基因合成仪

[size=5][b]多肽合成仪发展史[/b][/size][font=楷体_GB2312][size=3][color=black][b]多肽合成仪简介[/b][/color][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 美国洛克菲勒大学教授Bruce Merrifild 在1963年发明的多肽固相合成技术（SPPS）是多肽合成领域的一个重大突破，对化学，生化，医药，免疫和基因科学等学科和领域都起了巨大的推动作用. 他本人也因此项发明荣获1984化学诺贝尔奖。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 多肽固相合成技术的发明同时促进了肽合成的自动化。世界上第一台真正意义上的多肽合成仪出现在1980年代初期，它是利用氮气鼓泡来对反应物进行搅拌，用计算机程序控制来实现有限度的自动合成。虽然在搅拌方式和其他各项功能方面有着明显的缺陷，但是它毕竟把人从实验室里解放出来，极大地提高了工作效率，所以受到了多肽科学家的一致赞扬。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 多肽合成仪的问世大大促进了多肽科学的发展。反过来，随着多肽科学的发展，科学家也对合成仪提出了更高的要求，从而带动了合成仪的发展。目前多肽合成仪品种繁多。从合成量上分，可分为微克级的，毫克级的，克级的和公斤级的；从功能上分，可分为研究型的，小试型的，中试型的，普通生产型的和GMP生产型的；从自动化程度上分，可分为全自动的，半自动的和手动的；从通道上分，可分为单通道的和多通道的；从技术角度上分，可分为第一代的，第二代的，和第三代的；等等。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][color=black][b]第一代多肽合成仪[/b][/color][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3]标志性特点是采用氮气鼓泡的搅拌原理来对反应物进行搅拌，即合成仪上反应器是固定的，氮气从反应器的下方通过反应器到上部排出，在这一过程中产生的汽泡把固相和液相混合起来。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 它有着消耗成本大，有死角等严重缺陷，已大部分退出了市场。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][b][font=楷体_GB2312][size=3]第二代多肽合成仪[/size][/font][/b][font=楷体_GB2312][size=3]标志性特点是用不完全性的机械搅拌来取代氮气鼓泡，一般可分为接触式搅拌与非接触式搅拌两种。 接触式搅拌常见的搅拌方式是伸入反应器内部的螺旋桨由上部的电机带动进行快速旋转，使反应器内部的固液两相进行混合。但这种方式会严重降低合成产量，清洗也比较麻烦，还会缩短反应器的寿命，最主要这种方式也会产生反应死角。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 目前全世界共17个多肽合成仪生产厂商有16个放弃了接触式搅拌方法。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][b][font=楷体_GB2312][size=3]第三代多肽合成仪[/size][/font][/b][font=楷体_GB2312][size=3] 是由美国[/size][/font][font=楷体_GB2312][color=#000000][size=3]ABI[/size][/color][/font][font=楷体_GB2312][size=3]公司制造的无死角多肽合成仪为标志诞生的。其反应器转动方式有别于前两代的多肽合成仪，即反应器上方相对固定，而下方作圆周360度快速旋转，带动反应器里的固液两相从底部向上作螺旋运动，一直达到反应器的最上方。换句话说，溶液可以达到反应器内部的任意点，真正做到了无死角。由于搅拌速率可达每分钟1800转的高速，反应得以充分完全。其合成肽的纯度相当高，对于ACP65-74型肽的粗肽纯度可达87.6% （ABI433使用者手册）。由于无死角的搅拌方式保证的肽的合成纯度，ABI433型多肽合成仪（其退出多肽合成仪市场后最后一款仪器）至今在世界上还占有着很大的比例。当然，ABI产品的售价也是最高的。由于部件使用频率高，电磁阀会经常损坏，而ABI将7个电磁阀做成模块化的设计，坏掉一个电磁阀必须要更换整个模块，无形中增加了维修成本。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3]因此，成本过高，也已停止生产。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 无死角多肽合成仪的另一款方式是反应器在数控马达的带动下作上下180度的翻转运动。固相和液相在运动过程中不断从反应器的一端到达另一端，再返回来。所以在上下180度的翻转运动中溶液可以达到反应器内部的任意点。数控马达的转速可根据需要任意调节。一般用这种仪器合成出来的肽纯度是最高的。由于反应器越大，溶液作180度的翻转运动所得到的惯性也越大，搅拌也越来越剧烈，产品的纯度也会越来越高，所以只要小试能成功，就可以跳过中试这一步，直接放大生产。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3][/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3]微波法多肽合成仪[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 另一种革新式的产品，微波多肽合成仪的问世，是区别与之前任何一类合成仪的新产品。其采用微波加热方式，大大提高了反应速度，将多肽合成的速率增加到之前多肽合成仪的几倍甚至十几倍。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 这种仪器目前在中国市场还比较受欢迎，但在国际上，其实已经不认可这种方式生产多肽了，因为它有个致命缺点。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] 在加热的情况下副反应也相应增多，多肽纯度不能与之前的第三代甚至第二代产品媲美。另外，微波加热方法无法放大，故不适合用作多肽药物的研发。[/size][/font][font=楷体_GB2312][size=3] （部分内容摘自：百度百科-多肽合成仪）[/size][/font]

前段时间实验室试用了一家仪器公司代理的进口流动合成仪，效果蛮好的。就是类似于微管道反应器，反应液边流动边反应。之前做了两个实验，都是平时很迟钝的那种，一天一夜或者两天两夜那种，后来使用流动合成仪，增加了系统压力从而可以大大升高反应温度，实验进行了一个小时就达到甚至比之前的反应效果还好。正好我们实验室有一个才从国外回来的博后，他以前就用过流动合成，效率提高很多，也完成了一些平时烧瓶条件不好进行的反应，尤其是在新药研发和条件优化时具有很大的优势。大家有没有知道这款仪器的呢？想多交流交流。加上最近听到的关于流动化学的讲座，我觉得这样的仪器在国内市场上会有很大前景的哦，不过需要一个过程，不知道大家怎么看。

求购二手3900合成仪、BLP-192合成仪13301096091 张先生[em09511]

[size=1][size=4]请大家发表一下看法： 现在微波合成越来越被人们重视了，以前微波消解比较多，现在微波合成也逐年增加，对于做合成的人来说，希望所用微波合成仪都具备哪些功能呢？大家踊跃参加，一起讨论。还有谁用过微波合成仪觉得哪些功能不错也可以罗列！谢谢！积极参与！[/size][/size]

各位老师好，有没有熟练操作希施CS336X多肽合成仪的，我们单位想学习一下这台仪器的使用，南京的最好，方便交流。走过路过的朋友多多发言，或提供学习交流的渠道，非常感谢！

请问哪里有卖固相合成仪用于合成多肽的，还有层析缸？谢谢专家！

请问国产微波化学合成仪有哪几家的产品比较好？我单位拟购买，正在选型，但手中厂家的资料太少，请教一下是否有关这方面的信息？

偶想了解有关蛋白质合成仪方面的信息?请知之者不吝赐教.

大家用的微波消解是哪家的？还有微波合成仪有用过哪家的？出现过什么问题？用的时候觉得有哪些不便之处。

现在用一款国内的微波合成仪，对于顶部开口处是否会泄露微波我真的感觉很害怕，请教专家，为何微波不会通过顶部泄露出来，平时做实验我们应该注意什么？

请问各位大佬，哪有卖公斤级的液相多肽合成仪？

我知道有很多公司生产多肽合成仪，像cs bio, PTI, PSI, AAPPTEC, CEM, 好像还有中国的公司海南建邦，还有德国的一些公司，产品还是蛮多的。所以我想请教一下了解的人士，这些公司在中国有没有代理？哪些品牌比较好？哪些品牌性价比高？都适合什么领域的，比如高校研究、研究所、药厂啊什么的？谢谢各位！

采购微波合成仪应该考虑哪些因素？哪些因素比较重要？

传统的微波炉是多膜技术,不同模式微波的重叠会造成反应容器受热不均匀,使反应不稳定,重现性不好,且容易发生爆炸[em53] .请问有哪几家公司的微波合成仪是单膜技术的.什么公司呀.

各位大神，谁有waters 2767和AKTA OP100核酸合成仪教程，跪求有相关资料也可以，感谢感谢

我是新手,各位GGJJ给推荐个便宜的微波化学合成仪器,像改装过的家用微波炉,不需要多好,能回流! 顺便问句,DMF溶剂能在未经改造的家用微波炉的敞口体系中进行反应吗?只加热不控温.有危险不?

[b]职位名称：[/b]合成仪技术工程师[b]职位描述/要求：[/b]职位描述：1.负责本公司合成仪、氨解仪、PCR仪、定量PCR仪等产品的现场维修；2.能独立前往客户单位进行上述仪器的安装、调试并对客户进行培训：如何使用及日常维护、保养仪器。负责技术支持及远程现场维修的指导；3.能独立前往客户单位进行合成仪的检查维修、维护保养、软件升级及远程4.配合销售开发市场，协助重点用户的维护。5.领导交待的其他工作。职位要求：1、大专或以上学历；2、生物、材料、化学、电气、机械类或相关专业；3、熟悉ABI、Biolytic等品牌的荧光定量PCR仪、合成仪等任意一类产品；4、有生物化学类仪器维修或相关企业工作经验；5、具备良好的电脑软、硬件知识及技能；6、具有较强的技术应用能力及一定的沟通能力；7、能适应频繁出差。[b]公司介绍：[/b] 北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年，是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司，在美国，巴西，印度等国拥有多家兄弟公司。仪器销往及提供服务给欧美，日本，韩国，新加坡等多个国家。同时是美国 Biolytic 公司 Dr.Oligo 系列 DNA/RNA 合成仪，氨解仪等产品在中国唯一的授权代理商和服务商。我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/59274]查看全部[/url]

[b]职位名称：[/b]多肽合成仪器产品专员/经理（上海）[b]职位描述/要求：[/b]职位描述：1.从事化学合成相关仪器的市场开发； 3.及时了解、分析市场动态并汇报，及时反馈客户需求及其他相关信息； 4.维护责任区域内客户，并为客户提供全面的技术方案及服务； 5.积极配合公司各部门开展仪器展会、学术会议等活动。 职位要求：1.本科及本科以上学历，生物、化学等相关专业毕业； 2.具有1年以上生命科学仪器市场工作经验，市场敏锐度高；3.熟悉国内生命科学仪器领域的情况，了解相关学术的最新动态； 4.良好的英文表达能力，能够阅读并翻译与所销售仪器相关的资料； 5.具有良好的沟通能力，有责任心、进取心，遵守职业道德； 6.有合成产品背景为佳 熟悉相关产品仪器如：微波多肽合成（LIBERTY）、蛋白水解、蛋白酶解、PBI等。[b]公司介绍：[/b] 培安公司自成立以来，一直致力于为国内用户提供最先进的科研仪器和最新的科研技术，旨在提高祖国的科研实力。 培安一贯坚持“质量为本，信誉致上，服务第一”的企业宗旨，弘扬“团结诚信，求实创新”的企业精神，奉行“用户的需求就是我们的目标”的经营理念，竭诚为用户提供最优质的产品及服务。 培安以最快的速度将世界上尖端的技术及设备引进日新月异的中国，经过多年的发展，公司的产品已涉及到...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/67579]查看全部[/url]

上海交大一项研究有望降低抗肿瘤良药成本2013年02月26日 来源： 中国科技网 作者： 王春 沈海燕 中国科技网 讯 （沈海燕 记者王春）上海交通大学微生物代谢国家重点实验室林双君研究小组通过对链黑菌素生物合成基因簇进行基因解析，阐明了链黑菌素复杂的生物合成途径。由此得到的链黑菌素类似物不仅抗癌活性高很多，其毒性上也比原始链黑菌素降低了约5倍。该研究成果近日发表在国际权威学术期刊《美国化学会会志》上。 链黑菌素是由一株绒毛链霉菌所产生的抗肿瘤抗生素，具广谱抗肿瘤活性。但在上世纪七八十年代进行二期临床实验时，因其毒性过强而被迫终止。 基因组测序技术为生物合成机制的研究提供了更多信息。林双君研究小组首先克隆了链黑菌素潜在的抗生素基因簇，定位出链黑菌素的生物合成的48个独立基因编码，再通过微生物遗传学、化学及生物化学技术和手段，获得了其中17个基因的突变菌株，从中分离鉴定了12个与链黑菌素生物合成相关化合物的化学结构，提出了链黑菌素生物合成途径的模型。 在这一过程中，还揭示了多个新颖或关键的酶催化反应的分子生物学机制。该项研究为抗生素药物新颖酶催化反应基因的挖掘，并利用合成生物学等前沿生物技术创造新的结构衍生物奠定了基础。林双君称，这是首次在基因水平实现链黑菌素的生物合成途径的解析。 课题组通过基因工程技术获得的一个链黑菌素类似物，在抗癌活性上比目前临床使用的抗癌药物高很多。这个类似物在临床应用方面，对治疗淋巴瘤、白血病、鼻咽癌等疾病将有更大的优势。林双君表示，只要将产量提高到可规模化生产，就可将链黑菌素或类似物转化为一个新型的抗癌药物，不仅有望降低药价，而且减少化疗时产生的毒副作用。 《科技日报》2013-2-26 一版

最近在做合成多肽的基因毒性杂质，因为缺乏这方面的经验和相关的文献，无从下手，请大家多多指教

各位版友，我们公司买了一台瑞典Biotage 全自动微波合成仪器，说明书在给仪器搬家的时候弄没有了，经销商电子文档也没有留份，再要的时候客服磨机磨机迟迟不发，请问那位版友有的话能否传份给我，非常感谢，正在编写该仪器的SOP，唉~~没有资料凭借自己经验还是有点不足。。。。。

[b]职位名称：[/b]多肽合成仪产品专员/经理（北京）[b]职位描述/要求：[/b]1.从事多肽合成仪的市场开发；2.及时了解、分析市场动态并汇报，及时反馈客户需求及其他相关信息；3.全力维护北京区域内客户，并为客户提供全面的技术方案及服务；4.积极配合公司各部门开展仪器展会、学术会议等活动。***相关福利：公司提供五险一金、交通补助、餐饮补助、通讯补贴、定期体检、年终奖金、绩效奖金等。（工资待遇中不包含年终奖） 职位要求： 1、本科及本科以上学历，生物、化学等相关专业毕业； 2、具有2年以上仪器市场工作经验，市场敏锐度高，有相关客户关系者优先； 3、熟悉国内仪器领域的情况，了解相关学术的最新动态； 4、良好的英文表达能力，能够阅读并翻译与所销售仪器相关的资料； 5、工作认真主动，态度积极，有较强的责任心，善于沟通； 6、能吃苦耐劳，能承受较大工作压力，有良好的团队精神和协调能力。 [b]公司介绍：[/b] 培安公司自成立以来，一直致力于为国内用户提供最先进的科研仪器和最新的科研技术，旨在提高祖国的科研实力。 培安一贯坚持“质量为本，信誉致上，服务第一”的企业宗旨，弘扬“团结诚信，求实创新”的企业精神，奉行“用户的需求就是我们的目标”的经营理念，竭诚为用户提供最优质的产品及服务。 培安以最快的速度将世界上尖端的技术及设备引进日新月异的中国，经过多年的发展，公司的产品已涉及到...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/60133]查看全部[/url]

[b]职位名称：[/b]合成仪器产品专员（药物/化学）[b]职位描述/要求：[/b]职位描述：1.从事化学合成相关仪器的市场开发及销售工作； 2.及时了解、分析市场动态并汇报，及时反馈客户需求及其他相关信息； 3.全力维护责任区域内客户，并为客户提供全面的技术方案及服务； 4.积极配合公司各部门开展仪器展会、学术会议等活动。 职位要求：1.本科及本科以上学历，生物、化学、制药等相关专业毕业； 2.具有1年以上化学仪器市场工作经验，市场敏锐度高；3.熟悉国内合成领域的情况，了解相关学术的最新动态； 4.良好的英文表达能力，能够阅读并翻译与所销售仪器相关的资料； 5.具有良好的沟通能力，有责任心、进取心，遵守职业道德； 6.有合成产品背景为佳 熟悉相关产品仪器。[b]公司介绍：[/b] 培安公司自成立以来，一直致力于为国内用户提供最先进的科研仪器和最新的科研技术，旨在提高祖国的科研实力。 培安一贯坚持“质量为本，信誉致上，服务第一”的企业宗旨，弘扬“团结诚信，求实创新”的企业精神，奉行“用户的需求就是我们的目标”的经营理念，竭诚为用户提供最优质的产品及服务。 培安以最快的速度将世界上尖端的技术及设备引进日新月异的中国，经过多年的发展，公司的产品已涉及到...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/54060]查看全部[/url]

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基因芯片及其在病原微生物检测中的应用基因芯片是近年来迅速发展的一门生物高新技术，它以其能够快速、高效、大规模地同步检测生物遗传信息的卓越功能而得到发展。在基因测序、基因表达分析、药物筛选、基因诊断等领域显示出重要的理论和实用价值。基因芯片是指应用大规模集成电路的微阵列技术。在固相支持物表面（常用的固相支持物有玻璃、硅片、尼龙膜等载体）有规律地合成数万个代表不同基因的寡核苷酸“探针”或液相合成探针后由点样器有规律地点样于固相支持物表面；然后将要研究的目的材料中的DNA、RNA或用cDNA同位素或荧光物标记后，与固相支持物表面的探针进行杂交，通过放射自显影或荧光共聚焦显微镜扫描，对这些杂交图谱进行检测；再利用计算机对每一个探针上的杂交信号作分析处理，便可得到目的材料中有关基因表达信息。该技术可将大量的探针同时固定于支持物上，所以一次可对大量核酸分子进行检测分析。基因芯片分类基因芯片按其片基不同可分为无机片基芯片和有机合成片基芯片：如果按其应用不同，可分为表达谱芯片、诊断芯片、检测芯片；如果按其结构不同可分为DNA阵列和寡核苷酸芯片；如果按其制备方法不同可分为原位合成芯片和合成后交联芯片。目前，常用于基因芯片制作的固相支持物主要包括半导体硅片、普通玻璃片、尼龙膜等基质。它们各有优缺点，可根据不同的用途和目的选择使用。用硅片制作的芯片，其DNA探针排列的密度高，在1.28cm芯片上，可达40万点阵。检测灵敏度高但专一性差。用玻璃制作的芯片，可用于双色荧光标记杂交，便于杂交信号的检测，但其灵敏度低，而且对玻璃片的处理要求高。尼龙膜主要用于制作eDNA芯片，即将不同的eDNA片断点阵于尼龙膜上，它可用同位素标记检测，灵敏度高，专一性好，但是DNA阵列的密度低。DNA探针的制备及固化探针的制备及固化有2种方法：①在片基上原位合成寡核苷酸；②在片基以外制备DNA探针，并以显微打印等手段将其固化于片基上。作者介绍了待测DNA样品的制备、标记样品与基因芯片杂交、杂交信息的检测与分析、操作过程中存在的问题及解决办法。基因芯片可以对病原细菌检测、病毒的检测及其他方面如支原体检测等。问题和展望基因芯片在病原微生物检测中具有快速、灵敏、高通量、自动化等特点。但目前仍面临一些问题有待解决，这些问题主要体现在硬件和软件2个方面。在硬件方面，DNA芯片技术需要昂贵的尖端仪器，如生产原位合成芯片需要光刻机器和寡核苷酸合成仪；构建DNA微集阵列的自动仪器约需8万美元以上，而检测芯片则要激光共聚焦显微镜、落射荧光显微镜等设备，费用较高。在软件（即技术）上也存在一些问题。首先，探针制备的环节上，原位合成寡核苷酸技术复杂，且有专利保护，合成过程中有可能插入错误核苷酸或混入杂质，降低了特异性和信噪比；显微打印技术较灵活，易实现，但需收集或合成大量探针，且阵列的集成度不高。其次，在样品和芯片杂交的环节上 ，因为杂交在固相上进行，空间因素会对杂交造成不利影响；还有，在一个芯片上存在多种探针，这对杂交条件是个挑战，因为这种探针的最适条件未必适合另一种探针；而且，复杂的探针如长寡核苷酸容易自身形成二 、三级结构，影响与靶序列的杂交或给出错误的阴性信号，当然在其它技术环节上也存在着一些难题，如样品准备复杂、检测的灵敏度低等。虽然基因芯片技术在多个环节上有待提高，但它在生命科学及相关领域中已呈现出广阔的应用前景，相信随着研究的不断深入和技术的更加完善，基因芯片会成为基础研究和临床应用的强有力工具。

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[b]职位名称：[/b]多肽合成仪器产品专员（北京 上海）[b]职位描述/要求：[/b]职位描述：1.从事化学合成相关仪器的市场开发及销售工作； 2.在责任区域内开展销售活动，实现公司即定的销售目标； 3.及时了解、分析市场动态并汇报，及时反馈客户需求及其他相关信息； 4.全力维护责任区域内客户，并为客户提供全面的技术方案及服务； 5.积极配合公司各部门开展仪器展会、学术会议等活动。 职位要求：1.本科及本科以上学历，生物、化学等相关专业毕业； 2.具有1年以上生命科学仪器市场工作经验，市场敏锐度高；3.熟悉国内生命科学仪器领域的情况，了解相关学术的最新动态； 4.良好的英文表达能力，能够阅读并翻译与所销售仪器相关的资料； 5.具有良好的沟通能力，有责任心、进取心，遵守职业道德； 6.有合成产品背景为佳 熟悉相关产品仪器如：微波多肽合成（LIBERTY）、蛋白水解、蛋白酶解、PBI等。[b]公司介绍：[/b] 培安公司自成立以来，一直致力于为国内用户提供最先进的科研仪器和最新的科研技术，旨在提高祖国的科研实力。 培安一贯坚持“质量为本，信誉致上，服务第一”的企业宗旨，弘扬“团结诚信，求实创新”的企业精神，奉行“用户的需求就是我们的目标”的经营理念，竭诚为用户提供最优质的产品及服务。 培安以最快的速度将世界上尖端的技术及设备引进日新月异的中国，经过多年的发展，公司的产品已涉及到...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/60925]查看全部[/url]

[b]职位名称：[/b]合成仪器产品专员（北京 上海）[b]职位描述/要求：[/b]职位描述：1.从事化学合成相关仪器的市场开发及销售工作； 2.在责任区域内开展销售活动，实现公司即定的销售目标； 3.及时了解、分析市场动态并汇报，及时反馈客户需求及其他相关信息； 4.全力维护责任区域内客户，并为客户提供全面的技术方案及服务； 5.积极配合公司各部门开展仪器展会、学术会议等活动。 职位要求：1.本科及本科以上学历，生物化学、生物技术等相关专业毕业； 2.具有1年以上生命科学仪器市场工作经验，市场敏锐度高；3.熟悉国内生命科学仪器领域的情况，了解相关学术的最新动态； 4.良好的英文表达能力，能够阅读并翻译与所销售仪器相关的资料； 5.具有良好的沟通能力，有责任心、进取心，遵守职业道德； 6.有合成产品背景为佳 熟悉相关产品仪器如：微波多肽合成（LIBERTY）、蛋白水解、蛋白酶解、PBI等。[b]公司介绍：[/b] 培安公司自成立以来，一直致力于为国内用户提供最先进的科研仪器和最新的科研技术，旨在提高祖国的科研实力。 培安一贯坚持“质量为本，信誉致上，服务第一”的企业宗旨，弘扬“团结诚信，求实创新”的企业精神，奉行“用户的需求就是我们的目标”的经营理念，竭诚为用户提供最优质的产品及服务。 培安以最快的速度将世界上尖端的技术及设备引进日新月异的中国，经过多年的发展，公司的产品已涉及到...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/43792]查看全部[/url]

Q1.引物是如何合成的？目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种,无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。(1) 去保护：加入Deblocking脱去碱基上5'- OH的保护基团DMT，获得游离的5'- OH；(2) 耦合：同时加入活化剂和新的碱基，新的碱基5'-OH仍然被DMT保护，3'端被活化与溶液中游离的5'-OH发生耦合反应；(3) 封闭：耦合反应中极少数5'- OH没有参加反应，用封闭试剂终止其后继续发生反应；(4) 氧化：加入氧化剂使其由核苷亚磷酸酯形成更稳定的核苷磷酸酯。Q2.引物合成后如何处理？切割与脱保护基：将合成好的寡核苷酸链从支持物上化学切割下来。常用新鲜的浓氨水来裂解CPG与初始核苷之间的酯键。断裂下来的寡核苷酸带有自由的3'羟基。纯化：根据所合成寡核苷酸的组成和应用来选定纯化的方法。常用的纯化方法有：C18、OPC、PAGE和HPLC。定量：根据寡核苷酸在260nm处的紫外吸收来定量。储存：分装抽干。Q3.需要什么级别的引物？根据实验需要，确定订购引物的纯度级别。应用引物长度要求纯度级别要求一般PCR扩增60 basePAGE诊断PCR扩增 40baseHEPD, PAGEDNA测序20base左右HEPD亚克隆，点突变等根据实验要求定HEPD, PAGE，HPLC基因构建（全基因合成）根据实验要求定HEPDPAGE反义核酸根据实验要求定HEPDPAGE修饰引物根据实验要求定PAGE, HPLC Q4.引物的质量是不是跟序列有关？四种碱基的性质和各自保护基的性质都有差别。所以合成难度是不一样的。难度最大的当属GC重复多的和序列中还有多个连续的G的引物。尤其对于后者，国内公司一般都做不了20个G以上的引物。实验证明，如果引物中有超过三个连续G的结构，传统方法得到的产物质量就会开始下降。而且目前通用的脱盐、OPC和PAGE方法都无效。鼎国昌盛生物公司拥有的HEPD专利技术能够克服高GC或者高G含量引物的合成和纯化障碍，对普通引物、高GC引物和无论长短的oligo d（G）都能得到同样的非常好的结果。Q5.需要合成多少OD数？根据实验目的确定。一般PCR扩增，2 OD引物，可以做500-1000次50ul标准PCR反应。如果是做基因拼接或退火后做连接，1 OD就足够了。Q6.如何计算引物的浓度？引物保存在高浓度的状况下比较稳定。一般情况下，我们建议将引物的浓度配制成100pmol/ul，称为保存浓度，而引物的工作浓度一般配制成10-50pmol/ul。加水的体积（微升）可直接参照合成报告单上推荐的体积，也可按下列方式计算：V (微升)= OD数x 33 x 10000 /引物的分子量引物的分子量可以从合成报告单上获得。注意：1 OD260= 33 ug/ml。Q7.如何计算引物的Tm值？引物设计软件都可以给出Tm，与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。长度为25base以下的引物，Tm计算公式为：Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)对于更长的寡聚核苷酸，Tm计算公式为：Tm = 81.5 + 16.6 x Log10 + 0.41 (GC%) - 600/size＊＊公式中，Size =引物长度。