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美国南加州大学科学家表示,他们新发现的名为IQ-1的小分子在防止胞胎干细胞分化成一种或多种特殊细胞方面具有决定性作用,该研究成果有望帮助人们开发出无污染大规模培养胚胎干细胞的方法。有关研究刊登在美国《国家科学院院报》网站上。 干细胞疗法是许多科学家研究的热门项目,大规模培养胚胎干细胞是干细胞疗法成功发展的前提。目前,实验鼠纤维原细胞饲养层是唯一被证明为能够培养胚胎干细胞的方法。在此方法中,必要的化学信号能促使胚胎干细胞不断分裂而不分化。然而,南加州大学凯克医学院医学和药学教授迈克尔卡恩博士表示,人体胚胎干细胞用饲养层培养会遭受实验鼠糖蛋白标识的污染,如果将培养的干细胞用于人体,或许出现可怕的免疫反应。 作为发现IQ-1小分子的研究小组主要研究人员,卡恩表示,他们发现的小分子帮助人们向实现无实验鼠纤维原细胞饲养层培养胚胎干细胞的方法往前迈进了一步。对于IQ-1的工作原理,卡恩解释说,Wnt通道(也就是细胞信号通道)对干细胞具有分叉效应(dichotomouseffects),IQ-1能够在阻断Wnt通道一个分叉的同时,增强来自Wnt通道另分叉的信号。这样,人们可以从根本上维持干细胞的生长和所需的力量。 卡恩认为,如果人们能够创造出一个化学物质环境的系统来培养人体胚胎干细胞,那么就可以避免干细胞受污染的危险,它将让科学家的工作更加容易,这是研究小组的奋斗目标。凯克医学院干细胞和再生医学中心主任马丁佩拉博士表示,卡恩他们的研究让人们能够观察胚胎干细胞内部分子控制机制,其新发现有望帮助人们开发出大规模繁殖纯胚胎干细胞的技术。
10月6日出版的新一期英国《自然》杂志刊登报告说,美国研究人员用人类卵细胞培养出了胚胎干细胞,虽然这项成果还存在一些缺陷,但已是“黄禹锡造假事件”后最接近培养出正常人类胚胎干细胞的成果。这一成果可能引起有关克隆问题的新一轮大争论。http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201110/2011100911202350.jpg(图片来自原文)将体细胞中的遗传物质植入卵细胞中,将其培育成为胚胎干细胞甚至最终培养出新的个体,就是常说的克隆技术,著名的克隆羊“多利”就是用这种技术得到的。2004年,韩国研究人员黄禹锡曾宣称用这种方法培育出了人类胚胎干细胞,引起一时轰动,但后来证明这是一起造假事件。此后,许多科研人员都进行了这方面的尝试,但一直没有成功。相关研究面临的障碍是,如果先将人类卵细胞中的遗传物质去掉,再植入另一个体细胞的遗传物质,这样得到的卵细胞分裂几次后就会停止发育。而美国纽约干细胞基金实验室等机构的研究人员报告说,如果留下一部分原有卵细胞中的遗传物质,再另外加上体细胞的部分遗传物质,这样得到的卵细胞可以发育到具有70至100个细胞的囊胚阶段,达到可以提取胚胎干细胞的阶段。胚胎干细胞具备发育成各种组织和器官的潜力,如果能够培育出人类胚胎干细胞,就意味着能够培育出属于某个人自己的组织和器官,可用于个性化的医疗。当然这也会引起有关克隆人的争议。本次研究虽然能够培育出人类胚胎干细胞,但也存在一些缺陷。最重要的是这些细胞中存在3组染色体,即卵细胞原有的1组染色体和来自体细胞的2组染色体,而正常的人类细胞只有2组染色体。因此,这种人类胚胎干细胞还不具备实用性。但是《自然》杂志同时发表的社论指出,这是自“黄禹锡造假事件”后最接近培养出可用人类胚胎干细胞的成果,在大方向上证明这仍然是一条可行的道路。社论认为,这将引起新一轮的有关克隆人的大争论,甚至提出联合国有必要开始考虑制订监管克隆的规章制度。
关键词(必填项目):胚胎干细胞培养目的(必填项目):正确规范胚胎干细胞培养背景知识(选填项目):无。原理(选填项目):无主体内容:目录一、细胞二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代三、体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)体外分化方法四、移植细胞的准备细胞多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡1.表达绿色荧光蛋白(EGFP)的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。2.D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3.J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7-9代。4.J1rtTA-rtTA表达J1细胞,由Dr. Jaenish的实验室友情提供。5.表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞,由Dr. Nagy的实验室提供。一般培养--维持ES细胞处于未分化状态ES细胞培养用含有ESGRO(白血病抑制因子)的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。培养基ES:配制一20×不含DMEM,HS,ESGRO的溶液(该溶液也能用于EB培养基--见下文)。分装在50ml FALCON管中,(稀释为2×,每管42ml),贮存在-20℃。通过将21ml该溶液,HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基,0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注:一瓶DMEM是500ml。贮存液 DMEM(高糖) [/s