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电洗脱系统

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电洗脱系统相关的论坛

  • 【资料】请教关于梯度洗脱基线问题

    最近做梯度洗脱时,遇到比较头痛的问题,单进溶剂时基线漂移就比较厉害,甚至有很高的峰出来,如图,17min后没积分的即为基线中也有的峰。当时以为既然溶剂都有,就是空白了,在进样品时就没有积分。但心里还是没底,请教各位高手,这种现象正常不?梯度洗脱基线漂移是正常,但在后面有峰出来还正常吗?会不会是系统里面残留的东西,或是样品没完全洗脱出来?还有能不能改善一下洗脱程序,使基线好看一些啊?问题比较多,见笑了。洗脱程序如下:C18柱,A相甲醇,B相甲醇:水=5:95缓冲盐溶液时间(min)0212222432B%(V/V)1001001515100100

  • 【求助】关于梯度洗脱

    我想请教大家一个问题:二元高压梯度洗脱的程序控制问题,设定好的梯度时间程序必须是进样后才能开始运行,也就是说必须检测器有了采集信号才开始运行时间程序吗?也不知道大家明不明白我问的问题,就是如果我的进样装置是独立配置的,不受整个系统的控制,能进行梯度吗?

  • 【讨论】单泵洗脱达到双泵梯度洗脱效果

    我们公司的高效液相是安捷伦1200,配备单泵,但是《中国药典》里面的方法是需要双泵梯度洗脱,因此我公司无法按此法检测,现在老板不愿意再买一台泵,要求我从流动相的配比上面来解决单泵洗脱达到双泵梯度洗脱效果的问题,各位专家有什么高招,在此讨论讨论

  • 【每周讨论7】梯度洗脱时应注意哪些事项

    梯度洗脱装置分两种:高压梯度:用两台高压输液泵将两种溶剂输入低压梯度:在常压下将两种溶剂(或多元溶剂)混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱中。梯度洗脱可提高分离度、缩短分离时间、降低最小检测量和提高分离精度。但在使用中,梯度洗脱也有许多与等度洗脱不同的地方需要注意。那么,本周讨论话题就是:[color=#DC143C][size=4]梯度洗脱时应注意哪些事项??[/size][/color]希望大家就自己的经验说一说。[color=#DC143C]小结:[/color]1、注意各溶剂间的互溶性。2、对溶剂的纯度要求更高(影响重现性)。3、注意梯度变化时系统压力的变化,防止超出限度。4、梯度结束后,用初始流动相冲洗,使柱子平衡一段时间(再生),使系统回复到初始状态。(梯度周期)5、低压梯度要注意脱气,混合后容易产生气泡。6、容易出现鬼峰,应作空白试验。7、梯度选择时尽量几相之间相变化要小,否则不易平衡。8、梯度洗脱应使用对流动相组成变化不敏感的选择性检测器(如紫外吸收检测器或荧光检测器),而不能使用对流动相组成变化敏感的通用型检测器(如示差折光检测器)。9、要注意水相中盐的浓度,防止在有机相提升过程中盐的析出。

  • 关于梯度洗脱

    HPLC有等强度(isocratic)和梯度(gradient)洗脱两种方式。等度洗脱是在同一分析周期内流动相组成保持恒定,适合于组分数目较少,性质差别不大的样品。梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成,如溶剂的极性、离子强度和pH值等,用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。采用梯度洗脱可以缩短分析时间,提高分离度,改善峰形,提高检测灵敏度,但是常常引起基线漂移和降低重现性。 梯度洗脱有两种实现方式:低压梯度(外梯度)和高压梯度(内梯度)。 两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合,即有多种洗脱曲线:线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。线性梯度最常用,尤其适合于在反相柱上进行梯度洗脱。 在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视: ①要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。 ②梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。 ③混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。 ④每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理,使其恢复到初始状态。需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱,使固定相与初始流动相达到完全平衡。

  • 本版梯度洗脱一些内容的总结

    梯度洗脱是HPLC非常重要的一种分离手段,是解决单组份和多组分难分离的较为有效的方法。然而,如果对梯度洗脱不了解,不清楚其原理、不了解溶剂混合效应等,设计出来的梯度洗脱都很难得到满意的结果。 本贴透过仪器网高效而强大的搜索引擎http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif,通过自我卓越的大脑逻辑算法,分别列出了我们威武的液相版面中,关于梯度洗脱话题的讨论和分享,以期对关注液相版面的童靴们有所帮助。一,梯度洗脱的了解和其与等度洗脱的暧昧关系1.关于梯度洗脱 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20061018/593197/2. 等度梯度你会选择谁http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121222/4452632/(此贴是本版版主houjjun老师的大作,参加了第5届原创大赛)3.什么时候选择梯度洗脱 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20070208/741100/二,高压梯度和低压梯度的认识1. 两元高压梯度和四元低压梯度(带在线脱气)系统优劣的比较http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090329/1809101/2. 高压梯度和低压梯度http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060218/343172/(此贴为远古神器,历史久远也)3. 关于高效液相梯度泵的两个疑问http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121105/4343385/(追根溯源,探寻真想)三,梯度洗脱设计范例1. 梯度洗脱问题http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120131/3838800/(先来一个大问题,小解答)2.梯度洗脱设置问题 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101021/2876147/(问题很详细,解答较充分。液相版面的各位老师很给力!)3.梯度洗脱之前有什么准备工作吗? http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091210/2261403/(很简单,但也很实在)4.液相做梯度洗脱,基线偏移问题 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080922/1498240/四,梯度洗脱注意事项1. http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121119/4373554/(版面征集梯度洗脱需要注意的地方)2.对于梯度洗脱的一点总结 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080504/1247956/3. 梯度洗脱时应该注意的一些问题 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20060412/391357/http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif以上是我从坛子里搜寻的帖子,如果有不当的地方,请各位版友拍砖,如果有更好的但遗漏的,请贴上来,版主大人是不吝加分的哦。

  • 【求助】甲醇洗脱,基线漂移厉害?怎么回事?

    【求助】甲醇洗脱,基线漂移厉害?怎么回事?

    向各位高手请教事情的经过时这样的2011年1月18日,岛津液相,流动相是甲醇:20m mol/L 磷酸二氢钾溶液(22:78),在跑样的过程中突然断电,(没有关仪器),几分钟后突然来电又断电,(此时,关闭仪器)。于是去找工程部,工程部说只能供应30分钟,于是抓紧时间用5%甲醇洗脱30分钟(此时没有开空调,温度可能只有几度,跑样过程时候温度为25度).1月19日,开机首先用5%甲醇系统三个小时,再用水醇,甲醇洗脱,基线漂移厉害,那时候想可能柱子坏了,于是关机。此后几天没有人用此台仪器。1月26日,用水醇,甲醇洗脱一天,基线朝一个方向漂移厉害,始终不平(这时想可能检测器污染了)。1月27日,不接柱子,用纯水洗脱三个小时,然后过渡到甲醇,再用甲醇洗脱,基线与1月26号比较明显改善,但仍然不稳定,30分钟基线漂移1.5mV左右。1月28日,不接柱子,首先用纯水洗脱,再用甲醇洗脱,再用水洗脱,再用异丙醇洗脱,再用甲醇洗脱,基线仍然不理想。截下一段50分钟的基线,如图请问是仪器本省硬件元件的问题还是检测池污染啊?十分感谢!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191652_630081_2222645_3.jpg

  • 请教梯度洗脱?

    请教各位高手,多组分分析时梯度洗脱的作用,相对等度洗脱(的谱图)怎样设置梯度洗脱?

  • 洗脱液选择

    请教老师们,做蔬菜农残用CarbNH2小柱净化,看到介绍是用乙腈、甲苯3:1洗脱,可以换用其他洗脱液吗?比如丙酮、正己烷之类的?

  • 固相萃取柱所用洗脱剂洗脱实验

    固相萃取柱所用洗脱剂洗脱实验

    大家再使用一种新的固相萃取柱时,有没有将平时你们所要检测的农残项目的混标过这个萃取柱,然后使用不同的洗脱剂进行洗脱实验,看看各种农药会不会存在被固相萃取柱所吸附而用洗脱剂洗脱不下来的情况?我看有的实验室有这样做,觉得他们的工作做的好细致认真。[img=,690,376]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712171338_6751_2166779_3.png!w690x376.jpg[/img][img=,690,365]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712171339_1942_2166779_3.png!w690x365.jpg[/img]

  • 离子的洗脱

    想跟大家请教一下,以硫酸根为例,它在色谱柱中的出峰时间较长,为什么短时间内洗脱不下来,随着时间的增长会洗脱下来呢,难道淋洗液中的阴离子对硫酸根的作用力是会随着时间而累积的吗?请指教一下具体原因,谢谢!

  • 洗脱峰次序

    问一下 同一个样品,假如在20%乙腈浓度下洗脱下来的峰保留时间是10分钟,之后在50%乙腈下洗脱下来的峰保留时间是20分钟,如果我直接用纯乙腈洗脱,那么这些峰的保留时间还没有没先后次序?

  • 空白梯度洗脱

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。

  • 关于淋洗和洗脱的区别

    n 淋洗n 分析物得到保留后,通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分,淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。淋洗溶剂必须尽量地弱以洗调尽量多的干扰组分,但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。n 注意:淋洗时不宜使用太强溶剂,否则会将强保留杂质洗下来。使用太弱溶剂,会使淋洗体积加大。可改为强、弱溶剂混用;但混用或前后使用的溶剂必须互溶 n 洗脱n 淋洗过后,将分析物从固定相上洗脱。溶剂必须进行认真选择,溶剂太强,一些更强保留的不必要组分将被洗出来;溶剂太弱就需要更多的洗脱液来洗出分析物,这样固相萃取柱的浓缩功效就会削弱难道淋洗和洗脱不是一个过程吗

  • 关于离子色谱洗脱问题

    由于样品需要,使用两种不同能力洗脱剂洗脱,氢氧化钠和醋酸钠洗脱方式是前30分钟氢氧化钠后面用醋酸钠洗脱20分钟,发现一个问题,我单单用氢氧化钠洗脱需要物质时,洗脱峰型很好,但是后面再加上醋酸钠时,每个氢氧化钠洗脱时的样品就会影响,这是什么问题?醋酸钠会对之前氢氧化钠洗脱能力影响吗?醋酸钠洗脱后我都平衡至基线平稳了。

  • 【原创大赛】话说四元低压梯度洗脱的优势与缺陷

    【原创大赛】话说四元低压梯度洗脱的优势与缺陷

    话说四元低压梯度洗脱的优势与缺陷 现在我们面对的样品复杂多样、千奇百怪,那我们检测这些样品所涉及到的仪器和方法也就多种多样各不相同了。比如很多混合化合物检测就得采用梯度洗脱的方式才能更准确、方便、快速的检测出来。然而梯度洗脱方法也有很多种,现在一般采用的有二元低压梯度洗脱、二元高压梯度洗脱、三元低压梯度洗脱、四元低压梯度洗脱、四元高压梯度洗脱,戴安还高调的推出一款双三元高压梯度洗脱等等,其中二元高压梯度与四元低压梯度应用的最为盛行。 这两种仪器在市场上都很多,各有优缺点。现在中国的国标中应用的仪器及方法最多也就用到二元梯度,四元梯度还没有具体国标方法。有的人可能认为买一套四元梯度没用,买二元的就足够了,买四元的纯粹是浪费钱和资源。其实不然,四元的有四元的优势。下面就一一说来听听。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181613_518943_2498430_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181619_518949_2498430_3.jpg http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181614_518945_2498430_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181614_518946_2498430_3.jpg 四元低压梯度洗脱不用说就是能同时走四种流动相,而且在不同时间下可以以任意比例走。它是由一台高压泵和一个四元比例阀组成的,通过程序控制比例阀来实现梯度洗脱。它的优势是只有一个泵,比二元高压梯度泵省一个泵,比四元高压梯度泵省三个泵,大大节省了实验仪器费用。四元低压梯度需要的高压泵少,那么该仪器的故障率相对也就少。一般情况下四元低压梯度洗脱时泵的流速不变,这样控制泵的脉动就容易的多,仪器的噪声小检出限也就低;一般的液相泵流速越小脉动越大,通常总流速都是1.0ml/min,这样的流速脉动很小、流速很稳。四元低压梯度和二元低压梯度相比只是比例阀一个是四元的一个是二元的,费用相差并不大,但除了日常梯度用的二元外,剩下的二元一元可以走过渡液(换流动相时不相容或有较剧烈反应等两种多多种流动相时,如含量较高的甲醇和含量较高的缓冲液相容可能会有盐结晶析出;含量较高的甲醇和含量较高的酸溶液相容可能会产生大量热量,甚至有较剧烈的反应等,损坏仪器甚至发生危险),反相色谱一般是5%-20%的甲醇水溶液,通常大家都选10%;另一元可以走纯甲醇等试剂,这样冲洗系统时非常方便,不用来回换流动相瓶,既能省时、提高效率又能省试剂、省费用。当然它也有不足的地方,那就是低压混合的流动相进入高压系统容易产生气泡,所以一般的四元低压泵都会加一个在线脱气机(这个和高压泵相比一般都不算贵);它的混合是在高压泵之前,从混合处开始到进样阀的管路都是混合体积,虽然混合会很充分,但混合体积也会很大,混合滞后时间较长;四元低压梯度由于低压混合和混合体积较大等因素,它的准确度没有二元高压梯度高,但能满足绝大多数梯度洗脱要求。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181615_518947_2498430_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181615_518947_2498430_3.png 二元高压梯度洗脱是由两台高压泵同时走两种流动相,可以在不同时间下以任意比例走。它的优势是高压混合不容易产生气泡(相对四元低压梯度);混合体积较小;混合准确度较高等。缺陷是价格较高;故障率较高;冲洗系统时需要经常换流动相瓶,相对麻烦;泵流速小时有时会产生较大的压力(流速)脉动,影响仪器的检出限等。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410181616_518948_2498430_3.png 总之四元低压梯度洗脱和二元高压梯度洗脱都能实现现有梯度洗脱要求,只是使用过程和结果各不相同,各有优缺点。 四元低压梯度价格便宜,梯度混合噪声小,故障率小,使用方便等优点是我所看好的,相比我更支持四元低压梯度洗脱。长期从事液相色谱分析的您呢?您的看法和我有多大的差别呢?您更看好那种洗脱方式呢?

  • 浅谈梯度洗脱

    HPLC有等强度(isocratic)和梯度(gradient)洗脱两种方式。等度洗脱是在同一分析周期内流动相组成保持恒定,适合于组分数目较少,性质差别不大的样品。梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成,如溶剂的极性、离子强度和pH值等,用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。采用梯度洗脱可以缩短分析时间,提高分离度,改善峰形,提高检测灵敏度,但是常常引起基线漂移和降低重现性。梯度洗脱有两种实现方式:低压梯度(外梯度)和高压梯度(内梯度)。两种溶剂组成的梯度洗脱可按任意程度混合,即有多种洗脱曲线:线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度。线性梯度最常用,尤其适合于在反相柱上进行梯度洗脱。在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视:①要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围后就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。②梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气,以防止混合时产生气泡。③混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水为流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力。④每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理,使其恢复到初始状态。需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱,使固定相与初始流动相达到完全平衡。

  • 【实战宝典】高压梯度洗脱与低压梯度洗脱有什么区别?

    [b][font=宋体][back=white]解答:[/back][/font][/b][font=宋体]梯度洗脱有两种实现方式:低压梯度(内梯度)和高压梯度(外梯度)。[/font][font=宋体][back=white]([/back][/font][back=white]1[/back][font=宋体][back=white])[/back][/font][font=宋体]低压梯度:[/font][font=宋体]流动相在低压下混合,然后用高压输液泵将流动相输入到色谱柱,因此对硬件的要求较低,其梯度的实现主要由电磁阀的开关来进行控制,只需一台泵、一台容积组织器和一台动态混合器,即可配置成四元梯度系统。优点是成本较低,系统的故障率较低,维护较为方便,此外,由于流动相是在常压下混合,不存在流动相的压缩,故而梯度准确度较好。缺点是精度比高压梯度略差。[/font][font=宋体][back=white]([/back][/font][back=white]2[/back][font=宋体][back=white])[/back][/font][font=宋体]高压梯度:[/font][font=宋体]流动相的混合是在高压下进行,所以该系统在硬件上需多台同样的输液泵的组合,而后经动态混合器进行混合,并有专用的软件模块进行控制。优点是梯度精度较高,但缺点是成本较高,硬件较多;而流动相的可压缩性和流动相混合时的热力学体积的变化,可能影响输入到色谱柱的流动相的组成,所以,梯度的准确度会出现偏差,另外,高压梯度洗脱过程中为保证流速稳定必须使用恒流泵,否则很难获得很好的重复性结果。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])从硬件价格上看,高压比低压贵不少。两者最大的区别还是在流动相可能出现的气泡上。在同样的两种流动相混合时,高压混合所产生的气泡几率要比低压混合时少。在四元低压梯度系统中,在线脱气机在混合前先脱气,使气体远远低于其在溶剂中的饱和溶解度,混合后一般也不会达到其在混合溶剂中的最大溶解度,所以一般不会有气泡产生。混合后脱气是不可行的,因为混合后脱气,会在一定程度上改变混合比例(各种溶剂的饱和蒸气压不同决定)。另外,混合前脱气能提高流量精度,这点更有意义。而高压梯度是泵后混合,此时气体在溶剂中的溶解度会增大(溶解度随压力增大而增大),所以一般也不会有气体溢出而产生气泡了。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

  • 【讨论】柱子洗脱机理问题

    洗脱pi为4.7的蛋白时,水是富集流动相, 磷酸盐是洗脱流动相, 浓度为0.1 0.2 0.05 mol/l时,洗脱能力差不多, 洗脱机理是?

  • [求助]spe洗脱剂选择,有问题啊?

    经常在文献上看到这样处理:用乙氰提取,溶剂转换成丙酮,浓缩后,上spe柱,用丙酮洗脱,收集洗脱液,进行分析。用丙酮溶解的样品,再用丙酮洗脱,如果上样量较大,会不会把目标物带下来呢?用丙酮溶解的样品,如果被吸附,再用丙酮可以洗脱下来吗???

  • 梯度洗脱的目的

    梯度洗脱的目的是为了去除杂质干扰吗,梯度洗脱设置规律如何呀,本人做化妆品检测,因为不同家的产品配方不一样,导致检测方法不适合所有家的样品,有干扰的一般还得复测,想请问大家有啥好的建议

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