定细菌培养箱和霉菌培养箱不能在同一房间的规定。一般实验室都有三种培养箱，结构设计上分为两种，一种是内部循环风温度平衡的，第二种是内外热空气流动自动平衡型的，另外第三种是热辐射温度平衡型的。有网友认为，第一种和第三种应该可以放在一个实验室，保持一定距离即可。第二种培养箱应该不能放在一个实验室。据说，CNAS现场评审，会提出细菌和霉菌培养箱分开放置要求。

近期做一个中药复方的无菌过滤，结果将过滤膜送检了一下，发现有500多个细菌，还有霉菌。这个可能是与存放容器和时间有关。那么如果做无菌过滤，这个膜应该如何处理呢？是否可以高温高压灭菌，还是用紫外，还是 用臭氧，还是用水煮?补充一下，我用那个膜是水系的纤维膜。

微生物限度检验可以用无菌检验代替吗？为什么？微生物和无菌检验有什么不同？

一、无菌室内非请莫入，非本实验室人员未经批准不得在无菌室内工作。 二、所有药品器材均为无菌室专用，一般不得带出无菌室，作为其他用处。三、所有物品用后立即放回原处。 四、进入无菌室工作之前需修剪指甲，手清洗后在用１％新洁尔灭溶液洗手消毒，换鞋进入，使用超静台需着无菌室专用工作服并用酒精棉球擦手消毒。超静台每次使用后都应仔细做好清洁整理工作。 五、卫生值日人员要勤打扫。注意保持无菌室的相对无菌条件，经常用新洁尔灭溶液擦洗地面、桌面、台面和试剂厨。经常将无菌室工作服送至洗涤室清洗消毒，使用后的鼠尸及鼠笼随手带出无菌室。每日为除湿机倒水。注意无菌时使用药品、物品的消耗，及时通知工人准备，或汇报负责老师以便补充。 六、配培养基和其他试剂都应有记录，瓶子上映注明品质、浓度、日期及配制人，使用过的培养基及无菌试剂应自觉注明使用人姓名，以防止交叉污染。 七、严格控制细胞之间或病原之间的交叉污染，容易发生交叉污染的细胞或病毒不能在同一超净台内处理。八、扭力天平使用之后应休止，在将读数盘回零，托盘及天平表面擦洗干净，药勺也应洗净擦干。使用后的药品应将盖拧紧，放回原处。 九、离心机使用时应注意平衡，使用后将离心杯、橡皮套管清洗干净，倒置晾干。 十、ＣＯ２孵箱为通气培养箱，应自觉维护箱内清洁，定期将托板、托盘换出消毒。如培养瓶内培养基漏出，立即用酒精棉讲瓶外表面迹箱内污迹擦拭干净，箱内蒸发用水威无菌蒸馏水，应注意补充。四周水箱内的水定期补加。ＣＯ２浓度、温度控制器等零部件请勿动，发现问题及时报告。 十一、组织培养用眼科剪刀镊子使用后应洗净烘干，防止生锈。 十二、浸泡细胞培养板统一使用７５％酒精（ＣＰ或ＡＲ）或医用酒精。

【序号】：2【作者】： 吕阳【题名】：无菌隔离技术在悉生生物学中的应用与发展【期刊】：中国比较医学杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2014,24(05)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFD2014&filename=ZGDX201405017&uniplatform=NZKPT&v=St-Moni_CLZ4dtgYjQVQGuPjhShDcHMZjuBzYFhke36sjXldyD3mK5XbUvF5j64_

我们是引用水分析实验室，在实验室的建设规划图上，看到在微生物区域的无菌操作室，也就是放超净工作台的房间，设置了镜检及细菌，大肠菌的培养箱。第一次看到感觉很吃惊，一般说来，培养箱都是放在外面的，我个人认为既然是无菌室，还在里边培养细菌，进行镜检，那还能是无菌室吗？简单的紫外照射可以去除空气中因培养镜检所带入的污染源吗？不知道这种安排出于什么理论，请大家赐教。

[color=#444444]酸奶检测菌落总数为[/color][color=#444444]0[/color][color=#444444]，还需要做商业无菌检测吗？菌落总数包括所有微生物，那没有菌落生长是不是就代表无菌？[/color]

无菌生产有哪些要求？ 无菌生产过程中主要有哪些要求呢，其实在经清洗后，各组分至少应放在D型洁净区。如未规定要采用灭菌或空气过滤器过滤，阻止微生物流向后续工序，灭菌后的原材料和组分的生产王序应在A型洁净区完成，但在A型区外有B型区作为环境。在生产过程中需要灭菌过滤的溶液均应在C型洁净区生产。如果不需灭菌过滤，则应在A型洁净区进行材料和产品的制备。A型洁净区应位于B型洁净区之内。在无菌条件下制备的产品应在A型洁净区进行产品的再加工和灌装。A型洁净区应以B型洁净区为环境。部分密闭的容器传递（运输），如在脱水干燥时，应在包装之前在A型洁净区完成，A型区应被B型区包围。或者在B型洁净区环境内用密闭传递装置完成运输工作。无菌油膏、软膏、悬浮液和乳化液的制取和灌装应在A型洁净区完成，A型区应位于B型区环境内。其条件是允许产品裸零和不需要后续灭菌过滤。隔离工艺和抽气——充气——密封最重要的进步就是采用隔离工艺和抽气——充气一一密封工艺，保证产品的灭菌性，提高洁净室和洁净区的效率和降低与此有关的费用。隔离或屏障技术的实质就是用密闭装置的物理隔离将工作区与周围空间隔开。此项工艺广泛应用于灭菌产品的生产。GMP规程于1997年规定供无菌生产用的隔离装置应配置在至少不低于D型洁净区的环境空间内。与普通洁净室技术所提出的要求相比，确实这是较为简单的条件。它能显著地降低洁净厂房建造和使用费用。吹气——充气——密封工艺就是在一个连续循环内，用热塑型塑料粒子压制成容器装药，然后密封。所有这一切均由一台综合自动装置完成。如果是无菌生产，有A型洁净区的设备可安设在至少是C型洁净区的环境内，并且要采用符合A/B型洁净区要求的工作服。如果是最终灭菌生产，可将设备安装在至少是D型洁净区的环境内。与传统的工艺相比这也是较为简单的要求。

微生物房间的，污染的有菌灭菌和无菌灭菌还需要分房间吗？

无菌室一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。可以用板材和玻璃建造。面积不宜过大，约 4 — 5 平方米即可，高 2.5米左右。无菌室外要设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。无菌室标准化规程与验收规范。1.目的　　本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围　　生测实验室 3.责任者　　QC主管生测员 4.定义　　无 5.安全注意事项　　严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程　　6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 　　6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 　　6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 　　6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 　　6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 　　6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 　　6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 　　6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 　　6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 　　6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 　　6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 　　6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 　　6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 　　6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 　　6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 　　6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照　　参照《药品卫生检验方法》 《中国药品检验标准操作规范》中 (无菌检查法)章节 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》

微生物实验室无菌评价方法,包括高压灭菌锅、操作台、紫外灯、无菌室及干热灭菌箱。

（1）[b]薰蒸：[/b]这是无菌室彻底灭菌的措施。无菌室使用了较长时间，污染比较严重时，应进行薰蒸灭菌。可用甲醛、乳酸或硫磺薰蒸。（2）[b]喷雾：[/b]在每次使用无菌室前进行。喷雾可促使空气中微粒及微生物沉降，防止桌面、地面上的微尘飞场，并有杀菌作用。可用5%石炭酸喷雾。（3）[b]紫外线照射：[/b]在每次使用无菌室前进行。紫外线有较好的杀菌效果。通常应开启紫外线灯照射30～60min。

无菌均质器，又称拍打式匀浆机，拍打式匀浆器。主要用于生物技术领域的组织分散、医药领域的样品准备、食品工业的酶处理以及在制药工业、化妆品工业、油漆工业和石油化工等方面。 　　该装置设有全开启式玻璃透明窗口门，易于清洗，玻璃透明窗口易于观察。采用大屏幕液晶显示，工作时间和均质速度智能可调，拍击器也可任意调整前后距离。可有效的分离实验样品表面和被包含在内的微生物均一样品，样品使用一次性无菌均质滤袋隔离操作，保证卫生和安全，不与仪器接触，无样品泄露而不需进行系统清洗，具有方便快速、结果准确、均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理，不需洗刷器皿的特点，重复性好的要求。本产品也适合肿瘤组织(如肠癌、胃癌、肝癌、乳腺癌)的匀浆，既可得到大量的单细胞。必要时，可通过延长均质时间，对组织细胞实现柔软的破碎。 　　BILON品牌无菌均质器是使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单，只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中，然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品，确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析，没有样品的变化和交叉污染的危险。应用领域：食品微生物分析;动物组织、生物样品、化妆品的均质处理;鱼、肉、蔬菜、水果、饼干;药品的微生物分析等。 　　在使用我公司的无菌均质器时，有八个需要注意的地方，正确对待这些问题，可以使均质器更好的为您服务。 　　1) 电源插头必须插紧到位，出现松动可能影响电脑控制器造成死机，如出现死机现象，请关闭后侧电源开关，关机3分钟后重新启动。 　　2) 在锤击板工作时请不要随意打开均质器门，以免样品液溢出。应按“开/停”建，设备自动停止运行。当把门关上后，再按“开/停”建，设备自动完成余下工作。切勿颠倒操作。 　　3) 仪器长期不使用应切断电源，拨去插头。防止无菌均质器内部电子元器件老化。 　　4) 均质器门底部为防止均质袋意外破裂，便于清洗溢出物，底部设计为空的，可放置接水盘，所以仪器运转时请勿用手从底部伸入，以免纹伤手指。均质器工作时最好不要打开均质器门，造成不必要的损失。 　　5) 机器在运转前，请仔细查看均质箱内有无异物，以免工作时发生故障和损伤均质袋。 　　6) 硬块，骨状，冰状物等坚硬锐利的物质不宜使用，以免破坏均质袋。 　　7) 仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直接照射，特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方，以免老化。 　　8) 量少时，需加快速度时，均质物纤维比较坚韧时，则可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距，来达到更好的均质效果。注意调整的距离，避免发生空击等损伤无菌均质器的情况发生。 　　无菌均质器正确使用步骤为： 　　1、把需处理的试品放入无菌均质袋中。 　　2、打开均质器门(可全开启)，将无菌袋开口在关闭均质器门时夹住。 　　3、设定使用程序(如拍击速度、拍击时间等)，进行拍击均质工作。 　　4、实验完毕后，打开均质器门，取出样品。 　　无菌均质器的使用如果做到以上几点，可以极大延长其使用寿命和使用效果。让我们正确使用无菌均质器从现在开始!

[color=#333333]乳制品商业无菌检验中，如果通过检验菌落总数，大肠菌群，致病菌结果均未检出或者是0，能说明是商业无菌吗[/color]

问下，像伤可贴这种检品要做微限啊还是无菌啊

品管部微生物检测用的无菌室有比较明确的规定要求。那么菌种岗位的呢？用于菌种传代等接种工作的无菌室，有什么要求呢？洁净度的级别？做哪些检测（沉降菌、尘埃粒子、风速）？用什么清洁？用什么消毒？最关心的是，人员进入时也要穿无菌服的么？穿普通白大褂可以么？谢谢各位了！