无菌液体灌装机

灌装机的分类与选择 目前市场上的灌装机型号产品繁多，各式各样的灌装机都有，根据物料的不同也有人称其为分装机、充填机、包装机等。首先我们从自动化程度上划分为全自动灌装机、半自动灌装机和手动灌装机;按灌装物料上区分可分为液体灌装、膏体灌装、粉剂灌装和颗粒灌装等。液体灌装按灌装原理可分为压力灌装机、常压灌装机、真空灌装机和无菌灌装机等，这类灌装机的计量方式主要定时灌装和定容量灌装。压力灌装机是指在灌装的过程中高于大气压力，用储蓄罐的液面高于灌装机的液面，用压力灌装，这种主要高采用在高速生产线上，对灌装的精度不是太严格，如酱油、白酒、啤酒等;常压灌装机是在大气压力下靠液体自重进行灌装。灌装机采用活塞或叶轮等原理给物料加压来完成灌装，在灌装过程中会有较少的气泡出现。这也是人们最常见的灌装机，用途很广泛，适用于各种液体状乳油状的物料灌装;真空灌装机是指在灌装的压力低于大气压力下进行灌装，这种灌装机结构原理简单，工作效率高，常用于灌装过程中容易产生很多气泡，要求速度快的情况下使用，如油类、果酒等无菌灌装机一般都是配在自动化机器上使用，这种灌装机是在灌装过程中不受到外界的污染，常用在乳制品行业，如牛奶、果奶等。膏体可以分为流体、半流体、半固化和带颗粒等。流体、半流体的物料，拉丝不严重的物料，可以用普通的膏体灌装机。如洗发水、化妆品等;半固化物料并拉丝很高的物料就得用液压灌装机。如：黄油等;对于带颗粒的物料可以用搅拌酱类灌装机，如豆瓣酱等。粉剂灌装可分为两种方式：一种是利用螺杆来控制物料的重量，有一定流动性的粉剂状粉末状物体。如奶粉、珍珠粉、面膜粉等;另外一种是称重式，常用在大剂量灌装上。如面粉、水泥等。颗粒的灌装可分为容计式、称重式和数粒式灌装机也可以称包装机。容计式主要用在小颗粒的灌装，对颗粒大小均匀，误差偏大的灌装机器，如颗粒冲剂等;称重式灌装机是用于颗粒偏大，对物料完整的灌装方式。如蔬菜种子、农副产品等;数粒式灌装是物料颗粒大小比较均匀，按数量包装的方式，主要应用在医药行业，如片剂药等。在选择灌装机的时候，首先要明白灌装的是什么物料，用哪种机型，再根据灌装规格去选择适合自己的一款机型。

我们科室新开展了 检定液体物料定量灌装机的检定JJG-687最近有人提出对奶粉生产线的定量灌装机进行检测，但是不知道有没有固态物料定量灌装机的检定规程。想询问各位大大，有没有这个规程，如果没有，那么奶粉灌装机要依据什么样的检定规程呢？？？

法国Serac公司刚刚向市场推出一种新型的RABS隔离装置，以优化牛奶和饮料在灭菌区或灭菌区周围进行无菌灌装的条件。采用该装置可以连续灌装生产72小时，中途不必进行清除污染的作业，从而在保证安全的情况下，提高了生产率。 与传统的隔离装置相比，该装置有三项重大改进： 　　一、单向流通 　　与传统的隔离装置不同的是，RABS装置并不是完全密闭的，而是一道由操作间正高压作用的空气力学屏障，它对无菌容器起保护作用。灌装的流通方向为垂直单向流通，流通速度可以控制，使空气可以连续地循环和更新。通过两种技术的联合使用，可以清除操作间里存在的颗粒物，预防来自外部的污染。 　　在避免了完全密闭的同时，持续的空气循环延长了无菌条件的时间，可以连续生产72小时，中间不必停工进行清除污染的作业。 　　二、屏障区 　　无菌区的四周是屏障区，而屏障区也处在单向流通的控制之下。屏障区就像处在操作间和车间其它地方之间的一个辅助的保护屏障，方便了机器的清洁和维护作业。 　　三、易于进入 　　机器的心脏区域——无菌操作问，在生产时只能通过在灌装机关键部位设的手套箱进入。但所有其它的部位如产品的处理工位和生产线进出点，都可以通过外部的门进入，进入的操作人员也不必穿无菌服装。屏障区所有的进出都有登记存储，以保证操作具有良好的跟踪性能。 　　这种新型的RABS隔离装置首先是为符合制药业的要求而设计的。Serac公司在设计该隔离装置时，参考了国际生产力促进协会（ISPE）为美国食品和药品管理局（FDA）确立的定义。该定义有7项标准： 　　①硬性隔壁，以在生产和操作人员之间形成物理的隔离。 　　②单向流通，ISO　5级标准。 　　③采用手套和自动装置，以避免灌装时人员进入。 　　④设备的传输系统应能避免使产品暴露在不洁净的环境当中。 　　⑤表面高度消毒处理。 　　⑥环境达到ISO　7级要求。 　　⑦干预极少，且需要在干预后进行清除污染的处理；门要上锁，并带有开锁登记系统；带有正压；环境符合1SO　5级要求。 　　法国Serac股份有限公司成立于1969年，是一家专门生产液体和半液体灌装和封装机械以及包装生产线的公司。该公司生产的设备用于食品、工业品、化学产品和卫生用品（香水、美容和药品）市场。

大家好！我想问下，在灌药生产线上（或者其它灌装颗粒的生产线上）对于颗粒不同的尺寸范围，生产灌装机时是怎样考虑传感器的选择问题？颗粒是一粒一粒进入瓶子，还是无序地一起进入瓶子？用到的传感器所监测的量是什么？小弟是外行，希望大家帮助下，或者提供其它可以咨询的方式也行，十分谢谢了！！

液态奶无菌砖包括利乐包、康美包等以纸、铝箔、塑料薄膜等为基材复合而成的可供无菌罐装要求的产品的包装。目前，可供参考的产品标准有：(1) GB 19741-2005 《液体食品包装用塑料复合膜、袋》：适用于总厚度小于0.2mm的由塑料与塑料、塑料与纸和铝箔（或其他阻隔性材料）复合而成的包装材料或包装袋。(2) GB/T 18192-2008 《液体食品无菌包装用纸基复合材料》：适用于以原纸为基体，与塑料、铝箔或其他阻隔性材料经复合而成，以卷筒形式或以单个包装产品形式供无菌灌装液体食品用的材料。(3) QB/T 3531-1999 《液体食品复合软包装材料》：适用于以原纸、低密度聚乙烯（LDPE）、铝箔等为原料经挤压复合而成，专供瑞典利乐公司无菌灌装机包装液体食品的材料。

各位大神，想请问 用2216e液体培养基培养的菌液 想获得无菌上清液应该用哪一种滤膜呀？]

生产线过氧乙酸杀菌和冲洗目的：a）微生物隔离层内的机器外部杀菌b）供给外围杀菌流体的管道杀菌杀菌阶段结束后，为避免因环境中杀菌液的残留而污染成品，执行冲洗操作，无菌水由Unitherm提供。杀菌液由Unidox供给，如下所示：杀菌 单元需要条件持续时间—注释a袋隧道/无菌盖（袋杀菌机不要求杀菌）·设备的卫生·设备准备好·Unidox准备好·过滤器无菌·已执行泡沫清洗·已执行CIP大约20minb灌装机（外表面杀菌）·设备的卫生·设备运转·Unidox准备好·过滤器无菌·已执行泡沫清洗·已执行CIP大约20min此外，下列路线需要杀菌：·泡沫路线·无菌水冲瓶颈路线·无菌氮气路线（如果存在）c冲洗机（内部和外部杀菌）·设备的卫生·设备运转·Unidox准备好·过滤器无菌·已执行泡沫清洗·已执行CIP大约20min通过打开旋转圆盘传送部分的喷嘴杀菌执行冲洗

[color=#444444]前期稀释时用[/color][color=#444444]scdlp[/color][color=#444444]液体增菌液代替生理盐水，稀释完的菌液放到冰箱可以保存几天第二天或者第三天再拿出来涂布菌落总数还准确么[/color]

[size=3][b]“人人高”牛奶中毒原因查明 灌装密封不严致变质[/b] 4月19日，旬阳、勉县两百余学生饮用蛋奶工程“人人高”牛奶发生食物中毒，随后省市质监、药监等部门成立联合调查组介入调查。昨日记者从调查组获悉，[color=#d40a00]原因已经查明，系厂家灌装机械密封不严，导致灌装牛奶时空气进入发生变质。[/color][/size]　　4月21日，调查组进驻陕西人人高乳业有限公司，仔细查询该企业的生产环节，拆卸部分关键设备进行分析，初步怀疑包装设备存在问题。经过论证，再结合抽样送检结果，认为事故原因是灌装机调节阀杆腐蚀致使密封不严，导致灌装牛奶时空气进入，导致牛奶发生变质。　　对此，陕西人人高乳业有限公司总经理孙自堂表示，要向广大受害学生致歉，并承认在管理上存在问题。据他介绍，企业有严格的机器日常检修制度，但由于该灌装设备使用才两三年时间，加之不易损坏，并没有在检修范围内，通过此事故反映出企业责任心不强，他们要吸取教训，避免类似事故再次发生。据悉，对受害学生的赔偿方案近日将公布。　　另讯(记者高建平)勉县4月19日发生27名学生饮用“人人高”早餐奶出现身体不适，卫生部门抽样检验结果表明，“人人高”一个批次的奶品，大肠菌、菌落总数均严重超标。

谁有无菌灌装方面的资料参考参考[color=#DC143C][size=4]楼主能不能说得更清楚一些，这样对你的帮助更大[/size][/color]

液体灌装秤是一种自动定量计量设备，其功能是将大量的散装液体物料自动分成预定重量的小份载荷，进行定量容器包装。 　　 液体灌装秤自动化程度高，可以尽量避免物料溢出，最大程度地防止物料本身对环境的污染，从而对操作人员进行有效地劳动防护。其系统工作稳定可靠，操作简便，称量准确，重量数据可通过仪表输出给计算机等其它外接设备。 液体灌装秤的特点是独特的喷枪设计，易于操作，灌装快速，准确。双速加料，保证灌装精度。操作 安全，各种过程连锁，保证操作安全。安装简便，只需用地脚螺栓固定设备，连物料管道电源和气源，即可开始灌装。液体灌装秤广泛用于饮料，油脂，化工行业的液体定量灌装。该液体灌装秤是一种半自动的液体灌装秤,采用液面上灌装，适用于无泡沫或轻微泡沫物料。设计独特的喷枪易于操作，灌装快速、精确。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=97887]无菌灌装产品的工艺模拟实验（中英文对照）.rar[/url]

一、采集生产过程中的样品1、对插入点进行消毒。2、通过管道垫圈护着运送管上紧合不锈钢制喷嘴插入注射器针头。3、将注射器里的样品转移到样品容器。如果要采样单独来做微生物和化学成分分析，先用无菌工艺取微生物分析用的样品并贴上标签。4、把样品放到装有冰的样品盒里面，防止污染，并且立即把它连同样品数据一起转移到实验室。二、包装零售液体产品随机选择所有产品中有代表性的样品去检测。实验报告表格应包括生产日期（或者货架期产品的条码日期）。零售液体产品的取样是为了检查出产地和出产时间。当不可能收集一种产品的袋装产品时（如：产品包装在大的商品袋时），充分混合牛奶或牛奶产品，并且在无菌的状态下转移至少100mL的有代表性样品到无菌样品容器。收集一个温度控制样品,温度控制样品的大小必须至少是最大样品收集量的一半（如：如果样品收集1gal，温度控制样品必须是0.5gal或更大）。标明样品，迅速将它们放到装有冰的样品盒里，保持温度在0-4.4℃，防止污染（高于冷冻剂的顶部，或者用不渗水的塑料袋密封起来，特别是在运输过程中），将它们和样品数据一起在48h内送到实验室，时间越短越好。三、灌装机牛奶1、从先前未开启过的分装机管道采样，管道无需先用牛奶冲洗。取出大约500mL牛奶后收集样品，用来检测在用分装机的情况。2、收集一个温度控制样品。3、标明样品，迅速将它们放到装有冰的样品盒里，防止污染，将他们和样品数据一起在48小时内送到实验室，时间越短越好。四、调咖啡用的单独乳酪小袋装因为单一包装往往不能满足分析过程所需要的量，随意选择十个包装来满足检测和代表大多数的要求。包装应在不打开的情况下转移到实验室。（也就是说，取样前不要混合在一起）。1、经过巴氏杀菌和超巴氏杀菌的小袋装乳酪：标上条码、日期或实验室工作表上的批号，将小袋子放入塑料袋并密封，然后装有冰的样品盒里。2、干粉小袋儿装乳酪：就包装好的干燥产品放到一个袋子或盒子，避免污染和吸湿。不要把他们放到衣物里。在室温保存和运输样品。五、高压包装产品1、零售包装。(1)随机选择所需数量的包装。(2)标明样品，迅速将它们放到装有冰的样品盒里，防止污染，将他们和样品，数据一起送到实验室。2、商业包装。(1)随机选择所需数量的包装。(2)通过颠倒25次来混匀这些包装，或者搅拌30s。(3)无菌条件下分装吸取里至少100mL内容物采样容器。(4)标明样品，迅速将它们放到装有冰的样品盒里，防止污染，将它们和样品数据一起送到实验室。

这是PDA的技术报告No.22“Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products”。描述来进行无菌灌装验证应该注意的问题，本文发布是在1996年，距今已经有10年的历史了，但是现在看来，仍然是一篇很好的参考文献，大多数的建议仍然有指导意义。压缩包里有三个文件，分别是加密的PDF文档，加密证书和使用说明。只需要在第一次打开文档前先安装证书就可以看了。如果换一台电脑的话，则需要重新安装证书。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=38429]PDATR22无菌灌装产品的工艺模拟实验（中英文对照）[/url]

想上自动化的生产线，需要采购自动灌装机和自动贴签机，最好能将两个设备连在一起，有没有什么好的建议？

吐温80作为药用辅料内控标准要求检查无菌，但是根据2010版药典附录并没有找到相关检验量和检验数量的规定，具体该去多少样品进行检查呢？请各位高数指点一下。

无菌室一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。可以用板材和玻璃建造。面积不宜过大，约 4 — 5 平方米即可，高 2.5米左右。无菌室外要设一个缓冲间，缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向，以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。无菌室标准化规程与验收规范。1.目的　　本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围　　生测实验室 3.责任者　　QC主管生测员 4.定义　　无 5.安全注意事项　　严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程　　6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 　　6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 　　6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 　　6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。 　　6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 　　6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。 　　6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 　　6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 　　6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 　　6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 　　6 .11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 　　6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 　　6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 　　6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 　　6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 　　6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照　　参照《药品卫生检验方法》 《中国药品检验标准操作规范》中 (无菌检查法)章节 中华人民共和国医药行业标准 YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》

4.1培养基的准备选用硫乙醇酸盐流体培养基：硫乙醇酸盐流体培养基200g注射用水6600ml加注射用水搅拌混合均匀并慢慢加热溶解，然后煮沸1分钟，在121℃高压灭菌30分钟。4.2试验条件 4.2.1在进行培养基无菌灌装试验前，应对车间无菌作业的环境进行全面监测，包括空气悬浮粒子监测、表面微生物监测、空气浮游菌监测、层流罩下的沉降菌监测，以及人员的个人卫生（如工作服、手的微生物污染状况）监测。只有各项监测结果达标时，方可进行培养基灌封。4.2.2严格按照生产厂商的配制要求，在配料间用注射用水配制培养基。除菌过滤前，用一无菌瓶取50ml培养基溶液，用作除菌过滤前培养基溶液的微生物污染水平检测，除菌过滤作业完全模拟实际生产。4.2.3由受过培训的无菌生产操作人员模拟实际的灌装作业进行培养基灌封，其灌装容器及胶塞与产品生产时完全一致，每批灌装数量3300瓶以上，每瓶灌装量与实际产品相同。4.2.4西林瓶、胶塞、安瓿瓶和灌装用管道用具等按生产工艺要求进行灭菌。4.2.5人员按工艺要求穿灭菌的洁净工作服操作。

问: 做无菌验证时阳性对照菌是怎么加入的？可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入吗？答:严格的说是要在最后一遍冲洗液中加入阳性对照菌的,这主要是考量滤膜对于阳性菌的截留性～但是滤器如果可以提供滤膜对于阳性菌的充分截留的话在最后的培养体系中加入阳性菌也是未尝不可的. 如果供试品没有抑菌作用,可以在加完培养基后用无菌的注射器把菌液注入,摇匀如果供试品有抑菌作用,正如安哥洛卡所讲,在最后一次冲洗液中加入阳性对照菌,摇匀,抽虑,加培养基. 无菌检查，加入阳性的方法可以有许多种，可以根据个人的习惯。只是注意：1、避免人为污染。2、阳性菌加入数量，符合“2005版中国药典XIJ微生物限度检查法”的规定。关键词:阳性对照菌 问: 离心沉淀法的原理、操作和注意事项是什么? 答:原理:利用沉降系数的差异将供试品和微生物进行分离; 操作:取规定量的供试液，3000转/分离心20分钟（供试液如有沉淀，先以500转/分离心5分钟，取全部上清液再离心），弃去上清液，留底部集菌液约2ml，加稀释剂至原规定量. 注意事项:真菌由于沉降系数比较小, 500r/min离心5min，黑曲霉、白色念珠菌回收率为20%,因此其检查不适宜用低速离心沉淀法. [col

无菌为一相对概念,大输液无菌检查结果为无菌时,指在一定灭菌工艺条件下,对最终灭菌品相对于抽验样本数量的微生物存活率低于10 - 6 [ 1 ] 。笔者在按照中国药典2000 年版二部对大输液进行无菌检查时,认为需要注意以下环节。1 　环境无菌试验区应为净化区,尽可能除去微生物污染,试验区应定期检测其无菌符合程度,并在使用前采取有效的方法进行无菌处理。若使用开放式薄膜过滤器,要更加严格注意操作区环境,避免外界引入微生物对实验结果造成影响。2 　培养基2. 1 　培养基灵敏度检查　利用不同菌株生长试验来评价培养基灵敏度,只有培养基灵敏度符合要求时,在一定体积范围内才能够检测出大输液中微量残存的活菌,做大输液无菌检查前一定要做培养基灵敏度检查。2. 2 　培养基的pH 值和澄清度　不同微生物生长有相对适宜的pH 值范围,培养基配制后调节到相应的pH 值范围,创造一个最有利于微生物生长的pH 值条件,同时也保证实验的平行性。配制后的培养基应最好通过4 层以上纱布进行过滤后再分装灭菌,这样处理过的培养基细腻、澄清,无杂质和异物,有利于最终结果判断。2. 3 　培养基灭菌时间与温度　中国药典2000 年版二部规定无菌检查用培养基制备时均以115 ℃灭菌30 min ,从灭菌法角度讲,既保证培养基无菌程度,同时又防止营养成分流失。过高的灭菌温度、过长的灭菌时间,会破坏培养基中的葡萄糖成分,使培养基颜色变深,同时需氧菌、厌氧菌培养基中红色厌氧环高度加大,影响无菌检查用培养基的质量。2. 4 　培养基临用前检查　大输液无菌检查中的需氧菌、厌氧菌培养基在使用之前,应做培养基检查。培养基上部红色厌氧环高度为培养基高度的1/ 10～1/ 5 时可以使用,若红色厌氧环超过1/ 5 高度时,说明培养基中厌氧环境发生变化,应在保证培养基无菌程度情况下对培养基做水浴加热处理,除去培养基中游离氧后再使用,加热仅限一次[ 2 ] 。3 　对照实验3. 1 　阳性对照实验　阳性对照实验为无菌结果判定标准参考依据之一,若阳性菌对照管中无菌生长,则对应样品无菌检查结果无效。大输液无菌检查用对照菌株为金黄色葡萄球菌[CMCC( 26003 ][ 2 ] 。加入阳性对照菌液时,只有确认此对照菌液为新近配制,并且活菌数为10～100 个/ ml - 1时,才能保证阳性对照实验结果的有效性。3. 2 　阴性对照实验　阴性对照实验一般能够反映培养基灭菌程度、使用器具无菌程度、操作区域的无菌环境和操作人员的无菌技术等情况,用于对检查结果发生疑问时溯源的依据和问题环节的排除。4 　结果判断4. 1 　浑浊程度变化　大输液无菌检查的培养期为7 d ,若有微生物生长,培养基会因生长代谢而使培养基变浑浊。对于需氧菌、厌氧菌的培养,正常加入阳性对照菌液的培养基,一般在培养第2 天有菌生长,培养基变浑浊,随着培养时间的延长,浑浊程度加大至最后出现沉积现象。有极少量微生物的大输液供试品,接种在需气菌、厌气菌培养基中,其微生物生长一般比阳性对照管缓慢,由于某些细菌经过高压灭菌后,可能以休眠状态、亚致死状态或缺陷状态存在,需要一个恢复期后才能生长繁殖。实验中发现有的微生物在培养的第5 天、第6 天才有生长现象,培养基才发生浑浊,因而对培养基变化情况要逐日观察,及时记录。同时,需氧菌、厌氧菌培养基中为保证厌氧环境加入的少量琼脂在培养过程中,会使培养基本身产生轻微浑浊现象,浑浊程度虽每日略有变化但不发生突然改变时,也不认为有微生物生长。若无法确定,可与阴性对照做平行比对,也可按照中国药典2000 年版二部附录中无菌检查法中要求进行下一步操作。真菌的结果判断相对容易,真菌培养基澄清度大,培养过程中培养基本身几乎无变化,有真菌生长时,可见培养基浑浊,或培养基中出现菌团。4. 2 　颜色变化　真菌培养基颜色均一,结果容易判断。需氧菌、厌氧菌培养基在有微生物生长时,培养基上部红色厌氧环消失,整个培养基发生浑浊并变成浅黄色或黄白色。在培养过程中也出现下面几种情况:红色厌氧环扩散至培养基高度1/ 2 左右 整个培养基颜色变为淡红色 培养基上下部分为淡红色,中部为培养基正常颜色。笔者建议,对无菌结果判断要在保证无外界环境因素及人为因素影响情况下,结合培养基浑浊程度变化和颜色变化共同进行。参考文献:[1 ] 　马绪荣,苏德模主编. 药品微生物学检验手册[M] . 第一版. 北京:科学出版社,2000. 8.[ 2 ] 　中国药典. 二部[ S] . 化学工业出版社,2000 :附录89～91.[收稿日期]2001203205

1.目的本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。2.适用范围 生测实验室3.责任者 QC主管生测员4.定义 无5.安全注意事项严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。6.规程6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。6.11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。

35、如何进行容器密封性验证？ 答：容器密封性验证常采用物理和微生物学检测手段。物理检测有许多优点，如灵敏度较高、使用方便、检测迅速及低成本等。在产品有效期内，均可使用物理检测方法来确定包装完整性是否符合规定要求。进行包装完整性检测的一个重要原因是确保无菌产品始终保持无菌状态。因此，在产品包装的研发阶段，应考虑采用微生物侵入试验，或采用经验证过的并且比微生物检测更为有效的物理试验方法，来检测产品包装的完整性。但是，对效期内产品的稳定性试验来说，因进行微生物侵入试验较为困难，故建议采用物理检测方法。微生物侵入试验是对最终灭菌容器／密封系统完好性的挑战性试验。在验证试验中，取输液瓶或西林瓶(小瓶)，灌装入培养基，在正常生产线上压塞、压盖灭菌。然后，将容器密封面浸入高浓度运动性菌液中，取出、培养并检查是否有微生物侵入，确认容器密封系统的完好性。同时，需作阳性对照试验，确认培养基的促菌生长能力。36、在采用微生物浸泡法进行容器密封性验证时，为什么要事先去除铝盖，请问除去铝盖后，是不是只剩胶塞，那么在试验过程中会不会发生药液泄露而影响验证结果？答：去除铝盖是为了造成一个更为严格的条件，讲课中以冻干粉针剂为例，通常容器内有较高的真空，不会造成漏液，试验者可根据自己产品的特点判断去除铝盖是否适用。37、密封性验证中，如铝桶的验证，用培养基验证无法观察结果，是否有其他方法？答：对于无菌原料的容器，建议尝试物理的方法，如盐水渗入法。

1.目的：本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围：生测实验室 3.责任者：QC主管生测员 4.定义：无 5.安全注意事项：严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 6.11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照：《药品卫生检验方法》、《中国药品检验标准操作规范》中(无菌检查法)章节、中华人民共和国医药行业标准YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》。 8.分发部门：质量管理部

1.目的：本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程。 2.适用范围：生测实验室 3.责任者：QC主管生测员 4.定义：无 5.安全注意事项：严格无菌操作，防止微生物污染；操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯。 6.规程 6.1.无菌室应设有无菌操作间和缓冲间，无菌操作间洁净度应达到10000级，室内温度保持在20-24℃，湿度保持在45-60%。超净台洁净度应达到100级。 6.2.无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。 6.3.严防一切灭菌器材和培养基污染，已污染者应停止使用。 6.4.无菌室应备有工作浓度的消毒液，如5％的甲酚溶液，70％的酒精，0.1％的新洁尔灭溶液，等等。6.5.无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁，以保证无菌室的洁净度符合要求。 6.6.需要带入无菌室使用的仪器，器械，平皿等一切物品，均应包扎严密，并应经过适宜的方法灭菌。6.7.工作人员进入无菌室前，必须用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手)，方可进入无菌室进行操作。 6.8.无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上，并且同时打开超净台进行吹风。操作完毕，应及时清理无菌室，再用紫外灯辐照灭菌20分钟。 6.9.供试品在检查前，应保持外包装完整，不得开启，以防污染。检查前，用70％的酒精棉球消毒外表面。 6.10.每次操作过程中，均应做阴性对照，以检查无菌操作的可靠性。 6.11.吸取菌液时，必须用吸耳球吸取，切勿直接用口接触吸管。 6.12.接种针每次使用前后，必须通过火焰灼烧灭菌，待冷却后，方可接种培养物。 6.13.带有菌液的吸管，试管，培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒，24小时后取出冲洗。 6.14.如有菌液洒在桌上或地上，应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟，再做处理。工作衣帽等受到菌液污染时，应立即脱去，高压蒸汽灭菌后洗涤。 6.15.凡带有活菌的物品，必须经消毒后，才能在水龙头下冲洗，严禁污染下水道。 6.16.无菌室应每月检查菌落数。在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的无菌培养皿若干，无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml，放至凝固后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，证明无菌后，取平板3～5个，分别放置工作位置的左中右等处，开盖暴露30分钟后，倒置于30～35℃培养箱培养48小时，取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平均不得超过3个菌落。如超过限度，应对无菌室进行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。 7.参照：《药品卫生检验方法》、《中国药品检验标准操作规范》中(无菌检查法)章节、中华人民共和国医药行业标准YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》。 8.分发部门：质量管理部

1、目的:本规程旨在为无菌操作及无菌室的保护提供一个标准化规程.2、适用范围:生测实验室3、责任者:QC主管生测员4、定义:无5、安全注意事项 严格无菌操作,防止微生物污染;操作人员进入无菌室应先关掉紫外灯.6、规程 6.1 无菌室应设有无菌操作间和缓冲间,无菌操作间洁净度应达到10000级,室内温度保持在20-24℃,湿度保持在45-60%.超净台洁净度应达到100级. 6.2 无菌室应保持清洁,严禁堆放杂物,以防污染. 6.3 严防一切灭菌器材和培养基污染,已污染者应停止使用. 6.4 无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5％的甲酚溶液,70％的酒精,0.1％的新洁尔灭溶液,等等. 6.5 无菌室应定期用适宜的消毒液灭菌清洁,以保证无菌室的洁净度符合要求. 6.6 需要带入无菌室使用的仪器,器械,平皿等一切物品,均应包扎严密,并应经过适宜的方法灭菌. 6.7 工作人员进入无菌室前,必须用肥皂或消毒液洗手消毒,然后在缓冲间更换专用工作服,鞋,帽子,口罩和手套(或用70%的乙醇再次擦拭双手),方可进入无菌室进行操作. 6.8 无菌室使用前必须打开无菌室的紫外灯辐照灭菌30分钟以上,并且同时打开超净台进行吹风.操作完毕,应及时清理无菌室,再用紫外灯辐照灭菌20分钟. 6.9 供试品在检查前,应保持外包装完整,不得开启,以防污染.检查前,用70％的酒精棉球消毒外表面. 6.10 每次操作过程中,均应做阴性对照,以检查无菌操作的可靠性. 6.11 吸取菌液时,必须用吸耳球吸取,切勿直接用口接触吸管. 6.12 接种针每次使用前后,必须通过火焰灼烧灭菌,待冷却后,方可接种培养物. 6.13 带有菌液的吸管,试管,培养皿等器皿应浸泡在盛有5%来苏尔溶液的消毒桶内消毒,24小时后取出冲洗. 6.14 如有菌液洒在桌上或地上,应立即用5%石碳酸溶液或3％的来苏尔倾覆在被污染处至少30分钟,再做处理.工作衣帽等受到菌液污染时,应立即脱去,高压蒸汽灭菌后洗涤. 6.15 凡带有活菌的物品,必须经消毒后,才能在水龙头下冲洗,严禁污染下水道. 6.16无菌室应每月检查菌落数.在超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的营养琼脂培养基约15ml,放至凝固后,倒置于30～35℃培养箱培养48小时,证明无菌后,取平板3～5个,分别放置工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于30～35℃培养箱培养48小时,取出检查.100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级洁净室平均不得超过3个菌落.如超过限度,应对无菌室进行彻底消毒,直至重复检查合乎要求为止.7、参照《药品卫生检验方法》《中国药品检验标准操作规范》中(无菌检查法)章节 中华人民共和国医药行业标准YY/T0188.6-1995《药品检验操作规程》8、分发部门:质量管理部

如题！我想测定菌株对六价铬的还原能力如何？需要测定菌液中六价铬含量的变化，可以按照哪个标准来测定呢？用DPC方法测定中的重铬酸钾一定要用优级纯吗，分析纯可以吗？期待大家的答复，谢谢！

致病菌增菌液在划完选择性平板后可以灭菌处理掉了吗，还是要全部实验结束再处理。如果不能处理，是要放在培养箱继续培养还是可以放4℃冰箱，培养箱培养着很臭呢

稀释好的菌液是否培养两天计数后，再用来实验？10版药典说菌液制备后在两个小时内使用，大家是怎样做的呢？

请教一下各位：白色念球菌培养用什么增菌液合适？非常感谢～